CN112763620A - 一种厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的液相色谱-质谱联用检验方法 - Google Patents

一种厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的液相色谱-质谱联用检验方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的LCMS检验方法，包括将空白溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图。本发明提供的厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的LCMS检验方法通过高效液相色谱质谱联用法施行，能够灵敏地、准确地检验厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质，参照中国药典相关内容在系统专属性、检测限与定量限、线性与范围、溶液稳定性、精密度、准确度、耐用性方面进行了验证且在上述各方面均符合要求。

Description

一种厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的液相色谱-质谱联用检 验方法
技术领域
本发明涉及药物化学领域，具体涉及一种厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的液相色谱-质谱联用(LCMS)检验方法。
背景技术
厄贝沙坦(irbesartan)化学名为：3-((2'-(1H-四氮唑-5-基)-[1,1'-联苯]-4-基)甲基)-2-丁基-1,3-二氮杂螺环[4,4]壬-1-烯-4-酮，是由赛诺菲(Sanofi)研发，最早于1997年在英国上市。该药物是一类非肽类血管紧张素II受体拮抗剂，具有良好的降血压作用。结构如式I所示：
Figure BDA0002870721480000011
现有工艺生产的厄贝沙坦原料药中不可避免地残留一种痕量的叠氮类基因毒性杂质：5-(4'-(叠氮甲基)[1,1'-联苯]-2-基)-1H-四氮唑(CAS登录号：152708-24-2)，其化学结构如下所示，并在下文中称为杂质1。
Figure BDA0002870721480000012
上述杂质1经DEREK和SARAH基因毒性预测软件测评为ICH M7指导原则中的第三类诱变性杂质，按照ICH M7指导原则计算厄贝沙坦原料药中杂质1的可接受限度＝TTC(μg/天)×1000/MDD(mg/天)＝1.5μg/天×1000/300mg/天＝5.0ppm，其中TTC表示毒理学关注阈值，MDD表示最大每日剂量。
由于厄贝沙坦原料药中杂质1的可接受限度仅为5.0ppm，因此常规的高效液相色谱(HPLC)检验方法的检测灵敏度无法达到要求，灵敏并准确地检测厄贝沙坦原料药中痕量的杂质1存在技术难度。现有技术中尚未发现能够实现检测限低于5.0ppm的有关杂质1的检验方法的报道。因此，本领域需要提供一种能够灵敏地、准确地检验厄贝沙坦杂质1的方法。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种能够灵敏地、准确地检验厄贝沙坦杂质1的方法，该方法是通过高效液相色谱质谱联用法施行的，并参照中国药典相关内容在系统专属性、检测限与定量限、线性与范围、溶液稳定性、精密度、准确度、耐用性等方面了进行验证。
本发明的厄贝沙坦杂质1的液相色谱-质谱联用检验方法主要包括以下内容：
1仪器及用具
1.1高效液相色谱质谱联用仪：Agilent1260+Agilent 6470 LC-MSMS或相当仪器；
1.2数据处理系统：MassHunter工作站；
1.3色谱柱：InfinityLab Poroshell 120 PFP，3.0×100mm，2.7μm或其他同等规格；
2试剂、对照品和供试品
2.1试剂
品名 级别 CAS号 来源
甲酸 色谱纯 64-18-6 Merck
乙腈 色谱纯 75-05-8 Merck
水 Milli-Q超纯水 N/A 自制
2.2对照品
名称 CAS号 来源
杂质1 152708-24-2 自制
2.3供试品
名称 CAS号 来源
厄贝沙坦 138402-11-6 浙江天宇药业股份有限公司
3溶液的制备
3.1流动相
流动相A(0.1％甲酸水溶液)：量取1.0ml甲酸溶于1000ml超纯水中，混匀；
流动相B：乙腈
3.2稀释液(乙腈-水(80:20，V/V))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
3.3洗针液：甲醇
3.4杂质1对照品贮备溶液：
取杂质1对照品约30mg，精密称定，置于100ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；再精密量取上述溶液5ml于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀；再精密量取1ml上述溶液于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得杂质1对照品贮备溶液，溶液中杂质1浓度约为150ng/ml，例如，148ng/ml～153ng/ml。
3.5对照品溶液：
精密量取步骤3.4制备得到的杂质1对照品贮备溶液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1浓度约为15ng/ml，例如，14.8ng/ml～15.3ng/ml。
3.6灵敏度溶液：
量取步骤3.5制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度溶液，溶液中杂质1的浓度约为1.2ng/ml，例如1.18ng/ml～1.23ng/ml。
3.7厄贝沙坦供试品溶液：
取厄贝沙坦供试品约30mg，精密称定，置10ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀；平行制备两份或更多份，溶液中厄贝沙坦的浓度约为3mg/ml，例如，2.9mg/ml～3.2mg/ml。
4色谱条件
Figure BDA0002870721480000041
5质谱条件
5.1离子源类型：AJS ESI
5.2质谱时间段设置：
Figure BDA0002870721480000051
注：根据室温(RT)可适当调整切阀时间，若灵敏度溶液中杂质1的信噪比达不到要求时可适当调节Delta EMV(+)，使其达到灵敏度要求。
5.3电喷雾电离子源(AJS ESI)设置：
Figure BDA0002870721480000052
5.4 MRM方法：
Figure BDA0002870721480000053
Figure BDA0002870721480000061
*表示定量离子，为避免干扰，也可以使用其他的母离子/子离子对来量化。
6操作步骤：
待系统稳定后，注入空白溶液(稀释液)，无干扰后再注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)，灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积相对标准偏差(RSD)不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入供试品溶液(每份溶液进一针)。序列最后追加对照品溶液1针，追加的对照品溶液与最初6针进样对照品溶液中杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
进样顺序见下表：
进样顺序 进样名称 进样次数
1 空白溶液(稀释液) 1(至少)
2 灵敏度溶液 1
3 对照品溶液 6
4 空白溶液(稀释液) 1
5 供试品溶液 每份溶液进1针
6 对照品溶液 1
7计算公式
杂质1含量(ppm)＝(Cs/CT)×(rT/rs)
式中：
Cs为对照品溶液中杂质1的浓度，ng/ml；
CT为供试品溶液的浓度，mg/ml；
rT为供试品溶液中杂质1的峰面积；
rs为对照品溶液6次进样中杂质1的平均峰面积。
根据本发明的厄贝沙坦中杂质1的LCMS检测方法，厄贝沙坦中检测杂质1的检测限是0.13ppm，定量限是0.41ppm。
根据本发明的厄贝沙坦中杂质1的LCMS检测方法，质谱采集MRM方法中，杂质1的驻留时间是180毫秒。
根据本发明的厄贝沙坦中杂质1的LCMS检测方法，所述方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证按照正式检测的色谱条件，验证项目如下：
(1)专属性
测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(2)定量限和检测限
测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、检测限测试溶液、定量限测试溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(3)线性与范围
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、线性测试溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(4)溶液稳定性
测定方法：将对照品溶液和供试品溶液在室温下放置0天-2天后，分别注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(5)精密度
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(6)准确度
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(7)耐用性
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图。
根据本发明的厄贝沙坦中杂质1的LCMS检测方法，方法验证中各验证项目的可接受标准及验证结果如下：
Figure BDA0002870721480000081
Figure BDA0002870721480000091
Figure BDA0002870721480000101
根据本发明的厄贝沙坦中杂质1的LCMS检测方法，LCMS检测方法测得厄贝沙坦中杂质1的含量小于限度，其中限度为5.0ppm。
本发明提供的厄贝沙坦杂质1的检验方法通过高效液相色谱质谱联用法(LCMS)施行，能够灵敏地、准确地检验厄贝沙坦杂质1，参照中国药典相关内容在系统专属性、检测限与定量限、线性与范围、溶液稳定性、精密度、准确度、耐用性、样品检测方面进行了验证且在上述各方面均符合要求。
附图说明
图1是实施例1专属性验证中空白溶液的LC-MSMS谱图。
图2是实施例1专属性验证中专属性溶液(专属性测试溶液3)的LC-MSMS谱图。
图3是实施例1专属性验证中对照品溶液的LC-MSMS谱图。
图4是实施例1专属性验证中供试品溶液(专属性测试溶液2)的LC-MSMS谱图。
图5是实施例2定量限与检测限验证中检测限测试溶液的LC-MSMS谱图。
图6是实施例3线性与范围验证中杂质1浓度与平均峰面积的线性关系图。
图7是实施例4精密度验证中重复性向下重复性测试液1的LC-MSMS谱图。
图8是实施例5准确度验证中准确度测试溶液1-1的LC-MSMS谱图。
图9是实施例6耐用性验证中耐用性测试溶液的LC-MSMS谱图。
图10是实施例7溶液的稳定性验证中稳定性考察溶液(对照品溶液)放置0小时的LC-MSMS谱图。
图11是实施例7溶液的稳定性验证中稳定性考察溶液(对照品溶液)放置48小时的LC-MSMS谱图。
具体实施方式
实施例1专属性验证
1.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
1.2杂质1贮备液：
取杂质1工作对照品30.55mg，置于100ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液5ml，置于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液1ml，置于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为杂质1贮备液，溶液中杂质1的浓度152.75ng/ml。
1.3对照品溶液：
精密量取本实施例步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度为15.2750ng/ml。
1.4专属性测试溶液
专属性测试溶液1：精密量取本实施例步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，加入稀释液稀释至刻度，摇匀，溶液中杂质1的浓度为15.2750ng/ml。
专属性测试溶液2：称取供试品30.70mg，置于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，溶液中厄贝沙坦的浓度为3.070mg/ml。
专属性测试溶液3：称取供试品30.57mg，置于10ml容量瓶中，加入本实施例步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，溶液中厄贝沙坦的浓度为3.057mg/ml，杂质1的浓度为15.2750ng/ml。
1.5操作步骤
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再注入对照品溶液(6针)，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入专属性测试溶液，专属性测试溶液检测完成后，序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
1.6结果报告
表1专属性系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000121
Figure BDA0002870721480000131
表2专属性测试液中杂质1的分离情况表
溶液名称 保留时间(min) MRM通道 是否存在干扰
专属性测试溶液3 5.059 276.0→192.0 否
空白溶液的LC-MSMS谱图如图1所示，专属性溶液(专属性测试溶液3)的LC-MSMS谱图如图2所示，对照品溶液的LC-MSMS谱图如图3所示，供试品溶液(专属性测试溶液2)的LC-MSMS谱图如图4所示。
由表2和图2可知，在MRM模式下定量离子通道内杂质1无杂质峰干扰，该方法的专属性符合规定。
实施例2定量限与检测限验证
2.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
2.2对照品溶液：
精密量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度为15.2750ng/ml。
2.3定量限测试溶液：
量取本实施例步骤2.2制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得定量限测试溶液，溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。
2.4检测限测试溶液：
量取本实施例步骤2.3制备得到的定量限测试溶液3.3ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得检测限测试溶液，溶液中杂质1的浓度为0.4033ng/ml。
2.5操作步骤
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再注入对照品溶液(6针)，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入检测限测试溶液、定量限测试溶液，再注入对照品溶液1次，与前6次对照品溶液中杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
2.6结果报告
表3检测限与定量限系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000141
表4杂质1定量限检测结果
Figure BDA0002870721480000142
由表4可知，杂质1的定量限为0.41ppm，不大于限度的50％(限度的50％为2.5ppm)，且杂质1的信噪比大于10，符合要求。
表5杂质1检测限检测结果
Figure BDA0002870721480000143
Figure BDA0002870721480000151
检测限测试溶液的LC-MSMS谱图如图5所示。
由表5可知，杂质1的检测限为0.13ppm，不大于限度的30％(限度的30％为1.5ppm)，且杂质1的信噪比大于3，符合要求。
实施例3线性与范围验证
3.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
3.2对照品溶液：
精密量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度为15.2750ng/ml。
3.3灵敏度溶液：
量取本实施例步骤3.2制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度溶液，溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。
3.4线性测试溶液
线性测试溶液1：量取本实施例步骤3.2制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。(定量限)
线性测试溶液2：量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液0.5ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为7.6375ng/ml。(50％限度)
线性测试溶液3：量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为12.2200ng/ml。(80％限度)
线性测试溶液4：量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1.0ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为15.2750ng/ml。(100％限度)
线性测试溶液5：量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1.2ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为18.3300ng/ml。(120％限度)
线性测试溶液6：量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液2.0ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为30.5500ng/ml。(200％限度)
线性测试溶液7：量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液3.0ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，平行移取3份。溶液中杂质1的浓度为45.8250ng/ml。(300％限度)
3.5操作步骤：
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入上述线性测试溶液。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录LC-MSMS谱图和相关数据，并绘制杂质1浓度与平均峰面积的线性关系图，计算范围、线性方程和线性系数。杂质1浓度与平均峰面积的线性关系图如图6所示。
3.6结果报告
表6线性系统适用性
Figure BDA0002870721480000161
Figure BDA0002870721480000171
表7杂质1线性测试结果
Figure BDA0002870721480000172
由图6和表7可知，杂质1的线性回归方程为y＝49.194407x-2.947873，R＝0.9998；浓度在1.2220ng/ml～45.8250ng/ml之间，杂质1的浓度与峰面积呈良好线性关系，杂质1的100％限度为15.2750ng/ml，在线性范围内。y截距为-2.947873在100％响应值的25％以内(729×25％＝182.25)，该方法的线性符合规定。
实施例4精密度验证
4.1重复性
4.1.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
4.1.2杂质1贮备液：
取杂质1工作对照品30.36mg，置于100ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液5ml，置于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液1ml，置于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为杂质1贮备液，溶液中杂质1的浓度151.8000ng/ml。
4.1.3对照品溶液：
精密量取本实施例步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度约15.1800ng/ml。
4.1.4灵敏度溶液：
量取本实施例步骤4.1.3制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度溶液，溶液中杂质1的浓度为1.2144ng/ml。
4.1.5重复性测试溶液：
称取供试品30.74mg、30.52mg、30.68mg、30.25mg、30.59mg、30.23mg，分别置10ml容量瓶中，加入本实施例步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。
4.1.6操作步骤：
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入重复性测试溶液(6份)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。计算6份重复性测试溶液中的杂质1的RSD％以考察方法重复性。记录数据和LC-MSMS谱图。
4.1.7结果报告
表8重复性系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000191
表9重复性检测结果
Figure BDA0002870721480000192
重复性测试液1的LC-MSMS谱图如图7所示。
由表9可知，重复性项下6份加标供试品杂质1检测结果RSD为2.8％，杂质1检测结果小于标准规定15％，该方法的重复性符合标准规定。
4.2中间精密度
4.2.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
4.2.2杂质1贮备液：
取杂质1工作对照品29.69mg，置于100ml容量瓶中，用稀释液溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取上述溶液5ml，置于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液1ml，置于100ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为杂质1贮备液，溶液中杂质1的浓度148.4500ng/ml。
4.2.3对照品溶液：
精密量取本实施例步骤4.2.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度14.8450ng/ml。
4.2.4灵敏度溶液：
量取本实施例步骤4.2.3制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度溶液，溶液中杂质1的浓度为1.1880ng/ml。
4.2.5中间精密度测试溶液：
称取供试品30.79mg、29.80mg、30.67mg、30.06mg、29.85mg、29.35mg，分别置10ml容量瓶中，加入本实施例步骤4.2.2制备得到的杂质1贮备液1ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。
4.2.6操作步骤：
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入中间精密度测试溶液(6份)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。计算6份中间精密度测试溶液中的杂质1的RSD％以考察方法中间精密度。记录数据和LC-MSMS谱图。
4.2.7结果报告
表10中间精密度系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000211
表11精密度检测结果比较
Figure BDA0002870721480000212
由表11可知，中间精密度项下6份加标供试品杂质1检测结果RSD为5.1％，杂质1检测结果小于标准规定15％，该方法的中间精度符合标准规定。
精密度两项验证共12份加标供试品杂质1检测结果RSD为4.0％，杂质1检测结果小于标准规定15％，该方法的精度符合标准规定。
实施例5准确度验证
5.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
5.2对照品溶液：
精密量取实施例4精密度验证中4.1重复性项下步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度15.1800ng/ml。
5.3灵敏度溶液：
量取本实施例步骤5.2制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度溶液，溶液中杂质1的浓度为1.2144ng/ml。
5.4准确度测试溶液
准确度测试溶液1：称取供试品30.69mg、30.23mg、30.55mg，分别置于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。(供试品溶液)
准确度测试溶液2：称取供试品30.61mg、30.24mg、30.26mg，分别置于10ml容量瓶中，再加入本实施例步骤5.2制备得到的对照品溶液0.8ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中加入的杂质1的浓度为1.2144ng/ml。(供试品溶液+LOQ溶液)
准确度测试溶液3：称取供试品30.37mg、30.56mg、30.31mg，分别置于10ml容量瓶中，加入实施例4精密度验证中4.1重复性项下步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中加入杂质1的浓度15.1800ng/ml。(供试品溶液+100％对照品溶液)
准确度测试溶液4：称取供试品30.21mg、30.19mg、30.35mg，分别置于10ml容量瓶中，加入实施例4精密度验证中4.1重复性项下步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液1.2ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度为18.2160ng/ml。(供试品溶液+120％对照品溶液)
5.6操作步骤：
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入各准确度测试溶液(每份溶液进一针)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
5.7结果计算
各组分的回收率采用如下公式计算：
Figure BDA0002870721480000231
测得量：指分别根据准确度测试溶液2、准确度测试溶液3、准确度测试溶液4三次进样的峰面积按程序规定的方法计算的各组分的量，按浓度计；
已有量：指根据准确度测试溶液1和对照品溶液的峰面积按程序规定的方法计算各组分的量，按浓度计；
加入量：指对照品贮备液加入到准确度测试溶液中杂质1的量，按浓度计，其中对照品贮备液是指“实施例4精密度验证中4.1重复性项下步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液”。
5.8结果报告
表12准确度系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000232
表13准确度测试溶液1准确度测试结果
Figure BDA0002870721480000241
表14准确度测试溶液2～4准确度测试结果
Figure BDA0002870721480000242
Figure BDA0002870721480000251
准确度测试溶液1-1的LC-MSMS谱图如图8所示。
由表13-14中的数据可以看出，厄贝沙坦中杂质1的回收率在80％～120％之间，且平行三次测定的结果RSD＜10％，回收率符合规定。
实施例6耐用性验证
6.1正常条件、流速±0.04ml/min、柱温+5℃和有机相比例±2％条件溶液配制
6.1.1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
6.1.2对照品溶液：
精密量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液，溶液中杂质1的浓度约15.2750ng/ml。
6.1.3灵敏度溶液：
量取本实施例步骤6.1.2制备得到的对照品溶液0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，即得灵敏度溶液，溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。
6.1.4耐用性测试溶液：
称取供试品29.82mg，置10ml容量瓶中，加入实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀，作为耐用性测试溶液。
6.2操作步骤：
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入上述耐用性测试溶液(各改变条件下进一针)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。并计算加标供试品中杂质1的结果及其相对标准偏差RSD。记录数据和LC-MSMS谱图。
6.3结果报告
表15耐用性测试系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000261
表16耐用性检测结果(流速±0.04ml/min)
Figure BDA0002870721480000262
Figure BDA0002870721480000271
由表16可知，改变流速+0.04ml/min和改变流速-0.04ml/min，杂质1检测结果与正常条件比较的平均偏差均不大于限度的10％(限度的10％为0.5ppm)，该条件下的方法耐用性符合标准规定。
表17耐用性检测结果(柱温+5℃)
Figure BDA0002870721480000272
由表17可知，改变柱温+5℃(25℃)，杂质1检测结果与正常条件比较的平均偏差均不大于限度的10％(限度的10％为0.5ppm)，该条件下的方法耐用性符合标准规定。
表18耐用性检测结果(有机相比例±2％)
Figure BDA0002870721480000273
由表18可知，改变流动相比例有机相+2％和有机相-2％，杂质1检测结果与正常条件比较的平均偏差均不大于限度的10％(限度的10％为0.5ppm)，该条件下的方法耐用性符合标准规定。
在流速+0.04ml/min，柱温+5℃，有机相比例+2％条件下耐用性测试溶液的LC-MSMS谱图如图9所示。
实施例7溶液的稳定性验证
1稳定性考察溶液(对照品溶液)
1.1稳定性考察溶液(对照品溶液)
精密量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。玻璃瓶中密封，存放于常温、自然光照条件下贮放待用。溶液中杂质1的浓度为15.2750ng/ml。
1.2对照品溶液稳定性考察(第0小时)
稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
对照品溶液：实施例1专属性验证中步骤1.3制备得到的对照品溶液。
灵敏度溶液：量取本实施例步骤1.1制备得到的稳定性考察溶液(对照品溶液)0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。
稳定性考察溶液(对照品溶液)：本实施例步骤1.1制备得到的稳定性考察溶液(对照品溶液)。
1.3对照品溶液稳定性考察(第27小时)
对照品溶液：实施例4精密度验证中步骤4.1重复性项下的步骤4.1.3制备得到的对照品溶液。
灵敏度溶液：实施例4精密度验证中步骤4.1重复性项下的步骤4.1.4制备得到的灵敏度溶液。
稳定性考察溶液(对照品溶液)：本实施例步骤1.1制备得到的稳定性考察溶液(对照品溶液)。
1.4对照品溶液稳定性考察(第48小时)
对照品溶液：实施例4精密度验证中步骤4.2中间精密度项下的步骤4.2.3制备得到的对照品溶液。
灵敏度溶液：实施例4精密度验证中步骤4.2中间精密度项下的步骤4.2.4制备得到的灵敏度溶液。
稳定性考察溶液(对照品溶液)：本实施例步骤1.1制备得到的稳定性考察溶液(对照品溶液)。
1.5稳定性考察溶液贮存条件和检测频率
Figure BDA0002870721480000291
1.6操作步骤：
在第0小时、第27小时和第48小时分别以本实施例步骤1.2、1.3和1.4中的各溶液进行以下操作。
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入稳定性考察溶液(灵敏度溶液A)和稳定性考察溶液(对照品溶液)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
灵敏度溶液A是指实施例4精密度验证中4.1重复性项下步骤4.1.4制备得到的灵敏度溶液。
1.7结果报告
表19稳定性考察溶液(对照品溶液)系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000292
Figure BDA0002870721480000301
表20稳定性考察溶液(对照品溶液)检测结果
Figure BDA0002870721480000302
图10是稳定性考察溶液(对照品溶液)放置0小时的LC-MSMS谱图，图11是为稳定性考察溶液(对照品溶液)放置48小时的LC-MSMS谱图。
由表20可知，对照品溶液在常温、自然光照条件下放置，分别于0h、27h、48h取样测定，时间段27h和48h的检测结果与0小时检测结果基本一致，平均偏差均在限度的10％以内(限度10％为1.5ng/ml)，故对照品溶液在常温、自然光照条件下48小时内稳定。
2稳定性考察溶液(供试品溶液)
2.1稳定性考察溶液(供试品溶液)
称取供试品29.51mg，置于10ml容量瓶中，加入实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于其中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。
2.2供试品溶液稳定性考察(第0小时)
对照品溶液：精密量取实施例1专属性验证中步骤1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度约15.2750ng/ml。
灵敏度溶液：量取0.8ml上述对照品溶液于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。
稳定性考察溶液(供试品溶液)：本实施例步骤2.1制备得到的稳定性考察溶液(供试品溶液)。
2.3供试品溶液稳定性考察(第3小时)
对照品溶液：精密量取1ml实施例1专属性验证中步骤1.3制备得到的对照品溶液。
灵敏度溶液：量取0.8ml上述对照品溶液于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度为1.2220ng/ml。
稳定性考察溶液(供试品溶液)：本实施例步骤2.1制备得到的稳定性考察溶液(供试品溶液)。
2.4供试品溶液稳定性考察(第27小时)
对照品溶液：实施例4精密度验证中重复性项下步骤4.1.3制备得到的对照品溶液。
灵敏度溶液：实施例4精密度验证中重复性项下步骤4.1.4制备得到的灵敏度溶液。
稳定性考察溶液(供试品溶液)：本实施例步骤2.1制备得到的稳定性考察溶液(供试品溶液)。
2.5供试品溶液稳定性考察(第48小时)
对照品溶液：实施例4精密度验证中中间精密度项下步骤4.2.3制备得到的对照品溶液。
灵敏度溶液：实施例4精密度验证中中间精密度项下步骤4.2.4制备得到的灵敏度溶液。
稳定性考察溶液(供试品溶液)：本实施例步骤2.1制备得到的稳定性考察溶液(供试品溶液)。
2.6稳定性考察溶液贮存条件和检测频率
Figure BDA0002870721480000321
2.7操作步骤：
在第0小时、第3小时、第27小时和第48小时分别以本实施例步骤2.2、2.3、2.4和2.5中的各溶液进行以下操作。
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入稳定性考察溶液(供试品溶液)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
2.8结果报告
表21稳定性考察溶液(供试品溶液)系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000322
Figure BDA0002870721480000331
表22稳定性考察溶液(供试品溶液)检测结果
Figure BDA0002870721480000332
由表22可知，供试品溶液在常温、自然光照条件下放置，分别于0h、3h、27h、48h取样测定，各个时间段的检测结果与0小时检测结果基本一致，平均偏差均在限度的10％以内(限度10％为0.5ppm)，检测结果无明显变化趋势，无新杂质生成。故供试品溶液在常温、自然光照下条件下48小时内稳定。
实施例8样品检测
1稀释液(乙腈-水(80:20))：量取200ml超纯水于800ml乙腈中，混匀；
2对照品溶液：
精密量取实施例4精密度验证中4.1重复性项下步骤4.1.2制备得到的杂质1贮备液1ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度15.1800ng/ml。
3灵敏度溶液：
量取本实施例步骤2制备得到的“对照品溶液”0.8ml于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中杂质1的浓度为1.2144ng/ml。
4供试品溶液：
取厄贝沙坦供试品29.07mg，30.18mg，29.44mg，30.90mg，30.33mg，31.81mg，置于10ml容量瓶中，用稀释液稀释至刻度，摇匀。溶液中厄贝沙坦的浓度分别为2.907mg/ml、3.018mg/ml、2.944mg/ml、3.090mg/ml、3.033mg/ml、3.181mg/ml。
5操作步骤
待系统稳定后进行系统考察，注入空白溶液(稀释液)，确保无干扰后，再分别注入灵敏度溶液(1针)和对照品溶液(6针)。灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中6次重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
系统适用性符合要求后注入空白溶液(稀释液)，空白溶液无干扰后再注入供试品溶液(每份溶液进一针)。序列最后追加对照品溶液1针。追加的对照品溶液与最初6针进样杂质1峰面积RSD应不大于15％。记录数据和LC-MSMS谱图。
6结果报告
表23样品检测杂质1系统适用性结果
Figure BDA0002870721480000341
表24供试品杂质1检测结果
Figure BDA0002870721480000342
Figure BDA0002870721480000351
由表24可知，厄贝沙坦批号为第一批、第二批、第三批中杂质1的检测结果分别为4.9ppm、3.6ppm、4.8ppm(杂质1限度为5.0ppm)，该方法的样品检测符合规定。
以上公开内容仅是本发明的优选实施方式，从技术层面讲，对于在本发明构思框架的基础上，对所述的检测方法的若干优化和改进也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种厄贝沙坦中杂质1的液相色谱-质谱联用检测方法，其中杂质1的结构式如下：
Figure FDA0002870721470000011
所述方法包括：
1)色谱条件
Figure FDA0002870721470000012
2)质谱条件
离子源类型：电喷雾电离
质谱时间段设置：
Figure FDA0002870721470000021
MRM方法：
Figure FDA0002870721470000022
3)溶液配制
流动相
流动相A：0.1％甲酸水溶液，
流动相B：乙腈，
稀释液：乙腈-水，乙腈与水的体积比为80:20，
洗针液：甲醇，
空白溶液：稀释液
杂质1对照品贮备溶液：采用杂质1对照品和稀释液配制杂质1对照品贮备溶液，杂质1对照品贮备溶液中杂质1浓度为148ng/ml～153ng/ml，
对照品溶液：采用杂质1对照品贮备溶液和稀释液配制对照品溶液，对照品溶液中杂质1浓度为14.8ng/ml～15.3ng/ml，
灵敏度溶液：采用对照品溶液和稀释液配制灵敏度溶液，灵敏度溶液中杂质1的浓度为1.18ng/ml～1.23ng/ml，
供试品溶液：采用厄贝沙坦供试品和稀释液配制供试品溶液，供试品溶液中厄贝沙坦的浓度为2.9mg/ml～3.2mg/ml，
4)测定方法
分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录LC-MSMS谱图；
计算公式
杂质1含量(ppm)＝(Cs/CT)×(rT/rs)
式中：
Cs为对照品溶液中杂质1的浓度，ng/ml；
CT为供试品溶液的浓度，mg/ml；
rT为供试品溶液中杂质1的峰面积；
rs为对照品溶液6次进样中杂质1的平均峰面积。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述测定方法为：
1)待系统稳定后，注入空白溶液，无干扰后再注入灵敏度溶液和对照品溶液，灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％，记录数据和LC-MSMS谱图；
2)系统适用性符合要求后注入空白溶液，空白溶液无干扰后再注入供试品溶液，序列最后追加对照品溶液，追加的对照品溶液与步骤1)进样对照品溶液中杂质1峰面积RSD不大于15％，记录数据和LC-MSMS谱图。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，厄贝沙坦中检测杂质1的检测限是0.13ppm，定量限是0.41ppm。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，质谱采集MRM方法中，杂质1的驻留时间是180毫秒。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证按照正式检测的色谱条件，验证项目如下：
(1)专属性
测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(2)定量限和检测限
测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、检测限测试溶液、定量限测试溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(3)线性与范围
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、线性测试溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(4)溶液稳定性
测定方法：将对照品溶液和供试品溶液在室温下放置0天-2天后，分别注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(5)精密度
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(6)准确度
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；
(7)耐用性
测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，方法验证中各验证项目的可接受标准及验证结果如下：
(1)专属性
可接受标准：在杂质1离子通道内无干扰峰，
验证结果：在MRM模式下定量离子通道内杂质1无杂质峰干扰，专属性符合规定；
(2)定量限与检测限
定量限：
可接受标准：杂质1信噪比不得小于10，且定量限不得过限度的50％，
验证结果：杂质1的定量限为：0.41ppm，不大于限度的50％，其中限度的50％为2.5ppm，杂质1的信噪比大于10，方法定量限符合规定；
检测限：
可接受标准：杂质1信噪比不得小于3，且检测限不得过限度的30％，
验证结果：杂质1的检测限为：0.13ppm，不大于限度的30％，限度的30％为1.5ppm，杂质1的信噪比大于3，方法检测限符合规定；
(3)线性与范围
可接受标准：相关系数R≥0.990，y轴截距应在100％响应值的25％以内，
验证结果：杂质1线性关系方程：y＝49.194407x-2.947873，相关系数：R＝0.9998；y轴截距：-2.947873在100％响应值的25％以内；在LOQ～300％浓度范围内杂质1的浓度与峰面积呈良好线性关系；
(4)溶液稳定性
供试品溶液：
可接受标准：不同时间段加标供试品溶液中杂质1检测结果与0小时加标供试品溶液中杂质1检测结果的平均偏差均不大于限度的10％，且无明显变化趋势，无新杂质生成，则加标供试品溶液在规定时间内稳定，
验证结果：供试品溶液在常温、自然光照条件下放置，分别于0h、3h、27h、48h取样测定，各个时间段的检测结果与0小时检测结果基本一致，平均偏差均在限度的10％以内，其中限度10％为0.5ppm，检测结果无明显变化趋势，无新杂质生成，故供试品溶液在常温、自然光照下条件下48小时内稳定，
对照品溶液：
可接受标准：不同时间段对照品溶液中杂质1检测结果与0小时对照品溶液中杂质1检测结果的平均偏差均不大于限度的10％，则对照品溶液在规定时间内稳定，
验证结果：对照品溶液在常温、自然光照条件下放置，分别于0h、27h、48h取样测定，时间段27h和48h的检测结果与0小时检测结果基本一致，平均偏差均在限度的10％以内，其中限度10％为1.5ng/ml，故对照品溶液在常温、自然光照条件下48小时内稳定；
(5)精密度
重复性：
可接受标准：加标供试品中杂质1的测得量RSD均不得过15％，
验证结果：加标供试品溶液的杂质1检测结果RSD为2.8％，检测结果的RSD小于标准规定15％，该方法的重复性符合标准规定，
中间精密度：
可接受标准：加标供试品中杂质1的测得量RSD均不得过15％，
验证结果：加标供试品溶液的杂质1检测结果RSD为5.1％，检测结果的RSD小于标准规定15％，该方法的中间精密度符合标准规定，
精密度：
可接受标准：重复性和中间精密度两项验证加标供试品中杂质1的测得量RSD均不得过15％，
验证结果：加标供试品溶液的杂质1检测结果RSD为4.0％，检测结果的RSD小于标准规定15％，该方法的精密度符合标准规定；
(6)准确度
可接受标准：厄贝沙坦供试品按理论值的LOQ、100％、120％进行加标，杂质1的回收率均在80％～120％范围内，且平行测定的RSD均不大于10％，
验证结果：
供试品+LOQ准确度：回收率均在80％～120％范围内，且平行测定的RSD不大于10％，回收率符合规定，
供试品+100％准确度：回收率均在80％～120％范围内，且平行测定的RSD不大于10％，回收率符合规定，
供试品+120％准确度：回收率均在80％～120％范围内，且平行测定的RSD不大于10％，回收率符合规定；
(7)耐用性
可接受标准：各条件下系统适用性溶液均符合要求；且加标供试品中的杂质1在改变条件的检测结果与正常条件的检测结果的平均偏差均不大于限度的10％，
验证结果：改变流速+0.04ml/min(0.44ml/min)、改变流速-0.04ml/min(0.36ml/min)、改变柱温+5℃(25℃)，改变流动相比例有机相+2％和有机相-2％，杂质1检测结果与正常条件比较的平均偏差均不大于限度的10％，其中限度的10％为0.5ppm，该条件下的方法耐用性符合标准规定。
7.根据权利要求1-6所述的方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱联用检测方法测得厄贝沙坦中杂质1的含量小于限度，其中限度为5.0ppm。
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