CN112335796A - 一种含有螺旋藻多肽的组合物及其应用 - Google Patents

一种含有螺旋藻多肽的组合物及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物多肽制备技术领域，具体涉及一种含有螺旋藻多肽的组合物及其应用。本发明提供的含有螺旋藻多肽的组合物以下重量份数的原料组成：螺旋藻多肽20～35份，复合载体12～28份，吸收促进剂6～10份，抗菌肽3～8份，复合氨基酸1～3份，糖萜素1～3份，纤维素酶1～3份。本发明提供的含有螺旋藻多肽，经过破壁、酶解、发酵、过滤等制备步骤，营养物质丰富，比普通的植物蛋白肽吸收利用率高，同时还具有多种生理活性功能，还具有明显的抗氧化功能，能有效提高免疫能力和肠道吸收能力，达到很好的抗腹泻效果，有效减少了疾病的发生。

Description

一种含有螺旋藻多肽的组合物及其应用
技术领域
本发明属于生物多肽制备技术领域，具体涉及一种含有螺旋藻多肽的组合物及其应用。
背景技术
仔猪消化道类疾病严重制约了生猪健康养殖的发展(“猪系统性疾病的流行现状与防控措施”，陈焕春，兽医导刊，2017年第11期，第6页摘要第1行，公开日2017年06月30日)。据统计，每年因仔猪消化道疾病的发病率高达50.47％，细菌性疾病致死率达50％以上，病毒性腹泻致死率可达到100％。近30年来，我国仔猪消化道类疾病在检测、防控等方面有了明显突破，但效果却不尽如人意，畜禽疫病不断暴发，新病不断出现。
现代畜禽养殖过程中，为了预防和治疗动物疾病，常使用过量抗生素产品来确保动物健康，但过量抗生素的使用常导致动物肉制品及其产物的品质下降和抗生素耐性增强，通过食物链的传递导致人类健康也受到抗生素问题的严重影响，同时长期使用或滥用抗生素后，在抑制致病微生物的同时，也杀灭了动物体内正常的有益微生物菌群，使机体正常微生态体系失衡，造成动物内源性感染或二重感染。同时畜禽对抗生素产生依赖，抑制动物免疫系统的生长发育或降低了动物的免疫功能，使抗病能力下降。为了克服抗生素等药物添加剂带来的种种弊端，世界各国的科学家努力寻求和开发无毒副作用的新型饲料添加剂。
蛋白质为动物的主要营养物质，目前饲料中大多采用直接添加的方式，利用率不高，食物中蛋白质消化吸收实际上也是被消化道蛋白酶水解成小肽后，利用肠粘膜纹状缘存在的肽载体主动转运机制来完成的。我国动物蛋白原料资源非常短缺，大多依赖进口。优质动物源性蛋白的价格不断攀升，已严重影响到我国养殖业的利润水平。优质蛋白质原料的安全问题和资源短缺是限制饲料发展的重要因素。利用现代生物技术开发优质植物源蛋白质，逐步替代动物蛋白具有重要意义。
如中国专利CN103082136B公开了一种猪用饲料添加剂，组成如下：酵母抽提物10-25份，耐高温乳酸菌10-18份，大豆多肽5-10份，灵芝子实体8-18份，麸皮5-15份，虫草菌丝体10-22份，低聚果糖1-3份，棉籽糖1-4份，纤维素酶1-3份，蛋白酶1-2份，混合氨基酸1-3份，氨基酸螯合铜0.5-2份。中国专利申请CN106387398A公开了一种促进仔猪生长发育并增强机体免疫力的饲料酵母添加剂及其制备方法，该饲料添加剂由下列重量份的原料制成：废弃啤酒酵母100-120、氯化钙4-5、碳酸钠7-8、乳酸钠5-8、发酵血粉43-45、鲳鱼肉粉8-10、马铃薯淀粉13-15、白芸豆17-19、大米23-27、大豆多肽4-5、桑叶蛋白粉7-8、芝麻粕23-26、花蛤粉5-6、海带粉3-4、茴香籽0.4-0.5、甘草提取物0.2-0.4、芦荟提取物0.2-0.4、活性酵母菌粉0.2-0.3、羧甲基壳聚糖1.5-1.8、叶酸1.2-1.4、胆碱0.5-0.8。以上发明中的饲料添加剂虽然无抗生素的添加，能够提饲料添加剂的营养价值，加快仔猪的生长速度，但是对于仔猪抗腹泻、抗氧化性及提高免疫力等方面效果不明显。
所以，需要研制一种含有植物多肽的饲料添加剂，能有效促进动物的新陈代谢，提高机体的抗病能力，促进动物生长，同时能够有效辅助仔猪对饲料进行消化吸收，提高饲料利用率。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种含有螺旋藻多肽的组合物及其应用。本发明提供的含有螺旋藻多肽的组合物营养物质丰富，比普通的植物蛋白肽吸收利用率高，同时还具有多种生理活性功能，有效的提高了猪仔的生长率，还具有明显的抗氧化功能，同时有效提高了动物的免疫能力和肠道吸收能力，达到很好的抗腹泻效果，有效减少了疾病的发生。
本发明的技术方案是：
一种含有螺旋藻多肽的组合物，包括如下组分及其重量份数：
螺旋藻多肽20～35份，复合载体12～28份，吸收促进剂6～10份，抗菌肽3～8份，复合氨基酸1～3份，糖萜素1～3份，纤维素酶1～3份。
进一步地，所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：
螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
进一步地，所述螺旋藻多肽的制备方法如下：
S1、将干燥的螺旋藻粉碎并过20～80目筛，然后置于-10～20℃条件下，冷冻1～2h后，然后在30～40℃条件下，进行超声波破壁处理，得到螺旋藻破壁粉；
S2、向步骤S1所得的螺旋藻破壁粉加入其质量2～7倍的水，然后用氢氧化钠溶液调节其pH值至7～8，然后加入复合酶在40～60℃下进行酶解2～8小时后，在90℃下灭酶10min，降至室温，过滤得螺旋藻酶解液；
S3、将步骤S2所得螺旋藻酶解液中加入酵母菌粉，20～32℃下密封发酵5～18小时，发酵完成后搅拌均匀，放入105℃烘箱中灭活，冷却至常温，然后离心，取上清液通过超滤膜过滤，过截止分子量≤10000Da的超滤膜系统，得螺旋藻发酵液；所述酵母菌粉的添加量为螺旋藻酶解液的1～3％；
S4、将步骤S3所得的螺旋藻发酵液，真空浓缩，喷雾干燥，即得螺旋藻多肽。
更进一步地，所述螺旋藻多肽的制备方法中，步骤S2中的复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量比3:1组成，添加量为螺旋藻破壁粉质量的1.2～3.4％。
进一步地，所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比12～17:6～11:1～5组成。
进一步地，所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比15:9:4组成。
进一步地，所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸的两种或以上。
进一步地，所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、低聚果糖、壳聚糖、海藻糖中的两种或以上。
本发明还提供了一种所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法，所述制备步骤如下：
将螺旋藻多肽，复合载体，吸收促进剂，抗菌肽，复合氨基酸，糖萜素和纤维素酶过40～60目筛，然后经混合机混合均匀，即得。
进一步地，本发明还提供了所述的含有螺旋藻多肽的组合物在制备仔猪饲料添加剂中的应用。
进一步地，所述含有螺旋藻多肽的组合物在饲料中的添加量为3～8％。
螺旋藻(Spirulina)是人类迄今为止所发现的最优质的纯天然蛋白质食品源，其蛋白质含量高达60～70％，叶绿素含量是蔬菜的10倍多，并且含有人和动物必需的常量和微量元素，是一种理想的营养品，其丰富的蛋白质和氨基酸为开发螺旋藻生物活性肽提供了良好的物质基础。本发明提供的含有螺旋藻多肽的组合物，经过破壁、酶解、发酵、过滤等制备步骤，制得的螺旋藻多肽具有良好的抗氧化能力，能够提高处理过剩氧自由基能力，能够平衡抗氧化体系，同时与添加的由山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖组成的吸收促进剂协同增效，不仅能更好的提高抗氧化性能，还可以提高螺旋藻蛋白的溶解性和体内吸收利用率，同时也促进胃肠蠕动、增进食欲、促进营养物质的吸收和提高饲料利用率的功能。
同时，本发明含有螺旋藻多肽的组合物营养物质丰富，各组分协同作用，比普通的植物蛋白肽吸收利用率高，同时还具有多种生理活性功能。螺旋藻多肽多肽还具有较强的免疫调节活性，可有效提高被饲养动物的抗病能力、减少药物的使用，从而大大提高被饲养动物肉的安全性。
与现有技术相比，本发明提供的含有螺旋藻多肽的组合物具有以下优势：
(1)本发明提供的含有螺旋藻多肽的组合物营养物质丰富，比普通的植物蛋白肽吸收利用率高，同时还具有多种生理活性功能，有效的提高了猪仔的生长率，同时有效提高了动物的免疫能力和肠道吸收能力，克服了抗生素滥用带来的副作用，为人类提供了安全、绿色的饲料添加剂。
(2)本发明提供的含有螺旋藻多肽的组合物，添加的螺旋藻多肽和吸收促进剂协同作用，在促进仔猪成长的同时，还具有明显的抗氧化功能，达到很好的抗腹泻效果，有利于增强仔猪体质，提高机体免疫力，减少疾病发生，并且无激素、无化学残留。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的保护范围之内。
抗菌肽，货号：KL-P054，购自上海康郎生物科技有限公司；糖萜素，购自南京邦诺生物科技有限公司；纤维素酶，购自上海麦克林生化科技有限公司；山茱萸提取物和香附提取物，购自陕西斯诺特生物技术有限公司；甘露寡糖，购自山东谷硕生物科技有限公司。
本发明所用的其他试剂均为常用试剂，均可在常规试剂生产销售公司购买。
实施例1一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：
螺旋藻多肽20份，复合载体12份，吸收促进剂6份，抗菌肽3份，复合氨基酸1份，糖萜素1份，纤维素酶1份。
所述螺旋藻多肽的制备方法如下：
S1、将干燥的螺旋藻粉碎并过2目筛，然后置于-20℃条件下，冷冻1h后，然后在30℃条件下，进行超声波破壁处理，得到螺旋藻破壁粉；
S2、向步骤S1所得的螺旋藻破壁粉加入其质量2倍的水，然后用氢氧化钠溶液调节其pH值至7，然后加入复合酶在40℃下进行酶解2小时后，在90℃下灭酶10min，降至室温，过滤得螺旋藻酶解液；
S3、将步骤S2所得螺旋藻酶解液中加入酵母菌粉，20℃下密封发酵5小时，发酵完成后搅拌均匀，放入105℃烘箱中灭活，冷却至常温，然后离心，取上清液通过超滤膜过滤，过截止分子量≤10000Da的超滤膜系统，得螺旋藻发酵液；所述酵母菌粉的添加量为螺旋藻酶解液的1％；
S4、将步骤S3所得的螺旋藻发酵液，真空浓缩，喷雾干燥，即得螺旋藻多肽。
所述螺旋藻多肽的制备方法中，步骤S2中的复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量比3:1组成，添加量为螺旋藻破壁粉质量的1.2％。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比12:11:5组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸和赖氨酸按重量比1:1组成。
所述复合载体为玉米粉和低聚果糖按重量比1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法如下：
将螺旋藻多肽，复合载体，吸收促进剂，抗菌肽，复合氨基酸，糖萜素和纤维素酶过40目筛，然后经混合机混合均匀，即得。
实施例2一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
所述螺旋藻多肽的制备方法如下：
S1、将干燥的螺旋藻粉碎并过60目筛，然后置于-15℃条件下，冷冻1.5h后，然后在35℃条件下，进行超声波破壁处理，得到螺旋藻破壁粉；
S2、向步骤S1所得的螺旋藻破壁粉加入其质量6倍的水，然后用氢氧化钠溶液调节其pH值至7.5，然后加入复合酶在50℃下进行酶解6小时后，在90℃下灭酶10min，降至室温，过滤得螺旋藻酶解液；
S3、将步骤S2所得螺旋藻酶解液中加入酵母菌粉，28℃下密封发酵15小时，发酵完成后搅拌均匀，放入105℃烘箱中灭活，冷却至常温，然后离心，取上清液通过超滤膜过滤，过截止分子量≤10000Da的超滤膜系统，得螺旋藻发酵液；所述酵母菌粉的添加量为螺旋藻酶解液的2％；
S4、将步骤S3所得的螺旋藻发酵液，真空浓缩，喷雾干燥，即得螺旋藻多肽。
所述螺旋藻多肽的制备方法中，步骤S2中的复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量比3:1组成，添加量为螺旋藻破壁粉质量的3.0％。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比15:9:4组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比2:1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖和海藻糖按重量比1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法，所述制备步骤如下：
将螺旋藻多肽，复合载体，吸收促进剂，抗菌肽，复合氨基酸，糖萜素和纤维素酶过50目筛，然后经混合机混合均匀，即得。
实施例3一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：
螺旋藻多肽35份，复合载体28份，吸收促进剂10份，抗菌肽8份，复合氨基酸3份，糖萜素3份，纤维素酶3份。
所述螺旋藻多肽的制备方法如下：
S1、将干燥的螺旋藻粉碎并过280目筛，然后置于-10℃条件下，冷冻2h后，然后在40℃条件下，进行超声波破壁处理，得到螺旋藻破壁粉；
S2、向步骤S1所得的螺旋藻破壁粉加入其质量7倍的水，然后用氢氧化钠溶液调节其pH值至8，然后加入复合酶在60℃下进行酶解8小时后，在90℃下灭酶10min，降至室温，过滤得螺旋藻酶解液；
S3、将步骤S2所得螺旋藻酶解液中加入酵母菌粉，32℃下密封发酵18小时，发酵完成后搅拌均匀，放入105℃烘箱中灭活，冷却至常温，然后离心，取上清液通过超滤膜过滤，过截止分子量≤10000Da的超滤膜系统，得螺旋藻发酵液；所述酵母菌粉的添加量为螺旋藻酶解液的3％；
S4、将步骤S3所得的螺旋藻发酵液，真空浓缩，喷雾干燥，即得螺旋藻多肽。
所述螺旋藻多肽的制备方法中，步骤S2中的复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量比3:1组成，添加量为螺旋藻破壁粉质量的3.4％。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比17:6:1组成。
所述复合氨基酸为赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖、壳聚糖、海藻糖按重量比1:1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法，所述制备步骤如下：
将螺旋藻多肽，复合载体，吸收促进剂，抗菌肽，复合氨基酸，糖萜素和纤维素酶过60目筛，然后经混合机混合均匀，即得。
对比例1一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
所述螺旋藻多肽的制备方法如下：
S1、将干燥的螺旋藻粉碎并过60目筛，然后置于-15℃条件下，冷冻1.5h后，然后在35℃条件下，进行超声波破壁处理，得到螺旋藻破壁粉；
S2、向步骤S1所得的螺旋藻破壁粉加入其质量6倍的水，然后用氢氧化钠溶液调节其pH值至7.5，然后加入复合酶在50℃下进行酶解6小时后，在90℃下灭酶10min，降至室温，过滤得螺旋藻酶解液；
S3、将步骤S2所得的螺旋藻酶解液，真空浓缩，喷雾干燥，即得螺旋藻多肽。
所述螺旋藻多肽的制备方法中，步骤S2中的复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量比3:1组成，添加量为螺旋藻破壁粉质量的3.0％。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比15:9:4组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比2:1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖和海藻糖按重量比1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法，所述制备步骤如下：
将螺旋藻多肽，复合载体，吸收促进剂，抗菌肽，复合氨基酸，糖萜素和纤维素酶过50目筛，然后经混合机混合均匀，即得。
与实施例2的区别在于，所述螺旋藻多肽的制备中未进行发酵处理。
对比例2一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
所述螺旋藻多肽的制备方法与实施例2类似。
所述吸收促进剂为香附提取物和甘露寡糖按重量比9:4组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比2:1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖和海藻糖按重量比1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备步骤与实施例2类似
与实施例2的区别在于，所述吸收促进剂未添加山茱萸提取物。
对比例3一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
所述螺旋藻多肽的制备方法与实施例2类似。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物和甘露寡糖按重量比15:4组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比2:1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖和海藻糖按重量比1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备步骤与实施例2类似
与实施例2的区别在于，所述吸收促进剂未添加香附提取物。
对比例4一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
所述螺旋藻多肽的制备方法与实施例2类似。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物按重量比15:9组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比2:1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖和海藻糖按重量比1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备步骤与实施例2类似。
与实施例2的区别在于，所述吸收促进剂未添加甘露寡糖。
对比例5一种含有螺旋藻多肽的组合物
所述的含有螺旋藻多肽的组合物，由如下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
所述螺旋藻多肽的制备方法与实施例2类似。
所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比1:1:1组成。
所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸按重量比2:1:1:1组成。
所述复合载体为谷朊粉、低聚果糖和海藻糖按重量比1:1:1组成。
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法，所述制备步骤如下：
所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备步骤与实施例2类似。
与实施例2的区别在于，所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比1:1:1组成。
试验例一、抗氧化性能测试
1.试验材料：实施例1～3、对比例1～5制备的含有螺旋藻多肽的组合物。
2.试验方法：分别测定实施例1～3、对比例1～5所得含有螺旋藻多肽的组合物清除DPPH(1，1-二苯基苦基苯肼)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力。具体步骤如下：
(1)DPPH自由基清除能力的测定
分别将实施例1～3、对比例1～5配成0.5mg/mL的溶液，另配制浓度为1×10-4mol/LDPPH无水乙醇溶液，避光保存。取2mL试样与2mLDPPH无水乙醇溶液混合，并剧烈振荡，在室温下反应30min，然后在517nm处测定吸光值Ai。空白组以等体积无水乙醇溶液代替DPPH溶液，对照组以等体积蒸馏水代替样品溶液。DPPH自由基的清除率用下式计算：
Figure BDA0002765964430000101
式中：A0—对照组吸光度；Ai—样品组吸光度；Aj—空白组吸光度。
(2)超氧阴离子自由基清除能力的测定
恒温25℃下，取50mmol/LpH8.2的Tris-HCl缓冲溶液3mL(其中含1mmol/L的EDTA)，50mmol/L邻苯三酚10μL，迅速混匀，置于1cm石英比色皿中，在325nm处每隔30s测定吸光度一次，反应4.5min结束，以吸光度对时间作图，求得斜率即为邻苯三酚自氧化速率为A0。在3mLpH8.250mmol/L的Tris-HCl缓冲液中加适量含有螺旋藻多肽的组合物，用上述方法测样品325nm处的邻苯三酚白氧化速率As。清除率按下式计算：
Figure BDA0002765964430000102
(3)羟基自由基清除能力的测定
取0.1mL的FeSO4-EDTA混合液(10mmol/mL)于试管中，加入0.3mL2-脱氧核糖(10mmol/mL)，然后分别加入0.2mL实施例1～3、对比例1～5制备的含有螺旋藻多肽的组合物浓度为0.5mg/mL，用pH7.4的0.1mol/L磷酸缓冲液定容至1.9mL，再加入0.1mLH2O2(10mmol/mL)，混匀后置于37℃恒温水浴中反应1h。之后加入1mL2.8％(w/w)三氯乙酸(TCA)溶液和1mL1.0％(w/w)硫代巴比妥酸(TBA)溶液，混匀，沸水浴中反应15min，冷却后在532nm处测定吸光度值。不加入清除剂时的吸光度为Ac，加入样品后若有清除·OH作用，则能抑制氧化产物的生成，其吸光度减少，测得吸光度为As，实际空白吸光以A0表示，则清除能力下式计算：
Figure BDA0002765964430000111
3.试验结果
试验结果如表1所示。
表1抗氧化性能检测结果
Figure BDA0002765964430000112
由表1可知：实施例1～3组制备的含有螺旋藻多肽的组合物，抗氧化效果明显，其中实施例2组效果最好，其DPPH自由基，超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率分别为92.86％，62.44％，86.27％，为本发明的最佳实施例。而对比例1～5组与实施例组的试验结果表明，本发明制备的螺旋藻多肽与吸收促进剂进行复配，协同增效，抗氧化能力最强，并且效果优于对比例1～5。
试验例二、本发明的含有螺旋藻多肽的组合物对仔猪生长状况的影响
1、试验材料：本发明实施例1～3，对比例1～5制备的含有螺旋藻多肽的组合物。2、试验方法：在相同的养殖条件下，使用本发明实施例1～3，对比例1～5制备的含有螺旋藻多肽的组合物作为饲料添加剂为试验组，市场上的饲料作为对照组。将270头保育前期的仔猪(40日龄)分为9组，分别为实施例1～3组，对比例1～5组和对照组，每组30头；对照组喂食普通市售饲料，实施例1～3组，对比例1～5组在普通市售饲料中添加本发明实施例1～3，对比例1～5制备的含有螺旋藻多肽的组合物，添加比重为饲料量的5％，饲养30天，观察仔猪平均日增重、腹泻率等情况。
3、试验结果
试验结果如表2所示。
表2本发明的含有螺旋藻多肽的组合物对仔猪生长状况的影响
组别 平均始重(kg) 平均末重(kg) 日增重(kg/天) 腹泻率(％)
实施例1组 13.39 36.49 0.77 6.67
实施例2组 13.31 37.01 0.79 3.33
实施例3组 13.17 35.67 0.75 3.33
对比例1组 13.13 26.03 0.43 16.67
对比例2组 12.65 27.35 0.49 20.00
对比例3组 13.05 28.95 0.53 20.00
对比例4组 12.77 27.47 0.49 23.33
对比例5组 12.94 26.14 0.44 23.33
对照组 12.98 28.58 0.52 20.00
由表2可知，食用添加了本发明实施例1～3制备的含有螺旋藻多肽的组合物的饲料与对照组(普通市售饲料)相比，有效提高了仔猪的日增重，且预防了仔猪的产生腹泻的情况，腹泻率较低，其中实施例2组的效果最好，日增重显著增加，为0.79kg，腹泻率仅为3.33％。结果表明，添加本发明含有螺旋藻多肽的组合物的猪用饲料，对保育前期仔猪的养殖效果好，能有效的提高了猪仔的生长率和免疫力，成本低，可以显著提高仔猪的抗腹泻和饲料转化率，有效提升仔猪饲养经济效益。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (10)

1.一种含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，包括如下组分及其重量份数：螺旋藻多肽20～35份，复合载体12～28份，吸收促进剂6～10份，抗菌肽3～8份，复合氨基酸1～3份，糖萜素1～3份，纤维素酶1～3份。
2.如权利要求1所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，由以下组分及其重量份数组成：螺旋藻多肽30份，复合载体22份，吸收促进剂8份，抗菌肽5份，复合氨基酸2份，糖萜素2份，纤维素酶2份。
3.如权利要求1或2所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，所述螺旋藻多肽的制备方法如下：
S1、将干燥的螺旋藻粉碎并过20～80目筛，然后置于-10～20℃条件下，冷冻1～2h后，然后在30～40℃条件下，进行超声波破壁处理，得到螺旋藻破壁粉；
S2、向步骤S1所得的螺旋藻破壁粉加入其质量2～7倍的水，然后用氢氧化钠溶液调节其pH值至7～8，然后加入复合酶在40～60℃下进行酶解2～8小时后，在90℃下灭酶10min，降至室温，过滤得螺旋藻酶解液；
S3、将步骤S2所得螺旋藻酶解液中加入酵母菌粉，20～32℃下密封发酵5～18小时，发酵完成后搅拌均匀，放入105℃烘箱中灭活，冷却至常温，然后离心，取上清液通过超滤膜过滤，过截止分子量≤10000Da的超滤膜系统，得螺旋藻发酵液；所述酵母菌粉的添加量为螺旋藻酶解液的1～3％；
S4、将步骤S3所得的螺旋藻发酵液，真空浓缩，喷雾干燥，即得螺旋藻多肽。
4.如权利要求3所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，所述螺旋藻多肽的制备方法中，步骤S2中的复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按重量比3:1组成，添加量为螺旋藻破壁粉质量的1.2～3.4％。
5.如权利要求1或2所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比12～17:6～11:1～5组成。
6.如权利要求5所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，所述吸收促进剂为山茱萸提取物、香附提取物和甘露寡糖按重量比15:9:4组成。
7.如权利要求1或2所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，所述复合氨基酸为苏氨酸、赖氨酸、蛋氨酸和色氨酸的两种或以上。
8.如权利要求1或2所述的含有螺旋藻多肽的组合物，其特征在于，所述复合载体为玉米粉、谷朊粉、低聚果糖、壳聚糖、海藻糖中的两种或以上。
9.一种如权利要求1～8任一项所述的含有螺旋藻多肽的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备步骤如下：
将螺旋藻多肽，复合载体，吸收促进剂，抗菌肽，复合氨基酸，糖萜素和纤维素酶过40～60目筛，然后经混合机混合均匀，即得。
10.一种如权利要求1～8任一项所述的含有螺旋藻多肽的组合物在制备仔猪饲料添加剂中的应用。
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