CN108409826B - 一种木瓜籽蛋白及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种木瓜籽蛋白及其制备方法。该方法包括（1）木瓜籽脱除多糖胶；（2）将脱除多糖胶的木瓜籽粉碎；（3）以溶剂浸提法对粉碎的木瓜籽进行脱脂；（4）向脱脂后的木瓜籽粕中按一定料液比加入蒸馏水，并调节pH值至碱性，在一定温度下搅拌浸提一段时间；（5）浸提液高速离心，收集上清液并调节上清液的pH值至酸性，得到沉淀的木瓜籽蛋白；（6）高速离心获得沉淀的蛋白，并将其洗涤至中性，经干燥即可获得木瓜籽蛋白。该方法制备木瓜籽蛋白简便快捷、成本低，利于产业化生产。

Description

一种木瓜籽蛋白及其制备方法
技术领域
本发明属于农产品深加工领域，特别涉及一种木瓜籽蛋白及其制备方法。
背景技术
木瓜是蔷薇科木瓜属多年生落叶灌木或小乔木，在国内南北各地均有广泛栽培，是一种重要的经济树种。
木瓜的果实营养丰富、气味芳香含有丰富的糖类、皂苷、有机酸、黄酮、维生素等，具有护肝、抗氧化、抑菌、抗肿瘤、降血脂等特殊疗效。据本草纲目记载，木瓜具有舒经络、健脾胃、益精血的药理作用，临床上用于治疗吐泻腹痛、风湿关节痛、腰膝酸痛等疾病。木瓜一般被加工用作瓜脯、饮片、木瓜酒或木瓜醋，具有很好的经济价值。
木瓜籽为木瓜的加工副产物，目前关于木瓜籽的加工利用尚未引起足够重视，大量的木瓜籽被丢弃，不仅对环境造成不良影响，且资源也没有得到充分利用。
蛋白质是人体生命活动的物质基础，是重要的营养素之一，人体必需摄取足够的蛋白质，全身的细胞才能维持正常运转。蛋白质是人体血液、骨骼、内脏、肌肉、神经等组织的重要成分。此外，蛋白质还能为人体提供大量的能量，食品中的蛋白质通过消化分解为氨基酸，然后被吸收，通过血液分布到机体细胞中去，机体细胞利用这些氨基酸重新合成机体蛋白。因此，蛋白质的制备具有广阔的市场和应用前景。
现有的技术公开了多种蛋白的制备方法，但也存在一定缺陷。如公开号为CN103719532A的中国专利中采用微波辅助提取杜仲籽蛋白的方法中，采用微波使提取液沸腾，这种方法虽然可以缩短提取时间，但是高温会破坏蛋白质的空间结构，导致蛋白质变性；公开号为CN106608900A的中国专利中采用复合酶预处理的方法提取油茶籽蛋白，酶法提取蛋白虽然条件较之温和，但该法存在操作复杂、酶制剂价格高且酶经灭活后作为杂质会影响目标蛋白的纯度；公开号为CN101514226A的中国专利中，采用强电场萃取的方法制备红松松子蛋白，该法不仅对设备要求高，且能耗也高，难以实现大规模产业化生产；公开号为CN106810598A的中国专利中，在液氮中研磨苜蓿叶以制备粉末样品，该法效率低且耗费大难以大规模推广，同时该专利公开的提取蛋白的方法中大量使用有机溶剂，容易造成溶剂残留且存在安全隐患；公开号为CN106858037A的中国专利中，直接采用水煮南瓜子的方法提取其中的蛋白质，该提取方法中的高温会破坏南瓜子蛋白的空间结构，同时该法制备得到的蛋白含有多糖类物质，使得其纯度较低，严重影响其生产应用。
木瓜籽蛋白含量丰富，但是关于木瓜籽蛋白的制备方法尚未见到相关报道。
发明内容
本发明的目的在于克服木瓜籽应用上的不足，在现有技术缺点与不足的情况下，提供一种木瓜籽蛋白的制备方法。
为实现上述目的，本发明采用如下步骤：
（1）木瓜籽脱除多糖胶；（2）将脱除多糖胶的木瓜籽粉碎；（3）以溶剂浸提法对粉碎的木瓜籽进行脱脂；（4）向脱脂后的木瓜籽粕中按一定比例加入蒸馏水，并调节pH值至碱性，在一定温度下搅拌浸提一段时间；（5）浸提液高速离心，收集上清液并调节上清液的pH值至酸性，得到沉淀的木瓜籽蛋白；（6）高速离心获得沉淀的蛋白，并将其洗涤至中性，经干燥即可获得木瓜籽蛋白。
作为本发明进一步的方案：所述步骤（1）中木瓜籽脱除多糖胶采用的是经分选所得的优质的整粒木瓜籽，按一定的料液比（1︰10～30）加入蒸馏水，在20-60℃下浸泡0.5-2h，高速离心脱除水溶性多糖胶，该步骤重复1～5次。
作为本发明进一步的方案：所述步骤（2）中将已脱除多糖胶的木瓜籽粉碎至20-80目。
作为本发明进一步的方案：所述步骤（3）中脱脂采用的浸提溶剂为石油醚，并按1︰10～30的料液比，在20-50℃下浸提6-12h，浸提过程重复1-3次，完成浸提后旋转蒸发完全脱除溶剂。
作为本发明进一步的方案：所述步骤（4）中将脱脂的木瓜籽粕与蒸馏水按1︰10～30的比例混合，以NaOH溶液调节pH为8-11，在20-60℃下搅拌提取0.5-2h。
作为本发明进一步的方案：所述步骤（5）中向经高速离心获得的上清液中加入稀HCl溶液调节pH值为3.8-5.6以沉淀木瓜籽蛋白。
作为本发明进一步的方案：所述步骤（6）中木瓜籽蛋白经蒸馏水洗涤至中性，可通过真空干燥、烘干、微波干燥、喷雾干燥及真空冷冻干燥等方式获得干燥的木瓜籽蛋白。
有益效果
本发明操作简单，条件易控制，且蛋白质纯度高；本发明可变废为宝，提高木瓜籽的利用价值，为木瓜籽的加工利用提供新的参考途径。
具体实施方式：
以下实施例为本发明的一些举例，不应被看作是对本发明的限定。
实施例1
称取未霉变的整粒木瓜籽100g，按1∶20的料液比加入2000ml蒸馏水于20℃条件下浸泡2h，提取液高速离心脱去多糖胶，该过程重复3次；将脱除多糖胶的木瓜籽干燥至水分低于10%，并将其粉碎至20-80目；称取粉碎后的木瓜籽粕粉，按1∶20的料液比（g/mL）加入石油醚，于40℃下浸提8h，该过程重复两次，脱脂后的木瓜籽粕粉旋转蒸发完全脱除有机溶剂；称取脱脂后的木瓜籽粕粉，按照1∶15的料液比（g/mL）加入蒸馏水，以1mol/L的NaOH调节体系的pH至10，在30℃下搅拌提取1h，高速离心获取上层澄清提取液；以1mol/L的HCl调节体系的pH至4.5沉淀上清液中的蛋白，高速离心获取沉淀的蛋白；以蒸馏水冲洗离心所得蛋白质，通过冷冻干燥除去水分得到木瓜籽蛋白1.8g。
实施例2
称取未霉变的整粒木瓜籽150g，按1∶30的料液比加入4500ml蒸馏水于50℃条件下浸泡1h，提取液高速离心脱去多糖胶，该过程重复3次；将脱除多糖胶的木瓜籽干燥至水分低于10%，并将其粉碎至20-80目；称取粉碎后的木瓜籽粕粉，按1∶30的料液比（g/mL）加入石油醚，于45℃下浸提8h，该过程重复两次，脱脂后的木瓜籽粕粉旋转蒸发完全脱除有机溶剂；称取脱脂后的木瓜籽粕粉，按照1∶15的料液比（g/mL）加入蒸馏水，以1mol/L的NaOH调节体系的pH至9.5，在30℃下搅拌提取2h，高速离心获取上层澄清提取液；以1mol/L的HCl调节体系的pH至4沉淀上清液中的蛋白，高速离心获取沉淀的蛋白；以蒸馏水冲洗离心所得蛋白质，通过冷冻干燥除去水分得到木瓜籽蛋白2.4g。

Claims (4)

1.一种木瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于以下步骤：
其中所述的木瓜籽为蔷薇科木瓜属植物的种子，其蛋白制备方法包括以下步骤：（1）木瓜籽脱除多糖胶；（2）将脱除多糖胶的木瓜籽粉碎；（3）采用石油醚对粉碎的木瓜籽进行脱脂，按1︰10～30的料液比，在20-50℃下浸提6-12h，浸提过程重复1-3次，完成浸提后旋转蒸发完全脱除溶剂；脱脂木瓜籽粕与蒸馏水按1︰10～30比例混合，以NaOH溶液调节pH为8-11，在20-60℃下搅拌提取0.5-2h；浸提液高速离心，收集上清液并加入HCl溶液，调节pH值为3.8-5.6以沉淀木瓜籽蛋白；（4）高速离心获得沉淀的蛋白，并将其洗涤至中性，经干燥即可获得木瓜籽蛋白。
2.如权利要求1所述的一种木瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于：步骤（1）中木瓜籽脱除多糖胶采用的是经分选所得的优质的整粒木瓜籽，按一定的料液比加入蒸馏水，在20-60℃下浸泡0.5-2h，高速离心脱除多糖胶，该步骤重复1～5次。
3.如权利要求1所述的一种木瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于：步骤（2）中将已脱除多糖胶的木瓜籽粉碎至20-80目。
4.如权利要求1所述的一种木瓜籽蛋白的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，木瓜籽蛋白经蒸馏水洗涤至中性，干燥后获得木瓜籽蛋白，所述干燥选自真空干燥、烘干、微波干燥、喷雾干燥。
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