CN112353720B - 一种高效提取迷迭香抗氧化活性组分的工艺方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种高效提取迷迭香抗氧化活性组分的工艺方法，迷迭香干叶通过闪式提取工艺，合并提取液脱醇后过滤，滤饼用稀的氢氧化钠溶液溶解后再用稀盐酸调节pH析出沉淀，沉淀复溶后用活性炭脱色，去除活性炭等不溶物后干燥得迷迭香脂溶性抗氧化组分。ORAC分别检测抗氧化活性，闪式提取与传统回流提取工艺相比，提取率高，提取物抗氧化活性高，操作简便，节能降耗。
Description
技术领域
本发明属于天然产物化学植物成分提取分离技术领域，具体涉及一种高效提取迷迭香抗氧化活性组分的工艺方法。
背景技术
迷迭香(Rosmarinus officinalis L.)为唇形科灌木，在我国云贵地区广泛栽培。作为传统的香料和食品添加剂，迷迭香具有很强的抗氧化能力，是公认具有高效抗氧化活性的植物，其主要利用部位为叶片。
闪式提取技术是一种用于植物软、硬材料快速提取的新型提取技术。依靠高速机械剪切力和超动分子渗滤技术，在室温及溶剂存在下数十秒钟内把植物的根、茎、叶、花、果实等物料破碎至细微颗粒，并使有效成分迅速达到组织内外平衡，通过过滤达到提取之目的。能最大限度保护植物有效成分，不会受热破坏，溶剂用量小，提取时间短，效率高，且刀具耐磨，结构紧凑，使用安全可靠。具有快速高效、常温提取、使用广泛、节能降耗等优点。
目前，市场上的迷迭香抗氧化产品的提取方式为回流提取，抗氧化活性弱，操作上面比较复杂，提取能耗高，提取率比较低。
发明内容
有鉴于此，本发明期望提供高效提取迷迭香抗氧化成分的方法，与现有回流提取方法相比，可以实现缩短提取时间，减少提取能耗，提高提取率，提取物抗氧化活性高、操作简便。
为达到上述目的，本发明采用一种高效取迷迭香抗氧化组分的工艺方法，具体包括以下步骤：
(1)首先迷迭香干叶粉碎成粉，用提取溶剂进行闪式提取；提取液过滤，滤渣再加入提取溶剂进行闪式提取，合并所有提取液；
(2)取步骤(1)提取液减压浓缩，脱除乙醇；过滤，得滤液和滤饼；
(3)步骤(2)中所得滤饼，用NaOH溶液溶解；
(4)搅拌下，往步骤(3)中所得的NaOH溶液中缓慢加入HCl溶液，调节pH，静置，析出沉淀；
(5)进行过滤，得滤液和滤饼，滤饼用有机溶剂进行复溶，然后用活性炭脱色；
(6)在进行过滤，去除步骤(5)产生的不溶性成分，干燥，得迷迭香脂溶性抗氧化组分；
(7)步骤(2)中所得滤液，用活性炭脱色；
(8)过滤，去除步骤(7)产生的不溶性成分，干燥，得迷迭香水溶性抗氧化组分。
进一步的，提取溶剂优选为：乙醇含量为70％～90％的乙醇水，迷迭香干叶粉末与溶剂的料液比为1:8～1:12，闪式提取时间为30s～1min，提取次数为1～3次；
进一步的，NaOH溶液的浓度为0.05％～0.5％；
进一步的，用于复溶的溶剂优选为：步骤(2)浓缩过程中产生的回收乙醇(酒精度为70％～95％)，复溶之后，脱色时活性炭的用量为1％～4％(m/V)，脱色温度为50～70℃，脱色时间为30～60min。
进一步的，滤液脱色时活性炭的用量为1％～4％(m/V)，脱色温度为50～70℃，脱色时间为30～60min；
进一步的，本发明所使用的过滤方法包含但不限于减压抽滤、超滤、纳滤、离心等。
本发明的有益效果：
本发明所述的从迷迭香中提取抗氧化组分的方法，与传统提取方法相比，操作简便，缩短提取时间，节能降耗，提取率高，抗氧化活性强的特点。本发明工艺流程相对简单，所用试剂种类较少，简单、易得，实验结果重复性较好，具有较高的应用推广价值。
附图说明：
图1为迷迭香提取物(传统回流提取、闪式提取)在三次不同工艺参数制备的ORAC活性比较；
图2为闪式提取迷迭香脂溶性抗氧化成分流程。
具体实施方式
下文将结合具体实施例对本发明的技术方案做更进一步的详细说明，下列实施例仅为示例性地说明和解释本发明，而不应被解释为对本发明保护范围的限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术均涵盖在本发明旨在保护的范围内。
本发明提供如下技术方案：一种高效取迷迭香抗氧化组分的工艺方法，具体包括以下步骤：
(1)首先迷迭香干叶粉碎成粉，用提取溶剂进行闪式提取；提取液过滤，滤渣再加入提取溶剂进行闪式提取，合并所有提取液；
(2)取步骤(1)提取液减压浓缩，脱除乙醇；过滤，得滤液和滤饼；
(3)步骤(2)中所得滤饼，用NaOH溶液溶解；
(4)搅拌下，往步骤(3)中所得的NaOH溶液中缓慢加入HCl溶液，调节pH，静置，析出沉淀；
(5)进行过滤，得滤液和滤饼，滤饼用有机溶剂进行复溶，然后用活性炭脱色；
(6)在进行过滤，去除步骤(5)产生的不溶性成分，干燥，得迷迭香脂溶性抗氧化组分；
(7)步骤(2)中所得滤液，用活性炭脱色；
(8)过滤，去除步骤(7)产生的不溶性成分，干燥，得迷迭香水溶性抗氧化组分。
这个方法操作简便，缩短提取时间，节能降耗，提取率高，抗氧化活性强的特点。
进一步的，提取溶剂优选为：乙醇含量为70％～90％的乙醇水，迷迭香干叶粉末与溶剂的料液比为1:8～1:12，闪式提取时间为30s～1min，提取次数为1～3次；
进一步的，NaOH溶液的浓度为0.05％～0.5％；
进一步的，用于复溶的溶剂优选为：步骤(2)浓缩过程中产生的回收乙醇(酒精度为70％～95％)，复溶之后，脱色时活性炭的用量为1％～4％(m/V)，脱色温度为50～70℃，脱色时间为30～60min。
进一步的，滤液脱色时活性炭的用量为1％～4％(m/V)，脱色温度为50～70℃，脱色时间为30～60min；
进一步的，本发明所使用的过滤方法包含但不限于减压抽滤、超滤、纳滤、离心等。
方案整体的工艺流程相对简单，所用试剂种类较少，简单、易得，实验结果重复性较好。
实施例1：
传统方法：
迷迭香干叶100g，粉碎，用0.8L 90％乙醇(料液比1:8)浸泡30min后于80℃下提取90min，放出滤液后，滤渣中再加入0.8L 90％乙醇(料液比1:8)80℃下提取90min，合并提取液；使用旋转蒸发仪60℃减压浓缩，彻底脱除乙醇后抽滤，得滤液1和滤饼；所得滤饼用0.05％NaOH溶液(1:6，m/V)溶解，待滤饼全部溶解后在搅拌下缓慢加入0.5％盐酸溶液，调节pH至2，静置过夜至沉淀析出完全；抽滤后将滤饼用回收乙醇复溶，然后用1％(m/V)活性炭70℃脱色30min；抽滤去除不溶物后干燥，得迷迭香脂溶性抗氧化成分产品MDX A:5.83g。
本发明方法：
迷迭香干叶100g，粉碎，用0.8L 90％乙醇(料液比1:8)，置于闪式提取器中，提取1min放出滤液后，滤渣中再加入0.8L 90％乙醇(料液比1:8)提取1min，合并提取液；使用旋转蒸发仪60℃减压浓缩，彻底脱除乙醇后抽滤，得滤液1和滤饼；所得滤饼用0.05％NaOH溶液(1:6，m/V)溶解，待滤饼全部溶解后在搅拌下缓慢加入0.5％盐酸溶液，调节pH至2，静置过夜至沉淀析出完全；抽滤后将滤饼用回收乙醇复溶，然后用1％(m/V)活性炭70℃脱色30min；抽滤去除不溶物后干燥，得迷迭香脂溶性抗氧化成分产品MDX B:6.13g。
将MDX A、B分别溶于水中，配置浓度为50μg/mL,5X浓度稀释4个梯度，各梯度分别取50μL置于96孔板中，再加入100μL,100nM荧光素钠。37℃孵育10min，加入100mM AAPH 50μL，每30s检测一次荧光强度，共检测1h。计算荧光曲线下面积AUC，净面积＝AUC样品-AUC磷酸盐缓冲液，并绘制抗氧化剂浓度、待测剂浓度-净面积标准曲线。比较MDX A与MDX B的抗氧化活性。经计算得出：MDX A、B的ORAC值分别为150.70、993.58。
实施例2：
传统方法：
迷迭香干叶500g，粉碎，用6L 70％乙醇(料液比1:12)浸泡30min后于80℃下提取90min，放出滤液后，滤渣中再加入6L 70％乙醇(料液比1:12)80℃下提取90min，提取2次。合并3次提取液；使用旋转蒸发仪60℃减压浓缩，彻底脱除乙醇后抽滤，得滤液和滤饼；所得滤饼用0.5％NaOH溶液(1:6，m/V)溶解，待滤饼全部溶解后在搅拌下缓慢加入0.5％盐酸溶液，调节pH 2，静置过夜至沉淀析出完全；抽滤后将滤饼用回收乙醇复溶，然后用4％(m/V)活性炭50℃脱色60min；抽滤去除不溶物后干燥，得迷迭香脂溶性抗氧化成分产品MDX A:27.64g。
本发明方法：
迷迭香干叶500g，粉碎，用6L 70％乙醇(料液比1:12)，置于闪式提取器中，提取30s放出滤液后，滤渣中再加入6L 70％乙醇(料液比1:12)提取30s，提取2次。合并3次提取液；使用旋转蒸发仪60℃减压浓缩，彻底脱除乙醇后抽滤，得滤液和滤饼；所得滤饼用0.5％NaOH溶液(1:6，m/V)溶解，待滤饼全部溶解后在搅拌下缓慢加入0.5％盐酸溶液，调节pH至pH＝2，静置过夜至沉淀析出完全；抽滤后将滤饼用回收乙醇复溶，然后用4％(m/V)活性炭50℃脱色60min；抽滤去除不溶物后干燥，得闪式迷迭香脂溶性抗氧化成分产品MDX B:32.33g。
将MDX A、B分别溶于水中，配置浓度为50μg/mL,5X浓度稀释4个梯度，各梯度分别取50μL置于96孔板中，再加入100μL,100nM荧光素钠。37℃孵育10min，加入100mM AAPH 50μL，每30s检测一次荧光强度，共检测1h。计算荧光曲线下面积AUC，净面积＝AUC样品-AUC磷酸盐缓冲液，并绘制抗氧化剂浓度、待测剂浓度-净面积标准曲线。比较MDX A与MDX B的抗氧化活性。经计算得出：MDX A、B的ORAC值分别为177.36、987.50。
实施例3：
迷迭香干叶1000g，粉碎，进行试验，实施条件与实施例1一致，最终得到回流提取迷迭香脂溶性抗氧化成分59.45g和闪式提取迷迭香脂溶性抗氧化成分64.36g；ORAC值分别为138.71、961.23。
具体对比表见图1
对三次不同工艺参数条件下制备的迷迭香提取物(传统工艺、闪式提取)进行ORAC活性比较，如图1所示，闪式提取迷迭香提取物ORAC活性显著高于传统工艺制备，因此闪式提取迷迭香工艺在缩短制备时间的基础上还大大提高了迷迭香的抗氧化能力与传统提取方法相比，操作简便，缩短提取时间，节能降耗，提取率高，抗氧化活性强的特点。
将实施例3制备的回流提取迷迭香脂溶性抗氧化成分和闪式提取的迷迭香脂溶性抗氧化成分分别制备抗氧化乳液。
化妆品制备方法1：按照表1的配方，分别称取A、B、C、D相的原料，将A相加热至85℃，完全溶解后，加入B相，继续在700rpm转速下搅拌，至混合物完全溶解，关闭加热，加入C相，继续搅拌10分钟；冷却至60℃时，加入D相，搅拌均匀，冷却至常温，出料，得含传统回流提取的迷迭香脂溶性抗氧化成分为抗氧化乳液A、含闪式提取的迷迭香脂溶性抗氧化成分为抗氧化乳液B。
表1迷迭香抗氧化乳液的配方
将抗氧化乳液A、B，与一款现有具有抗氧化功效的乳液(对照组)进行对比测试；测试对象：分为3个实验组，每个实验组16名25-50岁的女性志愿者；测试区域：面部；测试方法：每天早晚清洁面部后，涂抹，持续4周，观察抗氧化效果。测评结果如下表：
表2人体功效测评结果
由表2可见，使用抗氧化乳液A和抗氧化乳液B的抗氧化效果明显的人数明显多于对照组，且抗氧化乳液B(闪式提取)明显优于抗氧化乳液A(回流提取)。
需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限。
Claims (3)
1.一种高效提取迷迭香抗氧化活性组分的工艺方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）首先迷迭香干叶粉碎成粉，用提取溶剂进行闪式提取；提取液过滤，滤渣再加入提取溶剂进行闪式提取，合并所有提取液；
（2）取步骤（1）提取液减压浓缩，脱除提取溶剂；过滤，得滤液和滤饼；
（3）步骤（2）中所得滤饼，用NaOH溶液溶解；
（4）搅拌下，往步骤（3）中所得的NaOH溶液中缓慢加入HCl溶液，调节pH，静置，析出沉淀；
（5）进行过滤，得滤液和滤饼，滤饼用有机溶剂进行复溶，然后用活性炭脱色；
（6）在进行过滤，去除步骤（5）产生的不溶性成分，干燥，得迷迭香脂溶性抗氧化组分；
（7）步骤（2）中所得滤液，用活性炭脱色；
（8）过滤，去除步骤（7）产生的不溶性成分，干燥，得迷迭香水溶性抗氧化组分；
所述步骤（1）中，提取溶剂为：乙醇含量70%~90%的乙醇水，迷迭香干叶粉末与提取溶剂的料液比为1:8~1:12，闪式提取时间为30s~1min，提取次数为1~3次；
所述步骤（3）中，NaOH溶液的浓度为0.05%~0.5%；
所述步骤（4）中，用于调节pH的HCl溶液浓度为0.1%~1%，pH调节至2~3；
所述步骤（5）中，用于复溶的溶剂为：步骤（2）浓缩过程中产生的回收乙醇，复溶之后，脱色时活性炭的用量为1%~4%（m/V），脱色温度为50~70℃，脱色时间为30~60min。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（7）中，滤液脱色时活性炭的用量为1%~4%（m/V），脱色温度为50~70℃，脱色时间为30~60min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述过滤方法为：减压抽滤、超滤、纳滤或离心。
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|---|---|---|---|---|
| US4450097A (en) * | 1981-02-26 | 1984-05-22 | Lion Corporation | Antioxidative compound, method of extracting same from rosemary, and use of same |
| CN103848740A (zh) * | 2012-11-30 | 2014-06-11 | 沈阳药科大学 | 一种从植物油粕中制备迷迭香酸的方法 |
| CN106831403A (zh) * | 2017-01-18 | 2017-06-13 | 河南佳尚农业科技发展有限公司 | 一种从迷迭香中提取脂溶性和水溶性抗氧化剂的方法 |
| CN110283226A (zh) * | 2019-08-06 | 2019-09-27 | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 | 一种提取迷迭香中抗氧化成分的方法 |
-
2020
- 2020-11-03 CN CN202011206856.6A patent/CN112353720B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| "迷迭香天然抗氧化剂的提取工艺及活性测定的研究";廖霞俐;中国优秀博硕士学位论文全文数据库(硕士) 工程科技I辑》(第01期);B018-18:10-11,17-20 * |
| 迷迭香抗氧化提取物的应用研究;刘士德 等;食品科技(第02期);59-62 * |
| 闪式提取技术的研究进展;孟庆举 等;《中国实验方剂学杂志》;第19卷(第19期);349-355 * |
Also Published As
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|---|---|
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