CN112369493A - 一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法 - Google Patents
一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112369493A CN112369493A CN202011169709.6A CN202011169709A CN112369493A CN 112369493 A CN112369493 A CN 112369493A CN 202011169709 A CN202011169709 A CN 202011169709A CN 112369493 A CN112369493 A CN 112369493A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dried scallop
- scallop
- antioxidant capacity
- improving
- dried
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000237509 Patinopecten sp. Species 0.000 title claims abstract description 101
- 235000020637 scallop Nutrition 0.000 title claims abstract description 101
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 38
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 title claims abstract description 31
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 title claims abstract description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 36
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 36
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 36
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 31
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 claims abstract description 30
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 25
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims abstract description 24
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims abstract description 19
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 230000036541 health Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 25
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 11
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 11
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 11
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 11
- 108010004032 Bromelains Proteins 0.000 claims description 10
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 claims description 10
- 235000019835 bromelain Nutrition 0.000 claims description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 10
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 claims description 10
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 241000007126 Codonopsis pilosula Species 0.000 claims description 6
- 235000003239 Guizotia abyssinica Nutrition 0.000 claims description 6
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 6
- 241001052560 Thallis Species 0.000 claims description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 6
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims description 5
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 5
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 5
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 claims description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 abstract description 6
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 abstract description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 2
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 abstract description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 abstract description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 abstract description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 abstract description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 18
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 14
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 3
- -1 ABTS free radical Chemical class 0.000 description 2
- 101800000068 Antioxidant peptide Proteins 0.000 description 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010013789 Dry throat Diseases 0.000 description 1
- 208000000616 Hemoptysis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014786 phosphorus Nutrition 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 235000014102 seafood Nutrition 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035922 thirst Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/04—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from fish or other sea animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/04—Animal proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
- A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
- A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P39/00—General protective or antinoxious agents
- A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，属于海洋生物技术领域。本发明以干贝为原料，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术，研制开发出高体外抗氧化能力的干贝多肽生物制品，其中混菌好氧发酵菌种主要包括黑曲霉和枯草芽孢杆菌。所得干贝多肽具有较强的抗氧化能力，提取液可根据应用途径做浓缩、吸附干燥、醇析或树脂纯化等处理，满足在保健、食品、医药等领域的高效利用。该工艺技术简单高效、所得产品抗氧化能力和自由基清除能力强，产品稳定性强，生产成本低，易于工业化规模生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，尤其是一种利用微生物协同发酵制备高抗氧化能力的干贝多肽生物制品，属于海洋生物技术领域。
背景技术
干贝即扇贝的干制品，其味道、色泽、形态与干贝、干贝不相上下。古人曰：“食后三日，犹觉鸡虾乏味。”可见干贝之鲜美非同一般。干贝富含蛋白质、碳水化合物、核黄素和钙、磷、铁等多种营养成分，蛋白质含量高达61.8％，为鸡肉、牛肉、鲜对虾的3倍。矿物质的含量远在鱼翅、燕窝之上。干贝含丰富的谷氨酸钠，味道极鲜。与新鲜扇贝相比，腥味大减。干贝具有滋阴补肾、和胃调中功能，能治疗头晕目眩、咽干口渴、虚痨咳血、脾胃虚弱等症，常食有助于降血压、降胆固醇、补益健身。据记载，干贝还具有抗癌、软化血管、防止动脉硬化等功效。
目前干贝作为海珍品深受广大消费者青睐，食用方式主要以即食和干制品为主，存在着一定的弊端，一是食用方式单一，缺乏干贝功能性强的活性提取物及其应用；二是烹制过或提取程中大量营养成分流失，影响功效；三是食用不便。因此，干贝营养保健品的开发既能充分发挥干贝的食效、药效功能，又便于消费者食用，顺应市场需求，具有较好的市场前景，这就对干贝工功能活性物质的提取提出了更高的要求。
现有技术中，关于干贝多肽及其在食品中的应用研究较少，如专利201610271264.X公开了一种扇贝抗氧化肽的制备方法，选用扇贝加工废弃物——扇贝外套膜及加工碎肉为主要原料，通过生物酶解技术制备抗氧化肽，在最优酶解条件下测定DPPH的清除率达到70.32％，所得产品可作为功能食品直接食用或作为附加材料添加到其他食品中，增强保健作用。比较上述文献可以发现，关于干贝多肽的制备多采用复合酶解法，缺少复合微生物发酵关键技术的应用，尤其是缺乏提高干贝多肽营养性的研究成为制约产业发展的关键瓶颈。
发明内容
为了克服上述现有技术的不足，满足干贝多肽高效提取及高抗氧化能力应用，本申请提供一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术，研制开发出高体外抗氧化能力的干贝多肽生物制品，满足保健、医疗、食品等领域对干贝多肽的应用需求，该工艺工艺简单高效、所得产品抗氧化能力和自由基清除能力强，生产成本低，易于工业化规模生产。
本发明通过下述技术方案实现上述技术效果：
一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于具体包括如下步骤：
(1)溶解：将干贝粉碎，加水搅拌至完全溶解；
(2)酶解：向溶解后的加入干贝蛋白质量比2～3％的复合蛋白酶，控温40～60℃条件下酶解4～8h；
(3)好氧发酵：向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比2～3％的复合微生物菌剂，在28～35℃条件下好氧发酵6～12h；
(4)厌氧发酵：好氧发酵结束后加入1～2％的乳酸杆菌粉，在28～35℃条件下厌氧发酵8～16h；
(5)过滤：进行粗过滤除去发酵菌体；
(6)灭酶：在100℃条件下灭酶10min；
(7)离心：以10000r/min速率离心分离，上清液即为干贝多肽提取液。
上述步骤(1)中最佳加水比例为干贝：水＝1:8。
优选的，在干贝溶解过程中加入干贝蛋白质量比2～3％的党参。
上述步骤(2)中所述复合蛋白酶为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶的组合，其质量比为2:1。
上述步骤(3)中所述复合微生物菌剂为黑曲霉和枯草芽孢杆菌的混合菌剂，其质量比组成为2:3。
上述步骤(3)中好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为0.1～ 0.2m3/m3.min，搅拌转速控制在30～60r/min。
黑曲霉的种子液的制备方法为：在无菌条件下，采用土豆培养基在35～ 40℃条件下培养24h，制得黑曲霉种子液，要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL。
上述枯草芽孢杆菌种子液制备方法为：在无菌条件下，采用LB培养基在 28～32℃条件下培养24h，制得液体枯草芽孢杆菌种子液，要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL。
本发明提供一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，所得干贝多肽具有较强的抗氧化能力，提取液可根据应用途径做浓缩、吸附干燥、醇析或树脂纯化等处理，满足在保健、食品、医药等领域的高效利用。
本发明提供一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，与现有技术相比，具有以下显著优势：
(1)本申请以干贝为原料，集成现代生物分离技术、生物酶解技术、混菌微生物发酵技术，显著提升了干贝抗氧化能力；尤为重要的是，本申请创造性的发现，在干贝蛋白溶解液中加入一定比例的党参可以显著提高酶解发酵法制备的干贝多肽的抗氧化能力，分析原因可能是补益类中草药能够促进微生物的发酵作用，且党参中的活性物质与干贝多肽产生复杂的化合反应，进一步提升产品的抗氧化能力；
(2)本申请利用好氧菌(黑曲霉、枯草芽孢杆菌)共同发酵干贝提取干贝多肽，充分利用微生物间的协同作用，提升干贝多肽的提取率和体外抗氧化能力，其中：黑曲霉在发酵过程中会产生各种降解细胞壁的酶类，使得更多的多肽等功能活性物质从细胞壁中释放出来，有利于提升干贝多肽的体外抗氧化能力；枯草芽孢杆菌在高温发酵过程中能够杀灭发酵液中的致病菌，并具有较强的产淀粉酶、蛋白酶等能力，可以将大分子淀粉、蛋白物质降解为微生物所利用；黑曲霉与枯草芽孢杆菌的协同作用显著提升了产品的抗氧化能力；
(3)，本发明采用乳酸杆菌进行厌氧发酵，提升了干贝多肽的稳定性，试验结果表明，在20～80℃范围内，温度和时间对干贝蛋白水解肽抗氧化性影响不大，当温度超过100℃时抗氧化性随着温度和时间的增加开始降低，稳定性高于目前报道的技术水平；
(4)采用液体发酵，提高了菌体的生长速率，缩短了发酵时间，提升了生产效率；发酵工艺条件温和，生产成本低，且易于规模化生产。
具体实施方式
在本申请中，黑曲霉和枯草芽孢杆菌的活化方法如下：
(1)黑曲霉种子液制备方法为：在无菌条件下，采用土豆培养基在35～40℃条件下培养24h，制得黑曲霉种子液，要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL；
(2)上述枯草芽孢杆菌种子液制备方法为：在无菌条件下，采用LB培养基在 28～32℃条件下培养24h，制得液体枯草芽孢杆菌种子液，要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL。
实施例1
一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，具体工艺步骤包括：
(1)溶解：将干贝粉碎，加水搅拌至完全溶解；加水比例为干贝：水＝1:8；
(2)酶解：向溶解后的加入干贝蛋白质量比3％的复合蛋白酶，控温40～60℃条件下酶解6h；所述复合蛋白酶为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶的组合，其质量比为 2:1；
(3)好氧发酵：向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比2％的复合微生物菌剂，在28～35℃条件下好氧发酵12h；所述复合微生物菌剂为黑曲霉和枯草芽孢杆菌的混合菌剂，其质量比组成为2:3；好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为 0.1～0.2m3/m3.min，搅拌转速控制在30～60r/min；
(4)厌氧发酵：好氧发酵结束后加入2％的乳酸杆菌粉，在28～35℃条件下厌氧发酵8h；
(5)过滤：进行粗过滤除去发酵菌体；
(6)灭酶：在100℃条件下灭酶10min；
(7)离心：以10000r/min速率离心分离，上清液即为干贝多肽提取液。
测定实施例1中干贝多肽提取液的抗氧化能力，其中·OH自由基清除率的测定参照邵秀芝等《食品化学试验》中所述方法；ABTS自由基清除率和DPPH 自由基清除率的测定参照林恋竹等《反应时间对DPPH法、ABTS法评价抗氧化性结果的影响》中所述方法；测定结果如下：
上述实验中对照1组为实施例1中不含好氧发酵工艺的干贝多肽产品；对照2 组为实施例1中好氧发酵中仅添加黑曲霉进行发酵后的干贝多肽产品，其余同实施例1；对照3组为实施例1中好氧发酵中仅添加枯草芽孢杆菌进行发酵后的干贝多肽产品，其余同实施例1。
实施例2
一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，具体工艺步骤包括：
(1)溶解：将干贝粉碎，加水搅拌至完全溶解，并加入干贝蛋白质量比2％的党参；加水比例为干贝：水＝1:8；
(2)酶解：向溶解后的加入干贝蛋白质量比3％的复合蛋白酶，控温40～60℃条件下酶解6h；所述复合蛋白酶为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶的组合，其质量比为 2:1；
(3)好氧发酵：向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比2％的复合微生物菌剂，在28～35℃条件下好氧发酵12h；所述复合微生物菌剂为黑曲霉和枯草芽孢杆菌的混合菌剂，其质量比组成为2:3；好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为 0.1～0.2m3/m3.min，搅拌转速控制在30～60r/min；
(4)厌氧发酵：好氧发酵结束后加入2％的乳酸杆菌粉，在28～35℃条件下厌氧发酵8h；
(5)过滤：进行粗过滤除去发酵菌体；
(6)灭酶：在100℃条件下灭酶10min；
(7)离心：以10000r/min速率离心分离，上清液即为干贝多肽提取液。
测定实施例2中干贝多肽提取液的抗氧化能力，测定方法同实施例1中所述的抗氧化性能测定方法。试验结果如下：
上述实验中对照1组为实施例2中不含好氧发酵的干贝多肽产品；对照2组为实施例2中好氧发酵中仅添加黑曲霉进行发酵后的干贝多肽产品，其余同实施例2；对照3组为实施例2中好氧发酵中仅添加枯草芽孢杆菌进行发酵后的干贝多肽产品，其余同实施例2。
实施例3
一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，具体工艺步骤包括：
(1)溶解：将干贝粉碎，加水搅拌至完全溶解，并加入干贝蛋白质量比3％的党参；加水比例为干贝：水＝1:8；
(2)酶解：向溶解后的加入干贝蛋白质量比3％的复合蛋白酶，控温40～60℃条件下酶解6h；所述复合蛋白酶为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶的组合，其质量比为 2:1；
(3)好氧发酵：向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比2％的复合微生物菌剂，在28～35℃条件下好氧发酵12h；所述复合微生物菌剂为黑曲霉和枯草芽孢杆菌的混合菌剂，其质量比组成为2:3；好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为 0.1～0.2m3/m3.min，搅拌转速控制在30～60r/min；
(4)厌氧发酵：好氧发酵结束后加入2％的乳酸杆菌粉，在28～35℃条件下厌氧发酵8h；
(5)过滤：进行粗过滤除去发酵菌体；
(6)灭酶：在100℃条件下灭酶10min；
(7)离心：以10000r/min速率离心分离，上清液即为干贝多肽提取液。
测定实施例3中干贝多肽提取液的抗氧化能力，测定方法同实施例1中所述的抗氧化性能测定方法。试验结果如下：
上述实验中对照1组为实施例3中不含好氧发酵的干贝多肽产品；对照2组为实施例3中好氧发酵中仅添加黑曲霉进行发酵后的干贝多肽产品，其余同实施例3；对照3组为实施例3中好氧发酵中仅添加枯草芽孢杆菌进行发酵后的干贝多肽产品，其余同实施例3。
以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对被发明进行了详细的说明，但对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而对这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于具体包括如下步骤：
溶解：将干贝粉碎，加水搅拌至完全溶解；
酶解：向溶解后的加入干贝蛋白质量比2～3%的复合蛋白酶，控温40～60℃条件下酶解4～8h；
好氧发酵：向酶解后的酶解液中加入酶解液质量比2～3%的复合微生物菌剂，在28～35℃条件下好氧发酵6～12h；
厌氧发酵：好氧发酵结束后加入1～2%的乳酸杆菌粉，在28～35℃条件下厌氧发酵8～16h；
过滤：进行粗过滤除去发酵菌体；
灭酶：在100℃条件下灭酶10min；
离心：以10000r/min速率离心分离，上清液即为干贝多肽提取液。
2.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述步骤（1）中最佳加水比例为干贝：水=1:8。
3.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述干贝溶解过程中加入干贝蛋白质量比2～3%的党参。
4.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述步骤（2）中所述复合蛋白酶为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶的组合，其质量比为2:1。
5.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述步骤（3）中所述复合微生物菌剂为黑曲霉和枯草芽孢杆菌的混合菌剂，其质量比组成为2:3。
6.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述步骤（3）中好氧发酵过程在发酵罐中进行时通风量为0.1～0.2m3/m3.min，搅拌转速控制在30～60r/min。
7.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述黑曲霉种子液制备方法为：在无菌条件下，采用土豆培养基在35～40℃条件下培养24h，制得黑曲霉种子液，要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL。
8.根据权利要求1所述的一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法，其特征在于所述枯草芽孢杆菌种子液制备方法为：在无菌条件下，采用LB培养基在28～32℃条件下培养24h，制得液体枯草芽孢杆菌种子液，要求种子液的有效活菌数≥109cfu/mL。
9.按权利要求1-8所述工艺制备的干贝多肽。
10.权利要求9所述干贝多肽在在保健、食品、医药中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011169709.6A CN112369493A (zh) | 2020-10-28 | 2020-10-28 | 一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011169709.6A CN112369493A (zh) | 2020-10-28 | 2020-10-28 | 一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112369493A true CN112369493A (zh) | 2021-02-19 |
Family
ID=74577318
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011169709.6A Pending CN112369493A (zh) | 2020-10-28 | 2020-10-28 | 一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112369493A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105821099A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-08-03 | 岭南师范学院 | 一种发酵法制备马氏珠母贝抗氧化多肽的工艺 |
| CN110628863A (zh) * | 2019-10-11 | 2019-12-31 | 杨庆利 | 一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺 |
| CN110663803A (zh) * | 2019-11-01 | 2020-01-10 | 付鹏磊 | 一种益脾健胃南极磷虾油多肽生物制品 |
-
2020
- 2020-10-28 CN CN202011169709.6A patent/CN112369493A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105821099A (zh) * | 2016-04-15 | 2016-08-03 | 岭南师范学院 | 一种发酵法制备马氏珠母贝抗氧化多肽的工艺 |
| CN110628863A (zh) * | 2019-10-11 | 2019-12-31 | 杨庆利 | 一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺 |
| CN110663803A (zh) * | 2019-11-01 | 2020-01-10 | 付鹏磊 | 一种益脾健胃南极磷虾油多肽生物制品 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108796017B (zh) | 牛骨肽及其酶解提取方法 | |
| CN102028091B (zh) | 一种纳豆菌发酵法制备低分子鱼肽的方法 | |
| CN114045227B (zh) | 一种改善低盐鱼露发酵品质的普拉扣动球菌发酵剂 | |
| CN109251954B (zh) | 一种海参多肽的生产方法 | |
| CN110628863A (zh) | 一种发酵酶解提高河豚鱼皮抗氧化能力的工艺 | |
| CN106993807A (zh) | 一种生姜酵素的制备方法 | |
| CN110495611A (zh) | 一种提高海参营养保健功效的工艺 | |
| CN110916177A (zh) | 一种通过酶酵耦合技术制备的海带酵素方法 | |
| CN103704830A (zh) | 纳豆菌发酵法制备低分子人参皂苷肽的方法 | |
| CN109568518B (zh) | 中药混合菌固体发酵的方法和所得到的发酵中药及其应用 | |
| CN110574930A (zh) | 一种高值化利用南极磷虾的新工艺 | |
| CN110663803A (zh) | 一种益脾健胃南极磷虾油多肽生物制品 | |
| CN102586378A (zh) | 一种从发酵虾头壳中提取物质的方法 | |
| CN103276038B (zh) | 一种试剂级蛋白胨的生产方法 | |
| CN105559087A (zh) | 一种含燕窝酸的益生菌产品及其制备方法 | |
| CN109628350B (zh) | 植物乳杆菌及其应用 | |
| CN110656151A (zh) | 一种提高海参补肾壮阳功效的方法 | |
| CN103224973A (zh) | 一种发酵虾头制备活性物质、甲壳素和有机酸钙的方法 | |
| CN112375799A (zh) | 一种提高鲍鱼生物制品抗氧化能力的方法 | |
| CN110574926A (zh) | 一种高值化利用无名葵的工艺 | |
| CN112369493A (zh) | 一种资源化利用干贝提高抗氧化能力的方法 | |
| CN115678797A (zh) | 戊糖片球菌sc009及其应用 | |
| CN105441297B (zh) | 一种葛根醋的制备方法 | |
| CN107674898A (zh) | 一种由维生素k2发酵液中提取蛋白质的方法 | |
| CN115211552B (zh) | 一种提高虾鳃酱营养成分的微生物加工方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210219 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |