CN113117026A - 青春驻颜膏 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了青春驻颜膏,由以下重量份的原料制备而成:荷叶2‑5份、莲子2‑5份、白术5‑10份、白芷4‑8份、白芨5‑10份、白芍2‑5份、百合2‑6份、茯苓5‑10份、珍珠粉10‑15份、铁皮石斛提取物1‑5份、艾地苯2‑6份、二裂酵母发酵产物溶胞物1‑8份、水7‑59份。本发明通过铁皮石斛提取物、艾地苯、二裂酵母发酵产物溶胞物经皮肤表面吸收,进入皮下组织,激活细胞分化能力,便于细胞再生长,有效的保护皮肤,促进修复,同时,加入纯天然中药,不添加化学药品,不伤害人体健康,具有排毒、解毒、活血、化淤、驻颜抗衰、养护、综合的调理肌肤的功效。
Description
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域,尤其涉及青春驻颜膏。
背景技术
人受到压力时,就会分泌肾上腺素,为对付压力而做准备。如果长期受到压力,人体新陈代谢的平衡就会遭到破坏,皮肤所需的营养供应趋于缓慢,色素母细胞就会变得很活跃,形成黑斑。另外,荷尔蒙分泌失调、新陈代谢缓慢、错误的使用化妆品、紫外线、不良的清洁习惯等都会形成黑斑。现在中药祛斑产品,大多含有激素成分,部分含有如铅汞等皮肤剥脱的重金属,对皮肤造成永久性损害。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题,本发明提出了青春驻颜膏。
本发明提出的青春驻颜膏,由以下重量份的原料制备而成:荷叶 2-5份、莲子2-5份、白术5-10份、白芷4-8份、白芨5-10份、白芍2-5份、百合2-6份、茯苓5-10份、珍珠粉10-15份、铁皮石斛提取物1-5份、艾地苯2-6份、二裂酵母发酵产物溶胞物1-8份、水 7-59份,其制备方法如下:
S1按照重量份配比选取荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉;
S2将荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉全部粉碎成粉末,将粉碎的药材粉末全部投入超临界流体萃取反应釜中,然后加入改性剂乙醇0.3ml,以水作为吸引,得到纯度很高的药粉;
S3向消毒之后的乳化锅中加入水、铁皮石斛提取物、艾地苯、二裂酵母发酵产物溶胞物,搅拌得到混合液;
S4在混合液中倒入黄原胶,然后,在加入丁二醇,搅拌使其分散于醇中;
S5在乳化锅的混合液中加入药粉,均质搅拌10-15min;
S6将乳化锅加热70℃~80℃,搅拌速度开至30~40RPM,充分搅拌10~20min,形成混合液,搅拌均匀后,降温至25℃~30℃,即得所述精华,灌装,包装。
优选的,所述步骤S2萃取条件为压力34.5mPa,温度60℃,静态萃取时间10min,动态萃取量10ml。
优选的,所述步骤S2将粉末过50目筛。
优选的,所述步骤S1将选取荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉,在60℃分别烘烤至含水量小于10%。
本发明中,所述青春驻颜膏,通过铁皮石斛提取物、艾地苯、二裂酵母发酵产物溶胞物经皮肤表面吸收,进入皮下组织,激活细胞分化能力,便于细胞再生长,有效的保护皮肤,促进修复,同时,加入纯天然中药,不添加化学药品,不伤害人体健康,具有排毒、解毒、活血、化淤、驻颜抗衰、养护、综合的调理肌肤的功效。
附图说明
图1为本发明提出的青春驻颜膏的制备流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。
参照图1,青春驻颜膏,由以下重量份的原料制备而成:荷叶2-5 份、莲子2-5份、白术5-10份、白芷4-8份、白芨5-10份、白芍 2-5份、百合2-6份、茯苓5-10份、珍珠粉10-15份、铁皮石斛提取物1-5份、艾地苯2-6份、二裂酵母发酵产物溶胞物1-8份、水 7-59份,其制备方法如下:
S1按照重量份配比选取荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉;
S2将荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉全部粉碎成粉末,将粉碎的药材粉末全部投入超临界流体萃取反应釜中,然后加入改性剂乙醇0.3ml,以水作为吸引,得到纯度很高的药粉;
S3向消毒之后的乳化锅中加入水、铁皮石斛提取物、艾地苯、二裂酵母发酵产物溶胞物,搅拌得到混合液;
S4在混合液中倒入黄原胶,然后,在加入丁二醇,搅拌使其分散于醇中;
S5在乳化锅的混合液中加入药粉,均质搅拌10-15min;
S6将乳化锅加热70℃~80℃,搅拌速度开至30~40RPM,充分搅拌10~20min,形成混合液,搅拌均匀后,降温至25℃~30℃,即得精华,灌装,包装。
本发明中,步骤S2萃取条件为压力34.5mPa,温度60℃,静态萃取时间10min,动态萃取量10ml。
本发明中,步骤S2将粉末过50目筛。
本发明中,步骤S1将选取荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉,在60℃分别烘烤至含水量小于10%。
荷叶是中草药中非常著名的一味具有清暑、化湿的药物,具有非常好的清暑、利湿、祛浊作用;
莲子:清心醒脾,补脾止泻,养心安神明目、补中养神,健脾补胃,止泻固精,益肾涩精止带,滋补元气;
白术:《神农本草经》记载,味苦温。主风寒湿痹死肌,痉疸,止汗,除热,消食,作煎饵。久服轻身延年,不饥;
白芷:祛风湿,活血排脓,生肌止痛。用于头痛、牙痛、鼻渊、肠风痔漏、赤白带下、痈疽疮疡、皮肤瘙痒;
白芨:主痈肿恶疮败疽、伤阴死肌、胃中邪气、贼风鬼击、痱缓不收。能治结热不销,主阴下痿,治面上暗疱,令人肌滑;
白芍:除血痹,破坚积,通顺血脉,散恶血,逐贼血;
百合:除浮肿胪胀,痞满寒热,通身疼痛,及乳难喉痹,止涕泪,安心定胆益志,养五脏,治颠邪狂叫惊悸,产后血狂运,杀蛊毒瓦斯,胁痈乳痈发背诸疮肿;
茯苓:通神而至灵,和魂而炼魂,明窍而易肌,厚肠而开心,调荣而理胃。茯苓久服百日,百病除,不食谷,灸瘢灭,面生光玉泽;
珍珠粉:珍珠涂面,令人润泽好颜色,涂手足,去皮肤逆胪;
铁皮石斛提取物,具有以下功效:
1.增强免疫功能:铁皮石斛具有滋阴养血的功能。清代《药性论》说:铁皮石斛能补肾积精、养胃阴、益气力。含有丰富的多糖类物质,具有增强免疫功能的作用。现代药理研究还表明:铁皮石斛能提高应激能力,具有良好的抗疲劳、耐缺氧的作用。
2.滋养肌肤:人体进入中年后,由于体内的阴液日益减少,从而加速了皮肤老化,使之变黑或变皱。铁皮石斛含有的黏液质,对人体皮肤有滋润营养作用。
3.抗衰老:《神农本草经》将铁皮石斛列为具有“轻身延年”作用的圣药。
艾地苯:艾地苯在化妆品中有抗氧化的作用。能有效地吞噬导致肌肤机体衰老的自由基,防护外来因素对肌肤所造成的伤害,延缓肌肤胶原蛋白流失,并提供肌肤新陈代谢所需的能量,让肌肤紧致、平滑,对肌肤的穿透力非常强。艾迪苯属于一种高度亲脂性化合物,也可以用适量的葡萄籽油加热溶解。它结构上与辅酶Q10相似。艾地苯作为一种高效的抗氧化剂,它具有清除自由基、抑制脂质过氧化、抑制炎症、抑制DNA损伤、光保护、减轻色素沉着、改善细纹、皱纹及老年斑等化妆品功效性;
二裂酵母发酵产物溶胞物:由双歧杆菌溶胞产物组成,包含代谢产物,细胞质,细胞壁和多糖复合物,这种组成的活性物质能特异性地支持皮肤自身的保护和修复基质,通过增强细胞内源性酶促进修复系统来防护紫外线造成的损伤,清除自由基,防止肌肤光老化,还能使细胞内各种介质的比例回复平衡,有利于免疫系统的调节,进而修复受损细胞,使皮肤更富有弹性。
本发明青春驻颜膏具有驻颜抗衰、美白淡斑的作用。
根据临床疗程,按照中药新药毒理学研究技术要求,本青春驻颜膏对大鼠的3个月长期毒性试验:
1.动物:Wistar大鼠80只,SPF级,雌雄兼用,体重65~85g;动物实验设施合格证SYXK(甘)2004~006,实验动物质量合格证号 SCXK(甘)2004~007,由甘肃中医学院实验动物中心提供。
2.分组:将Wistar大鼠按性别体重随机分为青春驻颜膏大剂量组、中剂量组、小剂量组和对照组,每组20只。大剂量组用药剂量 25.92g/kg.d(临床给药量的160倍),中剂量组用药剂量12.96g/kg.d (临床给药量的80倍),小剂量组用药剂量6.48g/kg.d(临床给药量的40倍)。
3.给药:皮肤外用,给药前24h用脱毛剂在大鼠脊柱旁进行脱毛 (约5cm×5cm),将青春驻颜膏按剂量多次均匀涂抹在脱毛区。对照组每天皮肤外用75%乙醇溶液。大鼠每周称体重1次,根据体重变化情况调整给药量。每天定时给药。
4.试验周期:3个月,约为临床疗程(20天)的4.5倍。
5.检查项目
1)一般检查:观察三个给药组大鼠外观体征(毛发、眼、耳、口、鼻分泌物等)、行为活动、粪便性状、体重变化、摄食及死亡情况等。一般活动未见异常,体重变化与对照组比较无明显差异。
2)血液学检查:红细胞、血红蛋白、白细胞及分类、血小板、红细胞容积、平均红细胞血红蛋白、平均红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞记数、凝血时间。三个剂量组连续给药3个月及停药14日,大鼠血液学指标及凝血时间与对照组比较均无显著差异。
3)血液生化学检查:谷丙转氨酶ALT、碱性磷酸酶ALP、谷草转氨酶AST、尿素氮BUN、肌酐Cre、总蛋白TP、白蛋白ALB、葡萄糖 GLU、总胆红素T-BIL、总胆固醇CHO、甘油三酯TG、肌酸激酶CK、氯CL、钾K、钠Na。三个剂量组连续给药3个月及停药14日,大鼠血液生化学指标与对照组比较均无显著差异。
4)脏器系数:将各组处死大鼠进行系统解剖,将心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸、副睾、子宫、卵巢、胸腺、肾上腺等脏器完整取出,称重并计算脏器系数。三个剂量组连续给药3个月及停药14日,大鼠脏器系数与对照组比较差异均无显著意义。
5)组织病理学检查:给药组大鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、胸腺、胃、十二指肠、回肠、结肠、睾丸、附睾、前列腺、卵巢、胸骨、肠系膜淋巴结、胰腺、视神经、子宫、膀胱、脊髓、甲状腺、垂体、输卵管、乳腺、坐骨神经、甲状腺、甲状旁腺、唾液腺、气管、食管等、皮肤等脏器组织病理学检查未见药物引起的异常改变。
停药后可逆性或延缓性毒性观察:各组剩余大鼠停药后继续正常喂饲14日后处死,进行血液学、血液生化学、组织病理学等指标检测。三个给药组大鼠上述观察指标与对照组比较无显著差异;大剂量组大鼠上述脏器组织病理学检查未见药物引起的延缓性毒性损害。实验结果提示在该实验条件下,该药按临床规定剂量使用未见明显的毒性反应。且大鼠给药处皮肤与不给药处皮肤表皮层与真皮层组织结构完整,间质无充血、水肿及炎性细胞浸润,所见与对照组一致。
青春驻颜膏按剂量25.92g/kg.d、12.96g/kg.d和6.48g/kg.d给大鼠连续3个月皮肤外用给药,各组大鼠活动正常,体重增长与对照组比较无明显差异;血液学指标、血液生化学指标,脏器指数与基质对照组比较无明显差异;大剂量组大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、肾上腺、胸腺、胃、十二指肠、回肠、结肠、睾丸、附睾、前列腺、卵巢、胸骨、肠系膜淋巴结、胰腺、视神经、子宫、膀胱、脊髓、甲状腺、垂体、输卵管、乳腺、坐骨神经、甲状腺、甲状旁腺、唾液腺、气管、食管等脏器组织病理学检查未见药物所致异常改变。停药14 日,各给药组大鼠活动正常,体重变化与对照组比较无明显差异;血液学指标、血液生化学指标及脏器指数与对照组比较,差异无显著意义;大剂量组大鼠上述脏器组织病理学检查均未见药物引起延缓性毒性损害。
长期毒性试验结果提示,本青春驻颜膏的动物安全用量为 25.96g/kg.d(相当于成人日用量的160倍);该青春驻颜膏在该实验条件下,在临床规定剂量范围内未发现明显的毒性反应。
本发明青春驻颜膏动物急性毒性试验:
按照现行的《中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则》 (2005.3)的相关要求及中药新药毒理学研究技术要求,本试验研究了青春驻颜膏的急性毒性。
1.试验目的:观察大鼠完整皮肤一次性接触青春驻颜膏后在短期内出现的急性毒性反应。
2.试验动物:Wistar大鼠,SPF级,雌雄兼用,体重200~240g,由甘肃中医学院科研实验中心提供,动物实验设施使用证 SYXK(甘)2004~0006,实验动物质量合格证号SCXK(甘)2004~0006,发证单位甘肃省科技厅;动物按性别分笼饲养,食固体饲料,食水自由,饲料由甘肃中医学院实验动物中心提供。室温20~25℃,相对湿度40%~52%。
3.试验方法:大鼠40只,随机分为青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组及对照组(基质对照组),每组10只,雌雄各半。具体给药方法为:给药前24h用脱毛剂在大鼠脊柱旁进行脱毛(约5cm×5cm),将该青春驻颜膏多次均匀涂抹在脱毛区。青春驻颜膏成人的用法用量为2次/日,3~5g/次,取本品涂于患处;据此,成人的临床一日用剂量约为97~162mg/kg;大鼠急性毒性大剂量相当于人临床用量的500倍。即每只动物按照48.5~ 81mg/g体重涂抹给药,涂敷24h后,用温水擦拭残留的受试物。
同法给药,则青春驻颜膏的中剂量应为26.19~43.74mg/g,相当于人临床用量的270倍;青春驻颜膏的小剂量应为9.7~16.2mg/g,相当于人临床用量的100倍。给药后,各组大鼠连续观察14天,每天观察1~2次,并于给药前及给药后7d、14d称体重,主要观察给药后动物的全身反应,包括皮毛、眼睛、口腔粘膜、呼吸、自主活动、肌张力等,有无颤抖、震颤、抽搐、流涎、腹泻、少动、精神萎靡不振、昏迷等毒性反应症状。记录有无死亡,若有死亡应立即进行尸检,若肉眼检查有明显异常时,进一步进行病理组织学检查。
4.试验结果
4.1动物全身反应:给药当日,大鼠清醒,连续观察14d,各组大鼠皮毛均有光泽,眼睛无分泌物出现,口腔粘膜无溃烂、充血和红肿等刺激症状,能自主活动,行为无改变,均无烦躁等异常精神状态及全身中毒症状。
4.2主要脏器大体尸体解剖结果:14d后处死动物,解剖,肉眼观察各主要脏器,除给药处皮肤有发红现象外,其余脏器均无明显病理改变。
4.3体重变化,见表1。
表1青春驻颜膏完整皮肤给药急性毒性试验大鼠体重变化表(单位:g,n=10,X±SD)
注:与对照组比较,P>0.05。
结果表明,给药组与对照组比较,体重无差异。
大鼠完整皮肤一次性接触青春驻颜膏后,在本实验条件下未发现明显急性毒性。其中大剂量相当于临床成人每日用量的1000倍。
青春驻颜膏皮肤多次用药过敏性反应试验
按照现行的《中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光过敏反应) 研究的技术指导原则》(2005.3)的相关要求及中药新药毒理学研究技术要求,本试验研究了青春驻颜膏的皮肤用药过敏性反应试验。
1.受试物:青春驻颜膏,褐色。临床成人拟用量2次/日,3~5g/ 次。
2.动物与饲养条件:豚鼠,体重270~320g,雌性,由兰州生物制品研究所提供,合格证号:SCXK(甘)2004-0005号。动物饲以颗粒饲料,自由饮水。实验室室温20~24℃,相对湿度35~43%。
3.试验方法
试验动物及分组:白色豚鼠18只,雌性,体重300±10g,按体重分为三组:A青春驻颜膏组、B75%乙醇组、C1%,2,4二硝基氯苯组,每组6只。于试验前24h,将受试豚鼠背部左右两侧的毛脱净,每侧面积为9cm2,受试期中根据背毛生长情况进行脱毛处理,要求去毛部位皮肤无损害,无皮肤病。
给药方法:致敏接触,即A组动物左侧脱毛区涂以青春驻颜膏 0.5mL,B组动物左侧脱毛区涂以75%乙醇0.5ml,C组动物左侧脱毛区涂以2,4二硝基氯苯(1%)0.5mL。给药后用纱布、胶布固定,使受试品与皮肤接触6h。第7天和第14天,用同样方法各重复一次,共计3次。激发接触,即于末次给药(14天)A组动物右侧脱毛区涂青春驻颜膏0.5mL,B组动物右侧脱毛区涂以75%乙醇0.5mL,C组动物右侧脱毛区涂以2,4二硝基氯苯(1%)0.5mL。
观察:受试药物与皮肤接触6h,观察即刻、24h、48h、72h的过敏反应情况。计算过敏反应平均分值和过敏率。根据《中药、天然药物免疫毒性(过敏性、光过敏反应)研究的技术指导原则》(2005.3) 的过敏反应程度评分标准及皮肤致敏性评价标准,判断受试动物对受试药品的过敏程度。
4.试验结果
1)每只动物的试验结果均按皮肤过敏反应评分标准评分,并计算各组动物的反应平均值。反应平均值=(红斑形成总分+水肿形成总分)/合计动物数;
2)按致敏率分类判断受试药物的致敏率。致敏率=出现皮肤过敏反应(无论程度轻重)阳性的动物数/受试动物总数;
3)如表2所示,C组动物皮肤受试区自末次激发给药6h后有明显轻度红斑出现,无水肿,致敏率83%。B组与A组在激发给药6~72h 未出现红斑及水肿,致敏率0。
表2青春驻颜膏对皮肤过敏试验的影响(n=6)
组别 | 动物数(n) | 反应平均值 | 致敏率(%) |
A | 6 | 0 | 0 |
B | 6 | 0 | 0 |
C | 6 | 5.55 | 83 |
结果表明:本实验条件下青春驻颜膏对豚鼠皮肤无致敏性。
青春驻颜膏主要药效学试验
按照现行的《中药、天然药物药效学研究技术指导原则》(2005.3) 的相关要求,本试验研究了青春驻颜膏对兔耳实验性角化模型的影响、活血化瘀作用(对大鼠血液流变学的影响)、抗炎消肿作用(对炎症大鼠足跖肿胀的影响及二甲苯致小鼠耳肿试验)、免疫抑制作用 (2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱发的小鼠迟发型超敏反应)、性激素样活性作用等。
1.试验目的:采用整体动物试验的方法,观察青春驻颜膏对兔耳实验性角化的影响、活血化瘀作用、抗炎消肿作用、免疫抑制作用、抗雄激素样作用等,反映青春驻颜膏的功效与主治,为临床使用提供理论依据。
2.试验动物:昆明种小白鼠,SPF级,雌雄兼用,体重18~22g; SD、Wistar大鼠,SPF级,雌雄兼用,体重180~220g,由甘肃中医学院实验动物中心提供,动物实验设施合格证SYXK(甘)2004~0006,实验动物质量合格证SCXK(甘)2004~0006,发证单位甘肃省科技厅。雄性大耳白兔(体重2~3kg),由兰州生物制品研究所提供。动物按性别分笼饲养,食固体饲料,食水自由,饲料由甘肃中医学院实验动物中心提供;室温20~25℃,相对湿度45%~52%。
3.试验方法及结果
3.1对兔耳实验性角化模型的影响
将大白耳兔随机分为空白组、模型组、阳性药对照组(维甲酸乳膏)、青春驻颜膏高剂量组及青春驻颜膏低剂量组,每组3只。模型组、阳性药对照组和药物组于家兔双耳内侧面耳管开口处2cm×2cm 范围,每日涂煤焦油2次,每次0.25mL,同时涂抹相应剂量的药物,连续14天,空白组同前方法涂抹橄榄油。肉眼观察局部给药处皮肤的变化,耳厚薄、硬度、粗糙程度、毛囊口有无黑角拴等。末次给药后24h,处死动物,将兔耳涂抹煤焦油处活检取皮,常规福尔马林固定,石蜡包埋,切片、HE染色,在光镜下从角化程度、表皮增厚程度、毛囊扩张程度、毛囊内角化物质多少和炎细胞浸润等方面重点进行组织学改变观察并与模型组对比。
给药前后各组兔耳肉眼观察:正常对照组,兔耳菲薄柔软,可见清晰毛细血管,兔耳道开口处可见毛囊排列整齐,大小均匀。模型对照组:涂煤焦油1周后,可见试验区增厚,变硬,毛囊口有黑色角栓,涂煤焦油2周后,毛囊口明显黑色角栓,呈黑头粉刺状,毛囊口隆起呈丘疹状,大小不均。4周后耳部仍可见明显的毛囊角栓,但丘疹略减轻,变平。青春驻颜膏高剂量组给药后耳部轻度增厚,毛囊呈轻度小丘突状。局部毛囊角栓减少,部分角栓脱落后遗留点状凹陷的毛囊,丘疹变平、减少,小剂量组的影响不明显,维A酸乳膏作用较药物组为优。
给药前后各组兔耳光镜下观察:正常对照组,兔耳表皮较薄,表皮、真皮交界清楚,可见毛囊。模型对照组:可见表皮及毛囊上皮不规则增生,角化过度,毛孔扩张,其中充满角化物质,相邻的毛囊相互融合;真皮内见炎性细胞浸润。青春驻颜膏高剂量组表皮增生程度明显减轻,部分毛囊口轻度扩张,有少量疏松角化物质充填,未见毛囊漏斗部扩大如壶状,未见炎性细胞。维甲酸乳膏组相当或优于大剂量组。
3.2活血化瘀作用(对大鼠血液流变学的影响)
SD大鼠60只,体重180~220,雌雄各半,随机分成6组,即青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组、维甲酸乳膏组、模型组和空白组;除空白组每天给予生理盐水,模型组只造模不给药,其余各组分别给予相应剂量的药物共7天,第7天,除空白对照组外,其余各组大鼠皮下注射盐酸肾上腺素注射液 (Adr)(10ug/1ml)0.08mL/100g两次,间隔4小时,在两次注射Adr 之间将大鼠浸入冰水内5分钟造成急性血瘀模型,处置后停食,次日各组大鼠用乙醚麻醉,从股静脉取血,用肝素抗凝(50mg/ml,0.5ml/ 只),血液流变仪器快速测定大鼠血液流变学各项指标。
大鼠皮下注射盐酸肾上腺素注射液(Adr)并浸入冰水内5分钟造成急性血瘀模型的方法是可靠的,其全血粘度高、中、低切以及血浆粘度与空白对照组比较差异显著(P<0.01);青春驻颜膏对肾上腺素加冷刺激造成大鼠急性血瘀模型的血液流变学各项指标改善作用是明显的,其中青春驻颜膏大剂量组对全血粘度高切值的影响和对血浆粘度的影响与模型组比较差异显著(P<0.01和P<0.05);青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组对全血还原粘度的影响与模型组比较差异显著(P<0.01和P<0.05)。
4.抗炎试验
4.1二甲苯致小鼠耳肿试验
取昆明种小鼠60只,SPF级,雌雄各半,随机分为6组,每组 10只,分别为青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组、空白对照组、基质对照组组和维甲酸乳膏组。将相应的药物均匀涂抹于相应组别的小鼠左侧耳壳正反两面,空白对照组涂生理盐水,30min后用微量注射器于左侧耳壳正反两面均匀涂抹二甲苯0.1ml/只,1h后处死动物,延耳廓基线剪下两耳,于同一部位用打孔器冲下耳片(直径8~9mm)称重,以两耳片质量之差为肿胀度,按以下公式求出给药组的肿胀抑制率。
肿胀度=肿胀耳重-正常耳重
本试验结果显示,青春驻颜膏大剂量对二甲苯所致小鼠的耳壳肿胀度具有明显的影响(P<0.05);基质卡波姆对耳壳肿胀度的影响不明显,使用后无显著性差异(P>0.05)。
4.2对炎症大鼠足跖肿胀的影响
取SD大鼠60只,SPF级,雌雄各半,随机分为6组,每组10 只,分别为青春驻颜膏大、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组、空白对照组、维甲酸乳膏对照组及基质对照组,先用电子数显外径千分尺测量各组大鼠右足垫厚度作为正常值后,各组大鼠均于右足垫部皮内注射完全角叉菜胶(FCA)复制炎性肿胀模型(0.1ml/只),并开始给药,除生理盐水组外,其它各组动物涂抹于后爪,并保持后爪10分钟不着地,以使药物被充分吸收);给药后1h、2h、3h、4h、 5h、6h分别测量各组大鼠右足垫厚度,记录结果,并按以下公式计算肿胀率:
药后1h,青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组对大鼠足跖肿胀的抑制作用明显,与空白组比较均具有差异性显著(P<0.01、0.001和0.05),其中中剂量较维甲酸乳膏比较差异性显著(P<0.05);药后2h,青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组对大鼠足跖肿胀的抑制作用明显,与空白组比较差异性显著(P<0.01、0.001和0.01),大、中、小剂量作用较维甲酸乳膏明显(P<0.01);药后3h,青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组对大鼠足跖肿胀的抑制作用明显,与空白组比较差异性显著(P<0.01),其中青春驻颜膏中剂量作用较维甲酸乳膏组明显(P<0.05);药后4h,青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组对大鼠足跖肿胀的抑制作用明显,与空白组比较差异性显著(P<0.001),青春驻颜膏中剂量作用较维甲酸乳膏明显(P<0.05);药后5h,青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组、青春驻颜膏小剂量组对大鼠足跖肿胀的抑制作用明显,与空白组比较差异性显著(P<0.01、0.01和0.05),青春驻颜膏中剂量作用较维甲酸乳膏明显(P<0.05);药后6h,青春驻颜膏大、中、小剂量对大鼠足跖肿胀的抑制作用明显,与空白组比较差异性显著(P<0.001、0.01和0.05),大、中、小剂量作用较维甲酸乳膏为优(P<0.001、0.01和0.05)。药后1~ 6h,基质卡波姆对角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀影响不明显,与空白对照组比较无显著性差异(P>0.05)。
以上试验结果表明,青春驻颜膏大剂量、中剂量、小剂量对角叉菜胶皮下注射所导致的足跖肿胀均具有一定的抑制作用,说明该制剂具有一定的抗炎和消肿作用。
5.免疫抑制作用
动物分组及处理:将小鼠随机分为模型组、空白组、青春驻颜膏大剂量组、青春驻颜膏中剂量组和青春驻颜膏小剂量组,每组10只。除空白组外,其它4组于实验前l天用10%硫化钠在小鼠腹部固定部位3cm×1cm面积脱毛,温水洗净。实验第l、2天(致敏期)于小鼠腹部脱毛部位涂1%DNCB(2,4-二硝基氯苯),每天1次,每次20μL,第3天、4天、5天不涂药,第6天(诱发期)于小鼠左耳背涂10.5%DNCB 20μL诱发皮炎,正常对照组只给生理盐水,不作任何处理。除正常对照组外,其它组自第1次涂药前2h开始涂抹相应药物的水溶液,每天1次,连续用药5天,第6天诱发前2h及诱发后4h各给药1次。最后一次给药2h后处死小鼠,取出每只小鼠的胸腺、脾脏,用电子天平称重,求出脏器指数。将脾脏匀浆后常规方法制备淋巴细胞悬液,按说明书操作,用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群检测。
免疫器官(胸腺、脾)不仅是T、B淋巴细胞分化成熟的场所,也是产生特异性免疫应答的场所,其质量降低程度反映了机体的免疫功能状态。实验表明,青春驻颜膏能调节迟发型超敏反应小鼠升高的 CD4和CD8值,并对免疫器官(胸腺、脾)指数有明显抑制作用,提示该药物可在一定程度上抑制细胞免疫,其中大剂量与模型组比差异均具有统计学意义(P<0.05)。
本试验研究表明,按相当于临床剂量的20倍、10倍、5倍对小鼠外用给药,按相当于临床剂量的12、6、3倍对大白耳兔外用给药,青春驻颜膏对兔耳实验性角化有一定的改善作用,对大鼠血液流变学各项指标有不同的改变,能够降低交叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀,能够对抗二甲苯致小鼠耳肿程度,对2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱发的小鼠迟发型超敏反应有一定的抑制作用,说明本发明青春驻颜膏具有对抗实验性角化作用、活血化瘀作用、抗炎消肿作用及免疫抑制作用等,因此,本青春驻颜膏对面部斑具有一定的治疗作用。
临床应用:
第一组:年龄30~50岁、面部有黄褐斑的女性患者50名,黄褐斑的症状有面部蝶形斑、色泽暗黑、片状斑,发病时间3月以上。
第二组:年龄20~40岁、面部有色素斑的女性患者50名,色素斑(痘印、晒斑)颜色暗黑、散在斑,发病时间3月以上。
以上两组患者均按用法使用本发明青春驻颜膏一个半疗程(三十天),治愈30例,显效50例,有效93例,无效7例;总有效率为 93%。
实施例1
按照重量份配比选取荷叶2份、莲子2份、白术5份、白芷4份、白芨5份、白芍2份、百合2份、茯苓5份、珍珠粉10份;将荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉全部粉碎成粉末,将粉碎的药材粉末全部投入超临界流体萃取反应釜中,然后加入改性剂乙醇0.3ml,以水作为吸引,得到纯度很高的药粉;向消毒之后的乳化锅中加入水、铁皮石斛提取物1份、艾地苯2份、二裂酵母发酵产物溶胞物1份,搅拌得到混合液;在混合液中倒入黄原胶,然后,在加入丁二醇,搅拌使其分散于醇中;在乳化锅的混合液中加入药粉,均质搅拌10-15min;将乳化锅加热70℃~80℃,搅拌速度开至30~40RPM,充分搅拌10~20min,形成混合液,搅拌均匀后,降温至25℃~30℃,即得所述精华,灌装,包装。
实施例2
按照重量份配比选取荷叶3份、莲子3份、白术7份、白芷7份、白芨8份、白芍4份、百合4份、茯苓7份、珍珠粉13份;将荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉全部粉碎成粉末,将粉碎的药材粉末全部投入超临界流体萃取反应釜中,然后加入改性剂乙醇0.3ml,以水作为吸引,得到纯度很高的药粉;向消毒之后的乳化锅中加入水、铁皮石斛提取物3份、艾地苯4份、二裂酵母发酵产物溶胞物4份,搅拌得到混合液;在混合液中倒入黄原胶,然后,在加入丁二醇,搅拌使其分散于醇中;在乳化锅的混合液中加入药粉,均质搅拌10-15min;将乳化锅加热70℃~80℃,搅拌速度开至30~40RPM,充分搅拌10~20min,形成混合液,搅拌均匀后,降温至25℃~30℃,即得所述精华,灌装,包装。
实施例3
按照重量份配比选取荷叶5份、莲子5份、白术10份、白芷8 份、白芨10份、白芍5份、百合6份、茯苓10份、珍珠粉15份;将荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉全部粉碎成粉末,将粉碎的药材粉末全部投入超临界流体萃取反应釜中,然后加入改性剂乙醇0.3ml,以水作为吸引,得到纯度很高的药粉;向消毒之后的乳化锅中加入水、铁皮石斛提取物5份、艾地苯6份、二裂酵母发酵产物溶胞物8份,搅拌得到混合液;在混合液中倒入黄原胶,然后,在加入丁二醇,搅拌使其分散于醇中;在乳化锅的混合液中加入药粉,均质搅拌10-15min;将乳化锅加热70℃~80℃,搅拌速度开至30~40RPM,充分搅拌10~20min,形成混合液,搅拌均匀后,降温至25℃~30℃,即得所述精华,灌装,包装。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.青春驻颜膏,其特征在于,由以下重量份的原料制备而成:荷叶2-5份、莲子2-5份、白术5-10份、白芷4-8份、白芨5-10份、白芍2-5份、百合2-6份、茯苓5-10份、珍珠粉10-15份、铁皮石斛提取物1-5份、艾地苯2-6份、二裂酵母发酵产物溶胞物1-8份、水7-59份,其制备方法如下:
S1按照重量份配比选取荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉;
S2将荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉全部粉碎成粉末,将粉碎的药材粉末全部投入超临界流体萃取反应釜中,然后加入改性剂乙醇0.3ml,以水作为吸引,得到纯度很高的药粉;
S3向消毒之后的乳化锅中加入水、铁皮石斛提取物、艾地苯、二裂酵母发酵产物溶胞物,搅拌得到混合液;
S4在混合液中倒入黄原胶,然后,在加入丁二醇,搅拌使其分散于醇中;
S5在乳化锅的混合液中加入药粉,均质搅拌10-15min;
S6将乳化锅加热70℃~80℃,搅拌速度开至30~40RPM,充分搅拌10~20min,形成混合液,搅拌均匀后,降温至25℃~30℃,即得所述精华,灌装,包装。
2.根据权利要求1所述的青春驻颜膏,其特征在于,所述步骤S2萃取条件为压力34.5mPa,温度60℃,静态萃取时间10min,动态萃取量10ml。
3.根据权利要求1所述的青春驻颜膏,其特征在于,所述步骤S2将粉末过50目筛。
4.根据权利要求1所述的青春驻颜膏,其特征在于,所述步骤S1将选取荷叶、莲子、白术、白芷、白芨、白芍、百合、茯苓、珍珠粉,在60℃分别烘烤至含水量小于10%。
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Legal Events
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---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20210716 |