CN112618560B - 一种包含人参皂苷的药物组合物及其降血脂和抑制脂肪肝的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种包含人参皂苷的药物组合物及其降血脂和抑制脂肪肝的用途。具体公开了一种用于治疗脂肪肝的人参皂苷组合物,其中包含至少一种人参皂苷以及人参低聚糖;其中人参皂苷选自人参皂苷Rh2、人参皂苷Rg1或二者的组合物,所述人参低聚糖的分子量为1000以上。还公开了上述人参皂苷组合物在制备治疗或预防脂肪肝或降低血脂的药物中的用途。本发明首次证实了本发明制备的高分子量人参低聚糖对于能够降低血脂和并减轻脂肪肝,且高分子量人参低聚糖与人参皂苷具有协同作用,能够显著降低血脂以及用于治疗脂肪肝。
Description
技术领域
本发明属于药物领域,具体提供了一种包含人参皂苷的药物组合物及其降血脂和抑制脂肪肝的用途。
背景技术
脂肪肝是指由于各种原因引起的肝细胞内脂肪堆积过多的病变。有数据统计,80%的肝癌是由病毒型肝炎引起,而脂肪肝是公认的隐蔽性肝硬化的常见病因,成为仅次于病毒性肝炎的第二大肝病。近年来,我国脂肪肝的患病率不断提升并出现年轻化趋势,据统计,脂肪肝在中国的发病率约为18%,发达城市则更高。
脂肪肝不仅是一种独立疾病,还会引起多种共病的产生。脂肪肝长期患病不仅会引起肝硬化,患者的血糖、血脂代谢等都会受到严重影响。引起脂肪肝的原因大致可分为代谢性和病毒感染。代谢性多见于酒精性脂肪肝、糖尿病脂肪肝、肥胖性脂肪肝、快速减肥性脂肪肝、药物性脂肪肝、妊娠脂肪肝等等,病毒感染则多见于丙型肝炎病毒(HCV)感染。
目前临床上常用的保肝药物有维生素类,促进肝脏解毒的药物,促进能量代谢的药物,促进蛋白质合成的药物,抗脂肪肝的药物及抗纤维化的药物等多种。但到目前为止,尚无防治脂肪肝的有效单体药物,对于脂肪肝的治疗多依赖于复方的中药/中成药;或西药常选用保护肝细胞、去脂药物及抗氧化剂等,以及某些降脂药物,例如他汀类降脂药等等。
目前针对高胆固醇血症,有一系列的他汀类药物,并得到广泛应用。高甘油三脂血症目前还缺乏有效的治疗药物和治疗方法。关于脂肪性肝炎NASH目前已经成为全球患者数最多的肝病类型,但是除了调整生活方式,目前还缺乏有效的药物干预。针对人参皂苷对脂肪肝的治疗作用,在申请人的前期研究中有所涉及。现有技术中也存在一些针对人参皂苷在体内代谢研究。人参皂苷是一类固醇类化合物的总称,其具有类似的结构,都含有由三十个碳原子排列形成的四环的甾烷类固醇母核,并根据糖苷基架构的不同而分为达玛烷型和齐墩果烷型。根据皂苷含量,研究较多的人参皂苷包括Rh2、Rg1、Rg2、Rg3、Rg5、Rb1、Rb2、Rc、Rb3等。同时,现有技术中对于人参皂苷体内代谢进行了一些研究,证实不同的人参皂苷在体内基于不同的代谢途径获得了不同代谢产物。但是现有技术中并未公开不同的代谢产物对于治疗效果有何影响。
发明内容
根据目前的临床研究,不同的受试者针对于人参皂苷具有不同的疗效。而且虽然人参皂苷是天然提取物,但是随着摄入量的增加必然会增加肝脏和肾脏的代谢负担。如何在不增加肝脏肾脏代谢负担的前提下,提高人参皂苷对于脂肪肝的治疗效果和有效性,是目前以人参皂苷治疗脂肪肝面临的问题。
本发明为了解决以上问题,提供了一种用于治疗脂肪肝的人参皂苷组合物,其中包含至少一种人参皂苷以及人参低聚糖;其中人参皂苷选自人参皂苷Rh2、人参皂苷Rg1或二者的组合物,所述人参低聚糖的分子量为1000以上。
在本发明的技术方案中,所述人参低聚糖与人参皂苷的质量比为1-5:1,优选为3:1。
在本发明的技术方案中,所述人参皂苷选自人参皂苷Rh2和人参皂苷Rb3的组合物,且二者的质量比为0.5-2:1,优选为1:1。
在本发明的技术方案中,所述人参低聚糖分子量优选为3000以上。
在本发明的技术方案中,所述人参低聚糖通过以下方法获得:
1)将人参粉碎以75%乙醇浸泡过夜,过滤后将滤渣清洗干燥;
2)在步骤1)所得滤渣中加入纤维素酶溶液,在25-35℃条件下酶解1-3小时;
3)酶解后采用纯净水提取1-3次,提取温度为50-70℃,合并滤液并冷冻干燥;
4)步骤3)所得干燥后的粉末中加入1-1.5倍体积的95%乙醇,然后弃掉上清液;并冷冻干燥;
5)采用超滤方法进行过滤,超滤采用的滤膜截留分子量为1KDa以上;获得分子量在1000以上的人参低聚糖。
在本发明的技术方案中,所述步骤2)中纤维素酶添加量为每10g人参加入0.5g纤维素酶。
在本发明的技术方案中,所述步骤5)中滤膜截留分子量为3KDa,获得分子量在3000以上的人参低聚糖。
本发明另一个方面给提供了一种用于治疗脂肪肝的药物组合物,所述的药物组合物中包含作为活性成分的上述人参皂苷组合物以及可药用的辅料。
在本发明的技术方案中,所述的药物组合物的制剂形式为口服制剂。
在本发明的技术方案中,所述的药物组合物的制剂形式为片剂或胶囊剂。
本发明再一个方面提供了上述人参皂苷组合物或药物组合物在制备治疗或预防脂肪肝的药物中的用途。
本发明再一个方面提供了上述人参皂苷组合物或药物组合物在制备降低血脂的药物中的用途。
在本发明的技术方案中,所述降低血脂为降低血中胆固醇或血中甘油三酯含量。
有益效果
本发明首次证实了本发明制备的高分子量人参低聚糖对于能够降低血脂和并减轻脂肪肝,且高分子量人参低聚糖与人参皂苷具有协同作用,能够显著降低血脂以及用于治疗脂肪肝。
附图说明
图1为实施例1实验结果图。
具体实施方式
为了使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面对本发明的具体实施方式做详细的说明,但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。
实施例1在脂肪肝小鼠模型中筛选人参皂苷种类。
选取6-8周C57BL/6J雄性小鼠,以正常饮食喂养(华阜康公司常规小鼠饲料)12周,自由摄食,获得对照组小鼠。以高脂饮食喂养(惠特比科技发展(北京)有限公司)12周,获得脂肪肝模型组小鼠。自第13周开始灌胃不同待测试组合物,共给药4周,给药期间给予前12周相同的饮食。实验结束后,进行肝指数的测定:小鼠麻醉前进行体重测量,然后进行麻醉取学并取肝脏,立刻对肝脏称重,并对血中胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平进行测量。然后计算肝指数,肝指数=肝重(g)/体重(g)×100%。
基于本发明人之前的研究成果,以抑制脂肪肝效果较好的Rh2、Rb3为活性成分后小鼠的脂肪肝程度均有减轻。因此,本发明中根据前期结果进行不同类型人参皂苷的配伍实验,以期筛选更优异的组合。实验组如下所示:
第1组(6只),对照组小鼠,第13-16周灌胃生理盐水。
第2组(6只),脂肪肝组小鼠,第13-16周灌胃生理盐水。
第3组(6只),脂肪肝给药组小鼠,第13-16周灌胃Rh2,给药剂量为10mg/kg体重。
第4组(6只),脂肪肝给药组小鼠,第13-16周灌胃Rb3,给药剂量为10mg/kg体重。
第5组(6只),脂肪肝给药组小鼠,第13-16周灌胃Rh2和Rb3质量比为1:1的组合物,给药剂量为10mg/kg体重。
实验结果
实验结果见下表
实验结果证实,虽然通常认为不同种类的人参皂苷均代谢为原人参二醇(PPD),并为人体利用,所以应当能够起到相同的作用。但本发明实验结构证明,将不同人参皂苷配伍使用后,相比于单独给与一种人参皂苷,小鼠的肝指数降低更为明显,第3-5组的肝指数数据与第2组均存在显著性差异P<0.01。从肝指数数值对比,Rh2和Rb3肝指数相比于单独使用Rh2和Rb3组效果更佳优异。
实施例2人参低聚糖的制备。
现有技术中关于人参低聚糖的报道通常集中在对于抗肿瘤和抗氧化的研究,未报道过关于对于脂肪肝的治疗效果,也未报道过其与人参皂苷联合用药治疗脂肪肝。由于人参的主要活性成分人参皂苷难水中溶解度不高,所以人参提取后的水溶液废料中包含多种多糖物质,本发明通过对人参水提页提取获得人参低聚糖。
首先将人参粉碎,加入75%乙醇浸泡过夜,过滤后以纯净水进行清洗干燥,然后加入纤维素酶(采购自河北利华生物科技公司)溶液,纤维素酶添加量为每10g人参加入0.5g,在30℃条件下酶解2小时,酶解后采用5倍体积的纯净水,在60℃条件下提取30分钟,过滤后加入纯净水再次在60℃条件下提取30分钟,合并滤液并冷冻干燥。干燥后的粉末中加入1倍体积的95%乙醇,弃掉上清液,获得人参低聚糖。
采用不同截留分子量的聚醚砜滤膜进行超滤,冷冻干燥后获得截留分子量分别选择1KDa,3KDa,获得分子量小于1000,分子量为1000-3000以及分子量大于3000的人参低聚糖。
提取物中不同分子量的人参低聚糖的质量比约为1:10: 8
实施例3人参低聚糖与人参皂苷组合物药效试验。
由于有研究表明低聚糖对于肠道吸收具有一定作用,尝试将人参皂苷与人参低聚糖联用,研究二者是否能够通过联用获得更好的效果。
分别将不同分子量的3g人参低聚糖与1g人参皂苷Rh2和Rb3的组合物(Rh2和Rb3的质量比为1:1)混合均匀后加入纯净水配制成粘稠溶液。
实验组如下所示:
第1组(8只),对照组小鼠,第13-16周灌胃生理盐水。
第2组(8只),脂肪肝组小鼠,第13-16周灌胃生理盐水。
第3组(8只),脂肪肝给低聚糖组合物组小鼠,第13-16周灌胃分子量1000以下的人参低聚糖与人参皂苷的组合物,给药剂量为以投料Rh2的质量计,5 mg Rh2/kg体重。
第4组(8只),脂肪肝给低聚糖组合物组小鼠,第13-16周灌胃分子量1000-3000的人参低聚糖与人参皂苷的组合物,给药剂量为以投料Rh2的质量计,5 mg Rh2/kg体重。
第5组(8只),脂肪肝给低聚糖组合物组小鼠,第13-16周灌分子量3000以上的人参低聚糖与人参皂苷的组合物,给药剂量为以投料Rh2的质量计,5 mg Rh2/kg体重。
第6组(8只),脂肪肝给低聚糖组小鼠,第13-16周灌胃分子量1000以下的人参低聚糖,给药剂量与第3-5组相同。
第7组(7只),脂肪肝给低聚糖组小鼠,第13-16周灌胃分子量1000-3000的人参低聚糖,给药剂量与第3-5组相同。
第8组(7只),脂肪肝给低聚糖组小鼠,第13-16周灌胃分子量3000以上的人参低聚糖,给药剂量与第3-5组相同。
实验结果
实验结果显示, 高脂肪饮食会引发血脂和肝指数增加,即脂肪肝的形成。通过给予小鼠人参皂苷和人参低聚糖的组合物,或者给予小鼠人参低聚糖,能够降低小鼠体重,血脂和肝指数。其中第3-8组小鼠的肝指数与第2组脂肪肝小鼠的肝指数之间存在显著性差异(P<0.05)。第6-8组仅给予人参低聚糖的小鼠于给予人参低聚糖和人参皂苷组合物的小鼠的杆指数之间存在显著性差异(P<0.05)。实验结果说明本发明获得人参低聚糖具有降低肝指数,即治疗脂肪肝的效果,但是通过对比数据可知,其对于血脂(TC和TG)的影响明显强于对于内脏脂肪(肝指数)的影响。尤其是分子量高于3000的人参低聚糖,给与3000的人参低聚糖后小鼠的TC值小于第3组,即同时给与分子量低于1000的人参低聚糖和人参皂苷的实验组。说明人参低聚糖的分子量对于其效果影响较大,从第3-5组的对比也可以看出,包含高分子量的人参低聚糖的实验组内脏脂肪以及血脂的数值更接近于正常值。
Claims (7)
1.一种用于治疗脂肪肝的人参皂苷组合物,其特征在于,其中包含至少一种人参皂苷以及人参低聚糖;其中人参皂苷为人参皂苷Rh2和人参皂苷Rb3,质量比为1:1;
所述人参低聚糖的分子量为3000以上;
所述人参低聚糖与人参皂苷的质量比为3:1;
所述人参低聚糖通过以下方法获得:
1)将人参粉碎以75%乙醇浸泡过夜,过滤后将滤渣清洗干燥;
2)在步骤1)所得滤渣中加入纤维素酶溶液,在25-35℃条件下酶解1-3小时;
3)酶解后采用纯净水提取1-3次,提取温度为50-70℃,合并滤液并冷冻干燥;
4)步骤3)所得干燥后的粉末中加入1-1.5倍体积的95%乙醇,然后弃掉上清液;并冷冻干燥;
5)采用超滤方法进行过滤,超滤采用的滤膜截留分子量为3KDa以上;获得分子量在3000以上的人参低聚糖。
2.权利要求1所述的人参皂苷组合物,其特征在于,所述步骤2)中纤维素酶添加量为每10g人参加入0.5g纤维素酶。
3.一种治疗脂肪肝的药物组合物,其特征在于,所述的药物组合物中包含作为活性成分的权利要求1-2任一项所述的人参皂苷组合物以及可药用的辅料。
4.根据权利要求3所述的药物组合物,其特征在于,所述的药物组合物的制剂形式为口服制剂。
5.根据权利要求3所述的药物组合物,其特征在于,所述的药物组合物的制剂形式为片剂或胶囊剂。
6.权利要求1-2任一项所述的人参皂苷组合物或权利要求3-5任一项所述的药物组合物在制备治疗或预防脂肪肝的药物中的用途。
7.权利要求1-2任一项所述的人参皂苷组合物或权利要求3-5任一项所述的药物组合物在制备降低血脂的药物中的用途。
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