CN113234863A - 一种特异性识别免疫分型为hlaa11的ebv病毒肽段的tcr引物组及其应用 - Google Patents

一种特异性识别免疫分型为hlaa11的ebv病毒肽段的tcr引物组及其应用 Download PDF

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ebv virus
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邓大川
周杰
吴海阳
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/70—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving virus or bacteriophage
    • C12Q1/701—Specific hybridization probes
    • C12Q1/705—Specific hybridization probes for herpetoviridae, e.g. herpes simplex, varicella zoster
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
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    • C12Q1/6851—Quantitative amplification

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Abstract

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种特异性识别免疫分型为HLAA11的EBV病毒肽段的TCR引物组及其应用。本申请的引物组是根据HLAA11分型，EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR设计的包括位点为L11‑3、L11‑6和L11‑15TCR引物对中的一种或几种。本申请的引物序列如SEQIDNO.1～6所示。本申请的引物组能特异性的识别HLAA11分型患者体内EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR。为追踪监测患者体内TCR‑T细胞药物提供依据。

Description

一种特异性识别免疫分型为HLAA11的EBV病毒肽段的TCR引物 组及其应用
技术领域
本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种特异性识别免疫分型为 HLAA11的EBV病毒肽段的TCR引物组及其应用。
背景技术
EBV是可以感染人类的疱疹病毒家族的一员。EBV感染与某些类型的癌症有关。这些因EBV病毒感染所导致的癌症患者有望在TCR-T细胞治疗中获益。
TCR-T细胞治疗是有望治疗实体肿瘤的新一代免疫细胞疗法。在TCR-T 细胞治疗的过程中，需要不断监测被输注到病人体内的药用TCR-T细胞的生长和续存的情况。能实现此目的技术手段中，荧光定量PCR(qPCR)是检测灵敏度很高的技术手段。利用qPCR监测TCR-T细胞，需要针对TCR-T细胞的特定TCR基因序列设计qPCR引物。
我公司克隆到了15条针对免疫分型为HLAA11的病人体内的EBV病毒蛋白肽段的SSCSSCPLSK表位点的TCR，并对这15条TCR的基因序列申请了专利保护。但是现有技术中尚没有针对这15条TCR基因序列所设计的，能够监控TCR-T细胞在病人体内生长和续存状况的qPCR引物。
发明内容
针对现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种特异灵敏的追踪 TCR-T细胞药物的引物组，尤其涉及一种特异性识别免疫分型为HLAA11 的EBV病毒肽段的TCR引物组及其应用。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种TCR引物组，包括位点为L11-3、L11-6和L11-15 TCR 引物对中的一种或几种。
作为优选，所述引物组依据HLAA11分型，EBV病毒抗原肽段 SSCSSCPLSK的TCR设计。
作为优选，位点为L11-3的TCR引物对的序列如SEQ ID NO.1～2所示；
位点为L11-6的TCR引物对的序列如SEQ ID NO.3～4所示；
位点为L11-15的TCR引物对的序列如SEQ ID NO.5～6所示。
本发明还提供了所述的引物组在制备特异性检测HLAA11分型患者体内EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR产品中的应用。
作为优选，所述产品为试剂盒产品。
作为优选，所述试剂盒为荧光定量PCR试剂盒。
本发明提供了一种特异性识别免疫分型为HLAA11的EBV病毒肽段的 TCR引物组及其应用，本申请的引物组是根据HLAA11分型，EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR设计的。将本申请的引物组制备成荧光定量 PCR试剂盒，追踪患者体内TCR-T细胞药物时，能特异的检测到药物的灵敏度为10个拷贝数的基因片段。
附图说明
图1为L11-3位点质粒DNA标准品的扩增曲线(从左到右质粒DNA标准品的稀释度分别为108拷贝、107拷贝、106拷贝、105拷贝、104拷贝、103拷贝、102拷贝、101拷贝的基因片段)。
图2为L11-3位点质粒DNA标准品扩增产物的电泳图(从左到右质粒 DNA标准品的稀释度分别108拷贝、107拷贝、106拷贝、105拷贝、104拷贝、 103拷贝、102拷贝、101拷贝的基因片段)。
图3为L11-3位点质粒DNA标准品的标准曲线图。
图4为L11-3位点的TCR-T细胞药的基因组DNA的扩增曲线(从左到右基因组DNA的稀释度分别为原液、10倍稀释、100倍稀释、1000倍稀释、 10000倍稀释)。
图5为L11-3位点的TCR-T细胞药的基因组DNA扩增产物的电泳图 (从左到右基因组DNA的稀释度分别为原液、10倍稀释、100倍稀释、1000 倍稀释、10000倍稀释)。
具体实施方式
本发明实施例中所述的TCR质粒标准品的构建方法为：
(1)将每个位点对应的TCR基因片段克隆至SEQ ID NO.7所示的质粒载体中，得到含有特定TCR基因片段的质粒载体；
(2)将含有特定TCR基因片段的质粒载体在大肠杆菌内扩增，提纯质粒DNA，得到相应位点的TCR质粒标准品。
在本发明实施例中以L11-3位点为例设计方案，其余位点的检测方法与之相同。
在本发明实施例中所述的TCR-T细胞药的基因组DNA为从相应的 TCR-T药物细胞中提取的基因组DNA。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1引物设计
根据HLAA11分型，EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的L11-3、L11-6 和L11-15位点设计TCR引物对。得到的引物序列如SEQ ID NO.1～6所示。
实施例2标准曲线建立
以TCR的L11-3位点为例设计方案。
取L11-3位点的质粒DNA标准品的108个拷贝数稀释液、107个拷贝数稀释液、106个拷贝数稀释液、105个拷贝数稀释液、104个拷贝数稀释液、 103个拷贝数稀释液、102个拷贝数稀释液、101个拷贝数稀释液，按照下述的反应体系和反应程序设置实时荧光PCR。
反应体系：PCR预混液10μl；正向引物0.4μl，引物浓度：10μm/μl；反向引物0.4μl，引物浓度：10μm/μl；ROX Reference Dye(50×)0.2μl；TCR-T 细胞药的基因组DNA 2μl，浓度50ng/μl，或TCR的质粒标准品DNA 2μl； Nuclease-Free Water 7μl；总反应体系共20μl。
PCR反应程序：95℃，30s；(95℃，5s；60℃，20s)40个循环。设置参比荧光为ROX，选择反应类型为SYBR Green Reagents，选择荧光检测通道SYBR，设置在60℃时采集荧光信号。
经实时荧光PCR扩增得到的L11-3位点质粒DNA标准品的扩增曲线如图1所示。
将每个稀释度的质粒DNA标准品的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如图2所示。
以扩增曲线的Ct值为纵坐标，质粒DNA标准品的log以10为底的基因片段拷贝数为横坐标建立标准曲线，标准曲线的结果如图3所示。计算公式为：y＝-3.6592x+40.382(R2＝0.983)。
由于计算公式中的R2≥0.95，则证明本实施例的标准曲线有效。
实施例3灵敏度检测
将针对L11-3位点的TCR-T细胞药的基因组DNA原液、10倍稀释液、 100倍稀释液、1000倍稀释液、10000倍稀释液，根据实施例2实时荧光PCR 的反应体系和程序进行扩增。得到针对L11-3位点的TCR-T细胞药的基因组 DNA的扩增曲线如图4所示。将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，结果如图5 所示。
将得到的每个稀释度的TCR-T细胞药的基因组DNA的Ct值代到实施例2的标准曲线中，可以计算得到每个稀释度的TCR-T细胞药的基因组DNA 的拷贝数。
经过计算，针对L11-3位点的TCR-T细胞药基因组DNA原液的拷贝数为43386个拷贝，10倍稀释液的拷贝数为3029个拷贝、100倍稀释液的拷贝数为258个拷贝、1000倍稀释液的拷贝数为20个拷贝、10000倍稀释液的拷贝数为5个拷贝。由此可以得出，本实施例1得到的引物对于检测L11-3 位点的TCR-T细胞药的最低检测限能达到5个拷贝，但是由于标准曲线的最低值为10，因此灵敏度设置为10个拷贝。
将其余位点的引物按照本实施例3的灵敏度的检测方法检测相对应位点的TCR-T细胞药，均能检测得到5个拷贝的基因片段，但由于标准曲线的最低值为10，因此将灵敏度设置为10个拷贝。
由以上实施例可知，本发明提供了一种特异性识别免疫分型为HLAA11 的EBV病毒肽段的TCR引物组及其应用，本申请的引物组是根据HLAA11 分型，EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR设计的。将本申请的引物组制备成荧光定量PCR试剂盒，追踪患者体内TCR-T细胞药物时，能特异的检测到药物的灵敏度为10个拷贝的基因片段。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
序列表
<110> 重庆天科雅生物科技有限公司
<120> 一种特异性识别免疫分型为HLA A11的EBV病毒肽段的TCR引物组及其应用
<160> 7
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
gatagctgga ccctgtgctg 20
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
ccaggcctct catcatggtc 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
cgtgtccctg tgtatcctgg 20
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
ccaggcctct catcatggtc 20
<210> 5
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
ggccttctgg tgcaatcct 19
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
aggctggatc ttcagtgtgc 20
<210> 7
<211> 7296
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
tggtagctct tgatccggca aacaaaccac cgctggtagc ggtggttttt ttgtttgcaa 60
gcagcagatt acgcgcagaa aaaaaggatc tcaagaagat cctttgatct tttctacggg 120
gtctgacgct cagtggaacg aaaactcacg ttaagggatt ttggtcatga gattatcaaa 180
aaggatcttc acctagatcc ttttaaatta aaaatgaagt tttaaatcaa tctaaagtat 240
atatgagtaa acttggtctg acagttacca atgcttaatc agtgaggcac ctatctcagc 300
gatctgtcta tttcgttcat ccatagttgc ctgactcccc gtcgtgtaga taactacgat 360
acgggagggc ttaccatctg gccccagtgc tgcaatgata ccgcgagacc cacgctcacc 420
ggctccagat ttatcagcaa taaaccagcc agccggaagg gccgagcgca gaagtggtcc 480
tgcaacttta tccgcctcca tccagtctat taattgttgc cgggaagcta gagtaagtag 540
ttcgccagtt aatagtttgc gcaacgttgt tgccattgct acaggcatcg tggtgtcacg 600
ctcgtcgttt ggtatggctt cattcagctc cggttcccaa cgatcaaggc gagttacatg 660
atcccccatg ttgtgcaaaa aagcggttag ctccttcggt cctccgatcg ttgtcagaag 720
taagttggcc gcagtgttat cactcatggt tatggcagca ctgcataatt ctcttactgt 780
catgccatcc gtaagatgct tttctgtgac tggtgagtac tcaaccaagt cattctgaga 840
atagtgtatg cggcgaccga gttgctcttg cccggcgtca atacgggata ataccgcgcc 900
acatagcaga actttaaaag tgctcatcat tggaaaacgt tcttcggggc gaaaactctc 960
aaggatctta ccgctgttga gatccagttc gatgtaaccc actcgtgcac ccaactgatc 1020
ttcagcatct tttactttca ccagcgtttc tgggtgagca aaaacaggaa ggcaaaatgc 1080
cgcaaaaaag ggaataaggg cgacacggaa atgttgaata ctcatactct tcctttttca 1140
atattattga agcatttatc agggttattg tctcatgagc ggatacatat ttgaatgtat 1200
ttagaaaaat aaacaaatag gggttccgcg cacatttccc cgaaaagtgc cacctgacgt 1260
ctaagaaacc attattatca tgacattaac ctataaaaat aggcgtatca cgaggccctt 1320
tcgtctcgcg cgtttcggtg atgacggtga aaacctctga cacatgcagc tcccggagac 1380
ggtcacagct tgtctgtaag cggatgccgg gagcagacaa gcccgtcagg gcgcgtcagc 1440
gggtgttggc gggtgtcggg gctggcttaa ctatgcggca tcagagcaga ttgtactgag 1500
agtgcaccat atgcggtgtg aaataccgca cagatgcgta aggagaaaat accgcatcag 1560
gcgccattcg ccattcaggc tgcgcaactg ttgggaaggg cgatcggtgc gggcctcttc 1620
gctattacgc cagctggcga aagggggatg tgctgcaagg cgattaagtt gggtaacgcc 1680
agggttttcc cagtcacgac gttgtaaaac gacggccagt gaattagtac tctagcttaa 1740
gtaacgccat tttgcaaggc atggaaaata cataactgag aatagagaag ttcagatcaa 1800
ggttaggaac agagagacag cagaatatgg gccaaacagg atatctgtgg taagcagttc 1860
ctgccccggc tcagggccaa gaacagttgg aacagcagaa tatgggccaa acaggatatc 1920
tgtggtaagc agttcctgcc ccggctcagg gccaagaaca gatggtcccc agatgcggtc 1980
ccgccctcag cagtttctag agaaccatca gatgtttcca gggtgcccca aggacctgaa 2040
atgaccctgt gccttatttg aactaaccaa tcagttcgct tctcgcttct gttcgcgcgc 2100
ttctgctccc cgagctcaat aaaagagccc acaacccctc actcggcgcg ccagtcctcc 2160
gatagactgc gtcgcccggg tacccgtatt cccaataaag cctcttgctg tttgcatccg 2220
aatcgtggac tcgctgatcc ttgggagggt ctcctcagat tgattgactg cccacctcgg 2280
gggtctttca tttggaggtt ccaccgagat ttggagaccc ctgcccaggg accaccgacc 2340
cccccgccgg gaggtaagct ggccagcggt cgtttcgtgt ctgtctctgt ctttgtgcgt 2400
gtttgtgccg gcatctaatg tttgcgcctg cgtctgtact agttggctaa ctagatctgt 2460
atctggcggt cccgcggaag aactgacgag ttcgtattcc cggccgcagc ccctgggaga 2520
cgtcccagcg gcctcggggg cccgttttgt ggcccattct gtatcagtta acctacccga 2580
gtcggacttt ttggagctcc gccactgtcc gaggggtacg tggctttgtt gggggacgag 2640
agacagagac acttcccgcc cccgtctgaa tttttgcttt cggttttacg ccgaaaccgc 2700
gccgcgcgtc ttgtctgctg cagcatcgtt ctgtgttgtc tctgtctgac tgtgtttctg 2760
tatttgtctg aaaattagct cgacaaagtt aagtaatagt ccctctctcc aagctcactt 2820
acaggcggcc gcgccaccat ggccacaggc agcagaacat ctctgctgct ggccttcgga 2880
ctgctgtgtc tgccttggct gcaagaagcc agcgcttctc agcagggcga agaggatcca 2940
caggctctgt ctatccaaga gggcgagaac gccaccatga actgcagcta caagaccagc 3000
atcaacaacc tgcagtggta cagacagaac agcggcagag gactggtgca cctgatcctg 3060
atcagaagca acgagagaga gaagcactcc ggcagactga gagtgaccct ggacaccagc 3120
aagaagtcct ccagcctgct gatcacagcc agcagagccg ccgataccgc cagctacttt 3180
tgtgccacaa caggcgacag cggctacagc accctgacat ttggcaaggg caccatgctg 3240
ctcgtgtccc cagacattca gaatcccgaa cccgccgtgt accagctgaa ggaccctagg 3300
agccaggact ctaccctctg cctgttcacc gacttcgaca gccagatcaa cgtgcccaag 3360
acaatggaga gcggcacctt catcaccgac aagaccgtgc tggacatgaa ggctatggac 3420
agcaagagca acggagccat cgcttggagc aaccagacca gcttcacttg ccaggacatc 3480
ttcaaggaga ccaacgcttg ctacccctct agcgacgtgc cttgcgacgc cacactgaca 3540
gagaagagct tcgagaccga catgaacctg aacttccaga acctgagcgt gatgggcctg 3600
agaatcctgc tgctgaaggt ggccggattc aacctgctga tgaccctgag gctgtggtct 3660
tcccgagcta aacgaggctc aggcgcgacg aactttagtt tgctgaagca agctggtgac 3720
gttgaggaaa atccgggacc catggccaca ggcagcagaa catctctgct gctggccttc 3780
ggactgctgt gcctgccttg tctgcaagag ggatctgcca atgccggcgt gacccagaca 3840
cctaagttcc aggtgctgaa aaccggccag agcatgaccc tgcagtgcgc ccaggatatg 3900
aaccacgagt acatgagctg gtacagacag gaccctggca tgggcctgag actgatccac 3960
tattctgtcg gagccggcat caccgaccag ggcgaagttc ctaatggcta caacgtgtcc 4020
agaagcacca ccgaggactt cccactgaga ctgctgtctg ccgctcctag ccagaccagc 4080
gtgtacttct gtgccagcac aaggcaaggc ggcaacgagc agtttttcgg ccctggcaca 4140
agactgaccg tgctggagga cctacgtaac gtgacccctc ccaaggtgtc cctgttcgag 4200
cctagcaagg ccgagatcgc caacaagcag aaggccacac tcgtctgcct ggctagaggc 4260
ttcttcccag accacgtgga gctgtcttgg tgggtgaacg gcaaggaggt gcactcagga 4320
gtgtctaccg accctcaggc ctacaaggag agcaactaca gctactgcct gtcctccaga 4380
ctcagggtct gcgccacctt ttggcacaac cctcggaacc acttccgctg tcaggtccag 4440
ttccacggcc tgtccgagga agacaagtgg ccagagggct ctcctaagcc agtgacacag 4500
aacatcagcg ccgaggcttg gggaagagcc gattgcggaa tcaccagcgc ctcttaccag 4560
cagggagtgc tgtcagctac catcctgtac gagatcctgc tgggcaaggc cacactgtac 4620
gcagtgctgg tgtccactct ggtcgtgatg gctatggtga agcggaagaa cagctaggaa 4680
ttcgagcatc ttaccgccat ttattcccat atttgttctg tttttcttga tttgggtata 4740
catttaaatg ttaataaaac aaaatggtgg ggcaatcatt tacattttat gggatatgta 4800
attactagtt caggtgtatt gccacaagac aaacatgtta agaaactttc ccgttattta 4860
cgctctgttc ctgttaatca acctctggat tacaaaattt gtgaaagatt gactgatatt 4920
cttaactatg ttgctccttt tacgctgtgt ggatatgctg ctttaatgcc tctgtatcat 4980
gctattgctt cccgtacggc tttcgttttc tcctccttgt ataaatcctg gttgctgtct 5040
ctttatgagg agttgtggcc cgttgtccgt caacgtggcg tggtgtgctc tgtgtttgct 5100
gacgcaaccc ccactggctg gggcattgcc accacctgtc aactcctttc tgggactttc 5160
gctttccccc tcccgatcgc cacggcagaa ctcatcgccg cctgccttgc ccgctgctgg 5220
acaggggcta ggttgctggg cactgataat tccgtggtgt tgtcggggaa gctgacgtcc 5280
tttccatggc tgctcgcctg tgttgccaac tggatcctgc gcgggacgtc cttctgctac 5340
gtcccttcgg ctctcaatcc agcggacctc ccttcccgag gccttctgcc ggttctgcgg 5400
cctctcccgc gtcttcgctt tcggcctccg acgagtcgga tctccctttg ggccgcctcc 5460
ccgcctgttt cgcctcggcg tccggtccgt gttgcttggt cgtcacctgt gcagaattgc 5520
gaaccatgga ttccaccgtg aactttgtct cctggcatgc aaatcgtcaa cttggcatgc 5580
caagaataat tcggatccaa gcttaggcct gctcgctttc ttgctgtccc atttctatta 5640
aaggttcctt tgttccctaa gtccaactac taaactgggg gatattatga agggccttga 5700
gcatctggat tctgcctagc gctaagctta acacgagcca tagatagaat aaaagatttt 5760
atttagtctc cagaaaaagg ggggaatgaa agaccccacc tgtaggtttg gcaagctagc 5820
ttaagtaacg ccattttgca aggcatggaa aatacataac tgagaataga gaagttcaga 5880
tcaaggttag gaacagagag acagcagaat atgggccaaa caggatatct gtggtaagca 5940
gttcctgccc cggctcaggg ccaagaacag ttggaacagc agaatatggg ccaaacagga 6000
tatctgtggt aagcagttcc tgccccggct cagggccaag aacagatggt ccccagatgc 6060
ggtcccgccc tcagcagttt ctagagaacc atcagatgtt tccagggtgc cccaaggacc 6120
tgaaatgacc ctgtgcctta tttgaactaa ccaatcagtt cgcttctcgc ttctgttcgc 6180
gcgcttctgc tccccgagct caataaaaga gcccacaacc cctcactcgg cgcgccagtc 6240
ctccgataga ctgcgtcgcc cgggtacccg tgttctcaat aaaccctctt gcagttgcat 6300
ccgactcgtg gtctcgctgt tccttgggag ggtctcctct gagtgattga ctgcccacct 6360
cgggggtctt tcattctcga gcagcttggc gtaatcatgg tcatagctgt ttcctgtgtg 6420
aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa catacgagcc ggaagcataa agtgtaaagc 6480
ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt 6540
ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg 6600
cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt 6660
tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta atacggttat ccacagaatc 6720
aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa 6780
aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa 6840
tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc 6900
ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc 6960
cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag 7020
ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga 7080
ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc 7140
gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac 7200
agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga agaacagtat ttggtatctg 7260
cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagt 7296

Claims (6)

1.一种TCR引物组，其特征在于，包括位点为L11-3、L11-6和L11-15TCR引物对中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的引物组，其特征在于，所述引物组依据HLAA11分型，EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR设计。
3.根据权利要求1或2所述的引物组，其特征在于，位点为L11-3的TCR引物对的序列如SEQ ID NO.1～2所示；
位点为L11-6的TCR引物对的序列如SEQ ID NO.3～4所示；
位点为L11-15的TCR引物对的序列如SEQ ID NO.5～6所示。
4.权利要求1～3任意一项所述的引物组在制备特异性检测HLAA11分型患者体内EBV病毒抗原肽段SSCSSCPLSK的TCR产品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述产品为试剂盒产品。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述试剂盒为荧光定量PCR试剂盒。
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