CN112778358A - 一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法 - Google Patents
一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112778358A CN112778358A CN201911085613.9A CN201911085613A CN112778358A CN 112778358 A CN112778358 A CN 112778358A CN 201911085613 A CN201911085613 A CN 201911085613A CN 112778358 A CN112778358 A CN 112778358A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- separation
- ultrafiltration
- solution
- impurity removal
- molecular weight
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 45
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 42
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 32
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 claims abstract description 18
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 43
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 25
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 19
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 17
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 17
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 17
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 15
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 13
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 7
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 7
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 238000011033 desalting Methods 0.000 claims description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 4
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 claims description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004042 decolorization Methods 0.000 claims description 3
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 claims description 2
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 2
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 claims 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 2
- 238000005202 decontamination Methods 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 35
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 28
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 28
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- BJHIKXHVCXFQLS-PQLUHFTBSA-N keto-D-tagatose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(=O)CO BJHIKXHVCXFQLS-PQLUHFTBSA-N 0.000 description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 9
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 9
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 8
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 8
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 6
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 6
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 6
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 6
- 229940099690 malic acid Drugs 0.000 description 6
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 6
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 6
- 108091000115 phosphomannomutase Proteins 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 108010070600 Glucose-6-phosphate isomerase Proteins 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 4
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 4
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 3
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 102000005731 Glucose-6-phosphate isomerase Human genes 0.000 description 2
- 108010028688 Isoamylase Proteins 0.000 description 2
- -1 PFK Proteins 0.000 description 2
- 102000009569 Phosphoglucomutase Human genes 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 2
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 2
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 2
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 229920000137 polyphosphoric acid Polymers 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CBOJBBMQJBVCMW-BTVCFUMJSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-amino-3,4,5,6-tetrahydroxyhexanal;hydrochloride Chemical compound Cl.O=C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO CBOJBBMQJBVCMW-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 108050004944 Alpha-glucan phosphorylases Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010021582 Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 101000760602 Homo sapiens ATP-binding cassette sub-family D member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001046426 Homo sapiens cGMP-dependent protein kinase 1 Proteins 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 108010057899 Maltose phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 229910021380 Manganese Chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L Manganese chloride Chemical compound Cl[Mn]Cl GLFNIEUTAYBVOC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710130324 NAD(P)-dependent glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 108091000041 Phosphoenolpyruvate Carboxylase Proteins 0.000 description 1
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 1
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 1
- 108010042149 Polyphosphate-glucose phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 101001000154 Schistosoma mansoni Phosphoglycerate kinase Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108020000005 Sucrose phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 101710149792 Triosephosphate isomerase, chloroplastic Proteins 0.000 description 1
- 101710195516 Triosephosphate isomerase, glycosomal Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 108700040099 Xylose isomerases Proteins 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000011362 coarse particle Substances 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 101150005733 glmp gene Proteins 0.000 description 1
- 229960001911 glucosamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940116298 l- malic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000002605 large molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 235000002867 manganese chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011565 manganese chloride Substances 0.000 description 1
- 229940099607 manganese chloride Drugs 0.000 description 1
- 229940041290 mannose Drugs 0.000 description 1
- 108010045211 mannose-6-phosphate phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- NONJJLVGHLVQQM-JHXYUMNGSA-N phenethicillin Chemical compound N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C(O)=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 NONJJLVGHLVQQM-JHXYUMNGSA-N 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020000161 polyphosphate kinase Proteins 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000001223 reverse osmosis Methods 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019830 sodium polyphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
- C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
- C07F9/09—Esters of phosphoric acids
- C07F9/117—Esters of phosphoric acids with cycloaliphatic alcohols
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C51/00—Preparation of carboxylic acids or their salts, halides or anhydrides
- C07C51/42—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/025—Purification; Separation; Stabilisation; Desodorisation of organo-phosphorus compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H3/00—Compounds containing only hydrogen atoms and saccharide radicals having only carbon, hydrogen, and oxygen atoms
- C07H3/02—Monosaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
- C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
- C07H5/06—Aminosugars
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/02—Monosaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/18—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a glycosyl transferase, e.g. alpha-, beta- or gamma-cyclodextrins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/24—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of an isomerase, e.g. fructose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/44—Polycarboxylic acids
- C12P7/46—Dicarboxylic acids having four or less carbon atoms, e.g. fumaric acid, maleic acid
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
Abstract
本发明涉及一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法，该方法采用多酶体系催化制备分子量小于800D的有机物，对催化反应所得的混合溶液进行除杂处理；所述除杂处理包括：对所述混合溶液进行微滤。本发明对所述混合溶液进行微滤后，还可以进行超滤、离子交换脱盐、纳滤中的任意一步、两步或三步。对于除杂处理后的溶液，还可以进行进一步的结晶。本发明提供的方法弥补了本领域对多酶体系催化制备分子量小于800D的有机物进行分离提取的空白，成本低、污染少、产率高，在分离小分子化学品时具有显著优势。
Description
技术领域
本发明属于小分子化合物的生产领域，具体涉及通过体外多酶催化将淀粉或纤维素以及它们的衍生物转化而成的小分子化合物的分离提取方法。
背景技术
随着基因工程、蛋白质工程、系统与合成生物学的发展，人们具备了改造修饰微生物以及利用其生产特定的、用于进行常温水相催化各种反应的酶，使其具有高效生产天然或非天然产品的能力。其中的体外合成体系由于具有副反应少、中间产物明确等特点而越来越受到重视。其主要特点在于将多种纯化或部分纯化的酶甚至是细胞裂解液、辅酶以及底物放入体外的一个反应容器中，通过酶的级联催化作用生产所需的产品。体外合成体系的产物得率较高，尤其是当反应不可逆转或者产物可以原位移除时，其得率通常接近于理论值。
目前，现有技术公开了一些利用体外多酶转化体系合成化合物的转利用。例如，专利文献CN106148425A针对肌醇提出了一种全新的利用淀粉类原料或者纤维素类原料的体外多酶体系的催化制备方法，但是未提出针对该工艺需要的肌醇分离提取工艺。再例如，PCT专利62/236,226也提出了利用多酶体系在体外利用淀粉质原料生产塔格糖的途径，等等。这些专利均没有给出针对体外多酶转化体系的分离提取方案。
因此，亟待开发一种和体外多酶转化体系相适应的低成本、低污染、高产率的分离小分子化学品的新方法。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种低成本、低污染、高产率的分离小分子化学品的新方法。
具体而言，本发明提供了一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法，该方法采用多酶体系催化制备分子量小于800D的有机物，对催化反应所得的混合溶液进行除杂处理；所述除杂处理包括：对所述混合溶液进行微滤。
本发明提供的方法所针对的对象是采用多酶体系催化制备分子量小于800D的有机物，具体是指以淀粉、纤维素和/或其衍生物为原料经酶催化转化而形成的混合溶液。在实际应用时，一般是将多种纯化或部分纯化的酶甚至是细胞裂解液、辅酶以及底物放入体外的一个含有原料(或底物)反应容器中，通过酶的级联催化作用生产所需的产品。
当所述分子量小于800D的有机物选自单糖或其衍生物、双糖或其衍生物、氨基酸或其衍生物时，所述方法能够实现更好的分离提取效果。具体而言，待提取液中经酶催化转化而形成的分子量小于800D的有机化合物可以选自肌醇、塔格糖、甘露糖、苹果酸或氨基葡萄糖。
本发明采用微滤方式对多酶转化反应液进行预处理，去掉其中的大颗粒。所述微滤又称微孔过滤，是以多孔膜(微孔滤膜)为过滤介质，在压力推动下截留溶液中的大颗粒物质，而大量溶剂、小分子及少量大分子溶质都能透过膜的分离过程。微滤能截留0.1微米～1微米之间的颗粒，允许大分子有机物和无机盐等通过，但能阻挡住悬浮物、细菌、部分病毒及大尺度的胶体的透过。具体而言，本发明所述微滤可以采用中空纤维膜，优选为孔径为50nm～250nm的中空纤维膜；或采用陶瓷膜或金属膜，优选为孔径为20nm～200nm的陶瓷膜；或采用板框压滤机，优选为布孔径为200目～900目的板框压滤机。
为了更好得除去多酶催化反应液中由于原材料带入的粗颗粒以及其它由于蛋白质等有机物形成的可溶性杂质，从而降低杂质含量，并防止由于大颗粒造成后续的处理单元膜堵塞以及蛋白质变性沉淀而很快降低通量，利于后续步骤的高效分离提取，本发明优选对微滤处理后的溶液继续进行除杂处理，可以包括超滤、离子交换脱盐、纳滤中的任意一步，或者依次进行超滤、离子交换脱盐、纳滤中的任意两步，或者依次进行超滤、离子交换脱盐以及纳滤。
本发明通过大量实践发现，对于本发明针对的多酶体系催化后的反应液，由于其中有大量的酶、未彻底反应的底物以及盐类等大小、种类不同的杂质，当所述分子量小于800D的目标有机物原始浓度在10g/L～120g/L这一特定的范围内时，采用本发明提供的先进行微滤再进行所述继续除杂处理的多步除杂方法，不仅可以确保大部分杂质被有效去除，且效率极高，更重要的是，目标产物在上述特定浓度下即使经过多步骤连续处理，但损失很低，收率高。
具体而言，本发明优选对微滤后的溶液进行超滤处理。超滤是一种加压膜分离技术，以大分子与小分子分离为目的，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。超滤的操作静压差一般为0.1～0.5MPa，被分离组分的直径大约为0.01-0.1μm，这相当于光学显微镜的分辨极限，一般为分子量500-1000000的大分子和胶体粒子，这种液体的渗透压很小，可以忽略，所用膜常为非对称膜，膜孔径为10-10μm，膜表面有效截留层厚度较小(0.1-10μm)。具体而言，本发明所述超滤可以采用截留分子量为1kD～10kD的超滤膜，优选采用截留分子量为1kD、3kD、5kD或10kD的超滤膜。
本发明优选对微滤后的溶液直接进行脱盐操作，或对依次经过微滤、超滤处理后的溶液进行脱盐操作，以去掉其中的无机盐。本发明所述脱盐优选采用阳离子吸附树脂(如732树脂)、阴离子吸附树脂(如724树脂)、大孔树脂(如D717大孔树脂)中的一种或多种联用。作为一种具体实施方式，所述脱盐可以将滤液依次通过大孔树脂和阴离子交换树脂。
本发明优选对微滤后的溶液直接进行纳滤处理，或对依次经过微滤、超滤和/或脱盐处理后的溶液进行纳滤处理，以去除不包括目标化合物在内的小分子杂质。纳滤是一种介于反渗透和超滤之间的压力驱动膜分离过程，纳滤膜的孔径范围一般在几个纳米左右，允许一些无机盐和某些溶剂透过膜，多用于将相对分子质量较小的杂质物质(如无机盐)从溶剂中分离出来。本发明优选所述纳滤采用截留分子量为300D～800D的纳滤膜。
为了提高产品的品质，去除其中的色素，本发明可以将前述步骤处理后所得的溶液进行脱色。所述脱色可以直接进行，也可以先将溶液浓缩1～8倍后再脱色。所述脱色可采用脱色剂，如活性炭、离子交换树脂、大孔树脂等。脱色后去掉脱色剂，收集清液即可。
除了可以直接以液体形式销售的产品外，本发明提供的方法还包括对所述除杂处理后的溶液进行结晶，以获得目标化合物。所述结晶可以根据分离物质溶解性特点采用现有的合适方法从浓缩液中析出，同时使大部分杂质、色素等包含在母液中而被除去。具体而言，所述结晶的方法可以采用降温、调节pH值、加入晶种中的一种或多种的结合。结晶后，进行离心分离，可获得目标小分子化合物的结晶和母液。
为了提高结晶效率，提高结晶品质，可以在结晶前对溶液进行浓缩。本发明在实际生产中，浓缩可以选择单效、双效、三效等多效浓缩，多效蒸发器；根据实际生产中的能耗成本可以利用多效蒸发装置或蒸汽机械压缩装置(TVR或者MVR)来进行浓缩。多效蒸发装置在每次浓缩时产生的蒸汽可以循环利用，这比一次浓缩直接达到要求的浓缩倍数的方案要减少损耗的蒸汽量，另外节省了整个浓缩过程花费的时间；蒸汽机械压缩装置则可以更有效的利用蒸汽潜热，降低浓缩费用，在蒸汽价值较高的地区使用经济效益尤其明显。在实际操作中，本发明优选所述浓缩是指浓缩成固形物与液体比例为(0.3～0.75)：1的浓缩液，更优选为浓缩成固形物与液体比例为(0.5～0.7)：1的浓缩液，控制好浓缩后的固液比可以在后续步骤快速、高效地进行结晶。
对于结晶后的产物，可以采用本领域已知的干燥方法进行，本发明不做具体限定。
本发明提供的小分子化合物的分离提取方法填补了本领域的空白，且成本低、污染少、产率高，在分离小分子化学品时具有显著优势。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
实施例1
本实施例提供了一种利用多酶转化体系分离提取获得肌醇的方法。
待处理溶液采用如下方法获得：配制多酶催化体系，包括100mM磷酸缓冲液(pH7.2)，10mM氯化镁，糊精125g/L,IA用量为5U/ml，aGP，PGM，IPS，IMP用量均为10U/mL，经过恒温催化后，得到的反应液中肌醇含量为80g/L。
分离提取方法具体为：
(1)取多酶体系催化反应的反应液50L，其中肌醇含量80g/L，通过中空纤维膜进行过滤，中空纤维膜孔径为220nm，操作压力0.4MPa，跨膜压差0.05-0.15MPa，获得48L滤液，滤液与肌醇反应液的体积比为1∶25，滤液中肌醇含量78g/L；
(2)所得到的48L滤液再通过超滤膜进行过滤，超滤膜截留分子量为10kD，操作压0.4MPa，跨膜压力0.05MPa，得到48L超滤滤液，滤液中肌醇含量77g/L,超滤滤液与肌醇反应液的体积比为1：20；
(3)得到的肌醇超滤清液进入多效蒸发器进行初步浓缩，浓缩温度不超过75℃，最终得到浓缩液6.2L,浓缩液中的固形物和液体比例为0.6：1，然后进入结晶罐进行结晶，控制最终结晶温度15-25℃，搅拌转速10-80rpm，离心分离，得到肌醇晶体和母液。肌醇晶体干燥后获得肌醇结晶2400g，肌醇总收率60％。
用HPLC法对获得的肌醇产品进行含量检测，肌醇含量为99.5％，用灼烧法测定产品的灰分含量为0.05％。
实施例2
本实施例提供了一种利用多酶转化体系分离提取获得肌醇的方法。
待处理溶液采用如下方法获得：配制多酶催化体系，包括100mM磷酸缓冲液(pH7.2)，10mM氯化镁，糊精160g/L,IA用量为5U/ml，aGP，PGM，IPS,IMP用量均为10U/mL，经过恒温催化后，得到的反应液中肌醇含量为120g/L。
分离提取方法具体为：
(1)将多酶体系转化的转化液50L，其中肌醇含量120g/L,通过陶瓷膜进行过滤，陶瓷膜孔径为50nm，操作压力0.4MPa，跨膜压差0.05-0.15MPa，得到滤液50L，滤液中肌醇含量118g/L,截留液5L，滤液与肌醇反应液的体积比为1∶10；
(2)所得到的滤液再通过超滤膜进行过滤，超滤膜截留分子量为5kD，操作压0.4MPa，跨膜压力0.05MPa，得到超滤清液55L，肌醇含量106g/L,截留液1.8L,超滤滤液与陶瓷膜反应液的体积比为1：30；
(3)得到的肌醇超滤清液进入单效蒸发器进行初步浓缩，真空度控制在-0.092Mpa，温度70℃，得到浓缩液10L，浓缩液中固形物和液体比例约为0.58：1，然后进入结晶罐进行结晶，控制最终结晶温度15-25℃，搅拌转速10-80rpm，离心分离，得到肌醇晶体和母液。肌醇晶体分离干燥后得到成品4700g，肌醇总收率78％。
用HPLC法对获得的产品进行含量检测，肌醇含量为99.4％，用灼烧法测定产品的灰分含量为0.04％。
实施例3
本实施例提供了一种利用多酶转化体系分离提取获得塔格糖的方法。
待处理溶液采用如下方法获得：在一个含有30mM的磷酸缓冲液(pH 7.0)，5mM的二价镁离子的多酶转化体系中，加入α-葡聚糖磷酸化酶的用量为15U/mL，葡萄糖磷酸变位酶的用量为15U/mL，葡萄糖磷酸异构酶的用量为15U/mL，6-磷酸塔格糖差向异构酶的用量为15U/mL，6-磷酸塔格糖磷酸酶的用量为15U/mL，以及1U/mL的异淀粉酶，1U/mL的麦芽糖磷酸化酶，1U/mL的聚磷酸葡萄糖激酶，1U/ml的葡聚糖转移酶，10mM聚磷酸钠，150g/L的麦芽糊精，经过催化反应后，转化液中的塔格糖含量为105g/L。
分离提取方法具体为：
(1)将经多酶体系转化后得到含塔格糖105g/L的转化液20L，通过滤布孔径为800目的板框压滤机进行过滤，水洗滤渣并合并滤清液得到滤液25L,截留液2L，滤液中塔格糖含量为83g/L,截留液与塔格糖反应液的体积比为1∶10；
(2)所得到的滤液再通过超滤膜进行过滤，超滤膜截留分子量为3kD，操作压0.3MPa，跨膜压力0.05MPa，收集得到超滤清液28L，滤清液中塔格糖含量73.4g/L；
(3)将超滤清液通过填入D717大孔树脂和724树脂脱盐后的液体利用旋转蒸发仪浓缩至2.5L后降温至15℃结晶，结晶过程维持旋转蒸发仪转速20-60rpm，将晶体抽滤去掉母液后进行干燥，获得含量97％的塔格糖晶体1250g，塔格糖总收率59.5％。
实施例4
本实施例提供了一种利用多酶转化体系分离提取获得甘露糖的方法。
待处理溶液采用如下方法获得：配制多酶催化体系中，包括30mM磷酸缓冲液(pH7.0)，5mM氯化镁，5mM ATP,250mM25聚磷酸，所述蔗糖的浓度为100g/L,蔗糖磷酸化酶用量为10U/mL，葡萄糖磷酸变位酶用量为10U/mL，葡萄糖磷酸异构酶用量为10U/mL，甘露糖6-磷酸异构酶用量为10U/mL，甘露糖6-磷酸磷酸酶用量为10U/mL，葡萄糖异构酶用量为10U/mL，葡萄糖激酶用量为10U/mL，聚磷酸激酶用量为10U/mL，经过恒温催化24小时后，得到的反应液中甘露糖含量为82g/L。
分离提取方法具体为：
(1)将经多酶体系转化后得到含甘露糖80g/L的转化液20L，通过孔径50nm的中空纤维膜进行过滤，操作压力0.4MPa，跨膜压差0.05-0.15MPa，水洗截留液并合并滤清液得到滤液26L,截留液2L，滤液中甘露糖含量为61g/L,截留液与甘露糖反应液的体积比为1∶10；
(2)将所得的滤液经过1KD超滤膜和截留分子量为300的纳滤膜后，得到透过液33L，透过液甘露糖含量47.5g/L；
(3)所得透过液再通过活性炭柱后进行减压浓缩，最终获得浓缩液2.2L，浓缩液经过降温结晶，分离的晶体干燥后得到含量96.7％的甘露糖880g，甘露糖总提取收率55％。
实施例5
本实施例提供了一种利用多酶转化体系分离提取获得苹果酸的方法。
待处理溶液采用如下方法获得：配制多酶催化体系，包括200mM磷酸缓冲液(pH7.5)，10mM氯化镁，10mM ATP,5Mm NAD，1mM氯化锰，300mM碳酸氢钠，以及25mM多聚磷酸，淀粉的浓度为100g/L,aGP,PGM,PGI,PFK,ALD,TIM,GAPDH,PGK,GAPN,PGAN,ENO,PEPC,MDH的酶用量为50-70U/ml，IA,4GT,PPGK用量为4U/ml，经过转化后，最终反应液中的苹果酸含量为40g/L。
分离提取方法具体为：
将经多酶体系转化后得到含苹果酸40g/L的转化液10L，通过经过离心机离心后，将上清液再通过截留分子量为800的纳滤膜进行过滤，所得到的滤液总固形物含量40g/L，其中苹果酸含量为38.6g/L，然后经过脱色，浓缩，结晶后即可获得高含量苹果酸液体或者苹果酸干粉。
实施例6
本实施例提供了一种利用多酶转化体系分离提取获得氨基葡萄糖的方法。
待处理溶液采用如下方法获得：将含有50g/L经异淀粉酶处理的可溶性淀粉、10mM氯化镁、20mM磷酸二氢钾、1000mM氯化铵、10U/mLαGP、10U/mL PGM、15U/mL PGI、10U/mLGlmD、10U/mL GlmP以及5U/mL的4GT，进行反应，最终获得氨基葡萄糖含量为30g/L。
分离提取方法具体为：
将经多酶体系转化后得到的上述氨基葡萄糖转化液50L，通过孔径20nm陶瓷膜进行过滤，滤液再经过截留分子量1kd的纳滤膜过滤，所得滤液调PH到8.5以上，经过由724树脂和732树脂组成的混合树脂床脱盐后，进行浓缩，将浓缩液按照氨基葡萄糖和盐酸比例为4:1的量加入盐酸，再加入2倍体积乙醇后，降温结晶并经过干燥获得氨基葡萄糖。所得盐酸氨基葡萄糖含量99.5％，总收率85％。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法，其特征在于，采用多酶体系催化制备分子量小于800D的有机物，对催化反应所得的混合溶液进行除杂处理；
所述除杂处理包括：对所述混合溶液进行微滤。
2.根据权利要求1所述的分离提取方法，其特征在于，所述微滤采用孔径为50nm～250nm的中空纤维膜，或孔径为20nm～200nm的陶瓷膜，或孔径为200目～900目的板框压滤机。
3.根据权利要求1或2所述的分离提取方法，其特征在于，所述除杂处理还包括：对所述混合溶液进行微滤后，进行超滤、离子交换脱盐、纳滤中的任意一步；
或者，依次进行超滤、离子交换脱盐、纳滤中的任意两步；
或者，依次进行超滤、离子交换脱盐以及纳滤。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述超滤采用截留分子量为1kD～10kD的超滤膜。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述脱盐采用阳离子吸附树脂、阴离子吸附树脂、大孔树脂中的一种或多种联用；
优选地，所述脱盐为将滤液依次通过大孔树脂和阳离子交换树脂，或依次通过阴离子交换树脂和阳离子交换树脂。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述纳滤采用截留分子量为300D～800D的纳滤膜。
7.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于，所述除杂处理还包括脱色。
8.根据权利要求1、3或7所述的方法，其特征在于，对所述除杂处理后的溶液进行结晶，收集所述分子量小于500的有机物的晶体。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述结晶的方法采用降温、调节pH值、加入晶种中的一种或多种的结合。
10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述结晶前先进行浓缩，优选将所述除杂处理后的溶液浓缩成固形物与液体比例为(0.3～0.75)：1的浓缩液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911085613.9A CN112778358A (zh) | 2019-11-08 | 2019-11-08 | 一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201911085613.9A CN112778358A (zh) | 2019-11-08 | 2019-11-08 | 一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112778358A true CN112778358A (zh) | 2021-05-11 |
Family
ID=75748127
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201911085613.9A Pending CN112778358A (zh) | 2019-11-08 | 2019-11-08 | 一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112778358A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023279687A1 (zh) * | 2021-07-05 | 2023-01-12 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种用于甘露糖生产的固定化细胞的制备方法及其应用 |
| WO2023174422A1 (zh) * | 2022-03-18 | 2023-09-21 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 高纯度结晶d-塔格糖，包含其的组合物，以及制备方法和用途 |
Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1685054A (zh) * | 2002-09-30 | 2005-10-19 | 阿彻-丹尼尔斯-米德兰公司 | 无细胞生产葡糖胺 |
| CN101781346A (zh) * | 2010-03-10 | 2010-07-21 | 南京工业大学 | 一种从生物催化转化液中分离尿苷酸的方法 |
| CN101811953A (zh) * | 2009-02-23 | 2010-08-25 | 凯能高科技工程（上海）有限公司 | 一种从发酵液中提取分离丁二酸的方法 |
| CN103059159A (zh) * | 2013-02-01 | 2013-04-24 | 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 | 一种啤酒酵母粉中甘露聚糖的提取工艺 |
| CN105418694A (zh) * | 2016-01-14 | 2016-03-23 | 廊坊梅花生物技术开发有限公司 | 一种海藻糖的制备方法 |
| CN105925643A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-09-07 | 武汉康复得生物科技股份有限公司 | 酶法催化制备肌醇的方法及其产物 |
| CN106148425A (zh) * | 2015-04-17 | 2016-11-23 | 张以恒 | 肌醇的制备方法 |
| CN106399427A (zh) * | 2016-11-01 | 2017-02-15 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 塔格糖的制备方法 |
| CN108101744A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-06-01 | 姜均 | 肌醇的提取方法 |
| CN109055454A (zh) * | 2018-10-24 | 2018-12-21 | 张刘兵 | 一种饲料级烟酸的分离提取方法 |
| CN109554419A (zh) * | 2018-12-14 | 2019-04-02 | 南京安佰思生物科技有限公司 | 一种酶转化法制备甘油葡糖苷的方法 |
| CN109750011A (zh) * | 2019-02-20 | 2019-05-14 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种甘露糖6-磷酸磷酸酶及甘露糖生物制备方法 |
| US20190336887A1 (en) * | 2016-12-14 | 2019-11-07 | Bontac Bio-Engineering(Shenzhen) Co.,Ltd | Process for purifying nadph |
-
2019
- 2019-11-08 CN CN201911085613.9A patent/CN112778358A/zh active Pending
Patent Citations (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1685054A (zh) * | 2002-09-30 | 2005-10-19 | 阿彻-丹尼尔斯-米德兰公司 | 无细胞生产葡糖胺 |
| CN101811953A (zh) * | 2009-02-23 | 2010-08-25 | 凯能高科技工程（上海）有限公司 | 一种从发酵液中提取分离丁二酸的方法 |
| CN101781346A (zh) * | 2010-03-10 | 2010-07-21 | 南京工业大学 | 一种从生物催化转化液中分离尿苷酸的方法 |
| CN103059159A (zh) * | 2013-02-01 | 2013-04-24 | 黄河三角洲京博化工研究院有限公司 | 一种啤酒酵母粉中甘露聚糖的提取工艺 |
| CN106148425A (zh) * | 2015-04-17 | 2016-11-23 | 张以恒 | 肌醇的制备方法 |
| CN105418694A (zh) * | 2016-01-14 | 2016-03-23 | 廊坊梅花生物技术开发有限公司 | 一种海藻糖的制备方法 |
| CN105925643A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-09-07 | 武汉康复得生物科技股份有限公司 | 酶法催化制备肌醇的方法及其产物 |
| CN106399427A (zh) * | 2016-11-01 | 2017-02-15 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 塔格糖的制备方法 |
| US20190336887A1 (en) * | 2016-12-14 | 2019-11-07 | Bontac Bio-Engineering(Shenzhen) Co.,Ltd | Process for purifying nadph |
| CN108101744A (zh) * | 2017-12-14 | 2018-06-01 | 姜均 | 肌醇的提取方法 |
| CN109055454A (zh) * | 2018-10-24 | 2018-12-21 | 张刘兵 | 一种饲料级烟酸的分离提取方法 |
| CN109554419A (zh) * | 2018-12-14 | 2019-04-02 | 南京安佰思生物科技有限公司 | 一种酶转化法制备甘油葡糖苷的方法 |
| CN109750011A (zh) * | 2019-02-20 | 2019-05-14 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种甘露糖6-磷酸磷酸酶及甘露糖生物制备方法 |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2023279687A1 (zh) * | 2021-07-05 | 2023-01-12 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一种用于甘露糖生产的固定化细胞的制备方法及其应用 |
| WO2023174422A1 (zh) * | 2022-03-18 | 2023-09-21 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 高纯度结晶d-塔格糖，包含其的组合物，以及制备方法和用途 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11377462B2 (en) | Process for the purification of a neutral human milk oligosaccharide (HMO) from microbial fermentation | |
| US5017480A (en) | Process for recovering L-amino acid from fermentation liquors | |
| US8859808B2 (en) | Method for obtaining lactic acid with a high degree of purity from fermentative liquor | |
| JP2022550680A (ja) | 発酵ブロスからの中性オリゴ糖の分離 | |
| CN112778358A (zh) | 一种体外多酶体系制备的小分子化合物的分离提取方法 | |
| CN110272461B (zh) | 一种从发酵液中提纯β-胸苷的方法 | |
| JP2023507247A (ja) | 発酵ブロスからのシアリル化オリゴ糖の分離 | |
| KR100828706B1 (ko) | 결정화 공정을 이용한 5'-이노신산 발효액의 정제방법 | |
| CN114853823A (zh) | 一种提取胸腺嘧啶核苷的方法 | |
| CN111171097A (zh) | 发酵生产腺苷的分离纯化方法 | |
| JP2020500546A (ja) | アルロース転換反応物の精製方法 | |
| CN109369731B (zh) | 一种脱除木糖生产过程中葡萄糖的方法 | |
| US4997754A (en) | Process for recovering L-amino acids from fermentation liquors containing them | |
| CN111065644B (zh) | 一种制备高纯度nad的方法 | |
| WO2022090450A1 (en) | Process for the purification of an acidic human milk oligosaccharide from fermentation broth | |
| WO2000024918A1 (en) | Method for purifying a polyol product stream | |
| CN103145771A (zh) | 一种采用超滤与离子交换技术从发酵液中提取d-核糖的方法 | |
| CN116496222B (zh) | 一种从发酵液中分离纯化四氢嘧啶的方法 | |
| CZ281723B6 (cs) | Způsob izolace krystalické alfa, alfa-trehalosy | |
| JPS60137489A (ja) | 廃液の処理法 | |
| CN118290347A (zh) | 一种依克多因的精制方法 | |
| JP2024521504A (ja) | 発酵液から目的の化合物を得る方法 | |
| CN116496336A (zh) | 一种从发酵液中提取胸苷的方法 | |
| CN114105849A (zh) | 一种l-羟基脯氨酸的提取方法 | |
| CN118440126A (zh) | 一种分离纯化海藻糖的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20210511 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |