CN102429946B - 一种用于制备抗流感病毒药物的中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于制备抗流感病毒药物的中药组合物，该中药组合物含有重量比为1∶4～4∶1的一枝黄花和野菊花；本发明还提供了上述中药组合物的制备方法，所述一枝黄花和野菊花加水或适宜浓度乙醇提取，浓缩，干燥，粉碎成粉末，将粉末混合均匀即得；该中药组合物可有效抑制流感病毒。

Description

一种用于制备抗流感病毒药物的中药组合物

技术领域

本发明涉及一种中药组合物及其制备方法与应用，尤其涉及一种含有一枝黄花和野菊花的具有抗流感病毒作用的中药组合物。

背景技术

流行性感冒(influenza)，简称流感，是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病，为临床常见病、多发病，特别是冬季，每年都有大范围的爆发、流行。流感病毒可通过多种途径传播，特别是可以借助空气飞沫传播，导致其传染性非常强、传播速度特别快，一旦大规模爆发难以控制。流感可使患者全身不适，包括打喷嚏、头痛、呕吐、发热发冷、疲倦乏力、食欲不振、咳嗽等症状，严重影响患者的工作和生活，其危害性更体现在严重时引起的肺炎、充血性心力衰竭及其他并发症，常危及婴幼儿、老年人及免疫力低下者的生命。

流感病毒属正黏科病毒，分为甲、乙、丙三型，其中甲型病毒最常见，也易引起世界大流行及地区流行，近年来在全球蔓延的甲型H1N1流感病毒就是其一。它比普通流感、禽流感传染性更强，患者染病后病情进展更迅速，相当凶猛。流感已经严重威胁到人类的生命健康，为此世界各国均投入了大量的人力物力对流感病毒进行研究，希望能找到治疗和预防的有效方法。

当前，生物药、化药、中药中都有针对流感的治疗药物，遗憾的是，流感病毒抗原性变异很快，流感疫苗难以达到免疫预防的作用；而化学药物(如达菲、金刚烷胺等)副作用大、易产生耐药性而且价格昂贵，同样难以控制流感的流行，特别是近年来我国抗生素药物的滥用，使得化学药物对流感病毒的抑制作用再打折扣；相比之下，中药以其安全性高，治疗中怯邪与扶正兼顾的特点，得到广大医患的认可，经长期临床实践证明其防治流感疗效肯定。中药，特别是清热解毒类中药，不但具有较强的抗病毒作用，而且其作用往往又是广谱的，能抑制致病菌、抗病毒、抑制炎症反应和解热，与此同时还具有免疫调节功能，从根本上抵制病毒侵害，较单一抗病毒的化学药物优势明显。

目前已经有大量的报道记载，一枝黄花和野菊花单一成分均具有较强的疏风清热和消肿解毒的药理作用，以及现代药理研究证实野菊花、一枝黄花具有明确的抗流感病毒作用，如楼士荣公开了一枝黄花在制备治疗和预防H5N1禽流感或流感病毒的药物中的应用，例如CN200610127149.1，广州中医药大学张奉学教授课题组研究证实中药野菊花具有抗甲1型流感病毒FM1株的作用(广州中医药大学硕士论文2008，2010)，野菊花水提物在体内外对甲1型流感病毒均有较好的抑制作用(中药材2010，33(11)：1773-1776)，但事实证明，其任一药材的疗效尚不能满足临床需求。而有关一枝黄花和野菊花组合物，以及二者以某种特定配比组合用于制备抗流感病毒治疗药物的用途，迄今未见有国内外研究报道。

然而常用的治疗流感的中成药组分较多(如莲花清瘟胶囊含有连翘、金银花、炙麻黄、炒苦杏仁、石膏、板蓝根、绵马贯众等13味中药材；抗病毒冲剂含有板蓝根、忍冬藤、青篙、白芷等9味中药材)，导致服用量大，对于吞咽有困难的老年儿童等患者服用困难，不能完全满足临床需要。近年来中药材由于供求关系等因素，价格全面逐年上涨，特别是今年，是十年来涨幅最大的一年，由此大复方中成药也给患者带来了很大的经济负担。

因此，为了缓解患者的经济压力、节约大量中药材资源、保障人类的稳定发展，开发一种在确保治疗流感疗效同时组分简单的中成药，十分必要。

发明内容

为了弥补现有治疗流感的药物的不足，发明人根据中医药理论进行了大量的科学试验研究，旨在提供一种疗效确切、服用量小、毒副作用低、不产生耐药性且价格低廉的中药组合物及其制备方法，以满足广大流感病患者尽快缓解症状、恢复健康的需求。

为达到本发明的目的、解决目前存在的技术问题，本发明所采用的技术方案为：

本发明提供了一种抗流感病毒的中药组合物，该中药组合物含有重量比为1∶4～4∶1的一枝黄花和野菊花。

上述组分中，所述的一枝黄花和野菊花为其原药材的水提物或醇提物，该醇提物包括了醇提取后的粗提物和/或粗提物经过非极性大孔吸附树脂精制除杂后的总黄酮提取物，该总黄酮提取物摒弃了醇提物(粗提物)中的无效成分，经过试验验证，该类成分对本发明所预期达到的抗流感病毒的效果作用甚微，甚至起到负面作用，因此，当本发明的一枝黄花和野菊花为其原药材的醇提物时，优选为其醇提物再经非极性大孔吸附树脂得到的总黄酮提取物。例如，将一枝黄花和野菊花经过常规的水提取或不同浓度乙醇提取，得到一枝黄花和野菊花的水提取物(简称水提物)或乙醇提取物(简称醇提物)，优选将一枝黄花和野菊花的用乙醇提取得到的提取液浓缩后再经非极性大孔树脂(如D101大孔树脂)分离纯化，得到一枝黄花和野菊花的总黄酮提取物。

所述一枝黄花(Solidago decurrens Lour.)，为菊科植物一枝黄花的干燥全草，性凉，味辛、苦，具有疏散风热、清热解毒等功效，常用于感冒头痛、上呼吸道感染、疮疖肿毒、支气管炎等。现代研究表明本品含有芸香甙(芦丁)、一枝黄花甙、苯甲酸苄酯、倍半萜等类化合物，对流感病毒、金葡萄色球菌、白喉杆菌、溶血性链球菌均有不同程度的抑制作用。

所述野菊花(Chrysanthemum indicum L.)，为菊科植物野菊的干燥头状花序，性微寒，味苦、辛，具有清热解毒、疏风平肝之功效，临床常用于风热感冒、咽喉肿痛、头痛眩晕、痈疖、肺炎等。现代研究表明本品含有蒙花苷、野菊花内酯、苦味素、维生素A等，具有抗病原微生物作用，对金黄色葡萄球菌、流感病毒、痢疾杆菌、伤寒杆菌均有不同程度的抑制作用，此外本品还有显著抗炎、抗氧化、提高机体免疫力等作用。

发明人经过大量的理论研究及科学实验，发现将一枝黄花和野菊花按照重量比为1∶4～4∶1相互配合使用，与单独使用一枝黄花或野菊花相比，本发明中药组合物抑制流感病毒的作用增强、毒性降低，治疗指数明显提高，特别是当其用量(重量)比为3∶4～3∶2时，其抑制甲型流感病毒作用更为显著。因此，可以这样认为，本发明研究发现了一枝黄花和野菊花的中药组合物具有显著的协同抗流感病毒作用，较一枝黄花或野菊花单方疗效更好，毒性更低。该中药组合物抗流感病毒作用显著、组分简单、配比合理，安全性高、不产生耐药性，且服用量小，在满足广大流感病患者尽快缓解症状、恢复健康需求的同时，还减轻了患者的经济负担、节约大量的中药材资源，特别还提高了吞咽不便的老年、儿童服用依从性。

本发明中药组合物更优选含有重量比为3∶4～4∶3的一枝黄花和野菊花。

本文所述的中药组合物也可称为药物组合物。

本发明的目的还在于提供上述中药组合物的制备方法，包含如下步骤：

(1)将一枝黄花和野菊花用水或浓度为50％～95％(v/v)的乙醇溶液提取，得到该一枝黄花和野菊花的提取液；

(2)将步骤(1)得到的一枝黄花和野菊花的提取液浓缩，干燥，粉碎成60～140目的粉末，得到一枝黄花和野菊花的水提物或醇提物，即为所述的中药物组合物。

上述制备方法的步骤(1)中，是将一枝黄花和野菊花混合后一起加水或50％～95％(v/v)乙醇溶液提取，优选50％～70％(v/v)的乙醇溶液提取。

而且，发明人经过大量实验发现并证明，在本发明中，将一枝黄花和野菊花混合后合并提取所得中药组合物的抗流感病毒活性明显优于各自单独提取后再将各自的提取液混合得到的中药组合物的抗流感病毒活性。

优选实施例中的上述制备方法的步骤(1)为：将所述的一枝黄花和野菊花加5～20倍量(指一枝黄花、野菊花总重量的5～20倍重量)优选6-15倍量的水，煎煮1～3次，每次煎煮1～2.5小时，煎液合并，即得到所述的该一枝黄花和野菊花的提取液；该提取液浓缩、干燥，得到一枝黄花和野菊花的水提物，收率为20～40％(重量百分比)。

另一优选实施例中的上述制备方法的步骤(1)为：将所述的一枝黄花和野菊花加5～15倍量的浓度为50％～95％(v/v)的乙醇溶液，煎煮2～3次，每次煎煮1～2.5小时，煎液合并，即得到所述的该一枝黄花和野菊花的提取液；该提取液浓缩、干燥后得到一枝黄花和野菊花的醇提物，收率为5～20％(重量百分比)。

上述采用乙醇提取的制备方法优选将得到的提取液进一步纯化，即，将提取液浓缩至适量，并使其通过非极性大孔树脂柱(如D101大孔树脂柱)，以水及体积浓度为20％、70％的乙醇溶液梯度洗脱，经镁粉/盐酸检测，结果发现70％乙醇溶液洗脱得到的洗脱液总黄酮含量最高，因此，收集、合并70％的乙醇洗脱得到的洗脱液，该洗脱液浓缩至适量，干燥，粉碎成60～140目的粉末，得一枝黄花和野菊花的总黄酮提取物，即，所述的中药物组合物，该总黄酮提取物的总黄酮含量不低于50％。

上述制备方法的步骤(2)为将所述的干燥，可采用本领域技术人员公知的减压干燥、喷雾干燥、微波干燥等方法实现。

本发明中药组合物优选采用一枝黄花和野菊花经70％(v/v)乙醇溶液提取，提取液浓缩，通过D101大孔树脂柱纯化，得一枝黄花和野菊花的总黄酮提取物的制备方法。该制备方法最大程度的保留了抗流感病毒有效成分，弃掉了大量无效成分，在提高疗效的同时降低了服用量。

为了方便服用，本发明所述的中药组合物可以是任何一种药物制剂形式，例如，片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、滴丸剂、糖浆剂或口服液等，当本发明的中药组合物采用上述任一种药物制剂形式时，为了制成该制剂的需要，该中药组合物中还含有本领域公知的常规辅料。此时，本发明中药组合物的制备方法，包含如下步骤：

(1)将一枝黄花和野菊花用水或浓度为50％～95％(v/v)的乙醇溶液提取，得到该一枝黄花和野菊花的提取液；

(2)将步骤(1)得到的一枝黄花和野菊花的提取液浓缩，干燥，粉碎成60～140目的粉末；

(3)在步骤(2)得到粉末中加入常规辅料，通过常规工艺，得到片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、丸剂、滴丸、糖浆或口服液等剂型的本发明中药组合物。

本发明中药组合物，当其制剂形式为固体形式时，所述的常规辅料为微晶纤维素、乳糖、羟甲基淀粉钠、木糖醇、甘露醇、微粉硅胶、乳糖、硬脂酸镁、聚维酮k30、羟丙甲基纤维素等，其比例为常规辅料∶原料为3∶1～1∶3，优选常规辅料∶原料为2∶1～1∶2。

当其制剂形式为液体形式，则所述的常规辅料是水、蜂蜜、蔗糖、甜菊甙、麦芽糖、香精、羟丙甲基纤维素、防腐剂等。

上述制备方法工艺简单、合理、收率高，其制得的中药组合物的有效成分含量高并且质量稳定、易控。经过本发明的合理配比组合，该中药组合物还大大强化了各原药材本身具有的抗病毒、提高免疫力等方面的作用效果。

本发明还提供了上述中药组合物在制备具有抗流感病毒作用的药物中的应用。

本发明的发明点和创造性在于：尽管有大量的报道记载，一枝黄花和野菊花单一成分具有较强的疏风清热和消肿解毒的药理作用，以及现代药理研究证实野菊花、一枝黄花具有明确的抗流感病毒作用但其疗效尚不能完全满足临床需求。本发明通过试验证实，将一枝黄花和野菊花两味中药材按照特定用量配比组合，其对流感病毒的抑制作用明显强于各自单独使用，在抗流感病毒方面表现出更为优异的协同作用，此外还降低了毒副作用；与目前常用的治疗流感的中成药相比，服用量减少1～2倍；而且工艺简单、节约了大量的药材及能源，降低了成本，从而有望给临床医生和患者提供疗效确切且副作用更小的简方治疗流感中药提供新选择。

本发明中药组合物疗效确切、毒副作用低，不会因耐受性而效果渐弱，可以满足广大流感病患者尽快恢复健康的需求，从而达到抑制流感大规模流行的目的。本发明的中药组合物在抗流感病毒方面表现出更为优异的协同作用，作用强度优于单一中药组分，且降低了有效剂量的毒性，保证了有效剂量的安全性，即安全性较好。

发明人进一步通过具体试验来验证本发明的预期功能性效果。

再次重申：以下实验只是本发明研制过程中众多试验中的例举性试验，并未涵盖和穷尽了发明人为本发明所做的所有试验，目的仅仅在于用那些数据来阐述本发明的有益效果。

1、试验材料

毒株：甲型流感病毒(A3/京科/30/95)，由上海市卫生防疫站提供；

细胞模型：狗肾细胞MDCK细胞(中国医学科学院医药生物技术研究所提供)；

阳性对照药：利巴韦林原料药，(广东肇庆星湖制药厂，批号10638)；

供试样品1：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶1水提物)；

供试样品2：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比4∶1水提物)；

供试样品3：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比2∶1水提物)；

供试样品4：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶3水提物)

供试样品5：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶4水提物)；

供试样品6：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶2水提物)

供试样品7：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比2∶3水提物)

供试样品8：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比3∶1水提物)

供试样品9：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比3∶2水提物)

供试样品10：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比3∶4水提物)

供试样品11：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比4∶3水提物)

供试样品12：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶170％乙醇溶液提取物)

供试样品13：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶160％乙醇溶液提取物)

供试样品14：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶150％乙醇溶液提取物)

供试样品15：本发明中药组合物(一枝黄花和野菊花重量比1∶1总黄酮提取物)

供试样品16：一枝黄花水提物

供试样品17：野菊花水提物

以上供试样品均由西安仁仁药业有限公司提供，其中供试样品1-15依次按照实施例1-15的制备方法制得，供试样品16、17参照实施例1的制备方法制得。

2、试验方法

2.1供试样品处理

供试样品：称取1g供试样品，用二甲亚砜(DMSO)溶解为20mg/L的储备溶液，临用前再用细胞维持液稀释至各工作浓度，经0.22μm滤膜过滤，取其滤液。

阳性对照药：利巴韦林原料药用二甲亚砜(DMSO)溶解为20mg/L溶液，临用前再用细胞维持液稀释至工作浓度250μg/ml，经0.22μm滤膜过滤，取滤液。

2.2药物对MDCK细胞毒性试验

将MDCK细胞按2×10⁶/ml接种于96孔培养板，每孔100μl，置37℃、5％CO₂培养24h后形成细胞单层，吸弃上清液，加入用细胞维持液稀释的不同工作浓度供试样品及阳性对照药，每孔加药100μl。37℃、5％CO₂继续培养72h，显微镜观察细胞形态，并用MTT(四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法)法在590nm测定A值，按下式计算细胞存活率，确定药物致半数细胞中毒浓度(TC₅₀)和最大无毒浓度(TC₀)。每个剂量供试样品加入4孔，同时设正常细胞对照。阳性对照药的细胞毒性实验按同法进行。

细胞存活率＝(实验孔A值/对照孔A值)×100％。

2.3细胞病变抑制试验

将MDCK细胞按2×10⁶/mL接种于96孔培养板，每孔100μl，置37℃、5％CO₂培养24h后形成细胞单层。用不含血清的MEM液洗涤细胞2次，加入100×TCID₅₀病毒液，每孔100μl，37℃、5％CO₂吸附2h，然后吸去病毒液，加入用无毒浓度范围倍比稀释的5个剂量的药物；再经37℃、5％CO₂培养72h，每日显微镜下观察细胞病变(CPE)情况。每个剂量药物设4孔加入，实验同时设细胞对照组，阳性对照药组及病毒对照组与实验组同时观察CPE。以发生CPE细胞比例表示CPE的程度，按以下6级标准判断：

1.细胞正常生长，无病变出现(-)；

2.病变细胞少于整个细胞单层的10％(±)；

3.病变细胞少于整个细胞单层的25％(+)；

4.25％-50％细胞产生病变(++)；

5.50％-75％细胞产生病变(+++)；

6.75％-100％细胞产生病变(++++)。

根据CPE的程度，采用Reed-Muench法计算，确定药物半数有效浓度(IC₅₀)，并结合细胞毒性实验的结果得到药物治疗指数(TI＝TC₅₀/IC₅₀)。

3、试验结果

以供试样品半数有效浓度(IC₅₀)和药物治疗指数(TI)分别评价供试样品的体外抗病毒活性和安全性。试验表明，药物半数有效浓度IC₅₀值越小，表明供试样品抗病毒活性越强；药物治疗指数TI值越大，表明供试样品安全性更好。体外抗流感病毒活性研究结果详见表1。

表1  体外抗流感病毒活性研究结果

序号	样品	TC50(mg/ml)	IC50(ug/ml)	TI
					1	供试样品1	2.50	150	16.7
2	供试样品2	3.50	330	10.6

3	供试样品3	2.80	325	8.6
					4	供试样品4	2.01	275	7.3
5	供试样品5	1.80	250	7.2
					6	供试样品6	1.70	300	5.7
7	供试样品7	1.65	265	6.2
					8	供试样品8	2.68	335	8.0
9	供试样品9	2.73	255	10.7
					10	供试样品10	2.23	200	11.1
11	供试样品11	2.34	215	10.9
					12	供试样品12	0.60	25	24.0
13	供试样品13	0.63	35	18.0
					14	供试样品14	0.69	40	17.3
15	供试样品15	0.15	3.125	48.0
					16	供试样品16	1.60	400	4.0
17	供试样品17	1.20	350	3.4
					18	阳性对照药	-	250	-

由表1可知，供试样品1～11为一枝黄花和野菊花重量比1∶4～4∶1配伍制备的水提物，与供试样品16(一枝黄花水提物)和供试样品17(野菊花水提物)比较，供试样品1～11的TC₅₀值提高，IC₅₀值降低，TI值提高。以上结果提示，与单独使用一枝黄花或野菊花相比，本发明中药物组合物抑制流感病毒的作用明显提高，治疗指数提高，安全性好。供试样品1～11中，以供试样品1的IC₅₀值最低，TI值最大，说明一枝黄花和野菊花的最佳配伍比例是1∶1，优于阳性对照药-利巴韦林。

供试样品12～14为一枝黄花和野菊花重量比1∶1配伍，经不同浓度乙醇溶液提取制备的醇提物，与供试样品1～11比较，供试样品12～14的TC₅₀值降低，IC₅₀值也明显降低(优于阳性对照药利巴韦林)，TI值提高。以上结果提示，与一枝黄花和野菊花水提法相比，醇提法能明显提高抑制流感病毒的活性和治疗指数，安全性好，其中70％乙醇提取更优。

供试样品15为一枝黄花和野菊花重量比1∶1配伍制备的总黄酮提取物，与供试样品12～14比较，供试样品15的TC₅₀值降低，IC₅₀值显著降低(优于阳性对照药利巴韦林)，TI值明显增大。以上结果提示，与一枝黄花和野菊花水提物和醇提物(粗提物)相比，总黄酮提取物更能显著提高组合物抑制流感病毒的活性，安全性更好。

本次试验结果表明：一枝黄花、野菊花水提物单独用于抗流感病毒，均有活性，但活性较弱，而由两者合理配比而成的本发明中药组合物，抗流感病毒活性明显增强，特别是当一枝黄花、野菊花按重量比1∶1配比时，其抗病毒活性的提高、毒性的降低更为显著，其抗病毒活性明显优于阳性对照药(利巴韦林250ug/ml)，说明一枝黄花、野菊花相互配合具有良好的抗流感病毒的协同作用。

除了上述试验，发明人还参照《免疫毒理学实验技术》进行了免疫调节试验，结果表明，本发明中药组合物能明显提高巨噬细胞的吞噬能力，具有体液免疫功能，能增强机体免疫机能，由于篇幅所限，该试验的方法及相关数据在此不再赘述。

为了验证本发明中药组合物的抗病毒效果，发明人进行了大量重复性的实验，与上述实验不同的是，一些是采用醇提取制备供试的本发明中药物组合物中两原药材的比例不同，比如一枝黄花与野菊花重量比为1∶2、1∶3∶2∶1等；另一些是采用醇提取制备方法中所有的乙醇浓度不同，如以体积浓度为50％、60％、80％、95％等的乙醇溶液为溶媒提取2-3次，每次1-2.5小时；此外，还将按照实施例18处方、工艺制备的片剂也进行了上述试验。

以上试验结果证明以下几点：

1、本发明的中药组合物具有较强的抗病毒活性及提高机体免疫力功能；

2、本发明的中药组合物中一枝黄花与野菊花的重量配比为1∶4～4∶1时，组合物均具有一定的抗流感病毒的作用，特别是当一枝黄花与野菊花重量配比为3∶4～3∶2时，较两者单独使用抑制流感病毒作用更为显著，毒副作用更为微弱；本发明中药组合物更优选重量比为3∶4～4∶3的一枝黄花和野菊花配合使用。

4、以适量的水或不同浓度乙醇提取1-3次、每次时间1-2.5小时的制备方法，均可制得具有良好抗流感病毒作用的本发明中药组合物，尤其是将醇提物进一步纯化后得到的总黄酮提取物，其抑制流感病毒活性更强，安全性更高；

5、是否添加常规辅料，对本发明药物组合物各方面的作用没有任何影响。

由于篇幅所限，上述试验尤其是筛选最优化配比的试验方法、步骤以及相关数据在此不再赘述。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步说明。

实施例1：

原药材：一枝黄花500g，野菊花500g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，第一次加10倍量水煎煮2.5小时，第2次加8倍量水煎煮1.5小时，合并煎液，过滤、浓缩，减压干燥，粉碎成80目的粉末，得到一枝黄花、野菊花的水提取物粉末，即为本发明中药组合物。

实施例2：

原药材：一枝黄花800g，野菊花200g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，第一次加15倍量水，煎煮2小时，第二次加5倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干浸膏，粉碎，过100目筛，得到一枝黄花、野菊花的水提取物粉末，即为本发明中药组合物。

实施例3

原药材：一枝黄花666g，野菊花333g；

工艺：

将上述组分加水煎煮3次，每次1.5小时，每次加8倍量水，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，微波干燥得干浸膏，粉碎，过120目筛，得到一枝黄花、野菊花的水提取物粉末，即为本发明中药组合物。

实施例4

原药材：一枝黄花250g，野菊花750g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，每次1小时，每次加10倍量水，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，微波干燥得干浸膏，粉碎，过140目筛，得到一枝黄花、野菊花的水提取物粉末，即为本发明中药组合物。

实施例5：

原药材：一枝黄花200g，野菊花800g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2.5小时共1次，加20倍量水，煎液滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干浸膏，粉碎，过60目筛，得到一枝黄花、野菊花的水提取物粉末，即为本发明中药组合物。

实施例6：

原药材：一枝黄花333g，野菊花666g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，第一次加12倍量水，煎煮2小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，沸腾干燥得干膏粉，粉碎，过80目筛，得到一枝黄花、野菊花的水提取物粉末，即为本发明中药组合物。

实施例7

原药材：一枝黄花400g，野菊花600g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，第一次加12倍量水，煎煮1.5小时，第二次加6倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过80目筛，得到的提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例8

原药材：一枝黄花750g，野菊花250g；

工艺：

将上述组分加水煎煮3次，每次1.5小时，每次加6倍量水，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过120目筛，得到的提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例9

原药材：一枝黄花600g，野菊花400g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2.5小时共1次，加20倍量水，煎液滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过60目筛，得到的提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例10

原药材：一枝黄花428g，野菊花572g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，第一次加12倍量水，煎煮1.5小时，第二次加8倍量水煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过100目筛，得到提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例11

原药材：一枝黄花572g，野菊花428g；

工艺：

将上述组分加水煎煮2次，每次1.5小时，第一次加12倍量水，第二次加8倍量水，合并煎液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过80目筛，得到提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例12

原药材：一枝黄花500g，野菊花500g；

工艺：

将上述组分加70％(v/v)乙醇提取2次，第一次加10倍量，提取2.5小时，第2次加8倍量，提取1.5小时，合并提取液，过滤、浓缩，减压干燥后得干膏粉，粉碎，过80目筛，得到一枝黄花、野菊花的醇提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例13

原药材：一枝黄花500g，野菊花500g；

工艺：

将上述组分加60％(v/v)乙醇提取3次，每次1.5小时，每次加8倍量60％乙醇，合并提取液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过60目筛，得到的提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例14

原药材：一枝黄花500g，野菊花500g；

工艺：

将上述组分加50％(v/v)乙醇提取2次，第一次加15倍量，提取2小时，第二次加5倍量提取1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过100目筛，得到提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例15

原药材：一枝黄花500g，野菊花500g；

工艺：

将上述组分加70％(v/v)乙醇提取2次，第一次加10倍量，提取2.5小时，第2次加8倍量，提取1.5小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至适量，上D101大孔树脂柱，用水及体积浓度分别为20％、70％的乙醇溶液洗脱，洗脱液经镁粉/盐酸检测，合并黄酮量高的70％乙醇部分洗脱液，浓缩至适量，干燥，得总黄酮提取物干膏粉(总黄酮含量90.2％)，粉碎，过100目筛，得到提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例16：

原药材：一枝黄花500g，野菊花500g；

工艺：

将上述组分加80％(v/v)乙醇提取2次，第一次加10倍量80％乙醇，提取1.5小时，第二次加6倍量80％乙醇提取1小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过80目筛，得到提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例17：

原药材：一枝黄花750g，野菊花250g；

工艺：

将上述组分加95％(v/v)乙醇提取2次，每次1小时，每次加8倍量95％乙醇，合并提取液，滤过，滤液浓缩至适量，减压干燥得干膏粉，粉碎，过80目筛，得到提取物粉末，即为本发明中药物组合物。

实施例18：

处方(1000片)：

原料：实施例15所得提取物粉末44g；

辅料：微晶纤维素35g、乳糖10g、微粉硅胶10g、硬脂酸镁1g。

工艺：

将原料与微晶纤维素、微粉硅胶、乳糖混匀，用50％(v/v)乙醇制颗粒，干燥后加入硬脂酸镁，混匀，压片，薄膜包衣，即得本发明中药组合物。

成人推荐口服用量一次1～2片，一日2～3次。

实施例19：

处方(1000粒)：

原料：实施例15所得提取物粉末44g；

辅料：微晶纤维素35g、淀粉10g、微粉硅胶10g、硬脂酸镁1g。工艺：

将原料与微晶纤维素、微粉硅胶、淀粉混匀，用10％(m/v)的淀粉浆制颗粒，干燥后加入硬脂酸镁，混匀，装胶囊，制得胶囊形式的本发明中药组合物。

成人推荐口服用量一次1～2粒，一日2～3次。

实施例20：

处方(1000支)：

原料：实施例15所得提取物粉末44g；

辅料：羟丙甲基纤维素100g、苯甲酸钠60g、果味香精60g、去离子水10L。

工艺：

将羟丙甲基纤维素用适量去离子水加热充分溶胀，备用；将原料及过100目筛的果味香精和苯甲酸钠缓慢加入溶胀好的羟丙甲基纤维素水溶液，混合，搅拌均匀，最后加适量蒸馏水至全量(10L)混匀，分装灭菌，制得混悬口服液形式的本发明中药组合物。

成人推荐口服用量一次1～2支，一日2～3次。

本发明不局限于上述实施方式，任何人在本发明的启示下得出的其他任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种抗流感病毒的中药组合物，其特征在于，该中药组合物由重量比为1∶4～4∶1的一枝黄花和野菊花两味中药制成。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的一枝黄花和野菊花的重量比为3∶4～3∶2。

3.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的一枝黄花和野菊花的重量比为3∶4～4∶3。

4.如权利要求1-3任一项所述的中药组合物，其特征在于，所述的一枝黄花和野菊花为其原药材的水提物或醇提物。

5.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的中药组合物是片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸或口服液的制剂的形式，且该中药组合物的所述制剂中还含有该制剂的常规辅料。

6.权利要求1所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，该制备方法包含如下步骤：

(1)将一枝黄花和野菊花用水或浓度为50％～95％(v/v)的乙醇溶液提取，得到该一枝黄花和野菊花的提取液；

(2)将步骤(1)得到的一枝黄花和野菊花的提取液浓缩，干燥，粉碎成60～140目的粉末，得到一枝黄花和野菊花的水提物或醇提物，即为所述的中药物组合物。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，该制备方法的步骤(1)为将所述的一枝黄花和野菊花加5～20倍量的水，煎煮1～3次，每次煎煮1～2.5小时，煎液合并，即得到所述的该一枝黄花和野菊花的提取液；该提取液浓缩、干燥后得到一枝黄花和野菊花的水提物，收率为20％～40％(重量百分比)。

8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，该制备方法的步骤(1)为将所述的一枝黄花和野菊花加5～15倍量的浓度为50％～95％(v/v)的乙醇溶液，煎煮2～3次，每次煎煮1～2.5小时，煎液合并，即得到所述的该一枝黄花和野菊花的提取液；该提取液浓缩、干燥后得到一枝黄花和野菊花的醇提物，收率为5～20％(重量百分比)。

9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述提取液浓缩后，使其通过非极性大孔树脂柱，以水及体积浓度分别为20％、70％的乙醇溶液梯度洗脱，收集、合并70％乙醇洗脱得到的总黄酮含量高的洗脱液，该洗脱液浓缩至适量，干燥，粉碎成60～140目的粉末，得总黄酮提取物，即所述中药物组合物，该总黄酮提取物的总黄酮含量不低于50％。

10.权利要求1所述的中药组合物在制备抗流感病毒的药物中的应用。