CN112315821B - 一种水解蛋白脂质体及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于化妆品技术领域,具体涉及一种水解蛋白脂质体及其制备方法与应用,所含水解蛋白脂质体包括以下组分:化妆品活性成分、脂质体构架成分、客体成分和冻干保护剂;所述化妆品活性成分包括水解角蛋白和神经酰胺;所述脂质体构架成分包括甾醇和磷脂;所述客体成分包括表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂和香精。本发明用脂质体作为水解角蛋白的载体,一方面能改善水解角蛋白的稳定性,另一方面能促进水解角蛋白的透皮吸收。同时在与皮肤接触的过程中活性物质浓度不断被提高,让活性物质更加充分的作用于细胞,增加肌肤的水分和弹性,具备高保湿性能。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域,具体涉及水解蛋白脂质体及其制备方法与应用。
背景技术
皮肤是人体最大的器官,皮肤屏障指由角质层细胞和细胞之间组成的"砖墙结构",由此共同形成了一道人体天然保护屏障。现代生活中的辐射、污染、紫外线等会抑制角质形成细胞中结构蛋白和天然保湿因子的正常生理代谢,使角质层含水量下降,下调人皮肤角质细胞中相关保湿因子的表达,引发皮肤水化能力下降,进而造成皮肤屏障功能受损。
角蛋白(Keratin,KRT)是表皮细胞的主要结构蛋白,属于中间丝蛋白家族,在细胞内形成广泛的网状结构。角蛋白基因的正确表达和角蛋白细胞骨架的完整构建是表皮物理性屏障结构的基础。此外角蛋白含有的氨基酸相同于人的皮肤和头发中的氨基酸组成,但角蛋白是由多种氨基酸组成的大分子物质,不溶于水,因此常以水解物的形式应用于化妆品。水解角蛋白(Hydrolyzed keratin)含有较多的半胱氨酸,通过胶原蛋白结构的改善,以及蛋白与水分子结合增加,保持皮肤滋润、增强皮肤锁水能力,能帮助补充皮肤中的结构蛋白,促进皮肤屏障修复。
但是水解角蛋白在溶液中浓度过低,易引起亚基解离、表面变性,在溶液中活性的性质不稳定,稳定性差。
因此开发一种稳定性良好的角蛋白相关产品是非常必要的。
发明内容
本发明用脂质体作为水解角蛋白的载体,一方面能改善水解角蛋白的稳定性,另一方面能促进水解角蛋白的透皮吸收。同时在与皮肤接触的过程中活性物质浓度不断被提高,让活性物质更加充分的作用于细胞,增加肌肤的水分和弹性,具备高保湿性能。
本发明的目的可通过以下技术方案实现:
一种水解蛋白脂质体,所含蛋白脂质体包括以下组分:化妆品活性成分、脂质体构架成分、客体成分和冻干保护剂;
所述化妆品活性成分包括水解角蛋白和神经酰胺;
所述脂质体构架成分包括甾醇和磷脂;
所述客体成分包括表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂和香精;
所述冻干保护剂选自乳糖、甘露醇、甘氨酸或者海藻糖的两种以上;
所述抗氧化剂选自维生素C及其衍生物、维生素E及其衍生物、丁基羟基茴香醚(BHA)、茶多酚、芝麻酚或者愈创树脂中至少一种。
本发明所述神经酰胺,神经酰胺又称神经鞘脂类,是(神经)鞘脂类共有的结构单位,当皮肤出现干燥,脱屑、开裂现象,其屏障功能明显降低时,皮肤补充神经酰胺便可迅速恢复保湿和屏障功能。神经酰胺能在角质层细胞中形成双层结构,有效防止表皮水分散失,能渗透至表皮深处,促使干性肌肤重新获得对水分保湿能力,具有突出保湿效果。
优选的,所述神经酰胺为神经酰胺-3。
优选的,所含蛋白脂质体包括以下重量份数的原料如下:
水解角蛋白10-80份,神经酰胺-3 5-20份,甾醇5-200份,表面活性剂0.5-50份,磷脂5-150份,抗氧化剂1-20份,增稠剂0.1-10份,香精0.1-2份,冻干保护剂500-2000份。
优选的,所含组分及各组分的重量份数如下:水解角蛋白20-50份,神经酰胺-310-20份,甾醇100-150份,表面活性剂5-10份,磷脂100-120份,抗氧化剂10-20份,增稠剂0.2-5份,香精0.2-1份,冻干保护剂1000-1500份。
优选的,所述甾醇选自胆固醇、麦角甾醇、植物甾醇、谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇的至少一种;所述磷脂选自大豆卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰肌醇、鞘磷脂、蛋黄卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺中的至少一种;所述的表面活性剂是胆酸钠或去氧胆酸钠。
优选的,所述甾醇选自胆固醇。
优选的,所述蛋白脂质体中磷脂与甾醇含量比为1:1-1.5。
优选的,所述增稠剂为卡波姆。
优选的,所述冻干保护剂为海藻糖和甘氨酸,所述海藻糖和甘氨酸的质量比为1:0.1。
本发明还提供一种制备上述水解蛋白脂质体的制备方法,包括如下步骤∶
1)将脂质体构架成分在70-90℃水浴条件下溶解于挥发性有机溶剂中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取化妆品活性成分、客体成分和冻干保护剂,在50-60℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-50 ~ -100℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
所述挥发性有机溶剂包括但不限于叔丁醇、丙酮、乙醇、环己烷,优选叔丁醇。
本发发明还提供了一种上述水解蛋白脂质体在化妆品中的应用,所述化妆品的类型包括但不限于精华水、乳液、精华液、眼霜、面膜、气雾或喷雾等形式。
本发明所述水解角蛋白的制备步骤如下:
S1、取羊毛毛条洗净烘干,放入装有7倍羊毛重量的熔融尿素中,在140℃溶解反应1-2小时,目的在于破坏分子间的氢键等作用力,但基本保留角蛋白中的二级结构,提高溶解度;
S2、加入NaHSO4水溶液使其溶解,同时搅拌1小时,目的在于不影响肽键的情况下部分破坏二硫键,增加角蛋白的水解程度;用截留质量4-6 kD渗析袋,在蒸馏水中渗析30小时,每15小时更换蒸馏水,过滤收集滤渣,烘干得到分子量4-6 kD的水解角蛋白;
S3、将步骤S2过滤后的滤液加入Na2CO3,进行碱水解,同时搅拌2小时后,目的在于进一步增加角蛋白的水解程度,得到分子量低的水解角蛋白;用截留质量2-4 kD渗析袋,在疏基乙醇0.08%水溶液中渗析30小时,每15小时更换巯基乙醇0.08%水溶液,过滤收集滤渣,烘干得到分子量2-4 kD的水解角蛋白;
S4、将上述两种分子量的水解角蛋白按比例混合,得到分子量为2-6 kD的水解角蛋白粉。
与现有技术相比,本发明药物组合物具有以下优势:
1、本发明用脂质体作为水解角蛋白的载体,显著改善水解角蛋白脂质体包封率,显著提高其的稳定性。
2、本发明显著促进水解角蛋白的透皮吸收,同时提高在皮肤接触的过程中活性物质浓度,让活性物质更加充分的作用于细胞,增加肌肤的水分和弹性,起到高保湿的性能。
具体实施方式
下面将结合具体实施例来详细说明本发明,在此本发明的示意性实施例及其说明用来解释本发明,但并不作为对本发明的限定。
实施例1 水解角蛋白的制备
本发明水解角蛋白的制备,包括如下步骤:
S1、羊毛毛条洗净烘干,放入装有7倍羊毛重量的熔融尿素中,在140℃溶解反应1小时;
S2、加入10倍体积的NaHSO4水溶液使其溶解,同时搅拌1小时,用截留质量4-6 kD渗析袋,在蒸馏水中渗析30小时,每15小时更换蒸馏水,过滤,过滤收集滤渣,烘干得到分子量4-6 kD的水解角蛋白;
S3、滤液加入10倍体积的 Na2CO3进行碱水解,同时搅拌2小时后,用截留质量2-4kD渗析袋,在疏基乙醇0.08%水溶液中渗析30小时,每15小时更换巯基乙醇0.08%水溶液,过滤收集滤渣,烘干得到分子量2-4 kD的水解角蛋白;
S4、将上述两种角蛋白混合,得到2-6 kD的混合水解角蛋白粉。
实施例2一种水解蛋白脂质体
本发明实施例2水解蛋白脂质体的组份及重量份数如表1所示:
水解角蛋白40份,神经酰胺-3 15份,谷甾醇150份,去氧胆酸钠5份,蛋黄卵磷脂110份,芝麻酚13份,卡波姆4份,香精1份,海藻糖1200份,甘氨酸120份;
所述水解蛋白的分子量为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的混合物;所述为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量分数比例为1:0.6;
所述水解蛋白脂质体的制备方法,具体包括如下步骤:
1)将谷甾醇和蛋黄卵磷脂在85℃水浴条件下溶解于叔丁醇,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取水解角蛋白、神经酰胺-3 、谷甾醇、去氧胆酸钠、蛋黄卵磷脂、芝麻酚、卡波姆、香精、海藻糖和甘氨酸,在55℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-80℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
实施例3一种水解蛋白脂质体
本发明实施例3水解蛋白脂质体的组份及重量份数如下所示:
水解角蛋白45份,神经酰胺-3 20份,胆固醇130份,胆酸钠5份,鞘磷脂130份,乙酸生育酚基酯15份,卡波姆4份,香精1份,海藻糖1300份,甘氨酸130份;
所述水解蛋白的分子量为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的混合物;所述为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量分数比例为1:0.7;
所述水解蛋白脂质体的制备方法,具体包括如下步骤:
1)将胆固醇和鞘磷脂在75℃水浴条件下溶解于叔丁醇中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取水解角蛋白、神经酰胺-3、胆固醇、胆酸钠、鞘磷脂、乙酸生育酚基酯、卡波姆4、香精、海藻糖和甘氨酸,在50℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-70℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
实施例4一种水解蛋白脂质体
本发明实施例4水解蛋白脂质体的组份及重量份数如下所示:
水解角蛋白50份,神经酰胺-3 20份,麦角甾醇140份,胆酸钠6份,二棕榈酰磷脂酰胆碱120份,愈创树脂20份,卡波姆5份,香精1份,乳糖1500份,甘氨酸150份;
所述水解蛋白的分子量为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的混合物;所述为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量分数比例为1:0.8
所述水解蛋白脂质体的制备方法,具体包括如下步骤:
1)将麦角甾醇和二棕榈酰磷脂酰胆碱在80℃水浴条件下溶解于叔丁醇中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取水解角蛋白、神经酰胺-3、麦角甾醇、胆酸钠、二棕榈酰磷脂酰胆碱、愈创树脂、卡波姆、香精、乳糖和甘氨酸,在60℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-90℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
实施例5一种水解蛋白脂质体
本发明实施例5水解蛋白脂质体的组份及重量份数如下所示:
水解角蛋白70份,神经酰胺-3 15份,豆甾醇120份,胆酸钠5份,二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱125份,茶多酚15份,卡波姆4份,香精1份,海藻糖800份,甘氨酸80份;
所述水解蛋白的分子量为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的混合物;所述为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量分数比例为1:0.9;
所述水解蛋白脂质体的制备方法,具体包括如下步骤:
1)将豆甾醇和二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱在85℃水浴条件下溶解于叔丁醇中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取水解角蛋白、神经酰胺-3 、豆甾醇、胆酸钠、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、茶多酚、卡波姆、香精、海藻糖和甘氨酸,在55℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-80℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
实施例6 一种水解蛋白脂质体
本发明实施例6水解蛋白脂质体的组份及重量份数如下所示:
水解角蛋白60份,神经酰胺-3 15份,菜油甾醇130份,胆酸钠5份,脑磷脂80份,丁基羟基茴香醚15份,卡波姆4份,香精1份,海藻糖900份,甘氨酸90份;
所述水解蛋白的分子量为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的混合物;所述为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量分数比例为1:0.5;
所述水解蛋白脂质体的制备方法,具体包括如下步骤:
1)将菜油甾醇和脑磷脂在75℃水浴条件下溶解于叔丁醇中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取水解角蛋白、神经酰胺-3、胆酸钠、丁基羟基茴香醚、卡波姆、香精、海藻糖和甘氨酸,在55℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-90℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
实施例7 一种水解蛋白脂质体
本发明实施例7水解蛋白脂质体的组份及重量份数如下所示:
水解角蛋白75份,神经酰胺-3 5份,胆固醇145份,胆酸钠7份,大豆卵磷脂70份,乙酸生育酚基酯20份,卡波姆5份,香精1份,海藻糖1000份、甘氨酸100份;
所述水解蛋白的分子量为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的混合物;所述为4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量份分数比例为1:1;
所述水解蛋白脂质体的制备方法,具体包括如下步骤:
1)将胆固醇、大豆卵磷脂在90℃水浴条件下溶解于叔丁醇中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜;
2)取水解角蛋白、神经酰胺-3 、胆固醇、胆酸钠、大豆卵磷脂、乙酸生育酚基酯、卡波姆、香精、海藻糖和甘氨酸,在58℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-95℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
对比例1 一种水解蛋白脂质体
与实施例3的区别在于水解蛋白的分子量均为4-6KD。
对比例2 一种水解蛋白脂质体
与实施例3的区别在于水解蛋白的分子量均为2-4KD。
对比例3 一种水解蛋白脂质体
与实施例3的区别在于4-6KD水解蛋白和2-4KD水解蛋白的重量份数比例为1:1。
对比例4 一种水解蛋白脂质体
与实施例3的区别在于将海藻糖替换为乳糖。
实施例8 一种含蛋白脂质体的保湿精华液
一种含蛋白脂质的保湿精华液,所述精华液的配方如表1所示:
表1 精华液配方及含量
原料名称 | 含量(%) |
水解蛋白脂质体 | 5.0 |
丁二醇 | 3.0 |
精氨酸 | 0.3 |
三乙醇胺 | 0.1 |
尿囊素 | 0.1 |
甘油 | 0.2 |
蒸馏水 | 余量 |
所述水解蛋白脂质体为实施例2-7制备所得的所述水解蛋白脂质体,所述含蛋白脂质的保湿精华液的制备方法为:将水解蛋白脂质体和三乙醇胺逐一缓慢溶解在蒸馏水中,搅拌加热至完全溶解,随后分别加入丁二醇、尿囊素和甘油,待溶解后继续搅拌,同时停止加热。最后待温度降至40℃,添加精氨酸,搅拌均匀后出料,即得所述精华液。
试验例1 脂质体的包封率
1、试验材料:
实施例1~6和对比例1-4制备得到的蛋白脂质体,溶于蒸馏水中配制成10 mg/mL溶液。
2、试验方法:
包封率测定∶利用紫外分光光度计在280mnm下,以甲醇为参比液分别测定不同浓度的水解角蛋白的吸光度,制作水解角蛋白浓度-吸光度标准曲线。取放置一段时间后(D0、D7、D14)的适量的脂质体溶液,采用微滤离心法得到游离药物的水溶液,用甲醇稀释一定倍数,利用紫外分光光度计在280mm波长下,以甲醇为参比液,测定样品溶液的吸光度。以甲醇且相同的稀释倍数将脂质体溶液、空白脂质体溶液进行稀释并测定其吸光度,通过水解蛋白标准曲线换算药物含量,采用公式((1)计算水解蛋白的包封率。结果见表2。
包封率(%)=(1-W未包/W总)×100%(1),其中,W未包和W总分别表示脂质体游离的药量和总投料量。
表2. 水解蛋白脂质体的包封率
放置时间(天) | 0 | 7 | 14 |
实施例2 | 93.12 | 92.27 | 91.75 |
实施例3 | 96.22 | 95.43 | 95.02 |
实施例4 | 90.13 | 89.38 | 88.89 |
实施例5 | 94.42 | 93.53 | 92.75 |
实施例6 | 92.22 | 91.03 | 90.12 |
实施例7 | 89.99 | 87.23 | 86.89 |
对比例1 | 65.21 | 64.15 | 51.04 |
对比例2 | 63.21 | 60.23 | 58.21 |
对比例3 | 87.32 | 85.24 | 72.74 |
对比例4 | 65.77 | 64.03 | 53.44 |
由表2的结果可以看出,本发明的脂质体具有良好的包封率;并且在放置一段时间后,包封率依旧较稳定,其中实施例3为最佳实施例,而对比例1-4制备的蛋白脂质体在0-14天的包封率较低,表明本发明中的4-6KD水解蛋白、2-4KD水解蛋白、海藻糖与甘氨酸能够协同配方内其他成分,协同提升水解蛋白脂质体的包封率和稳定性。
试验例2 在干燥环境下的水分散失实验
1、试验材料:
以水解蛋白脂质体为实施例2-7制备所得的所述水解蛋白脂质体按照实施例8制备得到 含蛋白脂质体的精华液。
2、试验方法:
为模拟皮肤状态,选用25.4×76.2mm的载玻片,贴上3M胶带。将各实施例样品配置成一定浓度的水溶液,称取约200mg的样品,将其均匀涂抹于载玻片上,放入恒温恒湿的仪器内。本实验在室温(25℃)下进行,采用饱和硫酸铵溶液来控制80%的恒定湿度环境。一定时间(30、60、120、180分钟)后称重,计算样品的失水率,通过失水率的大小来比较保湿率,失水率越小表示保湿效果越好。
失水率(%)=(M2-M3)/(M2-M1)×100%
其中M为载玻片重量(g);M2为涂抹后放置前总重量(g);M3为涂抹后放置后总重量(g)。
表3. 各样品在不同时间内的失水率
通过实验证实,各实施例制得的含水解蛋白脂质体的精华液均具有高效保湿的作用。对比保湿原料透明质酸钠,实施例3能发挥更好的保湿效果。由此可见,实施例制得的含水解蛋白脂质体的精华液具有良好的保湿性能。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效,而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下,对上述实施例进行修饰或改变。因此,举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变,仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (8)
1.一种水解蛋白脂质体,其特征在于,所含水解蛋白脂质体包括以下重量份数的原料:
水解角蛋白10-80份,神经酰胺5-20份,甾醇5-200份,表面活性剂0.5-50份,磷脂5-150份,抗氧化剂1-20份,增稠剂0.1-10份,香精0.1-2份,冻干保护剂500-2000份;
所述冻干保护剂为海藻糖和甘氨酸,所述海藻糖和甘氨酸的质量比为1:0.1;
所述抗氧化剂选自维生素C及其衍生物、维生素E及其衍生物、丁基羟基茴香醚(BHA)、茶多酚、芝麻酚或者愈创树脂中至少一种;
所述水解角蛋白为分子量为4-6KD的水解角蛋白和2-4KD的水解角蛋白的混合物;所述分子量为4-6KD的水解角蛋白和分子量为2-4KD的水解角蛋白的重量份 数比例为1:0.6;
所述水解角蛋白的制备步骤如下:
S1、取羊毛毛条洗净烘干,放入装有7倍羊毛重量的熔融尿素中,在140℃溶解反应1-2小时;
S2、加入 NaHSO4 水溶液使其溶解,同时搅拌1小时,用截留质量4-6 kD渗析袋,在蒸馏水中渗析30小时,每15小时更换蒸馏水,过滤收集滤渣,烘干得到分子量4-6 kD的水解角蛋白;
S3、将步骤S2过滤后的滤液加入 Na2CO3 ,进行碱水解,同时搅拌2小时后得到分子量低的水解角蛋白;用截留质量2-4 kD渗析袋,在疏基乙醇0.08%水溶液中渗析30小时,每15小时更换巯基乙醇0.08%水溶液,过滤收集滤渣,烘干得到分子量2-4 kD的水解角蛋白;
S4、将上述两种分子量的水解角蛋白按比例混合,得到分子量为2-6 kD的水解角蛋白。
2.如权利要求1所述的水解蛋白脂质体,其特征在于,所含组分及各组分的重量份数如下:水解角蛋白20-50份,神经酰胺-3 10-20份,甾醇100-150份,表面活性剂5-10份,磷脂100-120份,抗氧化剂10-20份,增稠剂0.2-5份,0.2-1份香精,冻干保护剂1000-1500份。
3.如权利要求1所述的水解蛋白脂质体,其特征在于,所述甾醇选自胆固醇、麦角甾醇、植物甾醇、谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇中的至少一种;所述磷脂选自大豆卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰肌醇、鞘磷脂、蛋黄卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱和二棕榈酰磷脂酰乙醇胺中的至少一种;所述的表面活性剂是胆酸钠或去氧胆酸钠。
4.如权利要求3所述的水解蛋白脂质体,其特征在于,所述甾醇选自胆固醇。
5.如权利要求1所述的水解蛋白脂质体,其特征在于,所述蛋白脂质体中磷脂与甾醇含量比为1:1-1.5。
6.如权利要求1所述的水解蛋白脂质体,其特征在于,所述增稠剂为卡波姆。
7.一种制备权利要求1-2任一项所述的水解蛋白脂质体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)将脂质体构架成分在70-90℃水浴条件下溶解于挥发性有机溶剂中,旋转蒸发,得到均匀的脂质膜,所述脂质体构架成分包括甾醇和磷脂;
2)取化妆品活性成分、客体成分和冻干保护剂,在50-60℃水浴条件下溶解完全,混合均匀,得到混合液体,所述化妆品活性成分包括水解角蛋白和神经酰胺,所述客体成分包括表面活性剂、抗氧化剂、增稠剂和香精;
3)将步骤2)得到的混合液体加入由步骤1)得到的脂质膜,超声破碎并混合均匀,均质,然后依次通过0.45μm和0.22μm的聚碳酸酯膜进行过滤,最终得到均匀、稳定的脂质体混悬液;
4)将步骤3)得到的脂质体混悬液预先冷冻12小时以上,所述冷冻温度为-50 ~ -100℃,再置于冷冻干燥机冻干,即得水解蛋白脂质体。
8.如权利要求1-2任一项所述水解蛋白脂质体在化妆品中的应用。
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