CN112891422A - 茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的用途，本发明经研究发现，茶枝柑幼果(或茶枝柑幼果提取物或茶枝柑幼果提取物的制剂)具有明显的促进胃肠运动的功能，并有促进胃液和胃蛋白酶分泌，增强胃蛋白酶活性的作用，能有效改善胃肠道功能，疗效确切，效果显著，且崩解快速、服用方便，具有广阔的应用前景，不仅开发了茶枝柑幼果的新用途，而且为胃肠道功能提供了新的调理方案。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的用途。
背景技术
胃肠道功能失调是消化科临床的常见病和多发病，主要临床表现有恶心、腹泻、腹痛等不适症状，严重的功能失调往往会出现潜在的慢性胃炎、消化性溃疡等致病风险。现代医学认为，胃肠道功能失调可能与性别、种族、年龄、居住环境以及经济地位、教育背景等相关；其发病原因及发病机制可能与幽门螺杆菌感染、胃酸异常分泌、胃排空障碍、胃容受性障碍、胃内食物分布异常、胃电节律异常、神经-内分泌调节、心理因素、饮食因素、遗传因素等多种因素有关。
胃肠道功能失调常用抗生素治疗，但大量使用抗生素会导致人体免疫力降低，诱导耐药性现象出现，长期不合理使用还会导致人体自身的胃肠功能紊乱，严重影响机体健康。近年来西医和中医对于胃肠道功能失调都已经进行了大量的临床研究。西医常用的药物种类和治疗方式包括：促进胃动力药、质子泵抑制剂、组胺H2受体拮抗剂、根除幽门螺杆菌治疗、精神疗法等。中医对于胃肠道功能失调则采用辩证论治，常用的治法有辛开苦降、疏肝健脾、健脾和胃、健脾燥湿等。
目前，现代医学对于胃肠道功能失调的研究不断深入，但其发病原因及机制仍尚未明确，治疗方案的选择仍以对症治疗为主，缺乏针对性，且化学药物在用药过程中常会导致严重的副作用。因此，急需寻找一种新的、能够有效改善胃肠道功能并且副作用小的药物，中医药在这方面被寄予重望，但已有的中药大组方中，药味较多，效果不明显且成本高。
茶枝柑(Citrus reticulata cv.‘Chachi’，简称CRC)是芸香科柑橘属柑橘的栽培品种，是广陈皮(新会陈皮)的基源植物，在中药上，一般以茶枝柑成熟组织完全分化果实的果皮入药，名“广陈皮或新会陈皮”，但实际上，茶枝柑果实组织未分化的干燥幼果也可入药，名“茶枝柑幼果或茶枝柑个青皮”。茶枝柑幼果归入肝、胆、胃经，具有疏肝破气，消积化滞的功效，常用于食积气滞，脘腹胀痛，主要化学成分有黄酮类、挥发油类和氨基酸类等。现代药理学研究表明，茶枝柑幼果对消化系统、心血管系统和呼吸系统等有广泛的生物学效应，其应用前景值得重视。茶枝柑幼果与橘子皮和广陈皮不同，前者(茶枝柑幼果)组织没有分化，幼果包括未分化的果肉与果皮；后者(茶枝柑柑皮和广陈皮)为干燥成熟果皮，仅指果实组织完全分化的果皮(茶枝柑果皮存放三年叫广陈皮或新会陈皮)，不包括果肉，两者在化学成分、药理活性和临床应用等方面具有显著不同。广陈皮归肺、脾经，具有理气健脾，开胃化痰之功效，多用于食少吐泻，咳嗽痰多等预防或治疗，主要成分包括黄酮类、生物碱类、多糖类及挥发油等。广陈皮是陈皮的一种，来源于柑橘(Citrus reticulata Blanco)的一个栽培变种，与陈皮比较，作用更加温和，多甲氧基黄酮等化学成分如更多，其品质也更高。有研究表明，茶枝柑幼果的黄酮苷类成分和多甲氧基黄酮类成分含量均远高于陈皮，抗氧化能力也远优于陈皮。长期以来针对陈皮或广陈皮的研究报道众多，开发的相关产品也非常丰富多样，但鲜少见茶枝柑幼果的研究报道。目前市场上还没有将茶枝柑幼果开发成用于改善胃肠道功能的相关产品，其药用价值尚未得到充分的发挥。而且我国具有丰富的茶枝柑幼果资源，这为进一步加强茶枝柑幼果的开发应用奠定了有利的基础。因此，将茶枝柑幼果开发成一种药味成分少且疗效显著的，用于改善胃肠道功能的产品具有重要的理论和现实意义。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，本发明提出了茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的用途，不仅开发了茶枝柑幼果的新用途，而且为胃肠道功能提供了新的调理方案。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
本发明提供了茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的应用。
本发明还提供了茶枝柑幼果提取物在制备改善胃肠道功能的药物中的应用。
本发明经研究发现，茶枝柑幼果(或茶枝柑幼果提取物或茶枝柑幼果提取物的制剂)具有较好的促进胃肠运动、促进胃液和胃蛋白酶分泌，增强胃蛋白酶活性的功效，疗效确切，作用显著，且崩解快速、服用方便，具有较好的改善胃肠道功能的功效。
优选地，所述茶枝柑幼果提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1、对茶枝柑幼果药材进行粉碎、过筛，然后采用有机溶剂-水溶液进行超声提取，收集得到提取液；
S2、用脂溶性有机溶剂对步骤S1的提取液进行萃取，回收溶剂后经干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物。
优选地，所述有机溶剂-水溶液包括但不限于乙醇、甲醇、丙酮、正丁醇的水溶液。进一步地，所述有机溶剂-水溶液包括但不限于95％乙醇水溶液、30％甲醇水溶液、正丁醇水溶液、30％丙酮水溶液、50％甲醇水溶液、30％乙醇水溶液、80％甲醇水溶液、95％甲醇水溶液、60％乙醇水溶液。
优选地，所述脂溶性有机溶剂包括但不限于乙酸乙酯、苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、氯仿、环己烷、正己烷。
优选地，所述超声提取的超声波频率为40kHz，功率为100W-500W，提取温度为30-60℃，提取次数为1-5次，提取时间为15-90min。
优选地，所述茶枝柑幼果药材粉碎、过筛的粒度为20-60目。
优选地，所述有机溶剂-水溶液的用量为药材量的6-20倍(体积比)。
优选地，萃取的次数为1-5次。
本发明还提供了一种改善胃肠道功能的药物，该药物以茶枝柑幼果提取物为主要活性成分。
优选地，该药物还包括药学上可接受的辅料。
进一步地，所述辅料包括但不限于淀粉、可溶性淀粉、微晶纤维素、硬脂酸镁、乳糖、糊精。
优选地，所述药物的剂型包括但不限于胶囊剂(比如软胶囊剂、微囊剂)、丸剂(比如微丸剂、滴丸剂)、颗粒剂、片剂(比如分散片)、浸膏剂、煎膏剂、散剂、散剂、注射剂、粉针剂(比如冻干粉针剂)、糖浆剂、口服液体制剂。此外，该药物还可以制备成其他药学上可以接受的剂型。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提供了茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的用途，茶枝柑幼果(或茶枝柑幼果提取物或茶枝柑幼果提取物的制剂)具有明显的促进胃肠运动的功能，并有促进胃液和胃蛋白酶分泌，增强胃蛋白酶活性的作用，能有效改善胃肠道功能，疗效确切，效果显著，且崩解快速、服用方便，具有广阔的应用前景，不仅开发了茶枝柑幼果的新用途，而且为胃肠道功能提供了新的调理方案。
附图说明
图1为小鼠小肠运动试验结果；
图2为大鼠胃液分泌量的测定结果；
图3为大鼠胃蛋白酶排出量的测定结果；
图4为大鼠胃蛋白酶活性的测定结果。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到的。
实施例1茶枝柑幼果胶囊剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过20目筛，用95％乙醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取三次，每次15min，溶液用量为药材量的6倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为100W，提取温度为30℃，收集提取液，回收乙醇；
(2)提取液用乙酸乙酯萃取三次，回收乙酸乙酯后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与乳糖以1:1比例混合，制成胶囊剂。
实施例2茶枝柑幼果丸剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过60目筛，用30％甲醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取一次，提取20min，溶液用量为药材量的8倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为150W，提取温度为35℃，收集提取液，回收甲醇；
(2)提取液用二氯甲烷萃取三次，回收二氯甲烷后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与淀粉以1:2比例混合，制成丸剂。
实施例3茶枝柑幼果颗粒剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过40目筛，用30％正丁醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取两次，提取30min，溶液用量为药材量的10倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为200W，提取温度为40℃，收集提取液，回收正丁醇；
(2)提取液用正己烷萃取两次，回收正己烷后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与微晶纤维素以1:3比例混合，制成颗粒剂。
实施例4茶枝柑幼果片剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过30目筛，用30％丙酮水溶液对茶枝柑幼果超声提取四次，提取40min，溶液用量为药材量的12倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为250W，提取温度为45℃，收集提取液，回收丙酮；
(2)用二甲苯萃取两次，回收二甲苯后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与糊精以1:4比例混合，制成片剂。
实施例5茶枝柑幼果浸膏剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过20目筛，用50％甲醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取五次，提取50min，溶液用量为药材量的14倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为300W，提取温度为50℃，收集提取液，回收甲醇
(2)提取液用苯萃取两次，回收苯后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物，制成浸膏剂。
实施例6茶枝柑幼果胶囊剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过30目筛，用30％乙醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取三次，提取60min，溶液用量为药材量的16倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为350W，提取温度为55℃，收集提取液，回收乙醇；
(2)提取液用氯仿萃取三次，回收氯仿后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与微晶纤维素以1:5比例混合，制成胶囊剂。
实施例7茶枝柑幼果煎膏剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过40目筛，用80％甲醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取两次，提取70min，溶液用量为药材量的18倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为400W，提取温度为60℃，收集提取液，回收甲醇；
(2)提取液用环己烷萃取两次，回收环己烷后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物，制成煎膏剂。
实施例8茶枝柑幼果散剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过50目筛，用30％正丁醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取一次，提取80min，溶液用量为药材量的20倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为450W，提取温度为30℃，收集提取液，回收正丁醇；
(2)提取液用甲苯萃取两次，回收甲苯后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与糊精以1:6比例混合，制成散剂。
实施例9茶枝柑幼果颗粒剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过60目筛，用95％甲醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取两次，提取90min，溶液用量为药材量的10倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为500W，提取温度为40℃，收集提取液，回收甲醇；
(2)提取液用乙酸乙酯萃取两次，回收乙酸乙酯后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与可溶性淀粉以1:7比例混合，制成颗粒剂。
实施例10茶枝柑幼果片剂的制备
(1)取茶枝柑幼果药材粉碎、过40目筛，用60％乙醇水溶液对茶枝柑幼果超声提取三次，提取60min，溶液用量为药材量的12倍(体积比)，超声波频率为40kHz，功率为500W，提取温度为50℃，收集提取液，回收乙醇；
(2)提取液用二甲苯萃取两次，回收二甲苯后干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物；
(3)茶枝柑幼果提取物与硬脂酸镁以1:8比例混合，制成片剂。
实验例1小鼠小肠运动试验
(1)实验设计
取雄性ICR小鼠60只，分为6组，分别为茶枝柑幼果中药制剂(CRC)低、中、高剂量组(以实施例1为例)、空白组、模型组、阳性组，中药制剂(CRC)低、中、高剂量给药量分别为0.18g/kg/d、0.54g/kg/d、0.9g/kg/d(按提取物计分别为36mg/kg、108mg/kg、180mg/kg，按生药量计分别为1.3g/kg、3.9g/kg、6.5g/kg)，阳性组给予莫沙必利(Mosapride)3mg/kg，空白组和模型组给予0.5％羧甲基纤维素钠，连续灌胃15天，每天定时灌胃一次。实验结束前禁食不禁水16小时，实验结束当天，给药组给予一次药物，空白及模型组给予一次0.5％羧甲基纤维素钠；30min后，给药组和模型组给予洛哌丁胺(Loperamide)10mg/kg造模，空白组给予同体积0.5％羧甲基纤维素钠；45min后，每组均给予墨汁，25min后处死动物，迅速打开腹腔分离肠系膜，剪取自幽门至回盲部的小肠，置于白纸上，分别测量小肠全长和从幽门到墨汁前沿的距离，计算墨汁推进率和墨汁推进率转换值。
墨汁推进率＝墨汁推进长度(cm)/小肠总长度(cm)×100％，
(2)实验结果
如图1所示，与空白组(48.05±6.07)％相比，模型组小肠推进率(39.58±5.92)％降低了17.63％(##P<0.01)，具有统计学意义，表明本实验的胃肠道功能失调模型构建成功；与模型组相比，茶枝柑制剂(GT)的低剂量组(53.51±13.76)％(**P<0.01)，中剂量组(62.18±13.11)％(***P<0.001)，高剂量组(83.70±4.34)％(***P<0.001)，阳性组(50.32±7.42)％(**P<0.01)显著提高小肠推进率，相对于模型组分别提高了35.19％、57.10％、111.47％、27.13％。
实验例2大鼠体质量增量、摄食量和食物利用率的测定
(1)实验设计
取雄性SD大鼠50只，分为空白组、阳性组、茶枝柑幼果中药制剂(CRC)低、中、高剂量组(以实施例1为例)，每组10只。中药制剂(CRC)低、中、高剂量给药量分别为0.125g/kg/d、0.375g/kg/d、0.625g/kg/d(按提取物计分别为25mg/kg、75mg/kg、125mg/kg按生药量计分别为0.9g/kg、2.7g/kg、4.5g/kg)，空白组给予0.5％羧甲基纤维素钠，阳性组给予莫沙必利2mg/kg，所有动物连续灌胃4周，每天定时灌胃一次，每周记录两次大鼠体重和食物摄取量，并根据体重变化调整给药量，实验结束时计算体重增重、摄食量和食物利用率。食物利用率＝体重增加量/摄食量×100％。
(2)实验结果
表1大鼠体质量增量、摄食量和食物利用率的测定结果
| 实验组 | 体质量增量(g) | 摄食量(g) | 食物利用率(％) |
| 空白组 | 135.78±13.51 | 530.09±45.59 | 25.60±0.91 |
| 制剂低剂量组 | 143.75±14.17 | 575.93±27.83* | 24.92±1.49 |
| 制剂中剂量组 | 145.61±17.16 | 585.63±44.86* | 24.80±1.26 |
| 制剂高剂量组 | 147.52±12.06 | 597.54±23.81** | 24.65±1.07 |
| 阳性对照组 | 146.60±18.52 | 574.49±39.00* | 25.44±1.60 |
注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01。
如表1所示，低、中、高剂量组和阳性组对大鼠体重增重和食物利用率均无明显影响(P＞0.05)，但均能显著增加摄食量(P<0.05)，与空白组相比，低、中、高剂量组、阳性组摄食量分别增加了8.65％(P<0.05)、10.48％(P<0.05)、12.72％(P<0.01)、8.38％(P<0.05)。以上结果证实本发明所提供的茶枝柑幼果能在体重不显著增加的情况下，有效提高食欲和摄食量。
实验例3大鼠胃液和胃蛋白酶的测定
(1)实验设计
按“实验例2”是方法进行分组及给药，实验结束时将所有大鼠禁食不禁水24小时，用戊巴比妥钠麻醉大鼠，结扎大鼠幽门收集3小时胃液并测定其体积，用Mett氏法测定胃蛋白酶活性，具体方法如下：将收集的胃液按每1mL加入0.05mol/L的盐酸溶液15mL置于离心管中混匀，加入新鲜制备好的蛋白管2根，密封，37℃恒温孵育24h后取出，用游标卡尺测量每根蛋白管两端透明部分的长度，求出四端的平均值，根据胃蛋白酶活性单位公式计算胃蛋白酶活性，根据胃蛋白酶排出量公式计算胃蛋白酶排出量。
胃蛋白酶活性单位(U/mL)＝四端蛋白管透明部分长度均值2×16；
胃蛋白酶排出量(U/h)＝胃蛋白酶活性×胃液量/h。
(2)实验结果
如图2所示，与空白组(0.90±0.11)U/mL相比，低剂量组(1.03±0.07)U/mL、中剂量组(1.11±0.11)U/mL、高剂量(1.31±0.15)U/mL、阳性组(1.17±0.25)U/mL的每小时胃液分泌量均显著增加，分别增加了14.44％(*P<0.05)、23.33％(**P<0.01)、45.56％(***P<0.001)、30.00％(*P<0.05)。
如图3所示，与空白组胃蛋白酶排出量(101.77±15.28)U/h相比，低、中、高剂量组和阳性组胃蛋白酶排出量均显著增加(145.36±18.61、155.28±16.37、195.05±21.55、163.74±18.41)U/h，胃蛋白酶排出量分别增加了42.83％(**P<0.01)、52.58％(***P<0.001)、91.66％(***P<0.001)、60.89％(***P<0.001)。
如图4所示，与空白组的胃蛋白酶活性(114.29±16.45)U/mL相比，低、中、高剂量、阳性组胃蛋白酶活性显著增强(138.96±12.34、139.68±11.42、153.65±16.48、135.37±14.75)U/mL，胃蛋白酶活性分别增强了21.59％(*P<0.05)、22.22％(**P<0.01)、34.44％(**P<0.01)、18.44％(*P<0.05)。
综合以上实验结果可以得出，本发明所提供的茶枝柑幼果够能显著提高大鼠摄食量、胃液分泌量、胃蛋白酶分泌量和胃蛋白酶活性，具有较好的改善胃肠道功能的功效。
以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。
Claims (10)
1.茶枝柑幼果在制备改善胃肠道功能的药物中的应用。
2.茶枝柑幼果提取物在制备改善胃肠道功能的药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述茶枝柑幼果提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1、对茶枝柑幼果药材进行粉碎、过筛，然后采用有机溶剂-水溶液进行超声提取，收集得到提取液；
S2、用脂溶性有机溶剂对步骤S1的提取液进行萃取，回收溶剂后经干燥、粉碎得到茶枝柑幼果提取物。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述有机溶剂-水溶液包括但不限于乙醇、甲醇、丙酮、正丁醇的水溶液。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述脂溶性有机溶剂包括但不限于乙酸乙酯、苯、甲苯、二甲苯、二氯甲烷、氯仿、环己烷、正己烷。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述超声提取的超声波频率为40kHz，功率为100W-500W，提取温度为30-60℃，提取次数为1-5次，提取时间为15-90min。
7.一种改善胃肠道功能的药物，其特征在于，以茶枝柑幼果提取物为主要活性成分。
8.根据权利要求7所述的一种改善胃肠道功能的药物，其特征在于，还包括药学上可接受的辅料。
9.根据权利要求8所述的一种改善胃肠道功能的药物，其特征在于，所述辅料包括但不限于淀粉、可溶性淀粉、微晶纤维素、硬脂酸镁、乳糖、糊精。
10.根据权利要求7所述的一种改善胃肠道功能的药物，其特征在于，所述药物的剂型包括但不限于胶囊剂、丸剂、颗粒剂、片剂、浸膏剂、煎膏剂、散剂、散剂、注射剂、粉针剂、糖浆剂、口服液体制剂。
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2021
- 2021-03-04 CN CN202110240800.0A patent/CN112891422A/zh active Pending
Patent Citations (1)
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| CN110376092A (zh) * | 2019-08-28 | 2019-10-25 | 西南医科大学 | 一种复方山楂中绿原酸和橙皮苷含量测定及综合评价方法 |
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