CN112844331A - 基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用 - Google Patents

基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。通过合成具有特定结构的DNA纳米材料，并将其与适配子连接，得到连接有适配子的DNA纳米材料；再将连接有适配子的DNA纳米材料负载于特定的吸附载体上，得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。通过上述方式，本发明能够将DNA纳米材料作为连接适配子和吸附载体的中间结构，不仅能够避免将适配子与吸附载体直接偶联时需要进行的复杂操作，简化制备工艺；还能够在稳定连接适配子和吸附载体的同时，有效提高吸附剂的吸附效率，从而实现对乙型肝炎表面抗原的高效吸附，大幅降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量，具有较高的实际应用价值。

Description

基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及生物医学吸附材料技术领域，尤其涉及一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。
背景技术
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染而引发的肝脏类疾病，包括急性和慢性肝炎。HBV表面抗原(HBsAg)血清检测阳性是确诊的主要标准，在临床实践中，清除HBsAg被认为是慢性乙型肝炎最关键的治疗终点，与改善临床结局、延长生存期、降低肝硬化和肝细胞癌的发生率相关。目前，针对乙型肝炎的治疗方法主要集中在药物筛选、给药和靶向治疗等方面，但这些治疗方案效果有限，且长期治疗效果不佳。
基于现有治疗方案存在的问题，体外血液净化系统逐渐受到研究者的关注，并被应用于乙型肝炎的治疗。体外血液净化系统包括血液滤过、血液灌流和血液吸附，其工作原理主要是通过降低血液中病原体相关分子的浓度来降低毒性的严重程度和中毒时间，其中，血液吸附与其他净化方式的主要区别在于其在非特异性吸附材料的基础上引入了能够与目标分子特异性结合的配体，制成相应的吸附剂，从而实现对特定目标分子的有效去除。由于吸附剂的吸附效果与其作为载体的吸附材料、配体的种类及其结合方式等密切相关，如何选择适宜的载体、配体及其结合方式已成为乙型肝炎病毒吸附剂开发过程的研究重点。
公开号为CN111659355A的专利提供了一种烷基化修饰的乙肝病毒免疫吸附剂及其制备方法，该专利通将活化的吸附载体与乙肝病毒抗体偶联结合，并对乙肝病毒抗体中的巯基进行烷基化修饰，经还原处理后即可得到吸附效率高、特异性好和可再生性好的烷基化修饰的乙肝病毒免疫吸附剂，增加了临床使用中的可操作性和重复利用率，进而降低了生产和使用成本。然而，该专利中是以抗体作为配体，而抗体的生产需要很高的成本和较长的时间，抗体在室温或更高的温度下经过一定时间会发生不可逆的变性，且抗体具有较高的免疫原性。此外，该专利中简单地将吸附载体与作为配体的抗体偶联结合，难以对配体表面的尺寸和几何形状进行控制，进而影响了配体的识别能力。因此，当前仍有必要寻求抗体的替代品，并改进吸附载体和配体间的连接方式，以改善吸附剂的性能。
有鉴于此，有必要设计一种改进的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法，以解决上述问题。
发明内容
针对上述现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。通过合成DNA纳米材料，并将其作为连接适配子和吸附载体的中间结构，在稳定连接适配子和吸附载体的同时，有效提高了吸附剂的吸附效率，从而实现对乙型肝炎表面抗原的高效吸附，以降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量。
为实现上述目的，本发明提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，包括如下步骤：
S1、合成DNA纳米材料；
S2、将步骤S1合成的所述DNA纳米材料回收并纯化后，与适配子混合均匀，孵育后得到连接有适配子的DNA纳米材料，溶于缓冲溶液中备用；
S3、将吸附载体置于孵育管中，再加入步骤S2得到的溶于缓冲溶液的所述连接有适配子的DNA纳米材料，充分反应后得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。
作为本发明的进一步改进，在步骤S1中，所述DNA纳米材料的合成具体包括如下步骤：
将预设数量的DNA单链干粉分别溶解于TE缓冲液中，再将其按照等物质的量混匀后加入TM缓冲液中，在预设温度下孵育后得到DNA纳米材料。
作为本发明的进一步改进，在步骤S1中，所述DNA单链的预设数量为六条、八条或十一条；所述孵育过程包括先在95℃下孵育5～10min，再进行两次阶段性降温。
作为本发明的进一步改进，在步骤S2中，所述孵育的温度为35～40℃，时间为80～100min。
作为本发明的进一步改进，在步骤S3中，所述反应在水浴条件下进行，反应温度为35～40℃，反应时间为15～25min。
作为本发明的进一步改进，在步骤S2中，所述适配子的序列为5′-TGAGC CTCTGGATAC TTTTT ACCCA CAGCG AACAG CGGCG GACAT AATAG TGCTT ACTAC GACGC-3′。
作为本发明的进一步改进，在步骤S1中，所述DNA纳米材料为DNA 立方体、DNA八面体笼、DNA双角锥中的一种。
作为本发明的进一步改进，在步骤S3中，所述吸附载体为二氧化硅凝胶、聚乙烯醇微球、碳化树脂、球形纤维素微球中的一种。
为实现上述目的，本发明还提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂，所述基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂根据上述技术方案中任一技术方案制备得到，包括吸附载体以及负载于所述吸附载体表面的连接有适配子的DNA纳米材料。
本发明还提供了所述基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂在血液吸附领域的应用。
本发明的有益效果是：
(1)本发明通过合成特定结构的DNA纳米材料，并将其与适配子连接，再将连接有适配子的DNA纳米材料负载于特定的吸附载体上，制备了基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。基于本发明提供的方法，本发明能够将DNA纳米材料作为连接适配子和吸附载体的中间结构，在稳定连接适配子和吸附载体的同时，有效提高吸附剂的吸附效率，从而实现对乙型肝炎表面抗原的高效吸附，以降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量。
(2)本发明通过选用核酸适配子代替传统的抗体作为配体，不仅能够避免抗体本身存在的成本高、易变性、免疫原性较高等缺点，还能够使制得的吸附剂具有更高的吸附效率、更特异的亲和力、更低的成本以及更长的储存期，具有较高的实际应用价值。
(3)本发明通过选择DNA纳米材料作为连接适配子和吸附载体的中间结构，不仅能够避免将适配子与吸附载体直接偶联时需要进行的复杂操作，简化制备工艺；还能够提高吸附剂的稳定性及其吸附效率，达到更好的吸附效果，以满足实际应用的需求。
(4)本发明通过选择DNA立方体、DNA八面体笼或DNA双角锥作为DNA 纳米材料，并选择二氧化硅凝胶、聚乙烯醇微球、碳化树脂或球形纤维素微球作为吸附载体，再基于所选的DNA纳米材料和吸附载体设置适宜的制备参数，从而简捷高效地制备了基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂；且本发明制备的基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂具有较高的吸附效率，能够有效降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量，具有较高的实际应用价值。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面结合具体实施例对本发明进行详细描述。
在此，还需要说明的是，为了避免因不必要的细节而模糊了本发明，仅仅示出了与本发明的方案密切相关的结构和/或处理步骤，而省略了与本发明关系不大的其他细节。
另外，还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
本发明提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，包括如下步骤：
S1、合成DNA纳米材料；
S2、将步骤S1合成的所述DNA纳米材料回收并纯化后，与适配子混合均匀，孵育后得到连接有适配子的DNA纳米材料，溶于缓冲溶液中备用；
S3、将吸附载体置于孵育管中，再加入步骤S2得到的溶于缓冲溶液的所述连接有适配子的DNA纳米材料，充分反应后得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。
在步骤S1中，所述DNA纳米材料的合成具体包括如下步骤：
将预设数量的DNA单链干粉溶解于TE缓冲液中，再将其按照等物质的量混匀后加入TM缓冲液中，在预设温度下孵育后得到DNA纳米材料；所述DNA单链的预设数量为六条、八条或十一条；所述孵育过程包括先在95℃下孵育5～10min，再进行两次阶段性降温。
所述DNA纳米材料为DNA立方体、DNA八面体笼、DNA双角锥中的一种。
在步骤S2中，所述孵育的温度为35～40℃，时间为80～100min；所述适配子的序列为5′-TGAGC CTCTG GATAC TTTTT ACCCA CAGCG AACAG CGGCG GACAT AATAG TGCTT ACTACGACGC-3′。
在步骤S3中，所述反应在水浴条件下进行，反应温度为35～40℃，反应时间为15～25min；所述吸附载体为二氧化硅凝胶、聚乙烯醇微球、碳化树脂、球形纤维素微球中的一种。
本发明还提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂，所述基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂根据上述技术方案制备得到，包括吸附载体以及负载于所述吸附载体表面的连接有适配子的DNA纳米材料。
本发明还提供了所述基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂在血液吸附领域的应用。
下面结合具体的实施例对本发明提供的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用进行说明。
实施例1
本实施例提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，具体包括如下步骤：
S1、合成DNA纳米材料：
将十一条DNA单链干粉溶解于TE缓冲液(10mmol/L的Tris-HCl、1mmol/L 的EDTA，pH＝8.0)中，再将物质的量相等的十一条DNA单链混匀后加入TM 缓冲液(20mmol/L的Tris-HCl、50mmol/L的MgCl2，pH＝8.0)中，在95℃下孵育5min，然后降温至80℃并孵育3min，再进行两次阶段性降温(先以每2min 降低1℃的速度降温至60℃，再以每3min降低1℃的速度降温至4℃)，之后在室温下保存10min以上，得到具有DNA立方体结构的DNA纳米材料。
其中，十一条DNA单链的DNA链序列如下所示：
Clip1-AB：5′-TCGCT GAGTA HTCCT ATATG GTCAA CTGCT CHGCA AGTGT GGGCACGCAC ACHGT AGTAA TACCA GATGG AGTHC ACAAA TCTG-3′；
Clip2-AB：5′-CTATC GGTAG HTCCT ATATG GTCAA CTGCT CHTAC TCAGC GACAGATTTG TGHGT AGTAA TACCA GATGG AGTHC AACTA GCGG-3′；
Clip3-AB：5′-CACTG GTCAG HTCCT ATATG GTCAA CTGCT CHCTA CCGAT AGCCGCTAGT TGHGT AGTAA TACCA GATGG AGTHG GTTTG CTGA-3′；
Clip4-AB：5′-CCACA CTTGC HTCCT ATATG GTCAA CTGCT CHCTG ACCAG TGTCAGCAAA CCHGT AGTAA TACCA GATGG AGTHG TGTGC GTGC-3′；
Clip1-C：5′-TCGCT GAGTA HGCCT GGCCT TGGTC CATTT GHGCA AGTGT GGGCACGCAC ACHCG CACCG CGACT GCGAG GACHC ACAAA TCTG-3′；
Clip3-C：5′-CACTG GTCAG HAAAA CTCTG CCGTA AGAGG AHCTA CCGAT AGCCGCTAGT TGHCG CACCG CGACT GCGAG GACHG GTTTG CTGA-3′；
Clip1-T14：5′-TCGCT GAGTA HTCCT TTTTT TTTTT TTTCT CHGCA AGTGT GGGCACGCAC ACHGT ATTTT TTTTT TTTTT AGTHC ACAAA TCTG- 3′；
Clip2-T14：5′-CTATC GGTAG HTCCT TTTTT TTTTT TTTCT CHTAC TCAGC GACAGATTTG TGHGT ATTTT TTTTT TTTTT AGTHC AACTA GCGG- 3′；
Clip3-T14：5′-CACTG GTCAG HTCCT TTTTT TTTTT TTTCT CHCTA CCGAT AGCCGCTAGT TGHGT ATTTT TTTTT TTTTT AGTHG GTTTG CTGA- 3′；
Clip4-T14：5′-CCACA CTTGC HTCCT TTTTT TTTTT TTTCT CHCTG ACCAG TGTCAGCAAA CCHGT ATTTT TTTTT TTTTT GAGTH GTGTG CGTGC-3′；
LA：5′-GAGCA GTTGA CCATA TAGGA AGCCA CCGTC GTGAC GTGTA GAGCA GTTGACCATA TAGGA-3′。
S2、制备连接有适配子的DNA纳米材料
将步骤S1合成的所述DNA纳米材料回收并纯化后，与相同物质的量的适配子混合均匀，在37℃下孵育90min后得到连接有适配子的DNA纳米材料，溶于缓冲溶液(20mmol/L的NaH2PO4、0.15mol/L的NaCl，pH＝7.4)中备用。
其中，对DNA纳米材料的回收与纯化具体包括如下步骤：
(1)平衡CA2吸附柱：将吸附柱CA2放入收集管中，取500μL平衡液BL, 加入到吸附柱CA2中，以12000r/min的转速在室温下离心1min，从离心机中取出，将收集管中的废液弃去，然后将吸附柱重新放回收集管中。
(2)切胶：将位于140bp左右的单一的DNA立方体条带从琼脂糖凝胶中切下，尽量不要切到多余的空白凝胶，取一个新的干净的离心管，将切下的凝胶放入离心管中，称取准确重量。
(3)溶胶：按照每100mg凝胶加入100μL PN溶液的方式向含有切下凝胶的离心管中加入PN溶液，预先准备50-60℃水浴，将PN溶液与凝胶充分混合后，放入50-60℃的水浴中，待凝胶完全溶解后，再按照每100mg凝胶加入 50μL异丙醇溶液的方式加入异丙醇溶液，然后放置于室温环境下，待其温度完全下降至室温。
(4)吸附：将步骤(3)所得溶液加入到一个已预先平衡并放入收集管中的 CA2吸附柱中，在室温下静置2min后，以12000r/min的转速在室温下离心1min，弃去收集管中的废液，再将吸附柱CA2放入收集管中。
(5)洗杂：向漂洗液PW溶液中加入标示的无水乙醇，然后取600μL加入吸附柱CA2中，静置5min，以12000r/min的转速在室温下离心1min，弃去收集管中的废液，将吸附柱CA2放入收集管中，再重复两次。
(6)甩干：取一个新的收集管，将漂洗过的吸附柱CA2放回收集管中，以 12000r/min的转速在室温下离心10min，完全除去漂洗液。然后将吸附柱CA2在室温下静置10min，使其完全晾干。
(7)洗脱：取一个新的干净的离心管，将吸附柱CA2放至离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加TE缓冲液，室温放置2min，以12000r/min的转速在室温下离心2min，收集洗脱下的DNA立方体溶液，重新悬空滴加回吸附膜中间位置，重复室温放置2min，以12000r/min的转速在室温下离心2min，收集洗脱下的DNA立方体溶液。
S3、制备基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂
将球形纤维素微球作为吸附载体置于孵育管中，再加入步骤S2得到的溶于缓冲溶液的连接有适配子的DNA纳米材料，震荡混匀后，置于37℃的水浴锅中静置20min，得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。
实施例2～6
实施例2～6分别提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，与实施例1相比，不同之处在于改变了使用的DNA纳米材料及吸附载体的种类，各实施例对应的DNA纳米材料及吸附载体的种类如表1所示。
表1实施例2～10对应的反应参数
实施例 DNA纳米材料 吸附载体
实施例2 DNA八面体笼 球形纤维素微球
实施例3 DNA双角锥 球形纤维素微球
实施例4 DNA立方体 二氧化硅凝胶
实施例5 DNA立方体 聚乙烯醇微球
实施例6 DNA立方体 碳化树脂
取来自乙肝病人的静态血液样本，分别采用实施例1～6制备的乙型肝炎病毒吸附剂，按照吸附剂：血液＝1:5的比例对血液样本进行吸附，并对吸附前后样本内乙肝表面抗原的含量进行检测。其中，吸附前的样本内乙肝表面抗原的含量为66.29IU/mL，分别采用实施例1～6提供的乙型肝炎病毒吸附剂进行吸附后得到的乙肝表面抗原的含量如表2所示。
表2经实施例1～6提供的吸附剂吸附后的乙肝表面抗原含量
实施例 吸附后的乙肝表面抗原含量(IU/mL)
实施例1 6.76
实施例2 11.93
实施例3 9.28
实施例4 11.26
实施例5 13.92
实施例6 9.94
由表2可以看出，选择不同的DNA纳米材料及吸附载体对制备的吸附剂的吸附效率具有一定影响，表明选择适宜的原料对于制备吸附性能优异的基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂具有重要意义。同时，本发明提供的方法适用于不同类别的DNA纳米材料与吸附载体，适用范围较广，具有较高的实际应用价值。
对比例1
对比例1提供了一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，包括如下步骤：
S1、将羧基化的球形纤维素微球震荡混匀，使用移液枪抽取混匀后的微球10mL，转移至100mL的锥形瓶中，室温下静置5min，缓慢吸取并弃去上层保护缓冲液，加入30mL蒸馏水重悬，转移至抽滤瓶中，使用200mL蒸馏水冲洗三次以彻底去除部分保护缓冲液，并将清洗后的微球迅速转移到 100mL的锥形瓶中，整个过程使微球保持湿润，得到球形纤维素微球悬浮液。
S2、自-20℃的冰箱中取出装有250μg的氨基修饰的核酸适配子的EP管，室温静置5min后，在室温下以5000r/min的转速离心2min，使贴附于EP管壁上的适配子聚集于管底。然后取适配子溶解缓冲液(含有200mmol/L的 Na2HPO4和5mmol/L的MgCl2，pH＝8.0)加入管中，轻微震荡后于室温下静置10min，然后在60℃的水浴锅中处理10min，再置于室温环境中20min，待其复性后即得到溶解的适配子。
S3、将分别称取0.23g N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和0.78g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，使NHS与EDC的摩尔比为1:2.5；再将其溶解于pH＝5.5，浓度为0.05mol/L的2-(N-吗啉)乙磺酸(MES)缓冲溶液中，得到交联催化剂。
S4、将步骤S3得到的所述交联催化剂加入步骤S1得到的所述球形纤维素微球悬浮液中，充分混匀后再加入步骤S2得到的所述溶解的适配子，置于 27℃的恒温箱中，反应12h。
S5、待步骤S4中的酰胺反应完成后，再加入pH＝9的三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(Tris-HCl)缓冲液终止反应，并封闭残留的活性酯，使用浓度为 0.01mol/L的磷酸缓冲盐溶液(PBS)漂洗两遍后，得到乙型肝炎病毒吸附剂。
对比例1提供的方法利用交联剂使羧基化的球形纤维素微球与氨基修饰的核酸适配子直接偶联，形成乙型肝炎病毒吸附剂。
为对比实施例1与对比例1制备的乙型肝炎病毒吸附剂的吸附效果，将来自于不同病人的15份HBV样本每个均分为三份，分别用于测量样本中乙肝表面抗原在吸附前、经对比例1提供的吸附剂吸附后以及经实施例1提供的吸附剂吸附后的含量，结果如表3所示。
表3对比例1和实施例1制备的吸附剂对不同样本的吸附结果
Figure BDA0002880174110000111
由表3可以看出，与对比例1提供的乙型肝炎病毒吸附剂相比，经实施例1提供的乙型肝炎病毒吸附剂吸附后的血液中乙肝表面抗原的含量明显更低，且样本中乙肝表面抗原含量越高时，实施例1提供的吸附剂的吸附优势更加明显。表明本发明通过选择DNA纳米材料作为连接适配子和吸附载体的中间结构，不仅能够避免将适配子与吸附载体直接偶联时需要进行的复杂操作，简化制备工艺；还能够提高吸附剂的稳定性及其吸附效率，达到更好的吸附效果，以满足实际应用的需求。
综上所述，本发明提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。通过合成具有特定结构的DNA纳米材料，并将其与适配子连接，得到连接有适配子的DNA纳米材料；再将连接有适配子的DNA纳米材料负载于特定的吸附载体上，得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。通过上述方式，本发明能够将DNA纳米材料作为连接适配子和吸附载体的中间结构，不仅能够避免将适配子与吸附载体直接偶联时需要进行的复杂操作，简化制备工艺；还能够在稳定连接适配子和吸附载体的同时，有效提高吸附剂的吸附效率，从而实现对乙型肝炎表面抗原的高效吸附，大幅降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量，具有较高的实际应用价值。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、合成DNA纳米材料；
S2、将步骤S1合成的所述DNA纳米材料回收并纯化后，与适配子混合均匀，孵育后得到连接有适配子的DNA纳米材料，溶于缓冲溶液中备用；
S3、将吸附载体置于孵育管中，再加入步骤S2得到的溶于缓冲溶液的所述连接有适配子的DNA纳米材料，充分反应后得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。
2.根据权利要求1所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S1中，所述DNA纳米材料的合成具体包括如下步骤：
将预设数量的DNA单链干粉溶解于TE缓冲液中，再将其按照等物质的量混匀后加入TM缓冲液中，在预设温度下孵育后得到DNA纳米材料。
3.根据权利要求2所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S1中，所述DNA单链的预设数量为六条、八条或十一条；所述孵育过程包括先在95℃下孵育5～10min，再进行两次阶段性降温。
4.根据权利要求1所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S2中，所述孵育的温度为35～40℃，时间为80～100min。
5.根据权利要求1所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S3中，所述反应在水浴条件下进行，反应温度为35～40℃，反应时间为15～25min。
6.根据权利要求1所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S2中，所述适配子的序列为5′-TGAGC CTCTG GATAC TTTTT ACCCA CAGCGAACAG CGGCG GACAT AATAG TGCTT ACTAC GACGC-3′。
7.根据权利要求1～6中任一权利要求所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S1中，所述DNA纳米材料为DNA立方体、DNA八面体笼、DNA双角锥中的一种。
8.根据权利要求1～7中任一权利要求所述的一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S3中，所述吸附载体为二氧化硅凝胶、聚乙烯醇微球、碳化树脂、球形纤维素微球中的一种。
9.一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂，其特征在于：所述基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂根据权利要求1～8中任一权利要求所述的制备方法制备得到，包括吸附载体以及负载于所述吸附载体表面的连接有适配子的DNA纳米材料。
10.一种权利要求1～8中任一权利要求所述的制备方法制得的基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂或权利要求9所述的基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的应用，其特征在于：所述基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂用于血液吸附领域。
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