CN113189236B - 一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及绿原酸提取技术领域，且公开了一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，包括以下步骤：S1：准备：在进行S2步骤之前，首先准备好氮气(N2)、高纯水、氨水溶液(28％)、磁铁、无水乙醇；S2：合成：在氮气(N2)保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O超声分散到280毫升高纯水中。基于磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，合成的Fe3O4@MIPs对于绿原酸吸附平衡时间更短，饱和吸附量更大，相对于绿原酸的结构类似物，Fe3O4@MIPs对于绿原酸的选择性更好，在实际果汁样品的提取中抗干扰能力更强，合成的Fe3O4@MIPs具有较高的吸附量、快速的动力学结合速率和对绿原酸(CGA)显著的选择性，可以成功的应用于实际样品中绿原酸的提取测定。

Description

一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法
技术领域
本发明涉及绿原酸提取技术领域，具体为一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法。
背景技术
分子印迹技术(MIT)是基于抗原-抗体特异性识别原理发展起来的一种新型、高效的分子识别技术。近年来，磁性分子印迹聚合物(Magnetic Molecularly ImprintedPolymers，MMIPs)用于样品前处理过程得到越来越多科研工作者的关注。由于加入了磁性介质，MMIPs可以在外加磁场的作用下，不经过离心或过滤就能实现与基质的快速分离，因此其在食品检测、环境分析和生物分析等领域得到广泛应用。
绿原酸，广泛分布于水果、蔬菜、植物中的一种酚酸，它具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎、抗病毒、抗菌、抗高血压活性、改善血糖调节、抗心脏病和抗动脉粥样硬化等作用，由于绿原酸具有上述的生物活性，使其备受科研工作者的青睐。然而，天然产物体系复杂，大分子和小分子、活性和非活性成分共存，多存在化学活性相似的结构类似物，且绿原酸有效成分含量较低，采用一般的分离方法提取测定难度较大，给样品的前处理工作和目标分析物的准确测定带来困难。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种新型磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，解决了上述背景所提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，包括以下步骤：
S1：准备：
在进行S2步骤之前，首先准备好氮气(N2)、高纯水、氨水溶液(28％)、磁铁、无水乙醇；
S2：合成：
在氮气(N2)保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O超声分散于280毫升高纯水中，然后进行搅拌，当搅拌的温度达到设定值时，向溶液中滴加40毫升氨水溶液(28％)，反应在70℃条件下搅拌反应1小时；
S3：分离、洗涤：
利用磁铁将由S2步骤得到的磁性固体从反应混合物中分离出来，得到黑色Fe3O4纳米颗粒，然后对Fe3O4纳米颗粒进行多次洗涤，并在60℃下真空干燥24小时；
S4：修饰：
在超声波分散作用下，将Fe3O4纳米颗粒分散于225毫升无水乙醇/高纯水中10分钟，然后进行搅拌，搅拌的同时向溶液中逐滴加入APTES，并用冰醋酸将pH值调节到4.0，然后在氮气(N2)保护下，在三口瓶中60℃下进行3小时的反应；
S5：收集、冲洗：
使用磁铁从S4步骤中的混合溶液中收集所得产物，然后使用高纯水反复冲洗黑色沉淀物，直到溶液的pH值为中性，最后在60℃下真空干燥24小时；
S6：印迹材料的制备：
将Fe3O4@SiO2-NH2、绿原酸(CGA)和丙烯酰胺(AM)在超声振动下分散于100毫升无水乙醇/乙腈中20分钟，然后在冰箱中4℃保存12小时，形成模板-单体结合物，然后在磁力搅拌条件下，将乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)和偶氮二异丁腈(AIBN)滴加到上述溶液中，在氮气(N2)保护下，在60℃条件下搅拌聚合反应24小时；
S7：收集、洗脱、表征
将获得Fe3O4@MIPs通过外部磁铁收集，通过索氏提取仪并用200毫升甲醇/乙酸洗脱模板分子，直到高效液相色谱(HPLC)检测不到绿原酸(CGA)的浓度，将产物用甲醇反复冲洗几次，并在60℃下真空干燥24小时，最后通过Vibrating sample magnetometer(VSM)、Fourier transform infrared spectrum(FTIR)、X-ray diffraction(XRD)和Scanningelectron microscopy(SEM)表征来确认成功合成Fe3O4@MIPs；
S8：优化提取和解吸条件：
以甲醇为提取溶剂，考察提取时间为5～60min，同时考察在5～40min范围内解吸时间的影响。
优选的，S2步骤中的FeCl2·4H2O含量为6.88克，FeCl3·6H2O含量为18.88克。
优选的，S2步骤中的温度设定值为70℃。
优选的，S3步骤中对Fe3O4纳米颗粒洗涤是利用高纯水和无水乙醇多次洗涤的。
优选的，S4步骤中的Fe3O4纳米颗粒含量为0.6克，其次无水乙醇/高纯水的比例为1：1，APTES的滴加量为0.5毫升。
优选的，S6步骤中的Fe3O4@SiO2-NH2含量为0.2克，绿原酸(CGA)的含量为0.1772克，丙烯酰胺(AM)的含量为0.1422克，其次无水乙醇/乙腈的比例为3：1，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)的含量为1.88毫升，偶氮二异丁腈(AIBN)的含量为60毫克。
优选的，S7步骤中的甲醇/乙酸比例为9：1。
本发明提供了一种新型磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法。该新型磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法具备以下有益效果：
该磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，Fe3O4@MIPs对于绿原酸吸附平衡时间更短，饱和吸附量更大，相对于绿原酸的结构类似物，Fe3O4@MIPs对于绿原酸的选择性更好，在实际果汁样品的提取中抗干扰能力更强，通过图10可以看出Fe3O4@MIP对于目标分子绿原酸具有较高的吸附量(35.84mg/g)和快速的动力学结合速率(40min)；通过图11可以看出Fe3O4@MIPs具有非常好的重复利用性；通过图12可以看出Fe3O4@MIPs和Fe3O4@NIPs对于绿原酸具有较好的选择性，我们基于新型磁性印迹材料建立的方法大大降低了实验前处理需要的成本和时间，合成的Fe3O4@MIPs具有较高的吸附量、快速的动力学结合速率和对绿原酸(CGA)显著的选择性。
附图说明
图1为本发明Fe3O4(A)的扫描电镜图；
图2为本发明Fe3O4@SiO2-NH2(B)的扫描电镜图；
图3为本发明Fe3O4@MIPs(C)的扫描电镜图；
图4为本发明Fe3O4@MIPs的合成示意图；
图5为本发明Fe3O4(A),Fe3O4@SiO2-NH2(B)和Fe3O4@MIPs(C)的红外光谱图；
图6为本发明Fe3O4(A),Fe3O4@SiO2-NH2(B)和Fe3O4@MIPs(C)的X-射线衍射图；
图7为本发明(A)Fe3O4纳米颗粒(a)、Fe3O4@SiO2-NH2(b)、Fe3O4@MIPs(c)的磁化曲线及(B)Fe3O4@MIPs在没有和存在强大磁铁的情况下的吸附情况示意图；
图8为本发明Fe3O4@MIPs吸附示意图；
图9为本发明苹果汁(A)，从Fe3O4@MIPs洗脱后的溶液(B)，标准溶液CGA(C)的色谱图；
图10为本发明Fe3O4@MIP对于绿原酸具有较高的吸附量和快速的动力学结合速率示意图；
图11为本发明Fe3O4@MIPs的重复利用性示意图；
图12为本发明Fe3O4@MIPs和Fe3O4@NIPs对于绿原酸和其结构类似物的选择性示意图。
具体实施方式
实施例一：
如图1-12：
一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，包括以下步骤：
S1：准备：
在进行S2步骤之前，首先准备好氮气(N2)、高纯水、氨水溶液(28％)、磁铁、无水乙醇；
S2：合成：
在氮气(N2)保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O添加到280毫升高纯水中，然后进行搅拌，FeCl2·4H2O含量为6.88克，FeCl3·6H2O含量为18.88克，当搅拌的温度达到设定值时，向溶液中滴加40毫升氨水溶液中，反应在70℃条件下搅拌反应1小时；
S3：分离、洗涤：
利用磁铁将由S2步骤得到的磁性固体从反应混合物中分离出来，得到黑色Fe3O4纳米颗粒，然后对Fe3O4纳米颗粒多次洗涤，并进行60℃真空干燥24小时；
S4：修饰：
在超声波分散作用下，将Fe3O4纳米颗粒分散在225毫升无水乙醇/高纯水中10分钟，然后进行搅拌，Fe3O4纳米颗粒含量为0.6克，无水乙醇/高纯水的比例为1：1，搅拌的同时向溶液中逐滴加入APTES，APTES的滴加量为0.5毫升，并用冰醋酸将pH值调节到4.0，然后在氮气(N2)保护下，在三口瓶中60℃下反应3小时；
S5：收集、冲洗：
使用磁铁从S4步骤中的溶液中收集所得产物，然后使用高纯水反复冲洗黑色沉淀物，直到溶液的pH值为中性，最后在60℃下真空干燥24小时；
S6：印迹材料的制备：
将Fe3O4@SiO2-NH2、绿原酸(CGA)和丙烯酰胺(AM)在超声振动下分散于100毫升无水乙醇/乙腈中20分钟，Fe3O4@SiO2-NH2含量为0.2克，绿原酸(CGA)的含量为0.1772克，丙烯酰胺(AM)的含量为0.1422克，无水乙醇/乙腈的比例为3：1，然后在冰箱中4℃保存12小时，形成模板-单体结合物，然后在磁力搅拌条件下，将乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)和偶氮二异丁腈(AIBN)滴加到上述反应溶液中，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)的含量为1.88毫升，偶氮二异丁腈(AIBN)的含量为60毫克，在氮气(N2)保护下，在60℃环境下搅拌聚合反应24小时；
S7：收集、洗脱、表征
将获得Fe3O4@MIPs通过外部磁铁收集，通过索氏提取仪并用200毫升甲醇/乙酸洗脱模板分子，甲醇/乙酸比例为9：1，直到高效液相色谱(HPLC)检测不到绿原酸(CGA)的浓度，将产物用甲醇反复冲洗几次，并在60℃下真空干燥24小时，最后通过Vibrating samplemagnetometer(VSM)、Fourier transform infrared spectrum(FTIR)、X-ray diffraction(XRD)和Scanning electron microscopy(SEM)表征来确认成功合成Fe3O4@MIPs；
S8：优化提取和解吸条件：
以甲醇为提取溶剂，考察提取时间为5min，同时考察解吸时间为5min时洗脱绿原酸的情况。
实施例二：
如图1-12：
一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，包括以下步骤：
S1：准备：
在进行S2步骤之前，首先准备好氮气(N2)、高纯水、氨水溶液(28％)、磁铁、无水乙醇；
S2：合成：
在氮气(N2)保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O添加到280毫升高纯水中，然后进行搅拌，FeCl2·4H2O含量为6.88克，FeCl3·6H2O含量为18.88克，当搅拌的温度达到设定值时，向溶液中滴加40毫升氨水溶液中，反应在70℃条件下搅拌反应1小时；
S3：分离、洗涤：
利用磁铁将由S2步骤得到的磁性固体从反应混合物中分离出来，得到黑色Fe3O4纳米颗粒，然后对Fe3O4纳米颗粒多次洗涤，并进行60℃真空干燥24小时；
S4：修饰：
在超声波分散作用下，将Fe3O4纳米颗粒分散在225毫升无水乙醇/高纯水中10分钟，然后进行搅拌，Fe3O4纳米颗粒含量为0.6克，无水乙醇/高纯水的比例为1：1，搅拌的同时向溶液中逐滴加入APTES，APTES的滴加量为0.5毫升，并用冰醋酸将pH值调节到4.0，然后在氮气(N2)保护下，在三口瓶中60℃下反应3小时；
S5：收集、冲洗：
使用磁铁从S4步骤中的溶液中收集所得产物，然后使用高纯水反复冲洗黑色沉淀物，直到溶液的pH值为中性，最后在60℃下真空干燥24小时；
S6：印迹材料的制备：
将Fe3O4@SiO2-NH2、绿原酸(CGA)和丙烯酰胺(AM)在超声振动下分散于100毫升无水乙醇/乙腈中20分钟，Fe3O4@SiO2-NH2含量为0.2克，绿原酸(CGA)的含量为0.1772克，丙烯酰胺(AM)的含量为0.1422克，无水乙醇/乙腈的比例为3：1，然后在冰箱中4℃保存12小时，形成模板-单体结合物，然后在磁力搅拌条件下，将乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)和偶氮二异丁腈(AIBN)滴加到上述反应溶液中，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)的含量为1.88毫升，偶氮二异丁腈(AIBN)的含量为60毫克，在氮气(N2)保护下，在60℃环境下搅拌聚合反应24小时；
S7：收集、洗脱、表征
将获得Fe3O4@MIPs通过外部磁铁收集，通过索氏提取仪并用200毫升甲醇/乙酸洗脱模板分子，甲醇/乙酸比例为9：1，直到高效液相色谱(HPLC)检测不到绿原酸(CGA)的浓度，将产物用甲醇反复冲洗几次，并在60℃下真空干燥24小时，最后通过Vibrating samplemagnetometer(VSM)、Fourier transform infrared spectrum(FTIR)、X-ray diffraction(XRD)和Scanning electron microscopy(SEM)表征来确认成功合成Fe3O4@MIPs；
S8：优化提取和解吸条件：
以甲醇为提取溶剂，考察提取时间为60min，同时考察解吸时间为40min洗脱绿原酸的情况。
实施例三：
如图1-12：
一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，包括以下步骤：
S1：准备：
在进行S2步骤之前，首先准备好氮气(N2)、高纯水、氨水溶液(28％)、磁铁、无水乙醇；
S2：合成：
在氮气(N2)保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O添加到280毫升高纯水中，然后进行搅拌，FeCl2·4H2O含量为6.88克，FeCl3·6H2O含量为18.88克，当搅拌的温度达到设定值时，向溶液中滴加40毫升氨水溶液中，反应在70℃条件下搅拌反应1小时；
S3：分离、洗涤：
利用磁铁将由S2步骤得到的磁性固体从反应混合物中分离出来，得到黑色Fe3O4纳米颗粒，然后对Fe3O4纳米颗粒多次洗涤，并进行60℃真空干燥24小时；
S4：修饰：
在超声波分散作用下，将Fe3O4纳米颗粒分散在225毫升无水乙醇/高纯水中10分钟，然后进行搅拌，Fe3O4纳米颗粒含量为0.6克，无水乙醇/高纯水的比例为1:1，搅拌的同时向溶液中逐滴加入APTES，APTES的滴加量为0.5毫升，并用冰醋酸将pH值调节到4.0，然后在氮气(N2)保护下，在三口瓶中60℃下反应3小时；
S5：收集、冲洗：
使用磁铁从S4步骤中的溶液中收集所得产物，然后使用高纯水反复冲洗黑色沉淀物，直到溶液的pH值为中性，最后在60℃下真空干燥24小时；
S6：印迹材料的制备：
将Fe3O4@SiO2-NH2、绿原酸(CGA)和丙烯酰胺(AM)在超声振动下分散于100毫升无水乙醇/乙腈中20分钟，Fe3O4@SiO2-NH2含量为0.2克，绿原酸(CGA)的含量为0.1772克，丙烯酰胺(AM)的含量为0.1422克，无水乙醇/乙腈的比例为3：1，然后在冰箱中4℃保存12小时，形成模板-单体结合物，然后在磁力搅拌条件下，将乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)和偶氮二异丁腈(AIBN)滴加到上述反应溶液中，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)的含量为1.88毫升，偶氮二异丁腈(AIBN)的含量为60毫克，在氮气(N2)保护下，在60℃环境下搅拌聚合反应24小时；
S7：收集、洗脱、表征
将获得Fe3O4@MIPs通过外部磁铁收集，通过索氏提取仪并用200毫升甲醇/乙酸洗脱模板分子，甲醇/乙酸比例为9：1，直到高效液相色谱(HPLC)检测不到绿原酸(CGA)的浓度，将产物用甲醇反复冲洗几次，并在60℃下真空干燥24小时，最后通过Vibrating samplemagnetometer(VSM)、Fourier transform infrared spectrum(FTIR)、X-ray diffraction(XRD)和Scanning electron microscopy(SEM)表征来确认成功合成Fe3O4@MIPs；
S8：优化提取和解吸条件：
以甲醇为提取溶剂，考察提取时间为20min，同时考察解吸时间为10min时洗脱绿原酸的情况。
实施例四：
如图1-12：
一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，包括以下步骤：
S1：准备：
在进行S2步骤之前，首先准备好氮气(N2)、高纯水、氨水溶液(28％)、磁铁、无水乙醇；
S2：合成：
在氮气(N2)保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O添加到280毫升高纯水中，然后进行搅拌，FeCl2·4H2O含量为6.88克，FeCl3·6H2O含量为18.88克，当搅拌的温度达到设定值时，向溶液中滴加40毫升氨水溶液中，反应在70℃条件下搅拌反应1小时；
S3：分离、洗涤：
利用磁铁将由S2步骤得到的磁性固体从反应混合物中分离出来，得到黑色Fe3O4纳米颗粒，然后对Fe3O4纳米颗粒多次洗涤，并进行60℃真空干燥24小时；
S4：修饰：
在超声波分散作用下，将Fe3O4纳米颗粒分散在225毫升无水乙醇/高纯水中10分钟，然后进行搅拌，Fe3O4纳米颗粒含量为0.6克，无水乙醇/高纯水的比例为1：1，搅拌的同时向溶液中逐滴加入APTES，APTES的滴加量为0.5毫升，并用冰醋酸将pH值调节到4.0，然后在氮气(N2)保护下，在三口瓶中60℃下反应3小时；
S5：收集、冲洗：
使用磁铁从S4步骤中的溶液中收集所得产物，然后使用高纯水反复冲洗黑色沉淀物，直到溶液的pH值为中性，最后在60℃下真空干燥24小时；
S6：印迹材料的制备：
将Fe3O4@SiO2-NH2、绿原酸(CGA)和丙烯酰胺(AM)在超声振动下分散于100毫升无水乙醇/乙腈中20分钟，Fe3O4@SiO2-NH2含量为0.2克，绿原酸(CGA)的含量为0.1772克，丙烯酰胺(AM)的含量为0.1422克，无水乙醇/乙腈的比例为3：1，然后在冰箱中4℃保存12小时，形成模板-单体结合物，然后在磁力搅拌条件下，将乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)和偶氮二异丁腈(AIBN)滴加到上述反应溶液中，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)的含量为1.88毫升，偶氮二异丁腈(AIBN)的含量为60毫克，在氮气(N2)保护下，在60℃环境下搅拌聚合反应24小时；
S7：收集、洗脱、表征
将获得Fe3O4@MIPs通过外部磁铁收集，通过索氏提取仪并用200毫升甲醇/乙酸洗脱模板分子，甲醇/乙酸比例为9：1，直到高效液相色谱(HPLC)检测不到绿原酸(CGA)的浓度，将产物用甲醇反复冲洗几次，并在60℃下真空干燥24小时，最后通过Vibrating samplemagnetometer(VSM)、Fourier transform infrared spectrum(FTIR)、X-ray diffraction(XRD)和Scanning electron microscopy(SEM)表征说明成功合成Fe3O4@MIPs；
S8：优化提取和解吸条件：
以甲醇为提取溶剂，考察提取时间为40min，同时考察解吸时间为15min时洗脱绿原酸的情况。
通过图9可以看出，Fe3O4@MIPs方法的实用性是通过对苹果汁样品中CGA的提取检测来评估，我们从图9A中看出，除了CGA色谱峰外，还存在其它干扰峰，这个结果说明苹果汁是一种非常复杂的基质，用Fe3O4@MIPs对苹果汁进行前处理后，在4.61min时出现明显的CGA峰(图9B)，与CGA在标准溶液中的保留时间一致(图9C)，其它干扰峰基本消除，结果表明Fe3O4@MIPs能有效地选择性地提取果汁样品中的CGA，建立的方法对于化学和食品分析领域中CGA的检测具有一定的指导意义。
该磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法在应用时，由实验结果表明40min为最佳提取时间，该时间足以满足从果汁样品中完全提取绿原酸，同时考察在5～40min范围内脱附解吸时间的影响，结果表明，3mL甲醇-乙酸(9/1，v/v)为解吸溶剂，15min为最佳解吸时间。Fe3O4@MIPs对于绿原酸吸附平衡时间更短，饱和吸附量更大，相对于绿原酸的结构类似物，Fe3O4@MIPs对于绿原酸的选择性更好，在实际果汁样品的提取中抗干扰能力更强，并且可以多次重复使用，大大降低了实验前处理需要的成本和时间，合成的Fe3O4@MIPs具有较高的吸附量(35.84mg/g)、快速的动力学结合速率(40min)和对绿原酸(CGA)显著的选择性，并利用高效液相色谱(HPLC)进行测定，能够成功地从果汁样品中高效和选择性地提取测定绿原酸(CGA)。建立方法的线性范围为0.1～100μg/mL，检出限为0.03μg/mL，该方法的回收率为93.5％～101.6％，相对标准偏差小于5％。该新型磁性印迹材料的合成及应用为实际样品中绿原酸的选择性识别和测定提供了一种有效的方法。

Claims (4)

1.一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：准备：
在进行S2步骤之前，首先准备好氮气、高纯水、氨水溶液、磁铁、无水乙醇；
S2：合成：
在氮气保护下，将FeCl2·4H2O和FeCl3·6H2O超声分散于280毫升高纯水中，然后进行搅拌，当搅拌的温度达到设定值时，向溶液中缓慢滴加40毫升氨水溶液，反应在70℃条件下搅拌反应1小时；
S3：分离、洗涤：
利用磁铁将由S2步骤得到的磁性固体从反应混合物中分离出来，得到黑色Fe3O4纳米颗粒，然后对Fe3O4纳米颗粒进行多次洗涤，Fe3O4纳米颗粒洗涤是利用高纯水和无水乙醇多次洗涤的，最后在60℃条件下真空干燥24小时；
S4：修饰：
在超声波分散作用下，将Fe3O4纳米颗粒分散于225毫升无水乙醇/高纯水中10分钟，然后进行搅拌，搅拌的同时向溶液中逐滴加入(3-氨基丙基)-三乙氧基硅烷，并用冰醋酸将pH值调节到4.0，然后在氮气保护下，在三口瓶中60℃下反应3小时，Fe3O4纳米颗粒含量为0.6克，其次无水乙醇/高纯水的比例为1：1，APTES的滴加量为0.5毫升；
S5：收集、冲洗：
使用磁铁从S4步骤中的混合溶液中收集所得产物，然后使用高纯水反复冲洗黑色沉淀物，直到溶液的pH值为中性，最后在60℃下真空干燥24小时；
S6：印迹材料的制备：
将Fe3O4@SiO2-NH2、绿原酸和丙烯酰胺在超声振动下分散于100毫升无水乙醇/乙腈中20分钟，然后在冰箱中4℃保存12小时，形成模板-单体结合物，然后在磁力搅拌条件下，将乙二醇二甲基丙烯酸酯和偶氮二异丁腈滴加到反应溶液中，在氮气保护下，在60℃条件下搅拌聚合反应24小时，Fe3O4@SiO2-NH2含量为0.2克，绿原酸的含量为0.1772克，丙烯酰胺的含量为0.1422克，其次无水乙醇/乙腈的比例为3：1，乙二醇二甲基丙烯酸酯的含量为1.88毫升，偶氮二异丁腈的含量为60毫克；
S7：收集、洗脱、表征
将获得Fe3O4@MIPs通过外部磁铁收集，通过索氏提取仪并用200毫升甲醇/乙酸洗脱模板分子，直到高效液相色谱检测不到绿原酸的浓度，将产物用甲醇反复冲洗几次，并在60℃下真空干燥24小时，最后通过Vibrating sample magnetometer、Fouriertransforminfrared spectrum、X-ray diffaction和Scanningelectronmicroscopy表征来确认成功合成Fe3O4@MIPs；
S8：优化提取和解吸条件：
以甲醇为提取溶剂，考察提取时间为5～60min，同时考察在5～40min范围内解吸时间的影响。
2.根据权利要求1所述的一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，其特征在于：S2步骤中的FeCl2·4H2O含量为6.88克，FeCl3·6H2O含量为18.88克。
3.根据权利要求1所述的一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，其特征在于：S2步骤中的温度设定值为70℃。
4.根据权利要求1所述的一种磁性印迹材料用于果汁中绿原酸的提取测定方法，其特征在于：S7步骤中的甲醇/乙酸比例为9：1。
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