CN112274672A - 一种冬虫夏草的灭菌方法及冬虫夏草灭菌品 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及中药处理技术领域，具体公开了一种冬虫夏草的灭菌方法及获得的冬虫夏草灭菌品。本发明提供的冬虫夏草的灭菌方法包括：将鲜冬虫夏草用盐水超声冷浸，过滤，收集浸泡液；将所述浸泡液进行除盐、浓缩后，均匀喷洒在冬虫夏草上；将冬虫夏草进行冷冻干燥。本发明提供的方法通过采用食盐水超声冷浸再冷冻干燥的处理工艺，可杀灭冬虫夏草的微生物，使其微生物限度符合要求，并保持了冬虫夏草中SOD活力和蛋白质含量。采用本发明灭菌方法获得的冬虫夏草灭菌品可以显著增强冬虫夏草的壮阳效果。

Description

一种冬虫夏草的灭菌方法及冬虫夏草灭菌品
技术领域
本发明涉及中药处理技术领域，特别是涉及一种冬虫夏草的灭菌处理。
背景技术
冬虫夏草，中药名，为麦角菌科植物冬虫夏草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫的尸体的复合体。冬虫夏草具有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳、补肺益肾、止血化痰、秘精益气等多种功效。冬虫夏草生长于高原地区土壤之中，收获的虫草表面无法避免地会带有土壤中的微生物，并且在储藏过程中也易受各种微生物的污染，导致制成的冬虫夏草产品含菌量高，严重影响了冬虫夏草产品的品质，因此冬虫夏草一般需要经灭菌处理来保证产品的品质。
冬虫夏草中含有虫草素、虫草酸、虫草多糖、氨基酸、脂肪酸、甾醇、蛋白质及多种活性酶等有效成分，其中很多有效物质在高温高湿环境下会发生变性、水解等，容易造成功效成分大量损失，因此高温、湿热的灭菌法不适用于冬虫夏草的灭菌处理。现有的对不耐高温高湿物料灭菌常用的方法如钴-60辐照法、电子束辐照法、臭氧灭菌法、微波灭菌法、环氧乙烷灭菌法、超低温冷冻法等方法在用于冬虫夏草灭菌时，发现也存在一定的缺陷，例如有的存在细菌残留问题，有的则会破坏物料的功效成分，有些方法还存在灭菌条件苛刻、灭菌效果不佳的问题。
因此，基于以上问题，有必要对现有的冬虫夏草灭菌方法进行研究改进。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种冬虫夏草的灭菌方法，该方法可以有效杀灭冬虫夏草的微生物，并保持冬虫夏草中SOD活力和蛋白质含量。
具体而言，本发明提供的冬虫夏草的灭菌方法包括如下步骤：
(i)将鲜冬虫夏草用盐水超声冷浸，过滤，收集浸泡液；
(ii)将所述浸泡液进行除盐、浓缩后，均匀喷洒在经步骤(i)处理后的冬虫夏草上；
(iii)将步骤(ii)所得冬虫夏草进行冷冻干燥。
本发明所述盐水是指NaCl的水溶液。在实际操作中，将食盐溶于水即可获得。
作为本发明的一种优选方案，所述盐水超声冷浸采用质量百分比浓度为10～20％的盐水。
作为本发明的一种优选方案，所述盐水超声冷浸采用的盐水的体积和鲜冬虫夏草的重量比为10～20mL/g。
作为本发明的一种优选方案，所述盐水超声冷浸的温度为10～30℃。
作为本发明的一种优选方案，所述盐水超声冷浸具体包括：将鲜冬虫夏草在盐水中浸泡并超声10～60min，停止超声后，继续浸泡0.5～3h。
作为本发明的一种优选方案，所述盐水超声冷浸采用的超声频率为20000～40000Hz，功率为100～400W。
本发明在盐水超声冷浸后，经过过滤，可以获得处理好的冬虫夏草，同时收集浸泡液。为了充分去除冬虫夏草上残留的盐水，本发明所述步骤(i)还可以包括：过滤后，对冬虫夏草进行清洗，收集洗脱液，将所述浸泡液与洗脱液合并。
本发明将所述浸泡液或者含有所述浸泡液与洗脱液的混合溶液进行除盐、浓缩后，均匀喷洒在经过盐水超声冷浸处理的冬虫夏草上，可以充分保留从冬虫夏草中流失的有效成分，如SOD和蛋白质等，同时将盐分进行了有效去除。
作为本发明的一种优选方案，所述除盐包括：采用纳滤膜进行纳滤。所述纳滤膜的截留分子量优选为150～300Da。经过上述纳滤处理后，可以得到低盐的浸泡液。
作为本发明的一种优选方案，所述浓缩的目的是浓缩得到相对密度为1.20～1.30的浓缩液。在实际操作中，所述浓缩可以在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa的条件下进行，最大程度地确保溶液中的活性成分不受破坏。
作为本发明的一种优选方案，所述冷冻干燥在真空条件下进行。具体而言，所述冷冻干燥包括：先在真空度10～40bar、温度-45～-20℃条件下升华干燥，再在真空度1～10bar、温度15～30℃的条件下解析干燥。优选地，所述升华干燥时间为10～30h。优选地，所述解析干燥时间为2～4h。
作为本发明的一种优选方案，所述冷冻干燥前先进行预冻处理，以便于为了提高冷冻干燥的效果。作为本发明的一种优选实施方式，所述预冻处理在-55～-40℃下进行，优选进行2～6h。
本发明的第二目的是保护所述灭菌方法获得的冬虫夏草灭菌品。
本发明提供的冬虫夏草的灭菌方法，通过对冬虫夏草进行低温灭菌和干燥，即采用盐水超声冷浸再冷冻干燥的处理工艺，可杀灭冬虫夏草的微生物，使其微生物限度符合要求，并保持了冬虫夏草中SOD活力和蛋白质含量。并且，采用本发明灭菌方法获得的冬虫夏草灭菌品显著增强了冬虫夏草的壮阳效果。
附图说明
图1是本发明实验例中冬虫夏草对雄性小鼠体重的影响曲线图；
图2是本发明实验例中雌性配笼小鼠体重变化曲线图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例1
本实施例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为15％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和冬虫夏草重量比为15mL/g，超声频率为20000Hz，功率为200W，时间为20min，停止超声，继续浸泡1.5h，超声、浸泡过程中均控制温度为20±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)纳滤：洗脱的盐水和过滤得到的浸泡液合并，使用截留分子量150Da的纳滤膜过滤除去其中盐分，得到低盐的浸泡液，在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.25的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-55℃，预冻2h；
(4)真空冷冻干燥：预冻处理后的冬虫夏草在-45℃进行升华干燥，真空度为40bar，干燥时间10h；再在15℃下解析干燥，真空度为1bar，干燥时间2h，即得到冬虫夏草灭菌品。冬虫夏草灭菌品密封4℃冷藏保存。
实施例2
本实施例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为10％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为10mL/g，超声频率为20000Hz，功率为400W，时间为60min，停止超声，继续浸泡1h，超声、浸泡过程中均控制温度为25±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)纳滤：洗脱的盐水和过滤得到的浸泡液合并，使用截留分子量300Da的纳滤膜过滤除去其中盐分，得到低盐的浸泡液，在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.20的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-40℃，预冻4h；
(4)真空冷冻干燥：预冻处理后的冬虫夏草在-30℃进行升华干燥，真空度为30bar，干燥时间30h；再在30℃下解析干燥，真空度为10bar，干燥时间3h，即得到冬虫夏草灭菌品。
实施例3
本实施例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为20％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为20mL/g，超声频率为40000Hz，功率为100W，时间为10min，停止超声，继续浸泡3h，超声、浸泡过程中均控制温度为30±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)纳滤：洗脱的盐水和过滤得到的浸泡液合并，使用截留分子量300Da的纳滤膜过滤除去其中盐分，得到低盐的浸泡液，在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.30的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-40℃，预冻4h；
(4)真空冷冻干燥：预冻处理后的冬虫夏草在-30℃进行升华干燥，真空度为40bar，干燥时间30h；再在30℃下解析干燥，真空度为10bar，干燥时间4h，即得到冬虫夏草灭菌品。
对比例1
本对比例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为15％的食盐水浸泡110min，其中食盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为15mL/g，浸泡过程中控制温度为20±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)纳滤：洗脱的盐水和过滤得到的浸泡液合并，使用截留分子量150Da的纳滤膜过滤除去其中盐分，得到低盐的浸泡液，在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.20的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-55℃，预冻2h；
(4)真空冷冻干燥：步骤(3)处理后的冬虫夏草在-45℃进行升华干燥，真空度为40bar，干燥时间10h；再在15℃下解析干燥，真空度为1bar，干燥时间2h，即得到冬虫夏草灭菌品。
对比例2
本对比例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为15％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为15mL/g，超声频率为20000Hz，功率为200W，时间为20min，停止超声，继续浸泡1.5h，超声、浸泡过程中均控制温度为20±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)预冻：将步骤(1)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-55℃，预冻2h；
(3)真空冷冻干燥：步骤(2)处理后的冬虫夏草在-45℃进行升华干燥，真空度为40bar，干燥时间10h；再在15℃下解析干燥，真空度为1bar，干燥时间2h，即得到冬虫夏草灭菌品。
对比例3
本对比例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)纯化水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用纯化水浸泡并超声，其中纯化水的体积和鲜冬虫夏草重量比为15mL/g，超声频率为20000Hz，功率为300W，时间为20min，停止超声，继续浸泡1.5h，超声、浸泡过程中均控制温度为20±2℃，之后过滤；
(2)纳滤：将过滤得到的浸泡液在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.25的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-55℃，预冻2h；
(4)真空冷冻干燥：步骤(3)处理后的冬虫夏草在-45℃进行升华干燥，真空度为40bar，干燥时间10h；再在15℃下解析干燥，真空度为1bar，干燥时间2h，即得到冬虫夏草灭菌品。
对比例4
本对比例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为35％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为10mL/g，超声频率为20000Hz，功率为200W，时间为30min，停止超声，继续浸泡2h，超声、浸泡过程中均控制温度为25±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)纳滤：洗脱的盐水和过滤得到的浸泡液合并，使用截留分子量150Da的纳滤膜过滤除去其中盐分，得到低盐的浸泡液，在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.30的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-40℃，预冻4h；
(4)真空冷冻干燥：预冻处理后的冬虫夏草在-30℃进行升华干燥，真空度为30bar，干燥时间30h；再在30℃下解析干燥，真空度为10bar，干燥时间2h，即得到冬虫夏草灭菌品。本对比例处理得到的冬虫夏草灭菌品冬虫夏草的性状发生改变，色泽变浅，质地变软。
对比例5
本对比例提供的冬虫夏草的灭菌方法，包括以下步骤：
(1)盐水超声冷浸：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为5％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为10mL/g，超声频率为40000Hz，功率为200W，时间为30min，停止超声，继续浸泡2h，超声、浸泡过程中均控制温度为25±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水；
(2)纳滤：洗脱的盐水和过滤得到的浸泡液合并，使用截留分子量300Da的纳滤膜过滤除去其中盐分，得到低盐的浸泡液，在60～65℃、-0.07～-0.09Mpa下浓缩成相对密度1.27的浓缩液，将所得浓缩液全部喷洒至步骤(1)处理后的冬虫夏草上；
(3)预冻：将步骤(2)处理后的冬虫夏草铺盘后置入冷冻干燥机中，控制温度为-40℃，预冻4h；
(4)真空冷冻干燥：预冻处理后的冬虫夏草在-30℃进行升华干燥，真空度为30bar，干燥时间30h；再在30℃下解析干燥，真空度为10bar，干燥时间2h，即得到冬虫夏草灭菌品。
对比例6
与实施例1相比，区别仅在于，步骤(1)中，浸泡并超声90min，停止超声后不再继续浸泡，直接过滤。
具体地，步骤(1)操作为：鲜冬虫夏草先用流水冲洗干净，之后用质量百分比浓度为15％的食盐水浸泡并超声，其中食盐水的体积和冬虫夏草重量比为15mL/g，超声频率为20000Hz，功率为200W，时间为90min，停止超声，超声过程中控制温度为20±2℃，之后过滤，并用无菌水洗脱冬虫夏草上残留的盐水。其他步骤同实施例1。
将实施例1-3、对比例1-6得到的冬虫夏草灭菌样品与灭菌前的冬虫夏草分别进行了SOD活力、蛋白质含量和卫生学检测，结果见表1。其中，SOD活力测定方法、蛋白质含量检验方法如下所述。
SOD活力测定方法：使用混合型球磨仪将灭菌前冬虫夏草和经过各实施例或各对比例处理过的冬虫夏草样本粉碎(频率30Hz，时间3min)后，分别取样本100mg，精密称定，置于三角锥形瓶中，精密加入超纯水5mL，密封，混合均匀，室温超声8min，离心，取上清，稀释为不同浓度。采用邻苯三酚自氧化法测定各上清液中抑制率，选取抑制率在40％～60％(最好接近50％)的浓度，进行正式试验。SOD活力结果以干燥品计。
蛋白质含量检验方法：准确称取灭菌前冬虫夏草和经过各实施例或各对比例处理过的冬虫夏草样本各500mg，剪碎研磨溶于50mL纯净水中，超声波处理10min，4℃、12000r/min离心20min，取上清液，采用凯氏定氮法测定蛋白质含量。蛋白质含量以干燥品计。
表1
Figure BDA0002718263930000081
由表1结果可以看出，实施例1-3得到的灭菌后冬虫夏草有效降低了冬虫夏草中微生物的含量。特别是相比仅盐水浸泡未超声处理的对比例1和纯水(0％盐水)浸泡处理的对比例3，各实施例处理得到的冬虫夏草显著降低了耐胆盐革兰阴性菌的含量(由耐胆盐革兰阴性菌含量102<N<103降至N<10)，具有意料不到的灭菌效果。同时，保证了蛋白质含量不损失，具有较高的SOD活力。
对比例1在没有超声处理情况下灭菌效果差，且SOD活力有所降低。对比例3在纯水(0％盐水)情况下超声浸泡处理灭菌效果差，且SOD活力和蛋白质含量均有所降低。对比例2没有纳滤处理情况下使得SOD活力和蛋白质含量明显降低。对比例4用35％盐水浸泡处理情况下，使得冬虫夏草的性状发生改变，色泽变浅，质地变软，且SOD活力明显降低。对比例5在低盐水浓度下(5％盐水)灭菌效果差，且SOD活力一般。对比例6在浸泡并超声90min条件下，SOD活力明显降低。
实验例效果实验
1、实验方法
采用昆明种清洁级小鼠108只，体重32～37g，其中雄性36只，雌性72只。分为正常对照组、实施例1组、肾阳虚模型组、肾阳虚虫草防治组、肾阳虚对比例2防治组和肾阳虚实施例1防治组。每组雄鼠6只，雌鼠12只。雄鼠分笼饲养，每笼1只，于实验第15天起以1:2与雌鼠合笼。
肾阳虚模型组：用腺嘌呤制备肾阳虚模型，腺嘌呤剂量为200mg/kg每日体重，共给予28d。
正常对照组：正常对照组服食常规饲料。
实施例1组：实施例1组于常规饲料中混入实施例1样品细粉(取适量实施例1的冬虫夏草粉碎至150～180μm，即得)，剂量为每日1.5g/kg体重。
肾阳虚虫草防治组：肾阳虚虫草防治组于常规饲料中混入腺嘌呤，剂量为每日200mg/kg体重及冬虫夏草细粉(取直接冷冻干燥的冬虫夏草粉碎至150～180μm，即得)剂量为每日1.5g/kg体重。
肾阳虚对比例2防治组：肾阳虚对比例2防治组于常规饲料中混入腺嘌呤，剂量为每日200mg/kg体重及对比例2样品细粉(取对比例2的冬虫夏草粉碎至150～180μm，即得)剂量为每日1.5g/kg体重。
肾阳虚实施例1防治组：肾阳虚实施例1防治组于常规饲料中混入腺嘌呤，剂量为每日200mg/kg体重及实施例1样品细粉剂量为每日1.5g/kg体重。
观察雌鼠阴道阴栓出现率、受孕率、受孕时间、受孕雌鼠生育的仔鼠数和仔鼠平均体重。采用SPSS20.0软件进行统计分析。
2、实验结果
(1)实验期间各组小鼠体重比较：肾阳虚模型组雄性小鼠服用腺嘌呤后体重下降，并始终处于较低水平，与正常小鼠比较，有显著性差异，P<0.05。而肾阳虚虫草防治组、肾阳虚对比例2防治组和肾阳虚实施例1防治组在服用腺嘌呤期间同时服食冬虫夏草细粉、对比例2样品细粉、实施例1样品细粉，除第1周体重有所下降外，第2周起很快恢复。冬虫夏草对雄性小鼠体重的影响曲线图具体见图1所示。
肾阳虚模型组配笼雌鼠体重增长明显降低，与正常小鼠比较，有显著性差异P<0.05。实施例1组雌鼠体重增长明显，肾阳虚虫草防治组、肾阳虚对比例2防治组和肾阳虚实施例1防治组在第3周体重增长快速。雌性配笼小鼠体重变化曲线图见图2所示。
(2)冬虫夏草子实体对雌鼠阴道阴栓出现率、受孕率、受孕时间、受孕雌鼠生育的仔鼠数和仔鼠平均体重的影响：小鼠阴道栓一般在雌雄合笼后的前2周内出现。与正常小鼠比较，和肾阳虚模型组雄鼠配对的雌鼠阴道栓出现率明显下降，肾阳虚虫草防治组、肾阳虚对比例2防治组和肾阳虚实施例1防治组其配对雌鼠阴道栓出现率均有所提高，且后组高于前组，具体结果见表2。而正常小鼠服食实施例1样品后，其配对雌鼠的阴道栓出现率变化不明显。
表2冬虫夏草子实体对雌性小鼠阴道栓出现率的影响
Figure BDA0002718263930000101
各组小鼠在雌雄合笼后的第28天时，其中绝大多数的雌鼠已经分娩，少数未分娩的雌鼠，剖腹探查子宫观察受孕情况。结果显示，除肾阳虚模型组受孕率为91.67％外，其余组雌鼠受孕率均为100％。冬虫夏草子实体对雌性小鼠受孕率、受孕时间、受孕雌鼠生育的仔鼠数和仔鼠平均体重的影响结果具体见表3。
表3
Figure BDA0002718263930000102
Figure BDA0002718263930000111
与肾阳虚模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；与肾阳虚虫草防治组比较，#P<0.05。
根据表3结果，以各组小鼠在雌雄合笼后的第20天分娩为标准，分娩时间每延后1d，作为受孕时间延后1d计。肾阳虚模型组的雌鼠受孕时间有延后的趋势，而肾阳虚虫草防治组、肾阳虚对比例2防治组和肾阳虚实施例1防治组的雌鼠受孕时间与肾阳虚模型组比较，则有所提前，且后组比前组略提前。
与正常小鼠比较，小鼠服食实施例1样品后，其雌鼠生育仔鼠数均有所增加。而肾阳虚模型组的雌鼠生育仔鼠数明显下降，肾阳虚虫草防治组和肾阳虚对比例2防治组分别与肾阳虚模型组比较，均有显著性差异，P<0.05；肾阳虚实施例1防治组与肾阳虚模型组比较，有极显著性差异，P<0.01；肾阳虚实施例1防治组平均仔鼠数＞肾阳虚对比例2防治组平均仔鼠数＞肾阳虚虫草防治组平均仔鼠数，与肾阳虚虫草防治组相比较，实施例1组和肾阳虚实施例1防治组平均鼠仔数均有显著性差异，P＜0.05。
肾阳虚模型组雌鼠生育的仔鼠，其平均体重明显降低，与其余4组小鼠生育的仔鼠平均体重比较，均有明显差异。而肾阳虚虫草防治组、肾阳虚对比例2防治组和肾阳虚实施例1防治组的小鼠所生育的仔鼠平均体重，与正常小鼠所生育的仔鼠平均体重比较则无明显差异。
实验结果说明，具有补虚损，益精髓功能的冬虫夏草有预防腺嘌呤对小鼠性欲、生育抑制的作用，能提高雄性小鼠的性功能，具有益气补肾壮阳的功效，采用本发明方法处理的冬虫夏草补肾壮阳的功效更强。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种冬虫夏草的灭菌方法，其特征在于，包括如下步骤：
(i)将鲜冬虫夏草用盐水超声冷浸，过滤，收集浸泡液；
(ii)将所述浸泡液进行除盐、浓缩后，均匀喷洒在经步骤(i)处理后的冬虫夏草上；
(iii)将步骤(ii)所得冬虫夏草进行冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的灭菌方法，其特征在于，所述盐水超声冷浸采用质量百分比浓度为10～20％的盐水；
优选地，所述盐水超声冷浸采用的盐水的体积和鲜冬虫夏草重量比为10～20mL/g。
3.根据权利要求1所述的灭菌方法，其特征在于，所述盐水超声冷浸的温度为10℃～30℃。
4.根据权利要求1～3任一项所述的灭菌方法，其特征在于，所述盐水超声冷浸包括：将鲜冬虫夏草在盐水中浸泡并超声10～60min，停止超声后，继续浸泡0.5～3h；
优选地，所述超声的频率为20000～40000Hz，功率为100～400W。
5.根据权利要求1～4任一项所述的灭菌方法，其特征在于，所述步骤(i)还包括：过滤后，对冬虫夏草进行清洗，收集洗脱液，将所述浸泡液与洗脱液合并；
所述步骤(ii)中，将含有所述浸泡液与洗脱液的混合溶液进行除盐、浓缩。
6.根据权利要求1所述的灭菌方法，其特征在于，所述除盐包括：采用纳滤膜进行纳滤；所述纳滤膜的截留分子量优选为150～300Da。
7.根据权利要求1所述的灭菌方法，其特征在于，所述浓缩得到相对密度为1.20～1.30的浓缩液。
8.根据权利要求1所述的灭菌方法，其特征在于，所述冷冻干燥包括：先在真空度10bar～40bar、温度-45℃～-20℃条件下升华干燥，再在真空度1bar～10bar、温度15℃～30℃的条件下解析干燥；
优选地，所述升华干燥时间为10～30h；和/或，所述解析干燥时间为2～4h。
9.根据权利要求1或8所述的灭菌方法，其特征在于，所述冷冻干燥前进行预冻处理；
优选地，所述预冻处理在-55～-40℃下进行，优选进行2～6h。
10.采用权利要求1～9任一种灭菌方法获得的冬虫夏草灭菌品。
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Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0444163A1 (en) * 1989-08-08 1991-09-04 Chem Eng Contracts Pty Limited Tannin extraction
RU2006112034A (ru) * 2006-04-12 2007-10-27 Антон Викторович Сергеев (RU) Биологически активный препарат и способ его получения
CN101773553A (zh) * 2009-12-29 2010-07-14 汤磊 一种天葵提取物及其制备方法和应用
CN103564495A (zh) * 2013-11-05 2014-02-12 浙江大学 一种蜂胶和虫草菌丝粉组合物及制备和应用
CN104415064A (zh) * 2013-08-20 2015-03-18 齐生伟 冬虫夏草的保鲜存储工艺
CN104473978A (zh) * 2014-11-26 2015-04-01 南京中科药业有限公司 一种富含活性成分的虫草菌丝体加工方法
CN106727734A (zh) * 2017-01-05 2017-05-31 广东东阳光药业有限公司 鲜冬虫夏草制品及其制备方法
CN107114758A (zh) * 2017-04-17 2017-09-01 天津天狮生物发展有限公司 一种发酵虫草菌丝体粉及其制备方法
CN107354067A (zh) * 2017-08-16 2017-11-17 安徽天康(集团)股份有限公司 一种保健酒及其制备方法
CN108931109A (zh) * 2017-05-24 2018-12-04 重庆戴贺李生物科技有限公司 一种保留虫草多糖及sod活性的冬虫夏草冷冻干燥方法
CN108967869A (zh) * 2018-07-28 2018-12-11 安徽省万果园农业科技发展有限公司 一种减小鲜食玉米颜色变化的加工方法
CN109744457A (zh) * 2019-03-08 2019-05-14 中国科学院西北高原生物研究所 一种液氮喷淋式鲜冬虫夏草速冻方法

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0444163A1 (en) * 1989-08-08 1991-09-04 Chem Eng Contracts Pty Limited Tannin extraction
RU2006112034A (ru) * 2006-04-12 2007-10-27 Антон Викторович Сергеев (RU) Биологически активный препарат и способ его получения
CN101773553A (zh) * 2009-12-29 2010-07-14 汤磊 一种天葵提取物及其制备方法和应用
CN104415064A (zh) * 2013-08-20 2015-03-18 齐生伟 冬虫夏草的保鲜存储工艺
CN103564495A (zh) * 2013-11-05 2014-02-12 浙江大学 一种蜂胶和虫草菌丝粉组合物及制备和应用
CN104473978A (zh) * 2014-11-26 2015-04-01 南京中科药业有限公司 一种富含活性成分的虫草菌丝体加工方法
CN106727734A (zh) * 2017-01-05 2017-05-31 广东东阳光药业有限公司 鲜冬虫夏草制品及其制备方法
CN107114758A (zh) * 2017-04-17 2017-09-01 天津天狮生物发展有限公司 一种发酵虫草菌丝体粉及其制备方法
CN108931109A (zh) * 2017-05-24 2018-12-04 重庆戴贺李生物科技有限公司 一种保留虫草多糖及sod活性的冬虫夏草冷冻干燥方法
CN107354067A (zh) * 2017-08-16 2017-11-17 安徽天康(集团)股份有限公司 一种保健酒及其制备方法
CN108967869A (zh) * 2018-07-28 2018-12-11 安徽省万果园农业科技发展有限公司 一种减小鲜食玉米颜色变化的加工方法
CN109744457A (zh) * 2019-03-08 2019-05-14 中国科学院西北高原生物研究所 一种液氮喷淋式鲜冬虫夏草速冻方法

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