CN112493487B - 一种增强人体免疫力的组合物及其制备方法和保健品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物包括如下组分：螺旋藻肽聚糖、羊胎盘多肽、人参多糖、灵芝多糖和桑黄多糖。本发明还提供上述组合物的制备方法，以及提供一种含有上述增强人体免疫力的组合物的保健品。本发明的增强人体免疫力的组合物，各组分产生了协同作用，具有良好的抗氧化、抗衰老性能、安全性高、生物利用度高、能够增强人体免疫力等优点，应用广泛，并且制备简单。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品领域，具体涉及一种具有增强人体免疫力的组合物及其制备方法、和包含该组合物的保健品。
背景技术
人体在增龄过程中表现出以身体退行性改变、功能减退以及代谢失调为特点的综合状态称为衰老。人体中含有多种内源性抗氧化酶和低分子抗氧化剂，它们能捕获危害人体的自由基，使机体内自由基的产生和消除处于一个动态平衡之中，使机体不受到伤害，避免人体的免疫力的低下。随着年龄的增长，人体内的超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶类的活性降低，清除体内的氧自由基的能力下降，浓度过高的氧自由基作用于核酸、蛋白质、细胞膜、酶类等造成不可逆细胞损伤，从而导致免疫力低下、机体生理性紊乱甚至是病理性的改变。
经研究发现，人参多糖、灵芝多糖和桑黄多糖具有抗疲劳提高免疫力，清除自由基、增强抗氧化能力，可以起到调节细胞和体液免疫功能。西方医学在抗肿瘤免疫研究中也发现，螺旋藻肽聚糖具有有激活抑癌基因，诱导肿瘤细胞凋亡，减少肿瘤组织新生血管的生成，抑制肿瘤生长和转移；提高抗氧化活性，减轻活性自由基对机体免疫系统的损伤，防止癌变。抑制癌细胞增生、转移、最终导致癌细胞凋亡等功效，具有较好的抗预防干预和抗肿瘤免疫功能。
人们对人参、灵芝及其他成分在食品或保健品中的应用有了一定的研究：
如，公开号为CN110237118A、发明名称为含烟酰胺单核苷酸的组合物在抗衰老药品、保健品的应用的中国发明专利申请文献，其公开了一种以质量份计，所述组合物的原料包括：1-10份烟酰胺单核苷酸、1-10份黄芪、1-10份人参、1-10份人参皂苷Rb1、1-10份辅酶Q10、1-10份葛根素、1-10份杜仲叶以及1-10份黄茂多糖；
又如，公开号为CN111035649A、发明名称为一种NMN GLP复配营养补充剂及其制备方法和应用的中国发明专利申请文献，其公开了一种NMN+GLP复配营养补充剂及其制备方法和应用，所述NMN+GLP复配营养补充剂由重量比例为20％-50％β-烟酰胺单核苷酸和50％-75％灵芝杂多糖组成。
上述组合物，在一定程度上具有提升免疫力和抗衰老的功能，但组分在组合物中主要发挥单一的功效、生物利用度方面仍有待改进。
发明内容
本发明的目的在于克服上述现有技术中不足，提供一种不同活性成分产生协同作用、互相促进、互相增效的组合；同时本发明还提供该组合物的制备方法和应用。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案实现：
一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物包括如下组分：螺旋藻肽聚糖、羊胎盘多肽、人参多糖、灵芝多糖和桑黄多糖。
本发明中，进一步优选的方案为，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖50-70％、羊胎盘多肽5-10％、人参多糖5-10％、灵芝多糖10-20％和桑黄多糖10-20％。
本发明中，进一步优选的方案为，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖50％、羊胎盘多肽10％、人参多糖10％、灵芝多糖10％和桑黄多糖20％。
本发明中，进一步优选的方案为，所述组合物为颗粒剂、片剂、胶囊剂、粉剂中的一种。
本发明还提供上述的增强人体免疫力的组合物的制备方法，包括如下步骤：按配方量称取各组分，混合均匀，即得。
本发明还提供上述的增强人体免疫力的组合物的一种应用，在保健食品中的用途，具体的在于提供一种保健品，所述保健食品包含上述抗氧化、抗衰老的组合物。
本发明中，进一步优选的方案为，所述保健食品中，所述增强人体免疫力的组合物的每日有效量为100-5000mg。
本发明中，进一步优选的方案为，所述保健食品中，所述增强人体免疫力的组合物的每日有效量为1000mg。
本发明中，进一步优选的方案为，所述保健食品还含有可接受的食品添加剂或可食用辅料。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：本发明的增强人体免疫力的组合物，各组分相互促进、产生了协同作用，能够有效提高血液、肝脏和大脑中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质的过氧化产物丙二醛(MDA)含量，并且其生物利用度高、易于吸收；并且本组合物中所采用的原料为药食同源的中药材，能够长期服用，安全性高；本发明的制备方法简单、易操作；本发明的组合物，安全性高、效果好，可以广泛的应用在食品、保健品等领域。
附图说明
图1为本发明的实验例1长期毒性试验中的给药组和对照组的大鼠体重、血液学指标数据图；
图2为本发明的实验例1长期毒性试验中大鼠的组脏器系数、血液生化指标数据图；A部分中，心脏系数、肾脏系数和肝脏系数的各柱形条从左至右均依次为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。
具体实施方式
下面，结合附图以及具体实施方式对本发明做进一步描述，需要说明的是，在不相冲突的前提下，以下描述的各实施例之间或各技术特征之间可以任意组合形成新的实施例。除特殊说明的之外，本实施例中所采用到的材料及设备均可从市场购得。具体的实施例是示例性的，仅用于解释本申请，而不能理解对本申请保护范围的限制。
一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物包括如下组分：螺旋藻肽聚糖、羊胎盘多肽、人参多糖、灵芝多糖和桑黄多糖。
螺旋藻肽聚糖，为螺旋藻细胞壁中的肽聚糖成分，具有激活抑癌基因，诱导肿瘤细胞凋亡，减少肿瘤组织新生血管的生成，抑制肿瘤生长和转移；提高抗氧化活性，减轻活性自由基对机体免疫系统的损伤，提高细胞免疫功能，具有干预细胞突变，提高人体抗肿瘤免疫功效。
羊胎盘多肽，是从羊胎盘的蛋白质经过水解得到的一系列肽链(短链氨基酸)的组合，具有“扶正补虚、养血填精、补肾壮阳、益气健脾”之功效，能够增强细胞免疫功能，提升淋巴细胞免疫识别多样性，增强人体抗病能力。
人参多糖，是将人参通过提取获得的多糖类物质，具有增强免疫力，促进造血，抗衰老，抗血栓，抗菌，抗炎，抗肿瘤等功能。
灵芝多糖，是多孔菌科灵芝属真菌菌丝体的次生代谢产物，存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中，能提高机体免疫力，加速血液微循环，提高血液供氧能力，降低机体静止状态下的无效耗氧量，消除体内自由基等功能。
桑黄多糖，来源于鲍氏层孔菌的多糖类物质，能够提高人体的免疫力，抵制细胞突变等功效。
本发明的增强人体免疫力的组合物中的各组分，可以通过市售途径获得，也可以通过现有的各种提取方式获得相应的成分，对于具体的提取方法，可以不做特别的限定。
本发明的增强人体免疫力的组合物，各成分复配在一起产生了协同作用，能够增强人体免疫力，具有良好的抗氧化、抗衰老效果，能够有效提高血液、肝脏和大脑中的超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及脂质的过氧化产物丙二醛(MDA)含量；生物利用度高、易于吸收，同时本组合物中所采用的原料为药食同源的中药材，能够长期服用，安全性高。
为了进一步提升免疫力、抗氧化、抗衰老的功能、以及进一步提高生物利用度，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖50-70％、羊胎盘多肽5-10％、人参多糖5-10％、灵芝多糖10-20％和桑黄多糖10-20％。
为了更进一步提升免疫力、抗氧化、抗衰老的功能、以及更进一步提高生物利用度，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖50％、羊胎盘多肽10％、人参多糖10％、灵芝多糖10％和桑黄多糖20％。
本发明的增强人体免疫力的组合物，可以通过各种剂型进行应用，具体的可以例举为颗粒剂、片剂、胶囊剂、粉剂等各种现有食品、药品或保健品的剂型，具体的可以根据实际需要选择合适的剂型。
对于本发明的增强人体免疫力的组合物的制备方法，可以根据具体的需要选择现有的方法进行制备，具体的可以例举的一种方法包括如下步骤：按配方量称取各组分，混合均匀，即得；后续可以根据需要，再继续选择现有的方法制成对应所需要的剂型。
本发明的增强人体免疫力的组合物，由于其良好的安全性和生物利用度，可以广泛的应用在食品、保健品和药品当中；具体的可以例举一种在保健品中的应用，该保健品包含上述增强人体免疫力的组合物，在施用频率和剂量方面可以不做严格的限制，考虑到成本和功效的统一和平衡，在该保健品中所述增强人体免疫力的组合物的每日有效量优选为100-5000mg，进一步优选的每日有效量为1000mg，这样能够做到功效最佳、成本最低；对应的，该保健食品可以根据具体的需要添加相应的添加剂、可食用辅料及其组合，对于添加量和添加物可以不做特别的限定，满足安全需要即可。
实施例1
一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖50％、羊胎盘多肽10％、人参多糖10％、灵芝多糖10％和桑黄多糖20％。
实施例2
一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖70％、羊胎盘多肽5％、人参多糖5％、灵芝多糖10％和桑黄多糖10％。
实施例3
一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖60％、羊胎盘多肽8％、人参多糖8％、灵芝多糖14％和桑黄多糖10％。
实施例4
一种增强人体免疫力的组合物，所述组合物由按照重量百分比的如下组分制成：螺旋藻肽聚糖55％、羊胎盘多肽9％、人参多糖6％、灵芝多糖14％和桑黄多糖16％。
本发明的实施例1-4，其制备方法均为：包括如下步骤，按配方量称取各组分，混合均匀，即得。
根据上述实施例1所得到的增强人体免疫力的组合物，对该组合物的安全性能、抗氧化、抗衰老等性能进行测试，具体的测试实验过程和方法参见下述实验例1-4，在实验例中，对应的“给药”、“药物组”等相关的描述并非是对实验对象真正的给予相关的药物，而是指给予本发明的增强人体免疫力的组合物。
实验例1-急性毒性试验
半数致死量(LD50)预试验：取清洁级昆明种小鼠20只，体质量(20.05±1.39)g，雌、雄各半，随机分为2组，每组10只。本组合物组(实施例1)按照可灌胃的最大浓度1.0g/mL、最大体积0.4mL灌胃给药1次(相当于成人临床用量的500倍)，对照组给以等体积的生理盐水，连续观察7天发现。结果发现，7天内小鼠无任何异常，因此根据预试验结果不能测出半数致死量(LD50)，遂对增强人体免疫力的组合物进行最大耐受量试验。
最大耐受量试验：取清洁级昆明种小鼠40只，体质量(20.67±1.37)g，雌、雄各半，分为药物组(给予实施例1的组合物)和对照组，每组20只。药物组以药物的最高浓度(1.0g/mL)于24h内灌胃3次，每次给药0.4mL，间隔6h，给药总量为1.2g/d。空白对照组给以等体积的生理盐水。给药前12h和给药期间均禁食但不禁水，末次给药4h后正常喂养，每天称小鼠体重，观察7天。观察指标如下：小鼠的精神状态、活动变化、进食情况、粪便性状及小鼠死亡只数。如果发现有小鼠死亡，立即对死亡小鼠进行尸检，并肉眼观察重要脏器的病理形态学变化。
最大给药量试验结果显示，小鼠以最高浓度(1.0g/mL)于24h内灌胃3次本发明的增强人体免疫力的组合物(实施例1的组合物)后，小鼠精神状态良好，毛色光亮，饮水摄食正常，给药前、后小鼠体质量均与对照组无统计学差异，表明本发明的增强人体免疫力的组合物粒对小鼠无急性毒性。具体见下表1：
表1：最大给药量试验小鼠体质量(g)
实验例2-长期毒性试验
取Wistar大鼠40只，体质量(128.77±4.38)g，雌、雄各半，分为高、中、低3个剂量组和1个对照组，每组10只。剂量组浓度分别为1.0、0.5、0.25g/mL，给药量为2mL，每天1次，连续灌胃给药30d。整个试验期间，每天观察并记录大鼠一般行为表现及死亡情况，每周称量大鼠体质量1次，30d后检测动物体重、血液学及血清生化指标、脏器质量等指标综合评价药物的毒性情况。
结果显示：大鼠给药后30天，给药组(给予实施例1的组合物)大鼠体重、血液学指标(白细胞、红细胞、血小板)与对照组均无显著差别(参见图1)。30天后处死大鼠，解剖未发现有明显的脏器病变，各组脏器系数无明显差异(参见图2中的2A区域)。大鼠给药30天后各组间血液生化指标(AST、ALT、Crea、Urea)无显著性差异(参见图2中的2B-2E区域)血清生化指标，结果表明长期用药安全。
实验例3-增强免疫力、抗氧化、抗衰老活性的测定
SOD是体内清除氧自由基的关键酶，GSH-Px是机体内催化过氧化分解的酶，其活性可以反映出组织的抗氧化能力，是评价机体衰老的重要指标。MDA是脂质的过氧化产物，与机体内自由基的产生情况和机体组织细胞的脂质过氧化程度密切相关，可反映出机体组织的氧化应激的损伤状态，也作为评价衰老的重要指标之一。
取Wistar大鼠90只，体质量(126.56±4.43)g，雌、雄各半，随机分为9组，每组10只。除空白对照组外，其余各组大鼠每天颈部皮下注射5％D-半乳糖120mg/kg造成衰老模型，在造模第13天起开始连续灌胃给药30d，各组给药体积均为2mL。具体灌胃给药成分及浓度如下：
末次给药后禁食不禁水24h，眼底取血，室温下静置待血液完全凝固后离心，分离血清备用。随后脱臼法处死大鼠，迅速分离肝脏和大脑组织，氯化钠溶液冲洗后制备10％组织匀浆，离心，分离得组织匀浆上清液备用。分别采用黄嘌呤氧化酶法、二硫代二硝基苯甲酸法和硫代巴比妥酸分光法测定血清、肝脏和大脑组织的SOD活性、GSH-Px活性和MDA含量，具体测试数值参见下表2-1至表2-3：
表2-1：大鼠的MDA含量测试数据表(单位：mmol/mL)
表2-2：大鼠的SOD活性值测试数据表(单位：U/mL)
表2-3：大鼠的GSH-Px活性值测试数据表(单位：U/mL)
结果表明，除了大脑中MDA含量外，实施例1-4组血清SOD活性、GSH-Px活性和MDA含量与空白对照组均没有统计学差异，表明本发明组合物能有效增强机体清除自由基的能力，减少组织细胞损伤的程度，指标基本能恢复至未进行衰老造模水平。实施例1组各指标数值上略优于实施例2-4组，差异没有统计学意义。研究还发现，无论是单纯的西方成分组合或传统成分组的抗氧化、抗衰老作用均不及实施例1-4组。西洋参组合组用西洋参替换了发明组合中的人参多糖，其SOD活性、GSH-Px活性均低于实施例1组(P<0.05)，MDA含量高于实施例1组(P<0.05)，说明本发明的组合方式最佳，更换其中的一种成分可能会降低其抗氧化、抗衰老效能。
实验例4-增强小鼠免疫力的测定
采用MTT法检测ConA诱导的大鼠淋巴细胞增殖转化功能，试验例3大鼠脱臼法处死后，剪取脾脏磨碎后过滤离心，每1份脾细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，一孔加入ConA液，另一孔作对照，置于5％CO2、37℃培养箱中培养72h。培养结束前4h，每孔吸取上清液，加入不含胎牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT溶液，继续培养4h后，加入酸性异丙醇，使紫色结晶完全溶解，然后分装到96孔培养板中，每孔作3个平行孔，用酶标仪以570nm波长测定光密度值(OD值)。以加ConA孔的OD值减去不加ConA孔的OD值表示淋巴细胞的增殖能力。
采用乳酸脱氢酶测定法检测NK细胞活性。实验前24h将YAC-1细胞(靶细胞)进行传代培养。试验例3大鼠处死取脾，磨碎后过滤离心，取底层细胞，加入灭菌注射用水和Hank’s液后离心。取靶细胞和效应细胞，加入96孔培养板中。靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液，靶细胞最大释放孔加靶细胞和2.5％Triton，上述各项均设三个平行孔，于培养箱中培养4h后离心。每孔吸取上清液加入LDH基质液，每孔加入HCL，用酶标仪在490nm波长处测定光密度值。
结果表明，实施例1-4组淋巴细胞增殖转化功能和NK细胞活性均明显高于模型对照组，表明本发明组合物能有效逆转D-半乳糖所致的衰老，并提升大鼠的免疫力。实施例1组各指标数值上略优于实施例2-4组，明显高于单纯的西方成分组合或传统成分组，说明本发明的组合方式最佳，更换其中的一种成分可能会降低其增强免疫的效能，具体结果参见表3。
表3：大鼠的淋巴细胞增殖转化功能和NK细胞活性测定
实验例5-抗氧化、抗衰老颗粒对人体的抗衰老作用
本实施例中，所使用的保健食品为胶囊剂，其中每粒胶囊剂所包含的主要成分的剂量如下：①本发明组：组分螺旋藻肽聚糖+羊胎盘多肽+人参多糖+灵芝多糖+桑黄多糖,(具体配比参见实施例1，总量1g)。②对照组：相同体积、重量的淀粉。
选取60名受试者随机分为2组，每组30人，分别服用本发明和对照物三个月，每晨一次，每次二粒胶囊，100-200mL的温开水送服。试验前后对每组的受试者睡眠质量、记忆力、免疫力、脸部气色、面部皮肤、脱发、食欲等6个方面进行主观测评，1分表示感受最不明显，5分表示感受最明显，结果参见表4：
表4增强人体免疫力的组合物对人体的抗衰老作用(n＝30，
)
结果表明，试验组的受试者在抗衰老的各个评测项目方面具明显优于对照组的评分。也就是说，相比于服用对照样品的受试者，服用本发明的受试者(试验组)在这些项目方面获得了改善效果，即反映了本发明的抗衰老制剂具有优异的抗衰老效果。
最后应说明的是：上述实施方式仅为本发明的优选实施例方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (8)
1.一种增强人体免疫力的组合物，其特征在于，所述组合物由如下重量百分比的组分制成：螺旋藻肽聚糖50-70％、羊胎盘多肽5-10％、人参多糖5-10％、灵芝多糖10-20％和桑黄多糖10-20％。
2.根据权利要求1所述的增强人体免疫力的组合物，其特征在于，所述组合物由如下重量百分比的组分制成：螺旋藻肽聚糖50％、羊胎盘多肽10％、人参多糖10％、灵芝多糖10％和桑黄多糖20％。
3.根据权利要求1所述的增强人体免疫力的组合物，其特征在于，所述组合物为颗粒剂、片剂、胶囊剂、粉剂中的一种。
4.一种根据权利要求1所述的增强人体免疫力的组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：按配方量称取各组分，混合均匀，即得。
5.一种保健食品，其特征在于：所述保健食品包含权利要求1所述的增强人体免疫力的组合物。
6.根据权利要求5所述的保健食品，其特征在于：增强人体免疫力的组合物的每日有效量为100-5000mg。
7.根据权利要求6所述的保健食品，其特征在于：增强人体免疫力的组合物的每日有效量为1000mg。
8.根据权利要求5所述的保健食品，其特征在于：所述保健食品还含有可接受的食品添加剂。
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