CN101650347A - 一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法，包括以下步骤：(1)分别配制甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸的标准储备溶液，然后混合定容配制成混合标准溶液；(2)取待测的饲用酸化剂试样稀释500－2000倍；(3)稀释后的样液过滤后取5－20μL注入液相色谱仪，在流动相的流速为0.6－1.0mL/min的条件下记录210nm波长下的色谱图；另取等量的混合标准溶液同上述方法测定，按外标法以峰面积计算试样中有机酸的含量。本发明能够在同一色谱条件下，仅需进一次样品，即能同时得到甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸含量分析结果。简单、快速、准确度高。

Description

一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法

技术领域

本发明涉及一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法。

背景技术

酸化剂是非营养性饲料添加剂的一种，能提高饲料酸度，抑制有害菌的生长，改善动物消化道环境，提高动物的生长性能。酸化剂主要包括单一酸化剂和复合酸化剂，单一酸化剂分为有机酸和无机酸。目前使用的无机酸化剂主要是磷酸；有机酸化剂主要有柠檬酸、延胡索酸(富马酸)、乳酸、丙酸、苹果酸、山梨酸、甲酸、乙酸等。复合酸化剂是将两种或以上的单一酸化剂按照一定的比例复合而成。由于受检验设备和技术上的困扰，大多数用户基本上不检测酸化剂中各成分含量，而生产厂家也只是根据各有机酸投料所占比例标示其含量。根据文献报导，酸化剂中各有机酸成分的含量检测方法是利用其理化性质，分别进行样品处理、检测。发明本检验方法之前，依据报导对各种酸检验方法进行了研究，结果证明其方法是可行的，但过程复杂，如乳酸含量检测通常采用方法是：在铜离子的催化下，与浓硫酸作用生成乙醛，乙醛能与对羟基联苯作用生成在565nm处有特征吸收的紫红色物质，在一定范围内，乳酸浓度与其在波长为565nm的吸光度呈线性关系，通过测定565nm处样品的吸光度来测定乳酸的含量。该方法测乳酸含量检测周期长，对浓硫酸氧化乳酸过程的实验者操作技能要求高，检测结果的重现性不高，偏差较大。柠檬酸含量国标检测方法是利用其与重氮化的磺胺酸的特效反应，于420nm波长处比色测定。该法测柠檬酸含量同上述测乳酸含量方法一样，实验操作必须做到标准柠檬酸溶液和样品溶液分别与试剂进行充分、完全的显色反应，方能达到标准曲线线性要求和试样分析结果准确、精密。甲酸含量国标检测采用其与碳酸钙反应，生成甲酸钙，甲酸钙定量将氯化汞还原为氯化亚汞，根据氯化亚汞的质量计算甲酸含量。该法测甲酸含量所用试剂毒性大，另外沉淀完全与否和沉淀过滤、洗涤过程中的损失，致检测方法相对误差较大。丙酸国标通常采用气相色谱法测含量，该法受检测设备、检验成本的限制，难以在实际生产、验收中使用。

发明内容

本发明的目的是提供一种同时分析饲用酸化剂中甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸等五种有机酸含量的方法，特别是提供一种快速、准确和精密度高的测定方法。

为达到上述目的，本发明的技术方案提供一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法，包括以下步骤：

(1)分别配制甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸的标准储备溶液，然后混合定容配制成混合标准溶液；

(2)取待测的饲用酸化剂试样稀释500-2000倍；

(3)稀释后的样液过滤后取5-20μL注入液相色谱仪，在流动相的流速为0.6-1.0mL/min的条件下记录210nm波长下的色谱图；另取等量的混合标准溶液同上述方法测定，按外标法以峰面积计算试样中有机酸的含量。

上述方法，其中所述步骤(1)中各种有机酸的标准溶液的浓度可以按照待测的市售饲用酸化剂中的有机酸的含量为标准来设定。对于现有的常用的饲用酸化剂，混合标准溶液中的各种有机酸的浓度优选为：甲酸的浓度为0.2mg/mL；乳酸的浓度为1.0mg/mL；柠檬酸的浓度为1.0mg/mL；富马酸的浓度为0.05mg/mL；丙酸的浓度为0.5mg/mL。

上述方法，所述步骤(2)中试样的稀释度主要依试样的有机酸含量和标准溶液的浓度来确定，可在500-2000倍之间选择，对于现有的常用的饲用酸化剂，优选为1000倍。

上述方法，其中所述步骤(3)中的进样量优选为10μL。

上述方法，其中所述步骤(3)中流动相优选为0.1mol/L的磷酸二氢铵溶液。

上述方法，其中所述步骤(3)中流动相的流速优选为1.0mL/min。

上述技术方案具有如下优点：

1、在同一色谱条件下，仅需进一次样品，即能同时得到甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸含量分析结果。建立了一种简单、快速、准确度高的检测方法。

2、明确了供试样品溶液的恰当浓度。由于五种有机酸的每个组分对应的峰面积(或高峰)都与其浓度成正比，但浓度相同的不同组分不一定能获得相同的峰面积，即浓度相同的不同组分在同一色谱条件下的响应因子不同，例如本发明中的富马酸响应因子远大于另四种酸。因此，通过实验，确定了较为合适的供试样品溶液浓度，使液相色谱仪工作站对富马酸的峰面积能准确计算，本发明方法中明确的供试样品浓度，能同时准确得出甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸含量。

3、确定液相色谱流动相的流速优选为1.0mL/min。通过实验，发现将检测流速由0.6mL/min提高到1.0mL/min，能使样品得到良好分离，且缩短了检测时间。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1：

一、试剂和溶液

1、磷酸二氢铵

2、磷酸

3、甲酸标准品：纯度大于等于88.0％

4、乳酸标准品：纯度约85％

5、柠檬酸标准品：纯度大于等于99.5％

6、富马酸标准品：纯度大于等于99.0％

7、丙酸标准品：纯度大于等于99.5％

8、酚酞指示液：取酚酞1g，加95％乙醇100mL使溶解，即得。

9、氢氧化钠滴定液(1mol/L)：按中国药典2005年版二部附录XV F规定的方法配制和标定。

10、硫酸滴定液(0.5mol/L)：按中国药典2005年版二部附录XV F规定的方法配制和标定。

11、甲酸标准储备溶液

(1)配制

称取甲酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加去二氧化碳水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取甲酸标准储备溶液100mL，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定，至溶液显淡粉红色。

(3)结果计算

甲酸标准储备溶液浓度C₁(mg/mL)，按(1)式计算：

$C_1=\frac{C^{\′}\×V_1\×46.03}{100}...\left(1\right)$

式中：C′------氢氧化钠滴定液浓度，mol/L；

V₁------甲酸标准储备溶液所消耗氢氧化钠滴定液的体积，mL；

46.03------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于46.03mg的甲酸；

100------吸取甲酸标准储备溶液体积，mL。

12、乳酸标准储备溶液

(1)配制

称取乳酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取乳酸标准储备溶液100mL，加水50mL，精密加氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL，煮沸5分钟，加酚酞指示液2滴，趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

(3)结果计算

乳酸标准储备溶液浓度C₂(mg/mL)，按(2)式计算：

$C_2=\frac{2\×C^{\′\′}\×(V_3-V_2)\×90.08}{100}...\left(2\right)$

式中：C″------硫酸滴定液浓度，mol/L；

V₃------空白溶液所消耗硫酸滴定液的体积，mL；

V₂------乳酸标准储备溶液所消耗硫酸滴定液的体积，mL；

2------质子转移数；

90.08------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于90.08mg的乳酸；

100------吸取乳酸标准储备溶液体积，mL。

13、富马酸标准储备溶液：准确称取适量富马酸标准品，用水溶解并配成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4℃保存。

14、丙酸标准储备溶液

(1)配制

称取丙酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取丙酸标准储备溶液100mL，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定，至溶液显淡粉红色。

(3)结果计算

丙酸标准储备溶液浓度C₃(mg/mL)，按(3)式计算：

$C_3=\frac{C^{\′\′\′}\×V_4\×74.08}{100}...\left(3\right)$

式中：C′″------氢氧化钠滴定液浓度，mol/L；

V₄------丙酸标准储备溶液所消耗氢氧化钠滴定液的体积，mL；

74.08------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于74.08mg的丙酸；

10------吸取丙酸标准储备溶液体积，mL。

15、混合标准溶液：取2mL甲酸标准储备溶液，10mL乳酸标准储备溶液，0.10g(精密称定)柠檬酸，5mL富马酸标准储备溶液和5mL丙酸标准储备溶液于100mL容量瓶中，溶解，混匀，用水稀释至刻度，于4℃保存。

二、仪器设备

液相色谱仪和一般实验室仪器。

三、样品溶液

取样品1g，精密称定，加水稀释至100mL，搅拌2小时，静置1小时，过滤，弃去初滤液，收集续滤液，量取10mL续滤液，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，备用。(稀释度为1000)

四、测定

1、色谱条件

(1)色谱柱：Inertsil ODS-3柱[25cm×4.6mm(内径)，5μm]或与之相当的色谱柱；

(2)流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵溶液，用磷酸调节pH＝2.4，过0.45μm滤膜；

(3)流速：1.0mL/min；

(4)检测波长：210nm；

(5)进样体积：10μL。

2、色谱测定

取样品溶液，过0.45μm滤膜，精密量取续滤液10μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取混合标准溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算。在上述色谱条件下，样液中待测成分的出峰顺序为甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、丙酸。

3、结果计算

样品溶液中被测成分的浓度Cx(mg/mL)，按式(4)计算：

$\mathrm{Cx}=C\frac{\mathrm{Ax}}{A}...\left(4\right)$

式中：Ax------样液中被测成分的峰面积；

C------混合标准溶液中被测成分的浓度；mg/mL；

A------混合标准溶液中被测成分的峰面积。

样品中被测成分的含量X以质量分数(％)表示，按式(5)计算：

$X=\frac{\mathrm{Cx}}{\mathrm{Co}}\×100...\left(5\right)$

式中：Cx------样液中被测成分的浓度，mg/mL；

Co------样液的浓度，mg/mL。

五、精密度试验

取按步骤三制备的供试品溶液，按步骤四连续测定5次，计算甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、丙酸RSD如下：

表1

六、回收率试验

在同样供试品溶液中分别加入不同量的各种成分标准品溶液做回收率试验，结果如下表：

表2

实施例2：

一、试剂和溶液

1、磷酸二氢铵

2、磷酸

3、甲酸标准品：纯度大于等于88.0％

4、乳酸标准品：纯度约85％

5、柠檬酸标准品：纯度大于等于99.5％

6、富马酸标准品：纯度大于等于99.0％

7、丙酸标准品：纯度大于等于99.5％

8、酚酞指示液：取酚酞1g，加95％乙醇100mL使溶解，即得。

9、氢氧化钠滴定液(1mol/L)：按中国药典2005年版二部附录XV F规定的方法配制和标定。

10、硫酸滴定液(0.5mol/L)：按中国药典2005年版二部附录XV F规定的方法配制和标定。

11、甲酸标准储备溶液

(1)配制

称取甲酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加去二氧化碳水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取甲酸标准储备溶液100mL，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定，至溶液显淡粉红色。

(3)结果计算

甲酸标准储备溶液浓度C₁(mg/mL)，按(1)式计算：

$C_1=\frac{C^{\′}\×V_1\×46.03}{100}...\left(1\right)$

式中：C′------氢氧化钠滴定液浓度，mol/L；

V₁------甲酸标准储备溶液所消耗氢氧化钠滴定液的体积，mL；

46.03------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于46.03mg的甲酸；

100------吸取甲酸标准储备溶液体积，mL。

12、乳酸标准储备溶液

(1)配制

称取乳酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取乳酸标准储备溶液100mL，加水50mL，精密加氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL，煮沸5分钟，加酚酞指示液2滴，趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

(3)结果计算

乳酸标准储备溶液浓度C₂(mg/mL)，按(2)式计算：

$C_2=\frac{2\×C^{\′\′}\×(V_3-V_2)\×90.08}{100}...\left(2\right)$

式中：C″------硫酸滴定液浓度，mol/L；

V₃------空白溶液所消耗硫酸滴定液的体积，mL；

V₂------乳酸标准储备溶液所消耗硫酸滴定液的体积，mL；

2------质子转移数；

90.08------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于90.08mg的乳酸；

100------吸取乳酸标准储备溶液体积，mL。

13、富马酸标准储备溶液：准确称取适量富马酸标准品，用水溶解并配成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4℃保存。

14、丙酸标准储备溶液

(1)配制

称取丙酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取丙酸标准储备溶液100mL，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定，至溶液显淡粉红色。

(3)结果计算

丙酸标准储备溶液浓度C₃(mg/mL)，按(3)式计算：

$C_3=\frac{C^{\′\′\′}\×V_4\×74.08}{100}...\left(3\right)$

式中：C′″------氢氧化钠滴定液浓度，mol/L；

V₄------丙酸标准储备溶液所消耗氢氧化钠滴定液的体积，mL；

74.08------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于74.08mg的丙酸；

10------吸取丙酸标准储备溶液体积，mL。

15、混合标准溶液：取2mL甲酸标准储备溶液，10mL乳酸标准储备溶液，0.10g(精密称定)柠檬酸，5mL富马酸标准储备溶液和5mL丙酸标准储备溶液于100mL容量瓶中，溶解，混匀，用水稀释至刻度，于4℃保存。

二、仪器设备

液相色谱仪和一般实验室仪器。

三、样品溶液

取样品1g，精密称定，加水稀释至100mL，搅拌2小时，静置1小时，过滤，弃去初滤液，收集续滤液，量取10mL续滤液，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，备用。(稀释度为1000)

四、测定

1、色谱条件

(1)色谱柱：Inertsil ODS-3柱[25cm×4.6mm(内径)，5μm]或与之相当的色谱柱；

(2)流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵溶液，用磷酸调节pH＝2.4，过0.45μm滤膜；

(3)流速：0.6mL/min；

(4)检测波长：210nm；

(5)进样体积：5μL。

2、色谱测定

取样品溶液，过0.45μm滤膜，精密量取续滤液5μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取混合标准溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算。在上述色谱条件下，样液中待测成分的出峰顺序为甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、丙酸。

3、结果计算

样品溶液中被测成分的浓度Cx(mg/mL)，按式(4)计算：

$\mathrm{Cx}=C\frac{\mathrm{Ax}}{A}...\left(4\right)$

式中：Ax------样液中被测成分的峰面积；

C------混合标准溶液中被测成分的浓度；mg/mL；

A------混合标准溶液中被测成分的峰面积。

样品中被测成分的含量X以质量分数(％)表示，按式(5)计算：

$X=\frac{\mathrm{Cx}}{\mathrm{Co}}\×100...\left(5\right)$

式中：Cx------样液中被测成分的浓度，mg/mL；

Co------样液的浓度，mg/mL。

五、精密度试验

取按步骤三制备的供试品溶液，按步骤四连续测定5次，计算甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、丙酸RSD如下：

表3

六、回收率试验

在同样供试品溶液中分别加入不同量的各种成分标准品溶液做回收率试验，结果如下表：

表4

实施例3：

一、试剂和溶液

1、磷酸二氢铵

2、磷酸

3、甲酸标准品：纯度大于等于88.0％

4、乳酸标准品：纯度约85％

5、柠檬酸标准品：纯度大于等于99.5％

6、富马酸标准品：纯度大于等于99.0％

7、丙酸标准品：纯度大于等于99.5％

8、酚酞指示液：取酚酞1g，加95％乙醇100mL使溶解，即得。

9、氢氧化钠滴定液(1mol/L)：按中国药典2005年版二部附录XV F规定的方法配制和标定。

10、硫酸滴定液(0.5mol/L)：按中国药典2005年版二部附录XV F规定的方法配制和标定。

11、甲酸标准储备溶液

(1)配制

称取甲酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加去二氧化碳水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取甲酸标准储备溶液100mL，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定，至溶液显淡粉红色。

(3)结果计算

甲酸标准储备溶液浓度C₁(mg/mL)，按(1)式计算：

$C_1=\frac{C^{\′}\×V_1\×46.03}{100}...\left(1\right)$

式中：C′------氢氧化钠滴定液浓度，mol/L；

V₁------甲酸标准储备溶液所消耗氢氧化钠滴定液的体积，mL；

46.03------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于46.03mg的甲酸；

100------吸取甲酸标准储备溶液体积，mL。

12、乳酸标准储备溶液

(1)配制

称取乳酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取乳酸标准储备溶液100mL，加水50mL，精密加氢氧化钠滴定液(1mol/L)25mL，煮沸5分钟，加酚酞指示液2滴，趁热用硫酸滴定液(0.5mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

(3)结果计算

乳酸标准储备溶液浓度C₂(mg/mL)，按(2)式计算：

$C_2=\frac{2\×C^{\′\′}\×(V_3-V_2)\×90.08}{100}...\left(2\right)$

式中：C″------硫酸滴定液浓度，mol/L；

V₃------空白溶液所消耗硫酸滴定液的体积，mL；

V₂------乳酸标准储备溶液所消耗硫酸滴定液的体积，mL；

2------质子转移数；

90.08------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于90.08mg的乳酸；

100------吸取乳酸标准储备溶液体积，mL。

13、富马酸标准储备溶液：准确称取适量富马酸标准品，用水溶解并配成浓度为1.0mg/mL的标准储备液，于4℃保存。

14、丙酸标准储备溶液

(1)配制

称取丙酸标准品约5.0g，精密称定，置500mL量瓶中，加水至刻度，混匀。于4℃保存。

(2)标定

精密吸取丙酸标准储备溶液100mL，加酚酞指示液2滴，用氢氧化钠滴定液(1mol/L)滴定，至溶液显淡粉红色。

(3)结果计算

丙酸标准储备溶液浓度C₃(mg/mL)，按(3)式计算：

$C_3=\frac{C^{\′\′\′}\×V_4\×74.08}{100}...\left(3\right)$

式中：C′″------氢氧化钠滴定液浓度，mol/L；

V₄------丙酸标准储备溶液所消耗氢氧化钠滴定液的体积，mL；

74.08------每毫升1.0mol/L氢氧化钠滴定液相当于74.08mg的丙酸；

100------吸取丙酸标准储备溶液体积，mL。

15、混合标准溶液：取2mL甲酸标准储备溶液，10mL乳酸标准储备溶液，0.10g(精密称定)柠檬酸，5mL富马酸标准储备溶液和5mL丙酸标准储备溶液于100mL容量瓶中，溶解，混匀，用水稀释至刻度，于4℃保存。

二、仪器设备

液相色谱仪和一般实验室仪器。

三、样品溶液

取样品1g，精密称定，加水稀释至200mL，搅拌2小时，静置1小时，过滤，弃去初滤液，收集续滤液，量取10mL续滤液，置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，备用。(稀释度为2000)

四、测定

1、色谱条件

(1)色谱柱：Inertsil ODS-3柱[25cm×4.6mm(内径)，5μm]或与之相当的色谱柱；

(2)流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵溶液，用磷酸调节pH＝2.4，过0.45μm滤膜；

(3)流速：1.0mL/min；

(4)检测波长：210nm；

(5)进样体积：20μL。

2、色谱测定

取样品溶液，过0.45μm滤膜，精密量取续滤液20μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取混合标准溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算。在上述色谱条件下，样液中待测成分的出峰顺序为甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、丙酸。

3、结果计算

样品溶液中被测成分的浓度Cx(mg/mL)，按式(4)计算：

$\mathrm{Cx}=C\frac{\mathrm{Ax}}{A}...\left(4\right)$

式中：Ax------样液中被测成分的峰面积；

C------混合标准溶液中被测成分的浓度；mg/mL；

A------混合标准溶液中被测成分的峰面积。

样品中被测成分的含量X以质量分数(％)表示，按式(5)计算：

$X=\frac{\mathrm{Cx}}{\mathrm{Co}}\×100...\left(5\right)$

式中：Cx------样液中被测成分的浓度，mg/mL；

Co------样液的浓度，mg/mL。

五、精密度试验

取按步骤三制备的供试品溶液，按步骤四连续测定5次，计算甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、丙酸RSD如下：

表5

六、回收率试验

在同样供试品溶液中分别加入不同量的各种成分标准品溶液做回收率试验，结果如下表：

表6

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1、一种同时测定饲用酸化剂中多种有机酸含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别配制甲酸、乳酸、柠檬酸、富马酸和丙酸的标准储备溶液，然后混合定容配制成混合标准溶液；

(2)取待测的饲用酸化剂试样稀释500-2000倍；

(3)稀释后的样液过滤后取5-20μL注入液相色谱仪，在流动相的流速为0.6-1.0mL/min的条件下记录210nm波长下的色谱图；另取等量的混合标准溶液同上述方法测定，按外标法以峰面积计算试样中有机酸的含量。

2、如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中混合标准溶液中甲酸的浓度为0.2mg/mL；乳酸的浓度为1.0mg/mL；柠檬酸的浓度为1.0mg/mL；富马酸的浓度为0.05mg/mL；丙酸的浓度为0.5mg/mL。

3、如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中试样稀释1000倍。

4、如权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中的进样量为10μL。

5、如权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中流动相为0.1mol/L的磷酸二氢铵溶液。

6、如权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中流动相的流速为1.0mL/min。