CN113080466B - 一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法 - Google Patents
一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN113080466B CN113080466B CN202110383736.1A CN202110383736A CN113080466B CN 113080466 B CN113080466 B CN 113080466B CN 202110383736 A CN202110383736 A CN 202110383736A CN 113080466 B CN113080466 B CN 113080466B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mixed peptide
- collagen mixed
- soybean isoflavone
- collagen
- peptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims abstract description 126
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims abstract description 126
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims abstract description 126
- GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N isoflavone Chemical compound C=1OC2=CC=CC=C2C(=O)C=1C1=CC=CC=C1 GOMNOOKGLZYEJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 87
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 87
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 title claims abstract description 87
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 71
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 title claims abstract description 47
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 63
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims abstract description 27
- 230000005684 electric field Effects 0.000 claims abstract description 23
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 claims abstract description 20
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims abstract description 20
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims abstract description 20
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims abstract description 18
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 37
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 31
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 31
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 20
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 20
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 18
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 18
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 16
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 16
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 16
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 16
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N daidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 16
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 16
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 16
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 9
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 9
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 claims description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000007240 daidzein Nutrition 0.000 claims description 8
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 8
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 7
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZCOLJUOHXJRHDI-FZHKGVQDSA-N Genistein 7-O-glucoside Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)c1cc(O)c2C(=O)C(c3ccc(O)cc3)=COc2c1 ZCOLJUOHXJRHDI-FZHKGVQDSA-N 0.000 claims description 4
- CJPNHKPXZYYCME-UHFFFAOYSA-N Genistin Natural products OCC1OC(Oc2ccc(O)c3OC(=CC(=O)c23)c4ccc(O)cc4)C(O)C(O)C1O CJPNHKPXZYYCME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- YCUNGEJJOMKCGZ-UHFFFAOYSA-N Pallidiflorin Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC=CC(O)=C2C1=O YCUNGEJJOMKCGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 4
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 4
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 4
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 claims description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N hydroxyl Chemical compound [OH] TUJKJAMUKRIRHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 4
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 4
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 230000005389 magnetism Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 abstract description 2
- 239000011173 biocomposite Substances 0.000 abstract 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 12
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 238000002792 antioxidant assay Methods 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 235000003687 soy isoflavones Nutrition 0.000 description 4
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 3
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 3
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 2
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 102000018832 Cytochromes Human genes 0.000 description 1
- 108010052832 Cytochromes Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-PHDIDXHHSA-N L-Glutathione Natural products OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-PHDIDXHHSA-N 0.000 description 1
- 230000002292 Radical scavenging effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003075 phytoestrogen Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
- A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
- A23J3/342—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of collagen; of gelatin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/30—Physical treatment, e.g. electrical or magnetic means, wave energy or irradiation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/30—Physical treatment, e.g. electrical or magnetic means, wave energy or irradiation
- A23L5/32—Physical treatment, e.g. electrical or magnetic means, wave energy or irradiation using phonon wave energy, e.g. sound or ultrasonic waves
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开一种制备Fe3O4/胶原混肽‑大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法，包括以下步骤：1、鱼明胶二步酶解；2、胶原混肽分离纯化(＜1000Da)；3、高压脉冲电场促羟基自由基生成；4、胶原混肽‑大豆异黄酮共价化合物制备；5、胶原混肽‑大豆异黄酮共价化合物分离纯化；6、Fe3O4/胶原混肽‑大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备。本发明采用凝胶色谱技术结合高效液相色谱技术分离纯化胶原混肽，提高了分离纯度和效率；利用高压脉冲电场协同超声技术制备胶原肽‑大豆异黄酮共价化合物，大大缩短了合成时间，提高了大豆异黄酮的抗氧化活性；制备的Fe3O4/胶原混肽‑大豆异黄酮共价化合物复合材料具有一定磁性，能为可控释放和靶向作用等提供新思路。
Description
技术领域
本发明涉及一种胶原混肽的改性加工技术，尤其涉及一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法。
背景技术
大豆异黄酮是从大豆子叶和胚轴中提取得到的天然植物雌激素。有研究表明大豆异黄酮具有抗氧化、调节肠道菌群和预防糖尿病等功能。胶原混肽是一类具有生物活性如抗氧化、美白肌肤及补水保湿的肽类物质。鱼明胶经水解后可以形成不同分子量的胶原混肽。将鱼明胶制备成胶原混肽将扩大鱼明胶在食品领域的应用。
高压脉冲电场，作为一种新兴的非热食品加工技术，其在食品领域中的应用主要是食物灭菌、钝化酶和有效成分提取等。高压脉冲电场具有传递均匀和能耗低等优点，同时它还具备电离作用，可以产生一些阴离子或阳离子以作用于生命体。目前，关于应用高压脉冲电场促胶原混肽和大豆异黄酮共价结合未有相关报道。
磁性纳米材料具有尺寸小、比表面积大和磁效应等特点。将胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物复合到磁性纳米材料可以增加在其体内的稳定性，并且可实现靶向释放。目前，关于制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料未有相关报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法，利用二步酶解法制备胶原肽；分离纯化1000Da以下的胶原混肽；高压脉冲电场技术协同超声技术促进胶原肽-大豆异黄酮共价化合物形成；最后制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料。
为实现上述目的，本发明一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料的方法，包括以下步骤：1.鱼明胶二步酶解
向鱼明胶中加入胃蛋白酶进行水解。水解完成后，调节溶液pH，再加入木瓜蛋白酶进行水解，获得胶原混肽母液。该胶原混肽母液经冷冻干燥后得到胶原混肽初干粉；
2.胶原混肽分离纯化(<1000Da)
利用凝胶色谱技术分离步骤1得到的胶原混肽初干粉，利用高效液相色谱技术分析胶原混肽的分子量大小，并收集分子量在1000Da以下的胶原混肽；
3、高压脉冲电场促羟基自由基生成
向胶原混肽溶液中加入过氧化氢和抗坏血酸混合后，采用高压脉冲电场处理，以促进羟基自由基生成；
4、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物制备
向步骤3中的溶液中加入大豆异黄酮，采用超声技术处理，制备胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
5、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分离纯化
采用AB-8大孔树脂和Sephadex LH-20分二步分离纯化胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
6、Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备
制备磁性Fe3O4纳米粒子，随后制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料。
优选的，步骤1中相对于10份的鱼明胶，胃蛋白酶的加入量为1～3份。
优选的，步骤1中胃蛋白酶的水解pH值是2～3，胃蛋白酶的水解时间为1～3h。
优选的，步骤1中相对于10份的脱腥鱼明胶，木瓜蛋白酶的加入量为1～2份。
优选的，步骤1中将木瓜蛋白酶的水解pH调节为6.8～7.2，木瓜蛋白酶的水解时间为1～3h。
优选的，步骤1中胶原混肽母液经6000～7000rpm离心20～30min后，收集上澄清液经冷冻干燥48h后获得胶原混肽初干粉。
优选的，步骤2中凝胶色谱技术所用的填料是Sephadex G-25，玻璃层析柱规格是1.6*50cm，流动相为超纯水，平衡层析柱所用流动相流速为0.5～0.6mL/min，进样量100～200mg，洗脱样品的流动相流速是0.4～0.5mL/min。
优选的，步骤2中高效液相色谱技术所用流动相包括乙腈和超纯水(含0.1～0.2％三氟乙酸)。
优选的，步骤2中相对40份乙腈，超纯水为60份。
优选的，步骤3中相对5份过氧化氢，抗坏血酸为1～3份。
优选的，步骤3中脉冲电场处理强度为40～60kV/cm，处理时间为40～60s，每隔10～15min处理一次，总时长为0.5～1h。
优选的，步骤4中相对于9份的胶原混肽，大豆异黄酮的加入量为0.5～1份。
优选的，步骤4中大豆异黄酮包括黄豆苷原、黄豆黄苷和染料木苷，使用比例为0.1～0.5：0.1～0.5：0.1～0.5。
优选的，步骤4超声处理功率为400～600W，处理时间为1～2h。
优选的，步骤5中AB-8大孔树脂层析柱的流动相为超纯水和95％的乙醇溶液(含0.1～0.3％盐酸)。
优选的，步骤5中Sephadex LH-20层析柱的流动相为80～100％的乙醇溶液。
优选的，步骤6中磁性Fe3O4纳米粒子制备方法为：2～3份FeCl3·6H2O中加入1～2份FeSO4·7H2O并加水溶解，搅拌该混合物使其混匀，在70～80℃下加热该混合物2～4h。该过程中加入浓氨水将pH调节至9～11，使溶液变黑。整个反应过程用氮气作为保护气体。得到的黑色产品用超纯水清洗干净后，置于40～60℃真空干燥箱中干燥24～48h，最后得到磁性Fe3O4纳米粒子。
优选的，步骤6中Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备方法为：将磁性Fe3O4纳米粒子和胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分别制备成溶液，按1：10～50比例混合，在50～60℃恒温水浴锅中磁力搅拌反应15～24h，分离上澄清液，经冷冻干燥后得到Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料。
因此，本发明采用上述一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法，利用二步酶解法制备胶原混肽，提高了水解效率和胶原混肽的多样性；采用凝胶色谱技术结合高效液相色谱技术分离纯化1000Da以下的胶原混肽，提高了分离纯度和效率；利用高压脉冲电场协同超声技术制备胶原肽-大豆异黄酮共价化合物，大大缩短了合成时间，同时提高了大豆异黄酮的抗氧化活性；制备的Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物复合材料具有一定磁性，能为可控释放和靶向作用等提供新思路。
附图说明
图1是细胞色素C、抑肽酶、杆菌肽、L-谷胱甘肽(氧化型)和L-羟脯氨酸标准品的高效液相色谱图。
图2是标准曲线图，根据各标准品的出峰时间和它们的相对分子量的对数，绘制图2相对分子质量校正曲线:Lg(MW)＝-0.1833T+6.5004(R2＝0.9732)，其中黑色实线表示标准曲线图，黑色虚线为趋势线。
图3是按照实施例1方法水解制备的胶原混肽凝胶色谱图和高效液相色谱图。由图3a可以看出，经两种酶水解后的胶原混肽经凝胶色谱分离后，出现四个峰，其中出峰时间越晚，样品的分子量越小。峰4出峰时间最晚，而且出峰强度最大(84.74％)，因此收集峰4组分进行高效液相色谱分析。图3b是峰4的高效液相色谱，由图可知，该胶原混肽主要在19.11和21.54min出峰，根据校正曲线计算得，该胶原肽的分子量主要是356.45～995.41Da，且含量高达92.69％。
图4为胶原混肽和大豆异黄酮共价结合机理图，过氧化氢和抗坏血酸反应产生的羟基自由基会进攻胶原混肽上的氨基或巯基，形成中间产物，中间产物再与大豆异黄酮发生共价反应。
具体实施方式
以下将对本发明作进一步的描述，需要说明的是，本实施例以本技术方案为前提，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围并不限于本实施例。
为进一步说明，本发明提供了四个实施例，
实施例一
1.鱼明胶二步酶解
向鱼明胶中加入胃蛋白酶进行水解。水解完成后，调节溶液pH，再加入木瓜蛋白酶进行水解，获得胶原混肽母液。该胶原混肽母液经冷冻干燥后得到胶原混肽初干粉；
2.胶原混肽分离纯化(<1000Da)
利用凝胶色谱技术分离步骤1得到的胶原混肽初干粉，利用高效液相色谱技术分析胶原混肽的分子量大小，并收集分子量在1000Da以下的胶原混肽；
3、高压脉冲电场促羟基自由基生成
向胶原混肽溶液中加入过氧化氢和抗坏血酸混合后，采用高压脉冲电场处理，以促进羟基自由基生成；
4、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物制备
向步骤3中的溶液中加入大豆异黄酮，采用超声技术处理，制备胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
5、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分离纯化
采用AB-8大孔树脂和Sephadex LH-20分二步分离纯化胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
6、Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备
制备磁性Fe3O4纳米粒子，随后制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料。Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备方法为：将磁性Fe3O4纳米粒子和胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分别制备成溶液，按1：30比例混合，在60℃恒温水浴锅中磁力搅拌反应24h，分离上澄清液，经冷冻干燥后得到Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料。
步骤1中相对于10份的鱼明胶，胃蛋白酶的加入量为1.5份。
步骤1中胃蛋白酶的水解pH值是2，胃蛋白酶的水解时间为1.5h。
步骤1中相对于10份的脱腥鱼明胶，木瓜蛋白酶的加入量为1份。
步骤1中将木瓜蛋白酶的水解pH调节为7，木瓜蛋白酶的水解时间为2h。
步骤1中胶原混肽母液经7000rpm离心20min后，收集上澄清液经冷冻干燥48h后获得胶原混肽初干粉。
步骤2中凝胶色谱技术所用的填料是Sephadex G-25，玻璃层析柱规格是1.6*50cm，流动相为超纯水，平衡层析柱所用流动相流速为0.6mL/min，进样量200mg，洗脱样品的流动相流速是0.4mL/min。
步骤2中高效液相色谱技术所用流动相包括乙腈和超纯水(含0.1～0.2％三氟乙酸)。
步骤2中相对40份乙腈，超纯水为60份。
步骤3中相对5份过氧化氢，抗坏血酸为1.5份。
步骤3中脉冲电场处理强度为60kV/cm，处理时间为50s，每隔10min处理一次，总时长为0.5h。
步骤4中相对于9份的胶原混肽，大豆异黄酮的加入量为1份。
步骤4中大豆异黄酮包括黄豆苷原、黄豆黄苷和染料木苷，使用比例为4：2：4。
步骤4超声处理功率为400，处理时间为2h。
步骤5中AB-8大孔树脂层析柱的流动相为超纯水和95％的乙醇溶液(含0.3％盐酸)。
步骤5中Sephadex LH-20层析柱的流动相为80％(洗脱胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物)和100％的乙醇溶液(洗脱为结合的大豆异黄酮)。
步骤6中磁性Fe3O4纳米粒子制备方法为：2份FeCl3·6H2O中加入1份FeSO4·7H2O并加水溶解，搅拌该混合物使其混匀，在70℃下加热该混合物3h。该过程中加入浓氨水将pH调节至9～11，使溶液变黑。整个反应过程用氮气作为保护气体。得到的黑色产品用超纯水清洗干净后，置于50℃真空干燥箱中干燥24h，最后得到磁性Fe3O4纳米粒子。
抗氧化测定：以ABTS+清除能力表征胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的抗氧化活性。用70％乙醇溶液将ABTS+溶液稀释至其吸光值在734nm处为0.7。600μL稀释的ABTS+溶液与100μL 25mg/mL共价化合物混合，室温反应10min后测定其吸光值OD，ABTS自由基清除能力按下式计算：
其中OD0为去离子水取代胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的吸光值，ODs为胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物与ABTS+溶液反应后的吸光值。
实验结果表明，按照实施例一得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力为85.23％。溶液成无色状态，表明胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物和Fe3O4几乎反应完全。
实施例二，包括以下步骤：
1.鱼明胶二步酶解
向鱼明胶中加入胃蛋白酶进行水解。水解完成后，调节溶液pH，再加入木瓜蛋白酶进行水解，获得胶原混肽母液。该胶原混肽母液经冷冻干燥后得到胶原混肽初干粉；
2.胶原混肽分离纯化(<1000Da)
利用凝胶色谱技术分离步骤1得到的胶原混肽初干粉，利用高效液相色谱技术分析胶原混肽的分子量大小，并收集分子量在1000Da以下的胶原混肽；
3、高压脉冲电场促羟基自由基生成
向胶原混肽溶液中加入过氧化氢和抗坏血酸混合后，采用高压脉冲电场处理，以促进羟基自由基生成；
4、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物制备
向步骤3中的溶液中加入大豆异黄酮，采用超声技术处理，制备胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
5、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分离纯化
采用AB-8大孔树脂和Sephadex LH-20分二步分离纯化胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
6、Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备
制备磁性Fe3O4纳米粒子，随后制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料。Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备方法为：将磁性Fe3O4纳米粒子和胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分别制备成溶液，按1：20比例混合，在60℃恒温水浴锅中磁力搅拌反应24h，分离上澄清液，经冷冻干燥后得到Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料。
步骤1中相对于10份的鱼明胶，胃蛋白酶的加入量为1.5份。
步骤1中胃蛋白酶的水解pH值是2，胃蛋白酶的水解时间为1.5h。
步骤1中相对于10份的脱腥鱼明胶，木瓜蛋白酶的加入量为1份。
步骤1中将木瓜蛋白酶的水解pH调节为7，木瓜蛋白酶的水解时间为2h。
步骤1中胶原混肽母液经7000rpm离心20min后，收集上澄清液经冷冻干燥48h后获得胶原混肽初干粉。
步骤2中凝胶色谱技术所用的填料是Sephadex G-25，玻璃层析柱规格是1.6*50cm，流动相为超纯水，平衡层析柱所用流动相流速为0.6mL/min，进样量200mg，洗脱样品的流动相流速是0.4mL/min。
步骤2中高效液相色谱技术所用流动相包括乙腈和超纯水(含0.1～0.2％三氟乙酸)。
步骤2中相对40份乙腈，超纯水为60份。
步骤3中相对5份过氧化氢，抗坏血酸为1.5份。
步骤3中脉冲电场处理强度为40kV/cm，处理时间为60s，每隔10min处理一次，总时长为0.5h。
步骤4中相对于9份的胶原混肽，大豆异黄酮的加入量为1份。
步骤4中大豆异黄酮包括黄豆苷原、黄豆黄苷和染料木苷，使用比例为4：4：2。
优选的，步骤4超声处理功率为400，处理时间为2h。
步骤5中AB-8大孔树脂层析柱的流动相为超纯水和95％的乙醇溶液(含0.3％盐酸)。
步骤5中Sephadex LH-20层析柱的流动相为80％(洗脱胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物)和100％的乙醇溶液(洗脱为结合的大豆异黄酮)。
步骤6中磁性Fe3O4纳米粒子制备方法为：2份FeCl3·6H2O中加入1份FeSO4·7H2O并加水溶解，搅拌该混合物使其混匀，在70℃下加热该混合物3h。该过程中加入浓氨水将pH调节至9～11，使溶液变黑。整个反应过程用氮气作为保护气体。得到的黑色产品用超纯水清洗干净后，置于50℃真空干燥箱中干燥24h，最后得到磁性Fe3O4纳米粒子。
抗氧化测定：采用实施例一的方法测量实施例二得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力。
实验结果表明，按照实施例二得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力为82.19％。溶液成淡黄色，表明胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物多余。
实施例三，本实施例与实施例一的区别在于：步骤3中脉冲电场处理强度为50kV/cm，处理时间为50s，每隔10min处理一次，总时长为0.5h；步骤6磁性Fe3O4纳米粒子和胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物按1：40比例混合。
抗氧化测定：采用实施例一的方法测量实施例三得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力。
实验结果表明，按照实施例三得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力为79.14％。溶液成淡黄色，表明磁性Fe3O4纳米粒子多余。
实施例四，本实施例与实施例一的区别在于：步骤3中脉冲电场处理强度为40kV/cm，处理时间为40s，每隔15min处理一次，总时长为0.45h。
抗氧化测定：采用实施例一的方法测量实施例三得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力。
实验结果表明，按照实施例三得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的ABTS+清除能力为74.68％。溶液成无色。
综上所述，相比于实施例四的步骤3中脉冲电场处理条件。本发明采用的实施例一或二，得到的胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物具有更强的抗氧化能力。相比于实施例二或三中磁性Fe3O4纳米粒子和胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物的比例，实施例一得到的磁性复合材料结合程度最好。
以上所述仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形、改进及替代，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (2)
1.一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法，其特征在于：包括以下步骤：
1.鱼明胶二步酶解
向鱼明胶中加入胃蛋白酶进行水解；水解完成后，调节溶液pH，再加入木瓜蛋白酶进行水解，获得胶原混肽母液；该胶原混肽母液经冷冻干燥后得到胶原混肽初干粉；
2.胶原混肽分离纯化
利用凝胶色谱技术分离步骤1得到的胶原混肽初干粉，利用高效液相色谱技术分析胶原混肽的分子量大小，并收集分子量在1000Da以下的胶原混肽；
3、高压脉冲电场促羟基自由基生成
向胶原混肽溶液中加入过氧化氢和抗坏血酸混合后，采用高压脉冲电场处理，以促进羟基自由基生成；
4、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物制备
向步骤3中的溶液中加入大豆异黄酮，采用超声技术处理，制备胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
5、胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分离纯化
采用AB-8大孔树脂和Sephadex LH-20分二步分离纯化胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物；
6、Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料制备
将制备的磁性Fe3O4纳米粒子和胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物分别制备成溶液，按1：10～50比例混合，在50～60℃恒温水浴锅中磁力搅拌反应15～24h，分离上澄清液，经冷冻干燥后得到Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性复合材料；
所述步骤1中相对于10份的鱼明胶，胃蛋白酶的加入量为1～3份；胃蛋白酶的水解pH值是2～3，胃蛋白酶的水解时间为1～3h；
所述步骤1中相对于10份的脱腥鱼明胶，木瓜蛋白酶的加入量为1～2份；木瓜蛋白酶的水解pH调节为6.8～7.2，木瓜蛋白酶的水解时间为1～3h；
所述步骤1中胶原混肽母液经6000～7000rpm离心20～30min后，收集上澄清液经冷冻干燥48h后获得胶原混肽初干粉；
所述步骤2中凝胶色谱技术所用的填料是Sephadex G-25，玻璃层析柱规格是1.6*50cm，流动相为超纯水，平衡层析柱所用流动相流速为0.5～0.6mL/min，进样量100～200mg，洗脱样品的流动相流速是0.4～0.5mL/min；
所述步骤2中高效液相色谱技术所用流动相包括含0.1～0.2％三氟乙酸的乙腈和超纯水；相对40份乙腈，超纯水为60份；
所述步骤3中相对5份过氧化氢，抗坏血酸为1～3份；步骤3中脉冲电场处理强度为40～60kV/cm，处理时间为40～60s，每隔10～15min处理一次，总时长为0.5～1h；
所述步骤4中相对于9份的胶原混肽，大豆异黄酮的加入量为0.5～1份；步骤4中大豆异黄酮包括黄豆苷原、黄豆黄苷和染料木苷，使用比例为0.1～0.5：0.1～0.5：0.1～0.5；步骤4超声处理功率为400～600W，处理时间为1～2h；
所述步骤5中AB-8大孔树脂层析柱的流动相为含0.1～0.3％盐酸的超纯水和95％的乙醇溶液；步骤5中Sephadex LH-20层析柱的流动相为80～100％的乙醇溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤6中磁性Fe3O4纳米粒子制备方法为：2～3份FeCl3·6H2O中加入1～2份FeSO4·7H2O并加水溶解，搅拌该混合物使其混匀，在70～80℃下加热该混合物2～4h；该过程中加入浓氨水将pH调节至9～11，使溶液变黑；整个反应过程用氮气作为保护气体；得到的黑色产品用超纯水清洗干净后，置于40～60℃真空干燥箱中干燥24～48h，最后得到磁性Fe3O4纳米粒子。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110383736.1A CN113080466B (zh) | 2021-04-09 | 2021-04-09 | 一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202110383736.1A CN113080466B (zh) | 2021-04-09 | 2021-04-09 | 一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN113080466A CN113080466A (zh) | 2021-07-09 |
| CN113080466B true CN113080466B (zh) | 2023-05-02 |
Family
ID=76675677
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202110383736.1A Active CN113080466B (zh) | 2021-04-09 | 2021-04-09 | 一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN113080466B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN115073684B (zh) * | 2022-08-11 | 2024-06-07 | 江苏大学 | 一种黄豆苷原生物基酚醛树脂的制备方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100421728C (zh) * | 2006-06-09 | 2008-10-01 | 杨德瑜 | 虫草鸸鹋胶原蛋白肽胶囊及其生产方法 |
| JP2012062278A (ja) * | 2010-09-16 | 2012-03-29 | Fancl Corp | リンゴ抽出物及びコラーゲントリペプチド含有美容飲料 |
| CN105982337A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-10-05 | 浙江省海洋开发研究院 | 一种用于骨质疏松和关节炎辅助治疗的水产胶原蛋白肽食品 |
| CN105982331A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-10-05 | 浙江省海洋开发研究院 | 一种创伤修复通用型水产胶原蛋白肽食品 |
| CN108823268A (zh) * | 2018-05-02 | 2018-11-16 | 金华市铁骑士生物科技有限公司 | 鱼胶原抗氧化肽的制备方法 |
| CN109172537B (zh) * | 2018-10-18 | 2021-04-30 | 江西师范大学 | 一种鱼油软胶囊的制备方法 |
-
2021
- 2021-04-09 CN CN202110383736.1A patent/CN113080466B/zh active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113080466A (zh) | 2021-07-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhuang et al. | Purification and identification of antioxidant peptides from corn gluten meal | |
| CN107556364B (zh) | 亚临界水辅助酶解提取鲍鱼蛋白肽的方法及产品 | |
| Dong et al. | Preparation, characterization and bioactivities of Athelia rolfsii exopolysaccharide-zinc complex (AEPS-zinc) | |
| CN113080466B (zh) | 一种制备Fe3O4/胶原混肽-大豆异黄酮共价化合物磁性生物复合材料的方法 | |
| CN112608968B (zh) | 一种以罗非鱼鳞原料生产鱼胶原蛋白肽的方法 | |
| CN113412875A (zh) | 蛋白超声复合酸/碱处理结合儿茶素提高抗氧化性 | |
| CN112608966A (zh) | 一种超声辅助矿物质螯合杏仁肽及其制备方法和应用 | |
| CN113234552A (zh) | 一种啤酒花多糖纳米粒子及其制备方法和应用 | |
| KR100837858B1 (ko) | 방사선 조사에 의한 돈피 콜라겐의 수용성 올리고펩타이드의 제조방법 | |
| CN111087447B (zh) | 一种鳄鱼抗氧化肽复合物及其制备方法和应用 | |
| CN111670996B (zh) | 一种大豆蛋白肽的制备方法 | |
| CN108383224A (zh) | 一种绿色环保除菌的絮凝剂 | |
| CN115644453A (zh) | 一种大豆多肽-多酚抗氧化颗粒稳定dha乳液的方法 | |
| CN114698844A (zh) | 壳聚糖原花青素组合物在抑制胃肠道戊糖素形成中的应用 | |
| CN114057828A (zh) | 一种提高菠萝蜜种子分离蛋白溶解性的方法 | |
| Kheto et al. | How Pulse Electric Field Treatment affects Anti-nutritional Factors and Plant Protein Digestibility: A Concise Review | |
| CN113100441A (zh) | 一种利用大豆肽聚集体与egcg结合制备纳米颗粒的方法 | |
| US6372265B2 (en) | Anti-oxidant reducing substance and method of producing the same | |
| KR100876921B1 (ko) | 갑각류의 껍질 또는 짐승의 각질을 연화하는 방법. | |
| KR20210026706A (ko) | 키틴질이 제어된 식용곤충 유래 식품 단백질의 제조방법 및 이에 따라 제조된 식용곤충 유래 식품 조성물 | |
| AU2019100706A4 (en) | Oligomeric proanthocyanidin extract mixed STOCK solution capable of scavenging free radicals from air and preparation and use methods thereof | |
| CN108715878A (zh) | 一种提取海参多肽的方法 | |
| CN114317656B (zh) | 一种生物活性带鱼肽微量元素螯合物及其制备方法 | |
| CN114716579B (zh) | 一种果胶接枝共聚物及其制备方法和应用 | |
| CN108409826B (zh) | 一种木瓜籽蛋白及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |