CN112568064B - 一种黑木耳菌种jh40及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及食用菌培育技术领域，具体公开一种黑木耳菌种JH40及其应用。所述黑木耳菌种JH40的菌种保藏号为CCTCC No：M20191058。本发明还提供了所述的黑木耳菌种JH40产生的原生质体、担孢子、菌丝体和子实体。本发明提供的黑木耳菌种JH40可应用于黑木耳栽培及保健品开发。本发明提供的黑木耳菌种JH40与传统的黑木耳菌种相比环境适应性较强、耐高温，可在30℃或30℃以上的环境下正常生长，兼具生长周期短、生物学效率高、遗传稳定性好、耳片厚和泡发率高等优良品质。

Description

一种黑木耳菌种JH40及其应用

技术领域

本发明涉及食用菌培育技术领域，尤其涉及一种黑木耳菌种JH40及其应用。

背景技术

黑木耳(Auricularia auricula)质地鲜脆、滑嫩爽口，富含多种氨基酸和微量元素及弹性的胶状物，含有的功能性营养成分有多糖、黑色素、多酚、类黄酮等，可以助消化，预防血栓、动脉硬化、缺铁性贫血和冠心病等，是营养丰富又具有药理作用的食用真菌。

我国是黑木耳生产大国，黑木耳产量占世界总产99％以上，远销日本、欧美等地，平均每年创汇十几亿美元。黑木耳产品干制贮藏、价格稳定，发展该产业对我国的乡村振兴也具有重要意义。黑木耳栽培过程中还可利用大量的木屑、果树剪枝、米糠、麸皮等农业废弃物，实现了农作物废弃物的资源化利用，对于推进循环经济发展也发挥着重要作用。

黑木耳属中温恒温结实型菌类，但由于华北地区的气候环境特点，在黑木耳栽培期经常会出现30℃以上的天气，在这样的高温条件下，耳片生长速度过快，色浅、肉薄，品质不佳，还易出现“流耳”现象，严重时可造成耳片脱落。目前，黑木耳已形成“北耳南扩”的产业发展趋势，栽培面积每年增长15％，栽培面积增长了，但是受温度的影响，产量增长偏低，产量的增长与栽培面积不成正比。随着黑木耳产业发展规模的迅速扩大，市场上急需耐高温的优质黑木耳品种来满足黑木耳产业发展的需求。

发明内容

针对现有黑木耳品种在30℃以上的条件下生长速度过快，造成黑木耳色浅、肉薄、品质不佳，且易出现流耳及耳片脱落的问题，本发明提供一种黑木耳菌种JH40及其应用。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种黑木耳菌种JH40，其菌种保藏号为CCTCC No：M20191058。所述黑木耳菌种是通过对亲本黑木耳的原生质体进行等离子体诱变(ARTP)得到的黑木耳菌种，其拉丁文名称为：Auricularia auricular，于2019年12月17日在中国典型培养物保藏中心(武汉市)进行保藏。

相对于现有技术，本发明提供的黑木耳菌种JH40与传统的黑木耳菌种相比环境适应性较强、耐高温，可在30℃或30℃以上的环境下正常生长。同时本发明提供的黑木耳菌种JH40兼具生长周期短(满袋时间较亲本黑木耳冀1号可提前3d)、酶活(淀粉酶、漆酶、多酚氧化酶和羧甲基纤维素酶)指标高、生物学效率高、遗传稳定性好、耳片厚和泡发率高等优良品质，是一种新型的优质黑木耳品种，适合全国大范围推广种植，尤其适宜于河北地域环境下种植。

优选的，所述黑木耳菌种JH40的ITS序列为SEQ ID NO:3。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40产生的原生质体。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40产生的担孢子。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40产生的菌丝体。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40产生的子实体。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40进行黑木耳栽培得到的黑木耳菌棒。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40在黑木耳栽培中的应用。

本发明还提供所述的黑木耳菌种JH40在制备含有黑木耳的保健品中的应用。

附图说明

图1是本发明实施例中的15种黑木耳栽培种菌丝在30℃下的生长速度柱形图；

图2是本发明实施例中的15种黑木耳栽培种菌液中的淀粉酶活性柱形图；

图3是本发明实施例中的15种黑木耳栽培种菌液中的多酚氧化酶活性柱形图；

图4是本发明实施例中的15种黑木耳栽培种菌液中的漆酶活性柱形图；

图5是本发明实施例中的15种黑木耳栽培种菌液中的羧甲基纤维素酶活性柱形图；

图6是本发明实施例中亲本菌株与诱变菌株的生长速度柱形图；

图7是本发明实施例中诱变菌株JH40在显微镜下的锁状联合图；

图8是本发明实施例中诱变菌株JH40与亲本冀1号相比淀粉酶的酶活指标图；

图9是本发明实施例中诱变菌株JH40与亲本冀1号相比漆酶的酶活指标图；

图10是本发明实施例中诱变菌株JH40与亲本冀1号相比多酚氧化酶的酶活指标图；

图11是本发明实施例中诱变菌株JH40与亲本冀1号相比羧甲基纤维素酶的酶活指标图；

图12是本发明实施例中诱变菌株JH40与亲本冀1号拮抗反应图；

图13是本发明实施例中构建的15种试验菌株与诱变菌株JH40的系统发育树。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例

1材料与方法

1.1材料

1.1.1酶液

溶壁酶：购自广东微生物所。

蜗牛酶：购自北京索莱宝科技有限公司，用0.6M甘露醇溶解后用0.22μm微孔滤膜过滤除菌后备用。

1.1.2供试培养基

固体PDA培养基(1L)：去皮马铃薯200g，切成小块煮沸半小时，然后纱布过滤，加入葡萄糖20g及琼脂15g，分装于250mL三角瓶中，pH自然，115℃灭菌30min。

液体PDA培养基(1L)：去皮马铃薯200g，切成小块煮沸半小时，然后纱布过滤，加入葡萄糖20g，pH自然，分装于250mL三角瓶中，115℃灭菌30min。

NA培养基(1L)：葡萄糖10g，蛋白胨5g，牛肉浸膏3g，酵母浸膏1g，琼脂15g，用ddH₂O定容至1L，pH6.8-7.0，121℃灭菌25min。

SMY：蔗糖10g，麦芽糖10g，酵母膏4g，MgSO₄·7H₂O 1.5g，KH₂PO₄0.46g，维生素B110mg，加ddH₂O至1L。

原生质体再生培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨3g，KH₂PO₄ 3g，MgSO₄·7H₂O2g，酵母膏2g，维生素B1 10mg，甘露醇109.3g，琼脂20g加水至1L。

1.2黑木耳诱变育种的亲本的筛选

1.2.1 15种黑木耳栽培种不同温度条件下菌丝的生长速度及长势

使用直径90mm的培养皿，每皿用蠕动泵定量加入30mL PDA培养基。培养皿中部分别接入15种黑木耳栽培种(黑威15、黑威伴金、冀1号、吊袋、黑威单片、黑29、黑山、延特5号、黑木耳2、黑木耳-2、高产王、极品-8、黑木耳-1、龙江黑+和宝霖2号)组织分离后获得的黑木耳菌株，25℃培养满皿后，用直径为5mm的打孔器打孔制备菌饼。将菌饼接入PDA培养基平板中央，分别放30℃的恒温培养箱中培养，每个黑木耳栽培种设置3个重复。7d后记录菌落直径，观察菌丝的长势，计算菌丝生长速度，计算公式如下：

菌丝生长速度(cm/d)＝菌落半径(cm)/生长天数(d)。

所测定的15种黑木耳栽培种菌丝在30℃下生长速度如图1所示，生长速度由快到慢依次为：冀1号>黑木耳-1>黑木耳-2>黑29>黑威15>极品-8>延特5号>黑威伴金>黑威单片>黑山>吊袋>龙江黑+>宝霖2号>高产王>黑木耳2，其中冀1号生长速度最快，为0.79cm/d。

对15种黑木耳栽培种菌丝生长状况进行统计后，结果如表1所示，可见黑木耳栽培种冀1号的菌丝兼具浓密、粗壮和整齐。

表1

注：“+”的多少代表相应性状的强弱程度。

1.2.2 15种黑木耳栽培种高温条件下胞外酶活指标测定

1.2.2.1 15种黑木耳液体菌种制备

将15种黑木耳栽培种在PDA培养上25℃恒温培养培养7d，用5mm打孔器沿黑木耳菌落边缘打孔得到菌块，分别接种在装有玻璃珠和20mL液体PDA培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10个菌块，每个黑木耳栽培种设置3个重复。30℃下静置培养3d后，30℃、150r/min摇床震荡培养，培养10d后得到的菌液，分离出菌液中的菌体得到粗酶液，采用分光光度计法分别测定粗酶液中的淀粉酶、多酚氧化酶、漆酶和羧甲基纤维素酶(CMC)的酶活性。

1.2.2.2黑木耳液体菌种淀粉酶活性测定

取0.5％的可溶性淀粉溶液(用pH 5.8、0.1mol/L的乙酸盐缓冲液配制)0.3mL于试管中，加入稀释10倍的粗酶液0.1mL，混匀，于38℃水浴30min，取出后立即加入0.3mL的DNS试剂，于100℃水浴中加热5min，冷却后加入1mL蒸馏水，混匀，测定波长520nm处测吸光度值。对照管在加入DNS试剂后，再加入0.1mL的粗酶液，其它操作与样品管相同。酶活力单位定义：每毫升粗酶液每分钟内改变0.1个光密度值为1活力单位(U)。测得的如图2所示。

1.2.2.3黑木耳液体菌种多酚氧化酶活性测定

采用南京建成多酚氧化酶试剂盒测定多酚氧化酶活性，在2mL离心管中加入试剂二200μL，试剂三50μL，粗酶液原液50μL，用煮沸的粗酶液上清作为对照。于37℃恒温反应10min，取出立即转入90℃以上的沸水浴5min，取出后流水冷却，10000rpm常温离心10min，取上清用紫外分光光度计于420nm处测定吸光度值(ΔA＝A_测定-A_对照)。酶活力单位定义：每毫升粗酶液每分钟内改变0.1个光密度值为1活力单位(U)。测得的多酚氧化酶的活性如图3所示。

1.2.2.4黑木耳液体菌种漆酶活性测定

在1mL含有0.5mmol/L的2，2-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸，ABTS)的0.lmol/L醋酸钠缓冲液(pH5.0)中，添加500uL稀释10倍的粗酶液启动反应，在30℃恒温培养箱中静置30min。采用Thermo Multiskan GO全波长酶标仪测定波长420nm时反应体系的吸光度值，以煮沸灭活15min的粗酶液作对照。酶活力单位定义为每毫升粗酶液每分钟吸光度值增加0.1为1活力单位(U)。测得的漆酶的活性如图4所示。

1.2.2.5黑木耳液体菌种羧甲基纤维素酶(CMC)活性测定

在试管中加入0.5％的羧甲基纤维素钠溶液(用pH4.6的0.1mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液配制)0.3mL，加稀释10倍的粗酶液0.1mL，50℃水浴保温30min，取出后立即加入DNS试剂0.3mL，煮沸5min。冷却后加入蒸馏水1mL，混匀，用Thermo Multiskan GO全波长酶标仪酶标仪测定波长520nm处的吸光度值，以煮沸灭活15min的粗酶液作对照。酶活力单位定义：每毫升粗酶液每分钟内改变0.1个光密度值为1活力单位(U)。测得的羧甲基纤维素酶的活性如图5所示

黑木耳品种的淀粉酶、漆酶、多酚氧化酶和羧甲基纤维素酶的酶活指标可以反映菌种分解营养物质和抵御逆境的能力，结果如图2-5所示，冀1号在这4种酶活性中综合表现较好，说明其分解营养物质和抵御逆境的能力较强。

1.3黑木耳栽培种亲和性试验

使用直径90mm的培养皿，每皿用蠕动泵定量加入30mL的PDA培养基，在平板中央分别接入上述15种黑木耳栽培种的菌块，于25℃条件下培养7d。用5mm打孔器沿黑木耳菌落边缘打孔，每皿接入3个不同品种的菌块，呈三角形排列，分别在25℃条件下培养15d，观察并记录菌丝生长及拮抗情况，在菌株间有沟壑型、隆起型、色线型、隔离型均为不亲和表现，初步判定为不同菌株。

15个黑木耳栽培种的亲和性反应如表2所示，吊袋和黑木耳2，黑威伴金和龙江黑+，龙江黑+和极品-8，黑威伴金和极品-8，黑木耳-2和黑木耳-1体细胞亲和，其它品种之间不亲和。另外，冀1号与其它菌株有明显的拮抗产生，我们初步认为冀1号与其它14种黑木耳栽培种为不同种，综合各项指标，确定冀1号为用于诱变育种的亲本菌株。

表2

注：“+”代表菌株间不亲和；“-”代表菌株间亲和。表2中菌种编号1-15所代表的菌株如表3所示。

表3

菌株编号	菌株名称
		1	黑木耳-2
2	黑威伴金
		3	龙江黑+
4	黑木耳2
		5	冀1号
6	黑威单片
		7	黑木耳-1
8	延特5号
		9	高产王
10	黑威15
		11	极品-8
12	宝霖2号
		13	黑29
14	吊袋
		15	黑山

1.4冀1号亲本菌株原生质体制备

1.4.1黑木耳菌丝收集

先将获得优良的黑木耳亲本菌株冀1号接种于PDA培养基上进行活化，待长满平板后，用直径5mm的打孔器在菌丝边缘打孔，接种于铺有玻璃纸的PDA培养基中，置于25℃培养箱中培养7d。用接种针将菌丝划成小块接种于装有20mLSMY培养基的100mL三角瓶中，置于25℃培养箱中静止培养3d，每天轻摇几次。菌丝用筛子过滤，无菌水冲洗两遍，再用0.6M甘露醇冲洗两次后，4℃、5000rpm离心10min，小心吸取上清，收集菌丝。

1.4.2黑木耳冀1号原生质体制备

将收集的菌丝采用1％溶壁酶和1％蜗牛酶进行酶解，酶解温度为29℃，酶解时间为3h。酶解完毕后，用带有6层无菌擦镜纸的过滤器过滤，除去残留菌丝，4000rpm、离心10min收集底部原生质体，弃掉酶液。用0.6M甘露醇重悬原生质体，4000rpm、离心10min，同样方法洗涤原生质体2次，倒出上清，离心管内保留约2mL，使用血球计数板对保留的原生质体进行计数。

1.4.3黑木耳冀1号ARTP诱变育种

采用室温常压等离子体(ARTP)对冀1号原生质体进行诱变处理，将制备好的冀1号的原生质体(初始浓度10⁸个/mL)10μL均匀涂布在载片表面，以氦气为工作气体，处理距离2mm，处理功率100W，气流量10SLM，处理时间分别为0，10，20，30，40，50，60，80，100，120min，按照ARTP-M操作流程，对样品进行处理。样品处理完毕后，用无菌镊子将载片分别放至装有1mL稳渗剂的EP管中，将EP管置于振荡器上振荡1min，把附着在载片上的原生质体洗脱到稳渗剂中，形成新的菌悬液。取200μL、100μL、10μL，每个处理3个平板，涂布在培养皿中，28℃培养10d。观察原生质体再生情况，计算致死率。

1.5黑木耳诱变菌株的初筛

1.5.1高温条件下菌丝的生长速度

使用直径90mm的培养皿，每皿用蠕动泵定量加入30mLPDA培养基。培养皿中部接入组织分离后获得的黑木耳菌株，25℃培养满皿后，用直径为5mm的打孔器打孔制备菌饼。将菌饼接入PDA培养基平板中央，分别放30℃的恒温培养箱中培养，每个处理设置3个重复。7d后记录菌落直径，计算菌丝生长速度，计算公式如下：

菌丝生长速度(cm/d)＝菌落半径(cm)/生长d数(d)

将筛选出的黑木耳诱变菌株连续继代培养10次，通过30℃条件下菌丝的形态和生长速度测定其遗传稳定性。

1.5.2显微镜观察

将诱变的黑木耳菌株接种于PDA培养基中，25℃恒温培养箱培养7d，采用压片法于40倍镜下观察诱变黑木耳菌株的锁状联合情况，挑选具有锁状联合的菌株。

1.5.3黑木耳诱变菌株与亲本的亲和性试验

用5mm打孔器沿黑木耳菌落边缘打孔，每皿在对称位置接入亲本菌株和诱变菌株的菌块，分别在25℃条件下培养15d，观察并记录菌丝生长及拮抗情况，与亲本之间的菌丝有沟壑型、隆起型、色线型、隔离型均为不亲和表现。

亲本菌株冀1号原生质体经ARTP诱变后，致死率达到90％时的诱变时间为80s，挑取再生后的单菌落，其中30℃条件下生长速度大于亲本的共13株(编号依次为D1、D7、D9、D11、D12、D13、D17、D21、D25、D28、D37、JH40和D43)，其中JH40生长速度最快，为8.97mm/d，如图6所示，并且具有很好的遗传稳定性。显微镜JH40可以观察到明显的锁状联合，如图7所示。30℃条件下JH40的淀粉酶、漆酶、多酚氧化酶和羧甲基纤维素酶的酶活指标与亲本冀1号相比，JH40的酶活指标明显升高，如图8-11所示，说明JH40具有在高温条件下仍然具有更好的分解营养物质的能力和抵御逆境的能力。通过与亲本的亲和性试验，发现JH40与亲本有明显的隆起型拮抗反应，如图12所示。说明JH40为区别于亲本黑木耳冀1号的新菌株。

1.6黑木耳诱变菌株的复筛

将黑木耳诱变菌株JH40和栽培种冀1号接种于PDA培养基中活化，长满平板后，用直径5mm的打孔器在菌丝边缘进行打孔。挑取10个菌块接种于装有100mL液体PDA培养基和玻璃珠的500mL三角瓶中，25℃静置培养2d后，150rpm摇床震荡培养7d。将液体菌种接种于栽培料中，每袋接入10mL液体种，每个菌种各接30袋。栽培料配方为：棉籽皮40％，麸皮18％，木屑40％，石膏1％，蔗糖1％。25℃培养室内发菌，待菌丝长满袋后，继续培养6-7d。黑木耳菌袋充分后熟后，打孔催芽。以亲本菌株冀1号栽培种为对照，在冀中南地区通过出耳试验进行子实体阶段的性状考察。

黑木耳诱变菌株JH40和亲本冀1号的出耳试验及生长指标测定结果如表4所示：JH40较亲本满袋时间可提前3d，生物学效率、耳片厚度和泡发率等指标较亲本明显提升。

表4

1.7黑木耳诱变菌株的ITS鉴定

使用直径90mm的培养皿，每皿用定量蠕动泵加入30mL PDA培养基，待培养基凝固后，表面放入灭菌的玻璃纸。在培养基中央分别接入直径5mm的黑木耳菌块，25℃恒温培养箱培养10d，收集菌丝。采用天根植物基因组DNA提取试剂盒DP305(北京天根生化科技有限公司)对黑木耳菌丝的总DNA进行提取，经NanoDrop ND-2000分光光度计对DNA定量。

采用真菌ITS序列通用引物ITS1(5’-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’，SEQ ID NO:1)和ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’，SEQ ID NO:2)对不同品种(黑威15、黑威伴金、冀1号、吊袋、黑威单片、黑29、黑山、延特5号、黑木耳2、黑木耳-2、高产王、极品-8、黑木耳-1、龙江黑+、宝霖2号和诱变黑木耳菌种JH40)的DNA进行扩增。PCR反应体系：2.5μL 10×P CRBuffer、2μL dNTP、引物(ITS1和ITS4)分别加入0.5μL、0.5μL Taq DN A聚合酶、0.5μL DNA模板，用水补至25μL。PCR扩增条件：94℃预变性2min，94℃变性40s，52℃复性1min，72℃延伸1min，共35个循环，72℃保温5min，4℃保存。将PCR产物用1％的琼脂糖凝胶电泳进行检测。采用PC R纯化试剂盒EP101(北京全式金生物科技有限公司)对扩增产物进行纯化。采用试剂盒CT301(北京全式金生物科技有限公司)将纯化后的PCR产物连接T3载体(pEASY-T3，3039bp)，将PCR产物连接T3载体的连接产物导入到大肠杆菌感受态细胞中，并用含有Amp的LB平板对感受态细胞进行蓝白斑筛选，挑取阳性克隆，将阳性克隆接种于液体LB培养基中过夜培养，通过菌落PCR验证阳性克隆，委托华大基因对阳性克隆菌液进行测序，所得序列与NCBI数据库中已知序列进行比对(BLAST)，采用MEGA6.0软件，通过临近法构建系统发育树。发育树如图13所示，JH40的ITS序列(AAAACTTTGGGGGAGTCCTACCTGATTTGAGGCCAAGCTTTAAAATAGTTGTCCACAAGGGACGGCTGTAAGCAGCGCCGCTGAAGAGGCCCAGGGCAGTCGGCGCAGATAATTATCACACCGTTCGCCCAGCACTCTAAAAGCGCCAGCTAATGCATTTCAAGACGAGCCGATTACCGGCACGGTCCAAGTCCACCGCAGGCGACTGTTACATCGCAGGGGTGAGGGTTTACGTGACACTCAAACAGGCATGCTCCATGGAATACCAAGGAGCGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGAATTCTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGATGCGAGAGCCAAGAGATCCGTTGTTGAAAGTTGTTACTTTATAGTTTTCTTCACATTCTAGACTTTTCGTGGTTGCATGTAAAAGCGGAAGCGGCCGAAACCGCAACCGAAAAGGTGCACAGGTGTGAGAGGTTAACGGCGTGCAGCCTGAGCGCACAGCCGAAATTAAGACCGAAGCCTTAGAATCTTTAATGATCCTTCCGCAGGCCCCCCCCCGGGGGGGGG)如SEQ ID NO:3所示。

具有耐高温、优质的黑木耳菌株黑木耳JH40，其拉丁文名称为：Auriculariaauricular，于2019年12月17日在中国典型培养物保藏中心(武汉市)进行保藏，保藏编号为CCTCC NO：M20191058。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

SEQUENCE LISTING

<110> 河北省科学院生物研究所

<120> 一种黑木耳菌种JH40及其应用

<130> 2020

<160> 3

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 19

<212> DNA

<213> ITS1

<400> 1

tccgtaggtg aacctgcgg 19

<210> 2

<211> 20

<212> DNA

<213> ITS4

<400> 2

tcctccgctt attgatatgc 20

<210> 3

<211> 581

<212> DNA

<213> JH40的ITS序列

<400> 3

aaaactttgg gggagtccta cctgatttga ggccaagctt taaaatagtt gtccacaagg 60

gacggctgta agcagcgccg ctgaagaggc ccagggcagt cggcgcagat aattatcaca 120

ccgttcgccc agcactctaa aagcgccagc taatgcattt caagacgagc cgattaccgg 180

cacggtccaa gtccaccgca ggcgactgtt acatcgcagg ggtgagggtt tacgtgacac 240

tcaaacaggc atgctccatg gaataccaag gagcgcaagg tgcgttcaaa gattcgatga 300

ttcactgaat tctgcaattc acattactta tcgcatttcg ctgcgttctt catcgatgcg 360

agagccaaga gatccgttgt tgaaagttgt tactttatag ttttcttcac attctagact 420

tttcgtggtt gcatgtaaaa gcggaagcgg ccgaaaccgc aaccgaaaag gtgcacaggt 480

gtgagaggtt aacggcgtgc agcctgagcg cacagccgaa attaagaccg aagccttaga 540

atctttaatg atccttccgc aggccccccc ccgggggggg g 581

Claims (8)

1.一种黑木耳菌种JH40(Auricularia auricular)，其特征在于：其菌种保藏号为CCTCCNo：M20191058。

2.权利要求1所述的黑木耳菌种JH40产生的原生质体。

3.权利要求1所述的黑木耳菌种JH40产生的担孢子。

4.权利要求1所述的黑木耳菌种JH40产生的菌丝体。

5.权利要求1所述的黑木耳菌种JH40产生的子实体。

6.利用权利要求1所述的黑木耳菌种JH40进行黑木耳栽培得到的黑木耳菌棒。

7.权利要求1所述的黑木耳菌种JH40在黑木耳栽培中的应用。

8.权利要求1所述的黑木耳菌种JH40在制备含有黑木耳的保健品中的应用。

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