CN113226510A - 用于哺乳动物细胞培养灌注和澄清的疏水中空纤维过滤器 - Google Patents

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Abstract

本公开涉及疏水中空纤维过滤器用于过滤细胞培养物和其他生物灌注物的用途，因为其抗结垢性以及过滤高固体含量的溶液的能力。疏水中空纤维过滤器可以结合过程容器和传统分离系统在过滤器壳体内使用。当通过交替切向流或切向流过滤使用系统时，疏水中空纤维过滤器导致滤液的更有效过滤，从而导致更高的截留物浓度，甚至在含有高水平固体的溶液中也是如此。

Description

用于哺乳动物细胞培养灌注和澄清的疏水中空纤维过滤器
优先权
本申请要求于2018年12月31日提交的题目为“Filer For Mammalian CellCulture Perfusion And Clarification With Polypropylene Hollow Fiber”的美国专利申请No.62/786.844的优先权的权益，并要求于2019年5月13日提交的题目为“Filer ForMammalian Cell Culture Perfusion And Clarification With Polypropylene HollowFiber”的美国专利申请No.62/846,934的优先权的权益，这两个申请通过引用整体并入本文。
技术领域
本公开的实施方案总体上涉及过程过滤系统，更具体地涉及利用疏水中空纤维膜的系统。
背景技术
过滤用于分离、澄清、改性和/或浓缩流体溶液、混合物或悬浮液。它通常是生物技术、制药和医疗行业在药物、诊断和化学品的生产、加工和分析阶段的必要步骤。例如，过滤可用于从溶液中移除所需的化合物，或去除副产物，留下更浓缩的介质。这些过程可以通过选择各种过滤材料、孔径和/或其他过滤变量来适当修改。
当生产细胞培养物时，通常需要过滤正在发育的培养物中的废物。生物制造工艺的进步现在允许大规模生产细胞培养物，使得能够生产重组蛋白、病毒样颗粒(VLP)、基因治疗颗粒和疫苗，通常使用过程容器(process vessel)装置。去除代谢废物并用额外的营养物更新培养物的细胞保留装置广泛可用。通常，这种保留用利用切向流或交替切向流过滤的中空纤维膜使用过程容器培养物的灌注来进行。
此外，行业趋势表明，生物处理操作正在延长或甚至连续化。这种操作可能延长为数天、数周或数月的操作。许多典型的部件，例如过滤器，不能在不结垢或需要维护或更换的情况下充分运行如此长的时间。
中空纤维膜通常用于细胞培养物灌注和澄清，但它们在这些应用中的使用可能因细胞碎片使膜结垢的可能性而变得复杂。反过来，结垢可能导致膜保留预期的产品而不是使其穿过。中空纤维膜通常由聚醚砜(PES)、聚砜、纤维素和其他能够在膜内产生孔的材料制成。这些孔通常在0.2μm至0.65μm之间。由于其防止细胞碎片附着的阴离子增压性质，PES传统上用于生物处理应用。然而，持续需要改进的膜，该膜能够抗结垢并同时允许过滤高固体含量的溶液。
聚丙烯(PP)是已普遍用于工业过滤的疏水材料。已知由于分子和PES膜之间的极性相互作用，与PES膜相比，某些分子不太可能吸附到PP膜上。具体地，发现多酚、多糖和单宁对PP膜的吸附水平比对PES膜的低得多。虽然聚丙烯(PP)已经用于制造中空纤维膜，但这些膜通常不用于生物技术灌注，因为它们的极端疏水性并且据信它们将有助于肽生物制剂的变性。
发明内容
在此已经发现聚丙烯适用于过滤细胞培养物和其他生物灌注物，这是因为其抗结垢性以及过滤高固体含量的溶液的能力。PP中空纤维过滤器(例如由Membrana制造的过滤器)可以结合过程容器和传统分离系统在过滤器壳体内使用。当通过交替切向流或切向流过滤使用系统时，PP中空纤维过滤器导致滤液的更有效过滤，从而导致更高的截留物浓度，甚至在含有高水平固体的溶液中也是如此。不希望受任何理论的束缚，在一些情况下，至少部分地通过管状收缩效应减少结垢，这通过在过滤过程中为过滤通量选择合适的内部纤维直径来实现。例如，该PP中空纤维过滤器可以用于N-1灌注。
一方面，本公开描述了一种用于灌注细胞培养的预润湿的一次性中空纤维过滤器。该过滤器可以用醇预润湿并且可以储存在缓冲溶液中。
在一个实施方案中，过滤器可以包括过滤器壳体，该过滤器壳体包括：入口；截留物出口；渗透物出口；至少一个疏水中空纤维，其在所述入口和截留物出口之间延伸，从而将渗透物出口与截留物出口和所述入口流体分离；和灌封材料，其将疏水中空纤维连接至过滤器壳体，并将所述入口和截留物出口中的至少一个相对于渗透物出口密封。
在一些实施方案中，疏水中空纤维可以包含多个孔。这些孔的直径可以为0.05um至2.0um。疏水中空纤维的表面积可以为10cm2至90cm2。疏水中空纤维的内径可以为0.2mm至5.0mm。疏水中空纤维的壁厚可以为50um至500um。疏水中空纤维可以包含聚烯烃或含氟聚合物。聚烯烃可以是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
一方面，本公开描述了一种灌注细胞培养的方法。该方法可以包括将细胞培养液循环通过疏水中空纤维过滤器，从而将细胞培养液分离成滤液和截留物，和将截留物返回至生物反应器。
在一些实施方案中，灌注细胞培养可以选自由以下组成的组：n-1培养和培养基交换，其中在任一种情况下都不保留滤液。灌注细胞培养可以选自由以下组成的组：高生产率收获、浓缩补料分批培养或连续灌注，其中在每种情况下，滤液都包含感兴趣的生物产品并被保留。细胞培养可以是哺乳动物细胞培养、酵母细胞培养、原核细胞培养或昆虫细胞培养。细胞培养的循环可以通过交替切向流进行。细胞培养的循环可以通过切向流过滤进行。细胞培养液的循环可以在1、2、3、4、5、10、15、20、22.5、25、30l/m2·h的过滤器通量下进行。分离系统可以含有以下中的一种或多种：通过蠕动泵头的蠕动泵管、磁悬浮泵、ATF泵和其他正排量一次性泵。该方法可以进行10、20、30、40、50天。疏水中空纤维可以包含聚烯烃或含氟聚合物。聚烯烃可以是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
一方面，本公开描述了一种组装灌注培养系统的方法。该方法可以包括将预润湿的疏水中空纤维过滤器置于灌注培养系统的过滤器壳体中，和任选地，将过滤器壳体的渗透物出口连接到渗透物收集容器，其中：(a)灌注培养系统包括过程容器、将过程容器内部流体连接到过滤器壳体内部以限定过滤器进料通道的第一导管、和任选地将过滤器壳体内部连接到过程容器并限定截留物通道的第二导管，并且(b)在置于过滤器壳体内之前，疏水中空纤维过滤器用包含醇的溶液预润湿并储存在缓冲水溶液中。
在一些实施方案中，过滤器壳体还可以包括用于滤出物的出口，该出口通过中空纤维疏水过滤器与进料和截留物通道流体分离。细胞培养液的循环可以在1、2、3、4、5、10、15、20、22.5、25、30l/m2·h的过滤通量下进行。疏水中空纤维可以包含聚烯烃或含氟聚合物。聚烯烃可以是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
一方面，本公开描述了一种灌注细胞培养的方法。该方法可以包括使细胞培养基切向通过疏水过滤器，以降低细胞培养基的第一组分的浓度，其中第一组分不包含重组肽、核酸或病毒衣壳。
在一些实施方案中，该方法可以进行10、20、30、40、50天。细胞培养液的循环可以在1、2、3、4、5、10、15、20、22.5、25、30l/m2·h的过滤通量下进行。疏水中空纤维可以包含聚烯烃或含氟聚合物。聚烯烃可以是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
一方面，本公开描述了一种过滤流体的方法。该方法可以包括使流体通过疏水中空纤维过滤器系统，使得流体以非层流方式流过疏水中空纤维过滤器，并使得流体被分离成截留物和渗透物。
在一个实施方案中，系统的进料速度与疏水中空纤维过滤器的内径的乘积可以大于2500mm2s-1。表征进入过滤器中的流体流动的雷诺数可以大于2000、2300、2500、3000、3500或4000。疏水中空纤维可以包含聚烯烃或含氟聚合物。聚烯烃可以是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
在一方面，本公开描述了一种过滤流体的方法。该方法可以包括在进料速度比流体的运动粘度与中空纤维过滤器直径的商大2000、2300、2500、3000、3500或4000倍的条件下，使流体通过中空纤维过滤器。
在一个实施方案中，通过疏水中空纤维过滤器的流动方向可以是交替的。该方法可以进一步包括收集过滤器渗透物的步骤。疏水中空纤维过滤器可以保留非期望物质。保留的非期望物质可以选自由以下组成的组：哺乳动物细胞来源的物质；微生物细胞来源的物质；病毒来源的物质；蛋白质；核酸；多糖；或任何前述物质的复合物。期望的物质可以穿过疏水中空纤维过滤器进入渗透物。期望的物质可以选自由以下组成的组：哺乳动物细胞来源的物质；微生物细胞来源的物质；病毒来源的物质；蛋白质；核酸；多糖；病毒；微载体；颗粒；或任何前述物质的复合物。组合物可以包括根据本公开中描述的方法收集的渗透物。组合物中期望的物质的浓度可以比流体中期望的物质的浓度大至少10x、20x、40x、50x、75x或100x。非期望物质的浓度可以比流体中非期望物质的浓度小至少10x、20x、40x、50x、75x或100x。该方法可以进一步包括从流体中移除渗透物的步骤，从而增加由疏水中空纤维过滤器保留的期望物质的浓度，其中所述期望物质的浓度增加了5X、10X、20X、40X、50X、75X或100X。期望的物质可以选自由以下组成的组：哺乳动物细胞来源的物质；微生物细胞来源的物质；病毒来源的物质；蛋白质；核酸；多糖；病毒；微载体；颗粒；或任何前述物质的复合物。
附图说明
图1A.在本公开的各种实施方案中使用的用于澄清细胞培养物的示例性系统。
图1B.在本公开的各种实施方案中使用的用于澄清细胞培养物的示例性系统。
图2A和2B.数据示出了在切向流(TF)模式下使用各种过滤器进行的IgG抗体的澄清。
图3.数据示出了在TF下在15和22.5LMH下使用聚丙烯和PES过滤器进行的IgG抗体的澄清。
具体实施方式
综述
不希望受任何理论的束缚，疏水中空纤维过滤器系统中实现的过滤过程不同于发生在常规使用的PES中空纤维切向流过滤膜中的过滤过程，在PES中空纤维切向流过滤膜的过滤过程中，中等尺寸颗粒可能积聚在壁的内表面，导致凝胶层或滤饼的形成和过滤器的结垢。
以下公开集中于疏水中空纤维过滤器，其可以包括但不限于聚烯烃，例如聚丙烯和聚乙烯。以下公开集中于聚丙烯，然而本领域技术人员将认识到，除非另有说明，否则可以使用任何类似的聚烯烃。
在此已经发现聚丙烯(PP)适用于过滤细胞培养物和其他生物灌注物，因为其抗结垢性以及过滤高固体含量的溶液的能力。这些性能特征可以有利于许多生物处理应用；本公开集中于连续灌注细胞培养和切向流过滤。在为这些应用设计的示例性系统中，切向流PP中空纤维过滤器元件设置在过滤器壳体内，以限定被过滤器元件彼此分开的进料/截留物流体通道和渗透物(也称为滤液)流体通道。进料/截留物流体通道反过来通过过程容器和过滤器壳体的入口(对应于流体进料)之间的流体耦合以及任选地过滤器壳体的出口(对应于截留物)和过程容器之间的回流耦合与生物反应器或其它过程容器流体连通。根据本公开的使用PP中空纤维过滤器元件的灌注培养系统，可以提供更有效的滤液过滤，减少结垢，导致更高的截留物浓度，甚至在含有高固体水平的溶液中也是如此。
中空纤维过滤器系统由多个过滤器参数和操作变量表征。过滤器参数包括中空纤维内径(d)、中空纤维长度(l)、中空纤维横截面积(A)和过滤器中的中空纤维单元的数目(N)。操作变量包括进料流速率(QF)、运动粘度(μ)、每个中空纤维的进料速度(VF)、剪切速率(γ)和雷诺数(Re)。过滤器参数与操作变量之间的关系如表1所示：
表1：过滤器参数与操作变量的关系
中空纤维横截面积(A)
Figure BDA0003135572420000061
每个中空纤维的进料速度(VF)
Figure BDA0003135572420000062
剪切速率(γ)
Figure BDA0003135572420000063
雷诺数(Re)
Figure BDA0003135572420000064
雷诺数是流体流动行为的预测。当应用于管状系统中的流体流动时，在雷诺数低于约2300的情况下，预计是层流流动，在雷诺数高于4000时，预计是湍流，并且在这些值之间发生层流到湍流的过渡。虽然注意到中空纤维过滤器中的层流和湍流流动行为可能与非渗透管状系统的模拟行为有些不同，但是发明人已经发现，当进料流150的雷诺数高于层流流动范围时，例如高于约2300、2500、3000、3500、4000等，根据本公开的中空纤维过滤器系统容许非常高的通量而不结垢。虽然不希望被任何理论约束，但据信湍流进料流可以从中空纤维过滤器的壁到穿过中空纤维过滤器的整体流产生增强的颗粒输送，这与层流流动相比可以减少结垢。因此，本公开的各种实施方案涉及操作中空纤维过滤器系统的方法，其使用为湍流或在层流至湍流过渡区内的进料流，例如，其特征为Re值高于2000、2300、2500、3000、3500、4000等。因为Re随着进料速度、剪切速率和/或中空纤维过滤器内径的增加而增加，所以本公开的某些方法涉及在进料速度或剪切速率被选择成产生高于2000、2300、2500、3000、3500、4000等的Re值的情况下操作中空纤维过滤器系统。因为稀的水溶液具有大约1厘沲(cSt)的运动粘度，所以该方法的某些实施方案涉及在进料速度和中空纤维过滤器直径的乘积大于2000、2300、2500、3000、3500或4000mm2s-1的条件下操作中空纤维过滤器系统。在其他实施方案中，该方法涉及在进料速度比运动粘度与中空纤维过滤器内径的商(μ/d)大2000、2300、2500、3000、3500或4000倍的条件下操作中空纤维过滤器系统，对于稀的水溶液，所述商大约等于1/d。
本公开的另外实施方案涉及被构造成在Re值超过2000、2300、2500、3000、3500、4000等的条件下操作的中空纤维过滤器系统。在某些实施方案中，进料速度和中空纤维过滤器直径的乘积大于2000、2300、2500、3000、3500或4000mm2s-1。本公开的其他实施方案涉及被构造成在进料速度比运动粘度与中空纤维过滤器内径的商大2000、2300、2500、3000、3500或4000倍的条件下操作的系统。
本公开的某些实施方案利用被选择成促进非层流流动的中空纤维过滤器几何形状。例如，在给定的剪切速率下，内径的增加将倾向于促进更湍流的流动。在本公开的实施方案中使用的中空纤维过滤器可以具有大于1mm的内径和/或大于0.1mm的壁厚，以承受高通量条件下的操作。本公开的系统和方法可以在交替切向流(ATF)装置中使用，或者在恒定切向流下使用，并且可以使用任何合适的泵技术来驱动进料流。中空纤维过滤器壁可以具有恒定或可变的密度，并且因此，在其长度和/或周向上具有恒定或可变的平均孔直径和最大孔直径。通过向中空纤维过滤器壁表面施加一层或更多层涂层，可以进一步控制中空纤维过滤器的孔隙率。熟练的技术人员将理解，对中空纤维过滤器表面的额外改性是可能的，包括但不限于使用亲和试剂来选择性地纯化特定的分子物质(例如，蛋白A涂层可以用于降低人源IgG)。
本领域技术人员将理解，对于以雷诺数处于或略高于约2300的过渡值为特征的进料流，速度在中空纤维过滤器的长度上的降低可能导致在中空纤维过滤器内低于2300Re过渡值的流动。发明人已经发现，在进料处的Re值低至2300时观察到了过滤器能力和结垢行为的改善，这表明不一定需要在整个中空纤维过滤器的长度上维持湍流流动，并且在中空纤维过滤器的长度的一部分上的湍流流动可能足以在一定程度上改善过滤器能力和结垢行为。因此，在本公开的某些实施方案中，中空纤维过滤器系统在进料处的VF处于2300至2500之间或2300至3000之间的条件下操作。在一些实施方案中，操作中空纤维过滤器系统，使得在过滤器中的中空纤维单元的长度的一部分上产生湍流流动。
根据本公开的中空纤维过滤器系统可以用于过滤各种流体和分离各种可溶性物质或颗粒物质。这些物质包括但不限于：哺乳动物细胞或其他真核细胞、微生物细胞(包括细菌细胞，例如大肠杆菌)和/或合成纳米颗粒(例如用于药物递送的颗粒)，以及生物分子(例如多肽、多核苷酸、多糖)，以及这些物质中的一种或多种的复合物。不限于前述内容，本公开的系统和方法可用于重组蛋白的生产和纯化，例如免疫球蛋白或其功能片段。本领域技术人员将理解，本公开的系统和方法可以应用于目前使用中空纤维TFF系统的任何环境，例如澄清动物或微生物培养物、例如上述那些物质的浓缩和分级。
在本公开中使用的中空纤维可以具有宽范围的长度。在一些实施方案中，中空纤维的长度可以为例如200mm至2000mm的范围内，以及其他值。中空纤维(例如上述那些中空纤维)可以用于构建用于生物处理和制药应用的切向流过滤器。可以使用这种切向流过滤器的生物处理应用的示例包括处理细胞培养液以将细胞从较小的颗粒(例如蛋白质、病毒、病毒样颗粒(VLP)、外来体、脂质、DNA和其他代谢物)中分离出来的应用。
这种应用包括灌注应用，其中较小的颗粒作为渗透物流体从细胞培养基中连续地移除，而细胞保留在返回到生物反应器的截留物流体中(并且其中通常同时将相同体积的介质加入生物反应器，以维持总的反应器体积)。这种应用还包括澄清或收获应用，其中较小的颗粒(通常是生物产品)作为渗透物流体较快地从细胞培养基中移除。
中空纤维(例如上述那些中空纤维)可以用于构建用于颗粒分级、浓缩和洗涤的中空纤维过滤器。可以使用这种中空纤维过滤器的应用的示例包括使用这种中空纤维过滤器从较大颗粒中移除小颗粒、使用这种中空纤维过滤器浓缩微颗粒，以及使用这种中空纤维过滤器清洗微颗粒。
根据本公开的灌注系统可以包括过滤器壳体、导管和其他耐用且可消毒(例如通过高压灭菌、蒸汽清洁、伽马辐射、化学消毒等)的元件；或者，一个或多个元件可以是一次性的，并且可以在使用后丢弃。可以有利地设计为一次性使用的一个系统部件是PP中空纤维过滤器元件本身。而且，在一些情况下，PP中空纤维过滤器元件可以作为消毒的预润湿部件提供：由于它们的疏水性，这些过滤器元件通常使用非极性或弱极性溶剂润湿，例如醇(例如甲醇、乙醇、乙二醇等)，并且在使用前必须冲洗和平衡。在一些情况下，将PP中空纤维过滤器存储在缓冲溶液(例如去离子水或PBS)中提供至最终用户。此外，它可以在使用前用醇预润湿。在本公开的一个方面，PP过滤器可以在客户现场用醇润湿。在又一方面，PP过滤器可以用甘油亲水化。在又一方面，PP过滤器可以在制造过程中润湿，并用去离子水或PBS缓冲液润湿后运输。
本公开的灌注系统可以包括可重复使用的PP中空纤维过滤器系统。可重复使用的系统可以包含可被消毒(例如通过高压灭菌、蒸汽清洁、伽马辐射、化学消毒等)的元件。这些可重复使用的系统可以进一步包含与过程容器的无菌连接。
根据本公开的灌注系统可以包括：中空纤维过滤器，其包含PP膜、过滤器壳体、灌注材料和一个或多个导管，所述过滤器可用所述导管连接至过程容器；和过程容器。本公开的过程容器可以是生物反应器。本公开的PP膜可以包括多个孔，所述多个孔可以用于从溶液中过滤预期的产品。根据特定应用的需求，孔径可以在0.05μm至0.2μm的范围内。PP膜可以由中空纤维组成并且这些中空纤维的内径可以为0.2mm至5.0mm。此外，这些中空纤维的壁厚可以在50至500μm的范围内。中空纤维可以并排排列(即成束)以形成中空纤维过滤器。这种成束可以导致表面积为10cm2至90m2。
从过程容器流入中空纤维过滤器壳体的流体通常由泵驱动，例如磁悬浮泵、蠕动泵或隔膜/活塞泵，其可以在单个方向上推动流体或可以循环地交替流动方向。
在为这些应用设计的示例性系统中，切向流PP中空纤维过滤器元件设置在过滤器壳体内，以限定被过滤元件彼此分开的进料/截留物流体通道和渗透物流体通道。这些实施方案与现有系统的不同之处在于它们使用PP膜，这种材料以前被认为不适用于此目的。在此描述的实施方案的优点在于，过滤器极其疏水，这方面以前被认为阻碍过滤过程。然而，已经发现这方面允许比其它材料更有效地过滤生物溶液，同时结垢更少。
本公开进一步涉及一种用于过滤生物溶液的系统，其包括中空纤维过滤器和过程容器。中空纤维过滤器包括PP膜。在各种实施方案中，PP中空纤维过滤器可以连接到过程容器。在这些实施方案中，过滤器可用于切向流过滤或交替切向流过滤。当该系统用于切向流时，细胞或其他生物成分可以通过纤维的内腔流回反应器。当该系统用于交替切向流时，细胞或其他生物成分可以沿不同方向来回泵送穿过膜，引导滤液流过内腔并限制过滤器结垢。本文所述的实施方案的优点在于，包含中空纤维过滤器的PP膜是疏水的，这反过来可以允许更有效地流过膜，因为它允许滤液流过孔，但是由于膜的疏水性质，可以不允许结垢条件。
本公开还描述了使用PP中空纤维过滤器过滤生物溶液的系统的使用方法。在一组实施方案中，PP中空纤维过滤器可以放置在过滤器壳体中。过滤器壳体可以通过第一导管连接到过程容器，通过第二导管连接到滤液容器。泵可以连接到过滤器壳体，与过程容器的第一导管相对。泵的启动可以将液体吸过PP中空纤维过滤器。移动通过过滤器的溶液是滤液，其可以从系统中去除。不穿过膜的溶液是截留物，并可以被压回到过程容器中。在一些实施方案中，液体是生物液体。在又一个实施方案中，液体含有细胞。在某些情况下，截留物被推回通过过滤器以返回到过程容器。
图1A和1B描绘了根据本公开实施方案的示例性灌注培养系统。图1A中描绘的灌注培养系统100被构造成提供交替切向流过滤和任选的渗滤。系统100包括过程容器110(例如生物反应器)和过滤器单元120，过滤器单元120包含过滤器(未示出)，将过滤单元分成两个流体隔室：进料/截留物通道130和渗透物通道140(也称为滤液通道)。过滤器单元120连接到正排量泵，例如活塞泵或隔膜泵。进料/截留物通道130在过程容器110和过滤器单元120之间延伸，而渗透物通道140延伸至渗透物容器170。系统100还包括渗滤流体容器150。来自渗滤流体容器150的流出物穿过流量控制器155(这里描述为泵，但其可以是阀或其他合适的装置)进入连接渗滤流体容器150与过程容器110的渗滤流体通道160。
该系统还包括控制器180，这里描述为通用计算机，但是它可以是能够接收输入、发送输出并基于预编程指令自动执行操作的任何合适的设备。控制器180可以通过例如键盘、触摸屏等外围设备接收用户输入，并接收来自一个或多个传感器181-183的过程数据输入，传感器181-183测量过程容器110和进料/截留物通道130中的一个或两个内的培养物中的一个或多个变量。(尽管在图中，传感器181-183被描绘为仅连接到进料/截留物通道130)。控制器还任选地分别从渗透物通道140和渗滤流体通道160中的一个或多个传感器184、185接收输入。由这些传感器测量的变量可以包括但不限于压力、流量、pH、温度、浊度、光密度、阻抗或与澄清过程控制相关的其他变量。
基于这些输入，并通过执行实现下面更详细描述的控制方法的预编程的控制算法或启发法，控制器180产生一个或多个输出，并将数据发送到调节流体流量的系统100的部件，所述部件包括正排量泵125、渗滤流体控制器155和调节流过渗透物通道140的流量的渗透物阀192。
接下来转到图1B，替代的系统设计利用切向流过滤和恒容渗滤。系统200包括过程容器210和过滤单元220，但是其包括单独的流出物通道230和返回(截留物)通道235，使得通过过滤单元220的流动方向在系统运行期间保持恒定，而不是如图1A所示的系统中那样交替。流出物通道230与来自渗滤流体容器250的渗滤通道255合并成过滤单元220的单一进料通道260。渗透物通道240、渗透物容器270、控制器280和传感器281-285基本上如对于图1A所示系统所述。然而，重要的是，恒容渗滤过程涉及多个流体通道的控制，因此控制器280将向多个阀291、292、293发送输出，这些阀分别调节通过渗透物通道240、过程容器输出230和渗滤流体输出255的流量。
应注意的是，可以改变上述灌注培养系统的某些特征，而不改变系统的其他方面。例如，尽管图1B描绘了被配置用于恒容渗滤的TFF系统，但是本领域技术人员将理解，可以使用不提供恒容渗滤的TFF系统，并且可以使用提供恒容渗滤的ATF系统。
图2A和2B描绘了对于两个独立的实验，PES和PP中空纤维过滤器的在30LMH下的渗透压和筛分百分比随时间的变化。
图3描绘了如上文图2A和2B所描述的渗透压和筛分百分比随时间的变化，但渗透通量为15LMH和22.5LMH。该图显示了PES和PP中空纤维过滤器结垢的差异，因为PES过滤器显示出加速的结垢，而PP过滤器保持高百分比筛分，即使在22.5LMH的较高渗透通量下也是如此。
实施例
以下示例说明了本公开的某些原理，并且不旨在以任何方式限制本公开的范围或内容。
实施例1-聚丙烯(PP)和聚醚砜(PES)过滤器的性能比较。
此实施例提供了灌注培养过程中使用PP过滤器元件可实现的过滤器性能改进的经验验证。在此实施例中，PP过滤器的性能与PES过滤器的性能进行了比较。
图2A和2B示出了以下过滤器的渗透压(psi)与处理时间(小时)以及筛分百分比(％)与处理时间的曲线图：0.2PES(1.0mm)，0.2PES(0.5mm)，0.2PP(1.8mm)，和0.2PP(0.6mm)。在含有中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的生物反应器中，以1.5L的工作体积执行批处理过程。过滤器通量设置为30升/m2·hr。IgG抗体的澄清在切向流(TF)模式下进行。此图显示，随着时间的推移，0.2PP(1.8mm)过滤器产生的结果具有始终高水平的筛分百分比和始终低的渗透压。重要的是，具有相似孔径的PES和PP过滤器在我们的测试中表现不同：0.2PES(0.5mm)过滤器在过程的前10小时内表现出筛分百分比和渗透压的快速下降。相比之下，0.2PP(0.6mm)过滤器表现出多于20小时的高筛分和恒定渗透压，甚至优于1.0mm PES过滤器。这表明材料的差异(PES vs.PP)对结垢性能有显著影响。澄清过程中使用PP过滤器可以延长处理时间，并可减少澄清相同体积培养基所需的表面积，从而潜在地提高产量并降低单位成本。历史上，PP过滤器没有用于扩大培养，因为以前假设PP会对蛋白质变性。不希望受任何理论的束缚，上述实验的结果表明这些过滤器不会变性，且事实上可以在延长的培养期内使用。

Claims (46)

1.一种用于灌注细胞培养的预润湿的一次性中空纤维过滤器，其中所述过滤器用醇预润湿并储存在缓冲溶液中。
2.如权利要求1所述的过滤器，其进一步包括过滤器壳体，所述过滤器壳体包括：
入口；
截留物出口；
渗透物出口；
至少一个疏水中空纤维，其在所述入口和所述截留物出口之间延伸，从而将所述渗透物出口与所述截留物出口和所述入口流体分离；和
灌封材料，其将所述疏水中空纤维连接至过滤器壳体，并使所述入口和所述截留物出口中的至少一个相对于所述渗透物出口密封。
3.如权利要求2所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维包含多个孔。
4.如权利要求3所述的过滤器，其中所述孔的直径为0.05um至2.0um。
5.如权利要求1所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维的表面积为10cm2至90m2。
6.如权利要求1所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维的内径为0.2mm至5.0mm。
7.如权利要求1所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维的壁厚为50um至500um。
8.如权利要求1所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维包括聚烯烃或含氟聚合物。
9.如权利要求8所述的过滤器，其中所述聚烯烃是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
10.一种灌注细胞培养的方法，其包括：
将细胞培养液循环通过疏水中空纤维过滤器，从而将细胞培养液分离成滤液和截留物；和
将截留物返回至生物反应器。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述灌注细胞培养选自由以下组成的组：n-1培养和培养基交换，其中在任一种情况下都不保留滤液。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述灌注细胞培养选自由以下组成的组：高生产率收获、浓缩补料分批培养或连续灌注，其中在每种情况下，滤液都包含感兴趣的生物产品并被保留。
13.如权利要求10所述的方法，其中所述细胞培养是哺乳动物细胞培养、酵母细胞培养、原核细胞培养或昆虫细胞培养。
14.如权利要求10所述的方法，其中所述细胞培养的循环通过交替切向流进行。
15.如权利要求10所述的方法，其中所述细胞培养的循环通过切向流过滤进行。
16.如权利要求10所述的方法，其中所述细胞培养液的循环在1、2、3、4、5、10、15、20、22.5、25、30l/m2·h的过滤器通量下进行。
17.如权利要求10所述的方法，其中所述分离系统含有以下中的一种或多种：通过蠕动泵头的蠕动泵管、磁悬浮泵、ATF泵和其他正排量一次性泵。
18.如权利要求10所述的方法，其中所述方法进行10、20、30、40、50天。
19.如权利要求10所述的方法，其中所述疏水中空纤维包括聚烯烃或含氟聚合物。
20.如权利要求19所述的过滤器，其中所述聚烯烃是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
21.一种组装灌注培养系统的方法，其包括以下步骤：
将预润湿的疏水中空纤维过滤器置于灌注培养系统的过滤器壳体中，和任选地，将过滤器壳体的渗透物出口连接到渗透物收集容器，其中：
(a)所述灌注培养系统包括过程容器(process vessel)、将过程容器的内部流体连接到所述过滤器壳体内部以限定过滤器进料通道的第一导管、和任选地将所述过滤器壳体的内部连接到过程容器并限定截留物通道的第二导管，并且(b)在置于所述过滤器壳体内之前，所述疏水中空纤维过滤器用包含醇的溶液预润湿并储存在缓冲水溶液中。
22.如权利要求21所述的方法，其中所述过滤器壳体进一步包括用于滤液的出口，所述出口通过中空纤维疏水过滤器与进料和截留物通道流体分离。
23.如权利要求21所述的方法，其中所述细胞培养液的循环在1、2、3、4、5、10、15、20、22.5、25、30l/m2·h的过滤器通量下进行。
24.如权利要求21所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维包括聚烯烃或含氟聚合物。
25.如权利要求24所述的过滤器，其中所述聚烯烃是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
26.一种灌注细胞培养的方法，其包括：
使细胞培养基切向通过疏水过滤器，以降低细胞培养基的第一组分的浓度，其中所述第一组分不包含重组肽、核酸或病毒衣壳。
27.如权利要求26所述的方法，其中所述方法进行10、20、30、40、50天。
28.如权利要求26所述的方法，其中所述细胞培养液的循环在1、2、3、4、5、10、15、20、22.5、25、30l/m2·h的过滤器通量下进行。
29.如权利要求26所述的方法，其中所述疏水中空纤维包括聚烯烃或含氟聚合物。
30.如权利要求29所述的方法，其中所述聚烯烃是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
31.一种过滤流体的方法，其包括：
使流体通过疏水中空纤维过滤器系统，使得所述流体以非层流方式流过疏水中空纤维过滤器，并使得所述流体被分离成截留物和渗透物。
32.如权力要求31所述的方法，其中系统的进料速度与疏水中空纤维过滤器的内径的乘积大于2500mm2s-1。
33.如权利要求31所述的方法，其中表征进入过滤器中的流体流动的雷诺数大于2000、2300、2500、3000、3500或4000。
34.如权利要求31所述的过滤器，其中所述疏水中空纤维包括聚烯烃或含氟聚合物。
35.如权利要求34所述的过滤器，其中所述聚烯烃是聚丙烯、聚乙烯或其共聚物。
36.如权利要求31所述的方法，其中通过所述疏水中空纤维过滤器的流动方向是交替的。
37.如权利要求31所述的方法，其进一步包括收集过滤器渗透物的步骤。
38.如权利要求37所述的方法，其中所述疏水中空纤维过滤器保留非期望物质。
39.如权利要求38所述的方法，其中保留的所述非期望物质选自由以下组成的组：哺乳动物细胞来源的物质；微生物细胞来源的物质；病毒来源的物质；蛋白质；核酸；多糖；或任何前述物质的复合物。
40.如权利要求37所述的方法，其中期望的物质穿过所述疏水中空纤维过滤器进入渗透物。
41.如权利要求40所述的方法，其中所述期望的物质选自由以下组成的组：哺乳动物细胞来源的物质；微生物细胞来源的物质；病毒来源的物质；蛋白质；核酸；多糖；病毒；微载体；颗粒；或任何前述物质的复合物。
42.一种组合物，其包含根据权利要求41所述的方法收集的渗透物。
43.如权利要求42所述的组合物，其中组合物中期望的物质的浓度可以比流体中期望的物质的浓度大至少10x、20x、40x、50x、75x或100x。
44.如权利要求42所述的组合物，其中非期望物质的浓度可以比流体中非期望物质的浓度小至少10x、20x、40x、50x、75x或100x。
45.如权利要求31所述的方法，其进一步包括从流体中移除渗透物的步骤，从而增加由疏水中空纤维过滤器保留的期望物质的浓度，其中所述期望物质的浓度增加了5X、10X、20X、40X、50X、75X或100X。
46.一种过滤流体的方法，其包括：
在进料速度比流体的运动粘度与中空纤维过滤器直径的商大2000、2300、2500、3000、3500或4000倍的条件下，使流体通过疏水中空纤维过滤器。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116406369A (zh) * 2020-10-05 2023-07-07 百时美施贵宝公司 用于浓缩蛋白质的方法

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04117600U (ja) * 1991-03-28 1992-10-21 三菱レイヨン株式会社 中空糸膜型細胞培養器
WO1998053894A1 (en) * 1997-05-30 1998-12-03 Compact Membrane Systems, Inc. Non-porous gas permeable membrane
CN102164657A (zh) * 2008-09-26 2011-08-24 旭化成化学株式会社 多孔中空纤维膜在用于制造澄清化的生物药物培养液中的用途
WO2013047775A1 (ja) * 2011-09-28 2013-04-04 東レ株式会社 中空糸膜モジュールの親水化方法
JP2014117190A (ja) * 2012-12-13 2014-06-30 Mitsubishi Rayon Co Ltd 浮遊細胞培養のための装置、モジュール及び方法
CA2951046A1 (en) * 2014-06-04 2015-12-10 Amgen Inc. Methods for harvesting mammalian cell cultures
CN105473214A (zh) * 2013-05-29 2016-04-06 3M创新资产公司 微孔聚偏二氟乙烯膜
WO2017180573A1 (en) * 2016-04-11 2017-10-19 Spectrum, Inc. Thick wall hollow fiber tangential flow filter
TWM557639U (zh) * 2017-04-10 2018-04-01 光譜實驗室公司 厚壁中空纖維構成之切向流體過濾材
US20180361325A1 (en) * 2015-12-15 2018-12-20 Toyobo Co., Ltd. Hollow-fiber membrane and hollow-fiber module for cell culture

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3040631A1 (de) * 1980-10-29 1982-05-27 Merck Patent Gmbh, 6100 Darmstadt Verfahren zur abtrennung von metallkatalysatoren und verwendung von membrantrennvorrichtungen
JPS60232208A (ja) 1984-05-04 1985-11-18 Mitsubishi Rayon Co Ltd 中空繊維を用いた濾過モジユ−ルの処理方法
JP2000032977A (ja) * 1989-02-15 2000-02-02 Hitachi Ltd 細胞培養方法及び装置
FR2717185B1 (fr) * 1994-03-08 1996-07-26 Tech Sep Microfiltration de la bière.
EP0672424A1 (en) * 1994-03-16 1995-09-20 Teijin Limited Method of sterilizing a blood dialyzer having semipermeable polymeric membranes by gamma-ray irradiation
AU3183195A (en) 1994-08-02 1996-03-04 Fsm Technologies Limited Membrane filter unit
JPH11507544A (ja) * 1995-06-08 1999-07-06 プロジェン インダストリーズ リミテッド Ｄｎａを抽出するための方法及び装置
JPH1042851A (ja) * 1996-04-12 1998-02-17 Kuraray Co Ltd 清酒の製造方法および製造装置
WO2001058501A1 (en) 2000-02-09 2001-08-16 Minntech Corporation Apparatus and process for removal of carbon dioxide in a bioreactor system
JP2005110695A (ja) 2005-01-06 2005-04-28 Toyobo Co Ltd 中空糸付き器具及びその使用方法
US8202726B2 (en) 2008-09-24 2012-06-19 Medimmune, Llc Methods for cultivating cells, propagating and purifying viruses
EP2177603A1 (en) 2008-09-25 2010-04-21 Gambro Lundia AB Device for renal cell expansion
PL2726600T3 (pl) 2011-07-01 2017-08-31 Amgen Inc. Hodowla ssaczych komórek
JP2013226486A (ja) 2012-04-24 2013-11-07 Toray Ind Inc 分離膜モジュールの滅菌方法、化学品の製造方法および膜分離型連続発酵装置
DE102013007927B4 (de) 2013-05-10 2014-12-24 Hoerbiger Automatisierungstechnik Holding Gmbh Antriebseinheit
CN106659977A (zh) * 2014-07-10 2017-05-10 旭化成株式会社 膜蒸馏装置和疏水性多孔膜
EP3374636B1 (en) * 2015-11-10 2020-06-03 Repligen Corporation Disposable alternating tangential flow filtration units
JP7043125B2 (ja) * 2016-10-28 2022-03-29 旭化成メディカル株式会社 連続培養における有用物質の回収方法

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH04117600U (ja) * 1991-03-28 1992-10-21 三菱レイヨン株式会社 中空糸膜型細胞培養器
WO1998053894A1 (en) * 1997-05-30 1998-12-03 Compact Membrane Systems, Inc. Non-porous gas permeable membrane
CN102164657A (zh) * 2008-09-26 2011-08-24 旭化成化学株式会社 多孔中空纤维膜在用于制造澄清化的生物药物培养液中的用途
WO2013047775A1 (ja) * 2011-09-28 2013-04-04 東レ株式会社 中空糸膜モジュールの親水化方法
JP2014117190A (ja) * 2012-12-13 2014-06-30 Mitsubishi Rayon Co Ltd 浮遊細胞培養のための装置、モジュール及び方法
CN105473214A (zh) * 2013-05-29 2016-04-06 3M创新资产公司 微孔聚偏二氟乙烯膜
CA2951046A1 (en) * 2014-06-04 2015-12-10 Amgen Inc. Methods for harvesting mammalian cell cultures
US20180361325A1 (en) * 2015-12-15 2018-12-20 Toyobo Co., Ltd. Hollow-fiber membrane and hollow-fiber module for cell culture
WO2017180573A1 (en) * 2016-04-11 2017-10-19 Spectrum, Inc. Thick wall hollow fiber tangential flow filter
TWM557639U (zh) * 2017-04-10 2018-04-01 光譜實驗室公司 厚壁中空纖維構成之切向流體過濾材

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