CN112535734A - 一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种抑制LncRNA‑RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。所述LncRNA‑RP5序列如SEQ ID NO.1所示。所述LncRNA‑RP5竞争性抑制miR‑34a‑5p调控人胎盘钙黏蛋白介导的内化作用从而促进小细胞肺癌侵袭转移。本申请的抑制LncRNA‑RP5表达的试剂可以抑制LncRNA‑RP5表达，可以有效改善小细胞肺癌患者的预后，抑制小细胞肺癌的迁移和增殖，促进小细胞肺癌细胞的凋亡，具有极大的临床意义。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体是一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
背景技术
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，也是致死率最高的肿瘤。2018全球癌症统计，有大约1810万新增癌症病例和960万癌症患者死亡，其中肺癌占所有新发癌症病例的11.6%，占所有癌症总死亡人数的18.4%。从病理分型上，肺癌有可分为小细胞肺癌（smallcelllungcancer，SCLC）和非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer，NSCLC）。其中小细胞肺癌（smallcelllungcancer，SCLC）是一种神经内分泌肿瘤，占全部肺恶性肿瘤的15%~20%，其恶性程度高、侵袭性强、易复发和转移的特点限制了患者的长期生存，是一种预后极差的恶性肿瘤。所以，提供一种能够有效改善预后的治疗小细胞肺癌药物是非常有必要的。
发明内容
本发明就是为了解决现有技术中存在的问题，所提出了一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
本发明采用了如下的技术方案。
一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
进一步的，所述LncRNA-RP5序列如下所示（SEQ ID NO.1）：
ATCTTCTGCTTCACCCCATGCTCGGTCCCTGAGCCAGTTCTGTCATTGGTTCTTTCAGACCAGGGCAGGAAAAGTCAAGAAAGCAAAAGCGGATTCTAGGCTGTGGGGTTTGCTGTTTGCTAGCCCCCTGGCAGAGATGCCTGTCCTTGCAGTCCTGAACTGGTGGCCAAGTGTGCATGCATGCACGTGCAGGTGTGTGCATGTGCAGGTGTGCATGCGTGTATGTGCGCACACACATTCATGCTTGTACATGTTTGTGTACACGCACACTTTTTTCTGCTTTCAATTTCAAGCTGTTGCCTCCCTGATGTGTCTGTTTAGTGACTTGAGCCAGAAAGATTCCCGGTTCTATGTGGGATGAGAATGAACGCAGGCAGGTCTCCACAGAAGTGAGTAAAGTAGAGCTGAGAAGAAGGACATTGTCTCATGCCAGCCTGTCCAATAGCCACTTTGCCCCAGCCCTGCCTCAAGCCCCAGAGAGATGACAAGGCTCTCTCTGTTTGTCGACTCCTTGAAGCTCAGAAAGGTGGGTCAAGAGGTGCCCGTCAAGCGTTTAGGCAAGCACAGGACCCTGATCTTTACTAAGTCTCCACATCTCTCTTGCACAGCCCTGGGCTCAGGGCTTGGTCCCCTCTGGGCAGGCCATCCAGACTAAGTGACAGTCAGATTGTGTGTGGGGAGGCTAGAGACATCCATTCTTCATGGATCAGCCTGAATGGCTGGACAGATCTTGCAAATGGATTGTGTAAGACAGAGTGTGGAAGAGGAGGCTGTGATCAGTGGCTTGGAGAGCAGAGTGTGGTCAGGCGCTAAACCTAAGGCTTTTCTGGGAAGAGCTGTTAAGATTAGACTGTTCTCCCAAAAAGCCAATAATTCTGAGTGTCTCCATTAATGCCTAGGTAGCCCATACTCTCACCCAGCCGGTGCCCTTCAGCCTGGAACCTTTGGATGGAGGATTGGACCTTGTGACCTTCAAGTTCCCTTCCGAACCAAATATGCTCTAACCCAGGAGATGGTGCTGTTGCCCAGGAAGCCGGTCACCATGACGAGAGTACCCGCTCAGATGAGGATGCAGGCGGAGGCGGTGAAGGTGCTGGAGGCCAGGATGCTGAGGTAGCTGCTCCTCTCCACCAGGGTCCAGATGCCCATGGCCAGGACAGCTGCCCCCCTGACCTGCAGGAGACCACCAGGTTGGAGCAGGGGGTGGCGGGGGCCTCAGGAGCTGCCATTCCTTGAGTGCCCGCTGGGTACCAGGCACTTCTCGTGCATTGTCTTATTCAATTTAGGCCTCCTAAGAGCCTGTGAGAACAGTGTGGTGGCCTAGCTTTACAGATGAGGAAACGGAGGCTGAGAGAGGTTTGCAGGCTTGTCCAAGGTCACACATGTAAGCGAGCTGCAGATTTTGAATCTGGGTCTGACTTCTGATTCTGTGCATCTTACTATGGTTCCTACTGCATATGAGGCGGGGAGAAATGACTTCAGTTTTGGGGATGACTAATATACCTGAGTCCCTTCGCCTCCCCTCCCCTCAGAGCGCTCCCTCCCTCTGTCCACGTTTCCCTGATGGATGTGGAGGTGCCATTTTGAGCACCTCCCCTTGTTCAATCCTTATATTTGCCCATTGGGGAAGCACGGCTGGGCCCCTTATCCCTCCCTGTTCTACAGAGGAAGGAACTGAGGCCCATGGAGGAGAGGTAAATGGCCCGAGTTAGGGGCAGGGCCAGGACCAGGACTCAGAGCCCAGGGCCTGCTTGCTCAGTCTCGCTGCCTCCATGATGGAAGGGCCACTGTGCTGGACAAGTTGGAGCTCCCTGGGACCACAGGAGGAGGGAGGAGAGCCTTCTTTGCTGTCTGACTCCCTTTCAGTCCTGAGAGGGGGCAGGGACGGGACACTGCTGATTTGCAGGTCTGGGGGATGCCTTCTTGGAAATAGAGTACCTGGGAAATGTAGCTGGGGTGGTGGGGCTTGACTGTTCTTTCCTGCCATGAAGCTGAGGAGCCTTTTAGTGACTGTTATCCTCAGCAGAGCATAGTGGGTGGGTGCAAGTGTCCTCAAGGTGCCAGATGGGGGCTGTTTGGAGTGTTTTCCCAGGATTTGGGTCCTCTGGGACCTCTGACCATCTCTGTCATTTGCTCCTGGGAAGGTGGACTTCTGTCTCCCAGTCTCTCTGCCCGCCATTTAGGGACGGGTCCATTTCCTCTGATGGTCAGTAGATGCTTCCTCAAGGGGTCTTGGGTGTAGCCAAAGCTAGAGAAGCCCTCCCGGGCTCTGTTCACATCCCCTGATGCTTTTCCCTGCAAGTTGTCTCCCGTCTGCCCCAGGAAGACTCTCTGTATAACCTAACCTGTCACTTCCCAGTTCTCTGTTCCGGGGAGTCGCAGACCTTGGCTGAGTAAATGGAAGGTGGTTCTTAGCAATGAACAGGCACCTACATTACTCAACTCGCAAGTATTTTACCATTTTGCCATTTTCTCTTCTGAGCTTTGCAACAGCTCTGTGAGGATGGGGCCGGGCAGGAGGGGCCAGGCTATCCCTGTCTTGCAGATAAGAAAATTGAGGCTTGGAGAGAATAAGAATGTGCCCAAGATGACACCATCAGAGGGTCAGAATTGAGGTGCAAACCCAGTTATTTGAGGGCAAATCCAGGCCTCTGTCCTTGGATCCCCCAGAGTAGGCTGGGCCTGCTTCTCTCTTACTTCTACGTTTTTAATAGACATGATTTCTTCAAAGTGCCATTTTATCTCCATAGGTACCTCCAGACACCACCCAGGCTGCAGCAAATGGAATGGGAGAGGCTAACACACCATAATTTTTCAATTCCATGATGCCCATTTTTTCTCACATTTTAACGTCTCTAAAATTGGGGCACATCTTATGATTGATGGCATCTTACAATTACACTTGGCAGTACTTTTTCTTGGTGATACAAAAAAACAACAGTGTATCTTACAACTGATAGCTTAGATTCAGTGAAATCCTAGAATACAACAGGTTTGAAAATTC
进一步的，所述LncRNA-RP5竞争性抑制miR-34a-5p调控人胎盘钙黏蛋白介导的内化作用从而促进小细胞肺癌侵袭转移。
本发明获得了如下有益效果。
本申请的抑制LncRNA-RP5表达的试剂可以抑制LncRNA-RP5表达，可以有效改善小细胞肺癌患者的预后，抑制小细胞肺癌的迁移和增殖，促进小细胞肺癌细胞的凋亡，具有极大的临床意义。
附图说明
图1是本发明影响小细胞肺癌患者预后的LncRNA差异表达结果图；
图2是本发明LncRNA-RP5在小细胞肺癌肿瘤组织和癌旁组织的表达差异图；
图3是本发明LncRNA-RP5能够促进小细胞肺癌细胞的增殖和迁移实验结果图；
图4是本发明LncRNA-RP5能够抑制小细胞肺癌细胞的凋亡实验结果图；
图5是本发明裸鼠成瘤实验结果图。
具体实施方式
以下参照实施例对本发明进行进一步的技术说明。
（1）小细胞肺癌患者LncRNA-RP5的表达与预后的关系
从2000余例小细胞肺癌患者中筛选出生存期完整、病理成分单一、治疗规范的局限期小细胞肺癌患者107例。考虑到手术患者肿瘤负荷为零，其发生发展更能反映出肿瘤的生物学特征，因此，从中挑选了5对生存期差异显著（生存期小于12个月5例，生存期大于36个月5例）、基线水平一致的手术患者，应用其蜡块组织检测差异表达的LncRNA，应用能够检测已知和未知基因的RNA-seq方法，而非传统的用于检测已知基因的基因芯片。检测发现了30余种差异表达的LncRNA。其中，LncRNA-RP5差异显著，且LncRNA-RP5高表达，患者预后差（图1A.LncRNA筛选流程图；图1B.LncRNA差异表达火山图，筛选阈值为 p值< 0.05，差异表达LncRNA共33个。A组为生存期长的小细胞肺癌患者组，C组为生存期短的小细胞肺癌患者组，分析发现LncRNA-RP5在C组高表达，结果显示：LncRNA-RP5高表达，预后差；图1C.LncRNA差异表达热点图）。此外，进一步检测了20对小细胞肺癌的癌和癌旁组织，发现LncRNA-RP5在癌组织中高表达（图2）。
（2）LncRNA-RP5对小细胞肺癌细胞迁移和增殖的影响
1)LncRNA-RP5能够促进小细胞肺癌细胞的增殖和迁移，抑制细胞凋亡（图3、4）
图3A:应用小细胞肺癌细胞株，瞬时过表达LncRNA-RP5，转染48小时后，CCK8检测细胞增殖。
图3B:应用LncRNA-RP5的类似物，作用于小细胞肺癌细胞株，检测miR-34a-5p的表达。结果显示：LncRNA-RP5能够下调miR-34a-5p的表达。
图3C:将高表达LncRNA-RP5的病毒质粒，转染至小细胞肺癌细胞株，Transwell实验检测迁移细胞数。结果显示：LncRNA-RP5能够促进小细胞肺癌细胞迁移。
图4 ：LncRNA-RP5能够抑制小细胞肺癌细胞的凋亡
通过病毒转染的方式，使小细胞肺癌细胞系中LncRNA-RP5高表达，在相同实验条件下，与LncRNA-RP5正常表达的小细胞肺癌细胞系进行比较，观察两组细胞的凋亡情况。
2)在裸鼠成瘤实验提示高表达LncRNA-RP5的小细胞肺癌细胞系，其成瘤能力增强（图5）
通过病毒转染的方式，使小细胞肺癌细胞系中LncRNA-RP5高表达，一组用LncRNA-RP5高表达的小细胞肺癌细胞悬液接种于裸鼠；另一组用普通的小细胞肺癌细胞悬液接种于裸鼠。在同样的实验条件下，比较两组细胞的成瘤能力。
本具体实施方式的实施例均为本发明的较佳实施例，并非依此限制本发明的保护范围，故：凡依本发明的结构、形状、原理所做的等效变化，均应涵盖于本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途，其特征在于：所述LncRNA-RP5序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根据权利要求1所述的一种抑制LncRNA-RP5表达的试剂在制备治疗小细胞肺癌药物中的用途，其特征在于：所述LncRNA-RP5竞争性抑制miR-34a-5p调控人胎盘钙黏蛋白介导的内化作用从而促进小细胞肺癌侵袭转移。
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