CN112694991B - 一种产维生素b12的菌株及其应用 - Google Patents

一种产维生素b12的菌株及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及维生素发酵技术领域，具体公开一种产维生素B12的菌株及其应用。所述产维生素B12的菌株的菌种保藏号为CCTCC NO:M2020913。本发明提供的产维生素B12的菌株具有高产维生素B12的活性，突破了传统维生素B12发酵单位低的瓶颈。且该菌株的遗传稳定性好、发酵过程简单易操作，为维生素B12的工业化生产提供了一种更优质的菌种。

Description

一种产维生素B12的菌株及其应用
技术领域
本发明涉及维生素发酵技术领域，尤其涉及一种产维生素B12的菌株及其应用。
背景技术
维生素B12又叫钴胺素，是一种含有3价钴的多环系化合物，其中4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大环，也是唯一含金属元素的维生素。高等动植物自身不能合成或制造维生素B12，自然界中的维生素B12都是通过微生物合成的。维生素B12在体内参与制造骨髓红细胞，具有防止恶性贫血，防止大脑神经受到破坏等重要作用，广泛应用于医药和食品工业。
微生物通过复杂的途径产生维生素B12，为了维持稳定的维生素B12浓度，其生物合成和转运通过核糖开关在转录或翻译水平上受到调节。常用的产维生素B12的菌株有P.denitrificans和P.shermanii等，这些菌株的遗传工具相对较少，且发酵过程复杂，因此菌株发酵工程一直关注于随机诱变和发酵过程的优化等策略。而目前利用上述策略获得的产维生素B12的菌株经发酵获得的维生素B12的平均单位最高也仅保持在290-305mg/L之间，这成为微生物发酵生产维生素B12无法突破的瓶颈。
发明内容
针对现有发酵生产维生素B12存在的上述问题，本发明提供一种产维生素B12的菌株及其应用，其具有高产维生素B12的优势，在适宜条件下，维生素B12的发酵单位可达到340mg/L。
为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：
一种产维生素B12的菌株，其菌种保藏号为CCTCC NO:M2020913。该菌株属于黏着剑菌(Ensifer adhaerens)，于2020年12月16日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址为武汉大学。
相对于现有技术，本发明提供的产维生素B12的菌株具有高产维生素B12的活性，突破了传统维生素B12发酵单位低的瓶颈。且该菌株的遗传稳定性好、发酵过程简单易操作，为维生素B12的工业化生产提供了一种更优质的菌种。
本发明还提供所述产维生素B12的菌株的发酵培养基，该培养基包括以下质量配比的组分：玉米浆65-75g/L，氧化镁0.4-0.6g/L，甘油4.5-5g/L，七水合硫酸镁1-1.4g/L，硫酸铵0.8-1.2g/L，尿素0.4-0.6g/L，磷酸氢二铵0.6-0.8g/L，磷酸二氢钾0.6-0.8g/L，硫酸锌0.06-0.08g/L，碳酸钙1.74-1.78g/L，液糖44-48g/L，甜菜碱6-10g/L，凝胶均质剂0.8-1.2g/L，七水合氯化钴0.02-0.04g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.02-0.04g/L和消沫剂0.22-0.26g/L。
上述优选的产维生素B12的菌株的发酵培养基的各组分配比，为所述产维生素B12的菌株发酵生产维生素B12提供了所需的多种营养物质，可长时间维持发酵液中维生素B12的高生产效率。
优选的，该培养基包括以下质量配比的组分：玉米浆70g/L，氧化镁0.5g/L，甘油4.8g/L，七水合硫酸镁1.2g/L，硫酸铵1g/L，尿素0.5g/L，磷酸氢二铵0.7g/L，磷酸二氢钾0.7g/L，硫酸锌0.07g/L，碳酸钙1.76g/L，液糖46g/L，甜菜碱8g/L，凝胶均质剂1g/L，七水合氯化钴0.03g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.03g/L和消沫剂0.24g/L。
上述优选的发酵培养基的各组分配比可以进一步满足产维生素B12的菌株发酵生产维生素B12营养需求，进而进一步提高维生素B12的发酵产量。
本发明还提供所述的产维生素B12的菌株的发酵方法，具体为：在温度为29-31℃、起始通气量为0.35-0.45V/V·min的搅拌条件下，将菌种接种到发酵培养基中进行发酵培养，当发酵液中的溶氧DO值≤20％时，通气量提升28-32％；当所述发酵液的氧气吸收速率值达到最大时，温度升高1-3℃，维持18-22h；然后通气量以18-22％的下调量连续下调3次，每次下调后维持48-50h，完成发酵过程。
上述优选的发酵方法和发酵条件，可以使所述产维生素B12的菌株在发酵过程中始终维持较高的活性，从而进一步提高维生素B12的发酵产量，降低维生素B12的生产成本。
优选的，所述搅拌的转速为60-100rpm。
优选的，所述菌种的接种量为5-15％。
优选的，所述菌种的接种量为10％。
所述接种量为液体菌种的接种体积占培养基体积的百分含量。
本发明还提供所述产维生素B12的菌株用于生产维生素B12的应用。所述产维生素B12的菌株为发酵生产维生素B12提供了一种优质的高产菌株，具有极高的工业应用价值。
附图说明
图1是本发明实施例1中的2019764菌株与相关种的atpD基因序列系统发育树。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
1、菌株的诱变
诱变用菌株：河北华北制药华恒药业有限公司购买并保藏的常规黏着剑菌。
筛选培养基：糖蜜90g/L，蔗糖18g/L，硫酸铵0.7g/L，磷酸氢二铵2.3g/L，七水合硫酸镁1.5g/L，一水合硫酸锰0.2g/L，七水合氯化钴0.02g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.07g/L；注射用卡那霉素30μg/mL。
诱变方法：将本单位保藏的黏着剑菌活化后，按20％(活化菌液占培养基的体积百分含量)的接种量接种到筛选培养基中，29-30℃摇培7d，得到菌液。将菌液涂布到筛选培养基固体培养皿中，29-30℃恒温培养7d，挑选生长状态良好的菌落接种到筛选培养基中进行扩大培养。将扩大培养后的菌液进行ARTP照射50s。从ARTP照射50s的菌液中分离筛选出三株具有高产维生素B12的单克隆菌株2019031、2019483、2019764，经鉴定2019031、2019483、2019764三种菌株在相同的发酵条件下，得到的发酵液中的维生素B12的发酵单位分别比筛选前的黏着剑菌菌株提高28.5％、34.3％和32.5％。
2、复筛
通过50L实验罐(筛选培养基)对2019031、2019483、2019764三种菌株的发酵单位进行检测，2019031、2019483、2019764三种菌株在相同的发酵条件下，得到的发酵液中维生素B12的发酵单位分别比筛选前的黏着剑菌菌株提高21.9％、20.5％、24.6％。继续用200吨大罐对2019031、2019483、2019764三种菌株和筛选前的黏着剑菌菌株进行对比，其中2019031、2019483、2019764三种菌株在相同的发酵条件下，得到的发酵液中的维生素B12的发酵单位分别比筛选前的黏着剑菌菌株提高18.3％、19.6％、21.1％。
3、鉴定
提取2019764菌株的基因组DNA，以2019764菌株的基因组DNA为模版，用16SrRNA通用引物进行PCR扩增。将扩增长度正确的PCR产物进行测序，测序结果如SEQ ID NO:1所示，该2019764菌株与黏着剑菌(Ensifer adhaeren s)的16SrRNA基因序列的相似性为100％，因此，可以确定本发明BS40-4菌株属于黏着剑菌(Ensifer adhaerens)，命名为黏着剑菌146A066。于2020年12月16日将2019764菌株保存于中国典型培养物保藏中心(地址：武汉大学)，菌种保藏号为CCTCC NO:M2020913。
检测2019764菌株的atpD基因区段的序列如SEQ ID NO:2所示。采用MEGA5.0软件，通过领位连接法显示2019764菌株与相关种的atpD基因序列系统发育树。得到的2019764菌株与相关种的atpD基因序列系统发育树如图1所示。
实施例2
发酵生产维生素B12
发酵培养基：玉米浆70g/L，氧化镁0.5g/L，甘油4.8g/L，七水合硫酸镁1.2g/L，硫酸铵1g/L，尿素0.5g/L，磷酸氢二铵0.7g/L，磷酸二氢钾0.7g/L，硫酸锌0.07g/L，碳酸钙1.76g/L，液糖46g/L，甜菜碱8g/L，凝胶均质剂1g/L，七水合氯化钴0.03g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.03g/L和消沫剂0.24g/L。
将2019764菌株按10％的接种体积接种到200吨发酵罐(发酵培养基)中，调节发酵罐中发酵液的搅拌转速为80rpm，起始通气量为0.4V/V·min，保持发酵温度为29℃进行发酵，发酵过程中对发酵液的溶氧DO和氧气吸收速率进行实时监测。当发酵液中的溶氧DO≤20％后，通气量提升30％，继续发酵；当发酵过程中发酵液的氧气吸收速率(our)达到最高值(our不再升高)后，将温度提升至32℃，继续发酵20h；然后通气量下调20％，继续发酵48h；通气量再次下调20％，继续发酵50h；通气量再次下调20％，继续发酵50h。
上述发酵生产维生素B12的过程同时进行4批，检测4批发酵液中最终的维生素B12的发酵单位，测得4批发酵液中维生素B12的平均发酵单位为344mg/L。
实施例3
发酵生产维生素B12
发酵培养基：玉米浆65g/L，氧化镁0.4g/L，甘油4.5g/L，七水合硫酸镁1g/L，硫酸铵0.8g/L，尿素0.4g/L，磷酸氢二铵0.6g/L，磷酸二氢钾0.6g/L，硫酸锌0.06g/L，碳酸钙1.74g/L，液糖44g/L，甜菜碱6g/L，凝胶均质剂0.8g/L，七水合氯化钴0.02g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.02g/L和消沫剂0.22g/L。
将2019764菌株按5％的接种体积接种到200吨发酵罐(发酵培养基)中，调节发酵罐中发酵液的搅拌转速为60rpm，起始通气量为0.35V/V·min，保持发酵温度为30℃进行发酵，发酵过程中对发酵液的溶氧DO和氧气吸收速率进行实时监测。当发酵液中的溶氧DO≤20％后，通气量提升28％，继续发酵；当发酵过程中发酵液的氧气吸收速率(our)达到最高值(our不再升高)后，将温度提升至32℃，继续发酵18h；然后通气量下调18％，继续发酵49h；通气量再次下调18％，继续发酵49h；通气量再次下调18％，继续发酵50h。
上述发酵生产维生素B12的过程同时进行4批，检测4批发酵液中最终的维生素B12的发酵单位，测得4批发酵液中维生素B12的平均发酵单位为340mg/L。
实施例4
发酵生产维生素B12
发酵培养基：玉米浆75g/L，氧化镁0.6g/L，甘油5g/L，七水合硫酸镁1.4g/L，硫酸铵1.2g/L，尿素0.6g/L，磷酸氢二铵0.8g/L，磷酸二氢钾0.8g/L，硫酸锌0.08g/L，碳酸钙1.78g/L，液糖48g/L，甜菜碱10g/L，凝胶均质剂1.2g/L，七水合氯化钴0.04g/L，5.6二甲基苯丙咪唑0.04g/L和消沫剂0.26g/L。
将2019764菌株按15％的接种体积接种到200吨发酵罐(发酵培养基)中，调节发酵罐中发酵液的搅拌转速为100rpm，起始通气量为0.45V/V·min，保持发酵温度为30℃进行发酵，发酵过程中对发酵液的溶氧DO和氧气吸收速率进行实时监测。当发酵液中的溶氧DO≤20％后，通气量提升32％，继续发酵；当发酵过程中发酵液的氧气吸收速率(our)达到最高值(our不再升高)后，将温度提升至32℃，继续发酵22h；然后通气量下调22％，继续发酵50h；通气量再次下调22％，继续发酵48h；通气量再次下调22％，继续发酵49h。
上述发酵生产维生素B12的过程同时进行4批，检测4批发酵液中最终的维生素B12的发酵单位，测得4批发酵液中维生素B12的平均发酵单位为341mg/L。
实施例5
将实施例1中的2019764菌株连续传代6代后，采用与实施例2完全相同的发酵生产维生素B12的方法进行发酵，得到发酵液。检测得到的发酵液中维生素B12的平均发酵单位为338mg/L。
可见该菌株的遗传稳定性良好，其生产维生素B12的活性未随着传代次数的增加发生明显变化。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 河北华北制药华恒药业有限公司
<120> 一种产维生素B12的菌株及其应用
<130> 2020
<160> 2
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1344
<212> DNA
<213> 16S rDNA
<400> 1
tcgagcgccc cgcaagggga gcggcagacg ggtgagtaac gcgtgggaat ctaccctttt 60
ctacggaata acgcagggaa acttgtgcta ataccgtata cgcccttcgg gggaaagatt 120
tatcgggaaa ggatgagccc gcgttggatt agctagttgg tggggtaaag gcctaccaag 180
gcgacgatcc atagctggtc tgagaggatg atcagccaca ttgggactga gacacggccc 240
aaactcctac gggaggcagc agtggggaat attggacaat gggcgcaagc ctgatccagc 300
catgccgcgt gagtgatgaa ggccctaggg ttgtaaagct ctttcaccgg tgaagataat 360
gacggtaacc ggagaagaag ccccggctaa cttcgtgcca gcagccgcgg taatacgaag 420
ggggctagcg ttgttcggaa ttactgggcg taaagcgcac gtaggcggac atttaagtca 480
ggggtgaaat cccggggctc aaccccggaa ctgcctttga tactgggtgt ctagagtatg 540
gaagaggtga gtggaattcc gagtgtagag gtgaaattcg tagatattcg gaggaacacc 600
agtggcgaag gcggctcact ggtccattac tgacgctgag gtgcgaaagc gtggggagca 660
aacaggatta gataccctgg tagtccacgc cgtaaacgat gaatgttagc cgtcgggcag 720
tttactgttc ggtggcgcag ctaacgcatt aaacattccg cctggggagt acggtcgcaa 780
gattaaaact caaaggaatt gacgggggcc cgcacaagcg gtggagcatg tggtttaatt 840
cgaagcaacg cgcagaacct taccagccct tgacatcccg atcgcggatt acggagacgt 900
tttccttcag ttcggctgga tcggagacag gtgctgcatg gctgtcgtca gctcgtgtcg 960
tgagatgttg ggttaagtcc cgcaacgagc gcaaccctcg cccttagttg ccagcattta 1020
gttgggcact ctaaggggac tgccggtgat aagccgagag gaaggtgggg atgacgtcaa 1080
gtcctcatgg cccttacggg ctgggctaca cacgtgctac aatggtggtg acagtgggca 1140
gcgagaccgc gaggtcgagc taatctccaa aagccatctc agttcggatt gcactctgca 1200
actcgagtgc atgaagttgg aatcgctagt aatcgcagat cagcatgctg cggtgaatac 1260
gttcccgggc cttgtacaca ccgcccgtca caccatggga gttggttcta cccgaaggta 1320
gtgctgctaa ccgcaaggag gcag 1344
<210> 2
<211> 506
<212> DNA
<213> atpD
<400> 2
gtcatcggcg agccggttga cgaagcaggc ccgctcgtca cctcgggcaa gcgcgccatc 60
caccaggaag cgccgtccta cgtcgagcag tcgacggaag cgcagatcct cgtcaccggc 120
atcaaggtcg tcgaccttct cgctccttac gcaaagggcg gcaagatcgg cctcttcggc 180
ggcgcaggcg tcggcaagac cgttctcatc atggaactga tcaacaacgt cgccaaggcg 240
cacggtggtt actcggtgtt cgcaggcgtg ggtgaacgta cccgcgaagg caacgacctt 300
taccacgaaa tgatcgagtc cggcgttaac aagcacggcg gtggcgcagg ctccaaggct 360
gctctcgtgt acggccagat gaacgaaccg ccgggcgccc gcgctcgtgt cgccctgacg 420
ggtctgacga tcgctgaaga cttccgcgac aagggccagg acgttctgtt cttcgtcgac 480
aacatcttcc gcttcaccca ggcagg 506

Claims (6)

1.一种产维生素B12的菌株，其特征在于：其菌种保藏号为CCTCC NO:M2020913；所述菌株属于黏着剑菌（Ensifer adhaerens）。
2.权利要求1所述的产维生素B12的菌株的发酵方法，其特征在于：在温度为29-31℃、起始通气量为0.35-0.45V／V·min的搅拌条件下，将菌种接种到发酵培养基中进行发酵培养，当发酵液中的溶氧DO值≤20%时，通气量提升28-32%；当所述发酵液的氧气吸收速率值达到最大时，温度升高1-3℃，维持18-22h；然后通气量以18-22%的下调量连续下调3次，每次下调后维持48-50h，完成发酵过程。
3.如权利要求2所述的产维生素B12的菌株的发酵方法，其特征在于：所述搅拌的转速为60-100rpm。
4.如权利要求2所述的产维生素B12的菌株的发酵方法，其特征在于：所述菌种的接种量为5-15%。
5.如权利要求4所述的产维生素B12的菌株的发酵方法，其特征在于：所述菌种的接种量为10%。
6.权利要求1所述的产维生素B12的菌株用于生产维生素B12的应用。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116768989B (zh) * 2023-07-10 2024-06-28 江南大学 一种维生素b12核糖开关突变体及高通量检测维生素b12的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007087815A2 (en) * 2004-12-17 2007-08-09 Metanomics Gmbh Process for the control of production of fine chemicals
CN102851237A (zh) * 2012-08-07 2013-01-02 南京师范大学 粘着箭菌及其应用
CN108913739A (zh) * 2018-08-04 2018-11-30 广济药业（孟州）有限公司 一种基于pH值控制的脱氮假单胞杆菌生产维生素B12的方法
CN109207469A (zh) * 2018-09-21 2019-01-15 山东泓达生物科技有限公司 一种高产维生素b12的突变菌株制备方法
CN110205350A (zh) * 2019-05-24 2019-09-06 河北华荣制药有限公司 一种基于氨氮指标调控提高维生素b12产量的方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102391339A (zh) * 2011-09-14 2012-03-28 河北华荣制药有限公司 一种从好氧发酵液中提取腺苷钴胺的方法
CN111041029B (zh) * 2019-12-23 2022-05-10 中国科学院天津工业生物技术研究所 一种强启动子及其在产维生素b12菌株中的应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007087815A2 (en) * 2004-12-17 2007-08-09 Metanomics Gmbh Process for the control of production of fine chemicals
CN102851237A (zh) * 2012-08-07 2013-01-02 南京师范大学 粘着箭菌及其应用
CN108913739A (zh) * 2018-08-04 2018-11-30 广济药业（孟州）有限公司 一种基于pH值控制的脱氮假单胞杆菌生产维生素B12的方法
CN109207469A (zh) * 2018-09-21 2019-01-15 山东泓达生物科技有限公司 一种高产维生素b12的突变菌株制备方法
CN110205350A (zh) * 2019-05-24 2019-09-06 河北华荣制药有限公司 一种基于氨氮指标调控提高维生素b12产量的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Identification and Phylogenetic Characterization of Cobalamin Biosynthetic Genes of Ensifer adhaerens;HOAN THI VU等;《Microbes Environ》;20131231;第28卷(第1期);全文 *

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