CN113317130A - 一种金针菇液体菌种制作方法及其使用的培养基 - Google Patents
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Abstract
一种金针菇液体菌种制作方法及其使用的培养基，以糖蜜、黄豆粕、无机盐等为主要原料，经过配制、杀菌制成菌种液体培养基，然后接种金针菇菌种，培养得到金针菇液体菌种。发明方法应用蔗糖加工的副产物‑糖蜜作为碳源制作金针菇液体菌种；本发明制得的金针菇液体菌种，在金针菇栽培中，发菌速度、芽出数量、单产等指标均与以蔗糖为碳源制作的金针菇液体菌种接近，实现了金针菇液体菌种加工中糖蜜替代蔗糖，达到废弃物的资源化循环增值利用、降低金针菇生产成本的效果。
Description
技术领域
本发明属于食用菌栽培技术领域，涉及一种金针菇液体菌种制作方法及其使用的培养基。
背景技术
金针菇学名毛柄金钱菌，因其菌柄细长，似金针菜，故称金针菇。金针菇具有很高的药用食疗作用。金针菇人工栽培已有较长历史，已形成成熟的工厂化生产金针菇产业体系，是目前国内工厂化生产量最大的食用菌品种。
液体菌种是用液体培养基，在发酵装置中，通过深层培养(液体发酵)技术生产的液体形态的食用菌菌种。因使用液体菌种较传统的固体菌种生产金针菇具有成本低、纯度高、污染少、制种时间短、萌芽快、生长快、易于实现自动化等优势，所以目前国内金针菇工厂化生产都采用液体菌种技术。常规的金针菇液体菌种生产主要碳源营养使用食品级的蔗糖，成本较高。
糖蜜是制糖工业的副产品之一，是制糖过程中，糖液经浓缩析出结晶糖后，残留的棕褐色黏稠液体，含糖类、水分、粗蛋白、矿物质等。
发明内容
本发明的目的在于提供一种金针菇液体菌种制作方法及其使用的培养基。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种培养基，所述培养基的原料配方包括下列质量百分比的原料：
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供的技术方案是：一种金针菇液体菌种制作方法，包括下列步骤：
步骤1：将金针菇菌种接种至PDA液体培养基，然后置于生化培养箱内，于18-20℃条件下培养10～12天，得到菌种；
步骤2：按照权利要求1的原料配方称取原材料，装入一三角瓶内，使用中间夹棉花的纱布覆盖所述三角瓶的瓶口，外加一层硫酸纸覆盖所述三角瓶的瓶口后扎紧瓶口，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，得到摇瓶液体培养基；按照权利要求1的原料配方称取原材料，装入一发酵罐内，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，发酵罐液体培养基；
步骤3：将步骤1得到的菌种，接入摇瓶液体培养基中；摇瓶菌种培养方式：130-150r/min摇床培养；培养温度：18-20℃；培养时间：6-7，然后将培养好的摇瓶液体菌种用磁力搅拌器将菌球状的菌丝体搅碎成片状，接着接入发酵罐液体培养基；发酵罐培养方式：通气量0.1～0.15MPa；培养温度：18-20℃；培养时间：6-8天，培养结束后即得金针菇液体菌。
优选的技术方案为：所述PDA液体培养基由39g的PDA培养基加入至1L水中，溶解后采用压力0.11-0.12Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间30分钟的高压灭菌后，冷却至20℃以下后而得。
优选的技术方案为：摇瓶液体培养基的高压蒸汽灭菌法采用的压力为0.11-0.12Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间30分钟。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有的优点是：
1、本发明采用复合酶解的方法，去除了蛋白、脂肪及纤维等，制得了高纯度芋头淀粉，有利于提高辛烯基琥珀酸改性芋头淀粉、多孔芋头淀粉的制备效率与效果。
2、本发明制得的豆浆产品，开盖即可饮用，具有传统豆浆的风味和营养；含有茶多酚，具有一定保健功效；茶多酚经过多孔淀粉吸附，具有更好的稳定性，货架期较长。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
实施例1：一种金针菇液体菌种制作方法及其使用的培养基
一种以糖蜜为主要培养原料的金针菇液体菌种制作方法，其特征在于，包括以下技术步骤。
(1)菌种培养
本试验采用本公司选育获得的白色金针菇菌种“森源FV6”。配制PDA培养基(39gPDA，1L水)，充分溶解后采用高压灭菌，压力0.11-0.12Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间30分钟。将灭菌培养基倒入无菌培养皿，冷却至20℃以下，按照无菌操作规程，接种金针菇菌种“森源FV6”，后置于生化培养箱内，于19℃条件下培养10～12天，菌丝发满培养皿培养基表面。
(2)液体培养基制作
糖蜜液体培养基配方见下表。
摇瓶液体培养基配制：按上述比例称取原材料，三角瓶种用1000ml玻璃三角瓶，将以上原材料装到三角瓶内，每瓶装液量600ml，使用12cm*12cm正方形8层纱布中间夹少量棉花覆盖瓶口，外加一层硫酸纸用棉绳扎紧。采用高压蒸汽灭菌法，三角瓶置试验室灭菌锅内灭菌，压力0.11-0.12Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间30分钟后出锅冷却至20℃以下。
发酵罐液体培养基配制：按上述比例称取原材料，将以上原材料装到700L发酵罐内；采用高压蒸汽灭菌法，压力0.12-0.13Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间80～90分钟后出锅冷却至20℃以下；
(3)液体菌种培养及使用
按照无菌操作规程，取发满菌的培养皿菌种，挑取8mm*8mm的方形接种块，接入摇瓶培养基中，每个摇瓶接入8块菌种块。
同样按照无菌操作规程，取发酵好的摇瓶菌液500～550ml，接入发酵罐内。
摇瓶菌种培养方式：140r/min摇床培养；培养温度：19℃；培养时间：6-7天。培养好的摇瓶液体菌种应在使用前用磁力搅拌器将菌球状的菌丝体搅碎成片状，然后接入液体发菌罐。
发酵罐培养方式：通气量0.1～0.15Mpa；培养温度：19℃；培养时间：6-8天。培养好的发酵罐液体菌种用于金针菇生产。
液体菌种培养基配方：1-2％糖蜜(对照使用2％白砂糖)、0.30％黄豆粕粉、0.1％KH2PO4、0.05％MgSO4，其余为水。
表1：糖蜜替代白砂糖不同浓度摇瓶发菌生长情况
验采用了8种糖蜜浓度的试验，由于糖蜜色深，配方中糖蜜浓度依次从1％到4％，糖蜜浓度越高，培养液颜色越深。从结果来看，糖蜜浓度1％的配方，其菌含量与对照相似；同时，糖蜜浓度相对较低，培养液色浅，有利于观察菌丝生长情况及判断无杂菌污染。
将1％浓度糖蜜培养的摇瓶接种至发酵罐扩大培养，接种至栽培种，以正常白糖配方为对照，跟踪发菌出菇情况。
表2：1％糖蜜配方与2％白糖配方(对照)发菌出菇情况
经过试验，同样的体积的发酵培养液所需糖蜜用量仅为白糖用量的一半，糖蜜配方生产的液体菌种较对照在金针菇发菌速度、芽出数量、产量、品质等方面无显著差异，此技术值得在金针菇工厂化液体菌种生产中推广应用。
实施例2：一种以糖蜜为主要培养原料的金针菇液体菌种制作方法
一种培养基，所述培养基的原料配方包括下列质量百分比的原料：
一种金针菇液体菌种制作方法，包括下列步骤：
步骤1：将金针菇菌种接种至PDA液体培养基，然后置于生化培养箱内，于20℃条件下培养10天，得到菌种；
步骤2：按照原料配方称取原材料，装入一三角瓶内，使用中间夹棉花的纱布覆盖所述三角瓶的瓶口，外加一层硫酸纸覆盖所述三角瓶的瓶口后扎紧瓶口，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，得到摇瓶液体培养基；按照原料配方称取原材料，装入一发酵罐内，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，发酵罐液体培养基；
步骤3：将步骤1得到的菌种，接入摇瓶液体培养基中；摇瓶菌种培养方式：130r/min摇床培养；培养温度：18℃；培养时间：6，然后将培养好的摇瓶液体菌种用磁力搅拌器将菌球状的菌丝体搅碎成片状，接着接入发酵罐液体培养基；发酵罐培养方式：通气量0.1MPa；培养温度：18℃；培养时间：6天，培养结束后即得金针菇液体菌。
优选的实施方式为：所述PDA液体培养基由39g的PDA培养基加入至1L水中，溶解后采用压力0.11Mpa，灭菌温度121℃，灭菌时间30分钟的高压灭菌后，冷却至20℃后而得。
优选的实施方式为：摇瓶液体培养基的高压蒸汽灭菌法采用的压力为0.11Mpa，灭菌温度121℃，灭菌时间30分钟。
实施例3：一种金针菇液体菌种制作方法及其使用的培养基
一种培养基，所述培养基的原料配方包括下列质量百分比的原料：
一种金针菇液体菌种制作方法，包括下列步骤：
步骤1：将金针菇菌种接种至PDA液体培养基，然后置于生化培养箱内，于20℃条件下培养10天，得到菌种；
步骤2：按照原料配方称取原材料，装入一三角瓶内，使用中间夹棉花的纱布覆盖所述三角瓶的瓶口，外加一层硫酸纸覆盖所述三角瓶的瓶口后扎紧瓶口，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，得到摇瓶液体培养基；按照原料配方称取原材料，装入一发酵罐内，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，发酵罐液体培养基；
步骤3：将步骤1得到的菌种，接入摇瓶液体培养基中；摇瓶菌种培养方式：150r/min摇床培养；培养温度：20℃；培养时间：7，然后将培养好的摇瓶液体菌种用磁力搅拌器将菌球状的菌丝体搅碎成片状，接着接入发酵罐液体培养基；发酵罐培养方式：通气量0.15MPa；培养温度：20℃；培养时间：8天，培养结束后即得金针菇液体菌。
优选的实施方式为：所述PDA液体培养基由39g的PDA培养基加入至1L水中，溶解后采用压力0.12Mpa，灭菌温度123℃，灭菌时间30分钟的高压灭菌后，冷却至20℃以下后而得。
优选的实施方式为：摇瓶液体培养基的高压蒸汽灭菌法采用的压力为0.12Mpa，灭菌温度123℃，灭菌时间30分钟。
以上所述者仅为用以解释本发明之较佳实施例，并非企图具以对本发明做任何形式上之限制，是以，凡有在相同之发明精神下所作有关本发明之任何修饰或变更，皆仍应包括在本发明意图保护之范畴。
Claims (4)
1.一种培养基，其特征在：所述培养基的原料配方包括下列质量百分比的原料：
糖蜜 1-2%；
黄豆粕粉 0.25-0.35%；
KH2PO4 0.08-0.12%；
MgSO4 0.04-0.06%；
余量为水。
2.一种金针菇液体菌种制作方法，其特征在于：包括下列步骤：
步骤1：将金针菇菌种接种至PDA液体培养基，然后置于生化培养箱内，于18-20℃条件下培养10~12天，得到菌种；
步骤2：按照权利要求1的原料配方称取原材料，装入一三角瓶内，使用中间夹棉花的纱布覆盖所述三角瓶的瓶口，外加一层硫酸纸覆盖所述三角瓶的瓶口后扎紧瓶口，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，得到摇瓶液体培养基；按照权利要求1的原料配方称取原材料，装入一发酵罐内，再采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，发酵罐液体培养基；
步骤3：将步骤1得到的菌种，接入摇瓶液体培养基中；摇瓶菌种培养方式：130-150r/min摇床培养；培养温度：18-20℃；培养时间：6-7，然后将培养好的摇瓶液体菌种用磁力搅拌器将菌球状的菌丝体搅碎成片状，接着接入发酵罐液体培养基；发酵罐培养方式：通气量0.1~0.15MPa；培养温度：18-20℃；培养时间：6-8天，培养结束后即得金针菇液体菌。
3.根据权利要求2所述的金针菇液体菌种制作方法，其特征在于：所述PDA液体培养基由39g的PDA培养基加入至1L水中，溶解后采用压力0.11-0.12Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间30分钟的高压灭菌后，冷却至20℃以下后而得。
4.根据权利要求2所述的金针菇液体菌种制作方法，其特征在于：摇瓶液体培养基的高压蒸汽灭菌法采用的压力为0.11-0.12Mpa，灭菌温度122℃±1℃，灭菌时间30分钟。
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