CN112725214B - 沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂及其应用 - Google Patents

沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂及其应用,本发明提供的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂中产碱杆菌(Alcaligenes sp.)322F3的保藏编号为CCTCC NO:M2020477,环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)322X3的保藏编号为CCTCC NO:M2020475,蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322‑N1的保藏编号为CCTCC NO:M2020476。本发明提供了一种沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂,该复合微生物菌剂用于沼渣堆肥时可以不必对沼渣进行脱水干燥处理,有效节省了能源,并提升了沼渣堆肥的效率;沼渣堆肥过程中接入本发明的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂后可以大幅加速堆肥中有机质的降解,提高沼渣堆肥的腐熟程度,缩短堆肥时间,增加了成熟堆肥的营养成分。

Description

沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,具体涉及一种沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂及其应用。
背景技术
随着农业和养殖业的规模化发展,伴随而来的废弃物和排泄物的污染问题也日益严重。厌氧消化是一种高效处理农业废弃物的方式,应用非常广泛,但会产生一种新的废弃物——沼渣,沼渣主要由难降解的纤维质和大量微生物组成。常规的沼渣处理方法主要是将沼渣经过脱水烘干制作成有机肥料,然而这种处理方法能源消耗大,不适合大规模的沼渣处理。根据国际公认的废弃物“无害化、减量化、资源化”综合治理方案,好氧堆肥是多种微生物在有氧条件下协同将废弃物中的有机质转化成腐殖质并释放能量的过程,是能够真正实现无害、高效、零排放的废弃物处理方式,这对于促进农业废弃物在农业生产中的良性循环具有积极的意义。然而沼渣的含水率过高,易降解的有机成分含量过低,因此不能不能使用单一沼渣作为堆肥物料,通常需要加入植物秸秆作为支撑物,并辅以一定量的畜禽粪便调节碳氮比来进行堆肥。
由于堆肥材料的异质性,对于沼渣中的难降解物质以及稻草中的纤维质来说,仅仅依靠堆肥中土著微生物来降解的效果不太理想,因此,现有的堆肥技术通常会添加一些外源微生物,这类外源微生物通常是能够加速堆肥中有机质的分解速度的纤维素降解微生物,可以缩短堆肥时间。然而目前的堆肥菌剂大都着重处理禽畜粪便和作物秸秆,对沼渣堆肥菌剂的研究较为匮乏,因此,将从其他环境中分离的微生物菌剂应用于沼渣堆肥可能很难得到理想的结果。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于沼渣堆肥处理的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂,该复合微生物菌剂为从沼渣自然堆肥分离得到,能够高效促进沼渣堆肥腐熟,对沼渣堆肥具有明显的促进作用,并且具有良好的保氮效果。
为了实现上述目的,本发明采用了如下技术方案:
本发明第一方面提供一种沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂,其活性成分包括产碱杆菌(Alcaligenes sp.)322F3、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322-N1和环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)322X3。
本发明的产碱杆菌(Alcaligenes sp.)322F3、环状芽孢杆菌(Bacilluscirculans)322X3和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322-N1已于2020年9月9日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC,保藏地址为:湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山)。其中,产碱杆菌(Alcaligenes sp.)322F3的保藏编号为CCTCC NO:M2020477,分类命名为Alcaligenes sp.322F3,经检测存活;
环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)322X3的保藏编号为CCTCC NO:M2020475,分类命名为Bacillus circulans 322X3,经检测存活;
蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322-N1的保藏编号为CCTCC NO:M2020476,分类命名为Bacillus cereus 322-N1,经检测存活。
本发明的所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3和蜡状芽孢杆菌322-N1的有效活菌数的比例为3:1:1。
本发明的所述沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂中产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3和蜡状芽孢杆菌322-N1总活性大于或等于1×1010cfu/g。
本发明的第二方面是提供上述的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂的在沼渣好氧堆肥领域中的应用。
本发明的第三方面提供了一种沼渣好氧堆肥方法,包括以下步骤:
S1、活化本所述沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂;
S2、将活化好的菌种在堆肥起始阶段接种至沼渣、稻草和猪粪组成的混合物料中;
S3、将接菌后的混合物料堆放至腐熟。
在一些优选的实施方式中,S1中,用于活化所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3的培养基包括:NaCl 5g、蛋白胨5g、酵母膏5g、CaCO35 g、水稻秸秆5g,用1mol/L氢氧化钠将pH调至7.6;用于活化所述蜡状芽孢杆菌322-N1的培养基包括:NaCl 10g,胰蛋白胨10g,酵母提取物5g;活化时,所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3及蜡状芽孢杆菌322-N1均按照10%(v/v)比例接种至培养基内,在35℃摇床内180r/min震荡培养24h。
在一些优选的实施方式中,所述沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂与所述混合物料的质量比为5-10:1000;所述混合物料中沼渣、稻草和猪粪的重量比为1:1.5:1;所述稻草为长度为1-2cm的小段。
在一些优选的实施方式中,堆肥时,混合物料的初始含水率为55-60%,初始pH为7.2-7.6,每吨有机质的通风量为28.8-36m3/h,堆肥时间为25-30d。
本发明的第四方面提供了由上述的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂或上述的沼渣好氧堆肥方法制备得到的堆制肥料。
本发明的有益效果体现在:
1、本发明提供了一种沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂,该沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂对沼渣堆肥时可以不需要对沼渣进行脱水干燥处理,解决了传统方法中在堆肥过程中加入水稻秸秆作为支撑物以调节沼渣含水率以及加入猪粪调节堆肥碳氮比的问题,有效节省了能源,并提升了沼渣堆肥的效率;
2、沼渣堆肥过程中接入本发明的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂后可以大幅加速堆肥中有机质的降解,提高沼渣堆肥的腐熟程度,缩短堆肥时间,增加了成熟堆肥的营养成分。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。在所有附图中,类似的元件或部分一般由类似的附图标记标识。附图中,各元件或部分并不一定按照实际的比例绘制。
图1为本发明与对照组堆肥过程温度变化示意图;
图2为本发明与对照组堆肥过程电导率变化示意图;
图3为本发明与对照组堆肥过程pH值变化示意图;
图4为本发明与对照组堆肥过程有机质变化示意图;
图5为本发明与对照组堆肥过程总氮变化示意图;
图6为本发明与对照组堆肥过程C/N变化示意图;
图7为本发明与对照组堆肥过程种子发芽指数变化示意图;
图8为本发明与对照组堆肥过程中样品扫描电镜图;
图9为产碱杆菌322F3(左)、蜡状芽孢杆菌322-N1(中间)和环状芽孢杆菌322X3(右)的菌落图。
具体实施方式
下面将结合附图对本发明技术方案的实施例进行详细的描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案,因此只作为示例,而不能以此来限制本发明的保护范围。
需要注意的是,除非另有说明,本申请使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域技术人员所理解的通常意义。
实施例1
菌株分离、筛选和鉴定:
1、菌株分离和筛选:将沼渣、稻草和猪粪按照1:1.5:1的质量比构建的自然堆肥,从堆肥的升温期采集样品,取10g样品加入装有90ml富集培养基的锥形瓶中,在180rpm、35℃条件下震荡培养7d,取10ml培养液加入装有90ml富集培养基的锥形瓶中,在同样的条件下培养7d,如此反复富集3次后,取200μL培养液用无菌水稀释至10-4-10-7后,涂布在分离培养基上,最后经划线分离纯化得到两株纤维素降解菌和一株固氮菌。以下为分离和富集菌株的培养基的配方组成:
①产碱杆菌322F3和环状芽孢杆菌322X3的富集培养基:胰蛋白胨5g,酵母膏1g,NaCl 5g,CaCO3 2g,滤纸5g,秸秆5g,去离子水1L;
②产碱杆菌322F3和环状芽孢杆菌322X3的分离培养基:CMC-Na 5.0g,(NH4)2SO42.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4·7H2O 0.5g,NaCl 0.5g,NaNO3 1.0g,蛋白胨0.5g,酵母粉0.5g,刚果红0.2g,琼脂20.0g;
③蜡状芽孢杆菌322-N1的分离培养基:葡萄糖10g,KH2PO4 0.2g,NaCl 0.2g,CaSO40.1g,CaCO3 5g,蒸馏水1L,琼脂15g,pH 7.0。
2、菌株鉴定:
利用细菌基因提取试剂盒提取菌株的基因组DNA后,采用细菌通用引物FA-27F:5'-AGTCTCTGATCATGCCTCAG-3'和RA-1492R:5'-AAGGAGGTGCTCCAGCC-3'扩增16S rDNA,扩增出的16S序列交由上海生工生物有限公司进行测序。
最终鉴定结果表明两株纤维素降解菌为产碱杆菌和蜡状芽孢杆菌,固氮菌株为蜡状芽孢杆菌。
产碱杆菌322F3的16S rRNA基因序列含有1429bp,16S rRNA基因序列在GenBank登录号为MT872024,在GenBank数据库中通过Blast方法比对,采用MEGA4软件用邻接(Neighbor-Joining)法构建322F3与相关模式菌株的系统发育树,该菌株322F3与邻近菌株的系统发育学关系,该菌株322F3与Alcaligenes faecalis MY5聚类在一个系统发育分支,序列同源性为95.70%,可确定该菌株菌属为产碱杆菌属Alcaligenes sp.,命名为产碱杆菌Alcaligenes sp.322F3。产碱杆菌Alcaligenes sp.322F3的微生物16S rRNA基因序列如序列表所示。
环状芽孢杆菌322X3的16S rRNA基因序列含有1380bp,16S rRNA基因序列在GenBank登录号为MT872065,在GenBank数据库中通过Blast方法比对,采用MEGA4软件用邻接(Neighbor-Joining)法构建322X3与相关模式菌株的系统发育树,该菌株322X3与邻近菌株的系统发育学关系表明,该菌株322X3与Bacillus cereus MCDA10-2聚类在一个系统发育分支,序列同源性为100%,可确定该菌株菌属为环状芽孢杆菌Bacillus circulans,命名为环状芽孢杆菌Bacillus circulans 322X3。环状芽孢杆菌Bacillus circulans 322X3的16S rRNA基因序列如序列表所示。
蜡状芽孢杆菌322-N1的16S rRNA基因序列含有1409bp,16S rRNA基因序列在GenBank登录号为MT974026,在GenBank数据库中通过Blast方法比对,采用MEGA4软件用邻接(Neighbor-Joining)法构建322-N1与相关模式菌株的系统发育树,该菌株322-N1与邻近菌株的系统发育学关系表明,该菌株322-N1与Bacillus cereus F45聚类在一个系统发育分支,序列同源性为97.92%,可确定该菌株菌属为蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus,命名为蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus 322-N1。蜡状芽孢杆菌Bacillus cereus 322-N1的16SrRNA基因序列如序列表所示。
3、菌株保藏:
本发明实施例1的三种菌株均保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:武汉大学保藏中心。
产碱杆菌322F3的保藏编号为CCTCC NO:M2020477;环状芽孢杆菌322X3的保藏编号为CCTCC NO:M2020475;蜡状芽孢杆菌322-N1的保藏编号为CCTCC NO:M2020476。
实施例2
将实施例1筛选得到的三种菌株用于沼渣好氧堆肥,包括以下步骤:
1、活化沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂:产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3和蜡状芽孢杆菌322-N1;
①产碱杆菌322F3和环状芽孢杆菌322X3的活化培养基:NaCl 5g、蛋白胨5g、酵母膏5g、CaCO3 5g、水稻秸秆5g,用1mol/L氢氧化钠将pH调至7.6。
②蜡状芽孢杆菌322-N1的活化培养基:NaCl 10g,胰蛋白胨10g,酵母提取物5g。
活化时,所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3及蜡状芽孢杆菌322-N1均按照10%(v/v)比例接种至培养基内,在35℃摇床内180r/min震荡培养24h。
3、将活化好的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂在堆肥起始阶段接种至沼渣、稻草和猪粪组成的混合物料中;
其中,产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3和蜡状芽孢杆菌322-N1菌种有效活菌数的比例为3:1:1;沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂中有效活菌数(cfu)≥1×1010
堆肥物料由沼渣:稻草:猪粪按照1:1.5:1的重量比组成,堆肥用稻草先裁剪至1-2cm小段,猪粪和沼渣不做其他处理。
3、将接菌后的混合物料堆放至腐熟
堆肥时,混合物料的初始含水率为60%,初始pH为7.2-7.6,每吨有机质的通风量为28.8-36m3/h,堆肥时间为25-30d。
堆肥期间每两天取样一次,取样时,先将堆肥翻堆混匀,然后采用五点取样法各取50g样品,混匀备用,取5g样品加入50ml去离子水,静置24h,然后过滤离心,取上清液测定pH、电导率(EC)和种子发芽指数(GI)。
含水率的测定采用烘干法,取一定量的样品在105℃烘箱烘干4h,损失重量即为水分含量,烘干样品用以测定全氮、有机质等参数。每天测定堆肥内部温度。
所得结果如图1至图9所示。从堆肥的结果来看,未接种菌剂的对照组堆肥温度难以上升,最高温度不超过55℃,接种本发明提供的菌剂后,大幅提高了堆肥中有机质的降解速率,使堆肥在第三天达到高温期,并在55℃以上为温度维持了5天,这一温度能有效杀灭堆肥中的病原微生物,为成品堆肥的质量提供保障。此外,对照组中的EC持续上升,过高的EC值(>4mS/cm)会提高土壤中的渗透压,导致种子难以生根发芽,使其GI值降低,而在实验组中,EC值始终维持在可接受的范围,堆肥结束后,实验组中的GI值达到100%以上,而对照组中这一值仅为50%。另外,由于硝化细菌的引入,降低了堆肥中9.2%的氮损失,提高了堆肥的质量。上述结果表明,在沼渣堆肥中添加本发明提供的复合微生物菌剂,能有效促进堆肥中有机质的降解,提高堆肥的腐熟度,并可以降低堆肥中的氮损失,提高堆肥肥效。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围,其均应涵盖在本发明的权利要求和说明书的范围当中。
SEQUENCE LISTING
<110> 江西农业大学
<120> 沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂及其应用
<130> 0
<160> 3
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 1429
<212> DNA
<213> 产碱杆菌(Alcaligenes Castellani&Chalmers)322F3的16S rRNA基因序列
<400> 1
ggagctttcc atgcagtcga acggcagcac gagatagctt gctctcttgg tggccagtgg 60
cggacgggtg agtactatat cggaccgtgc ccggtagatg gggataccta ctcgaaagaa 120
tgactaatac cgcctacccc ctacggggga agggggggga tcgcacgacc tctcgctatt 180
ggagcggccg atatcggatt atgtagttgg tggggtaaag gctcgccgcg gcaacgatcc 240
gtagctggtt tgagaggacg accacccaca ctgggactga gacacggccc ctactcctac 300
gggaggcggc agtggggaat tttggacaat ggggcagacc ctgatccccc catcccgcgt 360
ggatgatgaa ggccttcggg ttgtatttta cttttggcaa aaaagaaaag gtatccccta 420
atacgggata ctgctgacgg tatctgcaga atargcaccg gmtaactacg tgccagcagc 480
cgcgstaata cgtasggtgc aagcgttaat crsarttact gggcgtarrg cgtgygtagg 540
cggttcggaa agaaagatgt gaaatcccar ggctcaacct tgsawctgca tttttaactg 600
ccgagctaga gtatgtcaga gggaggtaga attccacgtg tarcagtgaa atgcgtagat 660
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<213> 蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322X3的16S rRNA基因序列
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tgaaactcaa aggaattgac gggggcccgc acaagcggtg gagcatgtgg tttaattcga 900
agcaacgcga agaaccttac caggtcttga catcctctga aaaccctaga gatagggctt 960
ctccttcggg agcagagtga caggtggtgc atggttgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg 1020
ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc ttgatcttag ttgccatcat taagttgggc 1080
actctaaggt gactgccggt gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc aaatcatcat 1140
gccccttatg acctgggcta cacacgtgct acaatggacg gtacaaagag ctgcaagacc 1200
gcgaggtgga gctaatctca taaaaccgtt ctcagttcgg attgtaggct gcaactcgcc 1260
tacatgaagc tggaatcgct agtaatcgcg gatcagcatg ccgcggtgaa tacgttcccg 1320
ggccttgtac acaccgcccg tcacaccacg agagtttgta acacccgaag tcggtggggt 1380
<210> 3
<211> 1409
<212> DNA
<213> 蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322-N1的16S rRNA基因序列
<400> 3
gattaagagc ttgctcttat gaagttagcg gcggacgggt gagtaacacg tgggtaacct 60
gcccataaga ctgggataac tccgggaaac cggggctaat accggataac attttgaacc 120
gcatggttcg aaattgaaag gcggcttcgg ctgtcactta tggatggacc cgcgtcgcat 180
tagctagttg gtgaggtaac ggctcaccaa ggcaacgatg cgtagccgac ctgagagggt 240
gatcggccac actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtagggaa 300
tcttccgcaa tggacgaaag tctgacggag caacgccgcg tgagtgatga aggctttcgg 360
gtcgtaaaac tctgttgtta gggaagaaca agtgctagtt gaataagctg gcaccttgac 420
ggtacctaac cagaaagcca cggctaacta cgtgccagca gccgcggtaa tacgtaggtg 480
gcaagcgtta tccggaatta ttgggcgtaa agcgcgcgca ggtggtttct taagtctgat 540
gtgaaagccc acggctcaac cgtggagggt cattggaaac tgggagactt gagtgcagaa 600
gaggaaagtg gaattccatg tgtagcggtg aaatgcgtag agatatggag gaacaccagt 660
ggcgaaggcg actttctggt ctgtaactga cactgaggcg cgaaagcgtg gggagcaaac 720
aggattagat accctgktag tccacgccgt aaacgatgag tgctaagtgt trgagggttt 780
ccgcccttta gtgctgaagt taacscatta agcaytccsc ctggggagta cggccgcaag 840
gctgaaattc aaaggaattg acgggggccc gcccaagcgg tggaccatgt ggtttaattg 900
gaagcaacgg gaagaccctt accagttctg gacatcttcg gacaacctta gagatagggt 960
ttttccttcg ggagcagagt gccaggtggt ccatggtggt cgtcagctcg tgtcgtgaga 1020
tgttgggtta agtcccgcaa cgagcccaac ccttgttctt agttgccatc attaagttgg 1080
ccattttaag gtgactgccg gtgccaaacc ggaggaaggt ggggaggacg tcaaatcatc 1140
atgcccctta tgccctgggt tccccacgtg ttccaatgga cggtccaaag agctccaaga 1200
ccgggagggg gagttaattt cataaaaccg ttttcagttc ggattttagg ctgcaattcg 1260
cttccaggaa gctggaatcg ttagtaatcg cggatcacca tgccgcgggg aatacgttcc 1320
cggccctggt ccccaccgcc cgtcccacca cgagagttgt accacccgaa gtcggtgggg 1380
taccctttgg agccagccgc taaggtgac 1409

Claims (6)

1.沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂,其特征在于,所述的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂的活性成分为产碱杆菌(Alcaligenes sp.)322F3、环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)322X3和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)322-N1;所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3和蜡状芽孢杆菌322-N1的有效活菌数的比例为2-4:1:1;所述沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂中产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3和蜡状芽孢杆菌322-N1总活性大于或等于1×1010cfu/g;所述产碱杆菌322F3的保藏编号为CCTCC NO:M2020477,所述环状芽孢杆菌322X3的保藏编号为CCTCC NO:M2020475,所述蜡状芽孢杆菌322-N1的保藏编号为CCTCCNO:M2020476。
2.权利要求1所述的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂的在沼渣好氧堆肥领域中的应用。
3.一种沼渣好氧堆肥方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、活化权利要求1所述的沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂;
S2、将活化好的菌种在堆肥起始阶段接种至沼渣、稻草和猪粪组成的混合物料中;
S3、将接菌后的混合物料堆放至腐熟。
4.根据权利要求3所述的沼渣好氧堆肥方法,其特征在于,S1中,用于活化所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3的培养基包括:NaCl 5g、蛋白胨5g、酵母膏5g、CaCO3 5g、水稻秸秆5g,用1mol/L氢氧化钠将pH调至7.6;用于活化所述蜡状芽孢杆菌322-N1的培养基包括:NaCl 10g,胰蛋白胨10g,酵母提取物5g;活化时,所述产碱杆菌322F3、环状芽孢杆菌322X3及蜡状芽孢杆菌322-N1均按照10%体积比的比例接种至培养基内,在35℃摇床内180r/min震荡培养24h。
5.根据权利要求3所述的沼渣好氧堆肥方法,其特征在于,所述沼渣好氧堆肥复合微生物菌剂与所述混合物料的质量比为5-10:1000;所述混合物料中沼渣、稻草和猪粪的重量比为1:1.5:1;所述稻草为长度为1-2cm的小段。
6.根据权利要求3所述的沼渣好氧堆肥方法,其特征在于,堆肥时,混合物料的初始含水率为55-65%,初始pH为7.2-7.6,每吨有机质的通风量为28.8-36m3/h,堆肥时间为25-30d。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113773987B (zh) * 2021-08-26 2023-07-21 郑州轻工业大学 一种提高有机废弃物好氧发酵效率的生物菌剂及其制备方法
CN114456985B (zh) * 2022-03-08 2022-10-18 中国科学院上海高等研究院 一种沼渣高温好氧堆肥的微生物菌种及其应用

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1434004A (zh) * 2003-03-11 2003-08-06 赵鹏 一种生物有机无机复混肥料及其生产方法
CN105524858A (zh) * 2015-11-27 2016-04-27 湖北大学 一种有机废弃物的耐高温腐熟菌剂及其应用
WO2018076660A1 (zh) * 2016-10-25 2018-05-03 昆山工研院华科生物高分子材料研究所有限公司 生物絮团及其在例如污泥无害化处理和工业水净化处理中的应用
CN109355218A (zh) * 2018-10-18 2019-02-19 东北农业大学 用于畜禽粪便堆肥快速升温除味的多功能发酵复合菌剂及其制备方法与应用
WO2019133923A1 (en) * 2017-12-28 2019-07-04 Sustainable Community Development, Llc. Microbial-based composition and method of use
CN111500487A (zh) * 2020-03-20 2020-08-07 阜阳师范大学 一种复合微生物、菌剂及其制备方法和应用
CN111676174A (zh) * 2020-07-17 2020-09-18 中国科学院成都生物研究所 一种畜禽粪便堆肥用促腐保氮菌剂及制备和应用方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1434004A (zh) * 2003-03-11 2003-08-06 赵鹏 一种生物有机无机复混肥料及其生产方法
CN105524858A (zh) * 2015-11-27 2016-04-27 湖北大学 一种有机废弃物的耐高温腐熟菌剂及其应用
WO2018076660A1 (zh) * 2016-10-25 2018-05-03 昆山工研院华科生物高分子材料研究所有限公司 生物絮团及其在例如污泥无害化处理和工业水净化处理中的应用
WO2019133923A1 (en) * 2017-12-28 2019-07-04 Sustainable Community Development, Llc. Microbial-based composition and method of use
CN109355218A (zh) * 2018-10-18 2019-02-19 东北农业大学 用于畜禽粪便堆肥快速升温除味的多功能发酵复合菌剂及其制备方法与应用
CN111500487A (zh) * 2020-03-20 2020-08-07 阜阳师范大学 一种复合微生物、菌剂及其制备方法和应用
CN111676174A (zh) * 2020-07-17 2020-09-18 中国科学院成都生物研究所 一种畜禽粪便堆肥用促腐保氮菌剂及制备和应用方法

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Assignor: JIANGXI AGRICULTURAL University

Contract record no.: X2024980000126

Denomination of invention: Composite microbial agents for anaerobic composting of biogas residue and their application

Granted publication date: 20220923

License type: Common License

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