CN112553075A - 一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法及装置 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法及装置，获取患者肿瘤组织标本、培养肿瘤细胞、获得足够数量的肿瘤细胞、使用多个频率的电场进行抑制肿瘤细胞生长的敏感频率试验、从实验结果中选择不少于一个对肿瘤细胞生长抑制作用明显的电场的频率为敏感频率，用敏感频率电场对患者进行治疗、检查病变区域情况、跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整。本发明解决了现有抑制肿瘤细胞生长的最佳电场频率难以确定的问题。

Description

一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法及装置
技术领域
本发明涉及医疗生物技术领域，具体涉及一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法及装置。
背景技术
当恶性肿瘤进入发展期时，肿瘤细胞为快速生长的状态，数量与时间呈指数关系。目前肿瘤治疗电场治疗法的基本原理均建立在电场对肿瘤细胞有丝分裂具有阻碍破坏作用的基础上，使用200KHz的电信号产生的电场对患者肿瘤细胞的快速生长进行抑制，以达到治疗效果。在细胞实验中发现，用不同频率的电信号产生的电场对多位患者的肿瘤细胞快速生长进行抑制，抑制效果各不相同，有的150KHz效果好，有的180KHz效果好，有的200KHz效果好，有的220KHz效果好，有的240KHz效果好，200KHz是对肿瘤细胞快速生长有抑制作用频率段的中心频率，对于个体患者而言，不一定是最好的，甚至有的患者的肿瘤细胞对200KHz电信号产生的电场不敏感，抑制效果达不到治疗的需要。
通过进一步的实验表明，同一位患者的病情进展到不同阶段时，其肿瘤细胞的敏感频率也有不同，多数患者的肿瘤细胞的敏感频率是随着病情的进展有变低的趋势。使用敏感频率产生的电场对患者的肿瘤细胞进行抑制，效果要比使用目前的统一固定频率好。如果能够根据病情的发展及时进行敏感频率跟踪校正，效果会更加显著。因此可以得出使用有针对性的敏感频率产生的电场对患者的肿瘤进行抑制，效果比统一频率要好。
有部分患者对电场的不同频率、不同方向以及不同强度均展现出不同的肿瘤抑制效果。已经证实了不同的患者的肿瘤的敏感频率不是一样的，经研究表明，有的患者的肿瘤细胞对200KHz电信号产生的电场不敏感，抑制效果达不到治疗的需要，这是目前肿瘤电场治疗法对部分患者效果不好或是没有效果的原因。现有技术中难以确定不同的肿瘤细胞最佳的抑制生长电场频率。
发明内容
为此，本发明提供一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法及装置，以解决现有抑制肿瘤细胞生长的最佳电场频率难以确定的问题。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
根据本发明的第一方面，公开了一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置，所述方法为：
获取患者肿瘤组织标本、培养肿瘤细胞、获得足够数量的肿瘤细胞、使用多个频率的电场进行抑制肿瘤细胞生长的敏感频率试验、从实验结果中选择不少于一个对肿瘤细胞生长抑制作用明显的电场的频率为敏感频率，用敏感频率电场对患者进行治疗、检查病变区域情况、跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整。
进一步地，所述培养肿瘤细胞包括通过技术手段，对肿瘤细胞进行培养，使肿瘤细胞生长、分裂、增殖，以获得可供进行所述敏感频率电场试验的数量。
进一步地，所述敏感频率电场是由50KHz至500KHz的正弦波信号产生的交变电场或者由50KHz至500KHz的方波信号产生的交变电场。
进一步地，所述敏感频率试验，包括多个使用不同频率电信号电场的抑制组，和一个不施加电场的对照组，进行抑制细胞生长的实验，将抑制效果对比，选择不少于一个抑制肿瘤细胞生长效果好的频率，当出现相邻的两个频率抑制效果相当时，取两个相邻频率中间的频率点为最佳敏感频率。
进一步地，所述敏感频率试验中的敏感频率电场包括敏感频率产生的电场，以及电场的强度和施加时间，在电环境培养装置中产生的电场的强度大于0.7V/cm。
进一步地，所述敏感频率对患者进行电场治疗，向患者施加电信号的频率为通过细胞试验获得的对该患者肿瘤细胞生长抑制效果最好的频率，施加电信号的强度为在患者体内的病变区域产生不小于0.7V/cm的电场强度，施加电信号的时间为每天不少于18个小时。
进一步地，所述病变区域的检查包括通过医疗技术手段检查病变区域变化的情况、评估患者生存质量，以此确定敏感频率电场对病变细胞生长的抑制情况，跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整，根据检查病变区域进展情况，对敏感频率进行调节。
本发明的第二方面，公开了一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置，所述装置包括：电场发生装置、电环境培养装置、玻片，将采集到的患者肿瘤细胞放置在电环境培养装置中进行培养，培养后通过分离取细胞悬液均匀涂抹在玻片表面，将玻片放置在电场发生装置中，通过电场发生装置施加不同频率的电场，经过电场刺激后再次收集细胞悬液，离心弃上清液，重悬混匀,制成新的细胞悬液，进行细胞计数。
进一步地，所述电场发生装置内设置有能够将电信号施加到培养液中的电信号施加介质单元，电信号施加介质单元的一个面接触培养液，另一个面为导电的电极。
进一步地，所述电场发生装置内设置有电场频率调节装置，能够根据实际需求调节电场频率和强度。
本发明具有如下优点：
本发明公开了一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法及装置，通过对提取的肿瘤组织细胞进行培养，增殖培养后，将肿瘤细胞放入电场发生装置，施加不同频率、强度的电场，对肿瘤细胞进行刺激，经过电场作用后，统计在不同频率的电场下，肿瘤细胞的增殖情况。确定最佳的抑制肿瘤细胞增殖的敏感电场频率和强度。利用敏感频率电场对患者而进行治疗，实现针对不同类型的肿瘤细胞施加合适频率的电场，抑制其生长。
附图说明
为了更清楚地说明本发明的实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是示例性的，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图引申获得其它的实施附图。
本说明书所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本发明可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整，在不影响本发明所能产生的功效及所能达成的目的下，均应仍落在本发明所揭示的技术内容得能涵盖的范围内。
图1为本发明实施例提供的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法流程图；
图2为本发明实施例提供的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置结构图；
图3为本发明实施例提供的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长时确定最敏感频率方法一示意图；
图4为本发明实施例提供的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长时确定最敏感频率方法二示意图。
图中：1-电场发生装置、2-电极、3-电场频率调节装置。
具体实施方式
以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例公开了一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，所述方法为：
获取患者肿瘤组织标本、培养肿瘤细胞、获得足够数量的肿瘤细胞、使用多个频率的电场进行抑制肿瘤细胞生长的敏感频率试验、包括多个使用不同频率电信号电场的抑制组，和一个不施加电场的对照组，进行抑制细胞生长的实验，将抑制效果对比，选择不少于一个抑制肿瘤细胞生长效果好的频率为敏感频率，用敏感频率电场对患者进行治疗、检查病变区域情况、跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整。
具体操作过程为：获取患者肿瘤组织标本，包括通过切除手术获取的病变肿瘤细胞，以及通过介入穿刺手术获取的病变组织标本，对肿瘤细胞进行培养，使肿瘤细胞生长、分裂、增殖，以获得可供进行所述敏感频率电场试验的数量。
取培养至80％以上融合度的T75培养瓶一瓶，丢弃培养基，加入Trypsin-EDTA(0.25％)，37℃，孵育2-3min，加入培养基(DMEM+10％FBS)终止消化。Trypsin-EDTA胰酶是是最常用的细胞分离试剂，为223个氨基酸组成的单链多肽，是胰蛋白酶原(zhitrypsinogen)在Lys6和Ile7之间切除氨基N末端6肽(hexapeptide)得到。
在离心机中离心五分钟，加入专用培养基，调节细胞浓度1-2*105/ml。
将玻片灭菌后，置于电环境培养装置中，每片加细胞悬液，使细胞悬液均匀分布于玻片表面。将玻片置于37℃饱和湿度培养箱中2-4h后，补充专用培养基，再置于37℃、饱和湿度的培养箱中培养。
将肿瘤细胞分为两组，一组不施加电场，另一组施加不同频率的电场。敏感频率电场是由50KHz至500KHz的正弦波信号产生的交变电场或者由50KHz至500KHz的方波信号产生的交变电场。本实施例中，电场频率分别采用100/150/180/200/220/300kHz，电场场强大小设置为2.2v/cm，电场作用时间72h。细胞通过电场处理后，胰酶消化，将细胞悬液收集到离心管中，进行离心，丢弃上清液，重悬混匀,制成细胞悬液，进行细胞计数。实验重复3次。
对肿瘤细胞计数结果进行作图分析，p＜0.05代表差异具有显著性意义。确定该组对应的电场频率为最佳敏感频率。
利用敏感频率对患者进行电场治疗，向患者施加电信号的频率为通过细胞试验获得的对肿瘤细胞生长抑制效果最好的频率，施加电信号的强度为在患者体内的病变区域产生不小于0.7V/cm的电场强度，施加电信号的时间为每天不少于18个小时。病变区域的查看包括通过医疗技术手段检查病变区域变化的情况、评估患者生存质量，评估敏感频率电场对病变细胞生长的抑制情况，跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整，根据检查病变区域进展情况，对敏感频率进行调节。
实施例2
本实施例公开了一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置，所述装置包括：电场发生装置1、电环境培养装置、玻片，将采集到的患者肿瘤组织细胞放置在电环境培养装置中进行培养，培养后通过分离取细胞悬液均匀涂抹在玻片表面，将玻片放置在电场发生装置1中，通过电场发生装置1施加不同频率的电场，经过电场刺激后再次收集细胞悬液，离心弃上清液，重悬混匀,制成新的细胞悬液，进行细胞计数。
电场发生装置1内设置有能够将电信号施加到培养液中的电信号施加介质单元，电信号施加介质单元的一个面接触培养液，另一个面为导电的电极2。电场发生装置1内设置有电场频率调节装置3，能够根据实际需求调节电场频率和强度。通过电场发生装置1调节不同频率的电场，能够找出最佳的抑制肿瘤细胞生长的电场频率和强度，出现两个相邻的频率同为敏感频率时，取两个频率中间的频率点为最敏感频率。
实施例3
本实施例公开了一种确定敏感频率的方法。获取患者肿瘤标本后，对肿瘤细胞进行增值培养，达到足够的细胞数量后，将细胞分为多个抑制组和一个对照组，每组不少于一个电环境培养装置，将电环境培养装置放入培养箱中，对每个抑制组施加不同频率的电场，经过72小时后，对各组细胞进行统计，得出抑制率，如图3所示，使用频率3的抑制组的细胞被抑制的效果最好，频率3为160KHz，那么该患者肿瘤细胞的敏感频率为160KHz。如图3所示如图4所示，如果得出两个相邻的频率3和频率4对的抑制率相当时，对该患者肿瘤细胞抑制效果最好的频率为(频率3+频率4)÷2＝170KHz，那么该患者肿瘤细胞的敏感频率为170KHz。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述方法为：
获取患者肿瘤组织标本、培养肿瘤细胞、获得足够数量的肿瘤细胞、使用多个频率的电场进行抑制肿瘤细胞生长的敏感频率试验、从实验结果中选择不少于一个对肿瘤细胞生长抑制作用明显的电场的频率为敏感频率，用敏感频率电场对患者进行治疗、检查病变区域情况、跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整。
2.如权利要求1所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述培养肿瘤细胞包括通过技术手段，对肿瘤细胞进行培养，使肿瘤细胞生长、分裂、增殖，以获得可供进行所述敏感频率电场试验的数量。
3.如权利要求1所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述敏感频率电场是由50KHz至500KHz的正弦波信号产生的交变电场或者由50KHz至500KHz的方波信号产生的交变电场。
4.如权利要求1所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述敏感频率试验，包括多个使用不同频率电信号电场的抑制组，和一个不施加电场的对照组，进行抑制细胞生长的实验，将抑制效果对比，选择不少于一个抑制肿瘤细胞生长效果好的频率，当出现相邻的两个频率抑制效果相当时，取两个相邻频率中间的频率点为最佳敏感频率。
5.如权利要求1所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述敏感频率试验中的敏感频率电场包括敏感频率产生的电场，以及电场的强度和施加时间，在电环境培养装置中产生的电场的强度大于0.7V/cm。
6.如权利要求5所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述敏感频率对患者进行电场治疗，向患者施加电信号的频率为通过细胞试验获得的对该患者肿瘤细胞生长抑制效果最好的频率，施加电信号的强度为在患者体内的病变区域产生不小于0.7V/cm的电场强度，施加电信号的时间为每天不少于18个小时。
7.如权利要求6所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的方法，其特征在于，所述病变区域的检查包括通过医疗技术手段检查病变区域变化的情况、评估患者生存质量，以此确定敏感频率电场对病变细胞生长的抑制情况，跟踪敏感频率电场的治疗情况并进行调整，根据检查病变区域进展情况，对敏感频率进行调节。
8.一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置，其特征在于，所述装置包括：电场发生装置、电环境培养装置、玻片，将采集到的患者肿瘤细胞放置在电环境培养装置中进行培养，培养后通过分离取细胞悬液均匀涂抹在玻片表面，将玻片放置在电场发生装置中，通过电场发生装置施加不同频率的电场，经过电场刺激后再次收集细胞悬液，离心弃上清液，重悬混匀,制成新的细胞悬液，进行细胞计数。
9.如权利要求8所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置，其特征在于，所述电场发生装置内设置有能够将电信号施加到培养液中的电信号施加介质单元，电信号施加介质单元的一个面接触培养液，另一个面为导电的电极。
10.如权利要求8所述的一种用敏感频率电场抑制肿瘤细胞快速生长的装置，其特征在于，所述电场发生装置内设置有电场频率调节装置，能够根据实际需求调节电场频率和强度。
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