CN105638907A - 一种提高免疫力的婴儿配方奶粉 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种提高免疫力的婴儿配方奶粉，属于配方奶粉技术领域。本发明所提供的婴儿配方奶粉除具有蛋白质、乳糖、脂质、维生素、矿物质等必备营养物质以外，每100g婴儿配方奶粉中还含有1000～2000mg乳铁蛋白，350～400mg免疫球蛋白，12～13μg的αs1-酪激肽-6。通过实验证明，食用本发明所提供的婴儿配方奶粉的小鼠，体质增长率及免疫力明显优于对照组，说明本发明的配方奶粉能够显著的提高婴儿的免疫力，提高婴儿抵抗疾病的能力。

Description

一种提高免疫力的婴儿配方奶粉
技术领域
本发明涉及一种提高免疫力的婴儿配方奶粉，属于配方奶粉技术领域。
背景技术
婴儿时期是人类一生中发育最迅速的时期，这一时期，营养物质的不断供给是极为必要的。众所周知，母乳是婴儿最理想的天然食品，其具有任何婴儿配方食品所不能比拟的优点。然后，现代社会中许多母亲由于工作、疾病等原因，很多婴儿无法获得充足的母乳，因此成分接近母乳的婴儿配方奶粉成为国内外乳品行业发展趋势。
目前，配方奶粉还是停留在宏观模拟人乳的阶段，因为缺乏人乳中存在的多种生物活性物质如免疫球蛋白、溶菌酶、神经生长因子NGF、免疫活性肽等，所以使用婴儿配方奶粉的婴儿自身免疫力差，易患有肺炎、痢疾、腹泻等疾病。常见的乳中常见的免疫活性物质包括免疫球蛋白和乳铁蛋白等。
免疫球蛋白：是一类具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，在动物体内具有重要的免疫调节作用。它能与其他非特异性抗菌因子如乳铁蛋白、溶菌酶等发生协同作用，能高效地预防疾病、增强抗病能力、促进组织修复和外伤痊愈，是免疫系统最关键的组成物质之一。免疫球蛋白在免疫系统中能够增强白细胞和巨噬细胞的吞噬作用及抗原呈递作用，在杀灭病原性微生物细胞及致病菌种发挥重要作用。
免疫活性肽：免疫活性肽是指一类存在于生物体内具有免疫功能的多肽，能够刺激机体淋巴细胞、促进淋巴细胞的增殖、增强巨嗜细胞的吞噬能力、抑制肿瘤细胞的生长，进而增强机体免疫力，降低发病率。免疫活性肽按来源可分为微生物来源免疫活性肽、植物来源活性肽和动物来源免疫活性肽。动物来源免疫活性肽是目前获得免疫活性肽的主要来源，其中研究最多的是乳源性免疫调节肽、胎盘免疫调节肽等。目前所发现的乳蛋白来源的免疫活性肽中,最小的只有2个氨基酸残基,最大的也只有17个氨基酸残基,它们不具免疫原性,却以完整肽的形式被肠道吸收。这些小分子肽能够刺激机体自身淋巴细胞的增殖、促进细胞因子的释放、增强机体巨噬细胞的吞噬能力,且不会引起机体的免疫排斥反应。αs1-酪激肽-6(αs1-casokinins-6)可以刺激人的吞噬细胞活性，预防许多细菌，尤其是肠细菌的侵染。
发明内容
为解决现有婴幼儿配方奶粉中免疫活性物质免疫效果不佳，使用婴儿配方奶粉的婴儿自身免疫力差的问题，本发明提供一种提高免疫力的婴儿配方奶粉。所采取的技术方案如下：
本发明的目的在于提供一种提高免疫力的婴儿配方奶粉，该婴儿配方奶粉含有蛋白质、碳水化合物、脂质、维生素和矿物质。其中，每100g配方奶粉中含有1000～2000mg乳铁蛋白，350～400mg免疫球蛋白，12～13μg的αs1-酪激肽-6。
优选地，每100g配方奶粉中含有1600mg乳铁蛋白，380mg免疫球蛋白，12.5μg的αs1-酪激肽-6。
优选地，所述αs1-酪激肽-6，是通过如下方法制备的：
a)牛乳经过脱脂后调节pH11.0，加入CaCl2溶液后调节pH7.0，产物10000r/min离心,上清液调节pH3.8后再次离心，沉淀取出后20℃水溶解，调节pH4.5离心得到αs-酪蛋白沉淀，反复溶解、冷却；
b)预处理：将10250U胃蛋白酶溶于pH7.2的PBS中，定成1L溶液，得到胃蛋白酶溶液；将10000U胰蛋白酶溶于pH7.2的PBS中，定成1L溶液，得到胰蛋白酶溶液；
c)将步骤a)得到的αs-酪蛋白溶液和胰蛋白酶溶液按照1:1的体积比进行酶解反应，用0.1M的NaHCO3调节pH值至7.0，37℃条件下消化2h，得到消化液I；
d)将步骤c)处理的消化液I和胃蛋白酶溶液按照1:1的体积比进行酶解反应，用0.1M的HCl调节pH值至3.0，37℃条件下消化1.5h，得到消化液II；
e)将步骤d)获得的消化液II进入3KDa超滤离心管，4℃，4000r/min条件下离心20min，得到上清液；
f)将步骤e)得到的上清液通过G-10葡聚糖凝胶层析柱，筛选出氨基酸组成和排列与αs1-酪蛋白的194-199残基序列Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Trp的多肽，得到牛乳αs1-酪激肽-6溶液；
g)将步骤f)所得牛乳αs1-酪激肽-6肽溶液进行真空浓缩及干燥，得到牛乳αs1-酪激肽-6。
优选地，还包括脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚糖、二十二碳六烯酸、花生四烯酸、牛磺酸、胆碱、核苷酸、复合维生素和复合矿物质。
优选地，所述核苷酸，每100g婴儿配方奶粉中含有16.16mg，其中，AMP3.68mg，GMP1.92mg，CMP8mg，UMP2.56mg。
优选地，所述复合维生素，每100g婴儿配方奶粉中含有96.22mg，包括维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg。
优选地，所述复合矿物质，每100g婴儿配方奶粉中含有1698.742mg，包括锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg。
优选地，所述结构油脂为1,3-二油酸2-棕榈酸甘油三酯。
更优选地，每100g婴儿配方奶粉的具体组成如下：脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白1600mg、免疫球蛋白380mg、αs1-酪激肽-612.5μg，除以上组分之外，其余组成为鲜牛乳喷干粉。
本发明的另一目的在于提供一种所述婴儿配方奶粉的制备方法，该方法的步骤如下：
7)将按配方组成称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料混合均匀,得原料奶；
8)在温度为50℃，均质机压力在15MPa条件下对步骤1)所得原料奶进行均质处理，获得均质奶；
9)在温度为85℃条件下对步骤2)所得均质奶进行杀菌处理，获得杀菌奶；
10)在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，对步骤3)进行浓缩，获得浓缩奶；
11)步骤4)所得浓缩奶在压力为15-20MPa，进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
12)经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时,先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-61溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
所述方法的具体步骤如下：
①混合原料：将按预定比例称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料等配料混合均匀,得混合溶液。
②均质：预热至40℃后在高压均质机内均质,均质温度为50℃,均质压力为15MPa,冷却到8℃后放入暂存罐中暂存,暂存时间不超过12h；
③杀菌：控制杀菌温度为85℃,杀菌时间为30秒；
④浓缩：在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，进行浓缩，获得浓缩奶；
⑤喷雾干燥：所得浓缩奶在压力为15-20MPa,进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
⑥活性物质添加：经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时,先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
本发明获得的有益效果如下：
本发明针对市面上的婴儿配方奶粉易导致婴儿自身免疫力差，易患有肺炎、痢疾、腹泻等疾病这一特点，特别添加了增强免疫力的乳铁蛋白、免疫球蛋白和αs1-酪激肽-6。乳铁蛋白具有广谱抗菌,抗病毒感染作用,调节机体免疫功能,增强机体抗病能力；抑制人体肿瘤细胞的作用。免疫球蛋白能与其他非特异性抗菌因子如乳铁蛋白、溶菌酶等发生协同作用，在免疫系统中能够增强白细胞和巨噬细胞的吞噬作用及抗原呈递作用，在杀灭病原性微生物细胞及致病菌种发挥重要作用。αs1-酪激肽-6是一种免疫活性肽，能够刺激机体淋巴细胞、促进淋巴细胞的增殖、增强巨嗜细胞的吞噬能力、抑制肿瘤细胞的生长，进而增强机体免疫力，降低发病率。同时添加三种免疫活性物质使得配方奶粉在更加贴近母乳，满足婴儿器官生长发育的同时，还能够增强婴儿自身免疫力。
本发明的配方设计中除了添加最基本的三大营养素蛋白质、脂肪、碳水化合物之外，同时添加了多种维生素和矿物质，在配方奶粉中添加了有利于增强免疫力的核苷酸。核苷酸可维持免疫系统的正常功能，如提高人和动物对细菌、真菌感染的抵抗力，增强细胞免疫能力，刺激淋巴细胞增生作用。
通过添加适量的结构油脂，改变植物油甘油三酯的结构使其更加接近母乳脂肪结构，从而有力预防新生儿便秘，增加脂肪和钙的吸收，促进骨骼生长。通过添加低聚果糖(FOS)、改善肠道菌群，抑制肠道有害生成物及致病菌的生长，从而保证肠道抵抗病毒的能力。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受实施例的限制。
以下实施例中所用材料、试剂、方法和仪器，未经特殊说明，均为本领域常规材料、试剂、方法和仪器，本领域技术人员均可通过商业渠道获得。
实施例1
αs1-酪激肽-6的制备方法：
a)牛乳经过脱脂后调节pH11.0，加入CaCl2溶液后调节pH7.0，产物10000r/min离心,上清液调节pH3.8后再次离心，沉淀取出后20℃水溶解，调节pH4.5离心得到αs-酪蛋白沉淀，反复溶解、冷却；
b)预处理：将10250U胃蛋白酶溶于pH7.2的PBS中，定成1L溶液，得到胃蛋白酶溶液；将10000U胰蛋白酶溶于pH7.2的PBS中，定成1L溶液，得到胰蛋白酶溶液；
c)将步骤a)得到的αs-酪蛋白溶液和胰蛋白酶溶液按照1:1的体积比进行酶解反应，用0.1M的NaHCO3调节pH值至7.0，37℃条件下消化2h，得到消化液I；
d)将步骤c)处理的消化液I和胃蛋白酶溶液按照1:1的体积比进行酶解反应，用0.1M的HCl调节pH值至3.0，37℃条件下消化1.5h，得到消化液II；
e)将步骤d)获得的消化液II进入3KDa超滤离心管，4℃，4000r/min条件下离心20min，得到上清液；
f)将步骤e)得到的上清液通过G-10葡聚糖凝胶层析柱，筛选出氨基酸组成和排列与αs1-酪蛋白的194-199残基序列相当(Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Trp)的多肽，得到牛乳αs1-酪激肽-6溶液；
g)将步骤f)所得牛乳αs1-酪激肽-6肽溶液进行真空浓缩及干燥，得到牛乳αs1-酪激肽-6。
实施例2
1.配方
本实施例的每100g配方奶粉中含有如下组分：
脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白1000mg、免疫球蛋白350mg、αs1-酪激肽-69μg。
上述实施例中所述的核苷酸如下重量比例：AMP3.68mg；GMP1.92mg；CMP8mg；UMP2.56mg组成，总量为16.16mg。
2.生产方法
①混合原料：将按预定比例称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料等配料混合均匀,得混合溶液。
②均质：预热至40℃后在高压均质机内均质,均质温度为50℃,均质压力为15MPa,冷却到8℃后放入暂存罐中暂存,暂存时间不超过12h；
③杀菌：控制杀菌温度为85℃,杀菌时间为30秒；
④浓缩：在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，进行浓缩，获得浓缩奶；
⑤喷雾干燥：所得浓缩奶在压力为15-20MPa,进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
⑥活性物质添加：经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时，先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
实施例3
1.配方
本实施例的每100g配方奶粉中含有如下组分：
脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白1000mg、免疫球蛋白350mg、αs1-酪激肽-612μg。
上述实施例中所述的核苷酸如下重量比例：AMP3.68mg；GMP1.92mg；CMP8mg；UMP2.56mg组成，总量为16.16mg。
2.生产方法
①混合原料：将按预定比例称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料等配料混合均匀,得混合溶液。
②均质：预热至40℃后在高压均质机内均质,均质温度为50℃,均质压力为15MPa,冷却到8℃后放入暂存罐中暂存,暂存时间不超过12h；
③杀菌：控制杀菌温度为85℃,杀菌时间为30秒；
④浓缩：在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，进行浓缩，获得浓缩奶；
⑤喷雾干燥：所得浓缩奶在压力为15-20MPa,进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
⑥活性物质添加：经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时，先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
实施例4
1.配方
本实施例的每100g配方奶粉中含有如下组分：
脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白1600mg、免疫球蛋白380mg、αs1-酪激肽-612.5μg。
上述实施例中所述的核苷酸如下重量比例：AMP3.68mg；GMP1.92mg；CMP8mg；UMP2.56mg组成，总量为16.16mg。
2.生产方法
①混合原料：将按预定比例称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料等配料混合均匀,得混合溶液。
②均质：预热至40℃后在高压均质机内均质,均质温度为50℃，均质压力为15MPa，冷却到8℃后放入暂存罐中暂存，暂存时间不超过12h；
③杀菌：控制杀菌温度为85℃,杀菌时间为30秒；
④浓缩：在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，进行浓缩，获得浓缩奶；
⑤喷雾干燥：所得浓缩奶在压力为15-20MPa,进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
⑥活性物质添加：经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时,先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
实施例5
1.配方
本实施例的每100g配方奶粉中含有如下组分：
脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白2000mg、免疫球蛋白400mg和αs1-酪激肽-613μg。
上述实施例中所述的核苷酸如下重量比例：AMP3.68mg；GMP1.92mg；CMP8mg；UMP2.56mg组成，总量为16.16mg。
2.生产方法
①混合原料：将按预定比例称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料等配料混合均匀,得混合溶液。
②均质：预热至40℃后在高压均质机内均质,均质温度为50℃,均质压力为15MPa,冷却到8℃后放入暂存罐中暂存,暂存时间不超过12h；
③杀菌：控制杀菌温度为85℃,杀菌时间为30秒；
④浓缩：在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，进行浓缩，获得浓缩奶；
⑤喷雾干燥：所得浓缩奶在压力为15-20MPa,进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
⑥活性物质添加：经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时，先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
实施例6
1.配方
本实施例的每100g配方奶粉中含有如下组分：
脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白2000mg、免疫球蛋白400mg、αs1-酪激肽-616μg。
上述实施例中所述的核苷酸如下重量比例：AMP3.68mg；GMP1.92mg；CMP8mg；UMP2.56mg组成，总量为16.16mg。
2.生产方法
①混合原料：将按预定比例称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料等配料混合均匀,得混合溶液。
②均质：预热至40℃后在高压均质机内均质,均质温度为50℃，均质压力为15MPa，冷却到8℃后放入暂存罐中暂存，暂存时间不超过12h；
③杀菌：控制杀菌温度为85℃,杀菌时间为30秒；
④浓缩：在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，进行浓缩，获得浓缩奶；
⑤喷雾干燥：所得浓缩奶在压力为15-20MPa,进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
⑥活性物质添加：经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时,先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解,通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中；然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
实施例7
免疫婴儿配方奶粉的功能性评价。
实验材料
普通婴儿配方奶粉(除不添加乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6外，其他成分与实施例2中所述免疫婴儿配方奶粉均相同)，免疫婴儿配方奶粉(包括实施例2-6)，小鼠8周龄，体质量随机分为6组，分别为A组(普通婴儿配方奶粉)、B组(实施例2免疫婴儿配方奶粉)、C组(实施例3免疫婴儿配方奶粉)、D组(实施例4免疫婴儿配方奶粉)、E组(实施例5免疫婴儿配方奶粉)和F组(实施例6免疫婴儿配方奶粉)。所有动物均自由摄食正常日粮，喂养时间30天。
实验方法
1.免疫婴儿配方奶粉对小鼠体增长率的影响
实验处理前对每组的每只小鼠进行标记，空腹称取每只小鼠体质量并记录，处死小鼠前空腹称取体质量并记录，体质量增长率/％＝(实验后小鼠空腹体质量－实验前小鼠空腹体质量)/实验前小鼠空腹体质量×100。小鼠体质量增长率统计结果见表1。
2.免疫婴儿配方奶粉对小鼠脾指数和胸腺指数的影响
称取各个组每只小鼠的体质量并记录，处死小鼠后，无菌取脾和胸腺称取质量后记录。按照下式进行计算。统计结果见表2。
脾指数＝实验后小鼠脾质量(mg)/实验后小鼠空腹体质量(g)
胸腺指数＝实验后小鼠胸腺质量(mg)/实验后小鼠空腹体质量(g)
3.免疫婴儿配方奶粉对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
无菌状态下制备脾细胞悬液，并调整细胞浓度为300万个/mL，将脾细胞悬液分2组加入24孔培养板中，并加入75μLConA液，置于5％CO2、37℃二氧化碳箱中孵育72h。培养结束前4h，每孔加入0.7mL不含胎牛血清的RPMI1640培养液及MTT(5mg/mL)50mL/孔，继续培养12h后，每孔加入1MlDMSO，溶解后分装到96孔培养板中，每孔3个平行复孔，用酶标仪570nm波长测定光密度值。淋巴细胞体外转化刺激指数(SI)按照下式进行计算。统计结果见表3。
刺激指数＝加ConA孔的光密度值/不加ConA孔的光密度值
4.免疫婴儿配方奶粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响
制备1％鸡红细胞悬液，实验小鼠预先于实验前24h经腹腔注射1mL5％的可溶性淀粉溶液，实验时于腹腔注射1％鸡红细胞悬液1mL，30min后处死，腹腔注入0.9％氯化钠水溶液1mL，用滴管吸取腹腔渗出液1mL，分滴于2张载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，移至37℃孵箱内温育30min后；0.9％氯化钠水溶液漂洗，以1:1丙酮甲醇溶液固定，4％(体积/体积)Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，蒸馏水漂洗晾干；油镜观察结果，每张玻片计数100个巨噬细胞，记录其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数和巨噬细胞吞噬的鸡红细胞总数，计算吞噬率和吞噬指数。染色镜检计数100个巨噬细胞计算吞噬百分率和吞噬指数。
吞噬百分率/％＝吞有鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞×100
吞噬指数＝100个巨噬细胞中所吞噬的鸡红细胞数/100个巨噬细胞
实验结果
1.免疫婴儿配方奶粉对小鼠体增长率的影响
由表1可知免疫婴儿配方奶粉能够促进小鼠体质量增长，并且实施例4组与其他组相比小鼠体质量增长率均高于其他实验组。
表1.小鼠体质量增长率统计结果(n＝10)
组别 体质量增长率
A 0.61±0.028
B 0.67±0.021
C 0.74±0.038
D 0.79±0.035
E 0.77±0.032
F 0.76±0.023
2.免疫婴儿配方奶粉对小鼠脾指数和胸腺指数的影响
由表2可知免疫婴儿配方奶粉对小鼠脾和胸腺都有促进增长的作用，并且实施例4组与其他组相比对小鼠的脾和胸腺的促进增长作用均高于其他实验组。
表2.小鼠脾指数和胸腺指数统计结果(n＝10)
组别 脾指数 胸腺指数
A 0.70±0.022 0.26±0.035
B 0.76±0.031 0.32±0.029
C 0.79±0.028 0.37±0.033
D 0.81±0.032 0.41±0.036
E 0.78±0.025 0.35±0.033
F 0.77±0.029 0.35±0.028
3.免疫婴儿配方奶粉对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响
由表3可知喂食免疫婴儿配方奶粉的小鼠其淋巴细胞转化率与普通配方奶粉相比有显著提高，增强了脾脏中B淋巴细胞的活性，表明免疫婴儿配方奶粉具有一定的促进B淋巴细胞转化的作用。
表3.小鼠淋巴细胞体外转化刺激指数统计结果(n＝10)
组别 刺激指数
A 0.42±0.025
B 0.50±0.031
C 0.48±0.042
D 0.56±0.045
E 0.51±0.038
F 0.50±0.041
4.免疫婴儿配方奶粉对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响
由表4可知喂食免疫婴儿配方奶粉的小鼠其巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力比普通奶粉喂养小鼠吞噬能力强。尤其是实施例4的免疫婴儿配方奶粉组较其他5组都有明显增强吞噬能力的作用。说明免疫配方奶粉尤其是实施例4对小鼠的非特异性免疫功能有显著增强作用。
表4.小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞吞噬百分率及吞噬指数统计结果(n＝10)
组别 吞噬百分率 吞噬指数
A 35.43±2.84 0.82±0.03
B 42.68±3.15 0.86±0.04
C 48.47±2.84 0.89±0.02
D 51.26±2.32 0.93±0.04
E 49.05±3.25 0.90±0.05
F 48.37±3.03 0.90±0.03
鉴于以上实验结果，本发明免疫婴儿配方奶粉具有增强免疫活性的作用，是一种能够提高免疫力的婴儿配方奶粉。
虽然本发明已以较佳的实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可以做各种改动和修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一种提高免疫力的婴儿配方奶粉，含有蛋白质、碳水化合物、脂质、维生素和矿物质，其特征在于，每100g配方奶粉中含有1000～2000mg乳铁蛋白，350～400mg免疫球蛋白，12～13μg的αs1-酪激肽-6。
2.根据权利要求1所述一种提高免疫力的婴儿配方奶粉，其特征在于，每100g配方奶粉中含有1600mg乳铁蛋白，380mg免疫球蛋白，12.5μg的αs1-酪激肽-6。
3.根据权利要求1所述的婴儿配方奶粉，其特征在于，所述αs1-酪激肽-6，是通过如下方法制备的：
a)牛乳经过脱脂后调节pH11.0，加入CaCl2溶液后调节pH7.0，产物10000r/min离心,上清液调节pH3.8后再次离心，沉淀取出后20℃水溶解，调节pH4.5离心得到αs-酪蛋白沉淀，反复溶解、冷却；
b)预处理：将10250U胃蛋白酶溶于pH7.2的PBS中，定成1L溶液，得到胃蛋白酶溶液；将10000U胰蛋白酶溶于pH7.2的PBS中，定成1L溶液，得到胰蛋白酶溶液；
c)将步骤a)得到的αs-酪蛋白溶液和胰蛋白酶溶液按照1:1的体积比进行酶解反应，用0.1M的NaHCO3调节pH值至7.0，37℃条件下消化2h，得到消化液I；
d)将步骤c)处理的消化液I和胃蛋白酶溶液按照1:1的体积比进行酶解反应，用0.1M的HCl调节pH值至3.0，37℃条件下消化1.5h，得到消化液II；
e)将步骤d)获得的消化液II进入3KDa超滤离心管，4℃，4000r/min条件下离心20min，得到上清液；
f)将步骤e)得到的上清液通过G-10葡聚糖凝胶层析柱，筛选出氨基酸组成和排列与αs1-酪蛋白的194-199残基序列Thr-Thr-Met-Pro-Leu-Trp的多肽，得到牛乳αs1-酪激肽-6溶液；
g)将步骤f)所得牛乳αs1-酪激肽-6肽溶液进行真空浓缩及干燥，得到牛乳αs1-酪激肽-6。
4.根据权利要求1所述一种提高免疫力的婴儿配方奶粉，其特征在于，还包括脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚糖、二十二碳六烯酸、花生四烯酸、牛磺酸、胆碱、核苷酸、复合维生素和复合矿物质。
5.根据权利要求4所述的婴儿配方奶粉，其特征在于，所述核苷酸，每100g婴儿配方奶粉中含有16.16mg，其中，AMP3.68mg，GMP1.92mg，CMP8mg，UMP2.56mg。
6.根据权利要求4所述的婴儿配方奶粉，其特征在于，所述复合维生素，每100g婴儿配方奶粉中含有96.22mg，包括维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg。
7.根据权利要求4所述的婴儿配方奶粉，其特征在于，所述复合矿物质，每100g婴儿配方奶粉中含有1698.742mg，包括锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg。
8.根据权利要求4所述的婴儿配方奶粉，其特征在于，所述结构油脂为1,3-二油酸2-棕榈酸甘油三酯。
9.根据权利要求4所述的婴儿配方奶粉，其特征在于，每100g婴儿配方奶粉的具体组成如下：脱盐乳清粉25g、结构油脂10g、乳糖8g、低聚果糖420mg、二十二碳六烯酸1800mg、花生四烯酸2000mg、膳食纤维200mg、核苷酸16.16mg、牛磺酸28mg、肌醇200mg、胆碱180mg、左旋肉碱12mg、维生素A200μg、维生素D10μg、维生素E10mg、维生素K126.3μg、维生素B1251μg、维生素B2385μg、维生素B6530μg、维生素B1220μg、维生素C120mg、烟酸3000μg、泛酸1000μg、叶酸0.8mg、生物素30μg、锌3mg、硒12μg、碘50μg、铜250μg、锰230μg、磷302mg、钠125mg、钾420mg、钙415mg、铁1.2mg、镁32mg、氯400mg、乳铁蛋白1600mg、免疫球蛋白380mg、αs1-酪激肽-612.5μg，除以上组分之外，其余组成为鲜牛乳喷干粉。
10.一种权利要求1-9任一所述婴儿配方奶粉的制备方法，其特征在于，步骤如下：
1)将按配方称取的脱盐乳清粉、结构油脂、乳糖、低聚果糖、胆碱、核苷酸、牛磺酸、左旋肉碱、维生素预混料、矿物质预混料混合均匀，获得原料奶；
2)在温度为50℃，均质压力15MPa条件下对步骤1)所得原料奶进行均质处理，获得均质奶；
3)在温度为85℃条件下对步骤2)所得均质奶进行杀菌处理，获得杀菌奶；
4)在真空至0.10MPa,温度为50-55℃，压力＜0.03MPa条件下，对步骤3)进行浓缩，获得浓缩奶；
5)步骤4)所得浓缩奶在压力为15-20MPa，进风温度为145-170℃，排风温度为70-80℃时进行喷雾干燥；
6)经离心喷雾干燥成粉后至流化床二次干燥时，先用50倍重量的无菌水将乳铁蛋白、免疫球蛋白、αs1-酪激肽-6溶解，通过喷涂装置均匀涂布于流化床中的奶粉中，然后进行流化床二次干燥得到婴儿配方奶粉。
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