CN112791236B - 一种细胞微载体基质及其应用 - Google Patents

一种细胞微载体基质及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种细胞微载体基质，其原料包括甲基丙烯酰化明胶和蚝壳粉，按照质量比计算，甲基丙烯酰化明胶：蚝壳粉＝1～10:0.5～2。甲基丙烯酰化明胶含水量高，成分与细胞外基质相似，具有良好的表面活性，从而能够与细胞、活性因子很好地相容，以含有甲基丙烯酰化明胶作为有效成分的细胞微载体基质将细胞包覆在其中，可以为细胞提供一个三维的支撑作用，也可以避免细胞在注射和移植过程中受到损伤。将甲基丙烯酰化明胶与蚝壳粉复配使用，能够有效地降低细胞微载体的溶胀率，使细胞微载体具有更优异的力学强度。

Description

一种细胞微载体基质及其应用
技术领域
本发明属于生物技术领域，特别地，涉及一种细胞微载体基质及其应用。
背景技术
细胞疗法(Cell therapy)是一种利用活性细胞对组织、器官进行修复的方法。用于细胞疗法的细胞主要有干细胞、成熟的功能细胞、本体细胞、异种细胞和转分化细胞，根据细胞的来源不同，可以将细胞疗法中应用的细胞分为两种类型，一种是自体细胞，来源于患者自己身上；另一种是同种异体细胞，来源于捐献者。无论是何种来源的细胞，在应用的过程中，一般都需要经过体内提取、体外活化培养、输入体内的过程。而细胞注射是将细胞输入患者体内的一种常用的方法，但在细胞注射的过程中呈现一些缺陷；首先是细胞流失严重，将目标细胞注射到人体的过程中由于组织机械力使得细胞保留率低，最终到达损伤位置的有效细胞不足；其次移植后的细胞成活率不高，这不仅浪费细胞源，消耗的细胞量大，并且直接影响注入体内的细胞的有效作用效果。因此，为了提高细胞注射的有效注入率，寻找合适的细胞微载体或支架材料极具现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种细胞微载体基质及其应用，以提高细胞注射的有效注入率。
根据本发明的一个方面，提供一种细胞微载体基质，其原料包括甲基丙烯酰化明胶和蚝壳粉，按照质量比计算，甲基丙烯酰化明胶：蚝壳粉＝1～10:0.5～2。
优选地，原料还包括羧甲基纤维素，按照质量比计算，甲基丙烯酰化明胶：羧甲基纤维素＝1～2:0.5～1.5。
优选地，甲基丙烯酰化明胶的接枝率为30～60％。
在本发明提供的细胞微载体基质中，甲基丙烯酰化明胶含水量高，成分与细胞外基质相似，具有良好的表面活性，从而能够与细胞、活性因子很好地相容，以含有甲基丙烯酰化明胶作为有效成分的细胞微载体基质将细胞包覆在其中，可以为细胞提供一个三维的支撑作用，也可以避免细胞在注射和移植过程中受到损伤，还可以附带更多的生长因子，对其表达和释放也具有较好的促进作用。蚝在我国沿海地区，蚝是一种高产的海产贝类，因此，蚝壳作为蚝的壳体来源广泛，价廉易得。将甲基丙烯酰化明胶与蚝壳粉复配使用，能够有效地降低细胞微载体的溶胀率，使细胞微载体具有更优异的力学强度。而微细胞载体基质中引入羧甲基纤维素，可以有效提高甲基丙烯酰化明胶的保水性，通过合理地设置微细胞载体基质中各原料的配比，一方面，使微细胞载体基质兼具较高的含水量和较低的溶胀率，从而具有优异的成形力和抗形变能力，以维持细胞生长空间的稳定性，另一方面，可以使微细胞载体基质在人体内以适宜的速率降解，避免降解过慢而使包裹在其中的细胞无法及时发挥作用，也避免降解过快而不足以为细胞生长提供支持和保护。用于配制本发明提供的细胞微载体基质的原料都具有良好的生物相容性，对细胞无毒副作用，可以和细胞稳定结合，且细胞在生物体内不会诱发排斥或炎症反应。
根据本发明的另一个方面，提供一种细胞微载体，包括上述细胞微载体基质和活体细胞，活体细胞包覆于细胞微载体基质之中。
优选地，上述细胞微载体按照如下方法制备：S1.按量称取细胞微载体基质的原料所包括的物料并混合，向其中加入交联引发剂，避光加热至形成均一的凝胶溶液；S2.将含有活体细胞的细胞悬液加入至凝胶溶液中，吹打均匀，由此形成预制溶液；S3.将预制溶液加入模具中，在蓝紫光照射下，预制溶液交联固化，在模具中形成细胞微载体。
优选地，在与原料中的其他物料混合前，蚝壳粉经过核酸酶浸泡和粉碎预处理。核酸酶浸泡能够除去蚝壳粉中的免疫源性物质，提高细胞微载体基质的细胞安全性。另一方面，粉碎预处理能够提高蚝壳粉与其它物料的相容性，进而提高细胞微载体基质的均质性，使其具备良好的力学性能。
优选地，交联引发剂为苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂。
优选地，在S3中，预制溶液在波长为400～420nm的蓝光中交联固化。
优选地，在凝胶溶液中，细胞微载体基质的质量浓度为5～15％。
本发明提供的细胞微载体基质交联成形工艺简单、操作便捷，利用其按照上述方法交联成型为具有多孔结构的三维支架，具有适宜的空间结构和孔隙率，将活性细胞包覆于其中，有利于细胞的粘附、生长、增殖。
根据本发明的另一个方面，提供上述细胞微载体在细胞注射中的应用。从而有效地降低活性细胞在细胞注射中的受损率，提高活性细胞的有效作用率。
附图说明
图1展示了实施例1中处理4制备的细胞微载体基质的凝胶化状态；
图2展示了培养时间为1天时实施例1中处理4制备的细胞微载体的细胞生长情况；
图3展示了培养时间为7天时实施例1中处理4制备的细胞微载体的细胞生长情况。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例设置6组处理组，分别标记为处理1、处理2、处理3、处理4、处理5和处理6，以制备细胞微载体。在本实施例所设置的6组处理组之间，以不同的细胞微载体基质作为变量，各处理组所采用的细胞微载体基质配方如表1所示。本实施例所采用的蚝壳粉为由蚝壳经过粉碎、过筛后制得，使用前，将蚝壳粉置于核酸酶溶液中，于37℃下浸泡3小时，干燥后备用。
表1各处理组所对应的细胞微载体配方组成(质量份数)
Figure BDA0002844859280000031
Figure BDA0002844859280000041
在本实施例中，细胞微载体的制备方法如下：
1.配置0.25％(w/v)引发剂标准溶液
取20mL PBS，加入装有引发剂苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂(LAP)的棕色瓶中(含有0.05g LAP)；放在45℃水浴中溶解LAP，每隔2min震荡一次；然后用铝箔纸将引发剂包裹，备用(每次使用后放在4℃冰箱中避光保存，使用前需要预热)。
2.配置浓度10％(w/v)细胞微载体基质溶液
按照表1所列举的配方组成分别称取各配方所需原料(其中：处理1对应的配方只有一种物料，按量直接取用甲基丙烯酰化明胶即可；而处理2～6分别对应的配方含有多种物料，称取物料后分别按配方混合)。取细胞微载体基质的原料(混合物)0.1g，放入15mL离心管中，材料尽可能放在试管底部；加入1mL引发剂标准溶液(尽量在避光条件下)，溶液充分浸润材料；45℃水浴避光加热至完全溶解(期间避光，每隔两分钟摇一摇离心管)，静置材料至没有气泡，然后备用。(静置过程中尽量让材料在水浴锅中，低温会使材料变成凝胶状态)。
3.细胞微载体的制备
准备一定溶度的细胞悬液(浓度需要按需求调整)，细胞悬液的体积尽可能少(悬液体积大，会影响配制的细胞微载体基质的浓度；将细胞悬液加入到配置的细胞微载体基质溶液中吹打均匀，吹打过程中尽可能不产生气泡；然后将含有细胞的溶液加入已经准备好的模具中，用能够发射405nm蓝光的手电筒照射10s左右，细胞微载体基质溶液交联成型，形成包覆有细胞的细胞微载体，将细胞微载体转移至孔板中加入培养基(转移过程结合使用培养基，避免水凝胶变干，加入培养基的量能够浸没材料)。
测试例
以实施例1所制得的6种细胞微载体(分别由处理1、处理2、处理3、处理4、处理5、处理6提供)作为参试对象进行理化性能测试。
溶胀率测试方式：将待测的细胞微载体完全浸泡在37℃的PBS中24小时，期间每8小时更换一次PBS，将达到溶胀平衡的细胞微载体表面的水分沥干，称重，按照ESR＝(w1－w0)/w0计算平衡溶胀率ESR，其中w0为溶胀前干燥细胞微载体质量，w1为达到溶胀平衡后的细胞微载体质量。每个待测样品一式三份，溶胀率取三次测量的平均值。
压缩强度测试方式：采用质构仪进行压缩强度测试，将待测的细胞微载体置于37℃的环境中测试其压缩强度，每个待测样品一式三份，压缩强度取三次测量的平均值。
储能模量测试方式：用DHR流变仪8mm的平行板夹具，设置1％的形变，37℃下，在0.1～10Hz范围内进行振荡频率扫描测试，每个待测样品一式三份，储能模量取三次测量的平均值。
表2中展示了参试对象的细胞微载体基质的溶胀率测试结果和储能模量测试结果，蚝壳粉的采用能够有效地降低细胞微载体基质溶胀率，羧甲基纤维素的采用能够有效地提高细胞微载体基质的压缩强度，另一方面，蚝壳粉和羧甲基纤维素都能够提高细胞微载体基质的储能模量，使细胞微载体基质具有良好的力学强度。然而，若蚝壳粉的用量过高，会使得细胞微载体基质的均质性显著下降，而若羧甲基纤维素的用量过高会导致细胞微载体基质溶液的粘稠度过高，细胞相容性变差。
表2参试细胞微载体的理化性能
Figure BDA0002844859280000051
Figure BDA0002844859280000061
通过理化性质测试可知，实施例1的处理4所制备的细胞微载体具备优良的综合性能，实施例1的处理4所提供的细胞微载体基质的凝胶状态如图1所示，质地均匀透明，具有较好的强度和韧性。而图2和图3则展示了实施例1的处理4所提供的细胞微载体的细胞扩增情况，随着培养时间的延长，细胞逐渐开始在细胞微载体基质中铺展。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (9)

1.一种细胞微载体基质，其特征在于：其原料包括甲基丙烯酰化明胶和蚝壳粉，按照质量比计算，甲基丙烯酰化明胶:蚝壳粉=1～10:0.5～2；
所述原料还包括羧甲基纤维素，按照质量比计算，甲基丙烯酰化明胶:羧甲基纤维素=1～2:0.5～1.5。
2.如权利要求1所述细胞微载体基质，其特征在于：所述甲基丙烯酰化明胶的接枝率为30～60%。
3.一种细胞微载体，其特征在于，包括如权利要求1～2任一项所述细胞微载体基质和活体细胞，所述活体细胞包覆于所述细胞微载体基质之中。
4.如权利要求3所述细胞微载体，其特征在于，按照如下方法制备：
S1.按量称取所述细胞微载体基质的所述原料所包括的物料并混合，向其中加入交联引发剂，避光加热至形成均一的凝胶溶液；
S2.将含有所述活体细胞的细胞悬液加入至所述凝胶溶液中，吹打均匀，由此形成预制溶液；
S3.将所述预制溶液加入模具中，在蓝紫光照射下，所述预制溶液交联固化，在所述模具中形成所述细胞微载体。
5.如权利要求4所述细胞微载体，其特征在于：在与所述原料中的其他物料混合前，所述蚝壳粉经过核酸酶浸泡和粉碎预处理。
6.如权利要求4所述细胞微载体，其特征在于：所述交联引发剂为苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基膦酸锂。
7.如权利要求6所述细胞微载体，其特征在于：在所述S3中，所述预制溶液在波长为400～420nm的蓝光中交联固化。
8.如权利要求4所述细胞微载体，其特征在于：在所述凝胶溶液中，所述细胞微载体基质的质量浓度为5～15%。
9.如权利要求3所述细胞微载体在制备细胞注射用材料中的应用。
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CN107267495B (zh) * 2017-06-29 2021-01-19 上海同柏宸科生物技术有限公司 一种微生物载体的制备方法
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