CN112979654B - 杂芳基稠环化合物、其制备方法及应用 - Google Patents
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Classifications
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Abstract
本发明提供了一种新的取代的杂芳基稠环化合物、其制备方法，其可用作TRK抑制剂，在黑色素瘤、肺癌、头颈癌、胰腺癌、乳腺癌、甲状腺癌、神经胶质瘤等TRK激酶介导的疾病中具有广泛良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及医药化学技术领域，更具体的涉及一种被取代的杂芳基稠环化合物、其制备方法以及在TRK抑制剂中的应用。
背景技术
TRK(Tropomyosin receptor kinase)，为神经营养因子酪氨酸激酶受体，隶属于受体酪氨酸激酶家族。酪氨酸激酶NTRK基因包含NTRK1、NTRK2和NTRK3，分别负责编码原肌球蛋白受体激酶(TRK)家族蛋白TRKA、TRKB和TRKC的合成；其中，NGF(神经生长因子)结合TRKA，BDNF(衍生的神经营养因子)结合TRKB，以及NT3(神经营养因子3)结合TRKC。神经营养因子与TRK蛋白质结合后可诱导受体二聚体化、磷酸化并激活下游PI3K、RAS/MAPK/ERK和PLC-γ的信号级联通路。TRK激酶在神经的发育过程中发挥重要的生理功能，包括神经元轴突的生长与功能维持、记忆的发生发展以及保护神经元免受伤害等等。但是，TRK信号通路的改变，包括基因融合、蛋白过度表达或单核苷酸改变，已经被发现是许多肿瘤的致病原因，特别是NTRK基因的融合，是目前其中最明确的致癌原因。NTRK在黑色素瘤(Truzzi,F.etal.Dermato-Endocrinology,2008(1):32-36)、乳腺癌(Jin,W.et al.Carcinogenesis,2010(11):1939-1947)、胃癌(Du,J.et al.World J.Gastroenterology,2003(7):1431-1434)和神经胶质瘤(Brodeur,G.M.et al.Nat.Rev.Cancer,2003(3):203-216)等多种肿瘤中都有发现，如CD74-NTRK1，MPRIP-NTRK1，QKINTRK2，ETV6-NTRK3，BTB1-NTRK3等。虽然在常见肺癌、结直肠癌中的发病率低于5％，但该通路在各癌种致病中共享，目前的临床试验药物可以覆盖NTRK+的泛癌种治疗。因此，近几年来，TRK融合蛋白已经成为一个有效的抗癌靶点和研究热点。
2018年11月26日，美国食品和药物管理局FDA加速批准由Bayer和LoxoOncology共同开发的泛肿瘤组织靶向抗癌药VITRAKVI(商品名larotrectinib)上市，用于治疗携带NTRK基因融合的局部晚期或转移性实体瘤的成人和儿童患者。除此之外，相关靶点的研究分别还有Ignyta公司的Entrectinib、Ono Pharmaceutical公司的ONO-7579以及TPTherapeutics公司的TPX-0005等。但在接受TRK抑制剂治疗后，癌症患者的TRK基因可能产生一些突变(如NTRK1 G595R,NTRK3 G623R等位点的突变)，导致耐药性产生，这个时期的病人需要新的治疗药物。寻找新的TRK激酶抑制剂有望解决NTRK突变引起的肿瘤耐药性问题。目前针对突变问题的有拜耳和LOXO Oncology公司合作开发的第二代TRK抑制剂LOXO-195，该药正在进行二期临床试验。
鉴于TRK激酶的重要生理功能，寻找有效的TRK激酶抑制剂是十分必要的。
发明内容
本发明目的在于提供一种新颖的杂芳基稠环化合物，这些新颖的杂芳基稠环化合物可用作TRK抑制剂，并进一步用于TRK抑制剂介导的疾病的相关药物制备以及病症治疗，本发明所提及的新颖的杂芳基稠环化合物具有更好的激酶抑制效果或更低的抑制剂量或对于产生TRK基因突变产生的耐药性问题仍具有较好治疗效果。
本发明提供一种新颖的化合物，其具有式A所示结构或者其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体，或其混合物，或其氘或氚代化合物，或其可药用的盐或溶剂化物：
方案详述
基于通式A的本发明第一种情况：
X1选自N、C-X，X选自氢、卤素；X2独立的选自CR4R5、O；X3、X4独立的选自CR4R5，R4、R5独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；R1选自氢、氘、卤素、氰基、-NR8R9、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；R8、R9独立的选自氢、C1-6烷基、-C(＝O)R10、-C(＝O)NHR10、-S(＝O)2R10，R10选自C1-6烷基、芳基；Z选自芳基、杂芳基，其中芳基、杂芳基独立的任选被卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基和/或C1-6烷氧基所取代，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代。
在该第一种情况中，当X1选自C-X，X选自卤素时：L选自氢、卤素、羟基、硝基、-C(＝O)R6、-C(＝O)NR6R7、-C(＝O)OR6、-C(＝S)NR6R7、-L1、-CRR0L1、-C(＝O)L1、-CR＝CR0C(＝O)L1、-C≡CC(＝O)L1、-CR＝CRR0、-C≡CR；R、R0独立的选自氢、氘、氚、卤素、羟基、氨基、巯基、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基所取代；R6、R7独立的选自氢、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基独立的任选被卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基所取代；L1选自芳基、杂芳基，其中芳基、杂芳基独立的任选被羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6环烷基和/或C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6环烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-3烷氧基、-C(＝O)NR6R7、-C(＝O)OR6所取代；
在该第一种情况中，当X1选自N，或者，当X1选自C-X，X选自氢时：L选自吡咯基、吡唑基、-L1、-CRR0L1、-C(＝O)L1、-CR＝CR0C(＝O)L1，L1选自咪唑基、1,2,3-三氮唑基、1,2,4-三氮唑基、四氮唑基；其中吡咯基、吡唑基、咪唑基、四氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；其中1,2,3-三氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；其中1,2,4-三氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；当L选自-L1且L1选为吡唑基时，吡唑基五元环上的碳直接与母核稠环基团连接；R、R0独立的选自氢、氘、氚、卤素、羟基、氨基、巯基、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基；R6、R7独立的选自氢、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基独立的任选被卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基所取代。
在一些更具体的实施方案中，进一步描述：当X1选自C-X，X选自卤素时，L1选自Y1、Y2、Y3、Y4独立的选自-CH、N、O、S、-CRb、-NRb，Rb选自氢、-C(＝O)NR6R7、C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环、3-7元杂环烷基，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环、3-7元杂环烷基独立的任选被氢、卤素、羟基、氨基、C1-3烷氧基所取代。
在一些更具体的实施方案中，进一步描述：Z选自芳基或含N、O或S杂芳基，其中芳基或含N、O或S杂芳基独立的任选被卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基和/或C1-6烷氧基所取代，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代。
在一些更具体的实施方案中，进一步描述：Z选自 W1、W2独立的选自CR3、N；R2、R3独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代。
在一些更具体的实施方案中，进一步描述：Z选自
在一些更具体的实施方案中，进一步描述：L1选自 时，Rb、Rc独立的选自氢、羟基、氨基、氰基、硝基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基所取代；L1选自/>时，Rb、Rc独立的选自氢、羟基、氨基、氰基、硝基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基所取代；L1选自/>时，Rb、Rc独立的选自氢、羟基、氨基、氰基、硝基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基，其中C2-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基所取代。
在另一些更具体的实施方案中，进一步描述：L1选自
在另一些更具体的实施方案中，进一步描述：L1选自 时，Rb、Rc独立的选自氢、甲基、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基，其中甲基、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基独立的任选被卤素、羟基、氨基、甲氧基所取代；L1选自/>时，Rb、Rc独立的选自氢、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基，其中甲基、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基独立的任选被卤素、羟基、氨基、甲氧基所取代。
在另一些更具体的实施方案中，进一步描述：L1选自
第一种情况中，在另一些更为具体的实施方案下，通式A化合物具有通式A-1所示结构：
基于通式A-1，在这些实施方案中：X1选自C-H、N、C-F；X2选自CH2、O；R1选自氢、氘、氟、氯、甲基、氨基、三氟甲基、氰基；W1、W2独立的选自CR3、N；R2、R3独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；L选自-L1、-CRR0-L1、-C(＝O)-L1，L1选自吡咯基、吡唑基、咪唑基、1,2,3-三氮唑基、1,2,4-三氮唑基、四氮唑基；其中吡咯基、吡唑基、咪唑基、四氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；其中1,2,3-三氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；其中1,2,4-三氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；当L选自-L1且L1选为吡唑基时，吡唑基五元环上的碳直接与母核稠环基团连接；R、R0独立的选自氢、氘、氚、卤素、羟基、氨基、巯基、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基；R6、R7独立的选自氢、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基独立的任选被卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基所取代；进一步优选选择，咪唑基、1,2,3-三氮唑基、1,2,4三氮唑基、四氮唑基五元环上的碳直接与母核稠环或L中的-CRR0-或-C(＝O)-基团连接。
第一种情况中，在另一些更为具体的实施方案下，通式A化合物还可具有通式A-2所示结构：
基于通式A-2，在这些实施方案中：X1、L可如前文所述各方案中所定义的；R1选自氢、氘、氟、氯、甲基、氨基、三氟甲基、氰基；W1、W2独立的选自CR3、N；R2、R3独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代。
基于通式A的本发明第二种情况：
X1选自N、C-X，X选自氢、卤素；X2独立的选自CR4R5、O；X3、X4独立的选自CR4R5，R4、R5独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；R1选自氢、氘、卤素、氰基、-NR8R9、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；R8、R9独立的选自氢、C1-6烷基、-C(＝O)R10、-C(＝O)NHR10、-S(＝O)2R10，R10选自C1-6烷基、芳基；Z选自芳基、杂芳基，其中芳基、杂芳基独立的任选被卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基和/或C1-6烷氧基所取代，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；L选自-L1、-CRR0L1、-C(＝O)L1、-CR＝CR0C(＝O)L1、-C≡CC(＝O)L1，L1选自吡咯基、吡唑基、咪唑基、1,2,3-三氮唑基、1,2,4-三氮唑基、四氮唑基；其中吡咯基、吡唑基、咪唑基、四氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；其中1,2,3-三氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；其中1,2,4-三氮唑基独立的任选被-C(＝O)NR6R7、羟基、氨基、氰基、硝基、C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基所取代，其中C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基、-C(＝O)NR6R7和/或-C(＝O)OR6所取代；当L选自-L1且L1选为吡唑基时，吡唑基五元环上的碳直接与母核稠环基团连接；R、R0独立的选自氢、氘、氚、卤素、羟基、氨基、巯基、氰基、硝基、C1-6烷基、C1-6烷氧基；R6、R7独立的选自氢、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基、6-10元芳基独立的任选被卤素、羟基、硝基、氰基、C1-4烷基所取代；进一步优选选择，咪唑基、1,2,3-三氮唑基、1,2,4三氮唑基、四氮唑基五元环上的碳直接与母核稠环或L中的-CRR0-或-C(＝O)-基团连接。
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在一些具体的实施方案中，R1进一步优选选自氢、氘、氟、氯、甲基、氨基、三氟甲基、氰基；
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在一些具体的实施方案中，进一步描述：Z选自芳基或含N、O或S杂芳基，其中芳基或含N、O或S杂芳基独立的任选被卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基和/或C1-6烷氧基所取代，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基独立的任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代。
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在一些具体的实施方案中，进一步描述：Z选自 W1、W2独立的选自CR3、N；R2、R3独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代。
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在一些具体的实施方案中，进一步描述：Z选自
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在另一些具体的实施方案中，进一步描述：L1选自时，Rb、Rc独立的选自氢、羟基、氨基、氰基、硝基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基所取代；L1选自/>时，Rb、Rc独立的选自氢、羟基、氨基、氰基、硝基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基，其中C1-6烷基、C3-7环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基所取代；L1选自时，Rb、Rc独立的选自氢、羟基、氨基、氰基、硝基、-C(＝O)NH2、-C(＝O)NHCH3、C2-6烷基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基，其中C2-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基、C3-7杂环烷基、5-6元芳杂环基独立的任选被卤素、羟基、氨基、C1-6烷氧基所取代。
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在另一些具体的实施方案中，进一步描述：L1选自
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在另一些具体的实施方案中，进一步描述：L1选自 时，Rb、Rc独立的选自氢、甲基、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基，其中甲基、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基独立的任选被卤素、羟基、氨基、甲氧基所取代；L1选自/>时，Rb、Rc独立的选自氢、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基，其中甲基、乙基、正丙烷基、异丙烷基、环丙烷基独立的任选被卤素、羟基、氨基、甲氧基所取代。
基于前述本发明第二种情况的基本方案描述下，在另一些具体的实施方案中，进一步描述：L1选自
另外，在本发明的一些具体实施方案中，本发明的通式A的化合物可选择下表所示结构的化合物中的任意一种、或者其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体，或其混合物，或其氘或氚代化合物，或其可药用的盐或溶剂化物：
化合物列表
/>
/>
/>
/>
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在另一个方面，本发明还提供了用于制备前述本发明所提供的杂芳基稠环化合物的中间体，该中间体具有下式Ⅱ所示结构或其立体异构体：
X1选自N、C-X，X选自卤素；
W1、W2独立的选自CR3、N；
R2、R3独立的选自氢、卤素、羟基、氨基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基，其中C1-6烷基、C1-6烷氧基任选被卤素、羟基、氨基和/或C1-3烷氧基所取代；
R11选自氢、卤素、醛基、氰基、-OR12、-C(＝O)CH3、-C(＝O)O CH2CH3，其中-C(＝O)CH3独立的任选被卤素或R12所取代；R12选自对甲基苯磺酰基、苯磺酰基、甲磺酰基、三氟甲磺酰基。
另外，在本发明的一些具体实施方案中，本发明的通式Ⅱ的中间体可选择下表所示结构的化合物中的任意一种、或者其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体，或其混合物，或其氘或氚代化合物：
中间体列表
本发明进一步提供了前述中间体的制备方法，视R11的选择不同，合成路线分别如下：
当R11选自-C(＝O)O CH2CH3时，合成路线：
当R11选自氢时，在步骤1的基础上，还包含下述步骤2和3：
当R11选自甲酰基时，在步骤1、2和3的基础上，还包含下述步骤2和3：
当R11选自乙酰基时，在步骤1、2和3的基础上，还包含下述步骤5：
当R11选自卤代乙酰基时，在步骤1、2、3和5的基础上，还包含下述步骤6：
当R11选自氰基时，合成路线如下：
当X1选自N，R11选自氢时，合成路线如下：
当R11选自甲酰基时，在步骤7和8的基础上，还包含下述步骤9：
以上合成路线中，根据本发明的具体实施方案，步骤1、8和10在碱性条件、有机溶剂下反应，优选添加有机碱控制达到所述碱性条件，所述有机碱优选为N,N-二异丙基乙胺，所述有机溶剂优选为乙腈；在碱性条件下水解的步骤2中，优选添加无机碱控制达到碱性条件，所述无机碱优选为氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或两种以上的组合；在酸性条件下脱羧的步骤3中，优选添加无机酸控制达到酸性条件，所述无机酸优选为浓盐酸；步骤2和3的优选反应溶剂为有机溶剂，该有机溶剂优选为乙醇；步骤4和9的Vilsmeier-Haack反应有机溶剂优选为N,N-二甲基甲酰胺，优选添加三氯氧磷作为反应催化剂；步骤5的Vilsmeier-Haack反应有机溶剂优选为N,N-二甲基乙酰胺，优选三氯氧磷作为反应试剂；步骤6中在碱性条件、有机溶剂下反应，优选添加有机碱控制达到所述碱性条件，所述有机碱优选为吡啶，所述有机溶剂优选为二氯甲烷，所述卤代试剂优选为三溴化吡啶；步骤7中还原剂优选锌粉和氯化铵，优选溶剂为乙醇：水：四氢呋喃＝3:2:1。
在另一个方面，本发明所提供述及的氘或氚代化合物是指化合物中的至少一个氢被氘或氚取代。氘或氚代化合物在某些药学因素考量下可望提供诸如提升代谢稳定性、增加药物体内半衰期或降低使用剂量等效果。
本发明示例性的氘代化合物如下：
/>
应当说明的是，以上氘代结构为本发明的示例性氘代化合物，其具体氘代的位点和数量可根据本发明的化合物结构做出更多选择。氚代化合物也同理。
在另一个方面，本发明所提供述及的中间体和化合物可以以不同的互变异构体形式存在，这些互变异构形式的化合物也均包括在本发明涵盖的范围之内。典型的互变异构体例如质子迁移互变异构体，其是经由质子的迁移造成的结构互变，具体的例如酮-烯醇异构化。本发明所提供述及的中间体和化合物中的咪唑结构部分、三氮唑结构部分中，质子可在两个环氮之间相互迁移，最终造成结构互变，示例性结构如下：
应当说明的是，以上三氮唑互变结构仅为本发明的示例性互变异构体化合物，本发明述及的化合物还具有多个互变位点，其它具体的位点和变化形式本质上等同于本发明述及的结构，在此一并纳入本发明的范围之内。
在另一个方面，本发明还提供药物组合物，其包含前述任一本发明所提供的基于通式A的化合物和药学上可接受的辅料。药学上可接受的辅料是指对有机体无明显的刺激或负面作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些辅料。合适的辅料是本领域技术人员熟知的，例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或水可膨胀的聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等。对于有一定刺激或负面作用的辅料，应按照收益-风险比进行衡量，最终选用的辅料应具有可接受的收益-风险比。
在另一个方面，本发明还提供前述基于通式A的化合物或所提供的药物组合物在制备TRK抑制剂中的用途。
在另一个方面，本发明还提供前述基于通式A的化合物或所提供的药物组合物在制备治疗TRK激酶介导的疾病的药物中的用途。
在另一个方面，本发明还提供抑制TRK的方法或治疗TRK激酶介导的疾病的方法，包括向受试者施用有效量的前述基于通式A的化合物或其药学上可接受的盐或所提供的药物组合物的步骤。
所述TRK激酶介导的疾病包括但不限制于肺癌、头颈癌、乳腺癌、甲状腺癌、神经胶质瘤和结直肠癌等。
另一方面，本发明所述的“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的化合物所形成的缔合物。形成溶剂化物的溶剂包括，但并不限于，水，异丙醇，乙醇，甲醇，丙酮、乙腈、四氢呋喃、异丙醚、二氯甲烷、二甲亚砜，乙酸乙酯，乙酸，氨基乙醇。
与现有技术相比，本发明提供了基于式A所示结构的化合物，或其异构体、药学上可接受的溶剂化物、或其盐。其用作TRK激酶抑制剂，对于TRK具有较高的抑制活性、较低的抑制剂量或者对于突变的TRK基因的常规耐药性问题的较好抑制效果。
具体实施方式
本发明中，定义：
1.除非另外定义，否则在此使用的所有技术和科学术语具有与要求保护的主题所属领域的技术人员通常所理解的相同的含义。除非另有说明，否则所有披露引用的公开材料均通过引用它们的全部内容的方式并入本文。
2.本发明所述的“取代”，表示所给结构中的一个或多个氢原子被取代基所取代。当所给出的结构式中不止一个位置能被取代基所取代时，所述取代基可以相同或不同。上述取代基可以任选的被一个或多个相同或不同的次级取代基所取代。其中所述的次级取代基包括并不限于氟、氯、溴、碘、氰基、硝基、烷基、卤素烷基、杂烷基、链烯基、炔基、羟基、巯基、氨基、酰胺基、烷氨基酰基、芳基、杂芳基等。所述杂烷基包括但不限于羟基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、烷氨基烷基、氰基烷基、烷氧基、烷硫基等。
3.本发明中所描述的取代基用化学键连接到环上形成的环体系，代表取代基在环上任何可取代的位置都可以取代。例如，表示Rb可取代咪唑基团上任何可能被取代的位置，即1、2、4或5中任意可被取代的位置。
4.本文提供的化合物具有一个或多个立体中心，本发明所述的“异构体”指代本发明所描述的结构式包括其所有的同分异构形式(如对映异构，非对映异构，和几何异构(或构象异构))：例如含有不对称中心的R、S构型，双键的(Z)、(E)异构体，和(Z)、(E)的构象异构体。因此，本发明的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体，非对映异构体，或几何异构体(或构象异构体)的混合物都属于本发明的范围。
5.术语“任选被……取代”、“任选的”、“任选地”、“任意取代”意指描述相关取代情况可能发生或可能不发生，并且该描述包括所有可能发生情况和不发生情况的实例。任意取代的基团可以是未取代的(例如，-CH2CH3)、完全取代的(例如，-CF2CF3)、单取代的(例如，-CH2CH2F)或在完全取代和单取代之间以任意程度取代的(例如，-CH2CHF2、-CHFCH2F等)。
6.缩写意义列表：
Pd(dppf)Cl2：[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯
BOC：叔丁氧羰基
Pt-C：铂炭催化剂
MeOH：甲醇
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
SEMCl：2-(三甲硅烷基)乙氧甲基氯
THF：四氢呋喃
SEM：2-(三甲硅烷基)乙氧甲基
EtOH：乙醇
TLC：薄层色谱法
Prep-TLC：制备薄层色谱法
DIPEA：N,N-二异丙基乙胺
TEA：三乙胺
TMSI：三甲基硅咪唑
Tf2O：三氟甲磺酸酐
DCM：二氯甲烷
AcOH：乙酸
nBuLi：正丁基锂
Et3SiH：三乙基硅烷
CuI：碘化亚铜
DMSO：二甲亚砜
MeI：碘甲烷
i-PrOH：异丙醇
ACN：乙腈
TMSI：三甲基硅咪唑
BOP：卡特缩合剂
DME：乙二醇二甲醚
TosMIC：对甲基苯磺酰甲基异腈
Conc.HCl：浓盐酸
NBS：N-溴代丁二酰亚胺
tBuOK：叔丁醇钾
TBS：叔丁基二甲基硅烷
(CH2O)n：多聚甲醛
TLC：薄层色谱法
LCMS：液相色谱与质谱联用
V:V：体积比
Flash：快速柱色谱
M：代表试剂的摩尔浓度，如1M表示1mol/L
N：代表试剂的当量浓度，如1升NaOH溶液中含有40克NaOH,它就是1当量浓度,写为1N
以下结合具体实施例来进一步阐述本发明的的技术构思以及实现方式，其应当理解为对本发明的进一步阐释，而不应当理解为对本发明保护范围的限制，在不脱离本发明构思原理的前提下，还可以基于本发明的具体实施例进行若干基团替换和修饰，这些显而易见的修改或修饰也落入本发明的权利要求保护范围之内。以下具体实施例只是本发明涵盖的具体典型化合物，本发明同时披露的其他同类化合物可同理按照类同的方法结合现有技术公开的通常技术合成手段予以确切制备，不再一一赘述。
实施例
中间体的制备
制备例1：(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶的制备
本制备例1的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号为WO2011146336 A1的PCT专利或公开号US20160168156 A1的美国专利所记载的方法予以制备。
制备例2：5-氯[1,5-a]并嘧啶-3-甲醛的制备
本制备例2的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号为US20140234254 A1的美国专利或公开号为CN103965199A的中国专利所记载的方法予以制备。
制备例3：1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑的制备
将咪唑(6.8g)溶于四氢呋喃(100mL)，保持0℃且氮气保护下分批加入氢化钠(36.0g)，加毕，体系于室温搅拌1小时，再将氯甲基三甲基硅乙基醚(20.0g)溶于四氢呋喃后缓慢加入反应体系中，该体系保持室温反应过夜，TLC和LCMS显示原料消耗完毕。将反应体系倒入水中，乙酸乙酯萃取两次，所得滤液用无水硫酸钠干燥后浓缩。粗品经柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝50:1(V:V))得标题化合物7.7g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝199.1.
制备例4：(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷的制备
本制备例4的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号为WO2016077841 A1的PCT专利或公开号US20170281632 A1的美国专利所记载的方法予以制备。
制备例5：5-氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备
本制备例5的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号WO2019126122 A1的PCT专利中所记载的方法予以制备。
制备例6：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
步骤1：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备
将(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(3.0g)和5-氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(3.1g)溶于乙腈(30ml)中，滴加二异丙基乙胺(8.3g)，60℃搅拌20分钟，TLC显示原料反应完全,将体系浓缩，Flash柱层析得标题化合物3.8g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝404.2.
步骤2：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.8g)溶于乙醇(20mL)中，加入2mol/L的氢氧化锂溶液12mL。反应1h后加入浓盐酸至体系呈酸性，TLC显示原料反应完全，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝20/1～5/1(V:V))纯化得到标题化合物424mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝332.1.
步骤3：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
/>
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(400mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，冰浴下滴加三氯氧磷(600mg)，室温搅拌2h后向体系加水。TLC显示原料反应完全，加入饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得到标题化合物408mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝360.1.
制备例7：5-氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的制备
本制备例7的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号为US20170145018 A1的美国专利中所记载的方法予以制备。
制备例8：(R)-3-氟-5-(吡咯烷-2-基)吡啶的制备
本制备例8的中间体还可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号为CN108101820 A的中国专利或公开号为US20160168156 A1的美国专利所记载的方法予以制备。
制备例9：甲基亚胺酸酰肼的制备
本制备例9的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号为JP2015051956 A的日本专利或《Metal hydrazides.VIII.Synthesis ofamidrazones from nitriles and sodium hydrazide,Kauffmann,Thomas；et,ChemischeBerichte(1964),97(12),3436-43》或《Synthesis of amidrazones,Kauffmann,Th.；et,Angewandte Chemie(1963),75,344》中所记载的方法予以制备。
制备例10：2-肼基-2-亚氨基乙酸乙酯的制备
本制备例10的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号WO2010020556 A1的PCT专利中所记载的方法予以制备。
制备例11：(R)-2-溴-1-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基乙酮的制备
步骤1：(R)-1-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]乙醇酮的制备
将制备例6中的(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(8.5g)溶于N,N-二甲基乙酰胺(120mL)中，冰浴冷却，滴加三氯氧磷(39.8g)，滴加完后，将体系升温至60℃反应过夜，TLC显示原料已反应完全。向体系中加入饱和碳酸氢钠水溶液，调节pH＝7，乙酸乙酯萃取，合并有机相，干燥，过滤，浓缩。所得粗品经柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2:1(V:V))纯化得标题化合物9.7g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝374.2.
步骤2：(R)-2-溴-1-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基乙酮的制备
将(R)-1-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]乙醇酮(1.4g)溶于二氯甲烷(25mL)中，室温下加入吡啶(380mg)，体系冰浴冷却后，分批加入三溴化吡啶鎓盐(1.42g)，将体系恢复至室温反应过夜。次日反应结束后，体系浓缩后所得粗品经柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2:1(V:V))纯化得标题化合物460mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝452.2.
制备例12：(R)-2-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-甲醛的制备
步骤1：2-(甲硫基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪的制备
将4-氯-2-(甲硫基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪(1.0g)溶于乙醇、水和四氢呋喃混合溶液中，加入锌粉(1.6g)和氯化铵(1.1g)。室温反应20分钟，TLC显示原料反应完全，浓缩溶剂，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品经柱层析纯化得标题化合物800mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝167.0.
步骤2：(R)-2-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪的制备
将2-(甲硫基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪(200mg)和(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯-2-基)吡啶(240mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，滴加N,N-二异丙基乙胺(620mg)，120℃反应2小时，LCMS显示原料反应完全，乙酸乙酯萃取，氯化锂溶液反洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。所得粗品经反相制备纯化得标题化合物化合物290mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝314.9.
步骤3：(R)-2-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪-8-甲醛的制备
/>
将(R)-2-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑[1,5-a][1,3,5]三嗪(240mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，氮气保护，滴加三氯氧磷(350mg)，室温反应过夜。LCMS显示原料反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，氯化锂溶液反洗，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩。所得粗品经柱层析纯化得标题化合物135mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝343.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(s,0.7H),9.56(s,0.3H),9.52(s,0.3H),9.34(s,0.7H),8.43(s,0.7H),8.36(d,0.3H),8.04-8.02(s,1H),7.45-7.42(m,0.3H),7.36-7.33(m,0.7H),5.41-5.39(m,0.7H),5.35-5.32(m,0.3H),4.05-4.00(m,1H),3.95(s,3H),3.86-3.83(m,0.3H),3.76-3.69(m,0.7H),2.40-2.35(m,1H),2.05-1.84(m,3H).
制备例13：3-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)异噁唑烷的制备
本制备例13的中间体可通过现有技术公开的各种制备方法予以制备，例如通过公开号WO2019165967 A1的PCT专利中所记载的方法予以制备。
实施例1：(R)-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
步骤1：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
称取(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(7.0g)溶于乙腈(100mL)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(9.2g)和5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(6.5g)。体系于60℃下搅拌6小时，TLC显示原料消耗完毕后，将体系倒入400mL水中，二氯甲烷萃取，干燥，浓缩。所得粗品用柱层析纯化得标题化合物10.0g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝342.1.
步骤2：(5-((R)-2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇的制备
将1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑(7.0g)溶于无水四氢呋喃(100mL)，氮气保护下降温至-78℃，缓慢滴加正丁基锂(21.2mL)，保持温度不高于-65℃，完毕保持该温度反应40分钟，将(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(9.6g)溶于干燥四氢呋喃(300mL)，缓慢滴入反应体系中，始终保持温度不高于-65℃，完毕保持该温度反应2小时，将反应体系倒入水中，乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩。所得粗品用反相制备纯化得标题化合物2.0g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝540.1.
步骤3：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑吡啶-2-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
称取(5-((R)-2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇(600mg)溶于三氟乙酸/水(30mL/10mL)中，搅拌条件下加入三乙基硅烷(644mg)，完毕体系于室温搅拌过夜。LCMS检测反应完全，将体系倒入水中，用饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝9，二氯甲烷萃取，干燥，浓缩，得标题化合物粗品500mg，无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝524.1.
步骤4：(R)-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
将(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-((1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑吡啶-2-基)甲基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(20mg)，碘化亚铜(2mg)和醋酸(1滴)溶于二甲基亚砜(1mL)中，置换氧气三次后120℃反应8小时。将反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩，得20mg标题化合物，无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝538.1.
步骤5：(R)-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
将(R)-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲酮(20mg)溶于三氟乙酸/水(3mL/1mL)中，体系于室温条件下反应过夜。将反应液倒入水中，饱和碳酸钠水溶液调pH＝9左右，乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩，反相制备纯化得标题化合物0.5mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝408.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,J＝7.5Hz,1H),8.41(s,1H),7.90(dd,J＝8.1,1.3Hz,1H),7.63(s,1H),7.55(dd,J＝8.0,1.3Hz,1H),7.36(d,J＝7.5Hz,1H),7.28(s,2H),5.38(t,J＝6.8Hz,1H),4.03(s,3H),3.97(dt,J＝9.5,6.9Hz,1H),3.74(dt,J＝9.5,6.9Hz,1H),2.02(tdd,J＝10.7,5.9,3.0Hz,1H),1.89–1.72(m,2H),1.72–1.58(m,1H).
实施例2：(R)-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲酮
将实施例1中的(R)-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮(61mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，依次加入碳酸铯(96mg)和碘甲烷(17mg)，室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品经反相制备纯化得标题化合物21mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝422.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05-8.59(m,2H),8.10-7.98(m,1H),7.45-7.04(m,3H),6.68-5.17(m,2H),3.99(s,3H),3.89-3.63(m,2H),3.36(s,3H),2.33-1.92(m,4H).
实施例3：(5-((R)-2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲醇的制备
将实施例1中的(5-((R)-2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇(0.1g)溶于三氟乙酸/水(4mL/1mL)的混合溶剂中，体系于室温搅拌过夜，TLC显示原料反应完全，加入饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝7～8，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物16mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝410.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.03-11.63(m,1H),8.55(dd,J＝32.0,28.0Hz,1H),8.08(t,J＝4.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.32(s,1H),7.07-6.88(m,1H),6.79-6.57(m,1H),6.52-6.45(m,1H),6.01-5.83(m,1H),5.75-5.61(m,2H),5.45-5.02(m,1H),3.97(s,3H),3.75-3.53(m,1H),2.32(s,1H),2.08-1.94(m,1H),1.90-1.78(m,2H).
实施例4：(R)-(5-(5-氟吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
步骤1：5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
将5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(7.5g)溶于甲醇(160mL)中，加入甲醇钠(2.6g)，室温搅拌1小时，TLC显示原料反应完全，加入水(40mL)，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得粗品7.2g无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝178.0.
步骤2：(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇的制备
将1-(2-(三甲基硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑(0.2g)溶于无水四氢呋喃中，降温至-78℃，在该温度下滴加丁基锂(0.66mL)，滴加完后继续在-78℃下搅拌0.5～1小时，随后将5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(0.3g)溶于无水四氢呋喃(10mL)后，滴入反应体系，滴加时控温-60℃以下，滴加完毕，体系缓慢升至室温过夜，TLC显示原料反应完全，加入饱和氯化铵水溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品用Prep-TLC(二氯甲烷/甲醇＝15/1(V:V))纯化得标题化合物44mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝376.1.
步骤3：(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰基)(1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-酰基)甲酮的制备
将(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)甲醇(50mg)溶于二甲基亚砜(1mL)中，依次加入碘化亚铜(5mg)和冰乙酸(5mg)，氧气置换，体系升温至120℃，搅拌过夜，TLC显示原料反应完全，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品用Prep-TLC(二氯甲烷/甲醇＝15/1(V:V))纯化得标题化合物8mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝374.1.
步骤4：(5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
将(5-甲氧基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰基)(1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-酰基)甲酮(765mg)溶于4M盐酸/1,4-二氧六环(1mL)和浓盐酸(1mL)中，体系升温至90℃，搅拌过夜，TLC显示原料反应完全，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝7，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得粗品236mg，无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝230.0.
步骤5：(5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
将(5-羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮(200mg)溶于三氯氧磷(4mL)中，体系升温至100℃，搅拌反应2小时。TLC显示原料反应完全，浓缩体系中的三氯氧磷，加入氢氧化钠溶液(1moL/L)调节pH＝8左右，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品Prep-TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1(V:V))纯化得标题化合物40mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝248.06.
步骤6：(R)-(5-(5-氟吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮的制备
将(5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1H-咪唑-2-基)甲酮(40mg)和(R)-3-氟-5-吡啶-2-基吡咯啉(26mg)溶于乙腈(4mL)中，向体系加入N,N-二异丙基乙胺(31mg)。体系升温至60℃，搅拌反应3h。TLC显示原料反应完全，加入水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品用Prep-TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1(V:V))纯化，得到标题化合物11mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝378.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.19(brs,1H),9.23(s,1H),8.81(m,0.6H),8.65-8.64(m,0.4H),8.60-8.58(m,0.6H),8.51-8.46(m,1H),8.39-8.38(m,0.4H),7.82-7.79(m,0.6H),7.69-7.67(m,0.4H),7.29-7.26(m,2H),6.71-6.69(m,0.6H),6.22-6.20(m,0.4H),5.53-5.50(m,0.6H),5.34-5.32(m,0.4H),4.11-3.88(m,1.6H),3.67-3.65(m,0.4H),2.50-2.34(m,1H),2.12-1.99(m,3H).
实施例5：((5-((R)-2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)(1-甲基-1H-咪唑-2-基)甲醇的制备
将N-甲基咪唑(0.40g)溶于干燥四氢呋喃(20mL)，氮气保护下降温至-78℃，缓慢滴加正丁基锂(2.3mL,2.5M)，保持温度不高于-65℃，滴加完毕保持该温度反应40分钟，将实施例1中的(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(1.1g)溶于干燥四氢呋喃(50mL)，缓慢滴入反应体系中，始终保持温度不高于-65℃，完毕保持该温度反应2小时，将反应体系倒入水中，乙酸乙酯萃取，干燥，浓缩。所得粗品用反相制备纯化得标题化合物5.0mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝424.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68-8.41(m,1H),8.09-7.83(m,2H),7.29-7.26(m,1H),7.23-6.90(m,1H),6.75-6.70(m,1H),6.50-6.46(m,1H),6.08-5.81(m,1H),5.70-5.51(m,1H),5.34-4.99(m,2H),3.97(s,3H),3.79-3.72(m,1H),3.63-3.51(m,2H),3.18-3.07(m,1H),2.37-2.27(m,1H),2.05-1.78(m,3H).
实施例6：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇的制备
将3-氨基-5-甲基吡唑(10g)溶于无水乙醇(100mL)中，在室温下加入乙醇钠(21g)和1,3-二甲基脲嘧啶(7.2g)，加热至80℃搅拌过夜。LCMS显示反应完全后，向反应体系加入3M盐酸水溶液，调节pH至3，浓缩反应液，乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得到目标化合物8.8g，无需纯化可直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝150.1.
步骤2：5-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
向2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇(8.8g)中加入三氯氧磷(50mL)，加热至110℃搅拌1h。LCMS监控反应完全后，将反应体系直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝168.0.
步骤3：5-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
将步骤2的反应体系降温至室温，冰浴下缓慢滴加N,N-二甲基甲酰胺(20mL)。滴毕，升至室温反应5小时。LCMS监控反应完全后，浓缩反应液，将剩余反应液滴加入饱和碳酸氢钠溶液中淬灭，乙酸乙酯、饱和食盐水萃取2次，合并有机相，干燥浓缩，得到粗品11.5g。粗品加入甲基叔丁基醚(60mL)搅拌30分钟后，抽滤，滤饼用甲基叔丁基醚(10mL)洗1次，滤饼烘干得到目标化合物6.8g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝196.0.
步骤4：5-甲氧基-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
将5-氯-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(6.8g)溶于无水甲醇(200mL)中，加入甲醇钠(5.6g)，室温搅拌2小时。LCMS监控反应完全后，向反应液中加入3M盐酸水溶液调pH至中性，固体析出，再加入500mL水，搅拌10分钟，抽滤，滤饼水洗2次，滤饼烘干得到目标化合物5.4g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝192.1.
步骤5：3-(1H-咪唑-2-基)-5-甲氧基-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将5-甲氧基-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(2g)溶于40mL异丙醇中，加入80mL乙二醛水溶液和80mL氨水，密闭升温至60℃，反应24小时。LCMS监控反应完全后，浓缩反应液，加入2M盐酸水溶液调pH至中性，二氯甲烷、水萃取3次，合并有机相，干燥浓缩，柱层析分离，得到目标化合物1.3g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝230.1.
步骤6：3-(1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇的制备
将3-(1H-咪唑-2-基)-5-甲氧基-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶(500mg)溶于50mL乙腈中，加入三甲基碘硅烷(4.36g)，加热至60℃，搅拌反应8小时。LCMS监控反应完全后，加入饱和亚硫酸氢钠水溶液淬灭反应，浓缩淬灭后的反应液，反相制备分离，得到目标化合物440mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝216.1.
步骤7：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将3-(1H-咪唑-2-基)-2-甲基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇(70mg)、(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(66mg)溶于5mL乙腈中，加入苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐(216mg)和N,N-二异丙基乙胺(126mg)，室温搅拌2小时。LCMS监控反应完全后，浓缩反应液，乙酸乙酯、饱和食盐水萃取2次，合并有机相，干燥浓缩，反相制备分离，得到目标产物12mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝394.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06-10.11(m,1H),8.65(s,1H),8.44(s,1H),8.08-8.02(m,1H),7.49(s,1H),7.30-7.19(m,1H),6.95-6.90(m,1H),6.57-6.54(m,1H),5.86(s,1H),5.48(s,1H),5.17(s,1H),4.18(s,1H),4.04(s,3H),3.91-3.84(m,1H),3.65(s,1H),2.09-1.87(m,3H).
实施例7：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(180mg)溶于甲醇(4mL)中，依次加入乙二醛(827mg)和25％的氨水(1.7g)，室温搅拌过夜。TLC显示原料反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝50/1～30/1(V:V)和反相制备纯化得到标题化合物24mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝398.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.10-9.08(s,1H),8.21(s,1H),8.02(s,1H),7.59-7.46(s,1H),7.15-6.89(m,3H),5.58-5.56(s,1H),4.31-4.23(s,1H),3.99(s,3H),3.95-3.88(m,1H),2.40-2.31(m,1H),2.07-1.94(s,2H),1.89-1.83(m,1H).
实施例8：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-羟基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将实施例7中的(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(84mg)溶于乙腈(5mL)中，加入三甲基碘硅烷(186mg)，室温搅拌过夜。TLC显示原料反应完全，反应体系用饱和亚硫酸氢钠溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品通过柱层析(二氯甲烷/甲醇＝50/1～20/1(V:V))和反相制备纯化得到标题化合物7.8mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝384.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.96-11.67(s,1H),11.02-10.71(s,1H),9.13-9.11(s,1H),8.22(s,1H),7.72-7.46(m,2H),7.19-6.86(m,2H),5.56(s,1H),4.25-4.23(s,1H),3.92-3.88(m,1H),2.33-2.26(m,2H),1.82-1.76(m,1H).
实施例9：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺
步骤1：2-氨基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇的制备
将3,5-二氨基吡唑(10g)溶于无水乙醇(100mL)中，在室温下加入乙醇钠(14g)和1,3-二甲基脲嘧啶(15g)，加热至80℃搅拌过夜。LCMS监控反应完全后，向反应体系加入3M盐酸水溶液，调节pH至3，浓缩反应液，乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得到目标化合物8.6g，无需纯化可直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝151.1.
步骤2：5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺的制备
/>
向2-氨基吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-醇(8.8g)中加入三氯氧磷(50mL)，加热至110℃搅拌1h。LCMS监控反应完全后，将反应体系缓慢滴入冰水中，饱和碳酸钠溶液调pH约为9，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝169.0.
步骤3：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺的制备
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺(4.0g)和(R)-3-氟-5-吡啶-2-基吡咯啉(5.1g)溶于乙腈(50mL)中，向体系加入N,N-二异丙基乙胺(4.6g)。体系升温至60℃，搅拌反应3h。TLC显示原料反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品反相制备纯化，得到标题化合物6.64g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝329.1.
步骤4：(R)-N-(5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基l)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)乙酰胺的制备
将(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺(160mg)溶于二氯甲烷中，滴加醋酸酐(500mg)，室温搅拌，LCMS显示原料反应完全，将反应液倒入水中，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物159mg，无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝370.9.
步骤5：(R)-N-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)乙酰胺的制备
将(R)-N-(5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基l)吡咯-1-基l)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)乙酰胺(290mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入三氯氧磷(241mg)，室温下搅拌，LCMS显示原料反应完全，旋干三氯氧磷，饱和碳酸氢钠溶液调pH至碱性。乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠溶液反洗，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品经反相制备纯化得标题化合物25mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝398.9.
步骤6：(R)-2-氨基-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
将(R)-N-(5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-甲酰基吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)乙酰胺(0.7g)溶于乙醇(8mL)中，滴加2N氢氧化钠溶液(10mL)，室温搅拌过夜，有固体析出。TLC显示原料反应完全，抽滤，得标题化合物0.6g，无需纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝356.9.
步骤7：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-胺的制备
将(R)-2-氨基-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(0.61g)溶于甲醇中，加入乙二醛(3.0g)和25％的氨水(5.8g)，70℃下反应过夜。TLC显示反应不再进行，向体系中加水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝50/1～20/1(V:V))纯化得到标题化合物7.2mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝395.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84-10.68(m,0.5H),9.74-9.56(m,0.5H),8.58-8.23(m,1H),8.11-7.99(m,1H),7.50-7.28(m,2H),7.19-6.87(m,1H),6.67-6.56(m,1H),6.40-6.24(m,1H),6.25-5.90(m,1H),5.57-5.32(m,1H),5.15-5.03(m,1H),4.12-3.88(m,3H),3.69-3.33(m,1H),2.51-2.33(m,1H),2.03-1.80(m,3H).
实施例10：((R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-咪唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
/>
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(200mg)溶于干燥的乙二醇二甲醚(10mL)中，室温下加入氨水(2mL)，密闭条件下室温搅拌1小时。再将1-((异氰基甲基)磺酰基)-4-甲基苯(131mg)和碳酸钾(152mg)加入到反应体系中，继续在室温下反应1小时，TLC检测反应不再进行，加入少量无水硫酸钠干燥后，反应体系经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1(V:V))纯化得标题化合物35mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝398.0.
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.09-11.99(d,J＝40.0Hz,1H),9.06(d,J＝8.0Hz,1H),8.13-8.09(m,1H),8.00(d,J＝4.0Hz,1H),7.59-7.54(m,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),6.95-6.75(m,1H),5.52(d,J＝8.0Hz,1H),4.28-4.21(m,1H),4.05(s,3H),3.90-3.82(m,1H),2.39-2.30(m,1H),2.08-1.90(m,2H),1.82-1.76(m,1H).
实施例11：(R)-5-氟-3-(1-(6-氟-3-(1H-咪唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)吡啶-2-醇的制备
将实施例10中的(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-咪唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(35mg)溶于乙腈(2mL)，缓慢加入三甲基碘硅烷(54mg)，体系于室温下反应4小时，TLC显示原料消耗完毕后，向体系中加入1mL饱和亚硫酸氢钠水溶液，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物25mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝384.1.
1H NMR(400MHz,d6-DMSO)δ12.10-11.83(brs,1H),9.02(d,J＝8.0Hz,1H),8.15(s,1H),7.60(s,1H),7.45-7.43(m,1H),7.30-6.99m,2H),5.44(d,J＝8.0Hz,1H),4.18-4.15(m,1H),3.85-3.78(m,1H),2.34-2.23(m,1H),2.03-1.99(m,1H),1.93-1.76(m,2H).
实施例12：(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷酮-1-基)-6-氟-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯的制备
将(R)-2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷盐酸盐(1.5g)溶于乙腈(20mL)中，依次加入5-氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.6g)和N,N-二异丙基乙基胺(4.4g)，室温反应4小时，TLC显示原料反应完全，加水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝15/1(V:V))纯化得标题化合物2.4g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝390.9.
步骤2：(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酸乙酯(1.6g)溶于乙醇(20mL)中，加入氢氧化锂水溶液(2M,20mL)，体系升温至60℃搅拌过夜，次日冷却反应液至室温，加入浓盐酸(6mL)，继续搅拌，TLC显示原料已反应完全，加入饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝7～8，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝30/1(V:V))纯化得标题化合物380mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝319.1.
步骤3：(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛的制备
将(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶(380mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，室温下加入三氯氧磷(400mg)，体系继续在室温下反应约1小时，TLC显示原料已反应完全，加入饱和碳酸氢钠水溶液，升温至40℃继续反应，TLC检测反应完全后，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得标题化合物425mg，无需纯化直接用于下一步反应。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝347.1.
步骤4：(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-5-(2-(2,5-二氟苯基)吡咯烷-1-基)-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶(266mg)溶于甲醇(6mL)，加入氨水(8mL)和乙二醛(40％,8mL)，室温下反应过夜，TLC检测反应完全，体系加水淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1(V:V))纯化得标题化合物40mg。
MS(ESI)m/z(M+H)＝385.1+.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.68-10.44(brs,1H),9.15(d,J＝8.0Hz,1H),8.2(s,1H),7.36-7.31(m,1H),7.21–7.11(m,3H),6.91(s,1H),5.68(d,J＝8.0Hz,1H),4.24(t,J＝12.0Hz,1H),3.97(q,J＝8.0Hz,1H),2.45-2.34(m,1H),2.07-1.94(m,2H),1.93-1.86(m,1H).
实施例13：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(4H-1,2,4-三唑-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：6-氟-5,7-二羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的制备
将5-氨基-1H-吡唑-4-甲腈(10.0g)及氟代丙二酸二甲酯(20.8g)溶于甲醇(110mL)中，加入甲醇钠(7.5g)，体系于80℃下反应过夜。LCMS显示反应完全后，将反应液过滤得固体，再将固体溶于300mL水中，乙酸乙酯萃取(3×100mL)，水相用浓盐酸调节pH＝2～3，抽滤，滤饼用水洗涤两次，干燥，得标题化合物12.2g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝195.1.
步骤2：5,7-二氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的制备
称取6-氟-5,7-二羟基吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(10.4g)于反应瓶中，加入三氯氧磷(200mL)，体系加热回流过夜。LCMS显示原料消耗完全，加入N,N-二乙基苯胺(9.0g)，继续加热反应三小时，LCMS显示反应完全后，浓缩反应液，再将反应液缓慢倒入200mL水中，饱和碳酸氢钠溶液调节pH＝8左右，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝4/1(V:V))得标题化合物6.0g。
步骤3：5-氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的制备
称取5,7-二氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(10.4g)于反应瓶中，加入乙醇/四氢呋喃/水(100mL)的混合溶剂，称取锌粉(13.1g)和氯化铵(13.4g)混合后加入反应体系中，室温反应5分钟，TLC显示反应完全后，抽滤，母液用无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物6.0g，无需纯化可直接用于下一步。
步骤4：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的制备
称取(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(6.0g)溶于乙腈(100mL)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(7.9g)和5-氯-6-氟吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(6.0g)。体系于室温下反应十分钟，TLC显示原料消耗完毕后，将体系倒入200mL水中，二氯甲烷萃取，饱和食盐水反洗一次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝3/1(V:V))得标题化合物3.5g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝356.2.
步骤5：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(4H-1,2,4-三唑-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
称取(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(200mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(5mL)中，体系于90℃下反应2小时，LCMS显示原料消耗完全，浓缩溶剂，向体系中依次加入醋酸(4mL)和无水肼(1mL)，室温下反应过夜。LCMS显示反应完全后，将反应液倒入15mL水中，饱和碳酸氢钠水溶液调节pH至8，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1(V:V))纯化得标题化合物47mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝399.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,2H),8.34(s,1H),8.07(d,J＝4.0Hz,1H),8.03-8.01(m,1H),7.49-7.46(m,1H),5.53(d,J＝8.0Hz,1H),4.19-4.15(m,1H),3.96(s,3H),3.87-3.83(m,1H),2.34-2.27(m,1H),2.02-1.94(m,1H),1.87-1.78(m,2H).
实施例14：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-1,2,4-三唑-3-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将实施例13中的(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(200mg)溶于甲酰肼(5mL)中，150℃下反应3小时，LCMS显示原料消耗完全，将反应液倒入15mL水中，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1(V:V))纯化得标题化合物19mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝399.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.12(s,1H),8.57-8.33(m,1H),8.28(s,1H),8.00(s,1H),7.94(s,1H),7.50-4.46(m,1H),5.65-5.61(m,1H),4.27-4.23(m,1H),3.99(s,3H),3.94-3.87(m,1H),2.38-2.33(m,1H),2.03-1.24(m,3H).
实施例15：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-酰基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：(R,E)-N'-((6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)亚甲基)乙酰咪唑肼的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-乙醛(0.5g)置于乙醇(20mL)中，加入甲基亚胺酸酰肼的乙醇溶液(0.2M,23mL)，体系升温至90℃反应1小时，TLC显示原料反应完全，浓缩溶剂，粗品无需纯化直接用于下一步。
步骤2：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-酰基)-3-(5-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R,E)-N'-((6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)亚甲基)乙酰咪唑肼(290mg)溶于醋酸(14mL)中，室温下依次加入醋酸铵(216mg)和N-溴代丁二酰亚胺(250mg)，体系升温至110℃反应过夜。LC-MS显示原料反应完全，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝7，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，得目标化合物25mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝413.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.11(brs,1H),8.23(s,1H),8.01(d,J＝4.0Hz,1H),7.50(brs,1H),5.60(brs,1H),4.24(m,1H),3.99(s,3H),3.88(brs,1H),2.40-2.30(m,4H),1.89(s,1H),1.84(brs,2H).
实施例16：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)-3-(4-甲基-1H-咪唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(50mg)溶于乙二醇二甲醚(3mL)中，加入氨水(0.5mL)，室温密闭反应30分钟。再将1-((1-异氰乙基)磺酰基)-4-甲苯(44mg)和叔丁醇钾(31mg)加入反应体系中，TLC显示原料反应完全，将体系浓缩，经反相制备纯化得标题化合物12mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝411.9.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.66(s,1H),9.06-8.99(m,1H),8.00-7.99(s,2H),7.44-7.42(s,2H),5.51-5.44(m,1H),4.19(s,1H),3.95(s,3H),3.81(s,1H),2.31-2.29(m,1H),2.02-2.00(s,4H),1.83-1.81(s,2H).
实施例17：(R)-3-(4-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-咪唑-5-基)丙烷-1-醇的制备
步骤1：叔丁基(4-异氰-4-羟丁氧基)二甲基硅烷的制备
氮气氛中，将氢化钠(738mg)溶于干燥四氢呋喃和二甲基亚砜的混合溶液(1.5mL)，降温至5℃左右，向体系中缓慢加入1-((1-异氰乙基)磺酰基)-4-甲苯(5g)的干燥四氢呋喃和二甲基亚砜混合溶液(50mL)，继续反应30分钟后再加入(3-溴丙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(7.1g)的干燥四氢呋喃和二甲基亚砜混合溶液(70mL)，室温反应2h。TLC显示原料反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物4.85g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝368.1.
步骤2：(R)-3-(5-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙基)-1H-咪唑-4-基)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(200mg)溶于乙二醇二甲醚(1mL)，加入氨水(1mL)，密闭反应2h。向体系加入叔丁基(4-异氰-4-羟丁氧基)二甲基硅烷(200mg)和叔丁醇钾(94mg)的乙二醇二甲醚溶液(1mL)，室温反应过夜。LCMS显示原料反应完全，浓缩反应液，粗品经反相制备纯化得标题化合物60mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝570.1.
步骤3：(R)-3-(4-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-咪唑-5-基)丙烷-1-醇的制备
将(R)-3-(5-(3-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)丙基)-1H-咪唑-4-基)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(60mg)溶于盐酸二氧六环溶液(2mL)，室温反应30分钟。LCMS显示原料反应完全，浓缩反应液，饱和碳酸氢钠溶液调pH至碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物23.5mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝456.0.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.70(s,0.5H),11.26(s,0.5H),9.05-8.97(m,1H),8.00(s,2H),7.50-7.36(m,2H),5.51(s,1H),4.56(s,0.5H),4.32(s,0.5H),4.18(s,1H),3.95(s,3H),3.86-3.76(m,1H),3.18(s,2H),2.68-2.57(m,1H),2.31(s,1H),1.88(s,1H),1.77(s,2H),1.63(s,1H),1.46(s,1H).
实施例18：(R)-2-(4-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙-1-醇的制备
步骤1：叔丁基(3-异氰-3-异丙氧基)二甲基硅烷的制备
氮气氛中，将氢化钠(148mg)溶于干燥四氢呋喃和二甲基亚砜的混合溶液(1mL)，体系降温至5℃，缓慢加入1-((1-异氰乙基)磺酰基)-4-甲苯(1g)的干燥四氢呋喃和二甲基亚砜混合溶液(10mL)，继续反应30分钟后再加入(2-溴乙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(1.35g)的干燥四氢呋喃和二甲基亚砜混合溶液(14mL)，室温反应2h。TLC显示原料反应完全，将反应液缓慢倒入水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物790mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝354.1.
步骤2：(R)-3-(5-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(100mg)溶于乙二醇二甲醚(1mL)，加入氨水(0.75mL),密闭反应2h。向体系中加入叔丁基(3-异氰-3-异丙氧基)二甲基硅烷(100mg)和叔丁醇钾(47mg)的乙二醇二甲醚溶液(0.5mL)，室温反应过夜。LCMS显示原料反应完全，浓缩反应液，粗品经反相制备纯化得标题化合物61mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝555.9.
步骤3：(R)-2-(4-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-咪唑-5-基)乙-1-醇的制备
将(R)-3-(5-(2-((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)乙基)-1H-咪唑-4-基)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(230mg)溶于盐酸二氧六环溶液(5mL)，室温反应30分钟。LCMS显示原料反应完全，浓缩反应液，饱和碳酸氢钠溶液调体系pH至碱性，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物29mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝441.9.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.64-11.29(m,1H),9.09-8.93(m,1H),8.06-7.96(m,2H),7.51-7.37(m,2H),5.55-5.45(m,1H),4.60-4.47(m,1H),4.38-4.17(m,1H),4.11-3.95(s,3H),3.87-3.74(m,1H),3.44-3.43(m,2H),2.72-2.68(m,1H),2.36-2.26(m,1H),2.01-1.99(m,1H),1.88-1.82(m,2H).
实施例19：(R)-(4-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-咪唑-5-基)甲醇的制备
将实施例10中的(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)-3-(1H-咪唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(50mg)溶于异丙醇(2mL)中，依次加入多聚甲醛(8mg)和碳酸钾(34mg)，体系升温至65℃反应过夜。将反应液加入水稀释，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1:1(V:V))纯化得标题化合物9mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝427.9.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02-11.28(brs,1H),9.15(dd,J＝24.0,8.0Hz,1H),8.12-8.00(m,2H),7.55-7.36(m,2H),5.5(dd,J＝20.0,12.0Hz,1H),4.75-4.37(m,3H),4.24-4.09(brs,1H),3.91(s,3H),3.81-3.71(brs,1H),2.33-2.22(brs,1H),2.05-1.94(m,1H),1.84(d,J＝8.0Hz,2H).
实施例20：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(5-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：1-((1-异氰基-3-甲氧基丙基)磺酰基)-4-甲基苯的制备
将氢化钠(924mg)溶于干燥四氢呋喃(30mL)和二甲基亚砜(90mL)的混合溶液，氮气保护下降温至5℃，缓慢加入1-((1-异氰乙基)磺酰基)-4-甲苯(3g)的干燥四氢呋喃(10mL)和二甲基亚砜(20mL)混合溶液，继续反应30分钟再加入(3-溴丙氧基)-叔丁基二甲基硅烷(2.1g)的干燥四氢呋喃和二甲基亚砜混合溶液，室温反应2h。TLC显示原料反应完全，将反应液倒入水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物950mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝254.1.
步骤2：(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(5-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯啉-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(200mg)溶于乙二醇二甲醚(3mL)，加入氨水(1mL)，密闭反应2h。向体系加入叔丁基(4-异氰-4-羟丁氧基)二甲基硅烷(142mg)和叔丁醇钾(94mg)的乙二醇二甲醚溶液(0.5mL)，室温反应过夜。LCMS显示原料反应完全，浓缩反应液，粗品经反相制备纯化得标题化合物48.8mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝456.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77-11.14(brs,1H),9.02(d,J＝8.0Hz,1H),8.01(s,2H),7.48(s,1H),7.42-7.39(m,1H),5.49(d,J＝8.0Hz,1H),4.21-4.14(m,1H),3.94(s,3H),3.84-3.75(m,1H),3.59-3.48(m,2H),3.12(s,3H),2.90-2.73(m,2H),2.35-2.25(m,1H),2.04-1.94(m,1H),1.87-1.74(m,2H).
实施例21：(R)-2-((5-氟-3-(1-(6-氟-3-(1H-咪唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)吡啶-2-基)氧基)乙-1-醇的制备
将实施例11中的(R)-5-氟-3-(1-(6-氟-3-(1H-咪唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-5-基)吡咯烷-2-基)吡啶-2-醇(32mg)溶于DMF(1mL)，依次加入溴乙醇(10mg)和碳酸钾(17mg)，60℃下反应过夜。LCMS显示原料反应完全，浓缩反应液，粗品经反相制备纯化得标题化合物7mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝428.0.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.30(s,0.5H),11.93(s,0.5H),9.09-9.01(m,1H),8.13-8.11(m,1H),7.77-7.55(m,2H),7.35(s,1H),7.23-7.12(m,1H),5.48(s,0.5H),5.33(s,0.5H),4.98(s,1H),4.26-4.08(m,2H),3.96-3.66(m,4H),2.34-2.22(m,1H),2.05-1.88(m,2H),1.81-1.73(m,1H).
实施例22：(R)-2-(5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)丙-2-醇的制备
步骤1：(R,Z)-2-(2-((6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)亚甲基)肼基)-2-亚氨基乙酸乙酯的制备
将(R)-6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-乙醛(2.0g)溶于无水乙醇(50mL)中，加入2-肼基-2-亚氨基乙酸乙酯的乙醇溶液(0.15M,100mL)，体系升温至90℃反应3小时。TLC显示原料反应完全，浓缩溶剂，粗品经柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1:1.5(V:V))得标题化合物2.3g。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝473.2.
步骤2：(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯的制备
将(R,Z)-2-(2-((6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷酮-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)亚甲基)肼基)-2-亚氨基乙酸乙酯(1.0g)溶于冰醋酸(30mL)中,室温下依次加入醋酸铵(240mg)和N-溴代丁二酰亚胺(370mg)，体系升温至90℃反应过夜。LC-Ms显示原料反应完全，饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝7，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1:2(V:V))纯化得标题化合物240mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝471.2.
步骤3：(R)-2-(5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)丙-2-醇的制备
将(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯(100mg)溶于无水四氢呋喃(5mL)中，体系降温至-30℃，滴加甲基氯化镁(0.28mL)，滴毕，缓慢升至室温，反应过夜。将反应液倒入饱和氯化铵溶液中淬灭，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经Prep-TLC纯化(二氯甲烷/甲醇＝15:1(V:V))得标题化合物2.9mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝457.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.02-11.28(brs,1H),9.15(dd,J＝24.0,8.0Hz,1H),8.12-8.00(m,2H),7.55-7.36(m,2H),5.5(dd,J＝20.0,12.0Hz,3H),4.75-4.37(m,3H),4.24-4.09(brs,1H),3.91(s,3H),3.81-3.71(brs,1H),2.33-2.22(brs,1H),2.05-1.94(m,1H),1.84(d,J＝8.0Hz,2H).
实施例23：(R)-(5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-基)甲醇的制备
氮气氛中，将实施例22中的(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基)-1H-1,2,4-三唑-3-羧酸甲酯(100mg)溶于无水四氢呋喃(1mL)，0℃下加入氢化铝锂(84mg)，将体系移至室温反应4h。LCMS显示原料反应完全，将反应倒入水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，粗品经反相制备纯化得标题化合物14mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝428.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45-9.07(s,1H),8.25(s,1H),8.01(s,1H),7.54-7.46(m,1H),5.64-5.59(m,1H),5.33(s,1H),4.53-4.46(m,2H),4.28-4.18(s,1H),4.04(s,3H),3.94-3.87(m,1H),2.37-2.31(m,1H),2.03-1.83(m,3H).
实施例24：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：5-氯-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将5-氯吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醛(180mg)溶于甲醇(4mL)中，依次加入乙二醛(1.6g)和25％的氨水(3.4g)，室温反应过夜。TLC显示原料反应完全，加水，乙酸乙酯萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，浓缩，所得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝50/1～30/1(V:V))和反相制备纯化得到标题化合物200mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝220.0.
步骤2：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(67mg)溶于乙腈(2mL)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(119mg)和5-氯-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(50mg)，体系于60℃反应过夜。TLC显示原料消耗完毕后，体系倒入5mL水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和氯化钠溶液反洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。所得粗品经Pre-TLC纯化(二氯甲烷/甲醇＝20/1(V:V))和Pre-HPLC纯化，冷冻干燥得标题化合物30mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝380.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.13-11.11(m,0.58H),10.12-10.11(m,0.57H),8.77-8.75(m,0.56H),8.55-8.53(m,0.53H),8.22-8.17(m,1H),8.09-8.02(m,1H),7.53-7.51(m,0.59H),7.33-7.31(m,1H),7.18-7.16(m,1.5H),6.63-6.61(m,0.55H),5.95-5.93(m,0.48H),5.53-5.51(m,0.55H),5.19-5.17(m,0.5H),4.18-4.16(m,0.59H),4.02(s,3H),3.87-3.85(m,0.55H),3.68-3.66(m,0.58H),3.36-3.35(m,0.45H),2.44-2.41(m,1H),2.05-1.81(m,3H).
实施例25：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
步骤1：5-氯-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将实施例24中的5-氯-3-(1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶(20mg)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL)，加入碳酸铯(45mg)，0℃下滴加碘甲烷(13mg)，体系移至室温反应1小时。TLC显示原料消耗完毕后，体系倒入5mL水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和氯化钠溶液反洗，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物15mg，未经纯化直接用于下一步。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝234.1.
步骤2：(R)-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶的制备
将(R)-5-氟-2-甲氧基-3-(吡咯烷-2-基)吡啶(18mg)溶于乙腈(2mL)，依次加入N,N-二异丙基乙胺(31mg)和5-氯-3-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶粗品(15mg)，体系于60℃反应过夜。TLC显示原料消耗完毕后，体系倒入5mL水中，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和氯化钠溶液反洗，无水硫酸钠干燥，浓缩。所得粗品经Pre-TLC(二氯甲烷/甲醇＝20/1(V:V))和Pre-HPLC纯化，冷冻干燥得标题化合物10mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝394.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76-8.73(m,0.63H),8.55-8.53(m,0.32H),8.13-7.80(m,2H),7.33(d,J＝8.0Hz,1H),7.20-7.19(m,0.35H),7.06-7.04(m,0.59H),6.94-6.91(m,0.29H),6.85-6.82(m,0.62H),6.62-6.59(m,0.66H),5.94-5.91(m,0.35H),5.35-5.32(m,0.71H),5.17-5.15(m,0.34H),4.04-4.01(m,1H),3.96-3.95(s,3H),3.60-3.59(m,1H),3.10-3.09(s,3H),2.24-2.23(m,1H),2.20-1.82(m,3H).
实施例26：(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酰胺的制备
步骤1：(R)-乙基5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酸盐的制备
将(R)-2-溴-1-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基(600mg)、2-氨基-2-亚氨基乙酸乙酯(916.4mg)及氟化钾(60mg)溶于无水乙醇(10mL)中，另加入N,N-二异丙基乙胺(0.93g)后升温至80℃，反应过夜。次日反应结束后将体系浓缩，所得粗品经柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2:1(V:V))纯化得标题化合物230mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝470.1.
步骤2：(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酰胺的制备
将(R)-乙基5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酸盐(115mg)溶于氨-甲醇溶液(7M,3mL)中，升温至100℃反应过夜。将体系浓缩，所得粗品经反相制备纯化得标题化合物45mg。MS(ESI)m/z(M+H)+＝441.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.02(s,1H),9.08(q,J＝8.0Hz,1H),8.46(s,0.5H),8.14(s,0.5H),7.99(s,1H),7.61(d,J＝24.0Hz,1H),7.52-7.34(m,2H),7.07-6.75(br,1H),5.52(d,J＝8.0Hz,1H),4.26(t,J＝16.0Hz,1H),4.11-3.91(m,3H),3.84(t,J＝8.0Hz,1H),2.38-2.30(m,1H),2.09-1.80(m,3H).
实施例27：(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-N-甲基-1H-咪唑-2-羧基的制备
/>
将实施例26中的(R)-乙基5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酸盐(60mg)溶于无水甲醇(5mL)中，室温下加入甲胺的甲醇溶液(2mL)，加完后，体系密闭升温至80℃反应约3小时。反应结束后将体系浓缩，所得粗品经反相制备纯化得标题化合物22mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝455.2.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.03(s,1H),9.08(q,J＝8.0Hz,1H),8.47(s,0.5H),8.22(d,J＝24.0Hz,1H),8.13(s,0.5H),7.99(d,J＝4.0Hz,1H),7.49(t,J＝12.0Hz,1H),7.02-6.78(br,1H),5.54-5.51(m,1H),4.26(t,J＝16.0Hz,1H),4.06(dd,J＝16.0Hz,20.0Hz,3H),3.86(t,J＝20.0Hz,1H),2.67(d,J＝4.0Hz,3H),2.38-2.33(m,1H),2.30-2.03(m,1H),1.93(br,1H),1.79(t,J＝24.0Hz,1H).
实施例28：(R)-5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酸的制备
将实施例26中的(R)-乙基5-(6-氟-5-(2-(5-氟-2-甲氧基吡啶-3-基)吡咯-1-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-基]-1H-咪唑-2-羧酸盐(15mg)溶于无水甲醇/水(4:1,1mL)中，室温下加入氢氧化钠(38mg)，体系室温反应过夜。反应结束后将体系浓缩，所得粗品经反相制备纯化得标题化合物7.5mg。
MS(ESI)m/z(M+H)+＝442.1.
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.10(d,J＝8.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.99(d,J＝4.0Hz,1H),7.49(q,J＝4.0Hz,1H),7.09-6.73(br,1H),5.53(d,J＝8.0Hz,1H),4.26(br,1H),4.06(s,3H),3.90-3.82(m,1H),2.37-2.31(m,1H),2.07-1.79(m,3H).
生物试验
试验一：检测化合物对TRKA激酶的活性抑制效应
1：试验材料
TRKa(Carna,No.13CBS-0565G),Kinase substrate22(GL,No.P180803-SL112393),DMSO(Sigma,No.SHBG3288V),384 well white plate(PerkinElmer,No.810712)2：实验方法
2.1化合物配制
化合物预先溶解在100％DMSO中，配制成10mM储存液，-20℃冻存。
2.2激酶反应过程
(1)配制1×Kinase buffer。
(2)化合物浓度梯度的配制：受试化合物测试浓度为1000nM，在384孔板中稀释成100倍终浓度的100％DMSO溶液，用Presision 3倍稀释化合物，10个浓度。使用分液器Echo550向目的板OptiPlate-384F转移250nL 100倍终浓度的化合物。
(3)用1×Kinase buffer配制2.5倍终浓度的激酶溶液。
(4)在化合物孔和阳性对照孔分别加10μL的2.5倍终浓度的激酶溶液；在阴性对照孔中加10μL的1×Kinase buffer。
(5)1000rpm离心30秒，反应板振荡混匀后室温孵育10分钟。
(6)用1×Kinase buffer配制5/3倍终浓度的ATP和Kinase substrate 22的混合溶液。
(7)加入15μL的5/3倍终浓度的ATP和底物的混合溶液，起始反应。
(8)将384孔板1000rpm离心30秒，振荡混匀后室温孵育相应的时间。
(9)加入30μL终止检测液停止激酶反应，1000rpm离心30秒，振荡混匀。
(10)用Caliper EZ Reader读取转化率。
2.3数据分析
计算公式
其中：Conversion％_sample是样品的转化率读数；Conversion％_min：阴性对照孔均值，代表没有酶活孔的转化率读数；Conversion％_max：阳性对照孔比值均值，代表没有化合物抑制孔的转化率读数。
拟合量效曲线
以浓度的log值作为X轴，百分比抑制率为Y轴，采用分析软件GraphPad Prism 5的log(inhibitor)vs.response-Variable slope拟合量效曲线，从而得出各个化合物对酶活性的IC50值。计算公式是Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))。
化合物对TRK A激酶的抑制活性IC50见表1：
表1
从具体实施例化合物生物活性数据来看，本发明系列化合物对TRK A激酶具有很强的抑制作用。
试验二：检测化合物对TRKA(G595R)和TRKC(G623R)激酶的活性抑制效应
1：试验材料：
TRKA(G595R)(signalchem,NO.C1877-7),TRKC(G623R)(signalchem,NO.H2775-9),Kinase substrate22(GL,No.P190116-SL112393),DMSO(Sigma,No.SHBG3288V),384well white plate(PerkinElmer,No.810712)
2：实验方法：
同试验一
化合物对TRKA(G595R)和TRKC(G623R)激酶的抑制活性IC50见表2：
表2
从具体实施例化合物生物活性数据来看，本发明系列化合物对TRKA(G595R)和TRKC(G623R)激酶具有很强的抑制作用。
试验三：检测化合物对3株细胞生长的抑制作用
1：试验材料：
细胞系：
置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下培养。
试剂和耗材：
胎牛血清FBS(GBICO,Cat#10099-141)； Luminescent CellViability Assay(Promega,Cat#G7573)；96孔透明平底黑壁板(/>Cat#165305)；RPMI-1640(Hyclone,Cat#SH30809.01)；SpectraMax多标记微孔板检测仪，MD，2104-0010A；CO2培养箱，Thermo Scientific，Model 3100 Series；生物安全柜，Thermo Scientific，Model 1300 Series A2；倒置显微镜，Olympus，CKX41SF；冰箱，SIEMENS，KK25E76TI
2：实验方法：
细胞培养和接种：
1.收获处于对数生长期的细胞并采用血小板计数器进行细胞计数。用台盼蓝排斥法检测细胞活力，确保细胞活力在90％以上；
2.调整细胞浓度；分别添加90μL细胞悬液至96孔板中；
3.将96孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下培养过夜。
药物稀释和加药：
1.配制10倍药物溶液，最高浓度为10μM，9个浓度，3倍稀释，在接种细胞的96孔板中每孔加入10μL药物溶液，每个药物浓度设置三个复孔，化合物作用终浓度为1μM，9个浓度，3倍稀释，DMSO终浓度为0.1％；
2.将已加药的96孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下继续培养72小时，之后进行CTG分析。
终点读板：
1.融化CTG试剂并平衡细胞板至室温30分钟；
2.每孔加入等体积的CTG溶液；
3.在定轨摇床上振动5分钟使细胞裂解；
4.将细胞板放置于室温20分钟以稳定冷光信号；
5.读取冷光值。
数据处理
使用GraphPad Prism 7.0软件分析数据，利用非线性S曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算IC50值。
细胞存活率(％)＝(Lum待测药-Lum培养液对照)/(Lum细胞对照-Lum培养液对照)×100％。
化合物对3株细胞生长的抑制活性IC50见表3：
表3
从具体实施例化合物生物活性数据来看，本发明系列化合物对Ba/F3LMNA-NTRK1-G595R、Ba/F3 LMNA-NTRK1-G667C和Ba/F3 EVT6-NTRK3-G623R三株细胞具有很强的抗增殖作用。
试验四：SD大鼠静脉和口服给予受试化合物的体内药代动力学研究
1.试验动物
种属：SD大鼠，SPF级。来源：动物转移自实验机构动物储备库(999M-017).
上海西普尔-必凯实验动物有限公司。数量：每种剂型3只。
2.供试品配制
2.1准确称取适量的供试品，加入终体积5％DMSO、95％Saline，涡旋或超声使充分混匀，得到0.2mg/mL的给药溶液，用于静脉注射给药。
2.2准确称取适量的供试品，加入适宜体积0.5％CMC-Na，涡旋或超声使充分混匀，得到0.5mg/mL的给药溶液，用于口服灌胃给药。
3.实验设计
/>
4.给药方式
给药前称重，根据体重，计算给药量。通过静脉或灌胃口服给药。
5.采血时间点
给药前及给药后0.083h，0.25h，0.5h，1h，2h，4h，6h，8h，24h。
6.样品采集和处置
经颈静脉或其它合适方式采血，每个样品采集约0.20mL，肝素钠抗凝，血液样本采集后放置于冰上，并于2小时内离心分离血浆(离心条件：离心力6800g，6分钟，2-8℃)。采集的血浆样本在分析前存放于-80℃冰箱内，分析后剩余血浆样本继续存放于-80℃冰箱暂存。
7.生物分析和数据处理
检测受试物血药浓度，进行血浆药物浓度-时间曲线绘制时，BLQ均记为0。进行药代参数计算时，给药前的浓度按照0计算；Cmax之前的BLQ(包括“Nopeak”)按照0计算；Cmax之后出现的BLQ(包括“No peak”)一律不参与计算。通过不同时间点的血药浓度数据，运用WinNonlin计算药代动力学参数，如AUC(0-t)，T1/2，Cmax，Tmax和MRT等。
SD大鼠静脉和口服给予实施例10化合物的体内药代动力学研究数据如下所示：
/>
Claims (5)
1.杂芳基稠环化合物，具有式A所示结构，或其可药用的盐：
其中，
X1选自N、C-X，X选自氢、卤素；
X2独立的选自CR4R5；
X3、X4独立的选自CR4R5，R4、R5独立的选自氢；
R1选自氢、氘、-NR8R9或C1-6烷基；
R8、R9独立的选自氢；
Z选自
L选自-L1，L1选自
或L选自-C(＝O)L1，L1选自
2.根据权利要求1所述的杂芳基稠环化合物，具有以下任一结构或者其可药用的盐：
3.药物组合物，其包含权利要求1或2所述杂芳基稠环化合物和药学上可接受的辅料。
4.权利要求1或2所述化合物或权利要求3所述药物组合物在制备治疗TRK激酶介导的疾病的药物中的用途。
5.根据权利要求4所述的用途，所述TRK激酶介导的疾病包括黑色素瘤、肺癌、头颈癌、胰腺癌、乳腺癌、甲状腺癌、神经胶质瘤和结直肠癌。
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|---|---|---|---|---|
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Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107207514A (zh) * | 2014-12-15 | 2017-09-26 | 康联制药有限公司 | 稠环杂芳基化合物及其作为trk抑制剂的用途 |
| WO2018077246A1 (zh) * | 2016-10-28 | 2018-05-03 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 用作神经营养因子酪氨酸激酶受体抑制剂的氨基吡唑并嘧啶化合物 |
| CN108431008A (zh) * | 2015-11-19 | 2018-08-21 | 蓝图药品公司 | 可用于治疗与ntrk相关的病症的化合物和组合物 |
| WO2019118584A1 (en) * | 2017-12-15 | 2019-06-20 | Pyramid Biosciences, Inc. | 5-(2-(2,5-difluorophenyl)pyrrolidin-1 -yl)-3-(1h-pyrazol-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidine derivatives and related compounds as trk kinase inhibitors for treating cancer |
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| CN111848626A (zh) * | 2019-04-30 | 2020-10-30 | 江苏柯菲平医药股份有限公司 | Trk激酶抑制剂及其用途 |
| WO2021042890A1 (zh) * | 2019-09-04 | 2021-03-11 | 罗欣药业(上海)有限公司 | 杂环化合物及其作为Trk激酶抑制剂的应用 |
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| CN113166156A (zh) * | 2018-12-07 | 2021-07-23 | 贝达药业股份有限公司 | 酪氨酸激酶抑制剂、组成及其方法 |
| CN114437075A (zh) * | 2020-11-03 | 2022-05-06 | 上海瑶琪生物科技有限公司 | 用作ntrk激酶抑制剂的化合物及其应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PT2350071E (pt) * | 2008-10-22 | 2014-04-11 | Array Biopharma Inc | Compostos de pirazol[1,5-a]pirimidina substituídos como inibidores da cinase trk |
| KR20140014184A (ko) * | 2011-02-25 | 2014-02-05 | 아이알엠 엘엘씨 | Trk 억제제로서의 화합물 및 조성물 |
| US11358973B2 (en) * | 2018-04-16 | 2022-06-14 | Shenzhen Targetrx, Inc. | Di(hetero)aryl macrocyclic compound for inhibiting protein kinase activity |
-
2019
- 2019-12-16 CN CN201911290146.3A patent/CN112979654B/zh active Active
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107207514A (zh) * | 2014-12-15 | 2017-09-26 | 康联制药有限公司 | 稠环杂芳基化合物及其作为trk抑制剂的用途 |
| CN108431008A (zh) * | 2015-11-19 | 2018-08-21 | 蓝图药品公司 | 可用于治疗与ntrk相关的病症的化合物和组合物 |
| WO2018077246A1 (zh) * | 2016-10-28 | 2018-05-03 | 正大天晴药业集团股份有限公司 | 用作神经营养因子酪氨酸激酶受体抑制剂的氨基吡唑并嘧啶化合物 |
| WO2019118584A1 (en) * | 2017-12-15 | 2019-06-20 | Pyramid Biosciences, Inc. | 5-(2-(2,5-difluorophenyl)pyrrolidin-1 -yl)-3-(1h-pyrazol-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidine derivatives and related compounds as trk kinase inhibitors for treating cancer |
| CN113166156A (zh) * | 2018-12-07 | 2021-07-23 | 贝达药业股份有限公司 | 酪氨酸激酶抑制剂、组成及其方法 |
| CN111848626A (zh) * | 2019-04-30 | 2020-10-30 | 江苏柯菲平医药股份有限公司 | Trk激酶抑制剂及其用途 |
| WO2020221236A1 (zh) * | 2019-04-30 | 2020-11-05 | 江苏柯菲平医药股份有限公司 | Trk激酶抑制剂及其用途 |
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