CN112368000A - 含有在油脂中包含ed-71及其环氧体的油分分散体的药物组合物 - Google Patents

Abstract

根据本发明，提供一种包含ED‑71及其环氧体的药物组合物的制造方法，其包括制备包含(5Z，7E)‑(1R，2R，3R)‑2‑(3‑羟基丙氧基)‑9，10‑开环胆甾‑5，7，10(19)‑三烯‑1，3，25‑三醇(ED‑71)的油脂溶液和水溶性高分子的水溶液的水包油型乳化液的工序，此处，所述水溶性高分子选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中。

Description

含有在油脂中包含ED-71及其环氧体的油分分散体的药物组 合物

技术领域

本发明涉及在油脂中包含(5Z，7E)-(1R，2R，3R)-2-(3-羟基丙氧基)-9，10-开环胆甾-5，7，10(19)-三烯-1，3，25-三醇(以下也称作ED-71或化合物1)及(1R，2R，3R，5Z)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇(以下也称作ED-71环氧化物)的药物组合物及其制造方法、抑制ED-71的氧化或分解的方法等。

背景技术

ED-71(常用名：艾地骨化醇)是具有成骨作用的活性型维生素D₃的合成衍生物，作为口服给药的骨质疏松症治疗剂来制造、销售。

ED-71与其他维生素D衍生物同样地能够以软胶囊剂的形式来制剂化。专利文献1中公开过将ED-71的中链脂肪酸甘油三酯(以下也称作MCT)溶液封入明胶剂壳内而得的无缝软胶囊。另外，专利文献1中还公开过，通过向该溶液中添加dl-α-生育酚等抗氧化剂，可以抑制作为ED-71的分解物的速甾醇体(tachysterol form)及反式体的生成。

目前，软胶囊以外的作为ED-71制剂销售的制剂尚属未知。专利文献2中公开过能够应用于骨质疏松症的锶盐与维生素D衍生物的复合剂，作为维生素D衍生物的一例举出了艾地骨化醇。另外，专利文献2中记载，可以将该复合剂制成片剂。然而，该记载不过是一般性的作为片剂的记载，并未公开在ED-71制剂中配合锶盐以外的特定的添加剂时的效果。

专利文献3中记载过例如通过如下操作得到的1α-(OH)-D₃组合物，即，将1α-(OH)-D₃及聚乙烯基吡咯烷酮溶解于乙醇中后，添加无水乳糖，搅拌后，减压蒸馏除去乙醇，将所得的反应生成物进一步粉碎而得。

专利文献4中记载过包含ED-71的固体分散体(混合有固体的ED-71和固体的添加剂的组合物)及油分分散体(在赋形剂中分散有ED-71的油脂溶液的粒子的组合物)的药物组合物及其制造方法。

专利文献5中记载，通过使特定的维生素D₃衍生物与3-氯过氧苯甲酸反应，可以得到维生素D₃衍生物的7，8-环氧化物。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO2005/074943A1

专利文献2：CN102688249A

专利文献3：WO90/09796A

专利文献4：PCT/JP2017/047156(2018年7月5日、作为WO2018/124260公开)

专利文献5：日本特开昭58-216179号公报

发明内容

发明所要解决的问题

作为骨质疏松症治疗剂销售的EDIROL(注册商标)0.5μg胶囊及EDIROL 0.75μg胶囊仅有球形的软胶囊剂，要求开发出基于新的制剂的功能上优异的ED-71制剂。另外，存在有如下的有关使用性的需求，即，通过使球形的软胶囊剂为非球形而变得更易抓取，并且变得不易滚动。为了方便需要ED-71的给药的患者，要求开发出软胶囊以外的剂形的非球形的ED-71制剂。

本发明人等对于此种制剂开展了由使ED-71的油脂溶液的粒子分散于赋形剂中的油分分散体(oil dispersion)制造的制剂的开发，结果发现如下的问题，即，若使用直接用ED-71的油脂溶液制备的油分分散体，则无法制造品质充分的制剂。为了进一步解决该问题反复进行了研究，结果虽然得到将ED-71的油脂溶液的粒子利用特定的添加剂包覆的构思，然而发现了因所用的添加剂多而使ED-71的稳定性降低的新的问题。针对该新的问题，本发明人等发现，通过使用属于水溶性高分子的羟丙甲纤维素或羟丙基纤维素作为添加剂，能够制造品质充分的制剂(特别是片剂)(专利文献4)。

本发明是鉴于此种状况而完成的，其目的在于，提供包含ED-71的油分分散体的新型药物组合物及其制造方法。

用于解决问题的手段

本发明人等的新发现是，在制造包含ED-71的油分分散体的片剂的过程中，ED-71的极少一部分(百分之几以下)被转换为ED-71环氧化物。本发明人等基于该发现进一步反复研究，从而完成了本发明。

即，本发明更具体而言提供以下的[1]～[12]。

[1]一种制造方法，是包含ED-71及(1R，2R，3R，5Z)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇的药物组合物的制造方法，其包括：

制备包含ED-71的油脂溶液和水溶性高分子的水溶液的水包油型乳化液的工序、

使水包油型乳化液附着于或吸附于赋形剂的工序、以及

使水包油型乳化液干燥的工序，

此处，所述水溶性高分子选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中。

[2]根据[1]中记载的制造方法，其中，水包油型乳化液与赋形剂的重量比为1：4～1：20。

[3]根据[1]或[2]中记载的制造方法，其中，赋形剂选自糖或糖醇类中。

[4]根据[3]中记载的制造方法，其中，赋形剂为甘露醇。

[5]一种药物组合物，是包含ED-71及(1R，2R，3R，5Z)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇的药物组合物，

在赋形剂中或赋形剂的表面包含由包覆剂包覆了的粒子，所述包覆剂包含选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中的水溶性高分子，

该粒子包含ED-71的油脂溶液。

[6]根据[5]中记载的药物组合物，其中，赋形剂选自糖或糖醇类中。

[7]根据[6]中记载的药物组合物，其中，赋形剂为甘露醇。

[8]根据[5]～[7]中任一项记载的药物组合物，其为被HPMC膜包衣了的包衣片。

此外，本发明提供以下的[9]及[10]。

[9]一种制品，其中，[5]～[8]中任一项记载的药物组合物及脱氧剂以气密状态被封入包装形态内。

[10]根据[9]中记载的制品，其中，包装形态为瓶包装或枕式包装(pillowpackage)。

发明效果

根据本发明，可以在油分分散体中抑制由与添加剂的接触(配合变化)引起的ED-71的分解。另外，可以使用油分分散体来制造软胶囊以外的各种剂形的ED-71制剂。

附图说明

图1是制造包含ED-71的油分分散体的片剂的制造流程的示意图。

图2是表示将水溶性高分子的2％水溶液与中链脂肪酸甘油三酯混合时的乳化状态的照片。左起依次为HPMC、HPC、PVP、以及POVA-COAT。

图3是“[制造例]油分分散体片剂”中得到的片剂的利用液相色谱的分析结果。

图4是ED-71的紫外可见光谱。

图5是ED-71环氧化物(化合物2)的紫外可见光谱。

具体实施方式

本发明中，ED-71是下述式(I)、优选下述式(Ia)所示的化合物。

[化1]

ED-71例如可以依照日本特开平10-72432号中记载的方法，通过如下操作得到，即，以(1R，2R，3R)-2-(3-羟基丙氧基)-胆甾-5，7-二烯-1，3，25-三醇作为起始物质，在紫外线照射及热异构化反应后，利用反相HPLC纯化、浓缩后，用乙酸乙酯使之结晶化而得。

本发明中，ED-71环氧化物是下述式(II)所示的化合物。

[化2]

在ED-71环氧化物中，环氧部分(7及8位)的立构没有特别指定，然而这些立构受到特别指定的下述式(IIa)及(IIb)所示的化合物、以及它们被以任选的比例混合的下述式(IIc)所示的化合物也包含于ED-71环氧化物中。作为ED-71环氧化物，优选下述式(IIa)及(IIb)所示的化合物的任意者，即优选(1R，2R，3R，5Z，7ξ，8ξ)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇(以下也称作化合物2)。

化合物(II)、(IIa)、(IIb)及(IIc)中的14位的立构优选各自与化合物(Ia)相同。

[化3]

ED-71的油分分散体

包含ED-71及ED-71环氧化物的药物组合物及其制造方法

本发明涉及ED-71的油分分散体以及包含ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体。本说明书中，所谓ED-71的油分分散体，是指在赋形剂中分散有ED-71的油脂溶液的粒子的组合物。同样地，所谓包含ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体，是指在赋形剂中分散有包含ED-71及ED-71环氧化物的油脂的粒子的组合物。

本发明提供含有此种包含ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体的药物组合物。具体而言，提供一种药物组合物，是包含ED-71及ED-71环氧化物的药物组合物，其在赋形剂中或赋形剂的表面，包含由包覆剂包覆了的粒子，所述包覆剂包含选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中的水溶性高分子，该粒子包含ED-71及ED-71环氧化物的油脂溶液。

另外，本发明提供此种药物组合物的制造方法。具体而言，提供一种方法，是包含ED-71及ED-71环氧化物的药物组合物的制造方法，其包括(i)制备包含ED-71的油脂溶液和水溶性高分子的水溶液的水包油型乳化液的工序、(ii)使水包油型乳化液附着于或吸附于赋形剂的工序、以及(iii)使水包油型乳化液干燥的工序，此处，所述水溶性高分子选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中。根据该方法，在赋形剂中包含ED-71及ED-71环氧化物的油脂的粒子成为被水溶性高分子包覆了的状态，从而能够制造使用了ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体的制剂(特别是片剂)。需要说明的是，ED-71环氧化物在工序(i)的开始时不包含，或者即使包含也优选含量为0.1％以下的少量，主要在工序(iii)中，因ED-71的转换(氧化)而生成，包含于油脂中。在制剂领域中，使包含有效成分的油脂溶液向赋形剂浸渗的方法已经为人所知，然而如下的方法以往却不为人知，即，不是使用油脂溶液而是使用水包油型乳化液，另外在使水包油型乳化液附着于或吸附于赋形剂后使水包油型乳化液干燥，利用水层中的成分将油脂溶液包覆。

关于工序(i)，作为本发明中使用的油脂，可以举出中链脂肪酸甘油三酯(以下记作“MCT”)、三辛酸甘油酯、己酸、辛酸、癸酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、植物油等。此处，作为植物油，可以举出椰子油、橄榄油、菜籽油、花生油、玉米油、大豆油、棉籽油、葡萄籽油、红花油等。它们当中，优选不包含不饱和脂肪酸的MCT、三辛酸甘油酯、己酸、辛酸、或癸酸，特别优选MCT。

工序(i)中的油脂溶液中的ED-71的浓度可以根据作为对象的疾病或症状、给药方式、给药途径等适当地确定，例如为0.001～0.3重量％，优选为0.005～0.1重量％，更优选为0.01～0.05重量％。

在工序(i)中的油脂溶液中，可以还添加抗氧化剂。作为本发明中的抗氧化剂，例如可以举出亚硝酸盐(例如亚硝酸钠)、亚硫酸盐(例如亚硫酸钠、干燥亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠)、硫代硫酸盐(例如硫代硫酸钠)、α-硫代甘油(alpha thioglycerin)、1，3-丁二醇、巯基乙酸及其盐(例如巯基乙酸钠)、硫代苹果酸盐(例如硫代苹果酸钠)、硫脲、硫代乳酸、依地酸盐(例如依地酸钠)、二氯异氰脲酸盐(例如二氯异氰脲酸钾)、柠檬酸、半胱氨酸及其盐(例如盐酸半胱氨酸)、苯并三唑、2-巯基苯并咪唑、异抗坏血酸及其盐(例如异抗坏血酸钠)、抗坏血酸及其酯化合物(例如L-抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯)、磷脂(例如大豆卵磷脂)、金属螯合剂及其盐(例如乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸钙二钠、乙二胺四乙酸二钠)、酒石酸及其盐(例如罗谢尔盐)、多酚类(例如儿茶素)、谷胱甘肽、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、没食子酸丙酯、天然维生素E、生育酚乙酸酯、浓缩混合生育酚、生育酚同系物(例如d-α-生育酚、dl-α-生育酚、5，8-二甲基母育酚、7，8-二甲基母育酚、δ-甲基母育酚、5，7，8-三甲基生育三烯酚、5，8-二甲基生育三烯酚、7，8-二甲基生育三烯酚、8-甲基生育三烯酚)等。其中，优选生育酚乙酸酯、二丁基羟基甲苯、天然维生素E、dl-α-生育酚、d-α-生育酚、浓缩混合生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、L-抗坏血酸硬脂酸酯、丁基羟基苯甲醚、没食子酸丙酯，更优选dl-α-生育酚、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、或没食子酸丙酯，进一步优选dl-α-生育酚或二丁基羟基甲苯。

向油脂溶液中的抗氧化剂的添加量没有特别限定，通常可以使用能够作为抗氧化剂使用的最大使用量以下的量(例如医药品添加物事典(药事日报社，2000)中记载的批准先例的最大使用量以下、食品添加物法定文件(日本食品添加物协会，1999)中记载的使用制限量以下的量等)。

在优选的方式中，以0.01重量％以上(例如1重量％以上)且10重量％以下(例如5重量％以下)的浓度向油脂溶液中添加dl-α-生育酚。对于二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、没食子酸丙酯等的添加量，也与上述的dl-α-生育酚相同。

本发明中使用的包覆剂包含水溶性高分子。水溶性高分子选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中。若向ED-71的油脂溶液添加大量的添加剂，则会使ED-71的稳定性降低，而羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素不使ED-71的稳定性降低。另外，在使用了羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素的情况下，可以长期地维持水包油型乳化液的乳化状态。

此处，本发明的药物组合物中ED-71的稳定性不降低这一点可以如下确认，即，由本发明的药物组合物制造片剂，将其遮光并在40℃保存1、3、或6个月后，调查ED-71的残存率，从而进行确认。如下算出ED-71的残存率，即，用高效液相色谱法(测定波长265nm)对保存试样和初始试样测定ED-71和作为其异构体的前体(化学名：6Z-(1R，2R，3R)-2-(3-羟基丙氧基)-9，10-开环胆甾-5(10)，6，8(9)-三烯-1，3，25-三醇；本说明书中也称作Pre ED-71)的峰面积，利用以下的计算式算出。

ED-71的含量相对于标识量的比(％)＝(ED-71标准品的称取量/ED-71标准品中的ED-71峰面积合计)×初始试样或保存试样中的ED-71峰面积合计×(初始试样或保存试样整体的重量/测定中使用的试样的重量)/标识量×100

(ED-71峰面积合计＝ED-71峰面积+1.98×PreED-71的峰面积)

ED-71的残存率(％)＝保存试样中的ED-71的含量相对于标识量的比(％)/初始试样中的ED-71的含量相对于标识量的比(％)×100

需要说明的是，上述式中的各术语的含义如下所示。

·“标识量”：每1片的理论含量

·“ED-71标准品”：ED-71的原药

·“ED-71标准品的称取量/ED-71标准品中的ED-71峰面积合计”：每单位峰面积中的ED-71标准品的重量(用于由峰面积算出测定试样中的ED-71的含量的值)

羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素只要是制剂上可以接受的等级的物质即可。

本发明的羟丙甲纤维素例如可以作为商品名TC-5从信越化学工业购入。

另外，本发明中，所谓羟丙基纤维素(HPC)，是指以成分编号002303收载于医药品添加物事典2016(编辑：日本医药品添加物协会；发行：(株)药事日报社；ISBN978-4-8408-1329-7)中的羟丙基纤维素，是与以成分编号002440收载于该事典中的低置换度羟丙基纤维素不同的物质。本发明中使用的羟丙基纤维素中，摩尔置换度(MS)(表示HPC的重复单元(葡萄糖环)的羟基被置换为羟基丙氧基的比例)通常为2～3，优选为2.5～3，更优选为3。另一方面，低置换度羟丙基纤维素的摩尔置换度为0.2～0.4。本发明的羟丙基纤维素例如可以作为商品名Klucel从ISP JAPAN购入、以及作为商品名HYDROXY PROPYL CELLULOSE从日本曹达购入。

本发明的包覆剂可以包含水溶性高分子以外的添加剂，例如可以包含稳定剂、抗氧化剂。

工序(i)中的水溶液中的水溶性高分子的浓度可以根据ED-71的量适当地确定，例如为1～15重量％，优选为2～10重量％，更优选为3～6重量％，进一步优选为4～6重量％，更进一步优选为5～6重量％。工序(i)中的水溶液可以包含水溶性高分子以外的添加剂，例如可以包含稳定剂、抗氧化剂。

水包油型乳化液可以利用制剂领域中普遍使用的方法来制备，然而优选利用机械乳化法来制备。机械乳化法例如可以举出使用如下装置的方法，即，化学搅拌器、涡流混合器、均质混合机、均化器、Hydro Shear、胶体磨、射流混合器、超声波发生器、使用玻璃珠的湿式粉碎机、使用多孔膜的膜乳化机、使用电能的电动乳化装置等。作为均化器，例如可以使用T-50Ultra Turrax(IKA制)。

ED-71的油脂溶液与水溶性高分子的水溶液的比率(重量比、o/w比)只要是能够制备水包油型乳化液的范围即可，通常为1：1.5～1：20，优选为1：2～1：20、或1：2～1：4。在优选的方式中，在水溶性高分子的水溶液中的水溶性高分子的浓度为3～6重量％、4～6重量％、或5～6重量％的情况下，ED-71的油脂溶液与水溶性高分子的水溶液的比率为1：1.5～1：20、1：2～1：20、或1：2～1：4。

另外，ED-71的油脂溶液与水溶性高分子的比率(重量比)只要是能够形成ED-71的油脂溶液的粒子由水溶性高分子包覆的状态的范围即可，通常为1：0.05～1：10，优选为1：0.1～1：1、或1：0.1～1：0.3。在优选的方式中，在水溶性高分子的水溶液中的水溶性高分子的浓度为3～6重量％、4～6重量％、或5～6重量％的情况下，ED-71的油脂溶液与水溶性高分子的比率(重量比)为1：0.05～1：10、1：0.1～1：1、或1：0.1～1：0.3。

该粒子优选为球形。其粒径通常为0.01～100μm，优选为0.1～10μm。

关于工序(ii)，作为本发明中使用的赋形剂，例如可以举出玉米淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、部分预糊化淀粉、预糊化淀粉、多孔淀粉等淀粉类、无水乳糖、乳糖水合物、果糖、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、赤藓醇等糖或糖醇类、无水磷酸氢钙、结晶纤维素、沉降碳酸钙、硅酸钙等，优选为糖或糖醇类，更优选为甘露醇、无水乳糖、乳糖水合物，进一步优选为甘露醇。

工序(ii)中使用的水包油型乳化液与赋形剂的比率(重量比)可以根据赋形剂的种类等而改变，通常为1：1～1：100，优选为1：4～1：20的范围。特别是在赋形剂为甘露醇的情况下，若重量比通常为1：4～1：20的范围，则可以获得能够在片剂等制剂的制造中使用的优选的造粒粉末。

水包油型乳化液向赋形剂的附着或吸附可以利用制剂领域中普遍使用的方法来进行，例如可以举出一边向赋形剂喷雾乳化液一边进行造粒的方法、向赋形剂中加入乳化液并进行混合搅拌的方法等。此种方法例如可以使用高速搅拌造粒机(POWREX制VG-600CT)、混合搅拌机(品川工业所制DM型)等进行。需要说明的是，在附着或吸附中也包括浸渗(在多孔的赋形剂的情况下，使水包油型乳化液浸润到孔内)。

工序(iii)中，将附着于或吸附于赋形剂的水包油型乳化液干燥，认为由此从水溶性高分子的水溶液除去水，形成油脂溶液直接由水溶性高分子包覆了的粒子。如此所述地得到的油分分散体含有包含ED-71的油脂溶液的粒子，在用于片剂等制剂的制造时显示出良好的制造性(例如流动性、压缩成形性)。

水包油型乳化液的干燥可以利用制剂领域中普遍使用的方法来进行，例如可以举出流动干燥、冷冻干燥、通气干燥、喷雾干燥、静置干燥、搅拌干燥、气流干燥、真空干燥、微波干燥、红外线/远红外线干燥等。另外，干燥也可以与加热或冷却一起进行。干燥例如可以使用流化床造粒干燥机(POWREX制WSG-200pro)、真空干燥机(日本干燥机制锥形干燥器)等进行。

本发明的药物组合物可以制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂等口服剂。这些口服剂可以利用制剂领域中使用的方法来制造。例如作为片剂的制造方法，可以举出以下的i)、ii)及iii)的方法。

i)将包含ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体与追加的添加剂(赋形剂2、崩解剂、润滑剂等)一起混合后，进行压缩成形，由此制造片剂。

ii)将包含ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体与追加的添加剂(赋形剂2、结合剂等)混合后，一边添加或喷雾溶剂(例如纯化水、乙醇、或其混溶液)一边进行造粒。向所得的造粒物中加入适量的润滑剂、根据需要使用的崩解剂等并混合后，进行压缩成形，由此制造片剂。

iii)将包含ED-71及ED-71环氧化物的油分分散体与追加的添加剂(赋形剂2等)混合后，一边添加或喷雾将结合剂及根据需要使用的其他添加剂分散或溶解于溶剂(例如纯化水、乙醇、或其混溶液)中而得的液体一边进行造粒。向所得的造粒物中加入适量的润滑剂、根据需要使用的崩解剂等并混合后，进行压缩成形，由此制造片剂。

作为追加的添加剂，例如可以出于提高药物的释放性的目的使用表面活性剂、pH调节剂，出于改善工序中的流动性的目的使用流动剂，出于提高稳定性的目的使用稳定剂，出于增加味道、气味的目的使用矫味矫臭剂，出于加入颜色的目的使用着色剂。它们的使用量相对于制剂100重量份通常为0～99.999重量份，优选为50～99.5重量份，更优选为90～99重量份。

另外，片剂中，可以作为追加的添加剂还包含抗氧化剂。抗氧化剂可以在i)、ii)及iii)的制造法的任选的工序中添加。例如，在i)的制造法的情况下，可以将抗氧化剂与其他添加剂一起与油分分散体混合后，进行压缩成形，由此制造片剂。另外，也可以使用预先溶解有抗氧化剂的ED-71的油脂溶液制备油分分散体，将其与其他添加剂混合后，进行压缩成形，由此制造片剂。

本发明的药物组合物(优选为片剂)中的ED-71的含量没有特别限定，然而在一个方式中，作为每单位制剂中的ED-71量为0.05～5μg，优选为0.5～0.75μg。

作为赋形剂2，例如可以举出玉米淀粉、马铃薯淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、部分预糊化淀粉、预糊化淀粉、多孔淀粉等淀粉类、乳糖水合物、果糖、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇等糖或糖醇类、无水磷酸氢钙、结晶纤维素、沉降碳酸钙、硅酸钙等。在优选的方式中，赋形剂2为淀粉类、乳糖水合物、结晶纤维素、或无水磷酸氢钙。

作为崩解剂，例如可以举出淀粉乙醇酸钠、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、低置换度羟丙基纤维素、羟丙基淀粉等。崩解剂的使用量相对于制剂100重量份优选为0.5～25重量份，更优选为1～15重量份。

作为结合剂，例如可以举出羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、甲基纤维素、聚维酮(聚乙烯基吡咯烷酮)、阿拉伯胶粉末等。结合剂的使用量相对于制剂100重量份优选为0.1～50重量份，更优选为0.5～40重量份。

作为润滑剂，例如可以举出硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、滑石、蔗糖脂肪酸酯、硬脂富马酸钠、轻质无水硅酸(light anhydrous silicic acid)等。

作为表面活性剂，例如可以举出聚山梨醇酯80、硬脂酸聚烃氧(40)酯(polyoxyl40stearate)、聚桂醇等。

作为pH调节剂，例如可以举出乙酸、乳酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、磷酸、以及它们的任意者的盐。

作为流动剂，例如可以举出轻质无水硅酸、含水二氧化硅等二氧化硅、滑石等。此处，作为轻质无水硅酸的具体例，例如可以举出Sylysia 320(商品名、富士Sylysia化学(株))、Aerosil 200(商品名、日本Aerosil(株))等。

作为稳定剂，例如可以举出对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等对羟基苯甲酸酯；氯丁醇、苄醇、苯乙醇等醇；苯扎氯铵；苯酚、甲酚等酚类；硫柳汞；脱氢乙酸；以及山梨酸。

作为矫味矫臭剂，例如可以举出制剂领域中通常使用的甜味料、酸味料、香料等。

作为着色剂，只要是容许添加到药物中的物质，可以是任何的着色剂，例如可以举出食用黄色5号(日落黄、美国的食用黄色6号)、食用红色2号、食用蓝色2号等食用色素、食用色淀色素、三氧化二铁等。

作为抗氧化剂，例如可以举出亚硝酸盐(例如亚硝酸钠)、亚硫酸盐(例如亚硫酸钠、干燥亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠)、硫代硫酸盐(例如硫代硫酸钠)、α-硫代甘油、1，3-丁二醇、巯基乙酸及其盐(例如巯基乙酸钠)、硫代苹果酸盐(例如硫代苹果酸钠)、硫脲、硫代乳酸、依地酸盐(例如依地酸钠)、二氯异氰脲酸盐(例如二氯异氰脲酸钾)、柠檬酸、半胱氨酸及其盐(例如盐酸半胱氨酸)、苯并三唑、2-巯基苯并咪唑、异抗坏血酸及其盐(例如异抗坏血酸钠)、抗坏血酸及其酯化合物(例如L-抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸棕榈酸酯)、磷脂(例如大豆卵磷脂)、金属螯合剂及其盐(例如乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸钙二钠、乙二胺四乙酸二钠)、酒石酸及其盐(例如罗谢尔盐)、多酚类(例如儿茶素)、谷胱甘肽、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、没食子酸丙酯、天然维生素E、生育酚乙酸酯、浓缩混合生育酚、生育酚同系物(例如d-α-生育酚、dl-α-生育酚、5，8-二甲基母育酚、7，8-二甲基母育酚、δ-甲基母育酚、5，7，8-三甲基生育三烯酚、5，8-二甲基生育三烯酚、7，8-二甲基生育三烯酚、8-甲基生育三烯酚)等。其中，优选生育酚乙酸酯、二丁基羟基甲苯、天然维生素E、dl-α-生育酚、d-α-生育酚、浓缩混合生育酚、抗坏血酸棕榈酸酯、L-抗坏血酸硬脂酸酯、丁基羟基苯甲醚、没食子酸丙酯，更优选dl-α-生育酚、二丁基羟基甲苯、丁基羟基苯甲醚、没食子酸丙酯，进一步优选dl-α-生育酚。

抗氧化剂的使用量相对于制剂100重量份优选为0.001～10重量份，更优选为0.01～1重量份。

上述追加的添加剂可以以适当的比例混合使用2种以上。

也可以由片剂进一步使用适当的包衣用添加剂得到糖衣片或薄膜衣片。作为包衣用添加剂，可以举出糖衣基剂、包衣剂、肠溶性薄膜包衣基剂、缓释性薄膜包衣基剂等。

作为糖衣基剂，例如可以举出白糖、赤藓醇等糖或糖醇，此外，也可以并用选自滑石、沉降碳酸钙、明胶、阿拉伯胶、支链淀粉、巴西棕榈蜡等中的1种或2种以上。

作为包衣剂，例如可以举出乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙甲纤维素、虫胶、滑石、巴西棕榈蜡、石蜡等。

作为肠溶性薄膜包衣基剂，例如可以举出羟丙甲纤维素邻苯二甲酸酯、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、羧甲基乙基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素等纤维素系高分子；甲基丙烯酸共聚物L〔Eudragit L(商品名)、Evonik Degussa公司〕、甲基丙烯酸共聚物LD〔Eudragit L-30D55(商品名)、Evonik Degussa公司〕、甲基丙烯酸共聚物S〔Eudragit S(商品名)、Evonik Degussa公司〕等丙烯酸系高分子；虫胶等天然物等。

作为缓释性薄膜包衣基剂，例如可以举出乙基纤维素等纤维素系高分子；甲基丙烯酸氨基烷基酯共聚物RS〔Eudragit RS(商品名)、Evonik Degussa公司〕、丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物悬浮液〔Eudragit NE(商品名)、Evonik Degussa公司〕等丙烯酸系高分子；醋酸纤维素等。

上述的包衣用添加剂可以以适当的比例混合使用它们的2种以上。

在包衣用添加剂中，为了调节溶出速度，可以根据需要加入水溶性物质、增塑剂等。水溶性物质可以使用选自羟丙甲纤维素等水溶性高分子类、甘露醇等糖醇类、白糖、无水麦芽糖等糖类、蔗糖脂肪酸酯、聚氧乙烯聚氧丙二醇、聚山梨醇酯、十二烷基硫酸钠等表面活性剂等中的1种以上。增塑剂可以使用选自乙酰化单甘油酯、柠檬酸三乙酯、三醋精、癸二酸二丁酯、癸二酸二甲酯、中链脂肪酸甘油三酯、柠檬酸乙酰三乙酯、柠檬酸三丁酯、柠檬酸乙酰三丁酯、己二酸二丁酯、油酸、油醇(oleinol)等中的1种以上。

另外，作为将片剂用所述包衣用添加剂包衣而形成包衣层的方法，可以使用制剂领域中通常的方法，例如可以举出锅包衣法、流动包衣法、滚动包衣法、流动滚动包衣法。这些方法中使用的包衣液可以通过将所述包衣用添加剂、滑石、和溶剂(优选为乙醇、或乙醇与水的混溶物)混合而得到。此种包衣液的固体成分浓度优选相对于包衣液整体的重量为5～15重量％的范围。

在优选的方式中，本发明的药物组合物为被HPMC膜包衣了的包衣片。

在本发明的药物组合物的制剂化中，除了可以利用实施例中记载的原理、装置以外，还可以利用挤出造粒、破碎/整粒、旋转造粒、干式造粒、湿式高剪切造粒、以及流化床造粒的各原理来进行造粒。

作为以挤出造粒为原理的造粒装置，例如可以举出Twin Dome Gran、BasketRyuzer、半干式/低水分造粒机盘式造粒机、半干式/小径造粒机细颗粒盘式造粒机、Pelleter Double及Multi Gran(以上为Dalton制)、以及KEX挤出机及KRC捏合机(以上为栗本铁工所)。

作为以破碎/整粒为原理的造粒装置，例如可以举出Power Mill(Dalton制)、整粒机Fiore F及Roundel Mill(以上为德寿工作所制)、无筛整粒机Nebulasizer(奈良机械制作所制)、QUICK MILL QMY(SEISHIN企业制)、辊式制粒机(MATSUBO制)、NEW SPEED MILL(冈田精工制)、以及MF型整粒机Oscillator及破碎整粒机Coni Witt(以上为瑞士FREWITT公司制、由EARTHTECHNICA销售)。

作为以旋转造粒为原理的造粒装置，例如可以举出MARUMERIZER(Dalton制)、以及离心流动包衣造粒机CF及GRANUREX GX(以上为FREUND产业制)。

作为以干式造粒为原理的造粒装置，例如可以举出ROLLER COMPACTOR(FREUND产业制)、PHARMAPAKTOR(HOSOKAWA MICRON制)、RCP ROLLER COMPACTOR(栗本铁工所制)及PHARMA COMPACTOR(MATSUBO制)。

作为以湿式高剪切造粒为原理的造粒装置，例如可以举出SPGRANULATOR及SPARTAN RYUZER(以上为Dalton制)、立式造粒机(POWREX制)、GEA AEROMATIC FIELDERMULTIPROCESSOR研究开发用PHARMA CONNECT(EUROTECHNO制)、MIXER&GRANULATOR(NMG)(奈良机械制作所制)、破碎滚动式NEW GRA MACHINE SEG(SEISHIN企业制)、NEW SPEEDKNEADER(冈田精工制)、高速混合机(ADVANCE系列)、动态干燥机、HIGH FLEX GRAL及微波造粒机干燥器(以上为深江POWTECH制、由EARTHTECHNICA销售)、以及TM型造粒混合机(日本COKE工业制)。

作为以流化床造粒为原理的造粒装置，例如可以举出NEW MARUMERIZER、旋转流化床、微量流化床及SWING PROCESSOR(以上为Dalton制)、FLOW COATER CONTAINMENT、FLOWCOATER Universal、FLOW COATER FLO、以及SPIRAL FLOW SFC(以上为FREUND产业制)、AGGLOMASTER(HOSOKAWA MICRON制)、GEA AEROMATIC FIELDER FLEX STREAM(EUROTECHNO制)、以及SPRUDE(大川原制作所)。

除了可以利用实施例中记载的原理、装置以外，还可以利用对流式(机械搅拌式)、扩散式(容器旋转式)、以及捏和/捏合机的各原理来进行混合。

作为以对流式(机械搅拌式)为原理的混合装置，例如可以举出混合搅拌机NDM型、混合搅拌机XDM型、混合搅拌机DM型、试制/研究用混合搅拌机AM·XDM·DM型、实验室用混合搅拌机TWIN MIX、PUG MIXER、带式混合器、SPARTAN MIXER及PASTE MIXER(以上为Dalton制)、CYCLOMIX及NAUTA MIXER(以上为HOSOKAWA MICRON制)、立式安装MAG-NEO密封混合器(MAGNEO技研制)、底面型SUPER MAG MIXER、以及S MIXER SUPER MIX(以上为佐竹化学机械工业制)、JULIA MIXER及带式混合机(以上为德寿工作所制)、PX MIXER(SEISHIN企业制)、LOEDIGE MIXER(MATSUBO制)、FM MIXER RC型及MP MIXER(以上为日本COKE工业制)、以及RIBOCONE(大川原制作所制)。

作为以扩散式(容器旋转式)为原理的混合装置，例如可以举出GEA BOOK SYSTEMIBC掺混机及带有GEA BOOK SYSTEM NIR测定装置的IBC掺混机(以上为EUROTECHNO制)、V型混合机及W型混合机(以上为德寿工作所制)、V型混合器(奈良机械制作所制)、W型混合机SCM及V型混合机SVM(以上为SEISHIN企业制)、CAPSULE ROCKING MIXER(爱知电机制)、以及BOHLE CONTAINER MIXER PM(寿工业制)。

作为以捏和/捏合机为原理的混合装置，例如可以举出连续捏合机及间歇式捏合机(以上为Dalton制)、T.K.HIVIS MIX及T.K.HIVIS DISPER MIX(以上为PRIMIX制)、LEISTRITZ EXTRUDER(奈良机械制作所制)、以及行星式混合器(浅田铁工制)。

作为其他混合装置，例如可以举出Conti-TDS(Dalton制)、以及MIXING TORQUEMETER ST-3000II PROCESS REACTOR DDL·3000、以及搅拌模拟MixSim(以上为佐竹化学机械工业制)。

在上述的各原理以外，还可以利用流动搅拌式、无搅拌式、以及高速剪切式等原理进行混合。

对于压片而言，基于单冲式压片及旋转式压片的各原理来进行，然而从效率性的观点考虑，优选旋转式压片。

作为以旋转式压片为原理的压片装置名，除了实施例中记载的压片装置以外，例如还可以举出可卸式高速压片机FITTE(BOSCH PACKAGING TECHNOLOGY制)、高速压片机COMPRIMA及高速压片机SYNTHESIS(以上为MUTUAL制)、ROTARY PRESS MZ400(MORIMACHINERY制)、GEA COURTOY MODULE型压片机P型、S型、D型、以及GEA PHARMA SYSTEMPERFORMA P(以上为EUROTECHNO制)、研究开发用小型旋转式压片机、小型高速旋转式压片机、中型高速旋转式压片机、复式高速旋转式压片机、转盘可卸式水洗旋转式压片机及CONTAINMENT压片机(以上为菊水制作所制)、以及BX型HX型强压压片机、CVX型转盘可卸式压片机、X型AP型小型压片机、X型AP型中型压片机、AP型大型压片机、以及X型AP型大型复式压片机(以上为畑铁工所制)。

利用上述的压片装置可以得到单层片，然而例如也可以使用GEA COURTOY MODULE型双层片压片机D型(EUROTECHNO制)及多层压片机(菊水制作所制)等制造多层片、使用包芯压片机(菊水制作所制)及AP/MS型C型包芯压片机(畑铁工所制)等制造包芯片。

包衣除了可以利用实施例中记载的原理、装置来进行以外，还可以利用锅包衣(水平锅)、锅包衣(倾斜锅)及空气悬浮式(流化床)的各原理来进行。

作为以锅包衣(水平锅)为原理的包衣装置，例如可以举出HICOATER FZ、AQUACOATER AQC CONTAINMENT及AQUA COATER AQC(以上为FREUND产业制)。

作为以锅包衣(倾斜锅)为原理的包衣装置，例如可以举出POWREX COATER PRC及DORIA COATER DRC(以上为POWREX制)。

作为以空气悬浮式(流化床)为原理的包衣装置，例如可以举出GLATT POWDERCOATER GPCG SPC、Multiplex及复合型流化床SFP(以上为POWREX制)。

作为其他包衣装置，例如可以举出Hybridization System(奈良机械制作所制)及MECHANO HYBRID(日本COKE工业制)。

本发明的药物组合物对于如下的疾病或症状(例如骨质疏松症)的治疗或预防而言有用，即，能够通过抑制骨代谢转换来改善骨密度及骨强度而进行治疗或预防。

本发明中，疾病或症状的治疗或预防包括：对该疾病的发病的预防、对恶化或发展的抑制或阻碍、对已经罹患该疾病的个体所呈现的一个以上的症状的减轻或者对恶化或发展的抑制、对继发性疾病的治疗或预防等。

本发明的药物组合物的给药对象为哺乳动物。哺乳动物优选为人。

本发明的药物组合物以对于治疗或预防有效的量向对象给药。所谓“对于治疗或预防有效的量”，是指对于特定的疾病、给药方式及给药途径而言起到治疗或预防效果的量，可以根据对象的物种、疾病的种类、症状、性别、年龄、宿疾、其他要素适当地确定。给药途径通常为口服给药。

本发明的药物组合物的给药量可以根据对象的物种、疾病的种类、症状、性别、年龄、宿疾、其他要素适当地确定，对于成人，通常以ED-71计可以每天给药0.01～10μg，优选给药0.5～0.75μg。

另外，本发明涉及一种用于疾病或症状的治疗或预防的方法，其包括将本发明的药物组合物的治疗或预防有效量向需要该药物组合物的对象给药。

本发明的所谓“治疗或预防有效量”，是指对于特定的疾病或症状、给药方式及给药途径而言起到治疗或预防效果的量，可以根据对象的物种、疾病或症状的种类、症状、性别、年龄、宿疾、其他要素适当地确定。

本发明的“对象”例如为哺乳动物，优选为人。

本发明的“给药”通常是指口服给药。

作为本发明的“疾病或症状”，可以举出能够通过抑制骨代谢转换来改善骨密度及骨强度而进行治疗或预防的疾病或症状(例如骨质疏松症)。

如上所述，ED-71环氧化物主要在工序(iii)(干燥工序)中因源于ED-71的转换而生成，在所制备出的片剂中，与ED-71一起存在于油脂溶液中。另外，若所制备出的片剂原样不变地放置，则会进一步慢慢地推进从ED-71向ED-71环氧化物的转换，但该推进可以通过在共存有脱氧剂的容器(包装形态)中以气密状态进行保存来抑制。因而，在一个方式中，本发明提供将本发明的药物组合物及脱氧剂以气密状态封入包装形态内的制品。

作为脱氧剂，例如可以举出Wonder Keep(注册商标)(Powdertech)、OxyMove(注册商标)(南通大江化学)、MODULAN(日本化药FOOD TECHNO)、KEEPIT(Dorency)、WELL PACK(TAISEI)、Oxy-Eater(注册商标)(UENO FOOD TECHNO)、KEPLON(Keplon)、保鲜剂(凸版印刷)、SANSORESU(博洋)、SANSO-CUT(注册商标)(IRIS FINEPRODUCTS)、AGELESS(注册商标)ZM(三菱瓦斯化学、ZM-1)、EVER FRESH(鸟繁产业、QJ-30及其他)、VITALON PH(常盘产业、PH-100SL及其他)、Sequl(注册商标)(Nisso Resin、AP-250及其他)等，优选为AGELESS ZM。

所谓“包装形态”，是能够制成气密状态的形态，例如可以举出瓶包装、枕式包装、吸塑包装、安瓿包装等，优选为瓶包装及枕式包装。另外，本发明的药物组合物被原样不变地或进行PTP包装(挤压式包装(press through pack))地以气密状态封入包装形态内，优选将原样不变的组合物以气密状态封入瓶包装内，或将经过PTP包装的组合物以气密状态封入枕式包装内。

作为瓶包装的材质，例如可以举出热塑性树脂、玻璃、陶器、珐琅、金属等，优选为热塑性树脂及玻璃。作为瓶包装的材质并不限定于单层的材质，例如可以是相同的热塑性树脂，也可以设为多种材质的多层结构。瓶包装的盖部只要能够制成气密状态，则可以是任选的形态，例如可以举出螺旋盖。作为盖部的材质，例如可以举出热塑性树脂、金属(例如铁、马口铁、不锈钢等)，优选为金属。另外，在盖部及瓶包装为热塑性树脂制的情况下，优选带密封(优选为铝制密封)的塑料瓶包装。

所谓“枕式包装”，是指将本发明的药物组合物原样不变、或以经过PTP包装的状态用膜以袋状包覆后、在加入气体的状态下制成气密状态的包装形态。作为枕式包装的材质，例如可以举出铝复合膜或热塑性树脂等、或者它们的组合，优选为铝复合膜。

所谓“气密”，是指在进行日常的操作、或通常的保存状态下没有液体侵入的危险的状态。另外，根据程度不同，气密包括抑制了气体的侵入的状态。对于气密的程度而言，在瓶包装的情况下，例如可以使用“关闭扭矩(closing torque)”进行数值化。作为数值，例如可以举出100～300N·cm，优选为150～250N·cm，更优选为200～220N·cm。气密状态也可以是密封状态。

所谓“密封”，是指在进行日常的操作、或通常的保存状态下没有气体或微生物侵入的危险的状态。

作为PTP包装及吸塑包装的材质，例如可以举出热塑性树脂等树脂类、金属类、各种涂料、各种粘接剂等，优选热塑性树脂。

作为热塑性树脂，例如可以举出聚氯乙烯(PVC)、未拉伸聚丙烯(CPP)、聚丙烯(PP)、聚偏二氯乙烯(PVDC)、聚三氟氯乙烯(PCTFE)、环状烯烃共聚物(COC)、聚乙烯(PE；高密度、中密度及低密度)、聚碳酸酯(PC)、聚酰胺(PA)、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物(EVA)、乙烯-甲基丙烯酸酯共聚物、聚苯乙烯(PS)、聚酯(PET)、聚丙烯酸(PAA)、乙烯-乙烯醇共聚物等，优选为聚氯乙烯、未拉伸聚丙烯、聚丙烯、聚偏二氯乙烯、聚三氟氯乙烯、环状烯烃共聚物及乙烯-乙烯醇共聚物。可以单独使用这些热塑性树脂，也可以组合使用2种以上。作为PTP包装的盖材，例如可以举出铝箔、将铝箔用热塑性树脂制的膜复合而得的复合膜等。PTP包装或吸塑包装的制作方法使用公知的方法即可。本发明中的枕式包装、PTP包装、或吸塑包装的包装材料并不限定于单层的材料，也可以制成将多个层贴合而得的多层的膜状。多层膜可以在外层或中间层具有抑制氧的透过的屏蔽层，并作为内层或中间层具有带有脱氧功能的吸收层。作为带有脱氧功能的吸收层，例如有内加有发挥脱氧功能的脱氧剂的树脂等。

另外，优选遮光性高的包装形态，例如可以举出带有金属制的瓶盖的褐色玻璃瓶包装等。

在将本发明的药物组合物及脱氧剂以气密状态封入包装形态内时，可以将包装形态内的气体置换为氧气以外的气体(例如氮气、二氧化碳气体、氦气、氩气、氖气、氪气、氙气、氡气)。

对于ED-71环氧化物而言，在经过与空气接触的干燥工序(工序(iii))制备出的本发明的药物组合物(优选为片剂)中，很难完全排除其存在，另外，虽然是允许存在的物质，然而从ED-71的有效性的观点出发，优选其含量少。具体而言，含量优选为5％以下，更优选为2％以下，进一步优选为1.2％以下。作为优选的含量的具体例，可以举出0.5％。含量的下限例如可以为0.1％以下。需要说明的是，ED-71环氧化物的“含量”是指，在下述实施例的试验例3中记载的条件下利用液相色谱进行分析时，基于由220nm的曲线得到的峰面积算出的、本发明的药物组合物中的ED-71环氧化物的含量相对于ED-71、ED-71环氧化物、作为ED-71的热异构体的Pre ED-71、以及其他的ED-71类似物的合计含量而言的比例(％)，利用以下的计算式算出。

ED-71环氧化物的含量(％)＝(A_imp-2×RRF)/(A_t+A_imp-2×RRF+A_p×RRF+Σ(A_i×RRF))×100

A_t：ED-71的峰面积

A_p：Pre ED-71的峰面积

A_imp-2：ED-71环氧化物的峰面积

A_i：其他ED-71类似物的峰面积

RRF：对ED-71的相对灵敏度系数；Pre ED-71：1.79；ED-71环氧化物：1.72；其他ED-71类似物：1.00。

需要说明的是，将本说明书中引用的所有现有技术文献通过参照纳入本说明书。

利用实施例对本发明进一步详细说明。

实施例

本实施例中，使用以下的简写符号。

EtOH：乙醇

HPMC：羟丙甲纤维素

BHT：二丁基羟基甲苯

MCT：中链脂肪酸甘油三酯

HPC：羟丙基纤维素

PVP：聚乙烯基吡咯烷酮

PVA共聚物：聚乙烯醇-丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯共聚物

实施例1：配合变化1

使50mg的ED-71溶解于2.5mL的EtOH中，制备出ED-71的乙醇溶解液。使1g的BHT(Merck)及2g的dl-α-生育酚(特殊用途、和光纯药工业)溶解于97g的MCT(O.D.O.C、日清Oillio)中，制备出MCT液。向所制备出的MCT液中加入ED-71的乙醇溶解液0.5mL，用漩涡混合器进行搅拌。继而在减压条件下蒸馏除去溶剂，制备出ED-71油脂溶液。向所制备出的ED-71油脂溶液150mg中加入羟丙甲纤维素300mg，制备出ED-71组合物(实施例1)。将所制备出的ED-71组合物在调整为60℃的恒温槽内在大气存在条件下保存，在14天后及28天后调查了ED-71的残存率(％)。

作为对照物使用了单独的上述的ED-71油脂溶液(对照例1)。

另外，取代实施例1的羟丙甲纤维素而使用第1表中记载的添加剂(300mg)，利用与实施例1相同的方法制备ED-71组合物，与实施例1同样地调查了60℃时的稳定性。

将结果表示于第1表中。从第1表可以清楚地看到，实施例1的组合物与对照例1的单独的油脂液同等稳定或更稳定，另外与对照例2～34的组合物相比在高温条件下更稳定。

[表1-1]

第1表

[表1-2]

[表1-3]

实施例2：配合变化2

取代实施例1的羟丙甲纤维素而使用第2表中记载的添加剂，利用与实施例1相同的方法制作出实施例2及对照例35的ED-71组合物，与实施例1同样地调查了60℃时的稳定性，并与对照例1进行了比较。将结果表示于第2表中。实施例2的组合物与对照例1同等稳定或更稳定，另外还显示出，与第1表所示的对照例2～34的组合物相比在高温条件下更稳定。需要说明的是，对照例35的组合物虽然没有观察到ED-71的稳定性的降低，然而在使用葡甲胺作为添加剂时无法维持后述的油分分散体片剂的制造过程中必需的乳化状态，基于此等理由，判明葡甲胺不适合用于油分分散体片剂的制造的添加剂。

[表2]

第2表

[试验例1]乳液稳定化试验

如后所述，在油分分散体片剂的制造过程中需要维持ED-71的MCT溶液与水溶性高分子的水溶液的乳化状态。因而，制备出MCT与水溶性高分子的乳化液，调查了乳化状态。

将HPMC(TC-5R、信越化学)、HPC(SSL、信越化学)、PVP(K90、BASF)、POVA-COAT(F、大同化成工业制)溶解于纯化水中，分别制备出2％及5％的水溶液。向塑料制的50mL离心沉降管中分别加入各液20mL。向其中加入以0.1g/L溶解油红(油红O、Nacalai Tesque)而着色为红色的中链脂肪酸甘油三酯各10mL。

用均化器以约10000rpm搅拌1分钟而使之乳化后，判定2小时后及24小时后有无油层分离到乳化液的上部。

将结果表示于第3表中。另外，将使用水溶性高分子的2％水溶液时的24小时后的离心沉降管内的乳化状态(照片)表示于图2中。HPMC、HPC、以及PVA共聚物没有产生水层与油层的分离，然而PVP产生了分离。

[表3]

第3表

-:未发生分离、+:发生分离

实施例3～11：乳液制备时的ED-71的稳定性

使100mg的ED-71溶解于5.0mL的EtOH中，制备出ED-71的乙醇溶解液。使1g的BHT(Merck)及2g的dl-α-生育酚(特殊用途、和光纯药工业)溶解于97g的MCT(O.D.O.C、日清Oillio)中，制备出MCT液。向所制备出的MCT液中加入ED-71的乙醇溶解液0.5mL，利用漩涡混合器进行搅拌，制成溶解有ED-71的MCT液。分别制备出第4表所示的水溶性高分子溶液。以第5表中记载的比例将溶解有ED-71的MCT液与水溶性高分子溶液混合，使用均化器以5400rpm搅拌1分钟而使之乳化，制备出含有ED-71的乳液。以作为ED-71原药量计约为1μg的方式称取所制备出的含有ED-71的乳液，利用真空干燥机进行减压蒸馏除去溶剂，将所得的样品用于残存率测定(实施例3～11)。将样品在调整为60℃的恒温槽内在大气存在条件下进行保存，调查刚刚制备后的ED-71含量值、14天后及25日后的ED-71的含量值及残存率(％)。需要说明的是，各含量值如下算出，即，以作为ED-71原药量计约为1μg的方式称取溶解有ED-71的MCT液，利用真空干燥机进行减压蒸馏除去溶剂，将所得的样品作为标准品算出。利用以下的计算式求出ED-71的含量值及残存率。

ED-71的含量值(％)＝样品中的ED-71峰面积合计/标准品中的ED-71峰面积合计(ED-71峰面积合计＝ED-71峰面积+1.98×Pre ED-71的峰面积)

ED-71的残存率(％)＝加速样品的含量值平均/刚刚制备后的样品的含量值平均

将结果表示于第5表中。从第5表可以清楚地看到，在水溶性高分子的浓度低的配方(1％)的情况下，ED-71的含量值的波动大。对此认为是因为，在水溶性高分子的浓度低的配方的情况下，可以观察到制备后乳液的分离，在进行了取样的乳液中的ED-71的称取量方面可以观察到波动。在水溶性高分子的浓度为5％或6％的样品的情况下，结果的波动小，并且25天后的ED-71残存率均显示为95％以上。在水溶性高分子的浓度高的配方(10％或15％)的情况下，虽然波动小，然而25天后的样品的ED-71残存率降低至90％左右。

作为含有1％～15％的HPMC或HPC的水溶性高分子溶液的浓度，为了使ED-71在乳液中稳定化，优选为5～6％。

[表4]

第4表

[表5]

第5表

*水溶性高分子添加比例＝水溶性高分子溶液(g)/溶解有ED-71的MCT液(g)

[制造例]油分分散体片剂

将dl-α-生育酚(和光纯药工业)0.142kg及BHT(Merck)0.284kg溶解于MCT(日清Oillio)9.025kg中，向其中加入艾地骨化醇(ED-71)1.1813g的乙醇(99.5％)(今津药品工业)(0.078kg)溶液后，将乙醇在减压条件下蒸馏除去(溶液1)。

使羟丙甲纤维素(HPMC)(TC-5R、信越化学工业)1.134kg溶解于纯化水17.766kg中(溶液2)。

向3kg的溶液1中加入6kg的溶液2，利用均化器(IKA制T-50Ultra Turrax；转速9600rpm)搅拌10分钟。反复进行3次该操作而得到乳化液。

一边将用网眼850μm的振动筛过筛后的甘露醇(Merck)165.6kg在高速搅拌造粒机(POWREX制VG-600CT)中在叶片56rpm、交叉螺杆1500rpm的条件下搅拌，一边喷雾添加乳化液，进行15分钟掺和，得到造粒粉末。

一边以300rpm使安装有9.5mm(方孔)的筛网的湿式整粒机(POWREX制U-20)运转，一边将所得的造粒粉末过筛，同时将造粒粉末转移到流化床造粒干燥机(POWREX制WSG-200pro)，进行了干燥(样品1)。

对经过干燥的造粒粉末，以800rpm使安装有直径2mm的筛网的干式整粒机(POWREX制U-20)运转，进行了整粒。

将整粒品和分别用网眼850μm的筛网过筛后的甘露醇3.0kg与交联羧甲基纤维素钠(DFE pharma)3.6kg的混合物混合15分钟，再和分别用网眼850μm的筛网过筛后的甘露醇6.6kg与硬脂酸钙(Merck)0.72kg的混合物混合3分钟后(样品2)，以约7.5kN的压力，利用压片机(IMA制COMPRIMA)进行压片而制成片剂(样品3)。在压片时，以使每1片的艾地骨化醇含量为0.75μg的方式调整片剂重量。

将所得的全部片剂投入包衣机(POWREX制PRC-450)内，在60℃喷雾HPMC 6.480kg的水(74.520kg)溶液并进行干燥，继而，喷雾羟丙甲纤维素4.950kg、滑石(Merck)1.350kg、氧化钛(石原产业)2.664kg、以及三氧化二铁(癸巳化成)0.036kg的水(65.167kg)悬浮液并进行干燥，得到由2层的膜包衣而成的片剂(样品4；每1片的艾地骨化醇含量为0.75μg)。

需要说明的是，在制备每1片的艾地骨化醇含量为0.5μg的片剂时，关于第2层，喷雾羟丙甲纤维素4.950kg、滑石(Merck)1.350kg、氧化钛(石原产业)2.502kg、三氧化二铁(癸巳化成)0.018kg及黄色三氧化二铁(癸巳化成)0.180kg的水(65.167kg)悬浮液而进行包衣。

将制造流程示意图表示于图1中。

[试验例2]加速稳定性试验

将“[制造例]油分分散体片剂”中得到的片剂(每1片的艾地骨化醇含量为0.5μg及0.75μg的2种)各500片投入高密度聚乙烯瓶容器(NC-130、伸晃化学)。用聚丙烯瓶盖(SK-200B、伸晃化学)将瓶子盖紧，在调整为40℃/75％RH的恒温槽内保存，在1个月后、3个月后、以及6个月后调查ED-71的残存率。

利用以下的方法测定出ED-71的残存率。

将5片片剂投入30mL离心沉降管。加入水：乙腈(20：80)7mL并进行30分钟超声波照射。在超声波照射中每10分钟进行1次搅拌。将上清液用孔径0.20μm的聚四氟乙烯(PTFE)过滤器过滤，废弃最初的约1mL，将剩下的滤液作为样品溶液。另行使用ED-71标准品以达到约0.6μg/mL的浓度的方式用水：乙腈(20：80)溶解，利用与样品溶液的制备相同的方法制备出标准溶液。利用高效液相色谱法(Waters制Alliance、测定波长265nm)测定样品溶液及标准溶液，对样品中的ED-71含量进行定量。

利用以下的计算式求出ED-71的残存率。

ED-71的残存率(％)＝加速样品中的ED-71含量相对于标识量的比(％)/未加速样品中的ED-71含量相对于标识量的比(％)×100

需要说明的是，所谓标识量，是指意欲使每一片中含有的ED-71的重量(0.5μg或0.75μg)。

[表6]

油分分散体片剂的加速稳定性试验结果

结果显示，“[制造例]油分分散体片剂”中得到的片剂在ICH指南(Q1A)中规定的加速条件下稳定。

[试验例3]纯度试验

将“[制造例]油分分散体片剂”中得到的片剂20个用小型粉碎机LM-Plus(大阪Chemical公司制)粉碎，称取粉碎了的试样1.6g。加入以1：1的体积比混合乙酸乙酯与己烷而得的混合溶液40mL并搅拌，进行20分钟超声波照射。在以3000rpm离心5分钟后，用膜滤器(DISMIC-25HP PTFE 0.2μm HYDROPHILIC、ADVANTEC公司制)过滤上清液。将滤液注入固相提取匣(InertSep^TM NH₂ FF 500mg/3mL、GL Sciences公司制)，用以1：1的体积比混合乙酸乙酯与己烷而得的混合溶液10mL清洗后，通入6mL的乙醇而洗脱。对洗脱出的液体用蒸发装置进行蒸馏除去并干燥固化后，加入以1：1的体积比混合水与乙腈而得的混合溶液100μL，进行再溶解，制成试样溶液。液相色谱使用ACQUITY UPLC H-Class(Waters公司制)，利用以下的分析条件进行纯度试验。

色谱柱：Kinetex Evo C18(2.6μm、4.6mm×100mm、Phenomenex公司制)

柱温：30℃

流动相：水(A)及乙腈(B)

流速：1.0mL/分钟

检测器：光电二极管阵列

检测波长：210nm～400nm

洗脱法：如表7所示地设定浓度梯度。

[表7]

将结果表示于图3中。除了检测出ED-71(保持时间约10.4分钟)及作为其热异构体的Pre ED-71(保持时间约8.3分钟)以外，还在保持时间约5.2分钟检测出未知峰。判明该未知峰为来自于后面的化合物2的峰。

[试验例4]片剂制造的各工序中的化合物2的含量测定

对上述制造例的样品1～4进行了化合物2的含量测定。对样品3及样品4与试验例3同样地实施纯度试验，对样品1及样品2除了省略粉碎工序以外，与试验例3同样地实施纯度试验。

化合物2的含量如下算出，即，根据由试验例3中记载的条件下的液相色谱的分析得到的220nm的曲线，求出试样溶液中的ED-71、化合物2、作为ED-71的热异构体的Pre ED-71、以及其他的ED-71类似物的峰面积，利用以下的计算式算出。需要说明的是，对化合物2、Pre ED-71、以及其他的ED-71类似物的峰面积利用相对于ED-71的相对灵敏度系数(RRF)进行了修正。

化合物2的含量(％)＝(A_imp-2×RRF)/(A_t+A_imp-2×RRF+A_p×RRF+Σ(A_i×RRF))×100

A_t：ED-71的峰面积

A_p：Pre ED-71的峰面积

A_imp-2：化合物2的峰面积

A_i：其他的类似物的峰面积

RRF：Pre ED-71：1.79；化合物2：1.72；其他的类似物：1.00。

将结果表示于表8中。样品1(干燥粉末)中含有的化合物2的含量为0.5％，在其后的制造工序中得到的样品2～3中也没有观察到显著的增加。因而，暗示出化合物2主要可能在干燥工序之前生成。

[表8]

样品	化合物2的含量(％)
		样品1	0.5
样品2	0.6
		样品3	0.6
样品4	0.6

如ED-71的紫外可见光谱(图4)所示，ED-71在分子内具有三烯结构，因此在265nm处紫外线吸收发生极大化。另一方面，化合物2的紫外可见光谱(图3)中，没有观察到由ED-71的三烯结构引起的265nm的特征性峰。该结果暗示，化合物2可能是三烯结构受到破坏的ED-71的分解物。已知ED-71所属的维生素D₃易于因氧化而被分解。干燥工序中，试样在干燥塔内因热风而处于流动化状态。在流化床内滞留的试样与空气中的氧接触的机会增加，因此可以说处于易于受到氧化的环境。根据以上的情况可以推测，制造过程中的ED-71的氧化参与了化合物2的生成。

[试验例5]利用ED-71的空气氧化的化合物2的制备及其结构确定为了确定结构，大量制备了化合物2。

将ED-71(60μg)的水∶乙腈＝1∶1混合溶液(10mL)加入小瓶中，为了促进氧化，利用磁力搅拌器在大气开放条件下在30℃剧烈搅拌16小时。由于发生挥发而使液量减少，因此在搅拌后追加加入3mL的乙腈。在与试验例3相同的分析条件下进行分析，结果在样品1(干燥粉末)、样品2(混合粉末)、样品3(素片)及样品4(包膜片)中全都在与所检测出的化合物2相同的保持时间检测出具有同等的紫外可见光谱的峰。分离取出该峰，利用液相色谱质谱LCMS-IT-TOF(岛津制作所公司制)及核磁共振装置Agilent DD2 600MHz NMRSpectrometer(Agilent Technology公司制)确定了结构。

MS m/z：529.3528(M⁺-Na)

¹H-NMR(500MHz、乙腈-d₃)δ：0.74(s、3H)、0.94(d、3H)、1.00-1.43(m、18H)、1.55-1.87(m、8H)、1.96-1.99(m、1H)、2.33(d、1H)、2.45(dd、1H)、3.18(dd、1H)、3.60-3.64(m、1H)、3.64-3.67(m、2H)、3.75-3.80(m、1H)、3.82(d、1H)、4.14-4.17(m、1H)、4.19-4.22(m、1H)、5.00(t、1H)、5.23(dd、1H)、5.36(t、1H)

根据利用LC/MS得到的分子量，推测化合物2为ED-71的氧加成物。另外，根据各种NMR测定的结果暗示，化合物2是在ED-71的三烯部位加成有氧的环氧体。根据以上情况，将化合物2鉴定为(1R，2R，3R，5Z，7ξ，8ξ)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇。

[试验例6]化合物2的化学合成

本试验例中，在氯仿-d或乙腈-d₃中，在作为内标的四甲基硅烷存在条件下或不存在条件下，使用ECP500(JEOL制)测定出质子核磁共振谱图(¹H-NMR谱图)。另外，与试验例3同样地进行所得的化合物2的、利用液相色谱的纯度分析。

6-1：方法1

[化4]

在-70℃向(1R，2R，3R，5Z，7E)-2-(3-羟基丙氧基)-9，10-开环胆甾-5，7，10(19)-三烯-1，3，25-三醇(化合物1、504.4mg、1.03mmol)及碳酸氢钠(170.4mg、2.03mmol)的二氯甲烷(15mL)悬浮液中加入3-氯过氧苯甲酸(74.2％、251.4mg、1.08mmol)，用3小时升温至10℃。将反应混合物冷却到-30℃，加入3-氯过氧苯甲酸(25.4mg、0.109mmol)，用0.5小时升温至1℃附近。向反应混合物中加入5％碳酸氢钠水溶液(5mL)，升温至室温，用二氯甲烷(5mL)进行萃取。对水层用二氯甲烷(10mL)再次进行萃取，合并萃取液并用无水硫酸钠进行干燥。利用过滤除去固体，用二氯甲烷(10mL)清洗。将滤液在减压条件下浓缩，对利用硅胶层析(二氯甲烷：乙醇、1：0→19：1→12：1、v/v)得到的包含化合物2的级分进行浓缩。将所得的残渣溶解于丙酮(5mL)中后，进行浓缩干燥固化而得到(1R，2R，3R，5Z，7ξ，8ξ)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇(化合物2、342.3mg、纯度90.4面积％)。所得的化合物2的¹H-NMR谱图与试验例5中得到的化合物一致。

6-2：方法2

[化5]

工序1：((1R，2R，3R，5Z，7E)-25-羟基-1，3-双[(甲氧基羰基)氧基]-2-{3-[(甲氧基羰基)氧基]丙氧基}-9，10-开环胆甾-5，7，10(19)-三烯(化合物3))

向(1R，2R，3R，5Z，7E)-2-(3-羟基丙氧基)-9，10-开环胆甾-5，7，10(19)-三烯-1，3，25-三醇(化合物1、4.008g、8.17mmol)的二氯甲烷(40mL)悬浮液中加入1-甲基咪唑(3.6mL、44.9mmol)并用冰浴进行冷却。在10℃以下，向反应混合物中滴加氯甲酸甲酯(3.1mL、40.8mmol)，在室温搅拌15小时后，在减压条件下蒸馏除去溶剂。向残渣中加入水(40mL)，利用庚烷(10mL)与乙酸乙酯(30mL)的混合液进行萃取。将萃取液用水(40mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)清洗，通过硅藻土、无水硫酸钠后，在减压条件下蒸馏除去溶剂。对所得的残渣利用硅胶柱层析(庚烷：二氯甲烷：乙酸乙酯、1：1：0→5：5：2→3：3：2、v/v/v)进行纯化，得到化合物3(5.3863g)。

工序2：((1R，2R，3R，5Z，7ξ，8ξ)-25-羟基-1，3-双[(甲氧基羰基)氧基]-2-{3-[(甲氧基羰基)氧基]丙氧基}-7，8-环氧-9，10-开环胆甾-5，10(19)-二烯(化合物4))

在0℃向工序1中得到的化合物3(5.3863g、8.10mmol)及碳酸氢钠(1.3694g、16.3mmol)的二氯甲烷(81mL)悬浮液中加入3-氯过氧苯甲酸(74.2％、1.9917g、8.56mmol)，在相同温度下搅拌3.5小时。向反应混合物中加入5％碳酸氢钠水溶液(40mL)并升温到室温后除去水层。使有机层通过硅藻土、无水硫酸钠后，在减压条件下蒸馏除去溶剂。对所得的残渣利用硅胶柱层析(庚烷：二氯甲烷：乙酸乙酯、1：1：0→3：3：2→1：1：2、v/v/v)进行纯化，得到化合物4(4.2359g)。

工序3：((1R，2R，3R，5Z，7ξ，8ξ)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇(化合物2))

将工序2中得到的化合物4(4.1369g、6.08mmol)、碳酸钾(0.8406g、6.08mmol)及甲醇(61mL)的混合物在室温下搅拌3小时。将反应液用二氯甲烷(183mL)稀释，用硅胶进行过滤。将硅胶用二氯甲烷-甲醇(3：1、100mL)清洗，合并滤液并在减压条件下进行浓缩。对所得的残渣利用硅胶柱层析(二氯甲烷：丙酮、1：0→1：1→1：2、v/v)进行纯化，得到化合物2(2.7679g、纯度97.0面积％)。所得的化合物2的¹H-NMR谱图与试验例5中得到的化合物一致。

[试验例7]长期保存时的片剂中的化合物2的增加抑制

化合物2为ED-71的氧化物，因此通过向包装中加入脱氧剂，有可能可以抑制所制造的片剂的保管中可能发生的化合物2的增加。为了验证该假说，对样品4(包膜片)，在褐色玻璃瓶中、在脱氧剂的不存在条件下及存在条件下，评价了保存温度25℃、相对湿度75％下的保存后的化合物2的含量。

首先，将样品4(500片)填充到褐色玻璃瓶(第一硝子公司制、PS-10K(棕色))中，盖上钢制盖子(荒木工业公司制、No.10-13(L))而制成气密状态。与试验例3同样地测定在保存温度25℃、相对湿度75％保管19个月后的样品4中的化合物2的含量，作为脱氧剂不存在条件下的化合物2的含量。

然后，将样品4(500片)填充于褐色玻璃瓶中，加入脱氧剂(三菱瓦斯化学公司制、AGELESS ZM、ZM-1)，盖上钢制盖子并以关闭扭矩200～220N·cm制成气密状态。与试验例3同样地测定出在保存温度25℃、相对湿度75％保管19个月后的样品4中的化合物2的含量，作为脱氧剂存在条件下的化合物2的含量。

将结果表示于表9中。

[表9]

脱氧剂	化合物2的含量(％)
		不存在条件下	1.5
存在条件下	0.4

在脱氧剂的不存在条件下，化合物2增加至1.5％。另一方面，在脱氧剂的存在条件下，化合物2的量为0.4％，利用脱氧剂的添加可以抑制保管期间中的增加。

产业上的可利用性

根据本发明，能够提供抑制了ED-71的分解的、软胶囊以外的剂形的ED-71制剂。

Claims (8)

1.一种制造方法，是包含ED-71及(1R，2R，3R，5Z)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇的药物组合物的制造方法，

所述制造方法包括：

制备包含ED-71的油脂溶液和水溶性高分子的水溶液的水包油型乳化液的工序、

使水包油型乳化液附着于或吸附于赋形剂的工序、以及

使水包油型乳化液干燥的工序，

此处，所述水溶性高分子选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中。

2.根据权利要求1所述的制造方法，其中，

水包油型乳化液与赋形剂的重量比为1：4～1：20。

3.根据权利要求1或2所述的制造方法，其中，

赋形剂选自糖或糖醇类中。

4.根据权利要求3所述的制造方法，其中，

赋形剂为甘露醇。

5.一种药物组合物，是包含ED-71及(1R，2R，3R，5Z)-2-(3-羟基丙氧基)-7，8-环氧-9，10(19)-开环胆甾-5，10-二烯-1，3，25-三醇的药物组合物，

在赋形剂中或赋形剂的表面包含由包覆剂包覆了的粒子，所述包覆剂包含选自羟丙甲纤维素及羟丙基纤维素中的水溶性高分子，

该粒子包含ED-71的油脂溶液。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其中，

赋形剂选自糖或糖醇类中。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其中，

赋形剂为甘露醇。

8.根据权利要求5～7中任一项所述的药物组合物，其为被HPMC膜包衣了的包衣片。

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