CN112980697B - 一株海绵胶煤炱菌及其野外人工保育方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一株海绵胶煤炱菌及其野外人工保育方法，属于微生物技术领域。本发明的海绵胶煤炱菌，该菌株的名称为海绵胶煤炱菌SS‑Leshan，分类名称为Scor i as spongi osa，保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是CGMCC No.21446，保藏日期为2021年01月04日。本发明还公开了上述海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法。本发明的海绵胶煤炱菌在居竹伪角蚜下方5‑20cm进行培育后能够快速生长成大型的珊瑚状分支的成品海绵胶煤炱菌，海绵胶煤炱菌整个生长过程较为稳定，有效缓解了海绵胶煤炱菌生长依赖气候条件的限制。

Description

一株海绵胶煤炱菌及其野外人工保育方法

技术领域

本发明属于微生物技术领域，特别涉及一株海绵胶煤炱菌及其野外人工保育方法。

背景技术

中国海绵胶煤炱菌，又叫竹燕窝，是川南竹林区特有的一种可食用的野生菌。因与味与燕窝形似，也称为植物燕窝。海绵胶煤炱菌是居竹伪角蚜吸食嫩竹笋汁液后，在竹笋下留下的代谢物残渣，在适宜的温度、湿度等条件下被微生物所利用，形成的一种微生物复合体，除了含有蛋白质、脂肪和多种人体必须的氨基酸，还含维生素B1、维生素B2、维生素C和维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱和果胶，是一种非常名贵的真菌类食品。

目前，由于海绵胶煤炱菌只生长在竹海深处的密林中，且仅在仲秋季节有虫寄生的嫩竹笋上生长。当年新竹，如硬头黄竹，有竹蚜附着生长时，需特定适宜气候条件下才能形成天然海绵胶煤炱菌。因此海绵胶煤炱菌的自然生长条件十分严苛，容易造成每年海绵胶煤炱菌产量极不稳定，大大影响海绵胶煤炱菌的市场发展。

鉴于此，有必要提供一株海绵胶煤炱菌及其野外人工保育方法，以解决现有技术的不足。

发明内容

本申请的发明人先将野外采集的海绵胶煤炱菌在超净台上使用无菌水冲洗三次，然后再放入无菌的研钵中研磨粉碎，无菌水重悬，梯度稀释于PDA培养基上，置于24℃培养箱中培养至单菌落出现。将远离细菌污染的海绵胶煤炱菌单菌落转移到新的PDA培养基上培养至产生分生孢子。使用无菌牙签挑取分生孢子，保存至50％甘油中，-80℃保存，即为一株具有分生再生能力的优势菌株--海绵胶煤炱菌SS-Leshan。

野生的生长状态良好的海绵胶煤炱菌呈金黄色珊瑚状分支，富有弹性；衰老黑化的部分则呈黑煤块状，不具弹性。使用研磨粉碎的海绵胶煤炱菌子实体在PDA培养基上24℃培养则会长出晶莹剔透的海绵胶煤炱菌组织团，与野外新生的海绵胶煤炱菌颜色相同。海绵胶煤炱菌生长过程的颜色变化规律为：无色透明-浅黄色-金黄色-暗黑色-黑色。

本发明的海绵胶煤炱菌SS-Leshan，具有以下特性：

(1)个体形状：在显微镜下观察PDA培养基上的海绵胶煤炱菌，发现其向四周辐射生长出菌丝体，而中间的组织团则类似植物的愈伤组织。在PDA培养基上，海绵胶煤炱菌在组织块周围形成有菌丝。

(2)菌落性状：菌落呈块状，组织块可以快速生长并在其表面产生突起，最终发育成为珊瑚状子实体。在PDA培养基上，这些珊瑚状突起最终会分化形成分生孢子器，成熟的分生孢子器会在其顶端形成透明的分生孢子球。

(3)生长适温20-25℃，pH值7.0左右即可，好氧。

本发明的目的之一，是提供一株海绵胶煤炱菌。本发明的海绵胶煤炱菌SS-Leshan丰富了海绵胶煤炱菌的物种资源，期望用于快速培养海绵胶煤炱菌成品。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一株海绵胶煤炱菌，该菌株的名称为海绵胶煤炱菌SS-Leshan，分类名称为Scorias spongiosa，保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是CGMCC No.21446，保藏日期为2021年01月04日。

本发明的海绵胶煤炱菌的有益效果是：

本发明的海绵胶煤炱菌整体呈椭圆形状，分支胶质呈米白色透明状，晶莹剔透，成色较好，能够在在野外高温高湿的气候存活，为海绵胶煤炱菌生长出大型分支奠定基础。

本发明的目的之二，是提供一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，能够解决目前培养天然海绵胶煤炱菌产量极不稳定，生长效果不佳的技术问题。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，包括如下步骤：

S1.选取上述海绵胶煤炱菌SS-Leshan制成的菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为1-4份的葡萄糖溶液、重量份数为1-5份的蔗糖溶液、重量份数为0.5-1份的果糖和重量份数为1.5-2.0的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方5-20cm处，其后每日使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止喷洒保育剂，得到处理后的菌种块；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的菌种块自然生长6-8天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌。

本发明的海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法原理是：

本发明接种保育，是选择在有居竹伪角蚜的新竹的下方5-20cm处进行，其中居竹伪角蚜主要生长在当年新竹上，居竹伪角蚜成蚜能分泌蜜露，蜜露能够促进海绵胶煤炱菌的生长，同时海绵胶煤炱菌所处的位置又并不会影响居竹伪角蚜，海绵胶煤炱菌与居竹伪角蚜刚巧达到协调，使海绵胶煤炱菌能够稳定生长。保持菌种块湿润，且配合使用保育剂，能够提高海绵胶煤炱菌菌种在新竹上的存活率，避免干蔫，加快海绵胶煤炱菌形成大型分支。

可以理解的是，所述新竹是指当年硬头黄竹新发笋子长成的竹子；竹子是多年生的植物，第二年及以后的竹子即称为老竹。

本发明的海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法的有益效果是：

(1).本发明能够促进海绵胶煤炱菌菌种快速生长成大型的珊瑚状分支的成品海绵胶煤炱菌，海绵胶煤炱菌菌种整个生长过程较为稳定，达到Ⅰ期的成品海绵胶煤炱菌约70％，达到Ⅱ期的成品海绵胶煤炱菌约20％，有效提高了海绵胶煤炱菌的成品质量；

(2).本发明能够提高海绵胶煤炱菌菌种的生长效率，缩短培育期限，通过接种保育处理，海绵胶煤炱菌菌种于6-12天后便可以进入自然生长阶段，有效缓解了海绵胶煤炱菌生长依赖气候条件的限制；

(3).本发明还能够提升海绵胶煤炱菌菌种的繁育能力，生长过程中的海绵胶煤炱菌菌种能够迅速扩展到同一根新竹下方竹节上和地面，以及相邻的新竹上，可让成片新生且有居竹伪角蚜的竹林迅速且在同一时间获得大量的成品海绵胶煤炱菌，为海绵胶煤炱菌规模化生产奠定一定基础。

在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。

进一步，步骤S1中，将权利要求1所述的海绵胶煤炱菌在增殖培养基培养6-8天，得到所述菌种块。

采用上述进一步方案的有益效果是：通过选择合适的菌种块，能够为菌种块健康生长奠定一定基础。

进一步，步骤S2中，所述保育剂由重量份数为1.5-3份的葡萄糖溶液、重量份数为2-3份的蔗糖溶液、重量份数为0.6-0.8份的果糖和重量份数为1.6-1.8的乳糖混合均匀后所得。

进一步，步骤S2中，所述葡萄糖溶液的浓度为2％-4％；所述蔗糖溶液的浓度为2％-4％。

进一步，步骤S3中，在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为4％-6％的含糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上。

采用上述进一步方案的有益效果是：无菌棉纱布材料来源广泛，透气性较好，不仅方便将菌种块接种在新竹上，而且可以尽可能避免长杂菌；另外，采用浸泡4％-6％的含糖溶液的无菌棉纱布能够为海绵胶煤炱菌提供养分，并保证湿度，从而确保菌种的较高活性，使海绵胶煤炱菌在野外适宜生长期，稳定生长。

进一步，所述含糖溶液为葡萄糖溶液、果糖溶液和蔗糖溶液中的任意一种或多种。

进一步，步骤S3中，所述菌种块位于所述居竹伪角蚜下方10-20cm。

采用上述进一步方案的有益效果是：一般竹节长度在30-40cm，菌种块接种于居竹伪角蚜下方10-20cm，能够扩大本发明的使用范围。

进一步，步骤S3中，所述接种保育时间为6-12天。

采用上述进一步方案的有益效果是：本发明能够缩短海绵胶煤炱菌菌块的生长期限，改善成品海绵胶煤炱菌的培养效率。

进一步，步骤S3中，每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次，每次保育剂的用量为2-7ml。

进一步，步骤S3中，所述接种的条件为：含氧量为18-24％，温度为18-35℃，湿度为55-90％，光照强度为67-2150Lux。

采用上述进一步方案的有益效果是：通过限制含氧量、温度、湿度和光照强度，海绵胶煤炱菌菌种块在接种阶段具有更适宜生长的环境条件。

进一步，所述接种的条件为：含氧量为20-22％，温度为20-30℃，湿度为65-80％，光照强度为200-1500Lux。

步骤S4中，所述自然生长的条件为：含氧量为18-24％，温度为20-35℃，湿度为55-90％，光照强度为67-2150Lux。

采用上述进一步方案的有益效果是：通过限制含氧量、温度、湿度和光照强度，海绵胶煤炱菌菌种块在自然生长阶段具有更适宜生长的环境条件。

附图说明

图1为本发明野外采集的海绵胶煤炱菌分离过程，其中，A代表为：海绵胶煤炱菌取样；B代表为：海绵胶煤炱菌新生部分子实体；C代表为：研磨粉碎的海绵胶煤炱菌子实体；D代表为：海绵胶煤炱菌子实体在PDA培养基上长出的海绵胶煤炱菌组织团；

图2为本发明海绵胶煤炱菌SS-Leshan显微镜下的组织块形态，其中，A代表为：海绵胶煤炱菌组织块，显示菌丝体；B代表为：海绵胶煤炱菌组织块开始形成珊瑚状子实体；C代表为：海绵胶煤炱菌形成大量的珊瑚状子实体；D代表为：海绵胶煤炱菌子实体形成分生孢子球，标尺＝100μm；

图3为本发明通过PDA培养基培育出的海绵胶煤炱菌SS-Leshan菌块；

图4为实施例5的海绵胶煤炱菌菌种块，接种后第1天的生长情况；

图5为实施例5的海绵胶煤炱菌菌种块，接种后第6天的生长情况；

图6为实施例5的海绵胶煤炱菌菌种块，接种后第12天的生长情况；

图7为实施例5的海绵胶煤炱菌菌种块，接种后第18天的生长情况；

图8为实施例5的海绵胶煤炱菌菌种块的成品图；

图9为本发明海绵胶煤炱菌的Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的生长情况图；

图10为本发明海绵胶煤炱菌扩展到同一根新竹下方竹节的生长情况图；

图11为本发明海绵胶煤炱菌扩展到地面的生长情况图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式和对比例对本发明做进一步的详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施方式仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施方式中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。

实施例1

本实施例提供一株海绵胶煤炱菌，该菌株的名称为海绵胶煤炱菌SS-Leshan，分类名称为Scorias spongiosa，保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是CGMCC No.21446，保藏日期为2021年01月04日。

本实施例提供一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，包括如下步骤：

S1.选取上述海绵胶煤炱菌SS-Leshan在增殖培养基培养8天，得到所述菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为1份的浓度为4％的葡萄糖溶液、重量份数为1份的浓度为4％的蔗糖溶液、重量份数为0.5份的果糖和重量份数为1.5的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：采用无菌棉纱布将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方5cm，其后在每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次一次，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止保育剂喷洒，接种保育时间为6天，得到处理后的菌种块；

在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为4％的葡萄糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上；

其中，所述接种的培育条件为：含氧量18％，温度18℃，湿度55％，光照强度67Lux；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的菌种块自然生长8天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌；

其中，所述自然生长的条件为：含氧量18％，温度18℃，湿度55％，光照强度67Lux。

实施例2

本实施例提供一株海绵胶煤炱菌，同实施例1。

本实施例提供一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，包括如下步骤：

S1.选取上述海绵胶煤炱菌SS-Leshan在增殖培养基培养7天，得到所述菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为4份的浓度为3％的葡萄糖溶液、重量份数为5份的浓度为4％的蔗糖溶液、重量份数为1份的果糖和重量份数为1.8的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：采用无菌棉纱布将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方20cm，其后在每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次一次，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止保育剂喷洒，接种保育时间为12天，得到处理后的菌种块；

在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为6％的果糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上；

其中，所述接种的培育条件为：含氧量24％，温度35℃，湿度90％，光照强度2150Lux；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的菌种块自然生长7天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌；

其中，所述自然生长的条件为：含氧量24％，温度35℃，湿度90％，光照强度2150Lux。

实施例3

本实施例提供一株海绵胶煤炱菌，同实施例1。

本实施例提供一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，包括如下步骤：

S1.选取上述海绵胶煤炱菌SS-Leshan在增殖培养基培养6天，得到所述菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为1份的浓度为4％的葡萄糖溶液、重量份数为3份的浓度为2％的蔗糖溶液、重量份数为0.6份的果糖和重量份数为1.6的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：采用无菌棉纱布将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方10cm，其后在每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次一次，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止保育剂喷洒，接种保育时间为8天，得到处理后的菌种块；

在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为5％的蔗糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上；

其中，所述接种的培育条件为：含氧量20％，温度26℃，湿度60％，光照强度120Lux；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的菌种块自然生长6天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌；

其中，所述自然生长的条件为：含氧量20％，温度26℃，湿度60％，光照强度120Lux。

实施例4

本实施例提供一株海绵胶煤炱菌，同实施例1。

本实施例提供一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，包括如下步骤：

S1.选取上述海绵胶煤炱菌SS-Leshan在增殖培养基培养7天，得到所述菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为2份的浓度为2％的葡萄糖溶液、重量份数为4份的浓度为3％的蔗糖溶液、重量份数为0.9份的果糖和重量份数为1.7的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：采用无菌棉纱布将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方10cm，其后在每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次一次，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止保育剂喷洒，接种保育时间为6天，得到处理后的菌种块；

在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为4％的葡萄糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上；

其中，所述接种的培育条件为：含氧量22.3％，温度24.2℃，湿度78％，光照强度1400Lux；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的菌种块自然生长8天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌；

其中，所述自然生长的条件为：含氧量22.3％，温度24.2℃，湿度78％，光照强度1400Lux。

实施例5

本实施例提供一株海绵胶煤炱菌，同实施例1。

本实施例提供一种海绵胶煤炱菌的野外人工保育方法，包括如下步骤：

S1.选取上述海绵胶煤炱菌SS-Leshan在增殖培养基培养8天，得到所述菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为3份的浓度为4％的葡萄糖溶液、重量份数为2份的浓度为3％的蔗糖溶液、重量份数为0.5份的果糖和重量份数为1.5的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：采用无菌棉纱布将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方10cm，其后在每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次一次，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止保育剂喷洒，接种保育时间为6天，得到处理后的菌种块；

在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为4％的葡萄糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上；

其中，所述接种的培育条件为：含氧量20.57％，温度20.4℃，湿度65％，光照强度500Lux；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的的菌种块自然生长6天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌；

其中，所述自然生长的条件为：含氧量20.57％，温度20.4℃，湿度65％，光照强度500Lux。

将上述实施例1至实施例5得到的海绵胶煤炱菌进行质量测试，质量测试参考目前市售的优尚级竹燕窝、特级竹燕窝和经典级竹燕窝，海绵胶煤炱菌按照质量要求分为Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期，测试结果如下：

其中，Ⅰ期是指：海绵胶煤炱菌整体呈椭圆形状，温度较低时湿度合适时，小分支和大型分支胶质呈米白色透明状，晶莹剔透，底部有少量黑色物质呈稀糊状；单簇长4-10cm，宽3.5-6cm，高(厚度)2-4.5cm，可食用高度(厚度)1-3cm。

Ⅱ期是指：海绵胶煤炱菌整体呈椭圆形状，温度较低时湿度合适时，小分支和大型分支胶质呈米白色透明状，晶莹剔透；边缘部分或其他部位有少量淡黄色或黄棕色胶质分支；单簇长10-14cm，宽6-8cm，高(厚度)3-4cm，可食用高度(厚度)1.5cm；可食用高度(厚度)1-2cm。

Ⅲ期是指：海绵胶煤炱菌整体呈椭圆形状，温度较低时湿度合适时，大部分小分支和大型分支胶质呈米白色或淡黄色透明状，晶莹剔透，边缘部分或其他部位有较多淡黄色或黄棕色胶质分支；高温(35℃)，小分支要干呈褐黑色；可食用高度(厚度)1cm。

下面，我们使用实施例5作为典型案例，对本发明的海绵胶煤炱菌培养过程及海绵胶煤炱菌生长情况进行具体说明：

(1)实验时间：2020年秋季9月至11月，居竹伪角蚜繁殖生长期；

(2)试验地情况：宜宾市长宁县先锋村海绵胶煤炱菌繁殖技术试验地，海拔236.88m、104。55’E，28°32’N，含氧量20.57％，温度20.4℃，湿度65％，光照强度500Lux，早上温度低、湿度大，旁边为长宁县淯江河。试验地为2018年竹荪人工培育采收后，荒芜至今，新竹数量少，但试验地蚜虫感染的新竹数量多，形成宽2.5-3米的间隔带，新竹种类是硬头黄竹；

(3)选取菌种块：使用海绵胶煤炱菌SS-Leshan在增殖培养基培养8天，得到所述菌种块；

(4)配制保育剂：将重量份数为3份的葡萄糖溶液、重量份数为2份的蔗糖溶液、重量份数为0.5份的果糖和重量份数为1.5的乳糖混合均匀，得到保育剂；

(5)接种保育：采用无菌棉纱布将步骤(3)的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，所述无菌棉纱布经糖浓度为4％的葡萄糖溶液浸泡，所述菌种块位于所述居竹伪角蚜下方10cm，并保持菌种块湿润，其后在每日早上10点、下午14点和晚上18点，使用步骤(4)的保育剂对菌种块喷洒一次，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止保育剂喷洒，接种保育时间为12天，每6天测定海绵胶煤炱菌单簇大小一次；

(6)自然生长：将完成步骤(5)的菌种块自然生长6天；

(7)生长情况：

a.开始步骤(5)接种保育后的1天，如图1所示，海绵胶煤炱菌菌种的固定于新竹上的情况；

b.开始步骤(5)接种保育后的6天，如图2所示，海绵胶煤炱菌菌种单簇的规格为：长为2.2-2.5cm，宽0.8-1.2cm,高为0.6-0.9cm。

c.开始步骤(5)接种保育后的12天，如图3所示，海绵胶煤炱菌菌种单簇的规格为：长为4.0-4.5cm，宽2.0-2.7cm,高为1.0-1.3cm。

d.开始步骤(5)接种保育后的18天(即开始步骤(6)自然生长后的6天)，如图4所示，海绵胶煤炱菌菌种单簇的规格为：长6-8cm，宽3.5-6cm，高2-4cm,单簇重均值24.6g。

e.海绵胶煤炱菌成品规格：长6-8cm，宽3.5-6cm，高2-4cm,可食用高度为3.2-4cm，单簇重均值24.6g。

本实施例的结论：

(1)本发明海绵胶煤炱菌SS-Leshan制备的菌种块经本发明的培养方法处理后，海绵胶煤炱菌成品规格达到：长6-8cm，宽3.5-6cm，高2-4cm,可食用高度为3.2-4cm，单簇重均值24.6g，说明海绵胶煤炱菌整个过程生长良好，成品能够符合食用级别的要求；

(2)在97簇海绵胶煤炱菌样品中，达到Ⅰ期质量标准的海绵胶煤炱菌成品有75簇，达到Ⅱ期质量标准的海绵胶煤炱菌成品有14簇，达到Ⅲ期质量标准的海绵胶煤炱菌成品有8簇，合格率达到70％以上，说明使用本发明培养海绵胶煤炱菌稳定性较好，有效缓解了海绵胶煤炱菌生长依赖气候条件的限制；

(3)本发明还能够提升海绵胶煤炱菌菌种的繁育能力，生长过程中的海绵胶煤炱菌菌种能够迅速扩展到同一根新竹下方竹节上和地面，以及相邻的新竹上，可让成片新生且有居竹伪角蚜的竹林迅速且在同一时间获得大量的成品海绵胶煤炱菌，为海绵胶煤炱菌规模化生产奠定一定基础。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种海绵胶煤炱菌（Scorias spongiosa）的野外人工保育方法，其特征在于，该菌株的名称为海绵胶煤炱菌SS-Leshan，保藏单位是中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是CGMCCNo.21446，保藏日期为2021年01月04日，所述海绵胶煤炱菌的具体野外人工保育方法为：

S1.取所述的海绵胶煤炱菌制成的菌种块；

S2.配制保育剂：将重量份数为1-4份的葡萄糖溶液、重量份数为1-5份的蔗糖溶液、重量份数为0.5-1份的果糖和重量份数为1.5-2.0的乳糖混合均匀，得到保育剂；

S3.接种保育：将步骤S1的菌种块接种在生长有居竹伪角蚜的新竹上，菌种块位于居竹伪角蚜下方5-20cm处，每日使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块，至菌种块形成珊瑚状分支后，停止喷洒保育剂，得到处理后的菌种块；

S4.自然生长：待步骤S3处理后的菌种块自然生长6-8天，即得人工保育后的海绵胶煤炱菌；

步骤S3中，所述接种的条件为：含氧量为18-24％，温度为18-35℃，湿度为55-90％，光照强度为67-2150Lux；

所述自然生长的条件为：含氧量为18-24％，温度为20-35℃，湿度为55-90％，光照强度为67-2150Lux。

2.根据权利要求1所述的野外人工保育方法，其特征在于，步骤S1中，将所述的海绵胶煤炱菌在增殖培养基培养6-8天，得到所述菌种块。

3.根据权利要求1所述的野外人工保育方法，其特征在于，步骤S2中，所述保育剂由重量份数为1.5-3份的葡萄糖溶液、重量份数为2-3份的蔗糖溶液、重量份数为0.6-0.8份的果糖和重量份数为1.6-1.8的乳糖混合均匀后所得。

4.根据权利要求1所述的野外人工保育方法，其特征在于，步骤S3中，在所述接种时，先将无菌棉纱布浸泡在糖浓度为4％-6％的含糖溶液中直至浸透，然后取出棉纱布，用于将所述菌种块缠绕固定在所述生长有居竹伪角蚜的新竹上。

5.根据权利要求4所述的野外人工保育方法，其特征在于，所述含糖溶液为葡萄糖溶液、果糖溶液和蔗糖溶液中的任意一种或多种。

6.根据权利要求1所述的野外人工保育方法，其特征在于，步骤S3中，所述菌种块位于所述居竹伪角蚜下方10-20cm处。

7.根据权利要求1所述的野外人工保育方法，其特征在于，步骤S3中，每日早、中、晚各使用步骤S2的保育剂喷洒菌种块一次，每次保育剂的用量为2-7ml。