CN112285090A - 一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统 - Google Patents

一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统 Download PDF

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杜耀华
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Abstract

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统。本发明包括电控载物台、成像单元、照明单元、拉曼光谱探测单元，电控载物台用于放置待检测样本；成像单元用于对待检测样本的原位成像；照明单元包括透明样本照射光源、不透明样本照射光源、荧光样本照射光源，透明样本照射光源用于照射待检测样本；不透明样本照射光源用于对待检测样本进行第一倾斜照明；荧光样本照射光源用于对待检测样本进行第二倾斜照明；拉曼光谱探测单元用于对待检测样本发出的拉曼散射光进行收集，形成拉曼光谱。本发明能够实现单个细菌细胞的分类鉴定，具有结构简单、检测范围广、成本低的特点。

Description

一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统
技术领域
本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统。
背景技术
拉曼散射光谱与物质的分子振动、振动-转动能级相关，因此拉曼光谱能够反应物质内分子振动、振动-转动能级，可应用于分子结构分析。共焦拉曼光谱法是一种非常有前景的细菌分类鉴定技术，拉曼光谱已被证明可以在菌株水平上对细菌进行鉴定，可检测生物量从微菌落到单细胞不等。拉曼光谱汇集了其探测范围内所有化学物质的信息，能够对细菌表型进行详细的描述。当前单细菌的拉曼检测主要采用无透镜成像技术、暗场显微镜技术与拉曼光谱仪结合的方法，在激发路径中使用扩束器将光束直径与目标入射光瞳相适应，光斑尺寸与CMOS传感器的尺寸匹配后，整个细菌液滴被成像，直接确认细菌区域，使得直径小于1μm的光斑的光聚集到样品上，由显微物镜收集，最后聚集到光谱仪中，当与物镜相连的LED打开，激光束聚焦到样品上时，便可实现暗场显微镜。但是，单细菌拉曼检测平台针对检测样本特性单一，不能实现自动捕获细菌，检测效率低下。
发明内容
本发明的目的在于提供一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，能够实现单个细菌细胞的分类鉴定，具有结构简单、检测范围广、成本低的特点。
本发明采用的技术方案：
一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，包括电控载物台、成像单元、照明单元、拉曼光谱探测单元，
电控载物台用于放置待检测样本，可在图像引导下自动捕获待检测样本的细胞；
成像单元用于对待检测样本的原位成像，成像单元与载物台同轴设置；
照明单元包括透明样本照射光源、不透明样本照射光源、荧光样本照射光源，透明样本照射光源与载物台和成像单元依次同轴设置，用于照射待检测样本，在所述成像单元形成散射光成像；不透明样本照射光源与载物台成第一设定角度的夹角，用于对待检测样本进行第一倾斜照明，使得待检测样本中的微粒的散射光在所述成像单元形成侧向散射光成像；荧光样本照射光源位于电控载物台的左侧，与电控载物台平行布置，用于对待检测样本进行第二倾斜照明，激发待检测样本中的微粒发出荧光，在成像单元形成荧光成像；
拉曼光谱探测单元与成像单元平行布置，位于成像单元的右侧，用于对待检测样本发出的拉曼散射光进行收集，形成拉曼光谱，包括激发模块和光谱探测模块，激发模块用于对待检测样本进行第二倾斜照明，激发待检测样本中的微粒发出散射光，散射光在光谱探测模块形成拉曼光谱图像；光谱探测模块用于对所述待检测样本发出的拉曼散射光进行收集，形成拉曼光谱。
所述成像单元包括显微物镜、第一分光片、第二分光片、荧光滤光片、成像透镜和面阵相机；显微物镜位于电控载物台的正上方，显微物镜的正上方自下而上依次为第二分光片、第一分光片、荧光滤光片、成像透镜、面阵相机。
所述第一分光片与水平方向的夹角为45°，第二分光片与水平方向的夹角为135°，第二分光片为荧光滤光片，电控载物台置于显微物镜的一个焦平面处；面阵相机用于对待检测样本聚焦成像。
所述透明样本照射光源包括白光照明光源，白光照明光源位于电控载物台的下部，白光照明模块与电控载物台和成像单元依次垂直设置。
所述不透明样本照射光源包括侧向照明光源，侧向照明光源与电控载物台成第一设定角度的夹角；第一设定角度为15-30度。
所述荧光样本照射光源包括LED荧光光源、滤光片、聚焦透镜，LED荧光光源位于电控载物台的左侧，与电控载物台平行布置。
所述激发模块包括激发光源、第一滤光片、第三分光片，第三分光片与第一分光片处于同一水平面且平行布置，激发光源发出吸收光，吸收光透过第一滤光片，经第三分光片和第一分光片反射后，经过第二分光片和显微物镜，垂直照射待检测样本，在光谱探测模块形成拉曼光谱图像；光谱探测模块包括拉曼光谱仪、光纤、第二滤光片、聚焦透镜，第二滤光片与第三分光片处于同一水平面且平行布置，聚焦透镜与第二滤光片处于同一水平面且与第三分光片分别位于第二滤光片的两侧，拉曼光谱仪通过光纤与聚焦透镜连接。
一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统的检测方法，包括如下步骤：
步骤一、确定样品类型，包括透明样本、不透明样本、荧光样本；
步骤二、根据步骤一确定的样品类型，选择光源；
步骤三，通过光源对样品进行照射，同时在面阵相机中实时观察图像，微调电控载物台聚焦，直到图像清晰；
步骤四、拉曼光谱探测。
所述步骤四包括如下步骤，所述拉曼激发光源发出的光，首先由第一滤光片滤除主波长外的杂光，然后由第三分光片和第一分光片反射，并由第二分光片透射，由显微物镜形成聚焦点，聚焦到被测样品上；样品目标粒子发出的散射光，由显微物镜收集，经由第二分光片透射，由第一分光片反射，并由第三分光片透射，经过第二滤光片消除弹性散射光，拉曼散射光信号由第二滤光片透射后进入聚焦透镜，并聚焦到光纤的入口，经由光纤传输到拉曼光谱仪中，完成样本拉曼散射光谱的信号采集。
所述聚焦点大小小于10um。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明提供的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，将荧光成像定位与透射成像定位与拉曼光谱技术结合，在单细胞检测领域，打破只能透明检测样品的限制，扩大检测范围；
(2)本发明提供的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，通过选择点亮不同的照明单元，实现对样本不同模式的成像定位，使得单个细胞的拉曼光谱采集更加快速精准；
(3)本发明提供的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，具有结构简单，成本低的特点；
(4)本发明提供的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，无任何机械切换部件，可实现样本透射成像定位、白光侧向照明成像定位、荧光成像定位、电控系统自动捕获细胞和拉曼光谱检测，用于细菌单个细胞的分类鉴定，可广泛应用于科学研究、临床检验和工业化验。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明提供的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统结构示意图；
图中：1-面阵相机、2-成像透镜、3-荧光滤光片、4-第一分光片、5-第二分光片、6-显微物镜、7-侧向照明光源、8-电控载物台、9-样本、10-白光照明光源、11-激发光源、12-第一滤光片、13-拉曼光谱仪、14-光纤、15-第三分光片、16-第二滤光片、17-聚焦透镜、18-LED荧光光源、19-第三滤光片、20-聚焦透镜。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
图1为本发明实施例提供的单细胞共焦拉曼检测平台结构示意图，如图1所示，本发明提供的的单细胞共焦拉曼检测平台包括：电控载物台8、成像单元、照明单元(包括白光照明模块、侧向照明光源7、荧光照明模块)、拉曼光谱探测单元(包括激发模块和光谱探测模块)。
其中，电控载物台8用于放置待检测样本9，可在图像引导下自动捕获待检测样本9的细胞，待检测样本9一般为薄层透明液体样本和不透明金属基材固体样本，如共聚焦培养皿中的液体样本或表面增强拉曼光谱增强基片固体样本。
成像单元用于对待检测样本的原位成像。成像单元包括显微物镜6、第一分光片4、第二分光片5、荧光滤光片3、成像透镜2和面阵相机1；显微物镜6位于电控载物台8的正上方，显微物镜6的正上方自下而上依次为第二分光片5、第一分光片4、荧光滤光片3、成像透镜2、面阵相机1；第一分光片4与水平方向的夹角为45°，第二分光片5与水平方向的夹角为135°，电控载物台8置于显微物镜6的一个焦平面处；面阵相机1用于对待检测样本9聚焦成像；第二分光片5为荧光滤光片。
白光照明模块10位于电控载物台8的下部，白光照明模块10与电控载物台8和成像单元依次垂直设置；所述白光照明模块10用于照射待检测样本9，在面阵相机1形成透射成像。
侧向照明光源7与电控载物台8成第一设定角度的夹角；所述侧向照明光源7用于对待检测样本9进行倾斜照明，在面阵相机1成像单元形成白光侧向照明成像。
具体的，侧向照明光源7第一设定角度为15-30度，即可对待检测样本9进行第一倾斜照明。
荧光照明模块包括LED荧光光源18、滤光片19、聚焦透镜20，LED荧光光源18位于电控载物台8的左侧，与电控载物台8平行布置所述荧光照明模块用于对待检测样本9进行荧光激发照明，激发待检测样本9中的微粒发出荧光，并通过面阵相机1元形成荧光成像。
激发模块包括激发光源11、第一滤光片12、第三分光片15，第三分光片15与第一分光片4处于同一水平面且平行布置，激发光源11发出吸收光，吸收光透过第一滤光片12，经第三分光片15和第一分光片4反射后，经过第二分光片5和显微物镜6，垂直照射待检测样本9，在光谱探测模块形成拉曼光谱图像，光谱探测模块包括拉曼光谱仪13、光纤14、第二滤光片16、聚焦透镜17，第二滤光片16与第三分光片15处于同一水平面且平行布置，聚焦透镜17与第二滤光片16处于同一水平面且与第三分光片15分别位于第二滤光片16的两侧，拉曼光谱仪13通过光纤14与聚焦透镜17连接；
与所述面阵相机1成像单元成第三设定角度的夹角，用于对所述待检测样本9发出的拉曼散射光进行收集，形成拉曼光谱。
成像过程：样品发出的光(荧光或散射光)经由显微物镜6收集，依次经过第二分光片5、第一分光片4和荧光滤光片3透射，由成像透镜2聚焦到面阵相机1中形成图像，并被面阵相机1采集。成像所需的照明光源，根据被测样本特性，可以选用照明光源10(实现透射成像)、照明光源7(实现散射成像)和照明光源18(实现荧光成像)。
拉曼光谱探测过程：拉曼激发光源11发出的光，首先由第一滤光片12滤除主波长外的杂光，然后由第三分光片15和第一分光片4反射，并由第二分光片5透射，由显微物镜6聚焦到被测样品9上。聚焦点大小小于10um，优选小于5um。样品9目标粒子发出的散射光，由显微物镜6收集，经由第二分光片5透射，由第一分光片4反射，并由第三分光片15透射，经过第二滤光片16消除弹性散射光，拉曼散射光信号由第二滤光片16透射后进入聚焦透镜17，并聚焦到光纤14的入口，经由光纤14传输到拉曼光谱仪13中，完成样本拉曼散射光谱的信号采集。
样品检测过程：
A：样本9放入电控载物台8上，如果是透明样本可用照明光源10进行照明，点亮照明光源10，同时在面阵相机1中实时观察图像，微调电控载物台8聚焦，直到图像清晰。根据图像，选取带检测目标点，选中目标点后电控系统自动控制电控载物台8，使选中目标样本点移动到共焦拉曼检测区，然后关闭面阵相机1和照明光源10，点亮拉曼光源11，并同步采集拉曼光谱仪13中的光谱信号，完成拉曼光谱探测。
B：样本9放入电控载物台8上，如果是不透明样本可用照明光源7进行照明，点亮照明光源7，同时在面阵相机1中实时观察图像，微调电控载物台8聚焦，直到图像清晰。根据图像，选取带检测目标点，选中目标点后电控系统自动控制电控载物台8，使选中目标样本点移动到共焦拉曼检测区，然后关闭面阵相机1和照明光源7，点亮拉曼光源11，并同步采集拉曼光谱仪13中的光谱信号，完成拉曼光谱探测。
C：对于具有荧光特性的样本，将样本放到电控载物台8上，点亮照明光源18，样本在光源18发出光的照射下将发出荧光信号，在面阵相机1中实时观察图像，微调电控载物台8聚焦，直到荧光图像清晰。根据图像，选取带检测目标点，选中后电控系统自动控制电控载物台8，使选中目标样本点移动到共焦拉曼检测区，然后关闭面阵相机1和照明光源10，点亮拉曼光源11，并同步采集拉曼光谱仪13中的光谱信号，完成拉曼光谱探测。
本文中应用了具体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处。综上所述，本发明内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (10)

1.一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：包括电控载物台8、成像单元、照明单元、拉曼光谱探测单元，
电控载物台(8)用于放置待检测样本(9)，可在图像引导下自动捕获待检测样本(9)的细胞；
成像单元用于对待检测样本的原位成像，成像单元与载物台(8)同轴设置；
照明单元包括透明样本照射光源、不透明样本照射光源、荧光样本照射光源，透明样本照射光源与载物台(8)和成像单元依次同轴设置，用于照射待检测样本，在所述成像单元形成散射光成像；不透明样本照射光源与载物台(8)成第一设定角度的夹角，用于对待检测样本进行第一倾斜照明，使得待检测样本中的微粒的散射光在所述成像单元形成侧向散射光成像；荧光样本照射光源位于电控载物台(8)的左侧，与电控载物台(8)平行布置，用于对待检测样本进行第二倾斜照明，激发待检测样本中的微粒发出荧光，在成像单元形成荧光成像；
拉曼光谱探测单元与成像单元平行布置，位于成像单元的右侧，用于对待检测样本(9)发出的拉曼散射光进行收集，形成拉曼光谱，包括激发模块和光谱探测模块，激发模块用于对待检测样本进行第二倾斜照明，激发待检测样本中的微粒发出散射光，散射光在光谱探测模块形成拉曼光谱图像；光谱探测模块用于对所述待检测样本发出的拉曼散射光进行收集，形成拉曼光谱。
2.根据权利要求1所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：所述成像单元包括显微物镜(6)、第一分光片(4)、第二分光片(5)、荧光滤光片(3)、成像透镜(2)和面阵相机(1)；显微物镜(6)位于电控载物台(8)的正上方，显微物镜(6)的正上方自下而上依次为第二分光片(5)、第一分光片(4)、荧光滤光片(3)、成像透镜(2)、面阵相机(1)。
3.根据权利要求2所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：所述第一分光片(4)与水平方向的夹角为45°，第二分光片(5)与水平方向的夹角为135°，第二分光片(5)为荧光滤光片，电控载物台(8)置于显微物镜(6)的一个焦平面处；面阵相机(1)用于对待检测样本(9)聚焦成像。
4.根据权利要求3所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：所述透明样本照射光源包括白光照明光源(10)，白光照明光源(10)位于电控载物台(8)的下部，白光照明模块(10)与电控载物台(8)和成像单元依次垂直设置。
5.根据权利要求3所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：所述不透明样本照射光源包括侧向照明光源(7)，侧向照明光源(7)与电控载物台(8)成第一设定角度的夹角；第一设定角度为15-30度。
6.根据权利要求3所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：所述荧光样本照射光源包括LED荧光光源(18)、滤光片(19)、聚焦透镜(20)，LED荧光光源(18)位于电控载物台(8)的左侧，与电控载物台(8)平行布置。
7.根据权利要求3所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统，其特征在于：所述激发模块包括激发光源(11)、第一滤光片(12)、第三分光片(15)，第三分光片(15)与第一分光片(4)处于同一水平面且平行布置，激发光源(11)发出吸收光，吸收光透过第一滤光片(12)，经第三分光片(15)和第一分光片(4)反射后，经过第二分光片(5)和显微物镜(6)，垂直照射待检测样本(9)，在光谱探测模块形成拉曼光谱图像；光谱探测模块包括拉曼光谱仪(13)、光纤(14)、第二滤光片(16)、聚焦透镜(17)，第二滤光片(16)与第三分光片(15)处于同一水平面且平行布置，聚焦透镜(17)与第二滤光片(16)处于同一水平面且与第三分光片(15)分别位于第二滤光片(16)的两侧，拉曼光谱仪(13)通过光纤(14)与聚焦透镜(17)连接。
8.根据权利要求1-7任意一项所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测系统的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤一、确定样品类型，包括透明样本、不透明样本、荧光样本；
步骤二、根据步骤一确定的样品类型，选择光源；
步骤三，通过光源对样品进行照射，同时在面阵相机(1)中实时观察图像，微调电控载物台(8)聚焦，直到图像清晰；
步骤四、拉曼光谱探测。
9.根据权利要求8所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测方法，其特征在于：所述步骤四包括如下步骤，所述拉曼激发光源(11)发出的光，首先由第一滤光片(12)滤除主波长外的杂光，然后由第三分光片(15)和第一分光片(4)反射，并由第二分光片(5)透射，由显微物镜(6)形成聚焦点，聚焦到被测样品(9)上；样品(9)目标粒子发出的散射光，由显微物镜(6)收集，经由第二分光片(5)透射，由第一分光片(4)反射，并由第三分光片(15)透射，经过第二滤光片(16)消除弹性散射光，拉曼散射光信号由第二滤光片(16)透射后进入聚焦透镜(17)，并聚焦到光纤(14)的入口，经由光纤(14)传输到拉曼光谱仪(13)中，完成样本拉曼散射光谱的信号采集。
10.根据权利要求9所述的一种便携式共焦单细胞拉曼散射检测方法，其特征在于：所述聚焦点大小小于10um。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113176248A (zh) * 2021-04-28 2021-07-27 中国科学院烟台海岸带研究所 一种海水微塑料在线监测系统
CN114235836A (zh) * 2021-12-16 2022-03-25 深圳市壹倍科技有限公司 一种用于半导体缺陷检测的系统

Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101216414A (zh) * 2007-12-29 2008-07-09 中国科学院西安光学精密机械研究所 多功能光学微操纵装置
DE102010005723A1 (de) * 2010-01-26 2011-07-28 WITec Wissenschaftliche Instrumente und Technologie GmbH, 89081 Raman-Vorrichtung, insbesondere Raman-Mikroskop mit einer Vorrichtung zur Detektion eines Raman-Signals einer Probe
JP2014016531A (ja) * 2012-07-10 2014-01-30 Jasco Corp 共焦点顕微装置
CN103884704A (zh) * 2014-03-10 2014-06-25 北京理工大学 分光瞳激光共焦布里渊-拉曼光谱测量方法及装置
CN106461925A (zh) * 2014-02-27 2017-02-22 堀场乔宾伊冯公司 用于具有自适应光学系统的拉曼散射光学显微镜的系统和方法
CN107044959A (zh) * 2017-02-16 2017-08-15 江苏大学 显微多模态融合光谱检测系统
CN107179272A (zh) * 2017-05-10 2017-09-19 中南民族大学 一种显微镜下急性分离神经细胞捕捉系统及方法
CN109154569A (zh) * 2016-02-12 2019-01-04 麻省理工学院 用于对未切片组织样本成像的方法和装置
CN109182081A (zh) * 2018-08-22 2019-01-11 长春长光辰英生物科学仪器有限公司 一种基于图像处理模型的单细胞分选系统
CN109709025A (zh) * 2019-02-12 2019-05-03 军事科学院系统工程研究院卫勤保障技术研究所 一种多模成像光学系统
CN110300883A (zh) * 2016-11-29 2019-10-01 光热光谱股份有限公司 用于增强光热成像和光谱的方法和设备
CN110441235A (zh) * 2019-09-13 2019-11-12 中国科学院新疆理化技术研究所 一种多模耦合原位显微光谱成像系统
CN110579470A (zh) * 2019-09-13 2019-12-17 中国科学院新疆理化技术研究所 一种利用多模耦合光学平台实时原位表征爆炸物检测方法

Patent Citations (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101216414A (zh) * 2007-12-29 2008-07-09 中国科学院西安光学精密机械研究所 多功能光学微操纵装置
DE102010005723A1 (de) * 2010-01-26 2011-07-28 WITec Wissenschaftliche Instrumente und Technologie GmbH, 89081 Raman-Vorrichtung, insbesondere Raman-Mikroskop mit einer Vorrichtung zur Detektion eines Raman-Signals einer Probe
JP2014016531A (ja) * 2012-07-10 2014-01-30 Jasco Corp 共焦点顕微装置
CN106461925A (zh) * 2014-02-27 2017-02-22 堀场乔宾伊冯公司 用于具有自适应光学系统的拉曼散射光学显微镜的系统和方法
CN103884704A (zh) * 2014-03-10 2014-06-25 北京理工大学 分光瞳激光共焦布里渊-拉曼光谱测量方法及装置
CN109154569A (zh) * 2016-02-12 2019-01-04 麻省理工学院 用于对未切片组织样本成像的方法和装置
CN110300883A (zh) * 2016-11-29 2019-10-01 光热光谱股份有限公司 用于增强光热成像和光谱的方法和设备
CN107044959A (zh) * 2017-02-16 2017-08-15 江苏大学 显微多模态融合光谱检测系统
CN107179272A (zh) * 2017-05-10 2017-09-19 中南民族大学 一种显微镜下急性分离神经细胞捕捉系统及方法
CN109182081A (zh) * 2018-08-22 2019-01-11 长春长光辰英生物科学仪器有限公司 一种基于图像处理模型的单细胞分选系统
CN109709025A (zh) * 2019-02-12 2019-05-03 军事科学院系统工程研究院卫勤保障技术研究所 一种多模成像光学系统
CN110441235A (zh) * 2019-09-13 2019-11-12 中国科学院新疆理化技术研究所 一种多模耦合原位显微光谱成像系统
CN110579470A (zh) * 2019-09-13 2019-12-17 中国科学院新疆理化技术研究所 一种利用多模耦合光学平台实时原位表征爆炸物检测方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113176248A (zh) * 2021-04-28 2021-07-27 中国科学院烟台海岸带研究所 一种海水微塑料在线监测系统
CN114235836A (zh) * 2021-12-16 2022-03-25 深圳市壹倍科技有限公司 一种用于半导体缺陷检测的系统

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