CN112998279A - 一种酶法制备功能性多肽粉末的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,涉及多肽粉加工技术领域。所述功能性多肽粉末的制备方法主要包括:原料处理、原料除油、原料二次处理、螺旋藻处理、原料混合、浓缩冷冻、热融酶解、过滤、蒸发浓缩、冻干研磨等步骤。本发明克服了现有技术的不足,提高了原料提取多肽的效率和提取率,同时提升多肽粉末的功效性,提升产品的吸收效率。

Description

一种酶法制备功能性多肽粉末的方法
技术领域
本发明涉及多肽粉加工技术领域,具体涉及一种酶法制备功能性多肽粉末的方法。
背景技术
我国是世界上最大的蛋白生产国和消费国,也是全球蛋白产业增长最快的国家。在蛋白类产品的生产和消费中,多肽粉近年来深受消费者的欢迎。目前,市场上常见的多肽粉品种有大豆多肽粉、核桃多肽粉及花生多肽粉等,市场对植物多肽粉未来发展持乐观态度,然而,植物多肽粉产业在发展中也面临着一系列的问题,如品种单一、技术落后、市场竞争激烈等,与发达国家相比,我国的植物多肽粉加工技术与国外先进水平依然存在着较大差距,如吸收效率低、辅料添加过多等。
多肽粉加工的主要方式包括凝胶色谱法、酶解法、微生物发酵法、合成法,现有的技术中为了达到良好的生产效率并且控制成本大多采用酶解法制备多肽粉,但是现有的酶解法制备工艺大多存在多肽提取效率低且多肽吸收效率低的问题,不利于提升多肽产品的市场竞争力。
发明内容
针对现有技术不足,本发明提供一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,提高了原料提取多肽的效率和提取率,同时提升多肽粉末的功效性,提升产品的吸收效率。
为实现以上目的,本发明的技术方案通过以下技术方案予以实现:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡10-15min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1-2h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/5-1/3,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解5-8h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至4.5-6,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解6-8h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至60-65℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2-3h后再次过滤,重复操作3-4次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/5-1/8,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100-200目筛,得功能性多肽粉末。
优选的,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆12-18份、黄豆8-10份、核桃仁14-20份、螺旋藻18-22份。
优选的,所述步骤(1)中低温干燥的温度为30-35℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%。
优选的,所述步骤(3)中高温干燥的温度为60-80℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛。
优选的,所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶10-12。
优选的,所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.2%-0.4%,果胶酶为均质液体积的0.3%-0.5%,且水域保温处理的温度为32℃-35℃,且在保温过程中对均质液按照20-50r/min进行搅拌。
优选的,所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比1-2∶2-3的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.1%-0.2%,且水浴保温酶解的温度为35-40℃。
优选的,所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下150℃-零下160℃,冷冻时间为180s-220s。
优选的,所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为90℃-100℃,且蒸汽热融时间为1-2h。
优选的,所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比1-2∶1-3∶1-2的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.1%-0.3%。
本发明提供一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,与现有技术相比优点在于:
(1)本发明采用黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻为制取多肽粉的原料,能够在制取多肽蛋白的同时保留部分黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻中的多种营养成分,有效提升多肽粉的功能性。
(2)本发明对原料进行分批处理,对黑豆、黄豆、核桃仁进行榨油后烦躁研磨,对螺旋藻进行制浆后高压均质破壁,有效提升各原料中成分的提取效率,同时减少原料的浪费。
(3)本发明对原料进行混合均质后纤维素酶和果胶酶初步酶解,后超低文冷冻,加速细胞壁的破裂,方便原料中的营养成分和蛋白成分的提取,并通过复合蛋白酶A和复合蛋白酶B的两次酶解有效提升多肽提取率,提升后期制得多肽粉的吸收率。
(4)本发明通过蒸汽处理的方式有效降低原料中的腥苦口感,有效提升产品的风味。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚,下面结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡10min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/5,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解5h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至4.5,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解6h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至60℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2h后再次过滤,重复操作3次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/5,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100目筛,得功能性多肽粉末。
其中,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆12份、黄豆8份、核桃仁14份、螺旋藻18份;所述步骤(1)中低温干燥的温度为30℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%;所述步骤(3)中高温干燥的温度为60℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛;所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶10;所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.2%,果胶酶为均质液体积的0.3%,且水域保温处理的温度为32℃,且在保温过程中对均质液按照20r/min进行搅拌;所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比1∶2的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.1%,且水浴保温酶解的温度为35℃;所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下150℃,冷冻时间为180ss;所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为90℃℃,且蒸汽热融时间为1h;所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比1∶1∶1的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.1%。
实施例2:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡15min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理2h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/3,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解8h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至6,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解8h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至65℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡3h后再次过滤,重复操作4次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/8,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过200目筛,得功能性多肽粉末。
其中,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆18份、黄豆10份、核桃仁20份、螺旋藻22份;所述步骤(1)中低温干燥的温度为35℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%;所述步骤(3)中高温干燥的温度为80℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛;所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶12;所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.4%,果胶酶为均质液体积的0.5%,且水域保温处理的温度为35℃,且在保温过程中对均质液按照50r/min进行搅拌;所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比2∶3的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.2%,且水浴保温酶解的温度为40℃;所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下160℃,冷冻时间为220s;所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为100℃,且蒸汽热融时间为2h;所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比2∶3∶2的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.3%。
实施例3:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡13min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1.5h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/4,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解6.5h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至5,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解7h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至60℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2.5h后再次过滤,重复操作3次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/7,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100目筛,得功能性多肽粉末。
其中,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆15份、黄豆9份、核桃仁17份、螺旋藻20份;所述步骤(1)中低温干燥的温度为30℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%;所述步骤(3)中高温干燥的温度为70℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛;所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶11;所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.3%,果胶酶为均质液体积的0.4%,且水域保温处理的温度为32℃,且在保温过程中对均质液按照40r/min进行搅拌;所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比1.5∶2.5的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.1%,且水浴保温酶解的温度为35℃;所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下155℃,冷冻时间为200s;所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为95℃,且蒸汽热融时间为1.5h;所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比1.5∶2∶1.5的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.2%。
对比例1:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡13min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1.5h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/4,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解6.5h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出常温融化,得融化浆液调节pH至5,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解7h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至60℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2.5h后再次过滤,重复操作3次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/7,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100目筛,得功能性多肽粉末。
其中,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆15份、黄豆9份、核桃仁17份、螺旋藻20份;所述步骤(1)中低温干燥的温度为30℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%;所述步骤(3)中高温干燥的温度为70℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛;所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶11;所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.3%,果胶酶为均质液体积的0.4%,且水域保温处理的温度为32℃,且在保温过程中对均质液按照40r/min进行搅拌;所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比1.5∶2.5的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.1%,且水浴保温酶解的温度为35℃;所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下155℃,冷冻时间为200s;所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比1.5∶2∶1.5的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.2%。
对比例2:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡13min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1.5h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/4,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至5,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解7h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至60℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2.5h后再次过滤,重复操作3次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/7,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100目筛,得功能性多肽粉末。
其中,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆15份、黄豆9份、核桃仁17份、螺旋藻20份;所述步骤(1)中低温干燥的温度为30℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%;所述步骤(3)中高温干燥的温度为70℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛;所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶11;所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.3%,果胶酶为均质液体积的0.4%,且水域保温处理的温度为32℃,且在保温过程中对均质液按照40r/min进行搅拌;所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下155℃,冷冻时间为200s;所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为95℃,且蒸汽热融时间为1.5h;所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比1.5∶2∶1.5的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.2%。
对比例3:
一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡13min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1.5h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/4,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解6.5h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至5,备用;
(8)过滤:将上述融化浆液加热至60℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2.5h后再次过滤,重复操作3次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/7,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100目筛,得功能性多肽粉末。
其中,所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆15份、黄豆9份、核桃仁17份、螺旋藻20份;所述步骤(1)中低温干燥的温度为30℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%;所述步骤(3)中高温干燥的温度为70℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛;所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶11;所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.3%,果胶酶为均质液体积的0.4%,且水域保温处理的温度为32℃,且在保温过程中对均质液按照40r/min进行搅拌;所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比1.5∶2.5的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.1%,且水浴保温酶解的温度为35℃;所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下155℃,冷冻时间为200s;所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为95℃,且蒸汽热融时间为1.5h。
检测:
检测上述实施例1-3和对比例1-3所得多肽粉的蛋白质的提取率和同时选取15-50岁的志愿者对每组多肽粉进行感官评价打分,计算各组平均分,结果如下表所示:
蛋白质提取率(%) 感官评测平均分
实施例1 89.24% 93.2
实施例2 88.76% 94.8
实施例3 90.15% 94.5
对比例1 87.32% 73.2
对比例2 72.65% 89.3
对比例3 80.32% 86.4
由上表可知本发明所制备多肽粉蛋白质提取效率高、风味好。
需要说明的是,在本文中,诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下,由语句“包括一个……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于,所述酶法制备功能性多肽粉末的方法包括以下步骤:
(1)原料处理:选取黑豆、黄豆、核桃仁、螺旋藻混合后清洗,再将黑豆、黄豆、核桃仁置于低温环境下干燥,后备用;
(2)原料除油:将上述干燥后的黑豆、黄豆、核桃仁混合得混合料,再将混合料进行压榨出油,后取剩余混合粕备用;
(3)原料二次处理:将上述混合粕采用清水淋洗后沥干,再加入60%的乙醇溶液浸泡10-15min后过滤,后置于干燥箱中高温干燥,并将干燥后的混合粕研磨成粉,得混合粉末备用;
(4)螺旋藻处理:将螺旋藻加入去离子水后研磨成浆,后再置于高压均质破壁机中进行破壁处理,螺旋藻浆液备用;
(5)原料混合:将上述螺旋藻浆液加入混合粉末中,置于超声均质机中进行均质处理,后将均质液调节pH至6.5,再加入纤维素酶和果胶酶于水浴环境下进行保温处理1-2h,得第一酶解液备用;
(6)浓缩冷冻:将上述第一酶解液真空浓缩至原有体积的1/5-1/3,后加入复合蛋白酶A继续水浴保温酶解5-8h,后置于超低温环境下快速冷冻,得冷冻体备用;
(7)热融酶解:将上述冷冻体取出置于高温蒸汽下快速融化,得融化浆液调节pH至4.5-6,后加入复合蛋白酶B,水浴保温酶解6-8h,得第二酶解液备用;
(8)过滤:将上述第二酶解液加热至60-65℃,后趁热过滤,再将滤渣加入去离子水保温浸泡2-3h后再次过滤,重复操作3-4次后合并滤液,得混合液备用;
(9)蒸发浓缩:将上述混合液调节pH至7.5,后恒温加热搅拌浓缩至原有体积的1/5-1/8,得浓缩液备用;
(10)冻干研磨:将上述浓缩液置于低温环境下冻干,后取出研磨过100-200目筛,得功能性多肽粉末。
2.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述多肽粉末包括以下重量份的原料:黑豆12-18份、黄豆8-10份、核桃仁14-20份、螺旋藻18-22份。
3.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(1)中低温干燥的温度为30-35℃,且干燥后黑豆、黄豆、核桃的含水量均低于8%。
4.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(3)中高温干燥的温度为60-80℃,且干燥后混合粕的含水量低于5%,且混合粉末需过80目筛。
5.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(4)中螺旋藻与去离子水的料液比为1∶10-12。
6.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(5)中加入的纤维素酶为均质液体积的0.2%-0.4%,果胶酶为均质液体积的0.3%-0.5%,且水域保温处理的温度为32℃-35℃,且在保温过程中对均质液按照20-50r/min进行搅拌。
7.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(6)中复合蛋白酶A为木瓜蛋白酶和中性蛋白酶质量比1-2∶2-3的混合酶,且复合蛋白酶A的添加量为真空浓缩后的第一酶解液体积的0.1%-0.2%,且水浴保温酶解的温度为35-40℃。
8.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(6)中超低温快速冷冻的温度为零下150℃-零下160℃,冷冻时间为180s-220s。
9.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(7)中高温蒸汽热融的蒸汽温度为90℃-100℃,且蒸汽热融时间为1-2h。
10.根据权利要求1所述的一种酶法制备功能性多肽粉末的方法,其特征在于:所述步骤(7)中复合蛋白酶B为木瓜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、碱性蛋白酶质量比1-2∶1-3∶1-2的混合蛋白酶,且复合蛋白酶B的添加量为融化浆液体积的0.1%-0.3%。
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