CN113018387A - 一种用于治疗难治性癫痫的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗难治性癫痫的药物及其制备方法，该药物包括有大麻提取物、天麻提取物和冰片，大麻提取物的有效成分为从大麻中分离提取得到的具有烷基间苯二酚结构的化合物，在针对难治性癫痫发挥药理作用上具备极大的协同效应，有效提高其药理活性作用；天麻提取物能够提供有效的营养，修复脑内神经，冰片则可在作为引经药物增强其他药物在血脑屏障内的吸收的同时，有效缓解癫痫疾病发作时所伴随的抽搐、痉挛、神志不清、精神恍惚等临床表征，以此三种药物成分进行中药处方配伍，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

Description

一种用于治疗难治性癫痫的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种用于治疗难治性癫痫的药物及其制备方法。

背景技术

癫痫是一种常见的严重危害人类健康的慢性脑功能障碍疾病之一，研究证实脑神经元异常放电所致的暂时性中枢神经系统功能失常是其主要病因，以发作性、短暂性、重复性及通常为刻板性的中枢神经系统功能失常为特征的综合征，多数癫痫患者的癫痫发作经药物治疗可得到控制，但有一部分患者对抗癫痫药物治疗反应差，癫痫发作难以控制，因此被称为难治性癫痫(intractable epilepsy)，也称顽固性癫痫，而难治性癫痫的治疗也称为癫痫疾病治疗中的难点。

大麻作为一种化学型复杂的植物，其自身含有许多天然化学成分。据统计，至今从大麻植株中分离得到的化合物共有565种，可分为植物大麻素和非大麻素两大类，依据植物大麻素依据化学结构的不同，又包含大麻四氢酚、大麻萜酚、大麻环萜酚11个亚类，其中大麻酚(CBN)，大麻二酚(CBD)，四氢大麻酚(THCV)以及大麻萜酚(CBG)等被认为是大麻中最主要的具有药理活性的部分，因其自身除药理活性作用外，同时具有致幻及成瘾作用，因此被国家命令禁止使用，而大麻萜酚、大麻二酚等具有烷基间苯二酚结构的化合物却因其良好的药理作用及临床安全性而成为开发利用的热点。

当前国内外对于大麻中活性物质的研究基本集中于某个具有药理活性的单体化合物的开发和利用，如在专利含有大麻二酚的药物制剂及其应用中，提供了从大麻中所提取的大麻二酚及其药学上可接受的盐用于抑郁症的治疗：专利CN 108245510 A中涉及了大麻二酚与乙丙酰脲类抗癫痫药物的组合物联合使用应用于癫痫疾病的治疗；专利CN108785298 A中涉及了大麻二酚与四氢次大麻酚作为组合物用于治疗癫痫疾病。

但是，在上述专利中所出现的大麻活性物质的应用，均为从大麻中分离、提取出的一个或两个具有一定药理作用的单体化合物之间的联合应用，或活性单体与有明确药理治疗作用的药物联合使用，并且进行联合应用的各活性单体之间的化学结差异较大，分属于植物大麻素中的不同亚型结构，如次四氢大麻酚属于Δ9-THC型结构，次大麻二酚属于大麻二酚型结构，因此现有的大麻中活性单体或活性单体之间的联合应用具有较为明显的局限性，由于其在化学结构上分属不同大麻素结构亚型，在联合使用时无法发挥药理上的协同作用，并且进入人体后其在体内的药代动力行为存在一定的差异，无法完成吸收及代谢时间的一致，在一定程度上影响其药理作用的发挥，在临床安全性上也增加了不确定性。

发明内容

针对上述技术中存在的不足之处，本发明提供一种用于治疗难治性癫痫的药物及其制备方法，该药物可有效用于难治性癫痫的治疗及缓解癫痫发病时所伴随的痉挛抽搐、精神恍惚、失神等症状。

为实现上述目的，本发明的技术方案如下。

本发明提供一种用于治疗难治性癫痫的药物，包括有大麻提取物、天麻提取物和冰片，所述大麻提取物包括有具有烷基间苯二酚结构的化合物。在本发明中，所述大麻提取物的有效成分为从大麻中分离提取得到的具有烷基间苯二酚结构的化合物，其在具有抗癫痫疗效的同时，属于具有相同亚型结构的化合物，在药理作用、体内代谢及治疗安全性上具有高度的一致性，作为从大麻植物中提取得到的一类具有相同生物活性的提取物质，在针对难治性癫痫发挥药理作用上具备极大的协同效应，有效提高其药理活性作用；其中，所述天麻提取物能够提供有效的营养，修复脑内神经，冰片则可在作为引经药物增强其他药物在血脑屏障内的吸收的同时，有效缓解癫痫疾病发作时所伴随的抽搐、痉挛、神志不清、精神恍惚等临床表征，以此三种药物成分进行中药处方配伍，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

进一步地，所述药物按照重量份数计，包括有大麻提取物5-12份，天麻提取物1-4份、冰片0.1-0.4份。在本发明中，对具有抗癫痫作用的药理成分进行了明确的定量要求，分别对于大麻提取物、天麻提取物和冰片作出上述重量份数的设置，能够以此三种药物成分进行中药处方配伍，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

进一步地，所述大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构的化合物的重量占比＞＝50％，所述大麻提取物中四氢大麻酚的重量占比≤1％。在本发明中，使大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构的化合物的重量占比＞＝50％，使四氢大麻酚的重量占比≤1％，能够更好的实现三种药物成分的配合，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

进一步地，天麻提取物中β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％。在本发明中，通过上述设置，能够更好的实现三种药物成分的配合，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

进一步地，所述大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构的化合物为一种具有烷基间苯二酚结构的单一化合物或为2种以上具有烷基间苯二酚结构化合物的混合物。在本发明中，具有烷基间苯二酚结构可以是大麻萜酚、大麻二酚等。

本发明还提供一种用于治疗难治性癫痫的药物的制备方法，包括有以下步骤：

步骤S1，制备大麻提取物；

步骤S2，制备天麻提取物；

步骤S3，取制备得到的大麻提取物5-12份、天麻提取物1-4份加入0.1-0.4份冰片混合均匀，然后进行药物制粒，压片，得到药物成品。

进一步地，步骤S1中，包括有以下步骤：

步骤S11，将工业大麻进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S12，采用95％乙醇作为萃取溶剂，将工业大麻的药材干粉在30℃-65℃的温度条件下进行萃取30min-60min，得大麻萃取液；

步骤S13，将所得大麻萃取液通过离心机进行离心分离，离心转速为4000-6500转/min、离心时间为20-30min，取上清液得大麻提取液；

步骤S14，将大麻提取液在45-60℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻初提浸膏；

步骤S15，以重量比为(1-10)∶(1-4)的氯仿和石油醚作为淋洗剂，以大麻初提浸膏20倍重量的200目硅胶采用湿法装柱对大麻初提浸膏进行硅胶柱层析分离，收集洗脱液，在45-60℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻粗提取物；

步骤S16，将得到的大麻粗提取物以其50倍重量的40-75目的C18反相材料采用湿法装柱进行反相柱层析，以重量比为9∶1的甲醇和水进行等度洗脱，收集洗脱液，在45-60℃的温度条件下旋转蒸发进行浓缩，得到具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝50％的大麻提取物。

在本发明中，通过上述制备方法制备出的大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝50％，其在具有抗癫痫疗效的同时，属于具有相同亚型结构的化合物，在药理作用、体内代谢及治疗安全性上具有高度的一致性，作为从大麻植物中提取得到的一类具有相同生物活性的提取物质，在针对难治性癫痫发挥药理作用上具备极大的协同效应，有效提高其药理活性作用；从而能够更好的实现三种药物成分的配合，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

进一步地，步骤S2中，包括有以下步骤：

步骤S21，将天麻进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S22，将天麻的药材干粉采用其20倍重量的70％乙醇进行萃取，在30-65℃的温度条件下进行萃取60min-120min，得天麻萃取液；

步骤S23，将制得的天麻萃取液经过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数为20％、40％、60％的乙醇水溶液进行梯度洗脱；

步骤S24，收集采用体积分数为40％和60％的乙醇水溶液的洗脱液进行合并、浓缩成浓缩液，然后采用ODS硅胶装柱，具体为取ODS硅胶与浓缩液搅拌，挥干溶剂，进行上柱；

步骤S25，用体积分数55％的乙腈水溶液进行洗脱，收集洗脱液，在45-65℃的温度条件下条件下旋转蒸发，得到β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％的天麻提取物。

在本发明中，通过上述制备方法制备出的天麻提取物中β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％，β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物类物质能够提供有效的营养，修复脑内神经；从而能够更好的实现三种药物成分的配合，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

在本发明中，所制备的药物适用于以下给药途径及与给药途径相对应的制剂：口服给药、舌下给药、透皮给药、喷雾给药、吸入式给药、局部给药、颊给药、经鼻给药、直肠给药、静脉内给药、腹膜内给药、肌内给药、皮下给药、阴道内给药及尿道内给药。

在本发明当中，大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构的化合物为大麻二酚、大麻环萜酚等结构类似化合物，因其所具有的神经保护作用而对难治性癫痫具有明显的抑制效果，该类型化合物可通过对脑内CB1受体的激活，进而对大脑重要的信号通路进行调控，利用激活关键基因PPARγ的转录降低神经性炎症的发生等方式有效减少癫痫的发作频次，同时对肌阵挛性癫痫及癫痫性脑病均有明显的改善作用。

天麻属于我国重要的中药材，具有广泛的临床应用，主要包含多糖类物质、挥发性成分、苷类物质及微量元素、氨基酸类物质等。天麻中苷类物质是其主要的药理活性成分，其中的β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物经研究证实具有保护神经细胞、提高自由基清除活性剂、降低脑内脂质过氧化物的产生、调节氨基酸含量等方面具有较好的疗效，通过抑制谷氨酸的合成和释放，增加了γ-氨基丁酸的含量，能够显著减轻癫痫的发作频次。

冰片具有开窍醒神、清热止痛、镇静、抗惊厥等功效，临床应用已久，其本身极易通过血脑屏障，因此在具备抗癫痫治疗用途的同时，其作为引经药可有效的增强其他神经保护药物的吸收，进而协同发挥更好的神经保护作用。

本发明中提供的药物打破了癫痫治疗领域中的药物应用的局限性，常用的抗癫痫化学药物仅对癫痫疾病的病理治疗具有较强的针对性，而用于癫痫治疗的传统中药则多集中于对脑神经的营养和修复功效，对从药理层面治愈癫痫疾病效果不佳，并且缺乏对癫痫发作时伴随的临床表征的即时、有效的缓解，本发明利用从植物中提取的烷基间苯二酚类物质与天麻提取物及冰片进行处方配伍，在从癫痫疾病发作机理上对其进行治疗的同时，能够有效营养和修复脑内受损神经病缓解癫痫发作时所伴随的临床表征，具有显著的现实意义。

与传统的中药提取物不同，发明中所涉及的提取物均对其中具有治疗癫痫作用的活性成分进行了特殊的分离和纯化，在分离出了药材中的其他药理活性成分的同时对具有抗癫痫作用的药理成分进行了明确的定量要求。

发明中针对大麻中具有烷基间苯二酚结构的化合物、天麻中的β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物等具有抗癫痫药理活性作用的成分进行了专项性的分离和纯化，并以此作为所述的提取物的有效成分和标志性成分。

本发明的有益效果是：在本发明中，所述大麻提取物的有效成分为从大麻中分离提取得到的具有烷基间苯二酚结构的化合物，其在具有抗癫痫疗效的同时，属于具有相同亚型结构的化合物，在药理作用、体内代谢及治疗安全性上具有高度的一致性，作为从大麻植物中提取得到的一类具有相同生物活性的提取物质，在针对难治性癫痫发挥药理作用上具备极大的协同效应，有效提高其药理活性作用；其中，所述天麻提取物能够提供有效的营养，修复脑内神经，冰片则可在作为引经药物增强其他药物在血脑屏障内的吸收的同时，有效缓解癫痫疾病发作时所伴随的抽搐、痉挛、神志不清、精神恍惚等临床表征，以此三种药物成分进行中药处方配伍，从癫痫疾病的病理治疗、脑内受损神经的营养及修复、临床表征的缓解三个方面对难治性癫痫进行针对性的有效治疗。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及有益效果更加清楚明白，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

一种用于治疗难治性癫痫的药物，包括有大麻提取物10g、天麻提取物2g和冰片0.2g，通过以下制备方法制得，包括有以下步骤：

步骤S1，制备大麻提取物；

步骤S2，制备天麻提取物；

步骤S3，取制备得到的大麻提取物10g、天麻提取物2g份与0.2g冰片再加上微晶纤维素12g混合均匀；

步骤S4，将上述混合均匀后的物料采用80％乙醇进行药物制粒，过20目筛，然后在40℃的温度条件下烘干1h；

步骤S5，过16目筛整粒，加入颗粒重量1％的硬脂酸镁后混合均匀，压片即得药物成品。

其中，步骤S1包括有以下步骤：

步骤S11，将干燥的工艺大麻放入烘箱中进行烘干处理，在80℃的温度条件下烘干4小时，烘干后对其进行研磨粉碎，粉碎后得药材干粉，取大麻的干粉1kg备用；

步骤S12，将1kg的大麻干粉置于萃取罐中，采用95％乙醇作为萃取溶剂，加入10L的95％乙醇/水溶液，在60℃的温度条件下进行萃取50min，得大麻萃取液；

步骤S13，将所得大麻萃取液通过离心机进行离心分离，离心转速为6500转/min、离心时间为30min，取上清液得大麻提取液；

步骤S14，将大麻提取液在55℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻初提浸膏180g；

步骤S15，以重量比为6∶1的氯仿和石油醚作为淋洗剂，以大麻初提浸膏20倍重量的200目硅胶采用湿法装柱对大麻初提浸膏进行硅胶柱层析分离，收集洗脱液，在55℃的温度条件下进行旋转蒸发，得110g大麻粗提取物；

步骤S16，将得到的大麻粗提取物以其50倍重量的75目的C18反相材料采用湿法装柱进行反相柱层析，以重量比为9∶1的甲醇和水进行等度洗脱，收集洗脱液，在55℃的温度条件下旋转蒸发进行浓缩，得到具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝80％的大麻提取物76g。

其中，步骤S2包括有以下步骤：

步骤S21，将天麻叶进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S22，取1kg干燥后的天麻干粉，加入20L的70％乙醇/水溶液进行萃取，在55℃的温度条件下进行萃取80min，得天麻萃取液；

步骤S23，将制得的天麻萃取液经过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数为20％、40％、60％的乙醇水溶液进行梯度洗脱；

步骤S24，收集采用体积分数为40％和60％的乙醇水溶液的洗脱液进行合并、浓缩成浓缩液，然后采用ODS硅胶装柱，具体为取ODS硅胶与浓缩液搅拌，挥干溶剂，进行上柱；

步骤S25，用体积分数55％的乙腈水溶液进行洗脱，收集洗脱液，在65℃的温度条件下条件下旋转蒸发，得到β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％的天麻提取物110g。

实施例2

一种用于治疗难治性癫痫的药物，包括有大麻提取物5g、天麻提取物1g和冰片0.1g，通过以下制备方法制得，包括有以下步骤：

步骤S1，制备大麻提取物；

步骤S2，制备天麻提取物；

步骤S3，取制备得到的大麻提取物5g、天麻提取物1g份与0.1g冰片再加上微晶纤维素12g混合均匀；

步骤S4，将上述混合均匀后的物料采用80％乙醇进行药物制粒，过20目筛，然后在40℃的温度条件下烘干1h；

步骤S5，过16目筛整粒，加入颗粒重量1％的硬脂酸镁后混合均匀，压片即得药物成品。

其中，步骤S1包括有以下步骤：

步骤S11，将干燥的工艺大麻放入烘箱中进行烘干处理，在80℃的温度条件下烘干4小时，烘干后对其进行研磨粉碎，粉碎后得药材干粉，取大麻的干粉1kg备用；

步骤S12，将1kg的大麻干粉置于萃取罐中，采用95％乙醇作为萃取溶剂，加入10L的95％乙醇/水溶液，在30℃的温度条件下进行萃取30min，得大麻萃取液；

步骤S13，将所得大麻萃取液通过离心机进行离心分离，离心转速为4000转/min、离心时间为20min，取上清液得大麻提取液；

步骤S14，将大麻提取液在45℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻初提浸膏；

步骤S15，以重量比为4∶1的氯仿和石油醚作为淋洗剂，以大麻初提浸膏20倍重量的200目硅胶采用湿法装柱对大麻初提浸膏进行硅胶柱层析分离，收集洗脱液，在45℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻粗提取物；

步骤S16，将得到的大麻粗提取物以其50倍重量的40目的C18反相材料采用湿法装柱进行反相柱层析，以重量比为9∶1的甲醇和水进行等度洗脱，收集洗脱液，在45℃的温度条件下旋转蒸发进行浓缩，得到具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝50％的大麻提取物。

其中，步骤S2包括有以下步骤：

步骤S21，将天麻叶进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S22，取1kg干燥后的天麻干粉，加入20L的70％乙醇/水溶液进行萃取，在30℃的温度条件下进行萃取60min，得天麻萃取液；

步骤S23，将制得的天麻萃取液经过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数为20％、40％、60％的乙醇水溶液进行梯度洗脱；

步骤S24，收集采用体积分数为40％和60％的乙醇水溶液的洗脱液进行合并、浓缩成浓缩液，然后采用ODS硅胶装柱，具体为取ODS硅胶与浓缩液搅拌，挥干溶剂，进行上柱；

步骤S25，用体积分数55％的乙腈水溶液进行洗脱，收集洗脱液，在45℃的温度条件下条件下旋转蒸发，得到β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％的天麻提取物g。

实施例3

一种用于治疗难治性癫痫的药物，包括有大麻提取物12g、天麻提取物4g和冰片0.4g，通过以下制备方法制得，包括有以下步骤：

步骤S1，制备大麻提取物；

步骤S2，制备天麻提取物；

步骤S3，取制备得到的大麻提取物12g、天麻提取物4g份与0.4g冰片再加上微晶纤维素12g混合均匀；

步骤S4，将上述混合均匀后的物料采用80％乙醇进行药物制粒，过20目筛，然后在40℃的温度条件下烘干1h；

步骤S5，过16目筛整粒，加入颗粒重量1％的硬脂酸镁后混合均匀，压片即得药物成品。

其中，步骤S1包括有以下步骤：

步骤S11，将干燥的工艺大麻放入烘箱中进行烘干处理，在80℃的温度条件下烘干4小时，烘干后对其进行研磨粉碎，粉碎后得药材干粉，取大麻的干粉1kg备用；

步骤S12，将1kg的大麻干粉置于萃取罐中，采用95％乙醇作为萃取溶剂，加入10L的95％乙醇/水溶液，在65℃的温度条件下进行萃取60min，得大麻萃取液；

步骤S13，将所得大麻萃取液通过离心机进行离心分离，离心转速为6500转/min、离心时间为30min，取上清液得大麻提取液；

步骤S14，将大麻提取液在60℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻初提浸膏；

步骤S15，以重量比为10∶1的氯仿和石油醚作为淋洗剂，以大麻初提浸膏20倍重量的200目硅胶采用湿法装柱对大麻初提浸膏进行硅胶柱层析分离，收集洗脱液，在60℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻粗提取物；

步骤S16，将得到的大麻粗提取物以其50倍重量的75目的C18反相材料采用湿法装柱进行反相柱层析，以重量比为9∶1的甲醇和水进行等度洗脱，收集洗脱液，在60℃的温度条件下旋转蒸发进行浓缩，得到具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝50％的大麻提取物。

其中，步骤S2包括有以下步骤：

步骤S21，将天麻叶进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S22，取1kg干燥后的天麻干粉，加入20L的70％乙醇/水溶液进行萃取，在65℃的温度条件下进行萃取120min，得天麻萃取液；

步骤S23，将制得的天麻萃取液经过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数为20％、40％、60％的乙醇水溶液进行梯度洗脱；

步骤S24，收集采用体积分数为40％和60％的乙醇水溶液的洗脱液进行合并、浓缩成浓缩液，然后采用ODS硅胶装柱，具体为取ODS硅胶与浓缩液搅拌，挥干溶剂，进行上柱；

步骤S25，用体积分数55％的乙腈水溶液进行洗脱，收集洗脱液，在65℃的温度条件下条件下旋转蒸发，得到β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％的天麻提取物。

实施例4

一种用于治疗难治性癫痫的药物，包括有大麻提取物8g、天麻提取物3g和冰片0.3g，通过以下制备方法制得，包括有以下步骤：

步骤S1，制备大麻提取物；

步骤S2，制备天麻提取物；

步骤S3，取制备得到的大麻提取物10g、天麻提取物2g份与0.2g冰片再加上微晶纤维素12g混合均匀；

步骤S4，将上述混合均匀后的物料采用80％乙醇进行药物制粒，过20目筛，然后在40℃的温度条件下烘干1h；

步骤S5，过16目筛整粒，加入颗粒重量1％的硬脂酸镁后混合均匀，压片即得药物成品。

其中，步骤S1包括有以下步骤：

步骤S11，将干燥的工艺大麻放入烘箱中进行烘干处理，在80℃的温度条件下烘干4小时，烘干后对其进行研磨粉碎，粉碎后得药材干粉，取大麻的干粉1kg备用；

步骤S12，将1kg的大麻干粉置于萃取罐中，采用95％乙醇作为萃取溶剂，加入10L的95％乙醇/水溶液，在45℃的温度条件下进行萃取45min，得大麻萃取液；

步骤S13，将所得大麻萃取液通过离心机进行离心分离，离心转速为5000转/min、离心时间为25min，取上清液得大麻提取液；

步骤S14，将大麻提取液在50℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻初提浸膏；

步骤S15，以重量比为8∶1的氯仿和石油醚作为淋洗剂，以大麻初提浸膏20倍重量的200目硅胶采用湿法装柱对大麻初提浸膏进行硅胶柱层析分离，收集洗脱液，在50℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻粗提取物；

步骤S16，将得到的大麻粗提取物以其50倍重量的75目的C18反相材料采用湿法装柱进行反相柱层析，以重量比为9∶1的甲醇和水进行等度洗脱，收集洗脱液，在50℃的温度条件下旋转蒸发进行浓缩，得到具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝50％的大麻提取物。

其中，步骤S2包括有以下步骤：

步骤S21，将天麻叶进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S22，取1kg干燥后的天麻干粉，加入20L的70％乙醇/水溶液进行萃取，在45℃的温度条件下进行萃取90min，得天麻萃取液；

步骤S23，将制得的天麻萃取液经过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数为20％、40％、60％的乙醇水溶液进行梯度洗脱；

步骤S24，收集采用体积分数为40％和60％的乙醇水溶液的洗脱液进行合并、浓缩成浓缩液，然后采用ODS硅胶装柱，具体为取ODS硅胶与浓缩液搅拌，挥干溶剂，进行上柱；

步骤S25，用体积分数55％的乙腈水溶液进行洗脱，收集洗脱液，在50℃的温度条件下条件下旋转蒸发，得到β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％的天麻提取物。

选取100例难治性癫痫患者，采用随机数字表法分为治疗组和对照组各50例。治疗组中男22例，女28例；对照组中男27例，女23例。

对照组口服卡左双多巴控释片(每片含卡比多巴50毫克和左旋多巴200毫克)，每次1片，每日1次。

治疗组在对照组的基础上，给予实施例1制备的药物，每次1片，每日两次。

两组均治疗16周，随访24周，共观察48周，包括3个研究期和3个随访期，其中3个研究期分别为：治疗8周前、治疗8周后、治疗16周后，3个随访期为疗程结束后，每8周随访1次，共随访3次。

两组均治疗16周后，以癫痫发作频次、脑电图异常情况评价临床疗效。

实验结果如下：

表1：两组难治性癫痫患者治疗前及治疗后不同时间癫痫平均发作频次比较

表2 两组难治性癫痫患者脑电图异常率比较例(％)

通过上述结果表明，两组患者治疗期、评估期、随访期平均癫痫发作的频率均较治疗前下降(P＜0.05)；治疗组患者治疗期、评估期及随访期各时间点癫痫平均发生次数均明显低于对照组。两组患者脑电图异常率自治疗期开始均呈逐渐下降，且治疗组明显低于同时段对照组(P＜0.05)。

因此，本发明的药物可有效用于难治性癫痫的治疗。

以上公开的仅为本发明的几个具体实施例，但是本发明并非局限于此，任何本领域的技术人员能思之的变化都应落入本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种用于治疗难治性癫痫的药物，其特征在于包括有大麻提取物、天麻提取物和冰片，所述大麻提取物包括有具有烷基间苯二酚结构的化合物。

2.根据权利要求1所述的用于治疗难治性癫痫的药物，其特征在于所述药物按照重量份数计，包括有大麻提取物5-12份，天麻提取物1-4份、冰片0.1-0.4份。

3.根据权利要求2所述的用于治疗难治性癫痫的药物，其特征在于所述大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构的化合物的重量占比＞＝50％。

4.根据权利要求2所述的用于治疗难治性癫痫的药物，其特征在于天麻提取物中β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％。

5.根据权利要求2所述的用于治疗难治性癫痫的药物，其特征在于所述大麻提取物中具有烷基间苯二酚结构的化合物为一种具有烷基间苯二酚结构的单一化合物或为2种以上具有烷基间苯二酚结构化合物的混合物。

6.一种根据权利要求1-5任一项所述的用于治疗难治性癞痫的药物的制备方法，其特征在于包括有以下步骤：

步骤S1，制备大麻提取物；

步骤S2，制备天麻提取物；

步骤S3，取制备得到的大麻提取物5-12份、天麻提取物1-4份加入0.1-0.4份冰片混合均匀，然后进行药物制粒，压片，得到药物成品。

7.根据权利要求6所述的用于治疗难治性癫痫的药物的制备方法，其特征在于步骤S1中，包括有以下步骤：

步骤S11，将工业大麻进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S12，采用95％乙醇作为萃取溶剂，将工业大麻的药材干粉在30℃-65℃的温度条件下进行萃取30min-60min，得大麻萃取液；

步骤S13，将所得大麻萃取液通过离心机进行离心分离后，取上清液得大麻提取液；

步骤S14，将大麻提取液在45-60℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻初提浸膏；

步骤S15，以步骤氯仿和石油醚作为淋洗剂，以大麻初提浸膏20倍重量的200目硅胶采用湿法装柱对大麻初提浸膏进行硅胶柱层析分离，收集洗脱液，在45-60℃的温度条件下进行旋转蒸发，得大麻粗提取物；

步骤S16，将得到的大麻粗提取物以其50倍重量的40-75目的C18反相材料采用湿法装柱进行反相柱层析，以甲醇和水进行等度洗脱，收集洗脱液，在45-60℃的温度条件下旋转蒸发进行浓缩，得到具有烷基间苯二酚结构化合物含量＞＝50％的大麻提取物。

8.根据权利要求7所述的用于治疗难治性癫痫的药物的制备方法，其特征在于步骤S13中，大麻萃取液通过离心机进行离心分离式，离心转速为4000-6500转/min、离心时间为20-30min；步骤S15中，氯仿和石油醚的重量比为(1-10)∶(1-4)；步骤S16中，甲醇和水的重量比为9∶1。

9.根据权利要求6所述的用于治疗难治性癫痫的药物的制备方法，其特征在于步骤S2中，包括有以下步骤：

步骤S21，将天麻进行干燥处理后进行粉碎，粉碎后得药材干粉；

步骤S22，将天麻的药材干粉采用其20倍重量的70％乙醇进行萃取，在30-65℃的温度条件下进行萃取60min-120min，得天麻萃取液；

步骤S23，将制得的天麻萃取液经过聚酰胺树脂纯化，分别用体积分数为20％、40％、60％的乙醇水溶液进行梯度洗脱；

步骤S24，收集采用体积分数为40％和60％的乙醇水溶液的洗脱液进行合并、浓缩成浓缩液，然后采用ODS硅胶装柱，具体为取ODS硅胶与浓缩液搅拌，挥干溶剂，进行上柱；

步骤S25，用体积分数55％的乙腈水溶液进行洗脱，收集洗脱液，在45-65℃的温度条件下条件下旋转蒸发，得到β-D-吡喃葡萄糖苷及其衍生物重量占比＞＝33％的天麻提取物。