CN113082204A - 一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,以动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子为主要原料,加有无菌生理盐水以及辅料组成,配方为每100 mL中含有胎盘免疫球蛋白0.4‑1 g;转移因子0.2‑0.7 g;聚乙二醇4000‑6000 2‑10 g;木糖醇1‑10 g;余量由无菌生理盐水补足。本发明复合免疫增强剂将动物胎盘免疫球蛋白和脾脏转移因子完美的结合,使免疫球蛋白和转移因子发挥协同作用,与市面上现有类似产品相比,生物利用度较高、免疫增效作用强、无毒副作用、能够促进动物生长,改善动物的健康状态,可减少服用次数,缩短疗程。有助于实现减抗替抗的目的,间接提高人类食品安全。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂及其制备方法。
背景技术
胎盘是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官,在分娩时排除体外。人类使用胎盘的历史源远流长。约400多年前,李时珍在其集中国古今医学之大成的《本草纲目》中,认为人、羊、猪、牛等哺乳动物的胎盘可以入药,并将胎盘以“紫河车”之名。传统医学认为,胎盘味甘咸,性温,归肺肝肾经,具有温肾益精,补气养血的功效。现代生物学及医学研究证明,妊娠期承担如此复杂的功能的动物和人胎盘,不仅为妊娠期胎儿的发育提供了坚强的后盾,并且在娩出后仍含有多种免疫球蛋白、活性肽、干扰素、激素等生物活性物质及磷脂、氨基酸、矿物质和多种多糖等成分,是一种理想的免疫调节剂。
转移因子是由具有生物活性的多肽及核苷酸组成的混合物,它能够将供体细胞所具有的细胞免疫功能转移给受体细胞,非特异性地增强一般细胞免疫,提高受体的免疫功能,而且安全无毒、无药物残留,是一种新型的免疫调节剂。主要用于对病毒性感染及自身免疫性疾病的治疗,配合疫苗使用可显著提高抗体滴度,增强免疫效果。脾脏是机体的免疫器官之一,含有游离氨基酸、多肽等40多种小分子物质,与机体的免疫功能有着密切的关系,从中提取的转移因子是一种非常有效的免疫增强剂,且具有无抗原性、无致畸、无致突变等优点。
在现行的动物胎盘处理手段来看,基本分为直接遗弃、简单掩埋、进入化粪池、焚烧几种。直接遗弃对环境的污染最重,简单掩埋污染水源且难以降解其中的生物性物质,进入化粪池甚至会在返田中对农作物造成二次污染,焚烧对空气的污染太重。畜禽脾脏也为加工过程中的废物。动物胎盘和脾脏的丢弃不仅对环境造成重大污染,同时,也不符合资源循环利用的基本原则。因此联合开发动物胎盘和脾脏有着极广的应用前景。
发明内容
本发明解决的技术问题:提供一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,该免疫增强剂生物利用度较高、免疫增效作用强、无毒副作用、能够促进动物生长,改善动物的健康状态,实现减抗替抗的目的,间接提高人类食品安全。
本发明采用的技术方案:一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,由下述重量份的原料组成:以动物胎盘(猪、牛、羊等)免疫球蛋白、脾脏(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等)转移因子为主要原料,加有无菌生理盐水以及辅料组成,其具体配方为每100 mL中含有胎盘免疫球蛋白0.4-1 g;转移因子0.2-0.7 g;聚乙二醇4000-6000 2-10 g;木糖醇1-10 g;余量由无菌生理盐水补足,pH为6.0-8.0。
进一步地,所述一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂产品其商品名为:源气。
其中的动物胎盘免疫球蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)以新鲜猪胎盘及产仔猪血为原料,去除胎膜和脐带,加等重量的浓度为1-6%的氯化钠盐水浸渍,先用胶体磨粉碎,用超声波裂解120秒,反复15次,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣可作为动物饲料蛋白;
(2)将滤液离心,收集上清液和红色沉淀,将红色沉淀加等体积去离子水,用超声波裂解120秒,反复20次,搅拌,使红血球充分溶血;
(3)然后按体积加硫酸铵至饱和度50-60%,待硫酸铵完全溶解后,静置2小时,过滤,收集滤液和沉淀,将沉淀透析脱盐即得免疫球蛋白溶液。
其中的动物脾脏转移因子是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)取正常脾解冻,用自来水清洗血迹和污渍后,以灭菌生理盐水清洗3次,去出系膜、脂肪称重。
(2)用绞肉机绞碎后,组织重量(g)按w/v加等量的灭菌生理盐水混匀,用胶体磨破碎120秒,反复冻融2-3次。最后一次解冻后,用超声波裂解120秒,反复15次,在此操作中温度不超过15℃。
(3)加入等体积的蒸馏水混匀,在低温冷冻离心机3800r/min离心10min。用纱布过滤上层清液,倒掉下层滤渣。
(4)上清液用截留分子量为8000-1万的透析袋4℃冰箱透析48h,即为原液,备用。
本发明动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂的制备方法如下:
(1)先将聚乙二醇和木糖醇按配方称重后混合,加入总体积50-80%的生理盐水,搅拌均匀,加热至120-130℃保持30-40 min,密封,降至室温放置在万级净化室待用,为配料1。
(2)在万级净化室内分取免疫球蛋白液和转移因子液按配方和生产用量混合后经过0.22μm除菌膜除菌,为配料2。
(3)在净化百级条件下无菌操作将灭菌后的配料1和配料2液体混合,用饱和氢氧化钙调pH值至6.0-8.0,搅拌均匀,最后用灭菌生理盐水加至总体积即为复合无菌液。
(4)将复合无菌液按规格要求直接灌封,冷冻保存。
本发明的有益效果:
1、本发明复合免疫增强剂将动物胎盘免疫球蛋白和脾脏转移因子完美的结合,使免疫球蛋白和转移因子发挥协同作用,与市面上现有类似产品相比,生物利用度较高、免疫增效作用强、无毒副作用、能够促进动物生长,改善动物的健康状态,可减少服用次数,缩短疗程。目前尚未见有此类配方报道。
2、发明产品配方组合科学适用,各组份均为纯生物原料,对人体无毒副作用,各个成分之间具有相互协同作用,适口性好,大大提高产品的食用舒适性,可实现减抗替抗的目的,间接提高人类食品安全。
3、本发明产品生产采用传统工艺与现代工艺相结合,简易设备与现代设备相结合,可操作性强,规模可大可小,生产成本低,经济效益显著。
4、本发明将动物胎盘和脾脏废物利用,符合资源循环利用的基本原则,同时对环境保护非常有益。
具体实施方式
以下通过具体实施例再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅局限于以下的实施例。在不脱离本发明上述技术思想的情况下,根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更,均应包括在本发明的范围内。
实施例1
一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,由下述重量份的原料组成:以猪胎盘免疫球蛋白、鸡脾脏转移因子为主要原料,加有无菌生理盐水以及辅料组成,其具体配方为每100 mL中含有胎盘免疫球蛋白0.4g;转移因子0.2g;聚乙二醇4000 2g;木糖醇1g;余量由无菌生理盐水补足,pH为6.0。
其中的动物胎盘免疫球蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)以新鲜猪胎盘及产仔猪血为原料,去除胎膜和脐带,加等重量的浓度为1%的氯化钠盐水浸渍,先用胶体磨粉碎,用超声波裂解120秒,反复15次,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣可作为动物饲料蛋白;
(2)将滤液离心,收集上清液和红色沉淀,将红色沉淀加等体积去离子水,用超声波裂解120秒,反复20次,搅拌,使红血球充分溶血;
(3)然后按体积加硫酸铵至饱和度50%,待硫酸铵完全溶解后,静置2小时,过滤,收集滤液和沉淀,将沉淀透析脱盐即得免疫球蛋白溶液。
其中的动物脾脏转移因子是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)取正常脾解冻,用自来水清洗血迹和污渍后,以灭菌生理盐水清洗3次,去出系膜、脂肪称重。
(2)用绞肉机绞碎后,组织重量(g)按w/v加等量的灭菌生理盐水混匀,用胶体磨破碎120秒,反复冻融2次。最后一次解冻后,用超声波裂解120秒,反复15次,在此操作中温度不超过15℃。
(3)加入等体积的蒸馏水混匀,在低温冷冻离心机3800r/min离心10min。用纱布过滤上层清液,倒掉下层滤渣。
(4)上清液用截留分子量为8000-1万的透析袋4℃冰箱透析48h,即为原液,备用。
本发明动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂的制备方法如下:
(1)先将聚乙二醇和木糖醇按配方称重后混合,加入总体积50%的生理盐水,搅拌均匀,加热至120℃保持30min,密封,降至室温放置在万级净化室待用,为配料1。
(2)在万级净化室内分取免疫球蛋白液和转移因子液按配方和生产用量混合后经过0.22μm除菌膜除菌,为配料2。
(3)在净化百级条件下无菌操作将灭菌后的配料1和配料2液体混合,用饱和氢氧化钙调pH值至6.0,搅拌均匀,最后用灭菌生理盐水加至总体积即为复合无菌液。
(4)将复合无菌液按规格要求直接灌封,冷冻保存。
实施例2
一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,由下述重量份的原料组成:以牛胎盘免疫球蛋白、鸭脾脏转移因子为主要原料,加有无菌生理盐水以及辅料组成,其具体配方为每100 mL中含有胎盘免疫球蛋白1 g;转移因子0.7 g;聚乙二醇6000 10g;木糖醇10 g;余量由无菌生理盐水补足,pH为8.0。
其中的动物胎盘免疫球蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的:
1、以新鲜猪胎盘及产仔猪血为原料,去除胎膜和脐带,加等重量的浓度为6%的氯化钠盐水浸渍,先用胶体磨粉碎,用超声波裂解120秒,反复15次,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣可作为动物饲料蛋白;
2、将滤液离心,收集上清液和红色沉淀,将红色沉淀加等体积去离子水,用超声波裂解120秒,反复20次,搅拌,使红血球充分溶血;
3、然后按体积加硫酸铵至饱和度60%,待硫酸铵完全溶解后,静置2小时,过滤,收集滤液和沉淀,将沉淀透析脱盐即得免疫球蛋白溶液。
其中的动物胎盘免疫球蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)以新鲜猪胎盘及产仔猪血为原料,去除胎膜和脐带,加等重量的浓度为6%的氯化钠盐水浸渍,先用胶体磨粉碎,用超声波裂解120秒,反复15次,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣可作为动物饲料蛋白;
(2)将滤液离心,收集上清液和红色沉淀,将红色沉淀加等体积去离子水,用超声波裂解120秒,反复20次,搅拌,使红血球充分溶血;
(3)然后按体积加硫酸铵至饱和度60%,待硫酸铵完全溶解后,静置2小时,过滤,收集滤液和沉淀,将沉淀透析脱盐即得免疫球蛋白溶液。
其中的动物脾脏转移因子是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)取正常脾解冻,用自来水清洗血迹和污渍后,以灭菌生理盐水清洗3次,去出系膜、脂肪称重。
(2)用绞肉机绞碎后,组织重量(g)按w/v加等量的灭菌生理盐水混匀,用胶体磨破碎120秒,反复冻融3次。最后一次解冻后,用超声波裂解120秒,反复15次,在此操作中温度不超过15℃。
(3)加入等体积的蒸馏水混匀,在低温冷冻离心机3800r/min离心10min。用纱布过滤上层清液,倒掉下层滤渣。
(4)上清液用截留分子量为8000-1万的透析袋4℃冰箱透析48h,即为原液,备用。
本发明动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂的制备方法如下:
(1)先将聚乙二醇和木糖醇按配方称重后混合,加入总体积80%的生理盐水,搅拌均匀,加热至130℃保持40 min,密封,降至室温放置在万级净化室待用,为配料1。
(2)在万级净化室内分取免疫球蛋白液和转移因子液按配方和生产用量混合后经过0.22μm除菌膜除菌,为配料2。
(3)在净化百级条件下无菌操作将灭菌后的配料1和配料2液体混合,用饱和氢氧化钙调pH值至8.0,搅拌均匀,最后用灭菌生理盐水加至总体积即为复合无菌液。
(4)将复合无菌液按规格要求直接灌封,冷冻保存。
实施例3
一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,由下述重量份的原料组成:以羊胎盘免疫球蛋白、鹅脾脏转移因子为主要原料,加有无菌生理盐水以及辅料组成,其具体配方为每100 mL中含有胎盘免疫球蛋白0.8 g;转移因子0.5 g;聚乙二醇4000 8g;木糖醇8g;余量由无菌生理盐水补足,pH为7.0。
其中的动物胎盘免疫球蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)以新鲜猪胎盘及产仔猪血为原料,去除胎膜和脐带,加等重量的浓度为4%的氯化钠盐水浸渍,先用胶体磨粉碎,用超声波裂解120秒,反复15次,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣可作为动物饲料蛋白;
(2)将滤液离心,收集上清液和红色沉淀,将红色沉淀加等体积去离子水,用超声波裂解120秒,反复20次,搅拌,使红血球充分溶血;
(3)然后按体积加硫酸铵至饱和度55%,待硫酸铵完全溶解后,静置2小时,过滤,收集滤液和沉淀,将沉淀透析脱盐即得免疫球蛋白溶液。
其中的动物脾脏转移因子是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)取正常脾解冻,用自来水清洗血迹和污渍后,以灭菌生理盐水清洗3次,去出系膜、脂肪称重。
(2)用绞肉机绞碎后,组织重量(g)按w/v加等量的灭菌生理盐水混匀,用胶体磨破碎120秒,反复冻融3次。最后一次解冻后,用超声波裂解120秒,反复15次,在此操作中温度不超过15℃。
(3)加入等体积的蒸馏水混匀,在低温冷冻离心机3800r/min离心10min。用纱布过滤上层清液,倒掉下层滤渣。
(4)上清液用截留分子量为8000-1万的透析袋4℃冰箱透析48h,即为原液,备用。
本发明动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂的制备方法如下:
(1)先将聚乙二醇和木糖醇按配方称重后混合,加入总体积50-80%的生理盐水,搅拌均匀,加热至125℃保持35 min,密封,降至室温放置在万级净化室待用,为配料1。
(2)在万级净化室内分取免疫球蛋白液和转移因子液按配方和生产用量混合后经过0.22μm除菌膜除菌,为配料2。
(3)在净化百级条件下无菌操作将灭菌后的配料1和配料2液体混合,用饱和氢氧化钙调pH值至7.0,搅拌均匀,最后用灭菌生理盐水加至总体积即为复合无菌液。
(4)将复合无菌液按规格要求直接灌封,冷冻保存。
上述实施例,只是本发明的较佳实施例,并非用来限制本发明实施范围,故凡以本发明权利要求所述内容所做的等效变化,均应包括在本发明权利要求范围之内。
Claims (5)
1.一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,其特征在于,所述复合免疫增强剂,由下述重量份的原料组成:以动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子为主要原料,加有无菌生理盐水以及辅料组成,其具体配方为每100 mL中含有胎盘免疫球蛋白0.4-1 g;转移因子0.2-0.7 g;聚乙二醇4000-6000 2-10 g;木糖醇1-10 g;余量由无菌生理盐水补足,pH为6.0-8.0。
2.根据权利要求1所述的一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,其特征在于,所述动物胎盘为猪、牛、羊等动物胎盘,所述动物脾脏为猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等脾脏。
3.根据权利要求1所述的一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,其特征在于,所述其中的动物胎盘免疫球蛋白是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)以新鲜猪胎盘及产仔猪血为原料,去除胎膜和脐带,加等重量的浓度为1-6%的氯化钠盐水浸渍,先用胶体磨粉碎,用超声波裂解120秒,反复15次,过滤,分别收集滤液和滤渣,滤渣可作为动物饲料蛋白;
(2)将滤液离心,收集上清液和红色沉淀,将红色沉淀加等体积去离子水,用超声波裂解120秒,反复20次,搅拌,使红血球充分溶血;
(3)然后按体积加硫酸铵至饱和度50-60%,待硫酸铵完全溶解后,静置2小时,过滤,收集滤液和沉淀,将沉淀透析脱盐即得免疫球蛋白溶液;
(4)根据权利要求1所述的一种高效复合型解霉祛毒制剂,其特征在于,所述无求主要成分包括发妥曲珠利、癸氧奎酯、缓释因子等。
4.根据权利要求1所述的一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,其特征在于,所述其中的动物脾脏转移因子是通过以下提取工艺步骤得到的:
(1)取正常脾脏解冻,用自来水清洗血迹和污渍后,以灭菌生理盐水清洗3次,去出系膜、脂肪称重;
(2)用绞肉机绞碎后,组织重量(g)按w/v加等量的灭菌生理盐水混匀,用胶体磨破碎120秒,反复冻融2-3次,最后一次解冻后,用超声波裂解120秒,反复15次,在此操作中温度不超过15℃;
(3)加入等体积的蒸馏水混匀,在低温冷冻离心机3800r/min离心10min,用纱布过滤上层清液,倒掉下层滤渣;
(4)上清液用截留分子量为8000-1万的透析袋4℃冰箱透析48h,即为原液,备用。
5.根据权利要求1所述的一种动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂,其特征在于,所述动物胎盘免疫球蛋白、脾脏转移因子复合免疫增强剂的制备方法如下:
(1)先将聚乙二醇和木糖醇按配方称重后混合,加入总体积50-80%的生理盐水,搅拌均匀,加热至120-130℃保持30-40 min,密封,降至室温放置在万级净化室待用,为配料1;
(2)在万级净化室内分取免疫球蛋白液和转移因子液按配方和生产用量混合后经过0.22μm除菌膜除菌,为配料2;
(3)在净化百级条件下无菌操作将灭菌后的配料1和配料2液体混合,用饱和氢氧化钙调pH值至6.0-8.0,搅拌均匀,最后用灭菌生理盐水加至总体积即为复合无菌液;
(4)将复合无菌液按规格要求直接灌封,冷冻保存。
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- 2021-03-25 CN CN202110320528.7A patent/CN113082204A/zh active Pending
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