CN112684074A - 一种甲酸钙含量的测定方法 - Google Patents
一种甲酸钙含量的测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112684074A CN112684074A CN202110033275.5A CN202110033275A CN112684074A CN 112684074 A CN112684074 A CN 112684074A CN 202110033275 A CN202110033275 A CN 202110033275A CN 112684074 A CN112684074 A CN 112684074A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- calcium formate
- sample
- content
- solution
- determining
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明涉及一种甲酸钙含量的测定方法,属于含量检测技术领域。其通过样品溶液的制备、对照品溶液的配置和甲酸钙含量测定步骤完成。本发明利用高效液相色谱技术对样品溶液进行测定,得到甲酸钙色谱峰的峰面积,根据标准曲线计算供试品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量。该方法可以用于含有甲酸钙动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料的含量快速测定,对含甲酸钙的动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料的质量进行评价,该含量测定方法准确、快捷、方便、有效。
Description
技术领域
本发明涉及一种甲酸钙含量的测定方法,具体涉及一种甲酸钙类动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料中甲酸钙的含量的测定方法,属于含量检测技术领域。
背景技术
为应对无抗养殖新时代的重大需求,现有市场开发出了混合型饲料添加剂,其主成分之一采用甲酸钙作为添加剂。其在动物体内经生化作用能有利于激活胃蛋白酶源,提高饲料养分的消化率,促进仔猪食欲和降低腹泻率,具有抑菌防腐作用。为保证产品质量,其有效成分的含量测定就不能忽视。
现有部分产品采用EDTA滴定法,该方法不适合复杂组分中低含量甲酸钙的含量测定,并且具有局限性及不确定性。公开文献对饲料中甲酸钙含量测定很少报道,尤其是复杂组分中的甲酸钙的含量测定。
为了控制产品质量,本发明对饲料添加剂中的甲酸钙含量测定进行了研究,为该类产品的质量控制提供了依据。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足之处,提供一种甲酸钙含量的测定方法,具有专属性强、灵敏度高、准确度好、操作简便、快速、应用范围广等特点,适用于各类动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料中甲酸钙含量的测定,从而建立一种快速简便的甲酸钙快速测定方法。
本发明的技术方案,一种甲酸钙含量的测定方法,步骤如下:
(1)样品溶液的配制:称取样品于容量瓶中,加入适量水,超声提取,加水至刻度后摇匀,离心后上清液过滤膜,滤液即为样品溶液;
(2)对照品溶液的配置:取甲酸钙对照品制成每1mL分别含0.05mg、0.1mg、0.2mg、0.4mg、0.8mg的对照品溶液;
(3)甲酸钙含量的测定:
a、对步骤(2)所得不同浓度的对照品溶液分别以10μL进样,测得各标准品溶液的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;
b、对步骤(1)配置的样品溶液进行高效液相色谱测定,得到甲酸钙色谱峰的峰面积,根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量。
一种甲酸钙含量的测定方法,包括以下步骤:
(1)样品溶液的配制:取样品不少于20g,研细;精密称取研磨细粉0.1-10.0g于500mL容量瓶中,加入200-250mL水,28-32℃、40KHz超声提取25-35min后,加水至刻度,摇匀;离心后将上清液过0.45μm滤膜,滤液即为样品溶液;
(2)高效液相色谱实验条件:
色谱柱:JADE-PAK ODS(250×4.6mm,5um)或等效色谱柱;
流速:0.5~1.5ml/min;
检测波长:214nm;
流动相:A:0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.0);B:乙腈;
梯度如下表1所示:
表1
时间(min) | 流动相A | 流动相B |
0 | 97% | 3% |
5.0 | 97% | 3% |
10.0 | 50% | 50% |
15.0 | 50% | 50% |
16.0 | 97% | 3% |
20.0 | 97% | 3% |
进样量:10μL;
柱温:20~40℃;
洗脱时间:20min;
(3)对照品溶液的配制:取甲酸钙对照品【CAS号:544-17-2】,制成每1mL分别含0.05mg、0.1mg、0.2mg、0.4mg、0.8mg的对照品溶液;
(4)甲酸钙含量测定:
高效液相色谱测定:不同浓度的对照品溶液分别以10μL进样,测得各标准品溶液的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对样品溶液进行高效液相色谱测定,得到甲酸钙色谱峰的峰面积,根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量。
A样:样品溶液的甲酸钙峰面积;
C:对照品溶液的浓度,μg/mL;
A标:对照品溶液的甲酸钙峰面积;
W样:样品称重,g。
所述的样品溶液经0.45um微孔滤膜过滤后再进样。
所述的步骤(1)中的样品为固体样品则需先用研钵及研杵研磨成细粉后使用,若样品为液体样品则直接取用,若样品为胶囊样品则取若干胶囊的内容物,研磨混合均匀后使用。
所述方法适用于含甲酸钙的片剂、甲酸钙类硬胶囊、甲酸钙类粉剂、甲酸钙类软胶囊、甲酸钙类滴剂、甲酸钙类丸剂、甲酸钙类软糖、甲酸钙类饮料。
所述甲酸钙还可以为甲酸钙产品;具体为各类动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料。
本发明的有益效果:本发明的色谱温度控制在25~40℃,洗脱时间为20min,该色谱条件在保证含量测定准确性的前提下,梯度洗脱时间仅为20min,有效提高了工作效率;本发明的含量测定方法测试时间短、专属性强、回收率高、仪器试剂简单,整个过程检测成本较低;本发明可以用于含有甲酸钙的动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料的含量快速测定,对含甲酸钙的动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料的质量进行评价,具有灵敏度高、准确度好、操作简便、快速、应用范围广等特点。
附图说明
图1是实施例1中甲酸钙对照品图谱;
图2是实施例1中样品溶液的HPLC-UV;
图3是实施例2中甲酸钙对照品图谱;
图4是实施例2中样品溶液的HPLC-UV;
图5是实施例3中甲酸钙对照品图谱;
图6是实施例3中样品溶液的HPLC-UV。
具体实施方式
以下通过实施例进一步说明本发明,但不作为对本发明的限制。
实施例1
检测试剂:甲酸钙对照品、磷酸二氢钾(分析纯)、乙腈(HPLC)、磷酸(分析纯);
检测:
(1)对照品溶液配制:分别精密称取10mg、20mg、40mg、80mg、160mg甲酸钙对照品于200mL容量瓶中,加入100mL水,超声使粉末溶解,用水定容至刻度,制备成含0.05mg、0.1mg、0.2mg、0.4mg、0.8mg的对照品溶液,阴凉保存。
(2)样品溶液配制:称取5.0g样品(产品名称:(单宁酸+甲酸钙)包被,批号:H4202012001,生产单位:江苏康雅生物科技有限公司)于500mL容量瓶中,加入250mL水,30℃、40KHz超声提取30min后,加水至刻度,摇匀,离心后将上清液过0.45μm滤膜,滤液待进样。
(3)HPLC检测条件:
色谱柱:JADE-PAK ODS(250×4.6mm,5um)或等效色谱柱;
流速:0.5mL/min;
检测波长:214nm;
流动相:A为质量浓度为0.5%的磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.0);B为乙腈。
梯度如下表2所示:
表2
进样量:10μL;
柱温:40℃;
洗脱时间:20min;
(4)高效液相色谱测定:不同浓度的对照品溶液分别以10μL进样,测得各标准品溶液的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;然后对样品溶液进行高效液相色谱测定,得到甲酸钙色谱峰的峰面积,根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量22.12mg/g;
式中A样为样品溶液的甲酸钙峰面积;
C为对照品溶液的浓度,μg/mL;
A标为对照品溶液的甲酸钙峰面积;
W样为样品称重,g。
本实施例1中0.2mg的甲酸钙对照品HPLC图谱如图1所示,样品溶液的HPLC-UV如图2所示。
实施例2
称取0.4015g样品(产品名称:(单宁酸+甲酸钙+香芹酚+百里香酚)包被,批号:H5202012001,生产单位:江苏康雅生物科技有限公司),按照实施例1步骤进行测定。其中HPLC色谱条件为流速1.0mL/min;柱温30℃;其余条件同实施例1。
根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量113.27mg/g。
本实施例2中0.2mg的甲酸钙对照品HPLC图谱如图3所示,样品溶液的HPLC-UV如图4所示。
实施例3
称取0.4025g样品(产品名称:(单宁酸+甲酸钙+香芹酚+百里香酚)包被,批号:H5202012002,生产单位:江苏康雅生物科技有限公司),按照实施例1步骤进行测定。其中HPLC色谱条件为流速1.5mL/min;柱温20℃;其余条件同实施例1。
根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量112.15mg/g。
本实施例3中0.2mg的甲酸钙对照品HPLC图谱如图5所示,样品溶液的HPLC-UV如图6所示。
实施例4
根据实施例1、2、3的要求,分别称取适量样品各5份,样品溶液制备处理中超声温度和超声提取时间按下表3进行,其它项及色谱条件分别同实施例1、2、3。
表3
序号 | 温度(℃) | 时间(min) |
1 | 25 | 40 |
2 | 28 | 35 |
3 | 30 | 30 |
4 | 32 | 25 |
5 | 35 | 20 |
根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的回收率,具体如表4所示。
表4
从表4中可以看出超声温度控制在28-32℃、超声提取时间控制在25-35min范围内甲酸钙样品回收率达98.0%以上,完全满足方法学的相关要求。
根据实施例1-4可知,在本发明方法开发过程采用恒温超声提取和建立新的色谱条件,可以显著反映样品中目标成分的回收率,更加真实反映出样品的甲酸钙的含量。本发明的含量的测定方法测试时间短、准确度高、仪器试剂简单易得,整个过程检测成本较低,该方法的尚无相关文献或专利进行报道过。
Claims (8)
1.一种甲酸钙含量的测定方法,其特征是步骤如下:
(1)样品溶液的配制:称取样品于容量瓶中,加入适量水,超声提取,加水至刻度后摇匀,离心后上清液过滤膜,滤液即为样品溶液;
(2)对照品溶液的配置:取甲酸钙对照品制成每1mL分别含0.05mg、0.1mg、0.2mg、0.4mg、0.8mg的对照品溶液;
(3)甲酸钙含量的测定:
a、对步骤(2)所得不同浓度的对照品溶液分别以10μL进样,测得各标准品溶液的高效液相色谱峰面积;以所得各标准对照品峰面积为纵坐标,各对应标准对照品浓度为横坐标分别做标准曲线,分别计算得线性回归方程;
b、对步骤(1)配置的样品溶液进行高效液相色谱测定,得到甲酸钙色谱峰的峰面积,根据标准曲线计算样品中甲酸钙的含量,并结合样品的质量,经计算得到甲酸钙的含量。
2.如权利要求1所述甲酸钙含量的测定方法,其特征是:步骤(1)中样品为固体样品则需先用研钵及研杵研磨成细粉后使用;样品为液体样品则直接取用;样品为胶囊样品则取若干胶囊的内容物,研磨混合均匀后使用。
3.如权利要求1所述甲酸钙含量的测定方法,其特征是:步骤(1)中取样品不少于20g,研细;精密称取研磨细粉0.1-10.0g于500mL容量瓶中,加入200-250mL水,28-32℃、40KHz超声提取25-35min后,加水至刻度,摇匀;离心后将上清液过滤膜,滤液即为样品溶液。
4.如权利要求3所述甲酸钙含量的测定方法,其特征是:所述滤膜具体为0.45μm的滤膜。
7.如权利要求1所述甲酸钙含量的测定方法,其特征是:所述甲酸钙具体为甲酸钙类粉剂、甲酸钙的片剂、甲酸钙类硬胶囊、甲酸钙类软胶囊、甲酸钙类滴剂、甲酸钙类丸剂或甲酸钙类软糖。
8.如权利要求1所述甲酸钙含量的测定方法,其特征是:所述甲酸钙具体还可以是动物保健食品、兽药、普通饲料或饲料预混料产品。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110033275.5A CN112684074A (zh) | 2021-01-11 | 2021-01-11 | 一种甲酸钙含量的测定方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202110033275.5A CN112684074A (zh) | 2021-01-11 | 2021-01-11 | 一种甲酸钙含量的测定方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN112684074A true CN112684074A (zh) | 2021-04-20 |
Family
ID=75457317
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202110033275.5A Pending CN112684074A (zh) | 2021-01-11 | 2021-01-11 | 一种甲酸钙含量的测定方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN112684074A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114344242A (zh) * | 2022-01-04 | 2022-04-15 | 北京菲繁生物技术有限公司 | 一种烯丙孕素软糖及其制备方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6137005A (en) * | 1995-05-12 | 2000-10-24 | Norsk Hydro Asa | Method for manufacture of products containing disalts of formic acid |
US6695952B1 (en) * | 1999-07-22 | 2004-02-24 | Consortium Fur Elektrochemische Industrie Gmbh | Method for the separation of and purification of an aqueous mixture consisting of the main components acetic acid and formic acid |
CN101650347A (zh) * | 2009-09-15 | 2010-02-17 | 安徽泰格生物技术股份有限公司 | 一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法 |
CN104597160A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-06 | 重庆医科大学 | 一种同时测定半夏中6种有机酸含量的hplc方法 |
-
2021
- 2021-01-11 CN CN202110033275.5A patent/CN112684074A/zh active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6137005A (en) * | 1995-05-12 | 2000-10-24 | Norsk Hydro Asa | Method for manufacture of products containing disalts of formic acid |
US6695952B1 (en) * | 1999-07-22 | 2004-02-24 | Consortium Fur Elektrochemische Industrie Gmbh | Method for the separation of and purification of an aqueous mixture consisting of the main components acetic acid and formic acid |
CN101650347A (zh) * | 2009-09-15 | 2010-02-17 | 安徽泰格生物技术股份有限公司 | 一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法 |
CN104597160A (zh) * | 2015-01-27 | 2015-05-06 | 重庆医科大学 | 一种同时测定半夏中6种有机酸含量的hplc方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
段培姿 等: "高效液相色谱法测定饲料中甲酸钙、双乙酸钠和丙酸盐", 《科学大众》 * |
石波 等: "二甲酸钾的化学结构分析及含量测定", 《中国饲料》 * |
郑婷 等: "高效液相色谱法测定饲料添加剂中有机酸含量", 《分析试验室》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114344242A (zh) * | 2022-01-04 | 2022-04-15 | 北京菲繁生物技术有限公司 | 一种烯丙孕素软糖及其制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104730190B (zh) | 同时测定食品或保健品当中多种水溶性维生素含量的方法 | |
CN105334274B (zh) | 枸橼酸托法替布含量及其有关物质的反相高效液相色谱法测定方法 | |
CN107561172B (zh) | 一种同时检测营养素软胶囊中多种维生素含量的方法 | |
CN104777243B (zh) | 一种同时测定半夏中有机酸、核苷和麻黄碱的hplc方法 | |
CN111239301A (zh) | 一种检测叶酸杂质d含量的方法 | |
CN112684074A (zh) | 一种甲酸钙含量的测定方法 | |
CN107271588B (zh) | 一种超高效液相色谱测定b族维生素的方法 | |
CN109387587A (zh) | 一种l-2-氨基-5-胍基戊酸对映异构体的检测方法 | |
CN111208249B (zh) | 利用高效液相色谱法测定驱虫药有效成分含量的方法 | |
CN109142585B (zh) | 一种泛酸钠异构体的检测方法 | |
CN109100456B (zh) | 一种同时测定多种维生素注射液中3种脂溶性维生素含量的方法 | |
CN103728389B (zh) | 使用hplc法测定丁酸和丁酸钠的方法 | |
CN113484450B (zh) | 药物对映异构体检测用衍生化处理方法及测定方法、应用 | |
CN115078568A (zh) | 一种测定羟基酪醇含量及纯度的超高效液相色谱方法 | |
CN110568119B (zh) | 一种同时检测甜菜碱盐酸盐和氯乙酸甲酯季铵盐的方法 | |
CN111044640B (zh) | 一种利用GC法测定饲料添加剂中γ-氨基丁酸含量的方法 | |
CN110187021B (zh) | 一种同时测定氯氰碘柳胺钠伊维菌素注射液中两种主药含量的方法 | |
CN115876940A (zh) | 一种肌肽的检测方法及其应用 | |
CN114137120A (zh) | 一种雷帕霉素药物支架中有关物质的检测方法 | |
CN112816567A (zh) | 测定褪黑素和维生素b6的高效液相色谱分析方法 | |
CN108303483B (zh) | 曲咪新乳膏中硫酸新霉素组分的hplc检测方法 | |
CN112684086A (zh) | 一种检测鱼粉中三种生物胺含量的方法 | |
CN104749282A (zh) | 测定鲜竹沥中有效成分愈创木酚含量的方法 | |
CN104391051A (zh) | 乳制品中核苷酸含量的测定方法 | |
CN111693615A (zh) | 同时测定烟酸、维生素b1、b6和泛酸的分析方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210420 |