CN112326947A - 肠道菌群代谢产物的检测方法 - Google Patents
肠道菌群代谢产物的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112326947A CN112326947A CN202011204172.2A CN202011204172A CN112326947A CN 112326947 A CN112326947 A CN 112326947A CN 202011204172 A CN202011204172 A CN 202011204172A CN 112326947 A CN112326947 A CN 112326947A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- flora
- solution
- sample
- mobile phase
- metabolic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 title claims abstract description 64
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 title claims abstract description 42
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 claims abstract description 67
- 239000012265 solid product Substances 0.000 claims abstract description 55
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 claims abstract description 52
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 148
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 120
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 56
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 16
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 16
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 14
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- 238000010849 ion bombardment Methods 0.000 claims description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 10
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- -1 argon ions Chemical class 0.000 claims description 6
- 238000000889 atomisation Methods 0.000 claims description 6
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 claims description 6
- 238000004332 deodorization Methods 0.000 claims description 5
- 230000001877 deodorizing effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 5
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims description 4
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000008213 purified water Substances 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 claims description 3
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 claims description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 9
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 8
- 230000010226 intestinal metabolism Effects 0.000 description 5
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/286—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q involving mechanical work, e.g. chopping, disintegrating, compacting, homogenising
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/34—Purifying; Cleaning
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/44—Sample treatment involving radiation, e.g. heat
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/286—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q involving mechanical work, e.g. chopping, disintegrating, compacting, homogenising
- G01N2001/2866—Grinding or homogeneising
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明提供了肠道菌群代谢产物的检测方法，其通过收集目标对象的粪便样本和呼出的气体，并对该粪便样本进行处理以得到相应的流动相溶液，再对该流动相溶液进行色谱分析处理，以此确定菌群代谢固体产物的类型和/或含量，并且还对该呼出的气体进行分析处理，以此确定肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量，该检测方法能够全面地和准确地对肠道菌群的代谢固体产物和代谢气体产物进行检测分析，从而提高肠道菌群代谢产物检测的可靠性和有效性。
Description
技术领域
本发明涉及微生物培养的技术领域，特别涉及肠道菌群代谢产物的检测方法。
背景技术
肠道菌群是人体肠道内与肠粘膜黏附的微生物，其能够对人体摄入的食物进行生物转化，该肠道菌群产生的代谢产物会影响人体的消耗系统的运作。当人体发生肠道疾病时，人体内部的肠道菌群会发生失调，此时该肠道菌群产生的代谢产物相比于正常状态下的肠道菌群产生的代谢产物，无论在代谢产物的类型和/或含量都会存在差异，而通过对肠道菌群代谢产物的类型和/或含量进行检测分析，能够有效地诊断人体的消化系统、特别是肠道系统是否发生病变。但是，现有技术对于肠道菌群代谢产物的检测都只是局限于对个别类型的代谢产物进行检测，其无法全面地和准确地对肠道菌群的代谢固体产物和代谢气体产物进行检测分析，这大大地降低了肠道菌群代谢产物检测的可靠性和有效性。
发明内容
针对现有技术存在的缺陷，本发明提供肠道菌群代谢产物的检测方法，其通过收集目标对象的粪便样本，并对该粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液，并对该粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液，再获取该流动相溶液的色谱信息，并根据该色谱信息，确定该菌群代谢产物的类型和/或含量，以及收集该目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对该呼出的气体进行分析处理，以此确定该目标对象的肠道代谢产出气体的类型和/或含量；可见，该肠道菌群代谢产物的检测方法通过收集目标对象的粪便样本和呼出的气体，并对该粪便样本进行处理以得到相应的流动相溶液，再对该流动相溶液进行色谱分析处理，以此确定菌群代谢固体产物的类型和/或含量，并且还对该呼出的气体进行分析处理，以此确定肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量，该检测方法能够全面地和准确地对肠道菌群的代谢固体产物和代谢气体产物进行检测分析，从而提高肠道菌群代谢产物检测的可靠性和有效性。
本发明提供肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：
步骤S1，收集目标对象的粪便样本，并对所述粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液；
步骤S2，对所述粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液；
步骤S3，获取所述流动相溶液的色谱信息，并根据所述色谱信息，确定所述菌群代谢产物的类型和/或含量；
步骤S4，收集所述目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对所述呼出的气体进行分析处理，以此确定所述目标对象的肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量；
进一步，在所述步骤S1中，收集目标对象的粪便样本，并对所述粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液具体包括：
步骤S101，通过形成负压吸附环境来收集来自所述目标对象的粪便样本；
步骤S102，对所述粪便样本依次进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理，从而获得无水化的粉末状粪便样本；
步骤S103，将所述无水化的粉末状粪便样本依次进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，从而获得粪便样本原溶液；
进一步，在所述步骤S101中，通过形成负压吸附环境来收集来自所述目标对象的粪便样本具体包括：
步骤S1011，构建包括存储箱和吸附管的粪便样本收集设备，并将所述吸附管与所述存储箱密封连接；
步骤S1012，在所述存储箱中形成所述负压吸附环境，并检测所述吸附管内部当前存在的粪便样本的重量，并根据所述重量调整所述存储箱内部的负压吸附环境的负压强值，从而将所述吸附管内部存在的粪便样本完全吸附到所述存储箱中；
进一步，在所述步骤S102中，对所述粪便样本依次进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理，从而获得无水化的粉末状粪便样本具体包括：
对所述粪便样本进行干燥处理具体为采用红外微波对所述粪便样本进行照射，以此蒸发所述粪便样本中的水分，从而实现所述干燥处理；
对所述粪便样本进行静置除臭处理具体为将所述粪便样本放置于密封环境中，并对所述粪便样本进行真空吸附，从而去除所述粪便样本产生的臭气成分；
对所述粪便样本进行粉碎处理具体为对所述粪便样本进行研磨处理，从而将所述粪便样本转化为粉末状粪便样本；
或者，
在所述步骤S103中，将所述无水化的粉末状粪便样本依次进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，从而获得粪便样本原溶液具体包括：
将所述无水化的粉末状粪便样本溶解于纯净水或者生理盐水中，以此得到粪便样本溶解液，并对所述粪便样本溶解液进行预设时间长度的匀速搅拌处理后，再利用负压渗透膜对所述粪便样本溶解液进行过滤处理，以此过滤所述粪便样本溶液中的不可溶杂质，从而得到所述粪便样本原溶液；
进一步，在所述步骤S2中，对所述粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液具体包括：
步骤S201，对所述粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从所述粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物；
步骤S202，将所述菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将所述菌群代谢固体产物稀释复溶于所述甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液；
步骤S203，对所述菌群代谢固体产物复溶液进行离心处理，并提取离心处理后所述菌群代谢固体产物复溶液上层表面的澄清液，以此作为菌群代谢固体产物的流动相溶液；
进一步，在所述步骤S201中，对所述粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从所述粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物具体包括：
在60℃-75℃的环境温度下，对所述粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从所述粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物；
或者，
在所述步骤S202中，将所述菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将所述菌群代谢固体产物稀释复溶于所述甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液具体包括：
配置甲醇与水的体积比为1:5-1:15的甲醇水溶液，再将所述菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将所述菌群代谢固体产物稀释复溶于所述甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液；
进一步，在所述步骤S3中，获取所述流动相溶液的色谱信息，并根据所述色谱信息，确定所述菌群代谢产物的类型和/或含量具体包括：
步骤S301，将所述流动相溶液进行雾化处理，以此得到雾化状流动相溶液；
步骤S302，对所述雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得所述流动相溶液的色谱信息；
步骤S303，从所述色谱信息对应的色谱曲线中确定所述色谱信息包含的色谱峰值，再根据所述色谱峰值和色谱曲线，确定所述菌群代谢产物对应的类型和/或含量；
进一步，在所述步骤S301中，将所述流动相溶液进行雾化处理，以此得到雾化状流动相溶液具体包括：
采用氮气作为雾化气，并利用所述雾化器对所述流动相溶液进行雾化物理，以此得到雾化状流动相溶液；
或者，
在所述步骤S302中，对所述雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得所述流动相溶液的色谱信息具体包括：
采用氩气作为碰撞气，并对所述氩气施加电压，以此得到相应的氩离子，再利用所述氩离子对所述雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，从而获得所述流动相溶液的色谱信息；
进一步，在所述步骤S4中，收集所述目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对所述呼出的气体进行分析处理，以此确定所述目标对象的肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量具体包括：
步骤S401，收集所述目标对象在至少持续空腹状态12小时后呼出的气体；
步骤S402，对所述呼出的气体进行蒸馏分离处理，以此确定所述目标对象的肠道代谢产出气体中H2、CH4和H2S的含量。
相比于现有技术，该肠道菌群代谢产物的检测方法通过收集目标对象的粪便样本，并对该粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液，并对该粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液，再获取该流动相溶液的色谱信息，并根据该色谱信息，确定该菌群代谢产物的类型和/或含量，以及收集该目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对该呼出的气体进行分析处理，以此确定该目标对象的肠道代谢产出气体的类型和/或含量；可见，该肠道菌群代谢产物的检测方法通过收集目标对象的粪便样本和呼出的气体，并对该粪便样本进行处理以得到相应的流动相溶液，再对该流动相溶液进行色谱分析处理，以此确定菌群代谢固体产物的类型和/或含量，并且还对该呼出的气体进行分析处理，以此确定肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量，该检测方法能够全面地和准确地对肠道菌群的代谢固体产物和代谢气体产物进行检测分析，从而提高肠道菌群代谢产物检测的可靠性和有效性。
本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过在所写的说明书、权利要求书、以及附图中所特别指出的结构来实现和获得。
下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明提供的肠道菌群代谢产物的检测方法的流程示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
参阅图1，为本发明实施例提供的肠道菌群代谢产物的检测方法的流程示意图。该肠道菌群代谢产物的检测方法包括如下步骤：
步骤S1，收集目标对象的粪便样本，并对该粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液；
步骤S2，对该粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液；
步骤S3，获取该流动相溶液的色谱信息，并根据该色谱信息，确定该菌群代谢产物的类型和/或含量；
步骤S4，收集该目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对该呼出的气体进行分析处理，以此确定该目标对象的肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量。
上述技术方案的有益效果为：该肠道菌群代谢产物的检测方法通过收集目标对象的粪便样本和呼出的气体，并对该粪便样本进行处理以得到相应的流动相溶液，再对该流动相溶液进行色谱分析处理，以此确定菌群代谢固体产物的类型和/或含量，并且还对该呼出的气体进行分析处理，以此确定肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量，该检测方法能够全面地和准确地对肠道菌群的代谢固体产物和代谢气体产物进行检测分析，从而提高肠道菌群代谢产物检测的可靠性和有效性。
优选地，在该步骤S1中，收集目标对象的粪便样本，并对该粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液具体包括：
步骤S101，通过形成负压吸附环境来收集来自该目标对象的粪便样本；
步骤S102，对该粪便样本依次进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理，从而获得无水化的粉末状粪便样本；
步骤S103，将该无水化的粉末状粪便样本依次进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，从而获得粪便样本原溶液。
上述技术方案的有益效果为：通过形成负压吸附环境来收集粪便样本，能够提高粪便样本的收集效率和有效避免发生泄漏的情况，而对该粪便样本进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理能够实现粪便样本的无气味化转换，以改善粪便样本的观感，而对该无水化的粉末状粪便样本进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，能够有效地去除粪便样本中的杂质，以此提高粪便样本的纯度。
优选地，在该步骤S101中，通过形成负压吸附环境来收集来自该目标对象的粪便样本具体包括：
步骤S1011，构建包括存储箱和吸附管的粪便样本收集设备，并将该吸附管与该存储箱密封连接；
步骤S1012，在该存储箱中形成该负压吸附环境，并检测该吸附管内部当前存在的粪便样本的重量，并根据该重量调整该存储箱内部的负压吸附环境的负压强值，从而将该吸附管内部存在的粪便样本完全吸附到该存储箱中。
上述技术方案的有益效果为：通过根据吸附化内部当前存在的粪便样本的重量来调整该存储箱内部的负压吸附环境的负压强值，能够最大限度地优化对粪便样本吸附的效率和有效的降低吸附过程所耗费的能量，从而提高粪便样本吸附的彻底性。
优选地，在该步骤S102中，对该粪便样本依次进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理，从而获得无水化的粉末状粪便样本具体包括：
对该粪便样本进行干燥处理具体为采用红外微波对该粪便样本进行照射，以此蒸发该粪便样本中的水分，从而实现该干燥处理；
对该粪便样本进行静置除臭处理具体为将该粪便样本放置于密封环境中，并对该粪便样本进行真空吸附，从而去除该粪便样本产生的臭气成分；
对该粪便样本进行粉碎处理具体为对该粪便样本进行研磨处理，从而将该粪便样本转化为粉末状粪便样本；
或者，
在该步骤S103中，将该无水化的粉末状粪便样本依次进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，从而获得粪便样本原溶液具体包括：
将该无水化的粉末状粪便样本溶解于纯净水或者生理盐水中，以此得到粪便样本溶解液，并对该粪便样本溶解液进行预设时间长度的匀速搅拌处理后，再利用负压渗透膜对该粪便样本溶解液进行过滤处理，以此过滤该粪便样本溶液中的不可溶杂质，从而得到该粪便样本原溶液。
上述技术方案的有益效果为：通过红外微波照射来实现对粪便样本的干燥处理，能够有效地控制粪便样本的干燥脱水进程，而对粪便样本进行真空吸附除臭和研磨成粉末状粪便样本，能够改善粪便样本的观感和粪便样本的处理简易性；而将粉末状粪便样本溶解于纯净水或者生理盐水后进行负压渗透过滤处理，能够最大限度地去除粪便样本中的不可溶杂质，从而提高粪便样本的纯度。
优选地，在该步骤S2中，对该粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液具体包括：
步骤S201，对该粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从该粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物；
步骤S202，将该菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将该菌群代谢固体产物稀释复溶于该甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液；
步骤S203，对该菌群代谢固体产物复溶液进行离心处理，并提取离心处理后该菌群代谢固体产物复溶液上层表面的澄清液，以此作为菌群代谢固体产物的流动相溶液。
上述技术方案的有益效果为：通过蒸发粪便样本原溶液中的溶剂能够提高高菌群代谢固体产物的提取效率，而采用甲醇水溶液来稀释复溶该菌群代谢固体产物，能够改善该菌群代谢固体产物的复溶效率。
优选地，在该步骤S201中，对该粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从该粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物具体包括：
在60℃-75℃的环境温度下，对该粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从该粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物；
或者，
在该步骤S202中，将该菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将该菌群代谢固体产物稀释复溶于该甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液具体包括：
配置甲醇与水的体积比为1:5-1:15的甲醇水溶液，再将该菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将该菌群代谢固体产物稀释复溶于该甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液。
上述技术方案的有益效果为：通过在60℃-75℃的环境温度下，对该粪便样本原溶液进行蒸发处理，能够最大限度地提高蒸发效率；而配置甲醇与水的体积比为1:5-1:15的甲醇水溶液，能够最大限度地提高该菌群代谢固体产物的复溶效率。
优选地，在该步骤S3中，获取该流动相溶液的色谱信息，并根据该色谱信息，确定该菌群代谢产物的类型和/或含量具体包括：
步骤S301，将该流动相溶液进行雾化处理，以此得到雾化状流动相溶液；
步骤S302，对该雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得该流动相溶液的色谱信息；
步骤S303，从该色谱信息对应的色谱曲线中确定该色谱信息包含的色谱峰值，再根据该色谱峰值和色谱曲线，确定该菌群代谢产物对应的类型和/或含量。
上述技术方案的有益效果为：通过对该雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得该流动相溶液的色谱信息，而该色谱信息能够转换为连续化的色谱曲线，再在该色谱曲线上确定其相应的色谱峰值，由于不同代谢产物具有不同的色谱峰值，这样通过对照该色谱峰值存在的波长区域就能够快速地确定该菌群代谢产物的类型，而在该色谱曲线中，对某一色谱峰值在该色谱曲线下的曲线面积进行积分，就能够得到该色谱峰值对应类型的菌群代谢产物的含量。
优选地，在该步骤S301中，将该流动相溶液进行雾化处理，以此得到雾化状流动相溶液具体包括：
采用氮气作为雾化气，并利用该雾化器对该流动相溶液进行雾化物理，以此得到雾化状流动相溶液；
或者，
在该步骤S302中，对该雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得该流动相溶液的色谱信息具体包括：
采用氩气作为碰撞气，并对该氩气施加电压，以此得到相应的氩离子，再利用该氩离子对该雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，从而获得该流动相溶液的色谱信息。
上述技术方案的有益效果为：采用氮气作为雾化气，能够提高该流动相溶液的雾化效率和降低其雾化成本，而采用氩气作为碰撞气，能够提高对该雾化状流动相溶液的离子轰击效率。
优选地，在该步骤S4中，收集该目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对该呼出的气体进行分析处理，以此确定该目标对象的肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量具体包括：
步骤S401，收集该目标对象在至少持续空腹状态12小时后呼出的气体；
步骤S402，对该呼出的气体进行蒸馏分离处理，以此确定该目标对象的肠道代谢产出气体中H2、CH4和H2S的含量。
上述技术方案的有益效果为：通过收集该目标对象在至少持续空腹状态12小时后呼出的气体，能够最大限度地保证该呼出的气体主要是来自肠道菌群代谢产出气体，而对对该呼出的气体进行蒸馏分离处理，能够准确地和可靠地确定该目标对象的肠道代谢产出气体中H2、CH4和H2S的含量。
从上述实施例的内容可知，该肠道菌群代谢产物的检测方法通过收集目标对象的粪便样本，并对该粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液，并对该粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液，再获取该流动相溶液的色谱信息，并根据该色谱信息，确定该菌群代谢产物的类型和/或含量，以及收集该目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对该呼出的气体进行分析处理，以此确定该目标对象的肠道代谢产出气体的类型和/或含量；可见，该肠道菌群代谢产物的检测方法通过收集目标对象的粪便样本和呼出的气体，并对该粪便样本进行处理以得到相应的流动相溶液，再对该流动相溶液进行色谱分析处理，以此确定菌群代谢固体产物的类型和/或含量，并且还对该呼出的气体进行分析处理，以此确定肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量，该检测方法能够全面地和准确地对肠道菌群的代谢固体产物和代谢气体产物进行检测分析，从而提高肠道菌群代谢产物检测的可靠性和有效性。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (9)
1.肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于，其包括如下步骤：
步骤S1，收集目标对象的粪便样本，并对所述粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液；
步骤S2，对所述粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液；
步骤S3，获取所述流动相溶液的色谱信息，并根据所述色谱信息，确定所述菌群代谢产物的类型和/或含量；
步骤S4，收集所述目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对所述呼出的气体进行分析处理，以此确定所述目标对象的肠道菌群代谢产出气体的类型和/或含量。
2.如权利要求1所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S1中，收集目标对象的粪便样本，并对所述粪便样本预处理，以此得到粪便样本原溶液具体包括：
步骤S101，通过形成负压吸附环境来收集来自所述目标对象的粪便样本；
步骤S102，对所述粪便样本依次进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理，从而获得无水化的粉末状粪便样本；
步骤S103，将所述无水化的粉末状粪便样本依次进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，从而获得粪便样本原溶液。
3.如权利要求2所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S101中，通过形成负压吸附环境来收集来自所述目标对象的粪便样本具体包括：
步骤S1011，构建包括存储箱和吸附管的粪便样本收集设备，并将所述吸附管与所述存储箱密封连接；
步骤S1012，在所述存储箱中形成所述负压吸附环境，并检测所述吸附管内部当前存在的粪便样本的重量，并根据所述重量调整所述存储箱内部的负压吸附环境的负压强值，从而将所述吸附管内部存在的粪便样本完全吸附到所述存储箱中。
4.如权利要求2所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S102中，对所述粪便样本依次进行干燥处理、静置除臭处理和粉碎处理，从而获得无水化的粉末状粪便样本具体包括：
对所述粪便样本进行干燥处理具体为采用红外微波对所述粪便样本进行照射，以此蒸发所述粪便样本中的水分，从而实现所述干燥处理；
对所述粪便样本进行静置除臭处理具体为将所述粪便样本放置于密封环境中，并对所述粪便样本进行真空吸附，从而去除所述粪便样本产生的臭气成分；
对所述粪便样本进行粉碎处理具体为对所述粪便样本进行研磨处理，从而将所述粪便样本转化为粉末状粪便样本；
或者，
在所述步骤S103中，将所述无水化的粉末状粪便样本依次进行溶解处理、搅拌处理和过滤处理，从而获得粪便样本原溶液具体包括：
将所述无水化的粉末状粪便样本溶解于纯净水或者生理盐水中，以此得到粪便样本溶解液，并对所述粪便样本溶解液进行预设时间长度的匀速搅拌处理后，再利用负压渗透膜对所述粪便样本溶解液进行过滤处理，以此过滤所述粪便样本溶液中的不可溶杂质，从而得到所述粪便样本原溶液。
5.如权利要求1所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S2中，对所述粪便样本原溶液进行菌群代谢产物的提取处理和稀释处理，以此获得菌群代谢产物的流动相溶液具体包括：
步骤S201，对所述粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从所述粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物；
步骤S202，将所述菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将所述菌群代谢固体产物稀释复溶于所述甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液；
步骤S203，对所述菌群代谢固体产物复溶液进行离心处理，并提取离心处理后所述菌群代谢固体产物复溶液上层表面的澄清液，以此作为菌群代谢固体产物的流动相溶液。
6.如权利要求5所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S201中，对所述粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从所述粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物具体包括：
在60℃-75℃的环境温度下，对所述粪便样本原溶液进行蒸发处理，以此从所述粪便样本原溶液中提取得到相应的菌群代谢固体产物；
或者，
在所述步骤S202中，将所述菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将所述菌群代谢固体产物稀释复溶于所述甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液具体包括：
配置甲醇与水的体积比为1:5-1:15的甲醇水溶液，再将所述菌群代谢固体产物加入甲醇水溶液中，以此将所述菌群代谢固体产物稀释复溶于所述甲醇水溶液中，从而获得菌群代谢固体产物复溶液。
7.如权利要求1所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S3中，获取所述流动相溶液的色谱信息，并根据所述色谱信息，确定所述菌群代谢产物的类型和/或含量具体包括：
步骤S301，将所述流动相溶液进行雾化处理，以此得到雾化状流动相溶液；
步骤S302，对所述雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得所述流动相溶液的色谱信息；
步骤S303，从所述色谱信息对应的色谱曲线中确定所述色谱信息包含的色谱峰值，再根据所述色谱峰值和色谱曲线，确定所述菌群代谢产物对应的类型和/或含量。
8.如权利要求7所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S301中，将所述流动相溶液进行雾化处理，以此得到雾化状流动相溶液具体包括：
采用氮气作为雾化气，并利用所述雾化器对所述流动相溶液进行雾化物理，以此得到雾化状流动相溶液；
或者，
在所述步骤S302中，对所述雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，以此获得所述流动相溶液的色谱信息具体包括：
采用氩气作为碰撞气，并对所述氩气施加电压，以此得到相应的氩离子，再利用所述氩离子对所述雾化状流动相溶液进行离子轰击处理，从而获得所述流动相溶液的色谱信息。
9.如权利要求1所述的肠道菌群代谢产物的检测方法，其特征在于：
在所述步骤S4中，收集所述目标对象在空腹状态下呼出的气体，并对所述呼出的气体进行分析处理，以此确定所述目标对象的肠道代谢产出气体的类型和/或含量具体包括：
步骤S401，收集所述目标对象在至少持续空腹状态12小时后呼出的气体；
步骤S402，对所述呼出的气体进行蒸馏分离处理，以此确定所述目标对象的肠道菌群代谢产出气体中H2、CH4和H2S的含量。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011204172.2A CN112326947A (zh) | 2020-11-02 | 2020-11-02 | 肠道菌群代谢产物的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011204172.2A CN112326947A (zh) | 2020-11-02 | 2020-11-02 | 肠道菌群代谢产物的检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112326947A true CN112326947A (zh) | 2021-02-05 |
Family
ID=74324388
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011204172.2A Pending CN112326947A (zh) | 2020-11-02 | 2020-11-02 | 肠道菌群代谢产物的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112326947A (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107513515A (zh) * | 2017-10-20 | 2017-12-26 | 南京益恒寿生命科技有限公司 | 一种粪菌移植治疗中标准粪菌液制备工艺 |
| CN108117991A (zh) * | 2017-11-03 | 2018-06-05 | 杭州海路医疗科技有限公司 | 一种肠道微生物体外模拟培养方法 |
| CN109517727A (zh) * | 2019-01-17 | 2019-03-26 | 上海宝藤生物医药科技股份有限公司 | 一种肠道微生物的分离装置及分离方法 |
| CN110060778A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-07-26 | 完美(上海)健康科技有限公司 | 以肠道菌群为靶点的健康管理方案 |
| CN110592246A (zh) * | 2019-10-14 | 2019-12-20 | 杭州同创越诚基因科技有限公司 | 一种人肠道菌群定量检测方法及其应用 |
| CN111208230A (zh) * | 2020-01-19 | 2020-05-29 | 天津中医药大学 | 一种美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法 |
-
2020
- 2020-11-02 CN CN202011204172.2A patent/CN112326947A/zh active Pending
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107513515A (zh) * | 2017-10-20 | 2017-12-26 | 南京益恒寿生命科技有限公司 | 一种粪菌移植治疗中标准粪菌液制备工艺 |
| CN108117991A (zh) * | 2017-11-03 | 2018-06-05 | 杭州海路医疗科技有限公司 | 一种肠道微生物体外模拟培养方法 |
| CN109517727A (zh) * | 2019-01-17 | 2019-03-26 | 上海宝藤生物医药科技股份有限公司 | 一种肠道微生物的分离装置及分离方法 |
| CN110060778A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-07-26 | 完美(上海)健康科技有限公司 | 以肠道菌群为靶点的健康管理方案 |
| CN110592246A (zh) * | 2019-10-14 | 2019-12-20 | 杭州同创越诚基因科技有限公司 | 一种人肠道菌群定量检测方法及其应用 |
| CN111208230A (zh) * | 2020-01-19 | 2020-05-29 | 天津中医药大学 | 一种美洲大蠊肠道菌群代谢产物的检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Brachet et al. | Focused microwave‐assisted extraction of cocaine and benzoylecgonine from coca leaves | |
| WO2020232970A1 (zh) | 一种测定肠道内容物或粪便中短链脂肪酸含量的方法 | |
| CN103484257B (zh) | 一种柚皮的综合利用方法 | |
| CN107621500A (zh) | 氨基酸与肉碱串联质谱衍生化检测法 | |
| CN109001335A (zh) | 用于测定南极磷虾中17种类固醇激素的方法 | |
| CN111249321A (zh) | 一种同时制备黑穗醋栗多酚及多糖的方法 | |
| CN102675483B (zh) | 一种从茶多糖中获取均一果胶多糖的方法及获得的均一果胶多糖 | |
| CN102070681A (zh) | 魔芋神经酰胺及其提取方法 | |
| CN102002112A (zh) | 超声波辅助提取银杏叶多糖工艺 | |
| CN112326947A (zh) | 肠道菌群代谢产物的检测方法 | |
| CN113311086A (zh) | 一种检测极片中残留nmp的方法 | |
| Li et al. | An improved facile method for extraction and determination of steroidal saponins in Tribulus terrestris by focused microwave‐assisted extraction coupled with GC–MS | |
| CN111013539B (zh) | 一种用于去除水体中精喹禾灵的油菜秸秆改性生物炭复合材料及其制备方法、应用 | |
| CN103207103B (zh) | 一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法 | |
| CN104558101A (zh) | 一种海绵动物水溶性肽类的制备方法 | |
| CN104713964A (zh) | 一种环境固体基质中多溴联苯醚的前处理方法 | |
| CN204758530U (zh) | 一种微生物鉴定综合设备 | |
| Zhou et al. | Evaluation of microwave‐assisted extraction for aristolochic acid from Aristolochiae Fructus by chromatographic analysis coupled with nephrotoxicity studies | |
| Wu et al. | Rapid analysis of essential oils in fruits of Alpinia oxyphylla Miq. by microwave distillation and simultaneous headspace solid-phase microextraction coupled with gas chromatography-mass spectrometry | |
| CN108717084A (zh) | 熊胆粉中熊去氧胆酸含量的液相色谱-质谱检测方法 | |
| CN103901143A (zh) | 一种用于少量生物血清中四溴双酚a分析的前处理方法 | |
| Van Elteren et al. | Arsenic speciation in aqueous samples using a selective As (III)/As (V) preconcentration in combination with an automatable cryotrapping hydride generation procedure for monomethylarsonic acid and dimethylarsinic acid | |
| CN110204924A (zh) | 一种辐照-酶解辅助非热高压法制备黑木耳黑色素的方法 | |
| CN108490089A (zh) | 同步分离柠檬内源激素赤霉素、生长素和脱落酸的方法 | |
| CN104478878B (zh) | 一种从核桃青皮中分离制备生物碱的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210205 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |