CN113348966A - 一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法 - Google Patents
一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113348966A CN113348966A CN202110631618.8A CN202110631618A CN113348966A CN 113348966 A CN113348966 A CN 113348966A CN 202110631618 A CN202110631618 A CN 202110631618A CN 113348966 A CN113348966 A CN 113348966A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- boletus
- culture medium
- bran
- culture
- liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G18/00—Cultivation of mushrooms
- A01G18/20—Culture media, e.g. compost
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G18/00—Cultivation of mushrooms
- A01G18/40—Cultivation of spawn
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于微生物领域,公开了一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法。所述培养基中包含:马铃薯:150~200g,麸皮:10~25g,葡萄糖:10~15g,酵母粉:2~3g,CaCO3:1~2g,KH2PO4:2~3g,MgSO4:1~2g,维生素B1:1~2片,水:1000mL。本发明提供的培养基适于中华腐生牛肝菌快速生长,培养过程根据菌丝生长特性分时段控制摇床转速,促进菌丝恢复、萌发及生长,方法操作简单、成本低,菌丝球细腻均匀,菌棒接种后,菌丝球多点式萌发,有效增加了菌丝体与培养料的接触面积;较之固体菌种,菌丝生长速度快,污染率低,菌龄一致,有效缩短了菌种培养周期。
Description
技术领域
本发明涉及微生物领域,具体是涉及一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法。
背景技术
云南省热带作物科学研究所联合海南医学院,对采自云南省西双版纳州及海南省海口市的野生中华腐生牛肝菌进行分子鉴定及生物学特性研究,并于2021年4月,将Buchwaldoboletus xylophilus命名为“中华腐生牛肝菌”,该中华腐生牛肝菌菌株BU001菌株,于2021年5月17日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC No.:21959。保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
中华腐生牛肝菌(Buchwaldoboletus xylophilus)隶属于真菌界、担子菌门、担子菌纲、牛肝菌目,牛肝菌科、腐生牛肝菌属,因其能够营腐生生活而得名。中华腐生牛肝菌在国外分布于马来西亚、斯里兰卡、菲律宾等地,国内分布于云南省西双版纳州、海南省海口市、香港等热带、亚热带地区,属于中高温型大型真菌。目前,中华腐生牛肝菌野生资源稀少,属于濒危物种。为保护中华腐生牛肝菌种质资源,云南省热带作物科学研究所牛肝菌团队通过深入调查中华腐生牛肝菌的生长环境,根据其生长特性研究菇房人工栽培中华腐生牛肝菌的方法,并获得成功,使中华腐生牛肝菌成为目前可以菇房人工栽培的牛肝菌种类之一,成为继暗褐网柄牛肝菌后实现的又一个可菇房人工栽培的牛肝菌种类,对中华腐生牛肝菌资源保护和后续的开发利用具有重要意义。
中华腐生牛肝菌栽培种采用固体菌种进行接种,菌种萌发时间长,菌丝生长缓慢,导致中华腐生牛肝菌栽培菌种制备周期长,污染率高,菌棒生长不一致,制约了中华腐生牛肝菌工厂化、规模化栽培。
发明内容
本发明的目的是为了克服上述背景技术的不足,提供一种适用于中华腐生牛肝菌快速生长的液体菌种培养基及培养方法。采用本方面的培养基, 6~8d即可制得晶莹剔透的中华腐生牛肝菌液体菌种菌球,菌棒接种后,菌丝多点式萌发,有效增加了菌丝体与培养料的接触面积;较之固体菌种,菌丝生长速度快,污染率低,菌龄一致,有效缩短了菌种培养周期。
为达到本发明的目的,本发明的中华腐生牛肝菌液体菌种培养基包含:
马铃薯:150~200g
麸皮:10~25g
葡萄糖:10~15g
酵母粉:2~3g
CaCO3:1~2g
KH2PO4:2~3g
MgSO4:1~2g
维生素B1:1~2片
水:1000mL。
进一步地,本发明还提供了一种中华腐生牛肝菌液体菌种的培养方法,所述方法包含以下步骤:
(1)配制培养基:按比例称取马铃薯、麸皮、葡萄糖、酵母粉、CaCO3、 KH2PO4、MgSO4、维生素B1,将马铃薯150~200g洗净、削皮、切片,麸皮10~25g用纱布包裹,将马铃薯和麸皮放入1000mL自来水中,煮沸 20~25min;纱布过滤得到马铃薯、麸皮浸提液,然后依次加入葡萄糖10~15g、酵母粉2~3g、CaCO31~2g、KH2PO42~3g、MgSO41~2g、维生素B1 1~2片(10mg/ 片),用自来水定容至1000mL,得到中华腐生牛肝菌液体菌种培养基;
(2)分装:将配制好的培养基分装至三角瓶中,封口;
(3)灭菌:将分装好的三角瓶置于灭菌锅中灭菌,冷却备用;
(4)接种:在无菌操作台内挑取直径约为3~6mm的中华腐生牛肝菌试管菌种块,放入上述液体培养基中;
(5)培养:接种后的三角瓶静置4~6h,让菌丝恢复,然后置于摇床中, 25~29℃,100~160rpm/min,避光培养6~8d即可得到中华腐生牛肝菌液体菌种;进一步的培养过程中前3d摇床转速为100~130rpm/min,促进菌丝萌发及菌丝球形成,后3~5d摇床转速设为130~160rpm/min,增加溶氧量促进菌球快速扩繁生长。
本发明提供的培养基适于中华腐生牛肝菌快速生长,培养过程根据菌丝生长特性分时段控制摇床转速,促进菌丝恢复、萌发及生长。该方法操作简单、成本低,菌丝球细腻均匀,菌棒接种后,菌丝球多点式萌发,有效增加了菌丝体与培养料的接触面积;较之固体菌种,菌丝生长速度快,污染率低,菌龄一致,有效缩短了菌种培养周期。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合实施例,对本发明进行进一步详细说明。本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本发明的实践了解到。应当理解,以下描述仅仅用以解释本发明,并不用于限定本发明。
本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形,意在覆盖非排它性的包括。例如,包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素,而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时,这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围,而不论该范围是否单独公开了。例如,当公开了范围“1至5”时,所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1 至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时,除非另外说明,否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
实施例1
(1)一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基,培养基配方为:
马铃薯:200g
麸皮:15g
葡萄糖:15g
酵母粉:2g
CaCO3:2g
KH2PO4:2g
MgSO4:1g
维生素B1:2片
水:1000mL。
(2)一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养方法:
a.培养基配制:按上述比例称取马铃薯、麸皮、葡萄糖、酵母粉、CaCO3、 KH2PO4、MgSO4、维生素B1,将马铃薯200g洗净、削皮、切片,麸皮15g 用4层纱布包裹,将马铃薯和麸皮放入1000mL自来水中,煮沸25min;4 层纱布过滤得到马铃薯、麸皮浸提液,然后依次加入葡萄糖15g、酵母粉 2g、CaCO3 2g、KH2PO4 2g、MgSO4 1g、维生素B1 2片(20mg),用自来水定容至1000mL,得到中华腐生牛肝菌液体菌种培养基;
b.分装:将配制好的培养基分装至500mL三角瓶中,每瓶装液量为200 mL,用橡皮塞封口;
c.灭菌:将分装好的三角瓶置于高温高压灭菌锅中121℃灭菌 30~35min,冷却备用;
d.接种:在无菌操作台内挑取5~7块直径约为3~6mm的中华腐生牛肝菌试管菌种块,放入上述液体培养基中。
e.培养:接种后的三角瓶静置4h,让菌丝恢复;然后置于摇床中, 25~29℃,120rpm/min,避光培养3d,促使菌丝萌发并形成少量菌丝球,然后调大摇床转速,将摇床转速设置为160rpm/min,增加培养基溶氧量促进菌球快速扩繁生长,同时可避免菌丝球过大或不均匀,继续暗光培养3d,即可得到晶莹剔透,大小均匀的中华腐生牛肝菌液体菌种。
实施例2
(1)一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基,培养基配方为:
马铃薯:150g
麸皮:20g
葡萄糖:15g
酵母粉:3g
CaCO3:2g
KH2PO4:3g
MgSO4:2g
维生素B1:1片
水:1000mL。
(2)一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养方法:
a.培养基配制:按上述比例称取马铃薯、麸皮、葡萄糖、酵母粉、CaCO3、 KH2PO4、MgSO4、维生素B1,将马铃薯150g洗净、削皮、切片,麸皮20g 用4层纱布包裹,将马铃薯和麸皮放入1000mL自来水中,煮沸20~25min;4层纱布过滤得到马铃薯、麸皮浸提液,然后依次加入葡萄糖15g、酵母粉 3g、CaCO3 2g、KH2PO4 3g、MgSO4 2g、维生素B1 1片(10mg),用自来水定容至1000mL,得到中华腐生牛肝菌液体菌种培养基;
b.分装:将配制好的培养基分装至500mL三角瓶中,每瓶装液量为200 mL,用橡皮塞封口;
c.灭菌:将分装好的三角瓶置于高温高压灭菌锅中121℃灭菌 30~35min,冷却备用;
d.接种:在无菌操作台内挑取5~7块直径约为3~6mm的中华腐生牛肝菌试管菌种块,放入上述液体培养基中;
e.培养:接种后的三角瓶静置6h,让菌丝恢复,然后置于摇床中, 25~29℃,100rpm/min,避光培养3d,促使菌丝萌发并形成少量菌丝球,然后调大摇床转速,将摇床转速设置为150rpm/min,增加培养基溶氧量促进菌球快速扩繁生长,同时可避免菌丝球过大或不均匀,继续暗光培养5d,即可得到晶莹剔透,大小均匀的中华腐生牛肝菌液体菌种。
对比例1
对比例1与上述实施例1的区别在于摇床培养阶段未根据中华腐生牛肝菌菌丝生长情况而改变摇床转速。对比例的具体实施方法为:
(1)一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基,培养基配方为:
马铃薯:200g
麸皮:15g
葡萄糖:15g
酵母粉:2g
CaCO3:2g
KH2PO4:2g
MgSO4:1g
维生素B1:2片
水:1000mL。
(2)一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养方法:
a.培养基配制:按上述比例称取马铃薯、麸皮、葡萄糖、酵母粉、CaCO3、 KH2PO4、MgSO4、维生素B1,将马铃薯200g洗净、削皮、切片,麸皮15g 用4层纱布包裹,将马铃薯和麸皮放入1000mL自来水中,煮沸25min;4 层纱布过滤得到马铃薯、麸皮浸提液,然后依次加入葡萄糖15g、酵母粉 2g、CaCO3 2g、KH2PO4 2g、MgSO4 1g、维生素B1 2片(20mg),用自来水定容至1000mL,得到中华腐生牛肝菌液体菌种培养基;
b.分装:将配制好的培养基分装至500mL三角瓶中,每瓶装液量为200 mL,用橡皮塞封口;
c.灭菌:将分装好的三角瓶置于高温高压灭菌锅中121℃灭菌 30~35min,冷却备用;
d.接种:在无菌操作台内挑取5~7块直径约为3~6mm的中华腐生牛肝菌试管菌种块,放入上述液体培养基中。
e.培养:接种后的三角瓶置于摇床中,25~29℃,130rpm/min,避光定速培养11d得到菌丝球大小不均匀的中华腐生牛肝菌液体菌种。该对比例获得的液体菌种菌丝球偏大、不均匀、培养周期长,不适宜中华腐生牛肝菌栽培种制备。
本领域的技术人员容易理解,以上所述仅为本发明的实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基,其特征在于,所述培养基中包含:
马铃薯:150~200g
麸皮:10~25g
葡萄糖:10~15g
酵母粉:2~3g
CaCO3:1~2g
KH2PO4:2~3g
MgSO4:1~2g
维生素B1:1~2片
水:1000mL。
2.一种中华腐生牛肝菌液体菌种的培养方法,其特征在于,所述方法包含以下步骤:
(1)配制培养基:按比例称取马铃薯、麸皮、葡萄糖、酵母粉、CaCO3、KH2PO4、MgSO4、维生素B1,将马铃薯150~200g洗净、削皮、切片,麸皮10~25g用纱布包裹,将马铃薯和麸皮放入1000mL自来水中,煮沸20~25min;纱布过滤得到马铃薯、麸皮浸提液,然后依次加入葡萄糖10~15g、酵母粉2~3g、CaCO31~2g、KH2PO42~3g、MgSO41~2g、维生素B11~2片,用自来水定容至1000mL,得到中华腐生牛肝菌液体菌种培养基;
(2)分装:将配制好的培养基分装至三角瓶中,封口;
(3)灭菌:将分装好的三角瓶置于灭菌锅中灭菌,冷却备用;
(4)接种:在无菌操作台内挑取直径约为3~6mm的中华腐生牛肝菌试管菌种块,放入上述液体培养基中;
(5)培养:接种后的三角瓶静置4~6h,让菌丝恢复,然后置于摇床中,25~29℃,100~160rpm/min,避光培养6~8d即可得到中华腐生牛肝菌液体菌种。
3.根据权利要求2所述的中华腐生牛肝菌液体菌种的培养方法,其特征在于,所述步骤(5)中培养前3d摇床转速为100~130rpm/min,促进菌丝萌发及菌丝球形成,后3~5d摇床转速设为130~160rpm/min,增加溶氧量促进菌球快速扩繁生长。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110631618.8A CN113348966A (zh) | 2021-06-07 | 2021-06-07 | 一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110631618.8A CN113348966A (zh) | 2021-06-07 | 2021-06-07 | 一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN113348966A true CN113348966A (zh) | 2021-09-07 |
Family
ID=77532717
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110631618.8A Pending CN113348966A (zh) | 2021-06-07 | 2021-06-07 | 一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN113348966A (zh) |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101130755A (zh) * | 2007-07-19 | 2008-02-27 | 青岛大学 | 崂山食用牛肝菌液体菌种的培养方法 |
CN101491195A (zh) * | 2009-03-05 | 2009-07-29 | 云南省热带作物科学研究所 | 暗褐网柄牛肝菌菌种的培养方法 |
CN105567576A (zh) * | 2016-01-25 | 2016-05-11 | 四川保兴现代农业科技股份有限公司 | 一种牛肝菌的液体菌种繁育方法和大田仿生栽培方法 |
CN108934785A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-12-07 | 景洪宏臻农业科技有限公司 | 一种黑牛肝菌的液体菌种培养方法及栽培方法 |
CN109006181A (zh) * | 2018-08-28 | 2018-12-18 | 铜陵盛牛菌业有限责任公司 | 一种食用菌液体菌种培养基及其制备方法 |
CN111066574A (zh) * | 2020-01-15 | 2020-04-28 | 青岛农业大学 | 一种利用菌渣制作花脸香蘑栽培种的方法 |
-
2021
- 2021-06-07 CN CN202110631618.8A patent/CN113348966A/zh active Pending
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101130755A (zh) * | 2007-07-19 | 2008-02-27 | 青岛大学 | 崂山食用牛肝菌液体菌种的培养方法 |
CN101491195A (zh) * | 2009-03-05 | 2009-07-29 | 云南省热带作物科学研究所 | 暗褐网柄牛肝菌菌种的培养方法 |
CN105567576A (zh) * | 2016-01-25 | 2016-05-11 | 四川保兴现代农业科技股份有限公司 | 一种牛肝菌的液体菌种繁育方法和大田仿生栽培方法 |
CN108934785A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-12-07 | 景洪宏臻农业科技有限公司 | 一种黑牛肝菌的液体菌种培养方法及栽培方法 |
CN109006181A (zh) * | 2018-08-28 | 2018-12-18 | 铜陵盛牛菌业有限责任公司 | 一种食用菌液体菌种培养基及其制备方法 |
CN111066574A (zh) * | 2020-01-15 | 2020-04-28 | 青岛农业大学 | 一种利用菌渣制作花脸香蘑栽培种的方法 |
Non-Patent Citations (6)
Title |
---|
刘青娥: "褐环粘盖牛肝菌多糖发酵工艺研究", 《广东农业科学》 * |
徐晓蝶等: "蒙山牛肝菌液体发酵培养基的优化", 《安徽农业科学》 * |
纪开萍等: "茶褐牛肝菌人工模拟栽培初步研究", 《云南农业大学学报》 * |
谭周进: "《食药用菌加工技术》", 31 March 2012, 湖南科学技术出版社 * |
邓百万等: "美味牛肝菌胞外多糖的发酵条件研究", 《食品与发酵工业》 * |
阳飞等: "美味牛肝菌多糖发酵工艺的研究", 《食用菌学报》 * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102533617B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌及其应用 | |
CN107142213A (zh) | 一株具有促生作用的棘孢木霉及其培养方法与应用 | |
CN103013838B (zh) | 草莓黄萎病的膏状生防制剂、制备方法、应用及其专用菌株 | |
CN109055235A (zh) | 一种用于普洱茶渥堆的外源接种菌种的制备及其应用方法 | |
CN104893984A (zh) | 一种冠突散囊菌株 | |
CN102696466A (zh) | 一种杜鹃花无菌苗快速菌根化的方法 | |
CN105039181A (zh) | 一种金龟子绿僵菌mayx130921及其应用 | |
CN105754926B (zh) | 一种快速诱导匍柄霉菌产孢的方法 | |
CN109971656B (zh) | 一株生姜内生绿色木霉及其应用 | |
CN116904321A (zh) | 一株篮状菌属真菌w10及其应用 | |
CN101245316A (zh) | 北冬虫夏草塑料袋栽培方法 | |
CN109749953B (zh) | 蜡样芽孢杆菌、菌剂及其制备方法和应用 | |
CN107467075B (zh) | 一种短小芽孢杆菌作为水稻生长促进剂的用途 | |
CN111334458B (zh) | 一种生防放线菌及其在生姜茎基腐病或大豆疫病防治方面的应用 | |
CN111172073B (zh) | 一株枯草芽孢杆菌菌株及其在植物生长中应用 | |
CN113348966A (zh) | 一种中华腐生牛肝菌液体菌种培养基及培养方法 | |
CN105624047A (zh) | 一种薏苡内生真菌及其应用 | |
CN103952338A (zh) | 成团泛菌新菌株xm2及其菌悬液的制备方法和对梨黑斑病的防治方法 | |
CN101372672B (zh) | 一种可常温发酵的蝙蝠蛾被毛孢真菌及其诱变育种方法和发酵工艺 | |
CN111235037B (zh) | 一种amf+dse组合菌剂及其在促进生姜生长与抗青枯病中的应用 | |
CN113213984B (zh) | 一种含死谷芽孢杆菌的生物有机肥及其制备方法和应用 | |
CN110938549B (zh) | 一种促进圆齿野鸦椿容器苗生长的菌剂及其制备方法和应用 | |
CN113412763A (zh) | 一株中华腐生牛肝菌菌株 | |
CN105039173A (zh) | 一种千层塔内生被孢霉菌及其应用 | |
CN114134052B (zh) | 毛簇木霉yw411及培养方法、菌剂及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |