CN112300275A - 用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与应用 - Google Patents

用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种用于抑制新冠病毒SARS‑CoV‑2的卵黄抗体的制备方法，如下步骤：利用多肽合成仪合成SARS‑CoV‑2冠状病毒S蛋白的抗原；免疫：选健康的产蛋母鸡隔离饲养并进行注射免疫；从上述鸡卵中提取抗体。本发明通过化学合成的方法合成SARS‑CoV‑2冠状病毒S蛋白的抗原表位，经过KLH或BSA偶联后作为抗原，与佐剂混合乳化后，免疫健康产蛋母鸡，收集鸡蛋，提取蛋黄中卵黄抗体，该抗体是天然的免疫球蛋白，可以有效地抑制和清除SARS‑CoV‑2冠状病毒。

Description

用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与 应用
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与应用。
背景技术
2019年底世界范围内出现的新冠状病毒的临床特征包括以发热、乏力、干咳为主，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状，潜伏期一般是1-14天之间，在潜伏期就会有传染的危险，传播形式主要包括飞沫直接传播、接触传播等。该病的流行对国家经济和社会稳定都产生了非常严重的影响。至2020年2月11日，国际病毒分类委员会的冠状病毒研究小组(CSG)将该新冠状病毒正式命名为SARS-CoV-2。截止2020年2月15日止，全球已有27个国家发现SARS-CoV-2病例，全球累计病例达到67095例，该病的流行对国家经济和社会稳定都产生了非常严重的影响。
SARS-CoV-2病毒于β属冠状病毒，病毒颗粒多呈圆形或椭圆形，有包膜，外周有冠状排列的纤突，病毒直径在60-140nm之间。其基因特征与SARSr-Cov和MERS-CoV有明显区别。目前研究显示其序列与蝙蝠SARS样冠状病毒(bat-SL-CoVAC45)同源性达85％以上。
SARS-CoV-2冠状病毒为单链RNA病毒，全长29.903kb，具有12个ORF(Open ReadingFrames)，分别编码RNA的RNA聚合酶、4种结构蛋白(S、E、M、N蛋白)、6种未知蛋白。SARS-CoV-2不同于以往任何一种已知的六种能够感染人类的冠状病毒，该病毒在不同的蛋白上至少有17个位点涉及氨基酸的改变，这给特异性治疗SARS-CoV-2带来巨大困难。
截止目前，人们还没有找到很好的预防和治疗SARS-CoV-2病毒的方法。目前常用的预防SARS-CoV-2病毒的消毒剂主要有含氯消毒剂和过氧乙酸消毒剂，这些消毒剂尽管可以有效杀灭冠状病毒，但同时它们对人体有比较强烈的刺激性和腐蚀性，因此只能用于日常物品的消毒，无法对人体进行消毒保护，另外对环境造成污染。在治疗方法，基本上都是针对疾病症状的对症治疗，有较多的负作用，且不能有效的控制病毒感染。临床上采用治愈患者的血浆是治疗SARS-CoV-2最为有效的方法，可以大幅降低危重患者的病死率。这反应的采用SARS-CoV-2中和抗体可以有效治疗SARS-CoV-2引起的严重急性性呼吸综合征，但是治愈患者的血浆来源有限，且处理程序复杂，存在潜在危险，不适合广泛推广。
现有技术实现方案中，还没有抗SARS-CoV-2卵黄抗体的报道。
发明内容
发明目的：本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法；
本发明的另一目的在于提供上述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体在制备防治新冠病毒SARS-CoV-2感染的产品的应用。
技术方案：本发明所述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，包括如下步骤：
(1)利用多肽合成仪合成SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原，将合成的抗原用KLH或BSA进行偶联；
(2)对步骤(1)中制备的抗原进行乳化：采上述抗原用弗氏完全佐剂按1:1混合后乳化作为初次免疫抗原；选用弗氏不完全佐剂与上述抗原按1:1混合后乳化作为加强免疫抗原；
(3)免疫：选健康的产蛋母鸡隔离饲养并进行鸡肌肉多点注射步骤(2)中的免疫抗原，初次免疫后，隔两周开始加强免疫，每隔一周加强免疫一次，共加强免疫三次；从初次免疫后计算，第三十天开始收集鸡卵，该鸡卵中含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体，将鸡卵4℃存储备用；
(4)从上述鸡卵中提取抗体。
进一步地步骤(1)中合成SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原的具体步骤是：
(11)取1mg KLH或BSA于1.5ml的离心管内，用100μl的pH10.0硼酸缓冲液充分溶解后，10000rpm离心1min后，将上清转移到新的离心管内；
(12)将1μM的抗原多肽用100μl的pH10.0硼酸缓冲液进行溶解；
(13)将步骤(11)中的KLH或BSA溶剂逐滴加到多肽溶液中；
(14)边振荡边缓慢加入新鲜配制的0.1ml 0.3％戊二醛溶液，室温放置2小时，中间颠倒混匀数次；
(15)加入25μl的甘氨酸溶液，孵育30分钟；
(16)以pH8.5硼酸缓冲液透析过夜，换液2次，得到SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原；
所述抗原多肽序列为：
S1 IAWNSNNLDSKVGGNYNYLY
S2 LKPFERDISTEIYQ
S3 AVRDPQTLEILDIT
S4 VEQDKNTQEVFAQV
S5 DPSKPSKRSFIEDS6 NHTSPDVDLGDISGIN。
进一步地，步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：用水稀释法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，以去离子水稀释，调节pH值至7.0～7.4，4℃搅拌4～6小时，离心后弃去沉淀，将上清浓缩、冷冻干燥得卵黄抗体。
进一步地，步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：采用PEG沉淀法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，加入3倍蛋黄体积的4％的PEG进行稀释，充分搅拌混匀后，4℃，12000rpm离心10分钟，取上清液，然后往上清液内逐滴滴加1/6上清液体积的40％PEG后充分搅拌混匀后，同样条件离心，收集沉淀，冷冻干燥，得卵黄抗体。
进一步地，步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离体积为V得蛋黄，加入体积为V的生理盐水，缓慢滴加体积为2V的50％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，12000rpm离心10分钟，弃上清，用生理盐水溶解沉淀，加入体积为2/3V的40％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，12000rpm离心10分钟，弃上清，用生理盐水溶解沉淀，加入体积为1/2V的33％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，取沉淀进行冷冻干燥，得卵黄抗体。
进一步地，步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：超滤法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，以去离子水稀释，4℃下静置过夜后，用150KD切向流技术，收集分子量大于150KD的蛋白物质，得卵黄抗体。
本发明还提供了采用上述方法制的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体。
本发明还提供了含有上述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的液体制剂；
所述液体制剂配方具体为：用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体1g，磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)4.45g,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)3.2g，氯化钾(KCl)0.4g，氯化钠(NaCl)4.2g，山梨酸钾2g，蒸馏水986.75g。
本发明还提供了由上述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体在制备喷雾剂中的应用，
所述喷雾剂的具体配方为：用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体1g，磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)4.45g,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)3.2g，氯化钾(KCl)0.4g，氯化钠(NaCl)4.2g，山梨酸钾2g，蒸馏水986.75g。
有益效果：本发明通过化学合成的方法合成SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原表位，经过KLH或BSA偶联后作为抗原，与佐剂混合乳化后，免疫健康产蛋母鸡，收集鸡蛋，提取蛋黄中卵黄抗体，该抗体是天然的免疫球蛋白，可以有效地抑制和清除SARS-CoV-2冠状病毒。体外实验显示，卵黄抗体浓度在0.2～5mg/ml时可以显著抑制SARS-CoV-2冠状病毒进入到细胞内。该抗体具有使用方便、高效、无毒副作用，可以对人体进行消毒，因而可以用于预防SARS-CoV-2冠状病毒引起的严重呼吸综合征；本发明的抗SARS-CoV-2冠状病毒的卵黄抗体的液体制剂，可以有效预防SARS-CoV-2冠状病毒引起的严重急性呼吸综合征。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明技术方案进行详细说明，但是本发明的保护范围不局限于所述实施例。
实施例1：
1、利用多肽合成仪合成SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原，将合成的抗原用KLH或BSA进行偶联，具体过程如下：
(11)取1mg KLH或BSA于1.5ml的离心管内，用100μl的pH10.0硼酸缓冲液充分溶解后，10000rpm离心1min后，将上清转移到新的离心管内；
(12)将1μM的抗原多肽用100μl的pH10.0硼酸缓冲液进行溶解；
(13)将步骤(11)中的KLH或BSA溶剂逐滴加到多肽溶液中；
(14)边振荡边缓慢加入新鲜配制的0.1ml 0.3％戊二醛溶液，室温放置2小时，中间颠倒混匀数次；
(15)加入25μl的甘氨酸溶液，孵育30分钟；
(16)以pH8.5硼酸缓冲液透析过夜，换液2次，得到SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原；
所述抗原多肽序列为：
S1 IAWNSNNLDSKVGGNYNYLY
S2 LKPFERDISTEIYQ
S3 AVRDPQTLEILDIT
S4 VEQDKNTQEVFAQV
S5 DPSKPSKRSFIEDS6 NHTSPDVDLGDISGIN。
2、抗原乳化
采上述抗原用弗氏完全佐剂按1:1混合后乳化作为初次免疫抗原；选用弗氏不完全佐剂与上述抗原按1:1混合后乳化作为加强免疫抗原；
3、免疫
选健康的产蛋母鸡隔离饲养并进行鸡肌肉多点注射免疫抗原，初次注射选用初次免疫抗原免疫，隔两周开始加强免疫，每隔一周加强免疫一次，共加强免疫三次；从初次免疫后计算，第三十天开始收集鸡卵，该鸡卵中含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体，将鸡卵4℃存储备用；
4、从上述鸡卵中提取抗体
用水稀释法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，以去离子水稀释，调节pH值至7.0～7.4，4℃搅拌4～6小时，离心后弃去沉淀，将上清浓缩、冷冻干燥得卵黄抗体。
本实施例中的卵黄抗体可用于制备液体制剂，具体配方为：用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体1g，磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)4.45g,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)3.2g，氯化钾(KCl)0.4g，氯化钠(NaCl)4.2g，山梨酸钾2g，蒸馏水986.75g。该制剂可用于人体消毒，防治新冠病毒。
实施例2：本实施例的具体过程与实施例1中基本一致，其不同在于从鸡卵中提取抗体的具体过程为：采用PEG沉淀法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，加入3倍蛋黄体积的4％的PEG进行稀释，充分搅拌混匀后，4℃，12000rpm离心10分钟，取上清液，然后往上清液内逐滴滴加1/6上清液体积的40％PEG后充分搅拌混匀后，同样条件离心，收集沉淀，冷冻干燥，得卵黄抗体。
本实施例中的卵黄抗体可用于制备喷雾剂，具体配方为：用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体1g，磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)4.45g,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)3.2g，氯化钾(KCl)0.4g，氯化钠(NaCl)4.2g，山梨酸钾2g，蒸馏水986.75g。该喷雾剂可用于防治新冠病毒引起的严重急性呼吸综合征。
实施例3：本实施例的具体过程与实施例1中基本一致，其不同在于从鸡卵中提取抗体的具体过程为：硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离体积为V得蛋黄，加入体积为V的生理盐水，缓慢滴加体积为2V的50％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，12000rpm离心10分钟，弃上清，用生理盐水溶解沉淀，加入体积为2/3V的40％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，12000rpm离心10分钟，弃上清，用生理盐水溶解沉淀，加入体积为1/2V的33％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，取沉淀进行冷冻干燥，得卵黄抗体。
实施例4：本实施例的具体过程与实施例1中基本一致，其不同在于从鸡卵中提取抗体的具体过程为：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，以去离子水稀释，4℃下静置过夜后，用150KD切向流技术，收集分子量大于150KD的蛋白物质，得卵黄抗体。
实施例5：对含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的活性测定
实验一、采用ELISA检测所制备的含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的活性：
1、抗原包埋
将SARS-CoV-2冠状病毒灭活后作为抗原，用抗原包被稀释进行稀释，调整浓度为10μg/ml，将稀释抗原加入到酶标板内，每孔200μl，放置4℃过夜。
2、封闭及抗原抗体的反应
1)取出酶标板甩去包被液，在吸水纸上拍干酶标板；
2)每孔加入300μl PBST，放置2分钟后，甩去孔内液体，在吸水纸上拍干酶标板；
3)每孔加入300μl含有5％BSA的PBST进行封闭，室温放置2小时；
4)甩掉封闭液，在吸水纸上拍干酶标板；
5)每孔加入300μl PBST，放置2分钟后，甩去孔内液体，在吸水纸上拍干酶标板；
6)将稀释好的卵黄抗体(1:1000～1:100000)加入到孔内，每孔100μl，室温放置2小时；
7)甩去一抗稀释液，在吸水纸上拍干酶标板；
8)每孔加入300μl PBST，放置2分钟后，甩去孔内液体，在吸水纸上拍干酶标板，重复4次；
8)每孔加入稀释的HRP标记的抗鸡IgY的二抗(1:5000)，室温放置1小时；
9)弃去二抗稀释液，在吸水纸上拍干酶标板
10)每孔加入300μl PBST，放置2分钟后，甩去孔内液体，在吸水纸上拍干酶标板，重复4次；
3、显色
1)每孔加入100μl TMB显色液，放置3～10分钟
2)每孔加入100μl 2M硫酸终止反应
3)设定酶标仪程序，检测450nm下的OD值，计算结果
4、实验结果
该抗体的ELISA检测效价为1:50000。
实验二：检测所制备的含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的中和活性
1)将含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体稀释成0.1％、0.5％、1％、2％、5％；
2)将培养好的SARS-CoV-2冠状病毒按照每106的Vero E6细胞的1/2接种量中含100TCID50进行稀释
3)试验组：将不同稀释度的含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体与等量的SARS-CoV-2冠状病毒相加；对照组用无菌的PBS代替；混匀后放入37℃作用1小时，分别接种至含有106Vero E6细胞中，37℃培养箱中培养，逐日观察细胞病变情况。
结果：SARS-CoV-2冠状病毒卵黄抗体在1％以上浓度下对SARS-CoV-2冠状病毒有有效的抑制作用。
经以上实验验证，本方案制备的SARS-CoV-2冠状病毒卵黄抗体在防治SARS-CoV-2冠状病毒方面具有良好的效果。
如上所述，尽管参照特定的优选实施例已经表示和表述了本发明，但其不得解释为对本发明自身的限制。在不脱离所附权利要求定义的本发明的精神和范围前提下，可对其在形式上和细节上作出各种变化。
序列表
<110> 南京蛋球球生物医学技术合伙企业（有限合伙）
<120> 用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与应用
<150> 2020101058024
<151> 2020-02-19
<160> 6
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp Ser Lys Val Gly Gly Asn Tyr
1 5 10 15
Asn Tyr Leu Tyr
20
<210> 2
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
Leu Lys Pro Phe Glu Arg Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln
1 5 10
<210> 3
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
Ala Val Arg Asp Pro Gln Thr Leu Glu Ile Leu Asp Ile Thr
1 5 10
<210> 4
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
Val Glu Gln Asp Lys Asn Thr Gln Glu Val Phe Ala Gln Val
1 5 10
<210> 5
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
Asp Pro Ser Lys Pro Ser Lys Arg Ser Phe Ile Glu Asp
1 5 10
<210> 6
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
Asn His Thr Ser Pro Asp Val Asp Leu Gly Asp Ile Ser Gly Ile Asn
1 5 10 15

Claims (9)

1.一种用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)利用多肽合成仪合成SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原，将合成的抗原用KLH或BSA进行偶联；
(2)对步骤(1)中制备的抗原进行乳化：采上述抗原用弗氏完全佐剂按1:1混合后乳化作为初次免疫抗原；选用弗氏不完全佐剂与上述抗原按1:1混合后乳化作为加强免疫抗原；
(3)免疫：选健康的产蛋母鸡隔离饲养并进行鸡肌肉多点注射步骤(2)中的免疫抗原，初次免疫后，隔两周开始加强免疫，每隔一周加强免疫一次，共加强免疫三次；从初次免疫后计算，第三十天开始收集鸡卵，该鸡卵中含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体，将鸡卵4℃存储备用；
(4)从上述鸡卵中提取抗体。
2.根据权利要求1所述的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中合成SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原的具体步骤是：
(11)取1mg KLH或BSA于1.5ml的离心管内，用100μl的pH10.0硼酸缓冲液充分溶解后，10000rpm离心1min后，将上清转移到新的离心管内；
(12)将1μM的抗原多肽用100μl的pH10.0硼酸缓冲液进行溶解；
(13)将步骤(11)中的KLH或BSA溶剂逐滴加到多肽溶液中；
(14)边振荡边缓慢加入新鲜配制的0.1ml 0.3％戊二醛溶液，室温放置2小时，中间颠倒混匀数次；
(15)加入25μl的甘氨酸溶液，孵育30分钟；
(16)以pH8.5硼酸缓冲液透析过夜，换液2次，得到SARS-CoV-2冠状病毒S蛋白的抗原；
所述抗原多肽序列为：
S1 IAWNSNNLDSKVGGNYNYLY
S2 LKPFERDISTEIYQ
S3 AVRDPQTLEILDIT
S4 VEQDKNTQEVFAQV
S5 DPSKPSKRSFIED
S6 NHTSPDVDLGDISGIN。
3.根据权利要求1所述的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，其特征在于：步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：用水稀释法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，以去离子水稀释，调节pH值至7.0～7.4，4℃搅拌4～6小时，离心后弃去沉淀，将上清浓缩、冷冻干燥得卵黄抗体。
4.根据权利要求1所述的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，其特征在于：步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：采用PEG沉淀法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，加入3倍蛋黄体积的4％的PEG进行稀释，充分搅拌混匀后，4℃，12000rpm离心10分钟，取上清液，然后往上清液内逐滴滴加1/6上清液体积的40％PEG后充分搅拌混匀后，同样条件离心，收集沉淀，冷冻干燥，得卵黄抗体。
5.根据权利要求1所述的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，其特征在于：步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：硫酸铵沉淀法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离体积为V得蛋黄，加入体积为V的生理盐水，缓慢滴加体积为2V的50％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，12000rpm离心10分钟，弃上清，用生理盐水溶解沉淀，加入体积为2/3V的40％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，12000rpm离心10分钟，弃上清，用生理盐水溶解沉淀，加入体积为1/2V的33％的饱和硫酸铵，4℃下缓慢搅拌3小时，取沉淀进行冷冻干燥，得卵黄抗体。
6.根据权利要求1所述的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，其特征在于：步骤(4)中鸡卵中提取抗体的具体过程为：超滤法提取卵黄抗体：从收集的免疫鸡卵中分离蛋黄，以去离子水稀释，4℃下静置过夜后，用150KD切向流技术，收集分子量大于150KD的蛋白物质，得卵黄抗体。
7.采用权利要求1所述方法制的用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体。
8.含有权利要求1所述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的液体制剂。
所述液体制剂配方具体为：用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体1g，磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)4.45g,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)3.2g，氯化钾(KCl)0.4g，氯化钠(NaCl)4.2g，山梨酸钾2g，蒸馏水986.75g。
9.由权利要求1所述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体在制备喷雾剂中的应用，
所述喷雾剂的具体配方为：用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体1g，磷酸氢二钠(Na2HPO4·2H2O)4.45g,磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)3.2g，氯化钾(KCl)0.4g，氯化钠(NaCl)4.2g，山梨酸钾2g，蒸馏水986.75g。
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