CN113248329B

CN113248329B - 一种具有抗重茬作用的微生物肥料及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN113248329B
Application number: CN202110746472.1A
Authority: CN
Inventors: 杨凤娟; 梁宸; 宋子涵; 袁梅; 梁永健; 徐文艳; 褚刚; 刘汇; 王克强
Original assignee: Shandong Richfoot Biotechnology Co ltd
Current assignee: Shandong Richfoot Biotechnology Co ltd
Priority date: 2021-07-02
Filing date: 2021-07-02
Publication date: 2021-10-12
Anticipated expiration: 2041-07-02
Also published as: CN113248329A

Abstract

本发明公开了一种具有抗重茬作用的微生物肥料，由以下组分组成：抗重茬复合菌液70%～81%，壳聚糖水解液4.5%～8%，矿源黄腐酸/矿源黄腐酸钾4.5%～6.5%，木醋液10%～15.5%；所述抗重茬复合菌液是由①解淀粉芽孢杆菌菌液，②地衣芽孢杆菌菌液和③侧孢短芽孢杆菌菌液组成的，①、②、③三者的重量比为（3～5）:（1～2）:（0.3～0.5）。制备方法为：将各组分混合。本发明的微生物肥料在抗辣椒、黄瓜重茬中的应用，用于抗辣椒重茬时，可抑制根结线虫生长活动，快速促发新根，促进根部对水分和养分的吸收，促进叶绿素的合成，改善黄化；用于抗黄瓜重茬时，可降低黄瓜枯萎病的发病率，增加黄瓜产量，提高土壤蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶、脲酶活性，效果显著。

Description

一种具有抗重茬作用的微生物肥料及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种具有抗重茬作用的微生物肥料及其制备方法与应用，属于微生物肥料技术领域。

背景技术

重茬，也称连作，是指在同一块地连续多年种植同种作物。目前经济价值较高的瓜果蔬菜、某些中草药等都存在重茬种植的现象。重茬种植易导致重茬障碍，作物病虫害加重，产量和品质严重降低。重茬障碍属于土传病害，主要由于多年重茬种植造成根际土壤营养不平衡，部分营养元素匮乏，土壤理化性质发生变化，土壤酶活性降低，作物根际微生物菌落失衡，致病性微生物，如真菌、细菌、线虫、放线菌等种类和数量逐渐增加，有益微生物降低，并且连年种植，作物根系会分泌一些抑制作物生长的自毒物质，随着种植年限的增加不断积累。重茬障碍主要危害作物根部，造成根部获取生长所需的营养物质遭到阻碍，影响作物生长，导致作物产量和品质降低。

重茬障碍目前没有较好的防治措施，防效较快的是化学防治，但长期大量使用化学农药会导致环境污染，且易产生抗药性，降低防效。此外现有的一些抗重茬产品主要通过补充化学元素，尤其是中微量元素，或者施用生物有机肥、抗重茬菌剂等，功能单一，作用效果缓慢，防效时间短，防治效果较差，且主要以基施为主，作物生育期施用不便，化学元素的添加也易引起环境及土壤问题，可能加重病害的发生。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种具有抗重茬作用的微生物肥料，及其制备方法与应用。本发明的微生物肥料，可以从多种维度综合作用改善重茬病害，作用效果快，防效时间长，全生育期均可使用，使用方法灵活，绿色安全无污染。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种具有抗重茬作用的微生物肥料，是由以下组分组成的，各组分按重量百分数计：抗重茬复合菌液70%～81%，壳聚糖水解液4.5%～8%，矿源黄腐酸/矿源黄腐酸钾4.5%～6.5%，木醋液10%～15.5%；所述抗重茬复合菌液是由①解淀粉芽孢杆菌菌液，②地衣芽孢杆菌菌液和③侧孢短芽孢杆菌菌液组成的，其中，①、②、③三者的重量比为（3～5）:（1～2）:（0.3～0.5）。

所述解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢短芽孢杆菌均是现有技术中已有的常规菌种，均可常规市场购买得到。

进一步地，所述解淀粉芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将解淀粉芽孢杆菌菌种以0.3%～0.5%（体积百分数）的接种量接入发酵液中，在28～35℃下有氧发酵45～50小时，即得解淀粉芽孢杆菌菌液，有效活菌数为1×10⁹～3×10⁹cfu/ml。所述发酵液的组分组成为：10%大豆粉，3%淀粉，6%糖蜜，余量为水，各组分按重量百分数计。

进一步地，所述地衣芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将地衣芽孢杆菌菌种以0.3%～0.5%（体积百分数）的接种量接入发酵液中，在28～35℃下有氧发酵45～50小时，即得地衣芽孢杆菌菌液，有效活菌数为1×10⁹～3×10⁹cfu/ml。所述发酵液的组成为：10%玉米淀粉，6%葡萄糖，15%糖蜜，余量为水，各组分按重量百分数计。

进一步地，所述侧孢短芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将侧孢短芽孢杆菌菌种以0.3%～0.5%（体积百分数）的接种量接入发酵液中，在30～35℃下有氧发酵45～50小时，即得侧孢短芽孢杆菌菌液，有效活菌数为0.5×10⁹～2×10⁹cfu/ml。所述发酵液的组分组成为：4.5%葡萄糖，1.2%酵母膏，1.8%蛋白胨，0.375%磷酸氢二钾，0.015%硫酸锰，余量为水，各组分按重量百分数计。

进一步地，所述壳聚糖水解液，是通过以下方法制备得到的：取45～55份的壳聚糖，加入875～905份的水，混合均匀，升温至50～60℃，再加入50～70份的磷酸，搅拌使之充分混匀（3～4小时），过滤，即得壳聚糖水解液；各组分按重量百分数计。

进一步地，所述木醋液，是由生物质（选自小麦秸秆、玉米秸秆、茄子秆、辣椒秆、玉米芯、水稻秸秆、番茄秸秆等农作物秸秆中的任意一种或两种以上）经450～600℃限氧热裂解形成的气体混合物经冷凝分离后得到液体产物，再经精制加工而成。可自行制备，也可以市场购买得到。具体地，可通过以下方法制备得到：将含水量在15wt%以下的生物质（选自小麦秸秆、玉米秸秆、茄子秆、辣椒秆、玉米芯、水稻秸秆、番茄秸秆等农作物秸秆中的任意一种或两种以上）置于炭化炉内，经450～600℃限氧热裂解1～2小时，形成的气体混合物冷凝后得到液体产物，经静置、活性炭吸附过滤，即得木醋液，pH值2～5,有机质含量≥5.0%，总酸（以乙酸计）≥6.5%。

所述具有抗重茬作用的微生物肥料的制备方法可以为：将解淀粉芽孢杆菌菌液，地衣芽孢杆菌菌液，侧孢短芽孢杆菌菌液，以及壳聚糖水解液混合混匀，得混合液，静置0.5～1小时；将矿源黄腐酸钾溶解于木醋液中，然后加入混合液中，混匀即得。

所述具有抗重茬作用的微生物肥料在抗辣椒重茬中的用途，在抗黄瓜重茬中的用途。具体应用时，施肥方式为：用水稀释微生物肥料至合适倍数（比如500倍），采用灌根、喷施、滴灌、蘸根、冲施等方式施肥。

本发明所用抗重茬菌剂由解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和侧孢短芽孢杆菌组成，这三种菌适应逆境环境的能力比较强，容易定殖，适合在重茬地土壤理化性质较差的环境中使用。侧孢短芽孢杆菌具有解磷解钾等功能，可提高肥料利用率，减少化学肥料用量，同时具有广谱的抗菌活性，尤其是对细菌和真菌病害，防效显著，对于线虫、软体动物等害虫也具有杀灭作用。地衣芽孢杆菌主要对植物的真菌性病害具有较好抑制作用，同时具备生产各种酶的能力，促进土壤中有机质分解成腐殖质，极大提高土壤肥效。解淀粉芽孢杆菌是典型的植物促生菌，能够分泌多种活性物质促进植物生长，防治真菌病害，此外，解淀粉芽孢杆菌能以多种方式降解多种有毒污染物，净化被污染的土壤。这三种菌复合在一起，可以抗多种土传病害，降解根系分泌的有毒物质，同时可改良土壤，活化土壤中被固定的营养元素提高肥料利用率，促进作物生长，且这三种菌除可在土壤、植物表面定殖外，也能在植物内部定殖，有助于提高菌株对不良环境的适应性，对于植物内部的病害也有很好的防控效果。

木醋液具有极强的渗透性和一定的展着性、粘附性，可增加根部施肥和叶面喷施的作用效果，与壳聚糖水解液、矿源黄腐酸钾混合后既是土壤改良剂，作物生长促进剂，又是肥料增效剂，同时也是产品中菌种的保护剂。此外，对多种植物病原菌及线虫具有较强的抑制作用。由于重茬障碍主要危害作物根部，所以对作物根部的修复非常重要，这三种物质（壳聚糖水解液、矿源黄腐酸钾、木醋液）的添加具有快速地促进作物根系生长，诱发新根的作用，其中含有的一些小分子有机物质可被作物直接吸收，促进作物生长，减轻因病害造成的叶片黄化、萎蔫、植株长势不良等症状。

本发明的具有抗重茬作用的微生物肥料，具有以下优点：

1、各成分相互促进，协同增效，产品性质稳定，菌株活性强，定殖能力强，对作物重茬造成的多种土传病害均有较好抑制作用，且为绿色生物制剂，安全无污染，作物定植期、生长期均可使用，可冲施、滴灌、喷灌、灌根、叶面喷施等，使用方法灵活，防效时间长，防治效果更好。

2、注重对重茬危害最严重的部位——根系的修复，使用后可快速促进作物根系生长，诱发新根，有利于作物对水分和养分的吸收，含有的小分子有机物可被作物根系快速吸收，促进作物生长，减轻因病害造成的叶片黄化、萎蔫、植株长势不良等症状。

3、产品使用后通过对土壤的改良和活化土壤中被固定的大中微量元素以及微生物对有机物质的分解作用，补充作物所需营养元素，同时可提高肥料利用率，减少化学肥料的用量。

4、经实际应用证明，对辣椒施用本发明的具有抗重茬作用的微生物肥料，对于辣椒因重茬造成的根结线虫病害具有较好防效，可抑制根结线虫生长活动，快速促发新根，促进根部对水分和养分的吸收，促进叶绿素的合成，改善黄化，作物长势健壮。

5、经实际应用证明，对黄瓜施用本发明的具有抗重茬作用的微生物肥料，可明显降低黄瓜枯萎病的发病率，增加黄瓜产量，土壤蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶、脲酶活性均有明显提高，土壤生物性状得到改善。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。

下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料等，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法，检测方法等，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法，检测方法等。

本发明实施例所用的解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌，均购自中国农业科学院农业微生物菌种保藏管理中心（公开出售），解淀粉芽孢杆菌的编号为ACCC10167，地衣芽孢杆菌的编号为ACCC02936，侧孢短芽孢杆菌购自沂水锦润生物科技有限公司。

本发明实施例所用壳聚糖，为潍坊科海甲壳素有限公司生产的片状壳聚糖。

实施例1 制备具有抗重茬作用的微生物肥料

组分组成为（按重量份计）：抗重茬复合菌液700份，壳聚糖水解液80份，矿源黄腐酸钾65份，木醋液155份。其中，抗重茬复合菌液是由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液组成的混合菌液，解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液的体积比为3:2:0.3。

所述解淀粉芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将解淀粉芽孢杆菌菌种以0.4%（体积百分数）的接种量接入发酵液中，在30℃下有氧发酵48小时，即得解淀粉芽孢杆菌菌液，有效活菌数为1.12×10⁹cfu/ml。所述发酵液的组分组成为：10%大豆粉，3%淀粉，6%糖蜜，余量为水，各组分按重量百分数计。

所述地衣芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将地衣芽孢杆菌菌种以0.4%（体积百分数）的接种量接入发酵液中，在30℃下有氧发酵48小时，即得地衣芽孢杆菌菌液，有效活菌数为1.04×10⁹cfu/ml。所述发酵液的组成为：10%玉米淀粉，6%葡萄糖，15%糖蜜，余量为水，各组分按重量百分数计。

所述侧孢短芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将侧孢短芽孢杆菌菌种以0.4%（体积百分数）的接种量接入发酵液中，在32℃下有氧发酵48小时，即得侧孢短芽孢杆菌菌液，有效活菌数为0.93×10⁹cfu/ml。所述发酵液的组分组成为：4.5%葡萄糖，1.2%酵母膏，1.8%蛋白胨，0.375%磷酸氢二钾，0.015%硫酸锰，余量为水，各组分按重量百分数计。

所述壳聚糖水解液，是通过以下方法制备得到的：取50份的壳聚糖，加入890份的水，混合均匀，升温至60℃，再加入60份的磷酸，搅拌3h使之充分混匀，经过滤后即得壳聚糖水解液；各组分按重量百分数计。

所述木醋液，是通过以下方法制备得到的：将茄子秆风干至含水量为13wt%，然后置于炭化炉内，经500℃限氧热裂解1h后，形成的气体混合物经分离系统冷凝分离后得到液体产物，再经静置、活性炭吸附过滤后加工即成，制备得到的茄子秆木醋液技术指标为：pH值3.5,有机质含量6.0%，总酸（以乙酸计）6.5%。

所述矿源黄腐酸钾，常规市场购买。

制备方法为：先将解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液按体积比3:2:0.3混合混匀，得混合菌液；取700份混合菌液，与80份的壳聚糖水解液混合混匀，得混合液，静置1小时；将65份矿源黄腐酸钾溶解于155份木醋液中，然后加入混合液中，混匀即得。

实施例2 制备具有抗重茬作用的微生物肥料

组分组成为（按重量份计）：抗重茬混合菌液810份，壳聚糖水解液45份，矿源黄腐酸钾45份，木醋液100份。其中，抗重茬混合菌液由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液组成，解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液的体积比为5:1:0.5。

其它同实施例1。

实施例3 制备具有抗重茬作用的微生物肥料

组分组成为（按重量份计）：抗重茬混合菌液780份，壳聚糖水解液65份，矿源黄腐酸钾53份，木醋液102份。其中，抗重茬混合菌液由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液组成，解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液的体积比为4:1.5:0.4。

其它同实施例1。

对照例1（不含侧孢短芽孢杆菌菌液）

组分组成为（按重量份计）：抗重茬复合菌液660份，壳聚糖水解液80份，矿源黄腐酸钾65份，木醋液155份，水40份。其中，抗重茬混合菌液由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液组成，解淀粉芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液的体积比为3:2。

其它同实施例1。

对照例2（不含木醋液）

组分组成为（按重量份计）：抗重茬复合菌液700份，壳聚糖水解液80份，矿源黄腐酸钾65份，水155份。其中，其中，抗重茬混合菌液由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液组成，解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液的体积比为3:2:0.3。

其它同实施例1。

对照例3（木醋液用量少）

组分组成为（按重量份计）：抗重茬复合菌液700份，壳聚糖水解液80份，矿源黄腐酸钾65份，木醋液55份，水80份。其中，其中，抗重茬混合菌液由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液组成，解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液的体积比为3:2:0.3。

其它同实施例1。

应用实例1

在山东省寿光市常治官村辣椒种植棚进行试验，试验棚面积约1.3亩，种植辣椒品种为微丽，2020年12月14日定植，辣椒株距0.45米，行距1.4米。试验地因连年重茬种植辣椒造成根结线虫病害发生，辣椒初果期开始出现黄化、植株矮小、根系已经开始结瘤。2021年2月4日上午进行试验布置，试验设置8个处理，每个处理1行，设置3次重复。2月27日进行试验观察统计。

试验方法：试验设8个处理，分别为：

处理1：对照处理（未添加任何制剂），每棵辣椒灌水100mL。

处理2：实施例1的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL。

处理3：实施例1的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL；同时，实施例1的产品稀释1000倍后喷施。

处理4：实施例2的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL。

处理5：实施例3的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL。

处理6：对照例1的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL。

处理7：对照例2的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL。

处理8：对照例3的产品稀释500倍后灌根，每棵辣椒灌根100mL。

处理后23天，对株高、叶长、叶宽、叶绿素含量、根等观察和统计，结果如表1所示。

表1 不同处理下辣椒生长和根结线虫发病情况

利用SPSS 21.0软件对数据进行方差分析，最小显著差异法（LSD）检验处理间的差异显著性（α=0.05）。表格中不同小写字母代表不同处理间差异达5%显著水平。

由表1可以看出，相比于空白对照（处理1），施用实施例1、2、3（处理2、3、4、5）的肥料的辣椒，生长表现更优，在株高、叶长和叶绿素含量方面有显著提升，有大量新根产生，根系少量结瘤。

实施例1、实施例3、实施例2三个实施例中解淀粉芽孢杆菌菌液含量、侧孢短芽孢杆菌菌液含量一次升高，壳聚糖水解液、矿源黄腐酸钾、木醋液、地衣芽孢杆菌菌液含量不断降低，但是在表现效果上以实施例1（处理2）表现最优，实施例3（处理5）表现次之，最后是实施例2（处理4）的表现，处理2叶绿素含量显著高于处理5和处理4，其中处理5和处理4木醋液含量近于相等，但处理5的实验效果好于处理4的实验效果，且叶绿素含量相比于处理4也有明显提高，这说明产品成分之间存在着相互影响。

相比于对照例1（处理6，不含侧孢短芽孢杆菌），施用实施例1（处理2）的肥料的辣椒，生长表现更优，且显著提高了叶片的叶绿素含量，这说明侧孢短芽孢杆菌在其中发挥了重要的作用。

相比于对照例2、3（处理7、8，不含木醋液，或木醋液用量较小），施用实施例1（处理2）的肥料的辣椒，生长表现更优，且株高和叶绿素含量显著高于对照例2和3；相比于对照例2（处理7，不含木醋液），施用对照例3（处理8，木醋液用量较小）肥料的辣椒，叶绿素含量也有显著提升，产生大量新根，根系结瘤更少，这说明木醋液在其中发挥了重要的作用。

相比于处理2，处理3的辣椒，生长表现更优，且在叶长和叶绿素含量方面有显著提升这说明灌根和叶面喷施相结合的方式作用效果更好。

结论：施用本发明的产品或应用本发明中配方成分制作的产品对于辣椒因重茬造成的根结线虫病害具有较好防效，可抑制根结线虫生长活动，并且在快速促发新根，促进根部对水分和养分的吸收，促进叶绿素的合成，提升作物光合作用，改善作物黄化方面效果更加显著，其中按照实施例1进行配制的产品作用效果更加突出，灌根和叶面喷施相结合的方式作用效果更好。

应用实例2

在山东省寿光市胡营一村黄瓜种植大棚进行试验，试验棚面积约1.5亩，2020年11月3日进行黄瓜定植，黄瓜株距0.2米，行距1.5米，每行种植一排黄瓜共24棵，试验地连年重茬种植黄瓜，造成黄瓜易感枯萎病。试验设置7个处理，每个处理5行，分别于2021年2月4日、2月15日、2月26日各进行一次灌根处理，2月4日第一次试验时黄瓜约6～9片叶，生长期间记录黄瓜发病情况和产量，最后进行分析，5月10日采集土壤样品进行分析化验。

试验方法：试验设7个处理，分别为：

处理1：对照处理（未添加任何制剂），每棵黄瓜灌水100mL；

处理2：实施例1的产品稀释500倍后灌根，每棵黄瓜灌根100mL；

处理3：实施例2的产品稀释500倍后灌根，每棵黄瓜灌根100mL；

处理4：实施例3的产品稀释500倍后灌根，每棵黄瓜灌根100mL；

处理5：对照例1的产品稀释500倍后灌根，每棵黄瓜灌根100mL；

处理6：对照例2的产品稀释500倍后灌根，每棵黄瓜灌根100mL；

处理7：对照例3的产品稀释500倍后灌根，每棵黄瓜灌根100mL。

对黄瓜枯萎病的发病率、防治效果、产量、增产率等进行观察和统计，结果如表2、3所示。

表2 不同处理对黄瓜枯萎病防治和产量的影响

表3 不同处理对黄瓜重茬棚土壤酶活性的影响

由表2、表3可以看出，处理2（实施例1）、处理3（实施例2）、处理4（实施例3）对黄瓜枯萎病的防治效果分别达到：85.48%、72.76%和79.45%，增产分别为：56.81%、47.54%和51.38%，土壤蔗糖酶活性分别提高：35.03%、26.53%和30.86%，土壤磷酸酶活性分别提高：93.7%、70.87%和87.40%，土壤过氧化氢酶活性分别提高：34.78%、26.09%和30.43%，土壤脲酶活性分别提高：80.0%、62.68%和72.16%。处理5（对照例1）、处理6（对照例2）、处理7（对照例3)对黄瓜枯萎病的防治效果分别达到：51.16%、32.58%和64.41%，增产分别为;32.4%、21.57%和40.13%，土壤蔗糖酶活性分别提高:10.44%、6.50%和23.73%，土壤磷酸酶活性分别提高:40.94%、19.69%和61.41%，土壤过氧化氢酶活性分别提高；13.04%、8.70%和21.74%，土壤脲酶活性分别提高：30.10%、18.35%和55.05%。土壤酶是土壤生态系统中最活跃的组分，参与了土壤中所有的生化反应，是土壤有机质分解和养分循环的主要生物学机制，可以作为土壤肥力和质量的敏感指标。可见施用本发明的产品增强了土壤酶活性，改善了农业生态系统的健康和生产力。

由表2和表3可以看出，相比于空白对照（处理1），施用实施例1、2、3（处理2、3、4）的肥料的黄瓜，黄瓜枯萎病的发病率大幅度降低，防治效果显著，增产效果显著。土壤中蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶、脲酶的含量有显著提升。

相比于对照例1（处理5，不含侧孢短芽孢杆菌），施用实施例1（处理2）的肥料的黄瓜，黄瓜枯萎病的发病率大幅度降低，防治效果显著，增产效果显著。土壤中蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶、脲酶的含量有显著提升。这说明侧孢短芽孢杆菌在其中发挥了重要的作用。

相比于对照例2、3（处理6、7，不含木醋液，或木醋液用量较小），施用实施例1（处理2）的肥料的辣椒，黄瓜枯萎病的发病率大幅度降低，防治效果显著，增产效果显著。土壤中蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶、脲酶的含量有显著提升。这说明木醋液在其中发挥了重要的作用。

结论：施用本发明的产品或应用本发明中配方成分制作的产品均可明显降低黄瓜枯萎病的发病率，增加黄瓜产量，土壤蔗糖酶、磷酸酶、过氧化氢酶、脲酶活性均有明显提高，土壤生物性状得到改善，其中以施用本发明的产品作用效果更加突出。

应用实例3

按照实施例1、3和对照例2的配方配置样品，放置于室内阴凉通风处，定期检测样品有效活菌数，结果如表4所示。其中样品1是按照实施例1进行配置，样品2按照实施例3进行配置，样品3按照对照例2进行配置。

表4 产品有效活菌数随放置时间的变化

固态菌剂菌株代谢缓慢，存活率高，可保存较长时间。而液态菌剂保藏受多种因素的影响，菌株代谢强度远高于固体菌种，菌株退化严重，且易受杂菌污染，保存时间相对较短。本发明中通过添加适当比例的矿源黄腐酸钾、壳聚糖水解液和木醋液有助于抑制杂菌生长，保持菌株和产品稳定性，延长贮存期。由表4可以看出，随着放置时间的延长，样品1、2、3的有效活菌数总体呈下降趋势，样品1三种菌有效活菌数下降较慢，总体比较稳定，样品2次之，样品3有效活菌数下降最快，说明矿源黄腐酸钾、壳聚糖水解液和木醋液在液体条件下对菌株的保存具有一定的作用，且在最优配比时对菌株的保存效果最好，三者添加比例的变化或者成分的缺失对菌株保存影响较大。

给本领域技术人员提供上述实施例，以完全公开和描述如何实施和使用所主张的实施方案，而不是用于限制本文公开的范围。对于本领域技术人员而言显而易见的修饰将在所附权利要求的范围内。

Claims

1.微生物肥料在抗辣椒重茬中的应用，其特征在于：所述抗辣椒重茬作用体现为：提高叶绿素含量，促发新根生长，抑制根结线虫；

所述微生物肥料是由以下组分组成的，各组分按重量百分数计：抗重茬复合菌液70%～81%，壳聚糖水解液4.5%～8%，矿源黄腐酸/矿源黄腐酸钾4.5%～6.5%，木醋液10%～15.5%；所述抗重茬复合菌液是由①解淀粉芽孢杆菌菌液，②地衣芽孢杆菌菌液和③侧孢短芽孢杆菌菌液组成的，其中，①、②、③三者的重量比为（3～5）:（1～2）:（0.3～0.5）；

所述木醋液，是通过以下方法制备得到的：将含水量在15wt%以下的生物质置于炭化炉内，经450～600℃限氧热裂解1～2小时，形成的气体混合物冷凝后得到液体产物，经静置、活性炭吸附过滤，即得木醋液；所述生物质，选自小麦秸秆、玉米秸秆、茄子秆、辣椒秆、玉米芯、水稻秸秆、番茄秸秆中的任意一种或两种以上；

所述解淀粉芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将解淀粉芽孢杆菌菌种以0.3%～0.5%的接种量接入发酵液中，在28～35℃下有氧发酵45～50小时，即得解淀粉芽孢杆菌菌液；所述发酵液的组分组成为：10%大豆粉，3%淀粉，6%糖蜜，余量为水，各组分按重量百分数计；

所述地衣芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将地衣芽孢杆菌菌种以0.3%～0.5%的接种量接入发酵液中，在28～35℃下有氧发酵45～50小时，即得地衣芽孢杆菌菌液；所述发酵液的组成为：10%玉米淀粉，6%葡萄糖，15%糖蜜，余量为水，各组分按重量百分数计；

所述侧孢短芽孢杆菌菌液是通过以下方法制备得到的：将侧孢短芽孢杆菌菌种以0.3%～0.5%的接种量接入发酵液中，在30～35℃下有氧发酵45～50小时，即得侧孢短芽孢杆菌菌液；所述发酵液的组分组成为：4.5%葡萄糖，1.2%酵母膏，1.8%蛋白胨，0.375%磷酸氢二钾，0.015%硫酸锰，余量为水，各组分按重量百分数计；

所述壳聚糖水解液，是通过以下方法制备得到的：取45～55份的壳聚糖，加入875～905份的水，混合均匀，升温至50～60℃，再加入50～70份的磷酸，充分搅拌使之混匀，即得壳聚糖水解液；各组分按重量百分数计。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述微生物肥料的组分组成为：抗重茬复合菌液700份，壳聚糖水解液80份，矿源黄腐酸钾65份，木醋液155份；其中，抗重茬复合菌液是由解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液组成的混合菌液，解淀粉芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和侧孢短芽孢杆菌菌液的体积比为3:2:0.3。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：具体应用时，施肥方式为：用水稀释微生物肥料至500倍，采用灌根的方式施肥；和/或：用水稀释微生物肥料至1000倍，采用喷施的方式施肥。