CN112661692A - 一种异吲哚啉衍生类化合物、制备方法及减肥应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药领域，涉及一种异吲哚啉衍生类化合物、制备方法及减肥应用。所述的异吲哚啉衍生类化合物结构式如式I所示：

药理学研究表明，本发明制备的化合物可以有效减轻高脂饮食诱导小鼠体重，同时降低肝脏脂肪和附睾脂肪含量，具有良好的减肥效果，可用于制备减肥相关药物或保健品。

Description

一种异吲哚啉衍生类化合物、制备方法及减肥应用

技术领域

本发明属于医药领域，涉及一种异吲哚啉衍生类化合物、制备方法及其在制备减肥相关药物或保健品中的应用。

背景技术

肥胖是指由于体内脂肪积聚过多而造成的人体病理生理改变。据世界卫生组织统计，它是目前发病率急剧上升却最容易被忽视的一种慢性疾病，并且会伴随多种严重的并发症。目前，肥胖症的治疗方法主要有运动、药物干预、保健疗法、手术干预等。由于药物治疗是顺应性最强、疗效最可靠的方法，减肥药物的研制也逐渐成为全球药物研发的重点。

美国食品药物管理局(FDA)批准了6种用于治疗肥胖症药物，均由于中枢神经系统和心血管系统等方面的不良反应，上市不久便撤市。本发明创新性的合成了一种异吲哚啉衍生类化合物，吸收度好，且毒副作用小，以期得到可以用于制备减肥相关药物或保健品的全新化合物，现有技术并未见到相关结构的报道。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的是提供一种异吲哚啉衍生类化合物的制备方法和应用，此类化合物有效降低体重，降低肝脏脂肪和附睾脂肪含量，具有良好的减肥效果。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。

一种异吲哚啉衍生类化合物，其结构通式I如下：

式中：R₁选自-OCH₃或者-OEt，R₂选自-OCH₃或者-OEt。

本发明另一目的为提供异吲哚啉衍生类化合物式I的合成路线为：

部分化合物的¹H-NMR(400MHz)和¹³C-NMR(125MHz)如下：

化合物1：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:2.35(m,2H),2.54(m,1H),2.78(m,1H),2.96(m,1H),3.19(m,1H),3.29-3.46(m,3H),3.54(m,1H),3.70(m,1H),3.84(m,9H),3.99(s,4H),4.66(m,1H),6.58-6.66(m,3H),6.79(d,1H),6.93(m,2H),7.09(s,4H),7.35(m,2H).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:34.40,41.11,50.75,55.40,56.04,62.44,73.47,112.56,113.96,122.64,123.65,125.58,128.67,131.21,135.50,139.30,148.08,149.62,159.12,170.73.

化合物2：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:1.46(t,3H),2.35(m,2H),2.55(m,1H),2.79(m,1H),2.96(m,1H),3.19(m,1H),3.29-3.46(m,3H),3.56(m,1H),3.69(m,1H),3.84(s,6H),3.97(m,5H),4.19(m,1H),4.65(m,1H),6.60-6.66(m,3H),6.77(d,1H),6.94(m,2H),7.09(s,4H),7.36(m,2H).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:14.80,34.40,41.11,50.75,55.40,56.03,56.32,62.44,64.46,73.47,113.03,113.96,114.52,122.26,123.65,125.58,128.67,131.30,135.50,139.30,147.16,149.22,159.12,170.73.

化合物3：¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:1.49(m,6H),2.35(m,2H),2.54(m,1H),2.78(m,1H),2.96(m,1H),3.18(m,1H),3.31-3.48(m,3H),3.55(m,1H),3.71(m,1H),3.84(s,3H),3.95(m,5H),4.11(m,1H),4.19(m,2H),4.66(m,1H),6.63(m,2H),6.76(m,2H),6.94(m,2H),7.08(s,4H),7.38(m,2H).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:14.71,34.40,41.11,50.75,55.40,56.03,62.44,63.97,64.46,73.47,113.96,115.04,122.06,123.65,125.58,128.67,132.00,135.50,139.30,147.76,150.80,159.12,170.73.

本发明所述的一种异吲哚啉衍生类化合物具有良好的减肥效果，能够有效体重，同时降低肝脏脂肪和附睾脂肪含量，具有良好的减肥效果。说明本发明所述的异吲哚啉衍生类化合物在治疗肥胖中具有积极意义，可以进行更加深入的研究。

所述的治疗肥胖的药物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备减肥相关药物或保健品中的应用，特别是提供了一种异吲哚啉衍生类化合物在制备血清脂质紊乱，能量代谢紊乱疾病中的应用。

与现有技术比，本发明的有益效果如下：

本发明的化合物在治疗肥胖中具有很好的效果。进一步地，从本发明提供的研究结果可以看出：本发明的化合物能够有效降低高脂饮食诱导小鼠体重、肝脏脂肪及附睾脂肪重量。综上所述，将本发明所述的一种异吲哚啉衍生类化合物用于制备减肥相关药物或保健品具有很好的开发前景。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。

附图说明

图1：本发明所得异吲哚啉衍生类化合物对高脂饮食诱导小鼠体重的影响。

图2：本发明所得异吲哚啉衍生类化合物对高脂饮食诱导小鼠附睾脂肪的影响。

图3：本发明所得异吲哚啉衍生类化合物对高脂饮食诱导小鼠脂肪细胞形态的影响。

图4：本发明所得异吲哚啉衍生类化合物对高脂饮食诱导小鼠肝脏的影响。

具体实施方式

下列合成实例、生物测试结果可用来进一步说明本发明，但不意味着限制本发明。

合成实例

实施例1、化合物1的制备

(1)2-(2-硝基-乙基)异吲哚啉的合成：

在0-5℃和氮气气氛下，向反应瓶中加入异吲哚啉(7.1g，59.58mmol)、溴化亚铜(7.2g，50.19mmol)、三乙胺(2.0g，19.76mmol)和四氢呋喃(50mL)，搅拌下滴加1-溴-2-硝基乙烷(18.5g，120.16mmol)，滴毕，缓慢升至30-35℃，搅拌反应36小时，TLC检测反应结束。冷却至室温，过滤除去不溶物，常压回收溶剂，减压蒸馏得到浅黄色液体2-(2-硝基-乙基)异吲哚啉，9.46g，产率82.6％。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:3.11(t,2H),3.79(s,4H),4.63(t,1H),4.96(t,1H),7.33-7.46(m,4H).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:52.73,60.97,71.57,124.78,127.96,139.81.LC-MS(ESI,pos,ion)m/z:193.09[M+H].

(2)3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)-2-硝基丙烷-1-醇的合成：

在室温和氮气气氛下，向反应瓶中加入一水合醋酸铜(0.88g，4.42mmol)、手性配体(1S,3R,7R)-苯基-3-(1-苯并三氮唑基)-1H,6H-萘并[1,2-e]哌啶环并[2,1-b][1,3]噁嗪(1.90g，4.42mmol)和四氢呋喃(55mL)，升温至50-60℃，搅拌反应6小时至溶液澄清。降至室温，加入对甲氧基苯甲醛(6.81g，50.00mmol)，搅拌30分钟后降温至-20℃，依次缓慢滴加2-(2-硝基-乙基)异吲哚啉(9.46g，49.21mmol)的四氢呋喃(55mL)溶液和1,4-二氮杂二环[2.2.2]辛烷(DABCO)的四氢呋喃(55mL)溶液，保持-20℃搅拌反应24-28小时，TLC检测反应完成。低温下用饱和氯化铵水溶液(50mL)淬灭反应，升至室温，用二氯甲烷萃取三次，合并有机相，无水硫酸镁干燥。浓缩，得到浅黄色固体3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)-2-硝基丙烷-1-醇，11.13g，产率68.9％。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:2.79(t,1H),3.04(t,1H),3.38(d,1H),3.84(s,3H),3.99(s,4H),4.14(m,1H),4.80(m,1H),6.94(d,2H),7.09(s,4H),7.36(d,2H).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:55.40,57.80,62.44,72.99,79.72,113.90,123.65,125.58,128.76,135.48,139.30,159.12.LC-MS(ESI,pos,ion)m/z:329.14[M+H].

(3)2-氨基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-1-醇的合成：

在氢化反应瓶中加入3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)-2-硝基丙烷-1-醇(11.13g，33.90mmol)、10％钯碳(Pd/C)(3.53g)和甲醇(50mL)，置换三遍氮气，然后置换三遍氢气，升高温度至50-55℃，氢气压力控制为0.5-0.8MPa，搅拌反应至不再吸氢，约8小时。过滤回收催化剂，减压回收溶剂，剩余物用乙酸乙酯和正己烷(体积比为2:1)重结晶，得到类白色固体2-氨基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-1-醇，9.13g，产率90.3％。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:2.50(m,2H),2.96(m,1H),3.38(d,1H),3.86(s,3H),3.92(s,4H),4.66(t,1H),4.93(d,2H),6.94(d,2H),7.03(s,4H),7.39(d,2H).¹³C-NMR(125MHz,CDCl₃)δ:53.77,55.40,58.32,62.44,74.90,74.90,114.05,123.65,125.58,128.61,135.52,139.30,159.23.LC-MS(ESI,pos,ion)m/z:299.17[M+H].

(4)化合物1的合成：

将2-氨基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-1-醇(9.13g，30.61mmol)，2-氯-N-(3,4-二甲氧基苯乙基)乙酰胺(10.57g，41.00mmol)，碘化钠(6.00g，40.00mmol)和碳酸钾(9.26g，67.00mmol)加入二甲基甲酰胺(80mL)中，并在50℃下搅拌80小时。蒸馏除去溶剂，将粗产物溶于水(80mL)中并用二氯甲烷(4×20mL)萃取。将合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩除去溶剂。通过柱色谱(洗脱剂：EA:丙酮＝1:1)纯化粗产物。得到黄色固体N-(3,4-二甲氧基苯乙基)-2-((1-羟基-3-(异吲哚啉-2-基)-1-(2,3,7,8-四氢苯并[1,2-b:4,5-b']双([1,4]二氧杂环己烯)-5-基)丙-2-基)氨基)乙酰胺(化合物1)，11.36g，产率71.4％。

实施例2、化合物2的合成

将2-氨基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-1-醇(14.92g，50.00mmol)，2-氯-N-(4-乙氧基-3-甲氧基苯乙基)乙酰胺(18.20g，66.99mmol)，碘化钠(9.74g，65.00mmol)和碳酸钾(14.51g，105.00mmol)加入二甲基甲酰胺(120mL)中，并在50℃下搅拌80小时。蒸馏除去溶剂，将粗产物溶于水(120mL)中并用二氯甲烷(4×30mL)萃取。将合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩除去溶剂。通过柱色谱(洗脱剂：EA：丙酮＝1：1)纯化粗产物。得到淡黄色固体N-(4-乙氧基-3-甲氧基苯乙基)-2-((1-羟基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-2-基)氨基)乙酰胺(化合物2)，17.48g，产率65.5％。

实施例3、化合物3的合成

将2-氨基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-1-醇(14.92g，50.00mmol)，2-氯-N-(3,4-二乙氧基苯乙基)乙酰胺(19.14g，66.99mmol)，碘化钠(9.74g，65.00mmol)和碳酸钾(14.51g，105.00mmol)加入二甲基甲酰胺(120mL)中，并在50℃下搅拌80小时。蒸馏除去溶剂，将粗产物溶于水(120mL)中并用二氯甲烷(4×30mL)萃取。将合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩除去溶剂。通过柱色谱(洗脱剂：EA：丙酮＝1：1)纯化粗产物。得到淡黄色固体N-(3,4-二乙氧基苯乙基)-2-((1-羟基-3-(异二氢吲哚-2-基)-1-(4-甲氧基苯基)丙烷-2-基)氨基)乙酰胺(化合物3)，21.52g，产率78.6％。

实验例1、本发明所得化合物对小鼠体重的影响

C57BL/6小鼠饲养在SPF级动物实验室，室温21℃-23℃，每12hr光暗循环，诱导肥胖小鼠所用的高脂饲料脂肪含量60％。小鼠成长至8周龄时，随机分成对照组和给药组，每组10只。在用高脂饲料喂养的同时，腹腔注射本发明所得化合物1、化合物2和化合物3，剂量为80mg/kg。每天给药一次，给药持续4周。在整个实验周期内，每天记录小鼠的体重。结果如图1，给药4周后，本发明所得化合物1、化合物2和化合物3均对高脂诱导肥胖小鼠模型的体重增加具有制作用，且化合物2作用最明显。

实验例2、本发明所得化合物对小鼠脂肪重量和脂肪细胞形态的影响

4周给药结束后，断颈处死小鼠，取腹股沟部脂肪，进行测量，称重。结果见图2。结果表明中本发明所得化合物1、化合物2和化合物3对腹股沟部脂肪(WAT)均具有减少作用。

同时使用H&E染色法测定本发明所得化合物对脂肪细胞大小和形态的影响。苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining)，简称HE染色法，石蜡切片技术里常用的染色法之一。结肠组织投入预先配好的固定液中(10％福尔马林，Bouin氏固定液)，使用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂，逐渐脱去组织块中的水份。再将组织块置于透明剂二甲苯中透明，以二甲苯替换出组织块的中酒精。将已透明的组织块置于已溶化的石蜡中，放入溶蜡箱保温。待石蜡完全浸入组织块后进行包埋。将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5—8微米厚。切下的薄片往往皱折，要放到加热的水中烫平，再贴到载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。染色前，用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，最后入蒸馏水，进行H&E染色。H&E染色过程是将已入蒸馏水后的切片放入苏木精水溶液中染色数分钟。酸水及氨水中分色，各数秒钟。流水冲洗1小时后入蒸馏水片刻。入70％和90％酒精中脱水各10分钟。入酒精伊红染色液染色2—3分钟。染色后的切片经纯酒精脱水，再经二甲苯使切片透明。将已透明的切片滴上加拿大树胶，盖上盖玻片封固。待树胶略干后，贴上标笺，显微镜下拍照观察。结果如附图3所示。结果显示，模型组脂肪细胞直径较大，视野内细胞数较少，本发明所制备的化合物处理后，小鼠脂肪细胞直径明显变小，说明本发明所得化合物可以显著降低脂肪细胞的大小，具有优良的降脂作用。

实验例3、本发明所得化合物对小鼠肝脏的影响

断颈处死小鼠，取小鼠肝脏进行H&E染色，以测定本发明所得化合物对脂肪组织的影响。结果如图4，模型组肝脏组织中的脂滴空泡清晰可见，本发明所得化合物在一定程度上减轻了这种脂肪病变，脂滴空泡明显减少。

以上说明本发明所制备的化合物在预防或治疗肥胖和相关病症中有积极意义，为预防或治疗肥胖和相关病症的药物研发提供了一条新的研究思路。

Claims (6)

1.一种异吲哚啉衍生类化合物，其化学结构通式如式I所示，

式中：R₁选自-OCH₃或者-OEt，R₂选自-OCH₃或者-OEt。

2.如权利要求1所述的异吲哚啉衍生类化合物式I的合成路线为。

3.如权利要求1所述的异吲哚啉衍生类化合物的制备方法，包括如下步骤：

4.如权利要求1所述的异吲哚啉衍生类化合物是在制备减肥相关药物或保健品的用途。

5.如权利要求4所述的用途，其特征是，用于制备治疗血清脂质紊乱，能量代谢紊乱疾病的药物或保健品中的用途。

6.如权利要求5所述的药物或保健品，采用上述权利要求1制备的用于减肥的异吲哚啉衍生类化合物，加入辅料，制备成药剂常规剂型。

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