CN112602727A - 一种植物保护剂的制备及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种植物保护剂的制备及其使用方法，属于植物保护试剂技术领域。该植物保护剂的制备以利迪链霉菌、蔗糖、酵母提取物、硫酸镁、磷酸二氢钾和氯化锰为主要原料制备而成。本发明中的利迪链霉菌植物保护剂，是以利迪链霉菌株发酵液，确认每毫升发酵液营养细胞浓度至10^7 cfu/ml以上后，接种至以煮熟之大米为主要载体上，经过48小时恒温培养，再经低温40度干燥水分至10%以下制成。该植物保护剂的制备方法工艺设计科学合理，制备成本低，工艺简单易控制，适合推广使用。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物保护剂的制备及其使用方法，属于植物保护试剂技术领域。
背景技术
由于近年来土传病害日益严重，在茄科类如蕃茄上，尤其以青枯病最为严重，青枯病由病原细菌，青枯假单胞菌（Pseudomonas solanacearum）所造成是一种土传性细菌性病害，从从根部或茎基部伤口侵入，在植株体内的维管束组织中扩展，造成维管束堵塞，养分无法输送，细胞中毒进而植株萎凋死亡。由于病原菌能潜伏于土壤中长达数年之久，因此即使使用农药也无法有效灭除此病原菌，且过度使用农药会对环境及自身健康造成危害，因此利用天然的微生物，透过以菌抑菌的角度，去有抑制病原菌生长，透过预防胜于炙料的方式，使之不对作物造成危害，才是根本的解决办法。
链霉菌是放线菌的一属，在土壤中分布极广，现有已知已有1000多种抗生素皆是由链霉属菌提炼而来如链霉素、四环霉素等，在土壤中可生产多种具生物活性分子的物质，不仅能够抑制病菌，并且还能保护植物根系健康，促进植物生长，在土壤中扮演着重要的角色。
番茄青枯病，是由病原细菌，青枯假单胞菌（Pseudomonas solanacearum）所造成，在南方是番茄上常见的维管束系统性病害之一，能危害多種作物如危害番茄、茄子、辣椒、马铃薯、生姜等多种作物，在高温高湿土壤偏酸的环境下适宜发病。在青枯病发病初期，常于中午高温时出现叶片下垂，青枯假单胞菌恢复正常的睡午觉现象，反覆数天后，接着病株的下位叶的呈现下垂，而后叶片逐渐萎凋，之后全株萎凋。由于萎凋后全株仍呈现绿色，故称为青枯病。横切新鲜病茎，用手挤压或插入清水中，可见乳白色菌液溢出，这是该病主要特征青枯病是属土传兴病害，除能根对根传播外，还会附着于土壤的鞋子及农机具、灌溉水的流动也有机会携带病原细菌进行传播，且病原细菌可长期存活于土壤中达数年之久，青枯病菌在土壤内可由根部的自然开口或是由于移植定植、线虫、昆虫或等其他物理伤害等造成的伤口处侵入感染，且如刀具携带着青枯病菌再修剪健康的植株，即 可借由修剪处的伤口感染，因此对番茄种植带来巨大的危害，给番茄农造成3-5成以上的损失，甚至绝收。
现在遇到番茄青枯病尚无合适的解决办法，一般是建议是使用农药，氧氯化铜(Copper oxychloride) 81.3%可湿性粉剂，然效果不彰，且具有呼吸毒性及对水生动物有毒性。而且施用农药无法有效杀灭土壤中之青枯病菌，因此是治标不治本之方法。
使用天然无毒的微生物菌，利用以菌制菌的方式是新的天然无毒的一种防治病害的一种方式，本发明就是针对对番茄危害严重的青枯假单胞菌，所筛选出的具有抑制效果的利迪链霉菌。经过实验室的抗菌拮抗试验、小量的接种试验至实际的田间操作试验结果显示，本发明之利迪链霉菌能够有效降低番茄青枯病的危害。除此之外，此利迪链霉菌还对其他多种病原菌有抑制效果，如立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、 似胶黏孢炭疽刺盘孢菌 (Colletotrichum gloeosporioide) 、番茄早疫病菌 (Alternaria solani)…等病原菌，是一株极具生防潜力的菌株。
发明内容
为了克服背景技术中存在的缺陷，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种植物保护剂的制备方法，其特征在于其步骤为：
（1）、将利迪链霉菌先经液态摇瓶培养，以蔗糖10%（重量百分比）, 酵母提取物5%（重量百分比）、硫酸镁 0.15%（重量百分比）、 磷酸二氢钾 0.3%（重量百分比）和 氯化锰 0.02%（重量百分比）为液体培养基，在30摄氏度恒温环境中，转速150转每分钟下，摇瓶培养7天，使得每毫升利迪链霉菌营养细胞浓度至10^7 cfu/ml以上；
（2）、在进行固体发酵前，物料及锅具须先进行灭菌处理，以确保为无菌状态，后于无菌状态下，将大米洗干净蒸制1小时以上至熟软，后于锅内放置冷却至20摄氏度；
（3）、蒸制大米冷却后，将大米碾碎至100-200目，再移至固体不锈钢发酵罐中，并接种大米重量10%的步骤（1）制备的迪链霉菌液；
（4）、向不锈钢发酵罐中，通入无菌空气，通气量为20-30升每分钟, 搅拌速度为120转每分钟, 温度控制在30摄氏度，pH控制为6.8-7.4之间，经过7天的搅拌发酵，培养生长期间定期抽样检测菌数活性、转孢情况以及pH值参数；
（5）、发酵完成后，随即经过2-4天的零下40摄氏度冷却干燥至水分10%以下，去除水分的同时，维持了菌体的高存活率，干燥冷却完成后，包装成成品，即制备出植物保护剂。
所述一种植物保护剂的使用方法，使用时按照植物保护剂和水的重量比1:500均匀混合，在植物定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合的方式施用，能够帮助植物减少青枯病的病害威胁。
本发明中的利迪链霉菌植物保护剂，是以利迪链霉菌株发酵液，确认每毫升发酵液营养细胞浓度至10^7 cfu/ml以上后，接种至以煮熟之大米为主要载体上，经过48小时恒温培养，再经低温40度干燥水分至10%以下制成。该植物保护剂的制备方法工艺设计科学合理，制备成本低，工艺简单易控制，适合推广使用。
具体实施方式
具体实施例一，一种植物保护剂的制备方法，其特征在于其步骤为：
（1）、将利迪链霉菌先经液态摇瓶培养，以蔗糖10%（重量百分比）, 酵母提取物5%（重量百分比）、硫酸镁 0.15%（重量百分比）、 磷酸二氢钾 0.3%（重量百分比）和 氯化锰 0.02%（重量百分比）为液体培养基，在30摄氏度恒温环境中，转速150转每分钟下，摇瓶培养7天，使得每毫升利迪链霉菌营养细胞浓度至10^7 cfu/ml以上；
（2）、在进行固体发酵前，物料及锅具须先进行灭菌处理，以确保为无菌状态，后于无菌状态下，将大米洗干净蒸制1小时以上至熟软，后于锅内放置冷却至20摄氏度；
（3）、蒸制大米冷却后，将大米碾碎至100-200目，再移至固体不锈钢发酵罐中，并接种大米重量10%的步骤（1）制备的迪链霉菌液；
（4）、向不锈钢发酵罐中，通入无菌空气，通气量为20-30升每分钟, 搅拌速度为120转每分钟, 温度控制在30摄氏度，pH控制为6.8-7.4之间，经过7天的搅拌发酵，培养生长期间定期抽样检测菌数活性、转孢情况以及pH值参数；
（5）、发酵完成后，随即经过2-4天的零下40摄氏度冷却干燥至水分10%以下，去除水分的同时，维持了菌体的高存活率，干燥冷却完成后，包装成成品，即制备出植物保护剂。
所述的一种植物保护剂的使用方法，使用时按照植物保护剂和水的重量比1:500均匀混合，在植物定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合的方式施用，能够帮助植物减少青枯病的病害威胁。
本发明中的利迪链霉菌植物保护剂，是以利迪链霉菌株发酵液，确认每毫升发酵液营养细胞浓度至10^7 cfu/ml以上后，接种至以煮熟之大米为主要载体上，经过48小时恒温培养，再经低温40度干燥水分至10%以下制成。该植物保护剂的制备方法工艺设计科学合理，制备成本低，工艺简单易控制，适合推广使用。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (2)
1.一种植物保护剂的制备方法，其特征在于其步骤为：
（1）、将利迪链霉菌先经液态摇瓶培养，以蔗糖10%（重量百分比）, 酵母提取物5%（重量百分比）、硫酸镁 0.15%（重量百分比）、 磷酸二氢钾 0.3%（重量百分比）和 氯化锰 0.02%（重量百分比）为液体培养基，在30摄氏度恒温环境中，转速150转每分钟下，摇瓶培养7天，使得每毫升利迪链霉菌营养细胞浓度至10^7 cfu/ml以上；
（2）、在进行固体发酵前，物料及锅具须先进行灭菌处理，以确保为无菌状态，后于无菌状态下，将大米洗干净蒸制1小时以上至熟软，后于锅内放置冷却至20摄氏度；
（3）、蒸制大米冷却后，将大米碾碎至100-200目，再移至固体不锈钢发酵罐中，并接种大米重量10%的步骤（1）制备的迪链霉菌液；
（4）、向不锈钢发酵罐中，通入无菌空气，通气量为20-30升每分钟, 搅拌速度为120转每分钟, 温度控制在30摄氏度，pH控制为6.8-7.4之间，经过7天的搅拌发酵，培养生长期间定期抽样检测菌数活性、转孢情况以及pH值参数；
（5）、发酵完成后，随即经过2-4天的零下40摄氏度冷却干燥至水分10%以下，去除水分的同时，维持了菌体的高存活率，干燥冷却完成后，包装成成品，即制备出植物保护剂。
2.根据权利要求1所述一种植物保护剂的使用方法，其特征在于：使用时按照植物保护剂和水的重量比1:500均匀混合，在植物定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、穴施或者与栽培基质混合的方式施用，能够帮助植物减少青枯病的病害威胁。
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