CN112525974A - 一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法 - Google Patents

一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：将单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，加入H2PtCl6溶液，微波反应，得到功能化二硫化钼；称取功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，取功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰电极；将功能化二硫化钼修饰电极浸入到同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定。本发明方法实现简便、灵敏地在抗坏血酸存在情况下测定多巴胺、尿酸浓度。

Description

一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法
技术领域
本发明涉及一种浓度测定方法，特别是涉及一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法。
背景技术
抗坏血酸、多巴胺、尿酸同时存在于人体中枢神经细胞外液中，是人体内重要的小分子。其中，多巴胺和尿酸在人体的肾脏功能、心血管系统和中枢神经系统中起着重要的作用。多巴胺在体内的含量异常会直接对人体的精神活动产生影响。过量的尿酸含量往往意味着嘌呤代谢异常，而且过量的尿酸会导致偏酸性的内环境，从而影响细胞的功能。由于多巴胺、尿酸和抗坏血酸共存于生物体的体液中，往往会干扰彼此。由于其含量测定具有重要的医学研究价值，对多巴胺、尿酸和抗坏血酸的同时检测具有重要的意义。
发明内容
针对上述现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，能够在抗坏血酸存在情况下简便、灵敏地测定多巴胺、尿酸的浓度。
为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：将单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，加入H2PtCl6溶液，微波反应，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，得到功能化二硫化钼溶液，取功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰电极浸入到同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，得到功能化二硫化钼修饰电极在同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V多巴胺、0.3V尿酸的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
优选地，在步骤一中单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1。
优选地，在步骤一中单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比范围为1：20.8～1：62.4。
更优选地，在步骤一中单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比为1：41.6。
优选地，在步骤二中功能化二硫化钼溶液浓度范围为4μg/ml～20μg/ml。
优选地，在步骤三中同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液pH值范围为pH 6.5～pH 8.0。
更优选地，在步骤三中同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液的pH值为pH 7.5。
优选地，在步骤三中差分脉冲伏安法的扫描范围设为-0.2～0.8V。
采用上述技术方案，本发明的有益效果有：
本发明提供的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，通过将制备的功能化二硫化钼修饰电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，可以得到功能化二硫化钼修饰电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；通过对同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液进行测定来得到优化条件下的检测限为0.21μM的多巴胺标准曲线以及检测限为0.41μM的尿酸标准曲线；采用差分脉冲伏安法测定得到包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液中的多巴胺与尿酸的对应峰电流值，并利用多巴胺标准曲线和尿酸标准曲线得到多巴胺和尿酸的浓度，本发明方法实现简便、灵敏地在抗坏血酸存在情况下测定多巴胺、尿酸浓度。
附图说明
图1为本发明的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法的流程图；
图2为功能化二硫化钼修饰电极在同时包含坏血酸、多巴胺和尿酸的溶液中的差分脉冲伏安图；
图3为优化条件下多巴胺的标准曲线图；
图4为优化条件下尿酸的标准曲线图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合实施例和附图，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明提供一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，如图1所示，包含以下步骤：
步骤一：将单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，加入H2PtCl6溶液，微波反应，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，得到功能化二硫化钼溶液，取功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰电极浸入到同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液(PBS)中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，得到功能化二硫化钼修饰电极在同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V多巴胺、0.3V尿酸的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例1
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：20.8，将200mg单层二硫化钼与20ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取5mg步骤一的功能化二硫化钼并加入10ml超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例2
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：62.4，将200mg单层二硫化钼与60ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取5mg步骤一的功能化二硫化钼并加入10ml超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例3
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取5mg步骤一的功能化二硫化钼并加入10ml超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
在实施例1至实施例3中，200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合，制备得到功能化二硫化钼，进而得到的功能化二硫化钼修饰玻碳电极对于抗坏血酸、多巴胺、尿酸的区分度最优且较灵敏。
实施例4
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为4μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例5
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为8μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例6
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为12μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例7
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为16μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例8
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为20μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
在实施例4至实施例8中，浓度4μg/ml的功能化二硫化钼溶液，得到的功能化二硫化钼修饰玻碳电极对于抗坏血酸、多巴胺、尿酸的区分度最优且较灵敏。
实施例9
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为4μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 6.5的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例10
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为4μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.0的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
实施例11
一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：按已知方法制备单层二硫化钼，按单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比1：41.6，将200mg单层二硫化钼与40ml质量分数为20％的聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，按单层二硫化钼与H2PtCl6质量比为8.9：1，加入0.55ml100mM的H2PtCl6溶液，微波反应30分钟，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，4℃存储备用，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取步骤一的功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，超声15分钟溶解，得到浓度为4μg/ml的功能化二硫化钼溶液，取10μL功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的玻碳电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极；
步骤三：将步骤二的功能化二硫化钼修饰玻碳电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 8.0的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，扫描范围设为-0.2～0.8V，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流的值，以浓度为横坐标，差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线；
步骤五：包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液，采用差分脉冲伏安法测定，分别得到多巴胺与尿酸对应峰电流值，通过步骤四的多巴胺标准曲线以及尿酸标准曲线分别得到多巴胺和尿酸的浓度。
在实施例4以及实施例9-11中，其中实施例4中，在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的0.1M pH 7.5的磷酸盐溶液中，功能化二硫化钼修饰玻碳电极对于抗坏血酸、多巴胺、尿酸的区分度最优且较灵敏，得到功能化二硫化钼修饰玻碳电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图，如图2所示。并且得到优化条件下的多巴胺标准曲线：Y＝1.27+0.0712X，R2＝0.998，检测限为0.21μM，如图3所示；以及优化条件下的尿酸标准曲线：Y＝0.536+0.0251X，R2＝0.988，检测限为0.41μM，如图4所示。
本发明的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，制备出功能化二硫化钼修饰电极，通过将功能化二硫化钼修饰电极浸入到同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，可以得到功能化二硫化钼修饰电极在同时包含已知浓度的多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；通过对同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的系列浓度溶液进行0.1V(多巴胺)、0.3V(尿酸)的峰电流值测定来得到优化条件下的多巴胺标准曲线和尿酸标准曲线；采用差分脉冲伏安法测定得到包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的待测溶液中的多巴胺与尿酸的对应峰电流值，并利用多巴胺标准曲线和尿酸标准曲线得到多巴胺和尿酸的浓度，本发明方法实现简便、灵敏地在抗坏血酸存在情况下测定多巴胺、尿酸浓度。
以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，包含以下步骤：
步骤一：将单层二硫化钼与聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液混合均匀后，加入H2PtCl6溶液，微波反应，反应结束后，产物于室温冷却并离心清洗，得到功能化二硫化钼；
步骤二：称取所述步骤一的所述功能化二硫化钼并加入超纯水溶解，得到功能化二硫化钼溶液，取所述功能化二硫化钼溶液滴加到处理过的电极表面，晾干后得到功能化二硫化钼修饰电极；
步骤三：将所述步骤二的所述功能化二硫化钼修饰电极浸入到同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的磷酸盐溶液中，采用三电极系统，选择差分脉冲伏安法进行测定，得到功能化二硫化钼修饰电极在同时包含多巴胺、尿酸以及抗坏血酸的所述磷酸盐溶液中的差分脉冲伏安图；
步骤四：配制同时包含所述多巴胺、所述尿酸以及所述抗坏血酸的系列浓度溶液，分别测定0.1V多巴胺、0.3V尿酸的峰电流的值，以浓度为横坐标，所述差分脉冲伏安法以峰电流为纵坐标绘制标准曲线，得到所述多巴胺标准曲线以及所述尿酸标准曲线；
步骤五：包含所述多巴胺、所述尿酸以及所述抗坏血酸的待测溶液，采用所述差分脉冲伏安法测定，分别得到所述多巴胺与所述尿酸对应峰电流值，通过所述步骤四的所述多巴胺标准曲线以及所述尿酸标准曲线分别得到所述多巴胺和所述尿酸的浓度。
2.根据权利要求1所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤一中所述单层二硫化钼与所述H2PtCl6质量比为8.9：1。
3.根据权利要求2所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤一中所述单层二硫化钼与所述聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比范围为1：20.8～1：62.4。
4.根据权利要求3所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤一中所述单层二硫化钼与所述聚二烯丙基二甲基氯化铵质量比为1：41.6。
5.根据权利要求2所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤二中所述功能化二硫化钼溶液浓度范围为4μg/ml～20μg/ml。
6.根据权利要求2所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤三中同时包含所述多巴胺、所述尿酸以及所述抗坏血酸的所述磷酸盐溶液pH值范围为pH 6.5～pH 8.0。
7.根据权利要求2所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤三中同时包含所述多巴胺、所述尿酸以及所述抗坏血酸的所述磷酸盐溶液的pH值为pH 7.5。
8.根据权利要求1所述的在抗坏血酸存在情况下多巴胺、尿酸浓度测定的方法，其特征在于，在所述步骤三中差分脉冲伏安法的扫描范围设为-0.2～0.8V。
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