CN112618632A - 一种祛黄褐斑的中药组合物及其应用、祛黄褐斑的药品 - Google Patents

一种祛黄褐斑的中药组合物及其应用、祛黄褐斑的药品 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种祛黄褐斑的中药组合物及其应用、祛黄褐斑的药品，属于中药组合物技术领域，所述中药组合物包括以下重量份的原料：破壁花粉提取物0.1～5份和枸杞提取物0.1～5份。本发明将枸杞提取物和破壁花粉提取物进行复配，通过融合两者的双重成分，增强抗氧化和自由基清除能力，加快人体代谢，具有能够祛斑养颜、美化容貌、滋阴养气的作用。本发明的中药组合物具有明显的抗氧化和自由基清除的作用，对酪氨酸酶活性有明显的抑制作用，能够达到祛斑养颜、美化容貌的目的。

Description

一种祛黄褐斑的中药组合物及其应用、祛黄褐斑的药品
技术领域
本发明涉及中药组合物技术领域，尤其涉及一种祛黄褐斑的中药组合物及其应用、祛黄褐斑的药品。
背景技术
黄褐斑是常见的皮肤色素沉着，多为颜面部对称的淡褐色至深褐色斑片，黑素生成过多是黄褐斑发生的根本原因。一般来说，酪氨酸酶是黑素细胞合成过程中所需的最重要酶。细胞内黑素合成受酪氨酸酶调节，酪氨酸酶的表达及活性增加可使黑素细胞合成色素增加。体内黑色素的合成途径为：酪氨酸经过多巴、多巴醌，直至吲哚醌为止的各种中间氧化物质聚合，形成了黑色素。现有技术中用于抑制酪氨酸酶的主要有维生素C、谷胱甘肽等，但目前缺少一种针对性抑制酪氨酸酶的中药组合物。
发明内容
本发明的目的在于提供一种祛黄褐斑的中药组合物及其应用、祛黄褐斑的药品，本发明的中药组合物具有明显的抗氧化和自由基清除的作用，对酪氨酸酶活性有明显的抑制作用，能够达到祛斑养颜、美化容貌的目的。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种祛黄褐斑的中药组合物，包括以下重量份的原料：破壁花粉提取物0.1～5份和枸杞提取物0.1～5份。
优选的，所述破壁花粉包括破壁蜂花粉。
优选的，所述蜂花粉选自益母草蜂花粉、油菜蜂花粉、菊花蜂花粉、玉米蜂花粉、玫瑰蜂花粉和茶花蜂花粉中的一种或几种。
优选的，所述破壁花粉提取物或枸杞提取物的制备方法包括以下步骤：
1)将破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂混合，进行高速剪切提取，得到花粉提取液或枸杞提取液；
所述溶剂包括水或体积分数为30％～95％的乙醇水溶液；
2)对所述花粉提取液或枸杞提取液进行减压浓缩，得到花粉浓缩液或枸杞浓缩液；采用大孔吸附树脂对所述花粉浓缩液或枸杞浓缩液进行洗脱，对得到的花粉洗脱液或枸杞洗脱液减压回收、干燥，得到破壁花粉提取物或枸杞提取物；所述洗脱采用的洗脱剂选自体积浓度为30％～90％的乙醇水溶液中的一种或几种。
优选的，所述破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂的质量体积比为1g：(1～15)mL。
优选的，所述高速剪切提取的转速为6000～18000r/min；所述高速剪切提取的时间为2～10min。
优选的，所述大孔吸附树脂选自AB-8、D101、HPD600、HPD700和XDA-8中的一种或几种。
本发明还提供了上述方案所述中药组合物在制备祛黄褐斑的药品中的应用。
本发明还提供了一种祛黄褐斑的药品，包括药物活性组分和药学上可接受的辅料，所述药物活性组分包括上述发囊所述中药组合物。
优选的，所述药物活性组分还包括维生素C。
本发明提供了一种祛黄褐斑的中药组合物，包括以下重量份的原料：破壁花粉提取物0.1～5份和枸杞提取物0.1～5份。本发明中，所述破壁花粉提取物和枸杞提取物中的关键活性成分为黄酮类物质，本发明将枸杞黄酮提取物和破壁花粉黄酮提取物进行复配互补，通过融合两者的双重成分，增强抗氧化和自由基清除能力，加快人体代谢，具有能够祛斑养颜、美化容貌、滋阴养气的作用。本发明的中药组合物具有明显的抗氧化和自由基清除的作用，对酪氨酸酶活性有明显的抑制作用，能够达到祛斑养颜、美化容貌的目的。
具体实施方式
本发明提供了一种祛黄褐斑的中药组合物，包括以下重量份的原料：破壁花粉提取物0.1～5份和枸杞提取物0.1～5份。
在本发明中，所述破壁花粉包括破壁蜂花粉。
在本发明中，所说蜂花粉选自益母草蜂花粉、油菜蜂花粉、菊花蜂花粉、玉米蜂花粉、玫瑰蜂花粉和茶花蜂花粉中的一种或几种。
在本发明中，所述破壁花粉提取物或枸杞提取物的制备方法分别包括以下步骤：
1)将破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂混合，进行高速剪切提取，得到花粉提取液或枸杞提取液；
所述溶剂包括水或体积分数为30％～95％的乙醇水溶液；
2)对所述花粉提取液或枸杞提取液进行减压浓缩，得到花粉浓缩液或枸杞浓缩液；采用大孔吸附树脂对所述花粉浓缩液或枸杞浓缩液进行洗脱，对得到的花粉洗脱液或枸杞洗脱液减压回收、干燥，得到破壁花粉提取物或枸杞提取物；所述洗脱采用的洗脱剂选自体积浓度为30％～90％的乙醇水溶液中的一种或几种。
本发明首先将破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂混合，进行高速剪切提取，得到花粉提取液或枸杞提取液。在本发明中，所述破壁花粉是对花粉依次进行破碎和破壁，使得花粉中的营养成分得以充分释放；在本发明中，所述破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂的质量体积比优选为1g：(1～15)mL，进一步优选为1g：(2～10)mL，更进一步优选为1g：(5～8)mL。在本发明中，作为溶剂的所述乙醇水溶液的体积分数优选为50％～80％，进一步优选为60％；在本发明中，所述高速剪切提取的转速优选为6000～18000r/min，进一步优选为8000～15000r/min，更进一步优选为10000～12000r/min；所述高速剪切提取的时间优选为2～10min，更优选为5～8min。
在本发明中，所述高速剪切提取的作用是使得枸杞破碎物和破壁花粉中有效成分高效溶出。
得到花粉提取液或枸杞提取液后，本发明对所述花粉提取液或枸杞提取液进行减压浓缩，得到花粉浓缩液或枸杞浓缩液；采用大孔吸附树脂对所述花粉浓缩液或枸杞浓缩液进行洗脱，对得到的花粉洗脱液或枸杞洗脱液减压回收、干燥，得到破壁花粉提取物或枸杞提取物。在本发明中，利用大孔吸附树脂对所述浓缩液进行洗脱的作用是最大限度的使枸杞和花粉中的活性组分总黄酮和多糖等得到纯化和提高。在本发明中，所述大孔吸附树脂优选的选自AB-8、D101、HPD600、HPD700和XDA-8中的一种或几种。在本发明中，所述洗脱首先采用水洗脱除杂，进一步采用乙醇水溶液洗脱，所述洗脱采用的洗脱液进一步选自体积浓度为60％的乙醇水溶液。
在本发明中，当所述洗脱液为乙醇水溶液时，所述减压浓缩的时间优选的以无乙醇为止；当所述洗脱液为水时，所述减压浓缩的时间以洗脱液浓缩至原液体积的1/5为止。
在本发明中，所述干燥的方式优选的包括冷冻干燥、减压真空干燥、喷雾干燥或微波干燥；所述微波干燥的温度优选为50℃。
在本发明中，所述中药组合物的制备方法优选的包括以下步骤：将枸杞提取物和破壁花粉提取物混合，得到的混合物为祛黄褐斑的中药组合物。本发明对所述混合的方式没有特殊限制，以混合均匀为准。
本发明在得到所述混合物后，优选的还包括对所述混合物进行灭菌；所述灭菌的方式优选为电子束辐照灭菌，所述辐照灭菌的电子的强度优选为8～10kGy；所述辐照灭菌的时间优选为1～2min；所述辐照灭菌的次数优选为2～3次，两次辐照灭菌的间隔时间优选为1～2min。
本发明还提供了上述方案所述中药组合物在制备祛黄褐斑的药品中的应用。
本发明还提供了一种祛黄褐斑的药品，包括药物活性组分和药学上可接受的辅料，所述药物活性组分包括上述方案所述中药组合物。在本发明中，所述药品优选包括以下重量份的组分：
破壁花粉提取物0.1～5份；
枸杞提取物0.1～5份；
辅料0.1～10份。
在本发明中，所述药品更优选包括1～5份的辅料，最优选为2～3份。在本发明中，所述辅料选自淀粉、甘露醇、硬脂酸镁、滑石粉和香精中的一种或几种。在本发明具体实施过程中，所述辅料包括淀粉、甘露醇、硬脂酸镁、滑石粉和香精，所述淀粉、甘露醇、硬脂酸镁、滑石粉和香精的质量比为(1～2)：(0.5～1)：(0.5～1)：(0.5～1)：(0.5～1)。
在本发明中，所述药物活性组分优选的还包括维生素C。在本发明中，维生素C不仅能够增加人体免疫力，增强对皮肤的营养供给，促进细胞新陈代谢和表皮细胞更新，而且可以使产品不易氧化、变质，降低药品在储存过程中活性物质的损失，延长产品的保存时间。在本发明中，所述破壁花粉提取物和维生素C的质量比优选为1：(1～2)。
在本发明中，所述药品的制备方法优选包括以下步骤：
将辅料和药物活性组分混合，得到的混合物为祛黄褐斑的药品。本发明对所述混合的方式没有特殊限制，以混合均匀为准。本发明在得到所述混合物后，优选的还包括对所述混合物进行灭菌；所述灭菌的方式优选为电子束辐照灭菌，所述辐照灭菌的电子的强度优选为8～10kGy；所述辐照灭菌的时间优选为1～2min；所述辐照灭菌的次数优选为2～3次，两次辐照灭菌的间隔时间优选为1～2min。
在本发明中，所述药品的使用方式优选为口服。
在本发明中，所述药品的剂型包括片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊剂或者泡腾片。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物5g、破壁花粉提取物1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为5：1的比例进行充分搅拌混合。
实施例2
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物4g、破壁花粉提取物1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为4：1的比例进行充分搅拌混合。
实施例3
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物3g、破壁花粉提取物1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为3：1的比例进行充分搅拌混合。
实施例4
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物2g、破壁花粉提取物1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为2：1的比例进行充分搅拌混合。
实施例5
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物1g、破壁花粉提取物1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为1：1的比例进行充分搅拌混合。
实施例6
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物0.1g、破壁花粉提取物1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为0.1：1的比例进行充分搅拌混合。
实施例7
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物1g、破壁花粉提取物0.1g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为1：0.1的比例进行充分搅拌混合。
实施例8
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物1g、破壁花粉提取物2g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为1：2的比例进行充分搅拌混合。
实施例9
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物1g、破壁花粉提取物3g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为1：3的比例进行充分搅拌混合。
实施例10
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物1g、破壁花粉提取物4g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g。
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为1：4的比例进行充分搅拌混合。
实施例11
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下重量份数的各组分，枸杞提取物1g、破壁花粉提取物5g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g
所述破壁花粉提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g花粉粉碎、破壁预处理后用水以料液比1：8高速剪切提取，过滤提取液，得破壁花粉提取液和花粉提取渣。
(2)减压回收(1)中破壁花粉提取液，提取液浓缩至1/4上大孔吸附树脂分离，用不同浓度乙醇洗脱，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得破壁花粉提取物；
(3)所述(1)的高速剪切提取，高速剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)所述(2)中大孔吸附树脂为AB-8，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收30％、60％、90％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，优选60％乙醇洗脱部位为破壁花粉提取物。
所述枸杞提取物的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)将100g枸杞粉碎预处理后以60％乙醇以料液比1：10高速剪切提取，过滤提取液，得提枸杞取液和提取后枸杞渣；
(2)减压回收(1)中枸杞提取液，减压回收到无醇味时，浓缩液上大孔吸附树脂分离，回收不同浓度乙醇洗脱部位，减压回收溶剂，进行干燥，得枸杞提取物。
(3)步骤(1)中，所述的高速剪切提取，剪切转速为18000r/min，剪切提取时间为10min。
(4)步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为HPD600，不同浓度的乙醇洗脱包括：30％、60％、90％乙醇。
(5)步骤(2)中，所述分别减压回收60％乙醇洗脱部位，减压真空干燥，得到枸杞提取物。
一种祛黄褐斑的组合物，包括以下具体步骤：
将枸杞提取物、破壁花粉提取物按照质量比为1：5的比例进行充分搅拌混合。
对实施例1～实施例11(1～11号)的中药组合物进行总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、酪氨酸酶活性的抑制率体外功能评价和总黄酮含量测定，测定方法如下：
1)11种不同样品总抗氧化能力测定，具体操作如下：
精密称取1～11号样品适量，用水配制成浓度为1mg/ml样品溶液，按说明书加入各试剂，混匀，放置10min，用蒸馏水调零，在波长520nm处分别检测吸光度值(A测)、对照管吸光度值(A对)，总抗氧化能力计算公式为
总抗氧化能力(U/mg)＝(A测-A对)/0.01/30×4.6
总抗氧化能力的定义，在37℃时(反应时间30min)，每分钟每毫升样品使反应体系吸光度(A)值每增加0.01时，为一个总抗氧化能力单位。
2)11种不同样品清除DPPH自由基能力测定，具体操作如下：
精密称取0.0395g DPPH，用95％的乙醇溶解并定容到100mL，得到1mmol/L DPPH的储备液，避光保存，备用。精密量取20mL储备液用95％的乙醇稀释定容至100mL，即得到0.2mmol/L DPPH溶液。将0.5mL上述1～11号样品溶液添加到2.0mL，0.2mmol/L DPPH溶液中，充分振荡，在室温下避光放置30min，然后在波长517nm处检测吸光度值(Ai)，对照管用95％乙醇代替DPPH溶液检测吸光度值(Aj)，Ac为蒸馏水代替样品的空白对照吸光值DPPH。清除率计算公式为：结果见下表1。
R(％)＝[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％
3)11种不同样品对酪氨酸酶活性的抑制测定，具体操作如下：
阳性对照物用PH6.8磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释成：1mg/ml、0.2mg/ml、0.04mg/ml、0.008mg/ml系列浓度梯度用以验证实验系统。受试物处理：受试物用磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液稀释为多级浓度样品。参照表2，使用10ml试管设立样品管(T)、样品本底(T0)、酶反应管(C)和溶剂本底(C0)，每一样品的每个受试浓度的样品管(T)需设立3支平行管，同时酶反应管(C)也需设立3支平行管。在样品管(T)和样品本底(T0)中各加入1ml相同浓度的样品溶液，酶反应管(C)和溶剂本底(C0)则分别加入1ml磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液。在样品管(T)和酶反应管(C)中各加入0.5ml酪氨酸酶溶液，样品本底(T0)与溶剂本底(C0)以0.5ml磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液代替，将样品和酪氨酸酶充分混合，置37℃水浴孵育10min。依次在各管中加入2ml的左旋多巴溶液，控制每管反应时间为5min,即刻将各管反应溶液移入比色皿中，在475nm处测定吸光值。结果见下表1。
表1样品加液要求
Figure BDA0002906848540000191
4)11种不同样品中总黄酮含量测定，具体操作如下：
标准曲线的绘制精密称取芦丁标准品10mg，加65％乙醇溶液溶解定容至100ml容量瓶中，超升至完全溶解，分别取标准溶液0ml,1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,分别置于5ml容量瓶中，用65％乙醇溶液补足至5mL，分别精密加入10％亚硝酸钠溶液0.3mL，摇匀,放置6min。加入10％硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置6min，加入8％氢氧化钠溶液2mL，摇匀，用65％乙醇定容至10ml，摇匀，放置15min。用1cm比色皿，于510nm波长处，以试剂空白为参比溶液，测定各溶液的吸光度。以芦丁质量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
精密吸取号待测上述1～11号样品溶液各1ml，置于10.00mL容量瓶中，按照以上芦丁标准溶液配制方法进行操作。根据标准曲线或通过回归方程计算，求出待测溶液中黄酮类化合物的含量，其单位为mg/ml。待测溶液的吸光度值应在标准曲线的线性范围内。结果见下表2。由表2可以看出总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、酪氨酸酶活性的抑制率基本随着总黄酮含量成正相关，当枸杞提取物、破壁花粉提取物1:1复配时总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、酪氨酸酶活性的抑制率最强。
表2不同中药组合物总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、酪氨酸酶活性的抑制率体外功能评价和总黄酮含量测定结果
Figure BDA0002906848540000192
Figure BDA0002906848540000201
实施例12
一种祛黄褐斑的中药组合物，由以下重量份数的各组分组成，枸杞提取物5g、破壁花粉提取物5g、淀粉1g、甘露醇0.5g、硬脂酸镁0.5g、滑石粉0.5g、香精0.5g、维生素C 2g进行充分搅拌混合；
采用强度为10kGy的电子束照射步骤(1)得到的混合物2min，搅拌后继续照射2min，如此反复3次。进行体外总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、酪氨酸酶活性的抑制率体外功能评价和总黄酮含量测定结果如表3所示。
表3体外总抗氧化能力、DPPH自由基清除率、酪氨酸酶活性的抑制率体外功能评价和总黄酮含量测定结果
Figure BDA0002906848540000202
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种祛黄褐斑的中药组合物，包括以下重量份的原料：破壁花粉提取物0.1～5份和枸杞提取物0.1～5份。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述破壁花粉包括破壁蜂花粉。
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述蜂花粉选自益母草蜂花粉、油菜蜂花粉、菊花蜂花粉、玉米蜂花粉、玫瑰蜂花粉和茶花蜂花粉中的一种或几种。
4.根据权利要求1～3任意一项所述中药组合物，其特征在于，所述破壁花粉提取物或枸杞提取物的制备方法包括以下步骤：
1)将破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂混合，进行高速剪切提取，得到花粉提取液或枸杞提取液；
所述溶剂包括水或体积分数为30％～95％的乙醇水溶液；
2)对所述花粉提取液或枸杞提取液进行减压浓缩，得到花粉浓缩液或枸杞浓缩液；采用大孔吸附树脂对所述花粉浓缩液或枸杞浓缩液进行洗脱，对得到的花粉洗脱液或枸杞洗脱液减压回收、干燥，得到破壁花粉提取物或枸杞提取物；所述洗脱采用的洗脱剂选自体积浓度为30％～90％的乙醇水溶液中的一种或几种。
5.根据权利要求4所述的中药组合物，其特征在于，所述破壁花粉或枸杞破碎物和溶剂的质量体积比为1g：(1～15)mL。
6.根据权利要求4所述的中药组合物，其特征在于，所述高速剪切提取的转速为6000～18000r/min；所述高速剪切提取的时间为2～10min。
7.根据权利要求4所述的中药组合物，其特征在于，所述大孔吸附树脂选自AB-8、D101、HPD600、HPD700和XDA-8中的一种或几种。
8.权利要求1～7任意一项所述中药组合物在制备祛黄褐斑的药品中的应用。
9.一种祛黄褐斑的药品，包括药物活性组分和药学上可接受的辅料，其特征在于，所述药物活性组分包括权利要求1～7任意一项所述中药组合物。
10.根据权利要求9所述的药品，其特征在于，所述药物活性组分还包括维生素C。
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