CN110540461A - 一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥，由如下重量份组分组成：复合有益微生物菌发酵液30～35份，糖蜜8～10份，腐植酸4～8份、磷酸二氢钾5～7份、磷酸氢二钾6～8份、聚磷酸铵6～10份、硝酸钾12～15份、硝酸钙5～7份、硝酸镁2～5份、硝酸锌1～4份、钼酸铵1～4份、螯合铁0.5～2份、螯合铜0.5～2份；所述复合有益微生物菌为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌。通过使用上述复合有益微生物菌发酵液，同时复配糖蜜、腐殖酸、氮肥、磷肥、钾肥、微肥等营养元素形成复合微生物液体肥，不仅能防治草莓炭疽病的发生，还可以为草莓提供营养元素需求。

Description

一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥及其制备方法和 应用

技术领域

本发明涉及一种微生物液体肥的制备及其生产工艺，特别涉及一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥及其制备方法和应用。

背景技术

草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是经济价值较高的一种水果，其果实含有丰富的蛋白质和维生素，且柔软多汁、酸甜适口，被誉为“水果皇后”，深受大家喜爱。

近年来，设施草莓栽培面积逐渐增加，设施密闭及高温高湿环境等导致草莓病害发生日益严重，其中，草莓炭疽病是草莓生产上的重要病害之一，严重影响草莓的产量和品质。草莓炭疽病主要危害草莓匍匐茎、叶柄、叶片、也可危害托叶、根冠、花瓣、花萼和果实，染病后可导致局部病斑和圈住萎蔫枯死，影响农民的增收和草莓产业的可持续发展。草莓炭疽病是由半知菌亚门黑盘孢目黑盘孢科刺盘孢菌属(Colletotrichum spp)真菌引起的病害，目前研究报道的主要包括3种病原菌：草莓炭疽菌(Colletotrichum fragariae)、尖孢炭疽菌 (Colletotrichum acutatum)和胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)。随着深入研究，发现还有一些其他种的炭疽菌也能引起草莓炭疽病。在生产上，针对草莓炭疽病的防治多种多样，目前主要以化学药剂防治为主，但随着化学药剂的使用量加大，不仅影响草莓的口感和品质，还会破坏生态环境，加快土壤的盐渍化，对环境造成很大的负担。因此，研究生物防治势在必行，不仅可以防控病原菌的侵害，还能促进作物生长、提高作物品质和产量，从而减少化学药品的使用量，达到绿色农业发展的要求。

发明内容

基于此，本发明的目的在于，提供一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥及其制备方法和应用。

为达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥，由如下重量份组分组成：复合有益微生物菌发酵液30～35份，糖蜜8～10份，腐植酸4～8份、磷酸二氢钾5～7份、磷酸氢二钾6～8份、聚磷酸铵6～10份、硝酸钾12～15份、硝酸钙5～7份、硝酸镁2～5份、硝酸锌1～4 份、钼酸铵1～4份、螯合铁0.5～2份、螯合铜0.5～2份；所述复合有益微生物菌为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌。

本发明利用复合有益微生物菌，可以防治草莓炭疽病的发生。

其中，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)是一种广泛分布于大自然中的革兰氏阳性菌，将解淀粉芽孢杆菌施入土壤，能够降解土壤中一些有毒物质，净化被污染的土壤，解淀粉芽孢杆菌是典型的植物促生菌，能够分泌抗菌蛋白、抗生素、酶或多肽等活性物质，促进植物生长，防治植物真菌病害。

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)在生长过程中能代谢分泌细菌素(枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素等)、脂肽类化合物、有机酸类物质等。这些代谢物可有效的抑制病原菌的生长或溶解病原菌，以致杀死病菌，高抗重茬。它分泌的酶类有几丁质酶抗菌蛋白对多种植物病原真菌有强烈的抑制作用；并通过空间和营养成分的争夺，达到对致病菌的竞争性抑制作用。枯草芽孢杆菌可在病原菌的菌丝上伴随生长，分解消耗病原菌，致病菌菌丝发生断裂，防止致病菌进一步侵染植株。

固氮芽孢杆菌(Paenibacillus azotofixans)在生长过程中能代谢分泌的次生代谢物质，不仅能抑制土壤中有害病原菌的生长，同时能改良土壤结构，促进作物生长，在土壤中能够起到固氮、解磷、解钾的作用，提高肥料利用率，刺激作物生长。

多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)以芽孢形式存在，耐温性好，质量稳定，“以菌治菌”，药效持久；“药肥兼能”，不仅是防治青枯病、枯萎病、根腐病、软腐病等土传病害最理想的药剂，而且具有明显的促进生长、提高产量、改善品质的作用；无任何药害和残留，是无公害、绿色、有机蔬菜生产的首选微生物制剂。多粘芽孢杆菌产生的抗菌物质等有效成分，在根、茎、叶等植物体内具有很强的定殖能力，可通过位点竞争、诱导抗性的作用方式，阻止病原菌侵染植物，杀灭和控制病原菌，从而达到防治病害的目的；同时对初发病的土传病害和叶部病害具有一定的治疗作用。

通过使用上述复合有益微生物菌发酵液，同时复配糖蜜、腐殖酸、氮肥、磷肥、钾肥、微肥等营养元素形成复合微生物液体肥，不仅能防治草莓炭疽病的发生，还可以为草莓提供营养元素需求。上述四种菌复合微生物发酵液，能显著增强各菌株对病原菌的抑制的作用，达到抑制土壤中病原菌的繁殖，减少植物土传病害的发生的作用；复合微生物菌还可以调节植物根系生态环境，形成优势菌落，防止土传病虫害。复合微生物液体施加到土壤中，还可以平衡土壤pH值、改善土壤团粒结构、改良土壤，提高土壤蓄水、蓄能和地温，缓解重茬障碍；促使土壤中有机质分解成腐殖质，极大的提高土壤肥效，促进作物生长、成熟，能显著降低成本、增加常量，提高收入。还能增强草莓植株的光合作用，提高肥料利用率，降低硝酸盐含量，解除化肥、农药及有害因子对土壤的破坏，克服连作障碍。

进一步地，由如下重量份组分组成：复合有益微生物菌发酵液35份，糖蜜9份，腐植酸 8份、磷酸二氢钾6份、磷酸氢二钾8份、聚磷酸铵9份、硝酸钾12份、硝酸钙5份、硝酸镁4份、硝酸锌3份、钼酸铵2份、螯合铁2份、螯合铜1份；所述复合有益微生物菌为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌。

进一步地，所述复合有益微生物菌发酵液为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌分别进行液态发酵获得培养液后，按照各培养液体积1：1：1：1的比例混合制成。上述4种微生物菌发酵获得培养液后，通过等体积混合复配形成复合有益微生物菌发酵液。能显著增强各菌株对病原菌的抑制作用，抑制土壤中病原菌的繁殖，减少植物土传病害的发生。还可以调节植物根系生态环境，形成优势菌落，防止土传病虫害，解除化肥、农药及有害因子对土壤的破坏，克服连作障碍。

本发明的另一目的在于提供一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥的制备方法，包括如下步骤：

1)复合有益微生物菌发酵液的制备

将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌用常规LB培养基分别培养，按照甘油菌种、种子、液态发酵三级培养，培养温度37℃，培养时间12-16h，发酵密度达到10¹⁰cfu/ml以上；各菌株分别进行液态发酵获得培养液，然后，将各培养液按照1：1：1：1的比例等体积混合，复合成有益微生物菌发酵液；

2)复合微生物液体肥的制备

按照重量份数，将复合有益微生物菌发酵液和糖蜜搅拌混匀，然后加入腐植酸，直至腐植酸完全溶解，然后依次加入磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、聚磷酸铵、硝酸钾、硝酸钙、硝酸镁、硝酸锌、钼酸铵、螯合铁、螯合铜；每加入一份物料时，搅拌保证物料完全溶解之后，再加入下一物料，最后，直至全部物料完全溶解，即得到富含复合微生物及营养元素的液体肥。

本发明将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌分别通过培养基发酵，与其他真菌/霉菌发酵的菌剂相比，发酵时间较短，只需要12-16小时，发酵密度较大，可以达到10¹⁰cfu/ml以上。将高菌密度的上述发酵液与糖蜜、腐殖酸以及氮肥、磷肥、钾肥、微肥等营养元素复配混合制备出液体肥。施用于草莓植株，可以有效的防治草莓炭疽病。

本发明的再一目的在于提供一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥在防治草莓炭疽病以及改善土壤方面的应用。

将复合有益微生物液体肥施用在草莓植株上，可以抑制土壤中病原菌的繁殖，减少植物土传病害的发生，有效防治草莓炭疽病的发生。同时，还可以改良土壤，平衡土壤pH值、提高土壤蓄水、蓄能和地温，缓解重茬障碍。草莓重茬种植，会导致草莓的大面积发病及死颗，从而影响草莓的产量、草莓的品质及生长状况。本发明的复合有益微生物液体肥能促进草莓植株生长，增强草莓植株的抗病性，提高草莓的产量和品质。

为了更好地理解和实施，下面详细说明本发明。

具体实施方式

下面对本发明作进一步详细描述。

本发明提供一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥，按照重量份比例，由以下组分组成：复合有益微生物菌发酵液30～35份，糖蜜8～10份，腐植酸4～8份、磷酸二氢钾5～7 份、磷酸氢二钾6～8份、聚磷酸铵6～10份、硝酸钾12～15份、硝酸钙5～7份、硝酸镁2～5份、硝酸锌1～4份、钼酸铵1～4份、螯合铁0.5～2份、螯合铜0.5～2份。所述复合有益微生物菌发酵液为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌分别进行液态发酵获得培养液后，按照各培养液体积1：1：1：1的比例混合制成。

优选的，按照重量份比例，所述复合有益微生物菌发酵液35份，糖蜜9份，腐植酸8份、磷酸二氢钾6份、磷酸氢二钾8份、聚磷酸铵9份、硝酸钾12份、硝酸钙5份、硝酸镁4份、硝酸锌3份、钼酸铵2份、螯合铁2份、螯合铜1份。

下面通过具体实施例来说明本发明的一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥的制备方法。

实施例1

一、本实施例提供一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥的制备方法，包括如下步骤：

1)复合有益微生物菌发酵液的制备

将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌用常规LB培养基分别培养，按照甘油菌种、种子、液态发酵三级培养，培养温度37℃，培养时间12-16h，发酵密度达到10¹⁰cfu/ml以上；各菌株分别进行液态发酵获得培养液，然后，将各培养液按照1：1：1：1的比例等体积混合，复合成有益微生物菌发酵液；

2)复合微生物液体肥的制备

将上述复合有益微生物菌发酵液35份与糖蜜9份搅拌混匀，然后加入腐植酸8份，直至腐植酸完全溶解，然后依次按照比例加入磷酸二氢钾6份、磷酸氢二钾8份、聚磷酸铵9份、硝酸钾12份、硝酸钙5份、硝酸镁4份、硝酸锌3份、钼酸铵2份、螯合铁2份、螯合铜1 份。每加入一份物料时，搅拌保证物料完全溶解之后，再加入下一物料，最后，直至全部物料完全溶解，即得到富含复合微生物及营养元素的液体肥。

二、复合微生物液体肥对草莓炭疽病的田间防治实验

1、实验设计及复合有益微生物液体肥使用量

草莓田间种植示范试验在位于山东省济南市唐王镇的草莓种植大棚中进行，草莓品种为田宝，该大棚已连续3年种植草莓。试验组和对照组各0.1亩。

在草莓定植时，实验组用肥：每亩地腐熟有机肥1000kg、过磷酸钙50kg、复合肥50kg做基肥，冲施实施例1中的复合微生物液体肥10kg。对照组用肥：每亩地腐熟有机肥1000kg、过磷酸钙50kg、复合肥50kg做基肥，常规的营养元素同等比例的有机无机复混肥溶在水中冲施。

定植后每月施肥，试验组使用本发明的复合微生物液体肥10kg，滴灌冲施。对照组常规的营养元素同等比例的有机无机复混肥溶在水中冲施。

盛果期，15天施肥一次，试验组使用本发明的复合微生物液体肥10kg，滴灌冲施；对照组常规的营养元素同等比例的有机无机复混肥溶在水中冲施。

试验各设3次重复。

2、分析项目及方法

草莓重茬种植，会导致草莓的大面积发病及死颗，从而影响草莓的产量、草莓的品质及生长状况。因此，本研究主要调查菌剂对草莓发病率、死颗率、产量及草莓生长情况的调查。

发病率(％)＝100×(发病株数/调查株数)。

死亡率(％)＝100×(发病株数/调查株数)。

草莓的株高，每个实验组测量10株草莓的株高取平均数。

根的鲜重，取草莓的地下部分，用水冲洗干净，用吸水纸擦干表面水份后，称重。

果实成熟后，统计每个试验组的总产量。列表统计，记录在表格1。

每个试验组组随机采集200个果实，称量计算平均单果重，用手持糖度仪测量果实糖度，统计畸形果的百分率。记录在表格2。

3、结果分析

表1草莓炭疽病发病情况及生长调查统计表(三次重复的结果，或者表明是平均数)

表2草莓品质统计调查表

由表1和表2可以看出，施用复合微生物液体肥能显著降低草莓炭疽病的发病率、死颗率，有效的防治草莓炭疽病，有效的降低了重茬种植草莓发病率死亡率高的危害。从数据中还能看出，施用复合微生物液体肥处理组的草莓植株的株高、根系鲜重，单果重量以及草莓的甜度都具有很大的提升，而畸果率大大下降，可以看出，复合微生物液体肥还能有效的提高了草莓的产量和品质，降低了畸形果的比率。表明该复合微生物液体肥的使用可大大降低重茬种植草莓的发病率和死颗率，并显著的改善了重茬草莓导致的草莓产量下降和品质影响。具有很大的应用价值和经济及社会效益。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥，其特征在于，由如下重量份组分组成：复合有益微生物菌发酵液30～35份，糖蜜8～10份，腐植酸4～8份、磷酸二氢钾5～7份、磷酸氢二钾6～8份、聚磷酸铵6～10份、硝酸钾12～15份、硝酸钙5～7份、硝酸镁2～5份、硝酸锌1～4份、钼酸铵1～4份、螯合铁0.5～2份、螯合铜0.5～2份；所述复合有益微生物菌为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌。

2.根据权利要求1所述的一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥，其特征在于：由如下重量份组分组成：复合有益微生物菌发酵液35份，糖蜜9份，腐植酸8份、磷酸二氢钾6份、磷酸氢二钾8份、聚磷酸铵9份、硝酸钾12份、硝酸钙5份、硝酸镁4份、硝酸锌3份、钼酸铵2份、螯合铁2份、螯合铜1份；所述复合有益微生物菌为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌。

3.根据权利要求1所述的一种防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥，其特征在于：所述复合有益微生物菌发酵液为解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌分别进行液态发酵获得培养液后，按照各培养液体积1：1：1：1的比例混合制成。

4.一种如权利要求1所述的防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥的制备方法，其特征在于：包括如下步骤，

1)复合有益微生物菌发酵液的制备

将解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、固氮芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌用常规LB培养基分别培养，按照甘油菌种、种子、液态发酵三级培养，培养温度37℃，培养时间12-16h，发酵密度达到10¹⁰cfu/ml以上；各菌株分别进行液态发酵获得培养液，然后，将各培养液按照1：1：1：1的比例等体积混合，复合成有益微生物菌发酵液；

2)复合微生物液体肥的制备

按照重量份数，将复合有益微生物菌发酵液和糖蜜搅拌混匀，然后加入腐植酸，直至腐植酸完全溶解，然后依次加入磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、聚磷酸铵、硝酸钾、硝酸钙、硝酸镁、硝酸锌、钼酸铵、螯合铁、螯合铜；每加入一份物料时，搅拌保证物料完全溶解之后，再加入下一物料，最后，直至全部物料完全溶解，即得到富含复合微生物及营养元素的液体肥。

5.一种如权利要求1所述的防治草莓炭疽病的复合微生物液体肥在防治草莓炭疽病以及改善土壤方面的应用。