CN112512517A - 作为免疫增强剂的尿石素a - Google Patents

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Abstract

本发明涉及用于提高对抗原的免疫反应和/或增强、调节或增大对抗原的免疫反应的化合物。特别是使用尿石素。本发明还涉及包含尿石素的免疫增强剂、使用这种免疫增强剂的方法和制备这种免疫增强剂的方法。本发明还涉及尿石素在调节干细胞功能例如增强干细胞数量、促进干细胞再生和促进干细胞分化的方法中的用途。

Description

作为免疫增强剂的尿石素A
技术领域
本发明涉及用于提高对抗原的免疫反应和/或增强、调节或增大对抗原的免疫反应的化合物。特别是使用尿石素(urolithin)。本发明还涉及包含尿石素的免疫增强剂、使用这种免疫增强剂的方法和制备这种免疫增强剂的方法。本发明还涉及尿石素在调节干细胞功能例如增强干细胞数量、促进干细胞再生和促进干细胞分化的方法中的用途。
背景技术
病毒引起多种人类疾病，从急性自我解决状况到急性致命疾病，例如狂犬病、麻疹、腹泻病、肝炎、小儿麻痹症、唇疱疹、HIV、埃博拉病毒、寨卡病毒和流感。这些微观颗粒通常通过人与人之间的接触或接触受污染的表面而易于传播。一旦进入体内，病毒就进入细胞并迅速繁殖。有效的抗病毒药物仅适用于许多人类病毒性疾病中的少数几种。在许多情况下，对病毒性疾病的治疗涉及缓解症状，直到身体的免疫系统清除感染为止。
流感给健康服务造成沉重负担，导致老年人、非常年幼的儿童和患有慢性疾病的人的发病率和死亡率显著上升。世界卫生组织估计，季节性流感每年在全世界造成250,000至500,000人死亡。非流感相关的病毒性呼吸道感染也是人类的常见疾病，并且也代表了健康服务的重大健康负担[Fendrick et al(2003)Arch.Intern.Med.163(4),487-94]。
细菌性疾病也代表了巨大的健康负担。结核病是造成疾病负担最重的细菌性疾病之一，它是由结核分枝杆菌引起的，每年致死约200万人，大部分在撒哈拉以南非洲。致病细菌导致其他全球性重要疾病，例如可能由例如链球菌和假单胞菌的细菌引起的肺炎，以及由例如志贺氏菌、弯曲杆菌和沙门氏菌的细菌引起的食源性疾病。致病细菌还引起感染，如破伤风、伤寒、白喉、梅毒和麻风病。致病细菌也是发展中国家婴儿死亡率高的原因。
用灭活或减毒形式的致病性病原体进行疫苗接种是在宿主体内建立细胞(T细胞-细胞因子和记忆细胞)和体液(B细胞-抗体)免疫反应的方式，以抵消暴露于病原体的有害负担。全球疫苗接种策略的主要实例涉及使用流感疫苗的免疫。每年都有可能每年暴露于不同株的流感病毒，导致上呼吸道感染(流感)，并且在晚期病例中甚至是威胁生命的肺炎，而且每年都有机会用针对今年最流行菌株的流感疫苗免疫。研究表明，>65岁以上且因衰老而导致免疫功能和健康状况下降的老年人最容易感染流感病毒株，仅在美国老年人群中发病率>30％，与之相比在免疫系统健全的健康成年人群(18-49岁)中<10％(CDC,2011-2012https://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm6122a4.htm)。
流感疫苗接种起作用，但远没有达到有效，季节性有效率取决于所用疫苗和佐剂的类型、接种人员的年龄以及该季节主要菌株的毒力。在美国一般人群中平均有效率在10％至60％之间变化，老年人接种疫苗的获益更高，但由于较低的免疫功能状态，其有效率甚至低于平均水平(N Engl J Med.2007 Oct 4；357(14):1373-81和Interim Estimatesof 2017-18 Seasonal Influenza Vaccine Effectiveness-United States,2018年2月.MMWR Morb Mortal Wkly Rep.2018 Feb 16；67(6):180-185)
衰老与免疫衰老和发炎相关(Aging Clin Exp Res.2009 Jun；21(3):201-9；.Front Immunol.2018 Jan 10；8:1960.doi:10.3389/fimmu.2017.01960)。随着年龄的增长，免疫功能和健康的下降会带来更大的与传染源和疾病的影响相关的风险，导致老年人的死亡率和发病率更高。到2030年，人口老龄化预计将占世界人口的>25％(联合国经济和社会事务部人口司(2015).《2015年世界人口老龄化》(ST/ESA/SER.A/390))以及维持或防止免疫功能下降是维持该人群良好生活质量的关键。此外，免疫功能下降导致最易患流感等疾病的人群对疫苗接种的反应效率降低。
认为衰老的部分原因是生物体自我更新的干细胞老化和干细胞数量减少。干细胞的这种老化被认为是由于内在事件(例如DNA损伤)以及外在事件(例如支持干细胞的干细胞生态位或受保护环境的变化)引起的。已经显示出各种生态位随着年龄的增长而下降，因此即使老化没有对静态干细胞种群产生显著影响，干细胞的功能也可能由于来自局部生态位的信号下降而受到损害，这调节了干细胞及其后代的功能。
干细胞功能的下降是指自我更新的核心干细胞特性所依据的常见分子过程和分化后代的生成的下降(D.Melton,in Essentials of Stem Cell Biology(第三版).(Academic Press,Boston,2014),pp.7-17)。这种干细胞功能、自我更新和干细胞数量的下降被认为在与年龄相关的病况(如体弱、动脉粥样硬化和2型糖尿病)中起作用(Sharpless,2007 Nat Rev Mol Cell Biol 2007 Sep；8(9):703-13)。最好在造血系统中研究干细胞中老化的作用，在该系统中，干细胞可以被分离到接近同质的状态，并且可以使用经过验证的分析方法来研究其功能。
造血系统由血液中所有的细胞成分组成(图1A)。造血系统的细胞需要不断更新，每天需要大约产生1011-1012个新的血细胞，以维持普通人的稳态细胞水平。这些细胞的产生发生在造血系统、脾脏和骨髓的器官中，所有不同谱系均来自多能祖细胞(MPP)。维持血细胞系统的多能祖细胞(MPP)群体本身由造血干细胞(HSC)维持(图1B)。这些细胞可以通过在其细胞表面表达不同的蛋白质来鉴定。如图1B所示，HSC和各种MPP祖细胞类型具有不同的细胞表面蛋白组合，并且通过使用针对这些细胞表面蛋白的不同抗体，可以识别和分离这些不同的细胞。HSC是不频繁循环的干细胞，并且能够维持更规则循环的MPP群体。HSC群体的不频繁循环可保护这些细胞免受DNA损伤，并在生物体的生命中维持它们。他们的耗竭和支持性HSC生态位的恶化被认为对老龄化是重要的。
在骨髓移植中，用于重构宿主血细胞系统的供体HSC的年龄在移植成功中起着重要作用。老年HSC已显示出其植入和重构骨髓的能力受到损害(Stem Cells TranslMed.2015 Feb；4(2):186-94)。
衰老期间免疫反应的不足表明，总体上，特别是对于免疫系统不足的人群例如老年人和免疫系统仍在发展的儿童，迫切需要新的免疫增强剂。本专利的主题式(I)的化合物可以用作这种免疫增强剂。
尿石素是天然的肠道代谢产物，是宿主肠道菌群暴露于饮食前体(例如鞣花单宁)而产生的，这些前体在某些水果和坚果(例如石榴、浆果和核桃)中含量很高。肠道中尿石素的产生显示出人与人之间的较大差异，这与结肠微生物群的差异有关[García-Villalbaet al(2013)J.Agric.Food Chem.,2013,61,8797–8806]。一些研究表明，食用这些富含多酚的水果对健康有好处，这些研究的结果不一致，可能是由于个体之间肠道菌群的巨大差异，这将导致不同的代谢物谱极大地影响其生物效力。这在设计最佳饮食干预方面提出了另一个主要挑战，并限制了研究富含多酚的水果的食用的健康方面的研究的解释。[例如参见Tomás-Barberán FA et al(2014)J Agric Food Chem.62(28):6535-8 and González-Sarrías et al(2017)Mol Nutr Food Res.61(5).doi:10.1002/mnfr.201600830]。
发明内容
根据本发明的第一方面，提供了式(I)的化合物
Figure BDA0002871967200000051
其中：
A、B、C、D、W、X、Y和Z各自独立地选自H和OH；
或其盐；
其用于在人或动物受试者中(i)提高对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大对抗原的免疫反应。
现在令人惊奇地认为，尿石素，例如尿石素A，通过改善免疫细胞和抗体(体液)反应增强了免疫功能和健康。在接种疫苗之前，尿石素(例如尿石素A)可用于保持免疫系统的最佳功能，并作为附加的干预措施，以大幅提高当前疫苗的有效性，尤其是在例如老年人或儿童的易感人群中。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物在人或动物受试者中(i)提高对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大对抗原的免疫反应。
根据本发明的另一方面，提供了在人或动物受试者中(i)提高对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大对抗原的免疫反应的方法，包括施用有效量的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了在人或动物受试者中(i)提高对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大对抗原的免疫反应的方法，包括施用有效量的式(I)化合物作为免疫增强剂。
根据本发明的另一方面，提供了用于改善人或动物受试者的免疫功能和/或免疫健康的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了当作为免疫增强剂施用时用于改善人或动物受试者的免疫功能和/或免疫健康的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于改善人或动物受试者的免疫功能和/或免疫健康的方法中。
根据本发明的另一方面，提供了改善免疫功能和/或免疫健康的方法，包括施用有效量的式(I)的化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增强免疫系统的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在制备用于增强免疫系统的药物中的用途。
根据本发明的另一方面，提供了增强免疫系统的方法，包括施用有效量的式(I)的化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于调节免疫系统的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)化合物在制备用于调节免疫系统的药物中的用途。
根据本发明的另一方面，提供了调节免疫系统的方法，包括施用有效量的式(I)化合物。
在一个实施方案中，调节免疫系统包括增强免疫反应。在另一个实施方案中，调节免疫系统包括调节炎性反应。在另一个实施方案中，调节免疫反应包括增强免疫反应和调节炎性应答。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人或动物受试者的免疫缺陷的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在制备用于治疗人或动物受试者的免疫缺陷的方法的药物中的用途。
根据本发明的另一方面，提供了改善免疫功能和/或免疫健康的方法，包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)的化合物。
炎性衰老(Inflamm-ageing)在衰老和与年龄有关的疾病的发病率中起作用，并且是促炎状态的慢性进行性增加。炎症是由面对病原体感染或各种类型的组织损伤的宿主系统引起的一系列复杂的反应事件。在通常情况下，当消除感染和组织损伤中的促炎因子时，炎性反应消失，然后转变为高度活跃且调节良好的平衡状态，这称为解决炎症。但是，在某些情况下，例如在衰老过程中，炎症无法进入稳定的抗感染和组织损伤修复的状态；而是，炎症继续，并转变为无法解决的炎症状态。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人或动物受试者的炎症衰老的方法中的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于预防、减少或减慢人类或动物受试者的炎性衰老的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在治疗炎性衰老的方法中的用途。根据本发明的另一方面，在预防、减少或减缓炎性衰老的方法中提供式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了治疗炎性衰老的方法，包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)的化合物。根据本发明的另一方面，提供了预防、减少或减缓炎性衰老的方法，包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)的化合物。
测量白细胞介素10(IL10)与白细胞介素12(IL12)的比率是细胞炎症表型的有用测量，IL10/IL12比率越高表明抗炎表型越多。因此，根据本发明的另一方面，提供了一种使用式(I)的化合物提高IL10/IL12比率的方法。
还认为本发明的化合物可用于治疗炎性疾病，例如
Figure BDA0002871967200000081
病。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于治疗
Figure BDA0002871967200000082
病的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人或动物受试者的免疫衰老的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在治疗免疫衰老的方法中的用途。
根据本发明的另一方面，提供了治疗免疫衰老的方法，包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)的化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于在人或动物对象中预防、减少或减慢干细胞衰老的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在预防、减少或减慢干细胞衰老的方法中的用途。
根据本发明的另一方面，提供了预防、减少或减慢干细胞衰老的方法，包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)的化合物。
免疫衰老可能是由于造血干细胞的老化所致，该造血干细胞分化为免疫系统的细胞，因此，根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人类或动物受试者中干细胞老化的方法中的式(I)化合物，尤其是造血干细胞的老化。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗人或动物受试者的干细胞老化，特别是造血干细胞的老化。
根据本发明的另一方面，提供了治疗干细胞老化，特别是造血干细胞老化的方法，包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD34阴性造血干细胞数目的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD34阴性造血干细胞和CD34阳性、CD 48阴性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD34阳性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD34阳性、CD48阴性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD48阳性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD48阳性、CD150阳性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD150阴性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD150阴性、CD135阴性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD135阳性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD34阳性、CD48阳性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD48阳性、CD150阴性造血祖细胞数量的方法中的式(I)化合物。
认为，除造血干细胞外，式(I)化合物还对干细胞本身有作用。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于调节干细胞功能的方法中的式(I)化合物。干细胞功能的调节包括：
(i)促进干细胞再生；
(ii)促进干细胞数量的增长；
(iii)预防、逆转或减缓干细胞老化；
(iv)预防、逆转或减慢干细胞衰老；和/或
(v)促进干细胞分化。
根据本发明的另一方面，提供了用于扩大体内、体外或离体干细胞数量的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一个方面，提供了在返回患者用于随后的再生治疗之前体外扩增干细胞中使用的式(I)的化合物。
根据本发明的另一方面，提供了一种干细胞离体扩增后产生的细胞。
干细胞的例子包括多能干细胞、诱导多能干细胞(iPS)、胚胎干细胞和成年干细胞。干细胞的其他例子包括：造血干细胞、肌肉干细胞、皮肤干细胞、肝干细胞、神经元干细胞、黑素细胞干细胞、毛囊干细胞、间充质干细胞、脂肪源干细胞、角膜缘干细胞(角膜干细胞)、心脏干细胞、肠干细胞、上皮干细胞、自体干细胞和同种异体干细胞。
根据本发明的另一方面，提供了用于以下方法中的式(I)化合物：
-支持干细胞再生；
-帮助优化干细胞再生；
-促进干细胞再生；
-刺激干细胞再生；
-支持干细胞功能；
-帮助优化干细胞功能；和/或
-促进干细胞功能。
根据本发明的另一方面，提供了用于以下方法中的式(I)化合物：
-支持干细胞再生；
-帮助优化干细胞再生；
-促进干细胞再生；
-增强干细胞；和/或
-增加干细胞数目。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加干细胞数目的方法的式(I)化合物。在一实施方案中，干细胞数目增加至少约5％，例如至少约10％、至少约15％、至少约20％或至少约25％。
干细胞通常处于静止状态，以使其可以重新进入增殖的方式停滞在细胞周期中，以根据需要产生新的干细胞，然后重新进入静止状态，直到再次增殖所需为止。在老化过程中，干细胞进入衰老状态，此时它们不再能够重新进入细胞周期。可能需要支持以防止干细胞进入衰老状态，从而维持活跃、健康的干细胞种群。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于支持干细胞的方法的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于预防和/或抑制干细胞衰老的方法的式(I)化合物。
老化的造血干细胞已报道的变化包括分化为淋巴细胞的能力降低、分化为髓系的能力增加、细胞周期抑制剂p16INKa的表达增加以及造血干细胞祖细胞种群恢复的能力降低。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人或动物受试者的干细胞老化的方法的式(I)化合物，其包括实现以下一项或多项：提高分化为淋巴细胞的能力、降低分化为髓系的能力、降低细胞周期抑制剂p16INKa的表达、以及提高造血干细胞祖细胞种群恢复的能力。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)化合物在用于制备用于治疗人或动物受试者的干细胞老化的方法中的药物的用途，所述方法包括以下一项或多项：提高分化为淋巴细胞的能力、降低分化为髓系的能力、降低细胞周期抑制剂p16INKa的表达、以及提高造血干细胞祖细胞种群恢复的能力。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人或动物受试者的干细胞老化的方法的式(I)化合物，其包括以下一项或多项：提高分化为淋巴细胞的能力、降低分化为髓系的能力、降低细胞周期抑制剂p16INKa的表达、以及提高造血干细胞祖细胞种群恢复的能力，其包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)化合物。
免疫衰老期间观察到的变化还包括先天免疫系统功能障碍、B细胞发育受损、胸腺退化、T细胞产量减少和T细胞多样性减少。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于治疗人或动物受试者的免疫衰老的方法中的式(I)化合物，其中所述治疗包括逆转、减少或中止先天免疫系统的变化，逆转、减少或中止B细胞发育中的损伤，逆转、减少或中止胸腺退化，逆转、减少或中止T细胞产量降低以及逆转、减少或中止T细胞多样性降低。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在制备用于治疗人或动物受试者的免疫衰老的方法中的药物的用途，其中所述治疗包括逆转、减少或中止先天免疫系统的变化，逆转、减少或中止B细胞发育中的损伤，逆转、减少或中止胸腺退化，逆转、减少或中止T细胞产量降低以及逆转、减少或中止T细胞多样性降低。
根据本发明的另一方面，提供了一种在人或动物受试者中治疗免疫衰老的方法，其中所述治疗包括逆转、减少或中止先天免疫系统的变化，逆转、减少或中止B细胞发育中的损伤，逆转、减少或中止胸腺退化，逆转、减少或中止T细胞产量降低以及逆转、减少或中止T细胞多样性降低，其包括向人或动物受试者施用有效量的式(I)化合物。
免疫系统的一个重要作用是抵抗外部感染，疫苗接种是其中的重要工具。在免疫受损的受试者和老年受试者中，免疫反应普遍下降并且对疫苗接种的应答受损，这降低了疫苗接种的有效性，并且受试者通常更易得流感。根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于在人或动物受试者中(i)提高针对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大针对抗原的免疫反应，其中所述受试者是老年人或免疫受损的受试者。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于在人或动物受试者中(i)提高针对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大针对抗原的免疫反应，其中免疫反应针对疫苗。
免疫反应包含许多组分，式(I)化合物有望在这些组分中的一种或多种中显示出益处。这些包括：
(i)抗体效价的提高；
(ii)免疫细胞反应的改善，例如在CD4 T细胞、CD8 T细胞、树突状细胞、巨噬细胞、自然杀伤(NK)细胞和/或B细胞的功能方法，和/或
(iii)细胞因子反应的提高。
在一实施方案中，抗体效价的提高将为至少5％，例如至少10％，例如至少15％或20％，例如至少25％或30％。
在另一个实施方案中，血清转化率的提高将是5％或更高，例如10％或更高，例如15％或更高或20％或更高，例如25％或更高或30％或更高。
在另一个实施方案中，血清保护率的提高将是5％或更高，例如10％或更高，例如15％或更高或20％或更高，例如25％或更高或30％或更高。
在另一个实施方案中，峰值抗体效价将高至少2倍、至少3倍、至少4倍或至少5倍。
根据本发明的另一个方面，提供了用于在受试者动物中响应于疫苗施用而增加抗体效价的方法中的式(I)化合物，包括用有效量的式(I)化合物治疗所述动物。
疫苗接种可以针对任何会导致人类或动物疾病的致病细菌或致病病毒。因此，根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于在人或动物受试者中(i)提高针对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大针对抗原的免疫反应，其中免疫反应针对流感、水痘、白喉、脑膜炎球菌、麻疹、腮腺炎、百日咳、肺炎球菌、小儿麻痹症、风疹、破伤风、肺结核、寨卡病毒、埃博拉病毒、伤寒和/或黄热病的疫苗。
根据本发明的另一方面，提供了一种疫苗接种方法，包括：
a)施用式(I)化合物作为免疫增强剂；和
b)施用疫苗。
根据本发明的另一方面，提供了一种疫苗接种方法，包括：
a)施用尿石素作为免疫增强剂；和
b)施用疫苗。
为了避免疑问，式(I)的化合物和尿石素可以与疫苗以任何顺序施用或可以同时施用。
一种特别优选的疫苗是针对流感病毒的疫苗。流感病毒以几种类型出现，即甲型流感、乙型流感、丙型流感和丁型流感。因此，根据本发明的另一方面，提供了本发明的方法或用途，其中疫苗接种针对甲型流感、乙型流感、丙型流感或丁型流感。在本发明的一方面，疫苗接种针对甲型流感。在本发明的另一方面，疫苗接种针对乙型流感。
甲型流感以多种变体(血清型)存在。在本发明的另一方面，提供了本发明的方法或用途，其中疫苗接种针对甲型流感，其中血清型选自H1N1、H2N2、H3N2、H5N1、H7N7、H1N2、H9N2、H7N2、H7N3、H10N7和/或H7N9，尤其是H1N1和/或H3N2。
在本发明的一方面，在本发明的方法或用途中，式(I)化合物与疫苗同时施用。在另一方面，在本发明的用途或方法中，在疫苗之前施用式(I)的化合物，任选在疫苗接种后继续施用。式(I)的化合物可以在疫苗之前数周或数天施用，例如1至12周，例如1至8周或1至4周。可选地，式(1)的化合物可以在施用疫苗之前约1周、约2周、约3周、约4周、约5周或约6周施用。
疫苗可以疫苗能够引发免疫反应的任何形式递送给受试者。施用途径的实例包括：通过肠胃外、皮下、皮内、口服、鼻内，舌下、经吸入、局部、直肠、颊和阴道。因此，根据本发明的另一方面，提供了本发明的方法或用途，其中通过以下一种或多种途径施用疫苗接种：肠胃外、皮下、皮内、口服、鼻内、舌下、经吸入、局部、直肠、颊和阴道。
认为当用于本发明的方法和用途中时，式(I)的化合物将对老年受试者和儿童特别有效。因此，根据本发明的另一方面，提供了本发明的方法或用途，其中所述受试者是儿童、年长的人或老人。
年长的人可以大于50岁，例如大于55岁，例如大于60岁，例如在50至65岁之间。
老年患者可以年龄在65岁以上，例如在70岁以上，例如在75岁以上，例如在80岁以上，例如在65至80岁之间，例如在65至90岁之间，例如90至100岁之间，例如大于100岁。
儿童可以从出生到大约18岁，例如从出生到大约1岁，例如从出生到大约10岁，例如从出生到4到5岁。
还认为式(I)的化合物在用于本发明的方法和用途中时将在免疫受损的受试者中特别有效，例如，感染了HIV、肝炎和结核病或有感染HIV、肝炎和结核病风险的免疫受损的受试者。因此，根据本发明的另一方面，提供了本发明的方法或用途，其中所述受试者是免疫受损的受试者，例如，感染了HIV、肝炎和/或结核病的受试者。
式(I)的化合物增强对抗原的免疫反应，特别是对疫苗接种的应答，并因此充当免疫增强剂。式(I)化合物可与一种或多种其他免疫增强剂组分一起使用以进一步增强免疫反应。因此，根据本发明的另一方面，提供了一种免疫增强剂组合物，其包含式(I)的化合物和一种或多种另外的免疫增强剂组分。这样的组合物包括打算在接种疫苗之前施用的组合物和其中首先施用式(I)的化合物并且在一段时间后施用一种或多种另外的免疫增强剂组分的组合物。免疫增强剂的施用可以在接种疫苗时停止，或者也可以与接种疫苗同时和之后进行。时间段可从几小时到几周不等。
式(I)化合物可以在治疗方案中与疫苗一起施用，具有或不具有一种或多种其他免疫增强剂组分。因此，根据本发明的另一方面，提供了一种治疗方案，包括：
(i)式(I)化合物；
(ii)疫苗；和
(iii)任选地一种或多种免疫增强剂组分。
根据本发明的另一方面，提供了一种治疗方案，其中疫苗包含灭活或减毒的微生物或衍生自其的蛋白质或肽抗原。灭活或减毒的微生物选自灭活或减毒的病毒或灭活或减毒的细菌。为了避免疑问，蛋白质或肽抗原可以源自活性或未减毒的病毒或细菌。
在治疗方案中，式(I)化合物可以多种方式施用，如下：
-一级预防：在接种疫苗前先给予式(I)的化合物以引发/敏化免疫系统，以备接种疫苗之用；和/或
-二级预防：将式(I)化合物与疫苗接种/免疫致敏剂一起给予(作为免疫增强剂-例如作为片剂口服，同时进行皮下疫苗接种)，以增强免疫反应；和/或
-三级预防：接种疫苗/流感反应开始后给予式(I)化合物以缓解或控制了流感发作的症状。
根据本发明的另一方面，疫苗是选自以下一种或多种的灭活或减毒的微生物或抗原：流感、水痘、白喉、脑膜炎球菌、麻疹、腮腺炎、百日咳、肺炎球菌、脊髓灰质炎、风疹、破伤风、结核病、寨卡病毒、埃博拉病毒、伤寒和/或黄热病或由它们衍生的蛋白质、亚基或肽。优选地，流感或由其衍生的蛋白质、亚基或肽。
增加功能性造血干细胞的数量有利于造血系统的整体更新，并导致：免疫功能提高；骨髓衰竭的发生率降低，例如在放射治疗或骨髓移植后；以及是贫血的一种治疗方法。这可用于改善用于治疗癌症(如白血病和淋巴瘤)的化学疗法治疗的细胞毒性作用的恢复，治疗和/或预防化学疗法引起的骨髓抑制；以及改善骨髓移植和降低移植相关死亡率。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于增加功能性造血干细胞数目的方法中的式(I)化合物，例如，用于：
(i)在治疗患者和/或在供体中收集骨髓之前；
(ii)在放射线后和/或骨髓移植后的治疗；
(iii)治疗化学疗法的细胞毒性作用；和/或
(iv)治疗和/或预防化疗导致的骨髓抑制。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于：
(i)在治疗患者和/或在供体中收集骨髓之前
(ii)在放射线后和/或骨髓移植后的治疗；
(iii)治疗化学疗法的细胞毒性作用；和/或
(iv)治疗和/或预防化疗导致的骨髓抑制。
造血干细胞也是新的红细胞的来源。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于预防和/或治疗贫血的式(I)化合物。
式(I)的化合物也可以用于通过辐射治疗的患者，例如，在癌症的治疗中。因此，根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物在患者的放射治疗期间作为免疫增强剂的用途。式(I)化合物可用于在辐射之前或期间增强免疫系统，以限制治疗期间对免疫系统的损害。替代地或另外地，可以在辐射后使用式(I)的化合物以增强免疫系统的恢复。
式(I)的化合物可以收获骨髓细胞用于随后的移植之前和/或在将骨髓细胞移植回患者体内以增强骨髓的再填充之后，在骨髓细胞移植期间用作免疫增强剂。式(I)的化合物可以在免疫抑制疗法例如用于治疗癌症的细胞毒性化学疗法之后返回患者之前离体用于骨髓细胞的扩增。
可以离体或体内使用式(I)的化合物以增加用于癌症免疫疗法的免疫细胞的数量和功能，包括天然杀伤细胞、巨噬细胞和活化的T细胞。
式(I)的化合物可以离体用于扩增CAR-T、TCR-T或其他工程改造的T细胞(Kershaw,M.H.,Westwood,J.A.,&Darcy,P.K.Gene-engineered T cells for cancertherapy.Nature Reviews Cancer,2013)，然后返回患者进行后续的癌症免疫治疗。
式(I)化合物可以离体用于增加间充质干细胞的数量和功能，然后再返回患者进行软骨再生。
式(I)的化合物可用于刺激多能干细胞、诱导性多能干细胞(iPS)、胚胎干细胞和成年干细胞分化为角质形成细胞，然后返回患者进行皮肤移植。
根据本发明的另一方面，提供了用于预防和/或治疗化学疗法的细胞毒性作用的方法的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于预防和/或治疗骨髓抑制例如细胞毒性化学疗法后的骨髓抑制的方法中的式(I)化合物。
已涉及神经元干细胞(NSC)衰竭以在衰老期间嗅觉下降中起作用。因此，根据另一方面，提供了用于治疗嗅觉下降例如衰老过程中的嗅觉下降的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，在促进内耳毛祖细胞扩增中提供式(I)化合物。
另外，刺激NSC以响应于癫痫发作而增殖，表明NSC增殖导致神经发生增加，从而修复脑损伤或神经元丢失。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于促进脑修复的方法的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物或在预防、抑制或减缓神经元丧失的方法中的用途。根据本发明的另一方面，提供了用于预防和/或治疗癫痫发作的方法的式(I)化合物。
功能神经干细胞数目的增加将促进神经发生，这可以支持学习，例如适应性学习。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于增加神经发生的方法的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于支持学习例如自适应学习的方法中的式(I)化合物。
黑色素干细胞功能下降和/或黑色素干细胞数量减少与衰老过程中的头发变白有关。因此，根据本发明的另一方面，提供了在预防、抑制或减缓头发颜色损失或头发白化例如老化过程中头发颜色损失或头发白化的方法中的式(I)化合物。
毛囊干细胞功能降低和/或毛囊干细胞数量减少可能与身体脱发和秃发有关。因此，根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于(i)预防、抑制或减缓身体脱发和/或秃发；(ii)促进和/或改善头发的生长；和/或(iii)促进和/或改善移植后的头发生长的方法中。
根据本发明的另一方面，提供了用于毛囊干细胞再生和/或提高毛干细胞更新率的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于毛囊干细胞分化的方法中的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于增加头发生长的方法中的式(I)化合物。毛发生长的速率可以通过毛干的形成速率或具有形成毛干的活性的毛囊的形成速率来测量。在一些实施方案中，效果可以包括改变发干的厚度。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加毛囊数的方法中的式(I)化合物。在一个实施方案中，式(I)的化合物在数周至数月的时间内促进毛囊数(或毛囊单位)增加至少5％、10％、15％、20％、25％。例如，在几周到几个月的时间内，毛囊数量(或毛囊单位)至少增加10％。例如，在几周到几个月的时间内，毛囊数量(或毛囊单位)增加了50％(或更多)。
根据本发明的另一方面，提供了用于减少脱发的式(I)化合物。在一个实施方案中，在几周到几个月的时间内，脱发至少减少了5％、10％、15％、20％、25％。例如，在几周到几个月的时间内，脱发至少减少了10％。例如，在数周至数月的时间内，脱发减少了50％(或更多)。
根据本发明的另一方面，提供了用于医学状况的式(I)化合物，该医学状况将从毛囊干细胞生长和/或毛发生长的增加中受益，例如斑秃、雄激素性脱发、男性型秃发和化学疗法引起的脱发。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗男性型秃发的方法的式(I)的化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于治疗脱发症的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于改善现有头发的式(I)化合物。改善现有的头发包括增加头发的厚度。
根据本发明的另一方面，提供了一种用于(i)预防、抑制或减缓身体脱发和/或秃发；(ii)促进和/或改善头发的生长；和/或(iii)促进和/或改善移植后毛发生长的组合物，其包含式(I)的化合物，其特征在于该组合物是补品、洗剂、血清、洗发剂、护发素、喷雾剂、凝胶剂或护发霜。在另外的实施方案中，式(I)化合物或其盐以处于0.01μM到100mM、0.01μM到10mM、0.01μM到1mM、0.01μM到100μM、0.1μM到500μM、0.1μM到100μM、或1μM到50μM范围内的浓度存在于组合物中。
胰岛中β细胞的更新率降低会增加衰老过程中2型糖尿病的可能性。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于预防、抑制、减慢和/或逆转胰岛中β细胞更新速率降低的方法的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于提高胰岛中β细胞的更新速率的式(I)化合物。.
肌肉干细胞数量和功能的下降导致受伤后肌肉再生能力的下降。因此，根据本发明的另一方面，提供了用于增加肌肉干细胞数量的方法的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于促进肌肉再生能力的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于促进肌肉干细胞再生能力的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于例如在受伤或手术后促进和/或改善肌肉再生的方法中。
根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于促进和/或改善例如年长或老年患者受伤或手术后的肌肉再生的方法中。
根据本发明的另一方面，提供了用于在运动后促进和/或改善肌肉再生的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加肌肉干细胞数量的方法中的式(I)化合物。
可以通过FACS(荧光激活细胞分选)识别对肌肉干细胞的影响。选择肌肉干细胞群体并观察本发明对肌肉干细胞的有益影响的方法的两个例子是采用以下标记组合：
1.CD31阴性、CD45阴性、SCA阴性、VCAM阳性肌肉干细胞
2.CD31阴性、CD45阴性、CD11b阴性、SCA阴性、整联蛋白α7阳性、CD34阳性肌肉干细胞。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD31阴性、CD45阴性、SCA阴性、VCAM阳性肌肉干细胞数目的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于增加CD31阴性、CD45阴性、CD11b阴性、SCA阴性、整联蛋白α7阳性、CD34阳性肌肉干细胞数目的方法中的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了用于在损伤后促进肌肉再生的方法中使用的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于增加肌肉再生能力的方法中的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了式(I)的化合物，其用于损伤后的肌肉愈合的方法中。式(I)的化合物可以离体用于肌肉干细胞的扩增，然后返回患者用于随后的肌肉再生治疗。因此，根据本发明的另一个方面，提供了用于肌肉干细胞扩增的方法，例如，肌肉干细胞扩增的离体方法中的式(I)化合物。
还认为式(I)的化合物在干细胞向更成熟的表型例如祖细胞和终末分化的细胞如肌肉细胞、毛细胞、造血细胞和神经细胞的分化中起作用。不受理论原理的束缚，认为这是通过充当其他分化诱导因子的辅助因子。
因此，根据本发明的另一方面，提供了用于诱导干细胞例如多能干细胞分化的方法的式(I)化合物。根据本发明的另一方面，提供了用于诱导祖细胞分化的方法的式(I)化合物。
其中式(I)的化合物促进分化的细胞的例子包括多能干细胞、诱导多能干细胞(iPS)、胚胎干细胞和成年干细胞。细胞的其他例子包括：造血干细胞、肌肉干细胞、皮肤干细胞、肝干细胞、神经元干细胞、黑素细胞干细胞、毛囊干细胞、间充质干细胞、脂肪源干细胞、角膜缘干细胞(角膜干细胞)、心脏干细胞、肠干细胞、上皮干细胞、自体干细胞和同种异体干细胞。
根据本发明的另一方面，提供了一种组合物，其包含：
a)式(I)化合物；和
b)一种或多种分化诱导因子。
分化诱导因子的例子包括：生长分化因子，类维生素A(例如视黄酸)，丁酸盐(例如丁酸钠)，激活素，成纤维细胞生长因子(例如碱性FGF)，转化生长因子(例如TGF-β)，肌生长抑制素，胰岛素生长因子1，血管内皮生长因子A，骨形态发生蛋白，白介素3，白介素6，干细胞因子，表皮生长因子，集落模拟因子(例如GM-CSF和M-CSF)和胰高血糖素样肽1型。
弗里德里希(Friedreich)共济失调是一种常染色体隐性遗传疾病，其影响9号染色体上的基因(FXN)，该基因产生一种重要的蛋白质，称为frataxin。Frataxin在线粒体中起作用，并且据信式(I)的化合物在减轻这种生化损伤的作用中具有作用。根据本发明的另一方面，提供了用于治疗弗里德里希共济失调的式(I)化合物。
根据本发明的另一方面，提供了在有需要的患者或受试者中在本发明的方法中使用的式(I)化合物。
附图说明
图1描述了造血系统，A)显示了源自造血干细胞的所有不同的细胞线，B)描述了可用于定义祖细胞的不同亚群的细胞表面标志物以及每个群体相对于总骨髓的相对贡献(％BM)。在人类中，对于HSC(Lin-CD34+CD38-CD45RA-CD90+CD49+)和MPPs(Lin-CD34+CD38-CD45RA-CD90-CD49f-)二者，已经确定了一组类似的人类蛋白质标志物。造血干细胞(HSC)是最静止的细胞，并且是不同的多能祖细胞(MPPS)的来源。
图2是通过流式细胞术分析从老年C57BL/6J小鼠分离的骨髓细胞的一组图。这些图展示了用于选择包含祖细胞LSK(c-Kit+,Lin-,Sca 1+)细胞的种群的门控策略的实例。在这个特定的例子中，用尿石素A处理导致祖细胞群的显著增加，从对照小鼠中3.16％的谱系阴性细胞增加到用尿石素A处理的老年小鼠中的5.27％。
图3显示了用于选择不同祖细胞群的门控策略，以及尿石素A处理对这些不同造血祖细胞群的影响。存在于LSK(c-Kit+,Lin-,Sca 1+)细胞群中的不同祖细胞群是根据其CD150、CD48、CD34和CD135的表达来分离的。尿石素A处理可使最不活跃的祖细胞(HSC+MPP1)的LSK细胞百分比从53.1％增加到61.7％。这种增加的HSC+MPP1祖细胞群对于HSC细胞进一步富集，从73.8％(未处理)增至81.7％(尿石素A)。
图4显示了尿石素A对最原始的造血干细胞群体的影响。尿石蛋白A在老年动物中的治疗导致最原始的祖先造血干细胞(HSC)群作为占总细胞数的百分比和细胞数二者都增加。总干细胞数量的增加具有统计学意义，p<0.05。
图5-显示了评估响应于流感疫苗尿石素A对抗体效价的影响的2期临床试验设计。
图6-展示了尿石素A对促炎和抗炎细胞因子的作用。老年动物的尿石素A处理导致IL-10比IL-12(p40)比率显著增加(p<0.05)。
具体实施方式
术语‘约’是指相关值的±20％的公差，例如相关值的±15％，例如相关值的±10％或相关值的±5％。
术语‘免疫增强剂’是指与特定疫苗抗原结合使用时可起到加速、延长或增强抗原特异性免疫反应作用的任何物质，和/或改善免疫健康性以使个体更能够增加针对感染或癌症的免疫反应的任何物质。
术语‘抗原’是指蛋白质、亚基、肽或其他化合物，当被受试者识别为非自身时，其触发免疫反应。这样的免疫反应可以通过先天和/或适应性机制来调动对入侵病原体、毒素或过敏原的反应。抗原通常可以源自病原生物，例如病原细菌或病原病毒。抗原也可以源自恶性细胞。
术语‘免疫细胞’是指涉及受试者对诸如细菌和病毒的微生物感染的防御的任何细胞。该术语还涉及与受试者对癌细胞的防御有关的任何细胞。免疫细胞包括：吞噬细胞(如嗜中性粒细胞和巨噬细胞)、细胞毒性自然杀伤(NK)细胞和粒细胞、巨噬细胞、树突细胞、T细胞亚群(包括记忆细胞、B细胞和巨噬细胞)。
术语‘炎性衰老’是指伴随衰老过程的慢性低度发炎。
术语‘免疫缺陷’是指免疫系统抵抗传染病和/或癌症的能力受损或完全缺乏的状态。具有任何类型的免疫缺陷的人被称为是免疫功能低下的。
术语‘免疫衰老’是指自然衰老引起的免疫系统逐渐退化。它既指宿主对感染的反应能力，也指长期免疫记忆的发展，尤其是通过疫苗接种。
术语‘盐’是指任何药学上可接受的盐或非药学上可接受的盐。尽管仅药学上可接受的盐将适合于对受试者施用，但是非药学上可接受的盐可用作形成药学上可接受的盐的中间体。
如本文所用，术语‘血清转化’是指在接种疫苗后，接种疫苗后的抗体水平，例如针对个体已接种疫苗的免疫原的血清抗体的量的增加，例如至少等于疫苗接种前测得的抗体水平的2倍至至少4倍，例如，普通流感株(H1N1、H3N2、B型)疫苗接种后。
如本文所用，术语‘血清保护’是指个体中针对免疫原的血清抗体中存在抗体，该个体已经接种了该免疫原，其量大于或等于赋予针对感染性源的保护的保护阈值。
术语干细胞衰老是指尽管持续存在活力和代谢活性，但稳定且不可逆的(无治疗干预)增殖能力丧失。
如本文所用，术语‘受试者’是指患有疾病或具有患病风险的个体，例如人、牛、猫、狗、驴、猪、马、小鼠、大鼠等，特别是人。受试者可以是根据本发明需要治疗的患者。术语‘受试者’可以包括非哺乳动物受试者，例如爬行动物。
术语‘胸腺退化’是指胸腺随着年龄的增长而萎缩，从而导致胸腺结构的改变和组织质量的减少。
如本文所用，术语‘疫苗’是指用于向动物或人体内施用以赋予针对疾病，特别是病毒或细菌性疾病的保护的免疫原性组合物。术语‘疫苗’还指抗癌疫苗。
本公开内容提供了组合物和方法，其涉及施用式(I)的化合物，即尿石素，例如尿石素A，其提供有益的健康作用。
式(I)化合物和其盐
尿石素是由包含人类的哺乳动物、肠道微生物群对鞣花单宁和鞣花酸的作用产生的代谢产物。鞣花单宁和鞣花酸是食物中常见的化合物，如石榴、坚果和浆果。鞣花单宁本身最低限度地被肠道吸收。尿石素是一类具有上述代表性结构(I)的化合物。一些特别常见的尿石素的结构描述于以下表1中，参考结构(I)。
Figure BDA0002871967200000291
在实践中，对于商业规模的产品，合成尿石素是方便的。合成途径描述于例如WO2014/004902和WO2015/100213中。
根据结构(I)的任何结构的尿石素可以用于本公开的方法中。
在本公开的用途和方法的一个方面，合适的化合物是式(I)化合物，其中A、C、D和Z独立地选自H和OH，并且B、W、X和Y都是H，优选地A、C、D和Z中的至少一个是OH。
特别合适的化合物是天然存在的尿石素。因此，Z优选地是OH，并且W、X和Y优选地都是H。当W、X和Y都是H，并且A和B两者都是H，并且C、D和Z都是OH时，然后化合物是尿石素C。当W、X和Y都是H，并且A、B和C都是H，并且D和Z两者都是OH时，然后化合物是尿石素A。优选地，本公开的方法中使用的尿石素是尿石素A、尿石素B、尿石素C或尿石素D。最优选地，所使用的尿石素是尿石素A。
根据一个实施方案，提供了本发明的方法，其中式(I)的化合物是尿石素A。
根据一个实施方案，提供了本发明的方法，其中式(I)的化合物是尿石素B。
根据一个实施方案，提供了本发明的方法，其中式(I)的化合物是尿石素C。
根据一个实施方案，提供了本发明的方法，其中式(I)的化合物是尿石素D。
Figure BDA0002871967200000301
应用于式(I)化合物的术语药学上可接受的盐定义了游离碱化合物的任何无毒的有机或无机酸加成盐，其适用于与人和低等动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应，且与合理的受益/风险比相称。根据本发明的合适的盐包含由有机碱或无机碱形成的那些盐。药学上可接受的碱盐包含铵盐、碱金属盐，例如钾和钠的那些；碱土金属盐，例如钙和镁的那些；以及具有有机碱的盐，例如二环己胺、N-甲基-D-葡萄糖、吗啉、硫代吗啉、哌啶、吡咯烷；单-、二-或三-低级烷基胺，例如乙基-、叔丁基-、二乙基-、二异丙基-、三乙基-、三丁基-或二甲基-丙基胺；或单-、二-或三羟基低级烷基胺，例如单-、二-或三乙醇胺。
这些盐可以以水合形式或基本上无水的形式存在。式(I)化合物的结晶形式也考虑用于本发明的用途或方法中。
施用/剂量方案
本公开内容的方法包括在疫苗接种前2至16周的期间内，以每天1.7至6.0mmol的每日量向受试者口服施用式(I)的化合物或其盐，例如，在接种前2至16周的期间内，每天1.7至2.7mmol或在接种前2至16周的期间内，每天2.8至6.0mmol。如下所述，尿石素A的优选施用范围为250mg至1000mg(相当于约1.1至4.4mmol)，与2000mg的更高剂量相比，其产生了出人意料的良好的药代动力学特征。在一个实施方案中，剂量是250mg/天，在另一个实施方案中，剂量是500mg/天，在另一实施方案中，剂量是1000mg/天。
在另一个实施方案中，施用剂量选自：
-每天一次或两次，250mg；
-每天一次或两次，500mg；
-每天一次或两次，750mg；
-每天一次或两次，1000mg；
-每天一次或两次，1250mg；或
-每天一次或两次，1500mg。
本公开的方法涉及每天施用式(I)的化合物或其盐，或含有该化合物或盐的组合物。在一些实施方案中，化合物或组合物每天施用一次，即化合物或组合物每24小时至少施用一次。在其他实施方案中，化合物或包含化合物的组合物每天施用多次，例如每天两次，或每天三或四次。在这种情况下，每日剂量将在这些多次剂量之间分配。在一个实施方案中，施用是一天一次，在第二实施方案中，施用是一天两次，在第三实施方案中，施用是一天三次。
本公开的方法需要每天施用式(I)的化合物或其盐，或包含该化合物或盐的组合物，持续2至16周的期间。在一些实施方案中，所述方法可以包括在更长的期间内施用式(I)化合物或其盐，例如每天施用，至少持续2周、3周、4周、5周、6周、8周、12周、4个月、6个月或至少一年。在一些实施方案中，该方法包括每天施用该化合物或其盐达3个月、达6个月、达1年、达2年或达5年的期间。在一些实施方案中，该方法包括每天施用化合物或盐，持续时间为21天至5年、21天至2年、21天至1年、21天至6个月、21天到12周、28天到5年、28天到2年、28天到1年、28天到6个月、28天到4个月、28天到12周、6周到2年、6周到1年、8周到1年、或8周到6个月。
本公开内容的方法需要每天施用的式(I)化合物或其盐的量为0.7mmol/天至最高2.7mmol/天或0.7mmol/天两次至2.7mmol天两次。在一些实施方案中，施用的量在2.0至2.5mmol的范围内。在一些实施方案中，施用的量约为1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6或2.7mmol。在其他实施方案中，施用的量为大约2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6.0mmol。在一些优选的实施方案中，该方法涉及每天施用约2.2mmol或每天两次2.2mmol的式(I)化合物或其盐(例如尿石素A)。所施用化合物的确切重量取决于所用化合物的分子量。例如，尿石素A的分子量为228g/mol(使得2.20mmol为501.6mg)，而尿石素B的分子量为212g/mol(使得2.20mmol为466.4mg)。
在另一个实施方案中，本公开内容的方法需要每天施用每天2.8mmol至每天6.0mmol或每天两次的量的式(I)化合物或其盐。在一些实施方案中，施用的量在4.0至4.8mmol的范围内。在一些实施方案中，施用的量为大约2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9或6.0mmol。在一些优选的实施方案中，该方法涉及每天或每天两次施用约4.4mmol的式(I)化合物或其盐(例如尿石素A)。所施用化合物的确切重量取决于所用化合物的分子量。例如，尿石素A的分子量为228g/mol(使得4.40mmol为1003.2mg)，并且尿石素B的分子量为212g/mol(使得4.40mmol为932.8mg)。
在一些实施方案中，所述方法包括以400至600mg/天或400至600mg/天两次的量施用尿石素A。在一个优选的实施方案中，该方法包括施用尿石素A，其量为每天或每天两次450至550mg，更优选约500mg。
在其他实施方案中，所述方法涉及每天两次以700至1300mg/天的范围内，或每天或每天两次以750至1250mg的范围内，或以800至1200mg的范围内，或以850到1150mg的范围内或以900到1100mg的范围内的量施用尿石素A。在一个优选的实施方案中，该方法包括每天或每天两次以950至1150mg的范围内，更优选每天或每天两次以约1000mg的量施用尿石素A。
在一些优选的实施方案中，所述方法包括以4.5至11mg/kg/天，例如4.5至8.5mg/kg/天的范围内的量向受试者施用尿石素A。在另一个实施方案中，所述方法包括以5至9mg/kg/天的范围内的量向受试者施用尿石素A。在另一个实施方案中，所述方法包括以6.0至8mg/kg/天的范围内的量向受试者施用尿石素A。
在其他优选的实施方案中，所述方法包括以9至18mg/kg/天，例如9至17mg/kg/天的范围内的量向受试者施用尿石素A。在另一个实施方案中，所述方法包括以10至17mg/kg/天的范围内的量向受试者施用尿石素A。在另一个实施方案中，所述方法包括以11至16mg/kg/天的范围内的量向受试者施用尿石素A。
结合500mg剂量和1000mg剂量的剂量方案可能是有利的。例如，每日两次的剂量方案将1000mg的第一剂量和数小时后的500mg的第二剂量结合。所述500mg剂量可以在1000mg剂量之后6-18小时，例如在1000mg剂量之后8-12小时。例如，在1000mg剂量后约12小时。因此，根据本发明的另一方面，提供了用式(I)的化合物治疗疾病，其包括每日两次的剂量方案，该方案包括1000mg的第一剂量，随后500mg的第二剂量，其中这两个剂量间隔6-18小时。
式(I)的化合物或其盐或包含该化合物或盐的组合物可以在任何合适的时间施用，例如可以在睡眠后的早晨或晚上施用。在一些实施方案中，可能优选的是，每天在大约相同的时间(例如，在给定时间点的15、30、60或120分钟内)执行该方法。
免疫增强剂
免疫增强剂是相对于单独抗原引起的使对外源抗原的免疫反应的强度和/或持续时间增加的任何化合物或组合物。因此，免疫增强剂的关键功能特征包括其增强对靶抗原的适当免疫反应的能力、广泛应用中的长期安全性以及与不同抗原/疾病应用一起使用时的灵活性。
式(I)化合物可与一种或多种其他免疫增强剂一起施用。
在本发明的另一个替代实施方案中，所述免疫增强剂是TLR激动剂，例如CpG寡核苷酸、鞭毛蛋白、单磷酰基脂质A、聚I：C及其衍生物。
在本发明的另一个实施方案中，所述免疫增强剂是细菌细胞壁衍生物，例如胞壁酰二肽(MDP)和/或海藻糖二棒状霉菌酸酯(trehelose dycorynemycolate)(TDM)。
在本发明的另一个实施方案中，所述免疫增强剂是适用于人类受试者的铝基免疫增强剂。
免疫增强剂(免疫加强剂或免疫调节剂)长期以来一直用于改善对疫苗抗原的免疫反应。将免疫增强剂掺入疫苗制剂中旨在增强、加速和延长对疫苗抗原的特异性免疫反应。免疫增强剂的优点包括增强较弱抗原的免疫原性，减少成功免疫所需的抗原量，减少所需的加强免疫的频率以及改善老年和免疫受损疫苗的免疫反应。选择性地，免疫增强剂也可用于优化所需的免疫反应，例如关于免疫球蛋白类别，和诱导细胞毒性或辅助性T淋巴细胞应答。另外，某些免疫增强剂可用于促进粘膜表面的抗体反应。氢氧化铝和磷酸铝或磷酸钙已常规用于人类疫苗。最近，各国已批准了掺入IRIV(免疫刺激重建的流感病毒体)的抗原和含有乳剂型免疫增强剂MF59的疫苗。免疫增强剂可以根据其来源、作用机理以及物理或化学性质进行分类。最常见的免疫增强剂类别是凝胶型、微生物型、油乳液型和乳化剂型、颗粒、合成型和细胞因子。最终疫苗产品中可能存在不止一种免疫增强剂。它们可以与疫苗中存在的单一抗原或所有抗原结合在一起，或者每种免疫增强剂可以与一种特定抗原结合。当前正在使用或开发的免疫增强剂的来源和性质高度多样。例如，铝基免疫增强剂由简单的无机化合物组成，PLG是一种聚合碳水化合物，病毒体可以源自不同的病毒颗粒，MDP来自细菌细胞壁；皂苷是植物来源的，例如QS-21，角鲨烯衍生自鲨鱼肝，重组内源性免疫调节剂衍生自重组细菌、酵母或哺乳动物细胞。有几种获得许可用于兽用疫苗的免疫增强剂，例如矿物油乳液，它们对人类的使用反应性太强。同样，完全的弗氏免疫增强剂虽然是已知的最强大的免疫增强剂之一，但不适合人类使用。
组合物
本公开的方法优选地涉及口服施用式(I)化合物或其盐。可以使用含有式(I)化合物或其盐的任何合适的口服组合物。因此，设想使用一系列包含式(I)的化合物并且适合口服的组合物。因此，在一些实施方案中，式(I)的化合物或其盐以包含式(I)的化合物或其盐和一种或多种适合于口服施用的赋形剂的口服组合物的形式施用。口服组合物可包含具有丸剂、片剂、胶囊剂、囊片、锭剂、含片、颗粒剂、悬浮粉末剂、口服溶液剂、口服混悬剂、口服乳剂、糖浆剂等形式的组合物。
包含式(I)化合物的组合物可以采取适合于预期应用的任何物理形式，例如，它们可以是固体(例如棒)、半固体(例如软凝胶)或液体(包括乳液)的形式。在某些情况下，该组合物可以是粘性流体或糊剂的形式。例如，在组合物是棒的情况下，它可以是任何合适的类型，并且可以包含常规用于制备小吃棒的成分。半固体形式同样可以包含本领域常规的赋形剂。赋形剂可以例如提供期望的硬度、保质期和风味，使得组合物具有可接受的味道、吸引人的外观和良好的储存稳定性。半固体形式可以是糊剂形式。当组合物是软凝胶时，它可以例如以具有壳的胶囊提供。壳可以是常规类型的，例如它可以是基于软明胶的壳。举例来说，该组合物也可以提供在硬胶囊型壳内部。液体组合物可以是药物、饮食补充剂或饮料的形式，各自用于口服。液体制剂可以是溶液、乳液、浆液或其他半液体。液体组合物中的赋形剂可以例如提供保存期限、视觉外观、风味和口感，使得组合物具有可接受的味道、吸引人的外观和良好的储存稳定性。在一定的稀释水平下，可能需要在受试者饮用饮料之前先摇动饮料，以保持活性成分的均匀悬浮。
在一些优选的实施方案中，该方法包括以微粉化形式施用式(I)的化合物或其盐(例如尿石素A)。微粉化使式(I)的化合物能够更快地分散或溶解。微粉化可以通过本领域中建立的方法实现，例如可以使用压缩力研磨、hamer研磨、通用或针磨、或喷射研磨(例如螺旋喷射研磨或流化床喷射研磨)。喷射研磨特别合适。如果使用微粉化的化合物，则优选地，化合物的D50尺寸小于100μm-也就是说，按质量计50％的化合物的粒径尺寸小于100μm。更优选地，化合物的D50尺寸小于75μm，例如小于50μm，例如小于25μm，例如小于20μm，例如小于10μm。更优选地，化合物的D50处于0.5-50μm的范围内，例如0.5μm到20μm，例如0.5μm到20μm，例如0.5μm到10μm，例如1.0μm到10μm，例如1.5μm到7.5μm，例如2.8μm到5.5μm。优选地，化合物的D90尺寸小于100μm。更优选地，化合物的D50尺寸小于75μm，例如小于50μm，例如小于25μm，例如小于20μm，例如小于15μm。化合物的D90优选地处于5μm到100μm的范围内，例如5μm到50μm，例如5μm到20μm，例如7.5μm到15μm，例如8.2μm到16.0μm。优选地，化合物的D10范围为0.5–1.0μm。优选地，式(I)化合物或其盐(例如尿石素A)的D90处于8.2μm到16.0μm的范围内，D50处于2.8μm到5.5μm的范围内，并且D10处于0.5μm到1.0μm的范围内。
在另一个实施方案中，式(I)的化合物或其盐具有选自以下之一的尺寸分布：
(i)D50尺寸在0.5至50μm的范围，D90尺寸在5至100μm的范围，
(ii)化合物的D90尺寸在8.2至16.0μm的范围内，D50尺寸在2.8至5.5μm的范围内，并且D10尺寸在0.5至1.0μm的范围内；
(iii)式(I)的化合物的D50尺寸在0.5至20μm的范围，并且D90尺寸在5至50μm的范围；
(iv)式(I)的化合物的D50尺寸在50μm以下，并且D90尺寸在75μm以下；
(v)式(I)的化合物的D50尺寸在25μm以下，并且D90尺寸在50μm以下；
(iv)式(I)的化合物的D50尺寸在10μm以下，并且D90尺寸在20μm以下；
(v)式(I)的化合物的D50尺寸在10μm以下，并且D90尺寸在15μm以下；或
(vi)式(I)的化合物的D50尺寸为10μm，并且D90尺寸为20μm.
包含式(I)化合物或其盐和中链甘油三酯的组合物
在一些优选的实施方案中，式(I)的化合物或其盐(例如尿石素A)以组合物的形式施用，所述组合物包含：a)中链甘油三酯；和b)式(I)化合物或其盐。在那些实施方案中，优选地式(I)的化合物(例如尿石素A)为微粉化形式。
通过选择合适的中链甘油三酯和赋形剂，可以使组合物的物理形式适应所讨论产品的要求。例如，在一些实施方案中，组合物可以是药物组合物。在一些实施方案中，组合物可以是营养组合物。
在许多情况下，包含式(I)的化合物和中链甘油三酯的组合物具有粘性液体或糊剂的稠度，并且可以作为受试者的一般饮食的单份补充剂提供(例如在棒、凝胶或软胶囊、硬胶囊中或稀释于饮料中)；可选地，它可以作为餐食的一部分或全部提供。
当本公开的方法涉及使用包含中链甘油三酯的组合物时，中链甘油三酯通常占组合物的至少1％w/w，例如至少5％w/w，例如至少10％w/w，例如至少15％w/w。中链甘油三酯优选占组合物的20％w/w或更多，例如占组合物重量的25％w/w或更多，例如占组合物重量的30％w/w或更多。例如，中链甘油三酯可占组合物的1-40％w/w，组合物的2-40％w/w，组合物的5-40％w/w；组合物的10-40％w/w；组合物的1-99％w/w，组合物的5-99％w/w，组合物的10-99％w/w，组合物的20-99％w/w，组合物的5-90％w/w，组合物的10-90％w/w，例如组合物的20-90％w/w，组合物的20-80％w/w，例如组合物的30-80％w/w，例如组合物的30-70％w/w，例如组合物的30-60％w/w，例如组合物的30-50％w/w，例如组合物的30-40％w/w，例如组合物的30-35％w/w。例如，中链甘油三酯可占组合物的40-70％w/w，例如组合物的50-70％w/w，例如组合物的55-65％w/w。
在这样的组合物中，式(I)的化合物通常占组合物的0.1至80％w/w，例如0.1至60％w/w，例如0.25至50％w/w。例如，式(I)的化合物可以占组合物的0.5-50％w/w。如果组合物作为膳食的一部分或全部提供，则式(I)的化合物可以例如占组合物的0.25-5％w/w，例如组合物的0.3-3％w/w。如果组合物作为受试者的一般饮食的单份补充剂提供，则尿石素通常占组合物的20至80％w/w，例如20至40％w/w，例如组合物的25至35％w/w。例如，尿石素可占组合物的26-34％w/w，例如组合物的28-33％w/w；例如组合物的29-32％w/w，例如组合物的29-31％w/w。
在这样的组合物中，中链甘油三酯组分与式(I)的化合物的重量比通常在0.01∶1至100∶1的范围内，例如0.5∶1至100∶1，例如0.5∶1至50：1，例如0.5：1至5：1；或例如1：1至75：1，例如1：1至50：1，例如1：1至20：1，例如1：1至10：1，例如1：1至2.5：1，例如1：1到2：1，例如1：1到1.5：1。重量比可以为0.01：1至10：1，例如0.1：1至10：1或0.01：1至5：1，例如0.01：1至0.1：1。
在一些优选的实施方案中，本公开的方法包括施用包含填充物的软胶囊，所述填充物包含式(I)的化合物或其盐(例如尿石素A)和一种或多种中链甘油三酯。在那些实施方案中，优选将式(I)的化合物或其盐(例如尿石素A)微粉化。在使用软胶囊的实施方案中，壳组分可以使用常规成分生产。
中链甘油三酯是式CH2(OR1)-CH(OR2)-CH2(OR3)的化合物，其中R1、R2和R3是中链脂肪酸基团，通常为式–C(＝O)(CH2)nCH3，其中n处于4到10的范围内，例如6到8。中链脂肪酸是具有6-12个碳原子的脂肪族尾部的脂肪酸。脂肪族尾部主要是饱和的。特定的中链脂肪酸包含己酸(己酸，C6:0)、辛酸(辛酸，C8:0)、癸酸(癸酸，C10:0)和月桂酸(十二烷酸，C12:0)。肉豆蔻酸(十四烷酸，C14:0)也可以少量存在。最常用的中链甘油三酯通常具有辛酸和癸酸的甘油三酯的混合物，并且含有95％或更多的饱和脂肪酸。本公开的方法中使用的优选组合物中存在的中链甘油三酯组分可以由均相的单中链甘油三酯化合物类型组成；更常见地，中链甘油三酯组分是两种或更多种不同中链甘油三酯化合物的混合物。
欧洲药典将中链甘油三酯描述为从可可椰子L.(椰子)的胚乳的坚硬干燥部分或从油棕雅克(非洲油棕)的干燥胚乳提取的固定油。欧洲药典和USPNF两者均具有中链甘油三酯的规格，其要求特定的脂肪酸如下存在：己酸(C6)≤2.0％；辛酸(C8)50.0-80.0％；癸酸(C10)20.0-50.0％；月桂酸(C12)≤3.0％；和肉豆蔻酸(C14)≤1％。
用于优选的组合物中的中链甘油三酯包括甘油三酯与脂肪酸链的混合物，所述脂肪酸链以下列比例存在：C6≤5％；C8 50-70％；C10 30-50％；和C12≤12％，例如C6≤0.5％；C8 55-65％；C10 35-45％；和C12≤1.5％。
在优选的组合物中使用的中链甘油三酯可以衍生自任何已知的或其他合适的来源。
本公开内容的方法中使用的组合物可以有利地包含一种或多种磷脂。特别优选的磷脂是磷脂酰胆碱。磷脂酰胆碱带来的优点可能至少部分是由于其两亲性，例如由于作为乳化剂的特性。
磷脂，特别是磷脂酰胆碱的特别有用的来源是卵磷脂，并且在本发明的方法中使用的组合物有利地包含卵磷脂。当存在于组合物中时，卵磷脂通常占组合物的至少0.5％w/w，优选占组合物的至少1％w/w。卵磷脂优选占组合物重量的10％w/w或更多，例如占组合物重量的20％w/w或更多，例如占组合物重量的30％w/w或更多。例如，卵磷脂可占组合物的0.5-80％w/w，例如1-80％w/w，例如20-80％w/w，例如40-80％w/w，或者例如，组合物的0.5-75％w/w，例如，组合物的1-40％w/w，例如，组合物的30-40％w/w，例如组合物的30-35％w/w，例如组合物的30-75％w/w。可选地，卵磷脂可占组合物的0.5-5％w/w，例如占组合物的1-5％w/w，例如占组合物的1-3％w/w，例如占组合物的0.5-2％w/w，例如占组合物的1-2％w/w。卵磷脂(存在时)和尿石素之间的重量比通常在0.02：1至3：1的范围内，例如0.03：1至1.2：1，例如1：1至1.2：1，例如1.1：1到1.2：1。
'卵磷脂'表示存在于动植物组织中的任何种类的脂肪物质，包括磷酸、胆碱、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酯和磷脂(例如，磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇)。从大豆和向日葵获得的市售卵磷脂包含磷脂磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺和磷脂酸。卵磷脂可通过在非极性溶剂(如己烷、乙醇、丙酮、石油醚或苯)中从其来源化学提取而获得，或通过机械提取而获得。特别地，卵磷脂可以通过从包括大豆、鸡蛋、牛奶、油菜籽、棉籽和向日葵的来源中提取而获得。用于可食用制剂的商业卵磷脂可以容易地购买。
可用于本文所述组合物中的商业生产的卵磷脂通常包含以下主要成分：33–35％的大豆油，20-21％的肌醇磷脂，19–21％的磷脂酰胆碱，8-20％的磷脂酰乙醇胺，5-11％其他磷脂，5％的游离碳水化合物，2-5％的甾醇和1％的水分。
可用于本文所述的组合物中的商业生产的卵磷脂可例如富含磷脂酰胆碱，其在卵磷脂中具有至少5％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少10％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少15％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少20％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少25％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少30％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少32％w/w的磷脂酰胆碱，例如，在卵磷脂中具有至少40％w/w的磷脂酰胆碱。
卵磷脂还可以通过以下一种或多种方法进行修饰以调整其性质：醇提取特定的磷脂以产生具有不同磷脂的修饰比例的卵磷脂；丙酮萃取以除去油，得到粉末状或颗粒状的磷脂共混物；喷雾干燥到作为载体的蛋白质上；用合成乳化剂(如高熔点甘油单酯和甘油二酯)喷雾冷却，以生产片状或粉状产品；通过酶作用(磷脂酶，通常特别是磷脂酶A2)的修饰，特别是部分水解以产生具有明显乳化行为的卵磷脂；酸和碱水解脂肪酸基团；乙酰化；和脂肪酸链和氨基的羟基化。
在一些实施方案中，该方法包括施用包含式(I)的化合物或其盐、中链甘油三酯和乳化剂(例如卵磷脂)的组合物。
包含式(I)的化合物或其盐的药物组合物可以例如包括另外的药物活性化合物。
组合物中的其他组分可以是对受试者没有健康益处，但以一些其他方式改善组合物的化合物，例如改善如上所述的其味道、质地或保质期。因此，组合物可以进一步包含一种或多种选自乳化剂、着色剂、防腐剂、树胶、固化剂、增稠剂、甜味剂和调味剂的化合物。
合适的乳化剂、稳定剂、着色剂、防腐剂、树胶、固化剂和增稠剂在乳液和其他半液体的制造领域中是众所周知的。乳化剂可包括磷脂酰胆碱、卵磷脂、聚山梨酯如聚山梨酯60或聚山梨酯80(Tween-60和Tween-80)和单硬脂酸甘油酯(GMS)中的一种或多种。单硬脂酸甘油酯(glycerol monostearate)也称为单硬脂酸甘油酯(glyceryl monostearate)。
稳定剂可用于本文所述的组合物中。许多组合物是稳定的悬浮液，不需要添加稳定剂。稳定的悬浮液是不会随时间发生相分离的悬浮液。对于某些组合物，可以包含添加的稳定剂来改善稳定性。用于本发明的组合物中的合适的稳定剂包括单硬脂酸甘油酯(GMS)、二氧化硅和植物起酥油。示例性的稳定剂是GMS，并且本发明的优选组合物包含GMS。它的特性还使GMS成为磷脂的良好溶剂，例如在卵磷脂中发现的。GMS有两种多晶型物：α形式可分散且是泡沫状，可用作乳化剂或防腐剂。β形式适用于蜡基质。在50℃加热时，α形式转化为β形式。
GMS分为两个不同的等级：40-55％的甘油单酸酯和90％的甘油单酸酯。欧洲药典定义的40-55％的甘油单酸酯将GMS描述为单酰基甘油(主要是单硬脂酰甘油)以及一定数量的二甘油和三甘油的混合物。特别地，40-55级包含40-55％的单酰基甘油、30-45％的二酰基甘油和5-15％的三酰基甘油。99％的等级包含不少于90％的甘油单酸酯。商业GMS产品中的甘油单酸酯是可变比例的单硬脂酸甘油酯和单棕榈酸甘油酯的混合物。欧洲药典还根据混合物中硬脂酸酯的比例将单硬脂酸甘油酯40-55分为三种。类型1包含40.0-60.0％的硬脂酸，且棕榈酸和硬脂酸之和≤90％。类型2包含60.0-80.0％的硬脂酸，棕榈酸和硬脂酸之和≤90％。类型3包含90.0-99.0％的硬脂酸，棕榈酸和硬脂酸的总和≤96％。组合物中可以使用任何形式的GMS。
在一些实施方案中，该方法包括施用包含中链甘油三酯、式(I)化合物或其盐(例如，尿石蛋白A)和稳定剂例如单硬脂酸甘油酯的组合物。在一些实施方案中，该方法包括施用包含乳化剂和稳定剂的组合物。
也可以使用金属螯合剂或隐蔽剂，例如乙二胺四乙酸(EDTA)的钠钙盐。可包含在本发明的制剂中的其他组分包括聚乙二醇、二氧化硅、植物起酥油和蜂蜡。
在本文所述方法中使用的组合物中，调味剂可能是有益的。在液体或半液体组合物中，可以例如通过包含果汁或果泥来提供水果风味。典型的调味剂包括草莓、覆盆子、蓝莓、杏、石榴、桃、菠萝、柠檬、橙和苹果。通常，水果调味剂包括水果提取物、水果罐头或水果泥，以及甜味剂、淀粉、稳定剂、天然和/或人工香料、着色剂、防腐剂、水和柠檬酸或其他合适的酸的任意组合以控制pH。
在本文所述的方法中使用的单位剂量组合物优选包含250mg或500mg的式(I)的化合物，例如250mg或500mg的尿石素A。单位剂量可以例如为小吃棒的形式，例如重量在25g至150g的范围内，提供在足以容纳单剂量(例如50至500ml、100至300ml，例如250ml或500ml)的容器例如瓶或小袋中的饮料的形式。在另一个优选的替代实例中，单位剂量为软胶囊的形式，例如含有250mg尿石素A。
代表性的组合物如下表所示：
代表性组合物A：
Figure BDA0002871967200000451
本发明进一步提供了一种组合物，其包含式(I)的化合物和疫苗以及任选地一种或多种另外的免疫增强剂和/或一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一实施方案中，组合物的组分分开提供。在另一个实施方案中，组分以混合物形式提供。在另一个实施方案中，与式(I)的化合物分开地在与一种或多种另外的免疫增强剂的混合中提供疫苗。在另一个实施方案中，疫苗与式(I)化合物混合提供，并且一种或多种另外的免疫增强剂分开提供。在另一个实施方案中，疫苗与一种或多种另外的免疫增强剂混合提供，并且式(I)的化合物分开提供。药物组合物可以采取试剂盒的形式，该试剂盒可以包含本发明的组合物以及使用说明书和/或单位剂型中的多种不同组分。因此，在本发明的一个实施方案中，提供了一种用于诱导对抗原的免疫反应的试剂盒，其包括：
-第一组分，其包含式(I)的化合物；和
-第二组分，其包含另外的免疫增强剂；和
-任选地，包含一种或多种其他免疫增强剂的一种或多种其他组分。
在本发明的进一步实施方案中，提供了一种用于诱导对抗原的免疫反应的试剂盒，其包括：
-第一组分，其包含式(I)的化合物；和
-第二成分，其包含疫苗；和
-任选地，包含一种或多种其他免疫增强剂的一种或多种其他组分。
在本发明的进一步实施方案中，提供了一种用于诱导对抗原的免疫反应的试剂盒，其包括：
-第一组分，其包含式(I)的化合物；和
-第二成分，其包含疫苗；和
-第三组分，其包含另外的免疫增强剂；和
-任选地，包含一种或多种其他免疫增强剂的一种或多种其他组分。
在本发明的这种试剂盒中，任选地提供了说明组分施用顺序和间隔的说明书。在一实施方案中，组分是同时施用的。在另一个实施方案中，在各组分之间相隔一天或多天或数周的时间顺序施用组分。
在一个实施方案中，本发明的试剂盒包含疫苗和式(I)化合物以及任选地一种或多种分开提供的其他免疫增强剂。在另一个实施方案中，本发明的试剂盒包含疫苗和式(I)化合物以及任选的一种或多种其他免疫增强剂的混合物。
实施例
现在将参照以下非限制性实施例说明本发明。
实施例1：尿石素A的制备
尿石素A(4)分两步制备，从2-溴-5-甲氧基苯甲酸1和间苯二酚2开始。得到呈浅黄色粉末的纯化合物。
Figure BDA0002871967200000471
步骤1：
将2-溴-5-甲氧基苯甲酸1(27.6g；119mmol；1.0当量)、间苯二酚2(26.3g；239mmol；2.0当量)和氢氧化钠(10.5g；263mmol；2.2当量)在水(120mL)中的混合物在回流下加热1小时。然后加入5％硫酸铜水溶液(50mL水中3.88g CuSO4·5H2O；15.5mmol；0.1当量)，并且将混合物再回流30分钟。允许混合物冷却到室温，并且在布赫纳过滤器上过滤固体。将残余物用冷水洗涤，得到浅红色固体，将其在热MeOH中研磨。将悬浮液在4℃下放置过夜。过滤所得沉淀物，并且用冷MeOH洗涤，得到呈浅棕色固体的标题化合物3。
步骤2：
在0℃下，向3(10.0g；41mmol；1.0当量)在干燥的二氯甲烷(100mL)中的悬浮液滴加1M三溴化硼在干燥的二氯甲烷中的溶液(11.93mL纯BBr3在110mL无水二氯甲烷中；124mmol；3.0当量)。将混合物在0℃下放置1小时，并且然后使其温热到室温。将溶液在所述温度下搅拌17小时。然后将冰完全加入混合物中。过滤黄色沉淀物，并且用冷水洗涤，得到黄色固体，将其在乙酸中加热回流3小时。快速过滤热溶液，并且用乙酸洗涤沉淀物，然后用乙醚洗涤，得到呈黄色固体的标题化合物4。1H和13C NMR与4的结构一致。
实施例2：尿石素A剂型
将尿石素A配制成含有以下组分的软胶囊：
Figure BDA0002871967200000481
Figure BDA0002871967200000482
Figure BDA0002871967200000491
实施例3尿石素A对干细胞群的影响
为了确定尿石素A处理是否对干细胞群体有任何影响，从接受标准啮齿动物饮食或含与食物混合的尿石素A以达到将50mg/kg/天的剂量递送给小鼠的饮食的C57BL/6J老年小鼠中分离出造血干细胞(HSC)和多能祖细胞(MPP)。从16个月大开始用尿石素A治疗小鼠，并接受34周的治疗。在治疗期结束时，处死小鼠并从股骨和胫骨收集骨髓。在去除肌肉和结缔组织后，从骨骼中提取细胞后，制成单细胞悬液。
为了确定尿石素A处理对造血系统不同祖细胞的影响，使用流式细胞仪确定每种祖细胞类型的数量和百分比。流式细胞术允许选择和定量在其细胞表面具有不同蛋白质表达模式的细胞。使用标记的单克隆抗体，可以根据其细胞表面蛋白表达鉴定出不同的祖细胞群。为了分离含有祖细胞群的未分化细胞，用针对多种分化细胞类型特异的细胞表面蛋白的单克隆抗体混合物对骨髓细胞进行染色。这些蛋白质的抗体(也称为谱系标记物)是CD3e(17A2)、CD4(GK1.5)、CD8a(53.6.7)、CD11b(M1/70)、CD19(1D3)、Gr1(RB6.8C5)、Ter119和NK1.1(PK136)，这些与Alexa 647偶联[Alexa Fluor 647染料是一种明亮的远红色荧光染料，例如在荧光显微镜中用作标记]。为了区分各种谱系祖细胞群，用抗下列祖细胞表面蛋白标记物的单克隆抗体对分离的骨髓细胞进行染色，所述祖细胞表面蛋白标记物含有以下标记CD34(RAM 34)-FITC；CD135(Flt3A2F10)-PE；CD48(HM48.1)-生物素+PE德州红链霉亲和素；CD117(ckit2B8)PerCp-Cy5.5；Sca1(D7)-PE-Cy7。在Becton Dickson流式细胞仪(Franklin Lake,NJ,USA)上进行染色细胞的细胞分析，并使用FlowjoTM软件(用于单细胞流式细胞仪分析的分析平台)分析收集的数据。从接受尿石素A处理的三只小鼠和六只未处理的对照小鼠中分离出骨髓。
为了鉴定分离的骨髓细胞中存在的造血祖细胞的不同群体，基于分离的骨髓细胞的细胞表面标记物组合选择它们。采用所谓的门控策略，其中基于细胞表面蛋白表达的模式选择(门控)特定的细胞群体，然后进一步检查该亚选择的群体的细胞表面蛋白表达。图2和3展示了在所有检查的样品上采用的门控策略的实例。通过选择对上述分化细胞(谱系标记物)上发现的细胞表面蛋白呈阴性的细胞来检查不活跃祖细胞(图2B)。从该谱系阴性细胞群体中，选择对细胞表面标志物CD117(c-kit)和Sca1染色呈阳性的细胞。谱系阴性、CD117和Sca1阳性细胞(LKS细胞)的这一亚群包含祖干细胞(图2C)。图2C显示，在接受尿石素A治疗的老年动物中，谱系阴性细胞中存在的LKS祖细胞数量显著增加，从对照治疗的老年小鼠的3.16％增至接受尿石素A治疗的老年小鼠的5.27％。
LKS细胞可以进一步分为四种不同的祖细胞类型，HSC(LT-HSC)、MPP 1(ST-HSC)、MPP2和MPP3或LMPP，并且具有降低的静态水平(图1B)。静态和不活跃性最强的细胞是HSC细胞。为了在LKS细胞中区分这些细胞群，检查了细胞的CD150和CD48表达。最原始的静态细胞群体HSC+MPP1对于CD150的细胞表面标记物为阳性，而对于细胞表面标记物CD48为阴性。如图3(第1组图表)所示，在该实施例中，尿石素A处理导致该群体的显著增加，在治疗的动物中，有61.7％的LKS细胞是HSC+MPP1细胞，而在未经治疗的动物中是53.1％。与未治疗的小鼠(n＝5)相比，在所有用尿石素A治疗的动物(n＝3)中都是这种情况，并且该祖细胞群的增加具有统计学意义(表2)。HSC+MPP1祖细胞是能够重构所有不同血细胞谱系群的干细胞。HSC+MPP1祖细胞可进一步细分为两种不同类型的造血干细胞，即长期更新群(HSC或LT-HSC)，其进入细胞循环的频率较低，并能维持干细胞种群，以及另一群MPP1或ST-HSC，其循环更频繁，并负责维持血细胞谱系。可以通过选择(门控)HSC+MPP1细胞并检查这些细胞的细胞表面标记物CD34表达来区分这两个种群。最原始的干细胞群体HSC或LT-HSC不表达CD34(图1B)。如图3(第二组图表)所示，尿石素A处理可使老年动物中的为HSC的HSC+MPP1细胞的百分比从73.8％增加到81.7％。重要的是，最原始干细胞群体的这种增加导致后肢中存在的HSC最终总数(以占骨髓细胞总数的百分比以及细胞数表示)的增加更为明显，如图4所示，与未治疗的老年动物相比，接受尿石素A治疗的老年动物的HSC细胞数量显著增加。
表2
Figure BDA0002871967200000511
实施例4：临床前实验，以评估施用尿石素A后响应于疫苗接种的抗体效价的改善
实验大纲
成年雌性BALB/c被随机分配到实验组中，并使其适应环境一周。从第0天起，根据下面的时间表通过食物掺和物施用给动物。在第0、14和28天进行PR8抗原的肌内(i.m.)攻击。从第0天开始，每天监测动物的非特异性临床体征。从第0天开始，每周对动物称重三次。在第28天，收集血液样品以进行血凝抑制测定(HAI)，并处理以分离血清以分析抗体(针对PR8的总IgG)。
在第42天，解剖出脾脏，处理成单细胞悬液，并铺平板用于T细胞增殖测定。在存在或不存在PR8(抗原)的情况下，将细胞一式三份孵育或与阳性对照孵育。在有或没有UA/媒介物的情况下，将用媒介物(下表中的第1组)处理的小鼠的脾脏(体内免疫细胞的系统性贮存库)收集的离体免疫细胞刺激24小时，以观察细胞增殖。细胞增殖是该体外测定法中主要的读数，用于评估免疫反应的增强，并通过氚化胸腺嘧啶掺入进行定量。储存细胞培养上清液以通过多重分析细胞因子。
施用方案
所有组均为n＝12
Figure BDA0002871967200000521
n/a：不适用；PO：饮食中施用；PR8：抗原；IM：肌内
实施例5：2期临床实验，以评估施用尿石素A后响应于流感疫苗接种的抗体效价的改善
进行了2期试验，以评估响应于流感疫苗接种尿石素A对老年人中抗体效价的影响。该方案的总结如图2所示。
按照以下主要纳入标准招募患者进入试验：
1)65-90岁
2)两种性别(男性和女性)
3)体重指数(BMI)在18.5-30kg/m2之间；和
4)给予知情同意并完成试验及其随访的能力。
招募符合以下主要排除标准的患者：
1)计划在本试验期内参加另一项研究疫苗或药物的临床试验。
2)在试验期之前的4周内接收了任何疫苗。
3)在试验疫苗接种期之前的6个月内接收了流感疫苗。
4)前一年内已知或怀疑的先天性或获得性免疫缺陷，或接受了免疫抑制疗法，例如抗癌化学疗法或放射疗法。
5)对鸡蛋、鸡肉蛋白或任何疫苗成分的全身超敏反应。
6)目前饮酒或吸毒。
7)研究者认为，慢性病处于可能干扰试验进行或完成的阶段。
8)患有听觉或视觉障碍。
9)诊断为严重认知障碍(MMSE<18)或严重抑郁。
10)进行性神经退行性神经疾病：例如阿尔茨海默氏病。
11)过去6周内入院。
12)自我报告的血小板减少症，禁忌肌肉内接种
13)疫苗接种前3周出现出血性疾病或接受抗凝剂，根据研究者的判断，禁止肌肉内接种。
临床试验方案
在双盲、随机和安慰剂对照的临床试验中，将评估UA在衰老过程中增强免疫健康以改善疫苗接种反应的作用。该研究的主要结果是，在UA治疗的老年组中，与在安慰剂治疗组中接种的相比，主要流感毒株(H1N1、H3N2和乙型)的疫苗接种后抗体几何平均效价(GMT)在统计学上更高的倍数变化/血清转化。根据上述纳入和排除标准筛选健康的老年人，并随机分为安慰剂组(n＝45-75名受试者)或接受尿石素A的活性组(n＝45-75名受试者)。例如，安慰剂和尿石素A会是软胶囊形式。随机分组后，受试者将接受总共四周的干预。在接受安慰剂或积极治疗的四周干预后，所有受试者均将具有血清中评估的疫苗接种前抗体效价和免疫健康状况。随后，受试者将接受流感疫苗的攻击，并在第3和6周时在这些时间点收集的血清中再次评估流感疫苗的抗体效价。如图1所示进行临床试验的设计。
临床试验终点
该临床试验的主要终点是将安慰剂与UA治疗相比时，血清转化率的接种后倍数变化(即通过血凝抑制(HAI)三种主要强毒流感病毒株H1N1、H3N2和乙型评估的抗体应答的几何平均效价)。当例如与血清转化率可在15-30％的范围内的安慰剂处理的老年组相比时，与安慰剂组相比的UA治疗的预期血清转化率变化可以在40-60％的范围内。与安慰剂干预相比，UA治疗的老年受试者中主要流感病毒株的几何平均效价可以高例如1.5至2倍。
主要的次要终点可以包括血清保护(不受流感侵袭的发生率)和细胞T细胞记忆反应(细胞因子、T细胞记忆)。
实施例6：临床前实验，以评估施用尿石素A后抗炎特性的改善
将尿石素A与AIN-93G生长啮齿动物饮食(Research Diet，New Brunswick，NJ，美国)混合，浓度为0.5g/kg饮食，相当于50mg/kg/天的剂量。将具有或不具有UA的粒料给予22个月大的雄性C57BL/6J小鼠(Janvier，Saint Berthevin，法国)，持续6周。分别总共圈养32只小鼠，并根据它们的运动能力随机分为每组16只动物。实验过程中自发死亡的动物被排除在计算之外。在开始实验之前建立这些标准。空腹过夜后经过6周的治疗，对动物实施安乐死，然后通过腔静脉收集血样。将血样以1500xg离心15分钟，然后将血浆上清液转移到干净的试管中。使用MILLIPLEX MAP小鼠细胞因子/趋化因子磁珠板(MCYTOMAG-70K)分析血浆中的细胞因子。
图6显示了白介素10(IL-10)、白介素12亚基β(也称为IL-12)(p40)和IL-10/IL-12之比(p40)的结果。IL-10是重要的抗炎细胞因子(Fiorentino DF,et al.,IL-10inhibitscytokine production by activated macrophages.J Immunol.1991年12月1日；147(11):3815-22；Fiorentino DF et al.,IL-10 acts on the antigen-presenting cell toinhibit cytokine production by Th1 cells.J Immunol.1991年5月15；146(10):3444-51)。白细胞介素12(IL-12)是一种有效的促炎细胞因子，其增强T淋巴细胞和静止的自然杀伤细胞的细胞毒活性。如图6所示，IL-10与IL-12(p40)的比率有显著增加。该结果表明，对老年小鼠进行UA治疗能够减少所谓的炎性衰老(Daniela Frasca和BonnieB.Blomberg.Inflammageing decreases adaptive and innate immune responses inmice and humans.Biogerontology.2016；Franceschi C et al.,Inflammageing:a newimmune–metabolic viewpoint for age-related diseases.Nature ReviewsEndocrinology 2018)，这是通过将细胞因子特性移向更抗炎的表型。
实施例7：临床前实验以评估用尿石素A改善毛发再生
毛发在毛囊中形成，毛囊是高度增殖的组织，这归因于干细胞的不断更新及其进一步分化。这些动力学机制需要非常高的生物能能力，因此越来越多的证据表明线粒体在此过程中的作用，特别是在分化阶段(Kloepper,J.E.et al.J.Invest.Dermatol.135,679–689(2015))。源自人囊泡的人干细胞主要依靠有氧糖酵解来产生能量(Kealey,WilliamsR,P.M.Ski.Pharmacol.7,41–46(1994))，然而在分化时，它们转向完全取决于线粒体功能的氧化磷酸化(OXPHOS)(Tang,Y.et al.PeerJ 4,e1821(2016)；Hamanaka,R.B.etal.Sci.Signal.6,(2014))。
本研究使用C57BL6/J雄性3个月大的小鼠。处于毛发生长期的背侧皮肤毛被小心地脱毛。有关毛发阶段鉴定的更多详细信息，请参见Müller-
Figure BDA0002871967200000562
S.et al.Acomprehensive guide for the accurate classification of murine hair folliclesin distinct hair cycle stages.J.Invest.Dermatol.117，3-15(2001)。将动物随机分为三个不同的实验组。脱毛后一天，每天将100μl安慰剂对照、UA浓度1和UA浓度2施加到目标区域(预先确定合适的UA制剂)。为了量化毛发生长的程度，每天对小鼠背部的区域进行成像，并使用NIH ImageJ软件进行进一步分析(https://imagej.nih.gov/ij/)。考虑到小鼠皮肤的背景色来测量该区域的色素沉着水平。治疗0、7、15和30天后处死小鼠。收集皮肤，将其放置在具有最佳切割温度(OCT)化合物的低温模具中，并冷冻在-80℃以进行进一步的组织学分析。
为了分析毛囊再生的周期，使用低温恒温器将冷冻的皮肤切片纵向切片，并用苏木精和曙红染色。在奥林巴斯显微镜上采集图像。为了量化毛发周期，根据指南对每只小鼠的单个毛囊进行了分类(Müller-
Figure BDA0002871967200000561
S.et al.A comprehensive guide for theaccurate classification of murine hair follicles in distinct hair cyclestages.J.Invest.Dermatol.117，3-15(2001))。在每组中计算特定毛发生长阶段的毛囊百分比。在每只小鼠的切片中计数相同区域的毛囊。另外，对相同区域的毛囊总数进行定量。
实施例8a：在体内测试尿石素A增加肌肉干细胞数量的能力。
为了测试UA增加肌肉干细胞数量的能力，使用了肌肉变性的小鼠模型，包括但不限于肌肉萎缩、肌肉营养不良和其他神经肌肉退行性疾病的模型，例如在下表中更详细描述的模型。
Figure BDA0002871967200000571
用具有或不具有UA的标准饮食喂养小鼠，剂量在10mpk/d至250mpk/d之间。每种病状下的动物数量和治疗持续时间取决于所使用的模型。实验结束时，对小鼠实施安乐死并收集肌肉并用II型胶原酶(Sigma)和胶原酶/分散酶(Roche)消化。然后通过细胞过滤器过滤肌肉浆液，洗涤分离的细胞，并用抗体染色，其包括MuSC(肌肉干细胞)标记CD31(1：800，eBioscience，偶联eFluor450)；CD45(1：200，eBioscience，偶联eFluor450)；Sca-1(1：1000，eBioscience，偶联PE-Cy7)；和VCAM-1(1：200，MBL)，在4℃下持续40分钟。二次染色用碘化丙锭(PI，Sigma)进行。使用FACSAria II仪器(BD Biosciences)分析并分选染色的细胞。肌肉干细胞定义为CD31阴性、CD45阴性、SCA阴性、VCAM阳性肌肉干细胞。通过前向散射、侧向散射和PI，门控排除碎片和死细胞。
实施例8b：在体内测试尿石素A增加年老小鼠中肌肉干细胞数量
给中老年和老年雄性C57BL/6小鼠喂以有或没有UA的标准饲料饮食，并按实施例8a所述评估肌肉干细胞数。
实施例8c：离体测试尿石素A增加肌肉干细胞数量
在胶原酶溶液中分离、洗涤和消化来自C57BL/10ScSn-DmdmdxJ小鼠和20个月大的雄性C57BL/6小鼠的肌肉。单个肌纤维使用玻璃移液器释放，并用DMSO或UA处理(终浓度为5μM和100μM之间)不同的时间范围，并针对肌肉干细胞标记进行染色。显微镜图像通过共聚焦显微镜获得并使用ImageJ软件确定每条肌纤维的肌肉干细胞数量。
实施例9：离体测试尿石素A增加内部毛祖细胞的数量
在Hank平衡盐溶液(HBSS)中解剖新生小鼠(出生后的第1-3天)的耳蜗，并将柯蒂氏器(感觉上皮)的器官与血管纹(离子转运上皮)和蜗轴(神经组织)分开。然后用细胞恢复溶液(Corning)处理柯蒂氏器器官1小时，以将耳蜗上皮与下面的间充质分开。然后收集上皮细胞，并在37℃下用TrypLE(Life Technologies)处理15–20分钟。将通过机械研磨获得的单细胞过滤(40mm)，并悬浮在Matrigel(Corning)圆顶中进行3D培养。将细胞浸入DMEM和F12的无血清1：1混合物中，并补充Glutamax(GIBCO)、N2、B27(Invitrogen)、EGF(50ng/mL；Chemicon)、bFGF(50ng/mL；Chemicon)、IGF-1(50ng/mL；Chemicon)和DMSO或UA。每隔一天更换一次培养基。
为了区分干细胞集落，将扩增培养基去除，并将集落保留在3D培养物中。补充了Glutamax(GIBCO)、N2和B27(Invitrogen)和DMSO或UA的DMEM和F12的无血清1：1混合物用于测试化合物对分化的影响。
为了评估UA对内部毛祖细胞增殖的影响，在多种条件下在培养物中10天后，对Lgr5阳性的细胞进行定量。使用TrypLE(GIBCO)将细胞集落解离为单个细胞。用血细胞计数器进行细胞计数。然后将细胞用碘化丙啶(PI)染色，并使用流式细胞仪分析Lgr5表达。
为了量化毛细胞产生并评估UA对内部毛祖细胞分化的影响，在分化处理的第0天和第10天对Atoh1阳性的细胞进行定量。将细胞集落在细胞回收液(Corning)中孵育，以从Matrigel中释放集落，并使用TrypLE将其解离为单个细胞。通过FACS定量Atoh1+细胞的总数和百分比。
实施例10.UA诱导神经干细胞增殖和分化。
几种中枢神经系统(CNS)疾病的特征是大脑特定区域的神经元丢失，因此，越来越有兴趣确定用功能神经元重新填充受损区域的治疗策略。一种有吸引力的方法是使用神经干细胞(NSC)。NSC是未分化的细胞，具有自我更新的能力，并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。这些细胞是CNS发育和成年大脑维持过程中的关键角色。NCS可以从哺乳动物的胚胎脑中分离出来，从而可以研究调节其增殖和分化为成熟神经元的策略(Marsh,S.E.&Blurton-Jones,M.Neurochem.Int.106,94–100(2017))。
增殖测定：为了评估UA对NSC增殖和分化的作用，使用了胚胎大鼠NSC。按照标准程序分离大鼠NSC(Zhenxian Han,Qian Xu,Changfu Li,H.Z.Genesis 55,(2017))。异氟烷过量后对Sprague-Dawley怀孕大鼠实施安乐死，并在妊娠第16天收集大鼠的胚胎脑。除去皮层，在Hank培养基(不含钙和镁)中机械解离，然后在1000rpm下离心10分钟。然后将沉淀重新悬浮在Dubelcco改良的Eagle培养基(DMEM)中。将培养物保持在补充有N2、EGF/BFGF(10ng/mL)和PDGF/NT3(5ng/mL)的DMEM/F12中。将NSC细胞以30000个细胞/孔的密度以96孔板形式铺板。
增殖测定：为了测试UA对NSC增殖的影响，使用了神经球形成测定。将细胞播种到培养基中，并在确定的处理方法后，用特异性标记增殖细胞的Ki-67抗体对神经球进行染色。使用奥林巴斯显微镜获取图像，并以盲法定量Ki-67阳性细胞的数量。
分化测定：为了测定UA对NSC分化为神经元的作用，将细胞接种在6孔板中。UA处理后，将细胞用针对神经元标记Tuj-1的抗体染色，然后添加第二抗体。使用奥林巴斯显微镜获取图像，并以盲法对Tuj-1阳性细胞的数量进行定量。

Claims (37)

1.式(I)化合物
Figure FDA0002871967190000011
其中：
A、B、C、D、W、X、Y和Z各自独立地选自H和OH；
或其盐；
其用于在人或动物受试者中(i)提高对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大对抗原的免疫反应。
2.根据权利要求1所述的式(I)化合物，其用于改善人或动物受试者的免疫功能和/或免疫健康的方法中。
3.根据权利要求1所述使用的化合物，其中所述免疫反应是对人或动物受试者的疫苗接种的反应。
4.根据权利要求1或权利要求3所述使用的化合物，其中增强的免疫反应包括抗体血清转化的改善。
5.根据权利要求1或3或4中任一项所述使用的化合物，其中增强的免疫反应包括免疫细胞应答的改善。
6.根据权利要求5所述使用的化合物，其中所述免疫细胞选自以下的一种或多种：CD4T细胞、CD8 T细胞、树突状细胞、巨噬细胞、自然杀伤(NK)细胞和B细胞。
7.根据权利要求3至5中任一项所述的化合物，其中所述疫苗接种针对病原细菌或病原病毒或癌症。
8.根据权利要求7所述使用的化合物，其中所述疫苗接种针对流感、水痘、白喉、脑膜炎球菌、麻疹、腮腺炎、百日咳、肺炎球菌、小儿麻痹症、风疹、破伤风、肺结核、伤寒和/或黄热病。
9.根据权利要求8所述使用的化合物，其中所述疫苗接种针对流感。
10.根据权利要求9所述使用的化合物，其中所述流感病毒株选自H1N1、H3N2和B。
11.根据权利要求3至10中任一项所述使用的化合物，其中所述疫苗包含减毒病毒。
12.根据权利要求3至11中任一项所述使用的化合物，其中所述疫苗接种的受试者是老年人或儿童。
13.根据权利要求12所述使用的化合物，其中所述老年人为60岁或更老。
14.根据权利要求2至13中任一项所述使用的化合物，其中所述受试者是免疫受损的。
15.根据权利要求14所述使用的化合物，其中所述免疫受损的受试者感染了HIV、肝炎和结核病或有感染HIV、肝炎和结核病的风险。
16.一种免疫增强剂，其包括：
(i)式(I)化合物
Figure FDA0002871967190000031
其中：
A、B、C、D、W、X、Y和Z各自独立地选自H和OH；或其盐；以及
(ii)一种或多种其他免疫增强剂组分。
17.根据权利要求16所述的免疫增强剂，其包含式(i)的化合物，其中A、C、D和Z独立地选自H和OH，并且B、W、X和Y都是H。
18.根据权利要求17所述的免疫增强剂，其中式(I)化合物选自尿石素A、尿石素B、尿石素C和尿石素D。
19.根据权利要求17所述的免疫增强剂，其中式(I)的化合物是尿石素A。
20.一种制备根据权利要求16-19所述的免疫增强剂的方法，包括将权利要求1所述的式(I)化合物与一种或多种其他免疫增强剂组分混合。
21.一种试剂盒，其包括：
(i)权利要求1所述的式(I)化合物；和
(ii)一种或多种其他免疫增强剂组分；和
(iii)可选地，疫苗。
22.一种试剂盒，其包括：
(i)权利要求1所述的式(I)化合物；和
(ii)疫苗以及
(iii)任选地一种或多种其他免疫增强剂组分。
23.一种在人或动物受试者中(i)提高对抗原的免疫反应和/或(ii)增强、调节或增大对抗原的免疫反应的方法，其包括施用有效量的式(I)化合物
Figure FDA0002871967190000041
其中：A、B、C、D、W、X、Y和Z各自独立地选自H和OH；
或其盐至人或动物受试者。
24.一种疫苗接种方法，其包括：
a)施用尿石素作为免疫增强剂；和
b)施用所述疫苗。
25.式(I)化合物
Figure FDA0002871967190000042
其中：
A、B、C、D、W、X、Y和Z各自独立地选自H和OH；
或其盐；
其用于调节干细胞功能的方法中。
26.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其中干细胞功能的调节是扩增干细胞数目和/或促进干细胞再生。
27.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其中干细胞功能的调节是防止、减小或减慢例如在衰老过程中的干细胞衰老。
28.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其中干细胞功能的调节是预防、减小或减缓炎性衰老。
29.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其中干细胞功能的调节是促进干细胞分化。
30.根据权利要求25至29中任一项所述的式(I)化合物，其中所述干细胞选自以下细胞中的一种或多种：多能干细胞、诱导性多能干细胞(iPS)、胚胎干细胞和成年干细胞。
31.根据权利要求25至29中任一项所述的式(I)化合物，其中所述干细胞选自以下细胞中的一种或多种：造血干细胞、肌肉干细胞、皮肤干细胞、肝干细胞、神经元干细胞、黑素细胞干细胞、毛囊干细胞、间充质干细胞、脂肪源干细胞、角膜缘干细胞(角膜干细胞)、心脏干细胞、肠干细胞、上皮干细胞、自体干细胞和同种异体干细胞。
32.根据权利要求25至29中任一项所述的式(I)化合物，其中所述干细胞选自CD34阴性的造血干细胞和CD34阳性的造血干细胞。
33.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其中所述干细胞功能的调节选自以下的一种或多种：
(i)促进肌肉干细胞扩增，例如，肌干细胞扩增的离体方法；
(ii)促进肌肉干细胞的再生能力；
(iii)促进毛囊干细胞再生；
(iv)促进毛囊干细胞分化；
(v)预防、抑制和/或逆转胰岛中β细胞更新速率的降低；
(vi)促进内耳毛祖细胞的扩增；和/或
(vii)防止、逆转或减缓衰老过程中的嗅觉下降。
34.根据权利要求25所述的式(I)的化合物，其用于增加功能性造血干细胞数目的方法中，例如，用于：
(i)在治疗和/或在供体中收集骨髓之前；
(ii)在放射线后和/或骨髓移植后的治疗；
(iii)治疗化学疗法的细胞毒性作用；
(iv)治疗和/或预防化疗导致的骨髓抑制。
35.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其用于治疗或预防贫血的方法中。
36.根据权利要求25所述的式(I)化合物，其用于(i)预防、抑制或减缓身体脱发和/或秃发；(ii)促进和/或改善头发的生长；和/或(iii)促进和/或改善移植后的头发生长的方法中。
37.式(I)化合物，其用于在返回患者用于随后的再生治疗之前体外扩增干细胞中。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113813255A (zh) * 2021-10-20 2021-12-21 山东大学 尿石素a及其衍生物在肿瘤免疫治疗的应用

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3787615A1 (en) 2018-04-30 2021-03-10 Amazentis SA Urolithin a as immune enhancer
US20240000747A1 (en) * 2020-11-26 2024-01-04 Daicel Corporation Sirtuin 6 activator
US11820751B2 (en) 2021-01-27 2023-11-21 Vandria Sa Urolithin derivatives and methods of use thereof
US20240228966A1 (en) * 2021-05-05 2024-07-11 Societe Des Produits Nestle S.A. Urolithin for increasing stem cell function
GB202219317D0 (en) * 2022-12-20 2023-02-01 Amazentis Sa Methods for improving mitophagy in subjects

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105142632A (zh) * 2012-06-27 2015-12-09 阿马曾提斯公司 通过投予尿石素或其前体增强自噬或增加寿命
US20170304263A1 (en) * 2016-04-20 2017-10-26 John Michael Pezzuto Antioxidative stress compositions, methods of preparing and uses thereof
CN107427488A (zh) * 2014-12-19 2017-12-01 光环生命科学有限公司 鞣花酸二水合物在食品和保健品中的用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2068864B1 (en) 2006-04-26 2017-08-23 The Regents of the University of California Therapeutic uses of urolithins
WO2015100213A2 (en) 2013-12-23 2015-07-02 Amazentis Sa Process-scale synthesis of urolithins
EP3787615A1 (en) 2018-04-30 2021-03-10 Amazentis SA Urolithin a as immune enhancer

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105142632A (zh) * 2012-06-27 2015-12-09 阿马曾提斯公司 通过投予尿石素或其前体增强自噬或增加寿命
CN107427488A (zh) * 2014-12-19 2017-12-01 光环生命科学有限公司 鞣花酸二水合物在食品和保健品中的用途
US20170304263A1 (en) * 2016-04-20 2017-10-26 John Michael Pezzuto Antioxidative stress compositions, methods of preparing and uses thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FRANCISCO A. TOMA´S-BARBERA´N ET AL.: ""Urolithins, the rescue of "old" metabolites to understand a "new" concept: Metabotypes as a nexus among phenolic metabolism, microbiota dysbiosis, and host health status"", vol. 61, no. 1, pages 1 - 35 *
HANLIN ZHANG ET AL.: ""Autophagy andImmune Senescence"", 《TRENDS IN MOLECULAR MEDICINE》, vol. 22, no. 8, pages 1 - 16 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113813255A (zh) * 2021-10-20 2021-12-21 山东大学 尿石素a及其衍生物在肿瘤免疫治疗的应用
CN113813255B (zh) * 2021-10-20 2023-09-01 山东大学 尿石素a及其衍生物在肿瘤免疫治疗的应用

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