CN114634878B - 一种复合微生物制剂及其在防治根结线虫中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于农作物防病治病技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其在防治根结线虫中的应用。所述的复合微生物制剂的活性成分由黑曲霉菌、除虫链霉菌、枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌组成。所述黑曲霉菌选自保藏号为CGMCC No.9778的菌株，除虫链霉菌选自保藏号为CGMCC No.1765的菌株，枯草芽孢杆菌选自保藏号为CGMCC No.8546的菌株，淡紫拟青霉菌选自保藏号为CGMCC No.2012的菌株。本发明的复合微生物制剂对设施蔬菜，尤其是黄瓜根结线虫病的防效高，且能促进黄瓜的生长，具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于农作物防病治病技术领域，具体涉及一种复合微生物制剂及其在防治根结线虫中的应用。
背景技术
根结线虫是近几年来危害日趋严重的大棚病害之一，危害表现相当强的地域性，因为不规范的农业措施操作，导致该病日趋严重，甚至极个别的村或棚出现了“年年种大棚，棚棚有线虫”的现象。该病是一种世界性的害虫，一般受害大棚可减产20％—30％，严重的大棚减产程度能达到60％，甚至绝产，危害程度相当严重。
能够造成危害的线虫种类有3000多种，主要根结线虫种类有南方根结线虫、爪哇根结线虫等。随着近几年来大批量的调运蔬菜，逐渐将线虫的危害区域扩大，导致了现在大家都能看到的这种情况(“年年种大棚，棚棚有线虫”)。北方大棚的温、湿度环境与南方的环境基本相同，使线虫能够迅速地适应北方的环境，并扩大危害范围。
化学制剂能够高效的杀死根结线虫，但是过量使用会危害农作物、污染环境，生物防治成为未来的研究趋势，已有研究表明，某些微生物在抑制土壤根结线虫中起到关键作用，但是单一的微生物的防效有限，如何进一步提高其防效成为本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
本发明针对现有技术中存在的问题，提供了一种复合微生物制剂及其在防治根结线虫中的应用，旨在提高对根结线虫的防治效率。
本发明的目的之一是提供一种复合微生物制剂，所述的复合微生物制剂的活性成分由黑曲霉菌、除虫链霉菌、枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌组成。
进一步的，所述黑曲霉菌选自保藏号为CGMCC No.9778的菌株，除虫链霉菌选自保藏号为CGMCC No.1765的菌株，枯草芽孢杆菌选自保藏号为CGMCC No.8546的菌株，淡紫拟青霉菌选自保藏号为CGMCC No.2012的菌株。
更进一步的，所述复合微生物制剂为液体制剂。
更进一步的，所述复合微生物制剂的制备方法如下：
1)将黑曲霉菌在液体沙氏培养基中培养至孢子数大于2×104个/ml；
2)将除虫链霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中培养至孢子数大于3×104个/ml；
3)将枯草芽孢杆菌在LB培养基中培养至菌落数大于3×108CFU/ml；
4)将淡紫拟青霉菌在YEPD培养基中培养至菌落数大于1×109CFU/ml；
5)将培养后的黑曲霉菌和除虫链霉菌的孢子悬液以1：2-3的体积比混合，得到制剂A；将培养后的枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌的发酵液以1：1的体积比混合，得到制剂B。
本发明的目的之二是提供所述一种复合微生物制剂在防治设施蔬菜根结线虫病中的应用。
本发明的目的之三是提供所述的一种复合微生物制剂在促进设施蔬菜生长中的应用。
进一步的，所述设施蔬菜包括黄瓜。
更进一步的，所述应用包括以下步骤：
1)黄瓜定植时，穴施所述制剂A，用量为每株15-20ml；
2)黄瓜生长至三叶一心时灌根所述制剂B，用量为每株40-50ml。
本发明具有如下有益效果：
1)本发明采用的菌种均为生防菌，相比大多化学制剂，绿色环保，对环境和人体无毒无害。
2)黑曲霉菌、除虫链霉菌、枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌之间协同配合，共同提高对黄瓜根结线虫的防效，最高可达73％。
3)本发明的复合微生物制剂还对黄瓜的生长具有促进作用，进一步可减少肥料的使用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中所用黑曲霉菌、除虫链霉菌、枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌菌种均为在微生物菌种保藏管理中心可购买到的现有菌种，不涉及新菌种的开发，只涉及这几种现有菌株的应用。并且，下述实施例中所用黑曲霉菌选自保藏号为CGMCC No.9778的菌株，除虫链霉菌选自保藏号为CGMCC No.1765的菌株，枯草芽孢杆菌选自保藏号为CGMCCNo.8546的菌株，淡紫拟青霉菌选自保藏号为CGMCC No.2012的菌株。
实施例1
一种复合微生物制剂，制备方法如下：
1)将黑曲霉菌在液体沙氏培养基中培养至孢子数大于2×104个/ml；
2)将除虫链霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中培养至孢子数大于3×104个/ml；
3)将枯草芽孢杆菌在LB培养基中培养至菌落数大于3×108CFU/ml；
4)将淡紫拟青霉菌在YEPD培养基中培养至菌落数大于1×109CFU/ml；
5)将培养后的黑曲霉菌和除虫链霉菌的孢子悬液以1：2的体积比混合，得到制剂A；将培养后的枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌的发酵液以1：1的体积比混合，得到制剂B。
实施例2
一种复合微生物制剂，制备方法如下：
1)将黑曲霉菌在液体沙氏培养基中培养至孢子数大于2×104个/ml；
2)将除虫链霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中培养至孢子数大于3×104个/ml；
3)将枯草芽孢杆菌在LB培养基中培养至菌落数大于3×108CFU/ml；
4)将淡紫拟青霉菌在YEPD培养基中培养至菌落数大于1×109CFU/ml；
5)将培养后的黑曲霉菌和除虫链霉菌的孢子悬液以1：2.5的体积比混合，得到制剂A；将培养后的枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌的发酵液以1：1的体积比混合，得到制剂B。
实施例3
一种复合微生物制剂，制备方法如下：
1)将黑曲霉菌在液体沙氏培养基中培养至孢子数大于2×104个/ml；
2)将除虫链霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中培养至孢子数大于3×104个/ml；
3)将枯草芽孢杆菌在LB培养基中培养至菌落数大于3×108CFU/ml；
4)将淡紫拟青霉菌在YEPD培养基中培养至菌落数大于1×109CFU/ml；
5)将培养后的黑曲霉菌和除虫链霉菌的孢子悬液以1：3的体积比混合，得到制剂A；将培养后的枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌的发酵液以1：1的体积比混合，得到制剂B。
下面结合本发明制备出的复合微生物制剂在黄瓜种植中的应用来对本发明的效果做进一步的说明，具体试验过程及结果如下。
1.试验材料
供试黄瓜品种为“津优209”。
2.试验地点
试验设在赤峰市农牧科学研究院蔬菜研究所的科研育种大棚，根结线虫病发病发生严重，经鉴定为南方根结线虫，上茬作物为黄瓜。
3.试验方法
于黄瓜定植时，穴施制剂A，用量为每株18ml；待黄瓜生长至三叶一心时灌根制剂B，用量为每株45ml；小区面积5m2，每小区定植30株黄瓜苗，试验设计为随机区组排列，重复3次。
收获期，每小区取5个点的5-20cm土层样品，调查土壤中根结线虫二龄线虫的数量以及根系发病程度。同时测量黄瓜果实的单果鲜质量。收获时，每个小区单独收获测产，计算小区实际产量。
病害严重度分级标准：
0级，根系上无根结；
1级，轻度感染，仅有少量的小根结，根结率在3％以下；
2级，根结率为3％～25％；
3级，根结较多，根结率为25％～50％；
4级，在根瘤上有再次根结，50％～75％根系有根结；
5级，根结相互连接成根结团块，75％以上根系有根结。
计算方法：
病情指数(％)＝Σ(各级病株数×相对级数值)/(调查总株数×7)×100；
防治效果(％)＝(空白对照区病情指数-处理区病指数)/(空白对照区病情指数)×100。
采用实施例1-3的复合微生物制剂进行如上处理，记作处理1-3，其余培养条件均一致；为了进一步说明效果，本发明还设置了对比例，具体如下。
处理4：不施加制剂A，其余同处理1。
处理5：不施加制剂B，其余同处理1。
CK(不处理)：制剂A和制剂B用等体积的清水代替。
4.结果
不同处理的黄瓜根结线虫的防治效果如表1所示，对黄瓜生长的影响如表2所示，实践证明，本发明的制剂A和制剂B能够协同配合，提高对黄瓜根结线虫的防效，且对黄瓜的生长具有促进作用。
表1不同处理对黄瓜根结线虫的防效测定结果
表2不同处理对黄瓜鲜质量和产量的影响
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (2)
1.一种复合微生物制剂在防治黄瓜根结线虫病和在促进黄瓜生长中的应用，其特征在于，所述的复合微生物制剂的活性成分由黑曲霉菌、除虫链霉菌、枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌组成；所述黑曲霉菌选自保藏号为CGMCC No.9778的菌株，除虫链霉菌选自保藏号为CGMCC No.1765的菌株，枯草芽孢杆菌选自保藏号为CGMCC No.8546的菌株，淡紫拟青霉菌选自保藏号为CGMCC No.2012的菌株；所述复合微生物制剂为液体制剂；
所述复合微生物制剂的制备方法如下：
1)将黑曲霉菌在液体沙氏培养基中培养至孢子数大于2×104个/ml；
2)将除虫链霉菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基中培养至孢子数大于3×104个/ml；
3)将枯草芽孢杆菌在LB培养基中培养至菌落数大于3×108CFU/ml；
4)将淡紫拟青霉菌在YEPD培养基中培养至菌落数大于1×109CFU/ml；
5)将培养后的黑曲霉菌和除虫链霉菌的孢子悬液以1：2-3的体积比混合，得到制剂A；将培养后的枯草芽孢杆菌和淡紫拟青霉菌的发酵液以1：1的体积比混合，得到制剂B。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
1)黄瓜定植时，穴施所述制剂A，用量为每株15-20ml；
2)黄瓜生长至三叶一心时灌根所述制剂B，用量为每株40-50ml。
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2022
- 2022-03-18 CN CN202210268736.1A patent/CN114634878B/zh active Active
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