CN112525652A - 一种稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种操作简便，染色效果清晰，检出率高且不易出现沉淀，体系稳定易于保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，包含A液、B液两种试剂。A液中的荧光素可以高亲和力地与真菌细胞壁上的β‑多糖，如几丁质与纤维素等结合，标记样品中存在的真菌成分。B液由水、荧光素以及荧光助剂组成，荧光素能荧光标记阴道分泌物中的细胞以及病原微生物。试剂分别添加了防干扰荧光助剂，可提高荧光染料与细胞以及微生物的结合率，荧光强度增强，细胞微生物轮廓清晰可见同时提高染色液组分体系的稳定性，降低染液荧光淬灭风险。此染色液操作简单快捷，背景干净，图像清晰，易于判断，临床使用可大大提高阴道炎等妇科白带检测项目的准确率。
Description
技术领域
本发明属于医学诊断技术领域，具体涉及一种阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液。
技术背景
阴道炎是不同病因引起的多种阴道粘膜炎性疾病的总称。在正常生理状态，阴道的组织解剖学及生物化学特点足以防御外界微生物的侵袭。如果遭到破坏，则病原菌即可趁机而入，借种种因素，导致阴道炎症。
阴道炎是妇产科患者最常见疾病，分特异性和非特异性阴道炎，大多是由加德纳菌、真菌、滴虫感染引起的细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎。细菌性阴道炎是育龄妇女最常见的阴道炎类型之一，因为阴道中的乳酸杆菌被高浓度厌氧菌(如普雷沃菌、动弯杆菌)、加德纳菌、流感嗜血杆菌、球菌和支原体等病原菌所代替。细菌性阴道炎主要通过性传播途径感染，但性传播途径不是细菌性阴道炎的唯一感染方式，因为健康女性阴道内也可检出上述病原菌。细菌性阴道炎的其他危险因素包括阴道内窥镜和过早怀孕等。阴道炎的症状缺乏特异性，因此在缺乏实验室确诊依据时，依据患者主诉和其他检查难以确诊。多数阴道炎患者即使反复感染，依然无法确认发病原因，且阴道炎患者多为混合感染，因此阴道炎的确诊十分困难。
细菌性阴道炎是育龄妇女最常见的阴道炎类型之一，因为阴道中的乳酸杆菌被高浓度厌氧菌(如普雷沃菌、动弯杆菌)、加德纳菌、流感嗜血杆菌、球菌和支原体等病原菌所代替。细菌性阴道炎主要通过性传播途径感染，但性传播途径不是细菌性阴道炎的唯一感染方式，因为健康女性阴道内也可检出上述病原菌。
细菌性阴道炎(BV)是一种由阴道加德纳菌和一些厌氧菌的混合感染，导致阴道内微生态平衡失调，引起的阴道分泌物增多，白带有鱼腥臭味及外阴瘙痒灼热的综合征。
念珠菌性阴道炎(monilialvaginitis)又称外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)、霉菌性阴道炎，是由假丝酵母菌(俗称“霉菌”)引起的常见外阴阴道炎症，主要症状为外阴瘙痒、灼热痛、阴道分泌物增多、呈豆腐渣状或凝乳样。如果没有及时进行正规、彻底的治疗，患者容易反复发作，严重影响日常生活和身心健康。
滴虫性阴道炎(TV)是由毛滴虫引起，寄生人体的毛滴虫有阴道毛滴虫、人毛滴虫和口腔毛滴虫，分别寄生于泌尿生殖系统、肠道和口腔，与皮肤病有关的是阴道毛滴虫，引起滴虫性阴道炎，是一种主要通过性交传播的寄生虫疾病，具有传染性。滴虫性阴道炎表现为外阴瘙痒、分泌物增多，其特点是泡沫样的黄色白带，诊断需要进行专门的检测，和其他阴道炎进行鉴别。
传统的阴道炎诊断方法主要依赖于患者主诉、阴道检查以及实验室检查。目前临床主要检测方法有传统湿片法、革兰氏染色、酶化学法、培养法以及PCR法。
(1)传统湿片法：生理盐水稀释后涂片观察，湿片法方便经济，可在几分钟内完成，但是线索细胞的观察需要经验，背景复杂，易漏检，整体阳性检出率低且没办法检查失活的滴虫。
(2)革兰氏染色：细胞和微生物可以上色，染色后形态较湿片清晰，但滴虫会破碎，且背景也相对复杂，容易漏检或误检。
(3)酶化学方法：可搭配全自动化设备，自动化程度高，但酶的干扰因素多，无国际权威报道支持，临床符合率低，假阳性假阴性概率高，另外操作复杂，需要45分钟，37℃温育，冷链运输。
(4)培养法：指对临床标本进行培养，目的在于分离致病菌，以明确是否存在该致病菌感染，特别是在直接镜检为阴性时，可从疑似患者身上采集标本，进一步进行致病菌培养。一般培养超过2至4周以上依然没有致病菌生长，才可报告阴性。
(5)PCR法：具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等优点，但操作要求高，步骤复杂，需要专门的PCR实验室以及专业检验医师，检测成本也高。
阴道炎的治疗关键在于准确的确定阴道炎的病原体，而镜检是阴道炎诊断的金标准，但湿片或者普通染色检测局限性相对较多，针对以上技术不足，现有采用荧光标记方法，然而普遍荧光染色液存在染色效果不佳，染色后荧光效果淬灭快，染色液长期存放不稳定，使得染色后荧光强度较低等问题。
发明内容
本发明是为了克服上述局限，提供一种操作简便，染色效果好，检出率高且体系稳定易于保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液。A液中的荧光素可以高亲和力地与真菌细胞壁上的β-多糖，如几丁质与纤维素等结合，从而标记样品中存在的念珠菌或可能存在的其他真菌类别微生物；B液荧光素能标记其他有形成分白细胞、上皮细胞、线索细胞、细菌、滴虫标记荧光，从而使得其形态更加清晰，便于鉴别。
本发明的另一个目的是提供一种操作简便，染色效果好，检出率高且体系稳定易于保存的制备方法。
一种稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，所述阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液由以下试剂：特征在于，所述阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液由如下组分按照重量百分比组成：A液为荧光素、渗透剂、背景染料、防干扰荧光助剂、稳定剂、促溶剂、去离子水；B液为荧光素，荧光助剂，PBS缓冲溶液。
进一步地，所述阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液由如下组分按照重量百分比组成：A液为荧光素0.1～2％、渗透剂1～15％、背景染料0.01～1％、防干扰荧光助剂0.1～5％、稳定剂10～30％、促溶剂5～25％、去离子水22～83.79％；B液为荧光素0.001～1％，荧光助剂0.1～3％，PBS缓冲溶液96～99.899％。
优选地，所述A液荧光素为荧光增白剂-28；
更优选地，所述A液荧光素的重量份数为0.5～1份。
优选地，所述A液渗透剂为二甲基亚砜、二甲基乙酰胺、N-N-二甲基甲酰胺的一种或几种；
更优选地，所述A液渗透剂的重量份数为5～15份。
优选地，所述A液防干扰荧光助剂为2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸钾与肌醇六磷酸钾的一种或几种；
更优选地，所述A液防干扰荧光助剂的重量份数为0.5～3份。
优选地，所述A液促溶剂为氢氧化钾、氢氧化钠中的一种或几种；
更优选地，所述A液促溶剂的重量份数为10～20份。
优选地，所述A液稳定剂为丙三醇、丙二醇、山梨醇中的一种或几种；
更优选地，所述A液稳定剂的重量份数为15～25份。
优选地，所述A液背景染料为伊文思蓝，台盼蓝、滂胺天蓝、溴酚蓝、百里酚蓝，溴甲酚蓝的一种或几种；
更优选地，所述A液背景染料的重量份数为0.05～1份。
优选地，所述B液荧光素为3，6-(二甲胺基)吖啶盐酸盐；
更优选地，所述B液荧光素的重量份数为0.001-0.5份。
优选地，所述B液荧光助剂为烷基酚聚氧乙烯醚、烷基苯磺酸盐、烷基磺酸酯盐、烷基磺酸盐、烷基硫酸盐、含氟脂肪酸盐、聚硅氧烷、脂肪醇硫酸盐、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸酯、α-烯基磺酸盐、脂肪醇聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基醇酰胺、烷基磺酸基乙酰胺、烷基琥珀酸酯磺酸盐、醇胺烷基苯磺酸盐、环烷酸盐、烷基酚磺酸酯、聚氧乙烯单月桂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、聚山梨醇酯60，司盘80的一种或者几种；
更优选地，所述B液荧光助剂的重量份数为0.1-2.5份。
优选地，所述B液PBS缓冲溶液pH值为6.0-8.0，重量份数为96～99.899份。
本发明还提供了一种稳定易于保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液的制备方法，具体包括如下步骤：
A液：
(1)按照重量百分比取荧光素0.5～1份、渗透剂5～15份、背景染料0.05～1份、防干扰荧光助剂0.5～3份、稳定剂15～25份、促溶剂10～20份、去离子水35～68.95份；
(2)将促溶剂溶于去离子水中形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)将荧光素溶于去离子水中形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，待用；
(5)将渗透剂、防干扰荧光助剂以及稳定剂混合，待用；
(6)将(5)所述混合液滴加入(4)所述水溶液，边加入边搅拌，混合后加入背景染料继续搅拌溶解完毕后，自然冷却后过滤即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液A液。
B液：
(1)按照重量百分比取B液为荧光素0.001～0.5份，荧光助剂0.1～2.5份，PBS缓冲溶液96～99.899份；
(2)将荧光助剂溶于PBS缓冲溶液形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)将荧光素溶于PBS缓冲溶液形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，自然冷却后过滤即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液B液。
优选地，所述过滤采用的方法为正压过滤法或负压过滤法中的一种，采用的是0.1～2.0微米孔径的纤维素膜过滤。
本发明优势是：
提供一种操作简便，染色效果好，检出率高且体系稳定易于保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液。该染色液A液添加了防干扰荧光助剂2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸钾以及肌醇六磷酸钾，因为荧光素在重金属离子的影响下，会出现被氧化或导致荧光淬灭的后果，而该助剂主要作用是螯合试剂中存在或者可能存在的金属离子，提高荧光染料与真菌细胞壁的结合率，另在紫外激发下，荧光强度增强，使得真菌菌丝与孢子等繁殖体发出明亮的蓝白荧光；B液添加荧光助剂可防止染液长时间存放出现沉淀，避免荧光变弱甚至染液失效的情况。在荧光显微镜观察下，组织细胞以及病原菌等有形成分轮廓清晰可见，同时染色液组分体系的稳定性提高，染液荧光淬灭风险降低；且此染色液两步染色，数秒上色，样本无需预处理，可直接染色，操作简单，节约检测时间，同时提高微生物感染临床检验的准确性，探索更精准且更快速诊断及鉴别微生物的新技术。
附图说明
图1为实施例1中制备的染色液A液的荧光染色图；
图2为实施例1中制备的染色液B液的荧光染色图；
图3为实施例2中制备的染色液A液的荧光染色图；
图4为实施例2中制备的染色液B液的荧光染色图；
图5为实施例3中对实施例1制备的染色液A液在80℃避光测试结果图；
图6为实施例3中对实施例1制备的染色液B液在80℃避光测试结果图；
图7为实施例3中对实施例2制备的染色液A液在80℃避光测试结果图；
图8为实施例3中对实施例2制备的染色液B液在80℃避光测试结果图；
图9为实施例3中对实施例1制备的染色液A液进行室温存放6个月后的测试结果图；
图10为实施例3中对实施例1制备的染色液B液进行室温存放6个月后的测试结果图；
图11为实施例3中对实施例2制备的染色液A液进行室温存放6个月后的测试结果图；
图12为实施例3中对实施例2制备的染色液B液进行室温存放6个月后的测试结果图；
图13为常规湿片的测试效果图。
具体实施方式
以下通过实施例说明本发明的具体步骤，但不受实施例限制。
在本发明中所使用的术语，除非另有说明，一般具有本领域普通技术人员通常理解的含义。
下面结合具体实施例并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
在以下实施例中，未详细描述的各种过程和方法是本领域中公知的常规方法。
实施例1
试剂1配置
A液：
(1)A液按照以下配方重量百分比混合而成：荧光增白剂-28 0.5份、二甲基亚砜15份、伊文思蓝0.05份、丙三醇20份、氢氧化钾10份、去离子水54.45份；
(2)称取相应重量的氢氧化钾溶于去离子水中形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)称取相应重量的荧光增白剂-28溶于去离子水中形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，待用；
(5)称取相应重量的二甲基亚砜、丙三醇混合，待用；
(6)将(5)所述混合液滴加入(4)所述水溶液，边加入边搅拌，混合后加入伊文思蓝继续搅拌溶解完毕后，自然冷却后过滤，即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液A液。
B液：
(1)按照重量百分比取B液为荧光素0.05份，PBS缓冲溶液99.95份；
(2)将荧光素溶于PBS缓冲溶液中形成水溶液，待用；
(3)将上述(2)所述水溶液，自然冷却后过滤即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液B液。
对念珠菌、乳酸、滴虫、上皮组织混合样本分别用A液、B液进行检测，其检测效果见说明书附图1与附图2。从附图1上可以见菌丝和孢子，但是菌丝与孢子结构不清晰，荧光强度较弱；从附图2上可见上皮细胞、细菌、滴虫。但荧光效果弱，背景度对比不够。
实施例2
试剂2配置
A液：
(1)A液按照以下配方重量百分比混合而成：荧光增白剂-28 0.5份、二甲基亚砜15份、伊文思蓝0.05份、2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸钾5份、丙三醇20份、氢氧化钾10份、去离子水49.45份；
(2)称取相应重量的氢氧化钾溶于去离子水中形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)称取相应重量的荧光增白剂-28溶于去离子水中形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，待用；
(5)称取相应重量的二甲基亚砜、2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸钾以及丙三醇混合，待用；
(6)将(5)所述混合液滴加入(4)所述水溶液，边加入边搅拌，混合后加入伊文思蓝继续搅拌溶解完毕后，自然冷却后过滤，即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液A液。
B液：
(1)按照重量百分比取B液为荧光素0.05份，荧光助剂2份，PBS缓冲溶液97.95份；
(2)将荧光助剂溶于PBS缓冲溶液中形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)将荧光素溶于PBS缓冲溶液中形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，自然冷却后过滤即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液B液。
对念珠菌、乳酸、滴虫、上皮组织混合样本分别用A液、B液进行检测，其检测效果见说明书附图3与附图4。从附图3上可以见菌丝，菌丝清晰，荧光强度强；从附图4上可见上皮细胞、细菌、滴虫，荧光效果好，背景度对比明显且荧光效果持久不淬灭。
实施例3溶液稳定性试验
将试剂1、2分别进行高温实验以及常温实验。
(1)高温实验
将染色液测试样品放置于80℃条件下，避光，一周后取出；然后对念珠菌、乳酸、滴虫、上皮组织混合样本进行染色处理。从染色效果判断试剂的稳定性，结果如表1所示。
(2)常温实验
将染色液测试样品置于不透明塑料瓶中，室温放置6个月后取出；然后对念珠菌、乳酸、滴虫、上皮组织混合样本进行染色处理。从染色效果判断试剂的稳定性，结果如表1所示。
表1
结果表明，高温实验后，试剂1A液的外观颜色略微变红，染色效果很差，具体表现为视野暗淡，念珠菌荧光强度下降，结构不清晰，与背景颜色对比弱；B液荧光的染液外观不变，染色后样本荧光不强，视野效果较差。试剂2A液与B液外观与染色效果均没有发生改变，没有沉淀产生，荧光效果好，菌体结构清晰；常温实验中，A液、B液实验染色效果都较好，真菌荧光较强，菌丝及孢子结构清晰可见。
本发明可用于其他不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概括。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施案例都只可能以为是对本发明的说明而不能限制本发明，权利要求书指出了本发明的范围，因此，在于本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应认为是包括在权利要求书的范围。
Claims (13)
1.一种稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，所述荧光染色液A液由以下试剂：荧光素、渗透剂、防干扰荧光助剂、稳定剂、促溶剂、背景染料以及去离子水配置而成；B液由PBS缓冲溶液、荧光素以及荧光助剂组成。
2.根据权利要求1所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，所述阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液由如下组分按照重量百分比组成：A液为荧光素0.1～2％、渗透剂1～15％、背景染料0.01～1％、防干扰荧光助剂0.1～5％、稳定剂10～30％、促溶剂5～25％、去离子水22～83.79％；B液为荧光素0.001～1％，荧光助剂0.1～3％，PBS缓冲溶液96～99.899％。
3.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，A液所述荧光素为荧光增白剂-28。
4.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，A液所述渗透剂为二甲基亚砜、二甲基乙酰胺、N-N-二甲基甲酰胺的一种或几种。
5.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，A液所述防干扰荧光助剂为2-羟基丙烷-1，2，3-三羧酸钾与肌醇六磷酸钾的一种或者几种。
6.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，A液所述促溶剂为氢氧化钾、氢氧化钠中的一种或几种。
7.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，A液所述稳定剂为丙三醇、丙二醇、山梨醇中的一种或几种。
8.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，A液所述背景染料为伊文思蓝、台盼蓝、滂胺天蓝、溴酚蓝、百里酚蓝、溴甲酚蓝的一种或几种。
9.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，B液所述荧光素为3，6-(二甲胺基)吖啶盐酸盐。
10.根据权利要求2所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，其特征在于，B液所述荧光助剂为烷基酚聚氧乙烯醚、烷基苯磺酸盐、烷基磺酸酯盐、烷基磺酸盐、烷基硫酸盐、含氟脂肪酸盐、聚硅氧烷、脂肪醇硫酸盐、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸酯、α-烯基磺酸盐、脂肪醇聚氧乙烯醚磷酸酯、烷基醇酰胺、烷基磺酸基乙酰胺、烷基琥珀酸酯磺酸盐、醇胺烷基苯磺酸盐、环烷酸盐、烷基酚磺酸酯、聚氧乙烯单月桂酸酯、聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯、聚山梨醇酯60，司盘80的一种或者几种。
11.根据权利要求1所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液A液制备步骤如下：
(1)按照重量百分比取荧光素0.1～2％、渗透剂1～15％、背景染料0.01～1％、防干扰荧光助剂0.1～5％、稳定剂10～30％、促溶剂5～25％、去离子水22～83.79％；
(2)将促溶剂溶于去离子水中形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)将荧光素溶于去离子水中形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，待用；
(5)将渗透剂、防干扰荧光助剂以及稳定剂混合，待用；
(6)将(5)所述混合液滴加入(4)所述水溶液，边加入边搅拌，混合后加入背景染料继续搅拌溶解完毕后，自然冷却后过滤即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液A液。
12.根据权利要求1所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液B液制备步骤如下：
(1)按照重量百分比取B液为荧光素0.001～1％，荧光助剂0.1～3％，PBS缓冲溶液96～99.899％；
(2)将荧光助剂溶于PBS缓冲溶液中形成水溶液，自然冷却至室温，待用；
(3)将荧光素溶于PBS缓冲溶液中形成水溶液，待用；
(4)将上述(2)(3)所述水溶液混合，自然冷却后过滤即成权利要求1中所述稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液B液。
13.根据权利要求11所述的稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液的制备方法，其特征在于，所述过滤采用的方法为正压过滤法或负压过滤法中的一种，采用的是0.1～2.0微米孔径的纤维素膜过滤。
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113567217A (zh) * | 2021-07-27 | 2021-10-29 | 肖波 | 一种妇科荧光染色液 |
| CN114199653A (zh) * | 2021-10-28 | 2022-03-18 | 济南德亨医学科技有限公司 | 一种阴道微生物免疫荧光染色液 |
| CN116256212A (zh) * | 2023-05-15 | 2023-06-13 | 广州盛安医学检验有限公司 | 一种妇科荧光染色液及其制备方法和应用 |
| CN116296703A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-06-23 | 广州盛安医学检验有限公司 | 一种用于检测的荧光染色液 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05130890A (ja) * | 1991-11-08 | 1993-05-28 | Bio Meito:Kk | 真菌の染色方法及びその試薬 |
| CN105067412A (zh) * | 2015-08-10 | 2015-11-18 | 长春瑞克医疗科技有限公司 | 一种阴道分泌物染色液及其制备方法与染色方法 |
| CN105950700A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-09-21 | 南京汉瑞生物科技有限公司 | 一种真菌荧光染色剂 |
| CN106244664A (zh) * | 2016-08-12 | 2016-12-21 | 石家庄博洋生物科技有限公司 | 真菌荧光染色液及其染色方法 |
| CN107656044A (zh) * | 2017-09-25 | 2018-02-02 | 亚能生物技术（深圳）有限公司 | 一种循环肿瘤细胞的检测试剂盒及检测方法 |
| CN108344613A (zh) * | 2018-02-05 | 2018-07-31 | 江苏诺鬲生物科技有限公司 | 一种标记白带及宫颈脱落细胞病原菌的荧光染色试剂 |
| CN110308031A (zh) * | 2019-07-24 | 2019-10-08 | 广州翰德泽信医药科技有限公司 | 一种稳定的真菌荧光染色液 |
| CN110596383A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-12-20 | 珠海市德灏生物科技有限公司 | 基于荧光染色的通用型病原微生物快速磁分离鉴别方法及试剂盒 |
| CN110940646A (zh) * | 2019-11-01 | 2020-03-31 | 江苏美克医学技术有限公司 | 一种阴道微生物检测双重荧光染色液及其应用 |
| CN111019999A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-04-17 | 江苏美克医学技术有限公司 | 一种微生物荧光染色液及其应用 |
-
2020
- 2020-11-13 CN CN202011281788.XA patent/CN112525652A/zh active Pending
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH05130890A (ja) * | 1991-11-08 | 1993-05-28 | Bio Meito:Kk | 真菌の染色方法及びその試薬 |
| CN105067412A (zh) * | 2015-08-10 | 2015-11-18 | 长春瑞克医疗科技有限公司 | 一种阴道分泌物染色液及其制备方法与染色方法 |
| CN105950700A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-09-21 | 南京汉瑞生物科技有限公司 | 一种真菌荧光染色剂 |
| CN106244664A (zh) * | 2016-08-12 | 2016-12-21 | 石家庄博洋生物科技有限公司 | 真菌荧光染色液及其染色方法 |
| CN107656044A (zh) * | 2017-09-25 | 2018-02-02 | 亚能生物技术（深圳）有限公司 | 一种循环肿瘤细胞的检测试剂盒及检测方法 |
| CN108344613A (zh) * | 2018-02-05 | 2018-07-31 | 江苏诺鬲生物科技有限公司 | 一种标记白带及宫颈脱落细胞病原菌的荧光染色试剂 |
| CN110308031A (zh) * | 2019-07-24 | 2019-10-08 | 广州翰德泽信医药科技有限公司 | 一种稳定的真菌荧光染色液 |
| CN110596383A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-12-20 | 珠海市德灏生物科技有限公司 | 基于荧光染色的通用型病原微生物快速磁分离鉴别方法及试剂盒 |
| CN110940646A (zh) * | 2019-11-01 | 2020-03-31 | 江苏美克医学技术有限公司 | 一种阴道微生物检测双重荧光染色液及其应用 |
| CN111019999A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-04-17 | 江苏美克医学技术有限公司 | 一种微生物荧光染色液及其应用 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113567217A (zh) * | 2021-07-27 | 2021-10-29 | 肖波 | 一种妇科荧光染色液 |
| CN114199653A (zh) * | 2021-10-28 | 2022-03-18 | 济南德亨医学科技有限公司 | 一种阴道微生物免疫荧光染色液 |
| CN116256212A (zh) * | 2023-05-15 | 2023-06-13 | 广州盛安医学检验有限公司 | 一种妇科荧光染色液及其制备方法和应用 |
| CN116296703A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-06-23 | 广州盛安医学检验有限公司 | 一种用于检测的荧光染色液 |
| CN116296703B (zh) * | 2023-05-17 | 2023-07-28 | 广州盛安医学检验有限公司 | 一种荧光染色液在制备阴道炎检测试剂中的应用 |
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