CN107648284A - 猴头菌提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及猴头菌提取物在制药领域中的用途，尤其涉及一种猴头菌提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群相关疾病的制剂中的用途。本发明的猴头菌提取物不仅能明显有助于肠道内优势菌群结构恢复，有助于菌群多样化，而且还对与肠道菌群结构相关的疾病表现出明显的治疗和/或预防效果，例如能有效抑制炎症因子的表达，有效缓解炎症的恶化，改善免疫相关的各项生理病理指标。同时在对于包括过量抗生素等因素导致的肠道菌群结构破坏后的主体中，观察到肠道的溃疡和炎症加重等症状，而本发明所述的猴头菌提取物有效缓解主体的溃疡性结肠炎等症状，维护主体的肠道菌群完整性，具明显修复效果，可用于药物、保健品等各种领域中，具有极大的经济和社会价值。

Description

猴头菌提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病 的制剂中的用途
技术领域
本发明涉及猴头菌提取物在制药领域中的用途，尤其涉及一种猴头菌提取物在制备治疗和/或预防与肠道菌群相关疾病的制剂中的用途。
背景技术
近年来，关于肠道菌群的研究不断涌现，肠道菌群在人类健康中的作用也越来越得到人们关注。肠道菌群是人体肠道的正常微生物，种类繁多，数目更是惊人。据估算，一个正常成人体内，肠道细菌总重量可达1～1.5kg。它们能够影响体重和消化能力，抵御感染和自身免疫疾病的患病风险，除此之外，还与一些内分泌代谢性疾病、肾脏疾病、神经性疾病、心血管疾病、呼吸系统疾病以及癌症的发生具有密切关联。
肠道菌群按一定的比例组合，各菌间互相制约，互相依存，在质和量上形成一种生态平衡，一旦机体内外环境发生变化，例如包括长期应用广谱抗生素，敏感肠菌被抑制而未被抑制的细菌乘机繁殖，从而引起菌群失调，其正常生理组合被破坏，从而产生病理性组合，引起临床症状，就称为肠道菌群失调症。
目前国内外研究开发的具有调节肠道菌群功能的物质主要有两种：一是有益活菌制剂，主要是以双歧杆菌和各种乳酸菌为主，二是有益菌增值促进剂，即通过这类物质使机体自身的生理性固有的菌增殖，形成以有益菌占优势的肠道生态环境。
猴头菌(Hericiumerinaceus)是一种极具营养保健和药用价值的食用菌，性平，味甘。研究报道，猴头菌的活性物质主要有多糖、甾醇(麦角甾醇类)、萜类(二萜类、杂萜类)、脂肪酸(饱和脂肪酸、不饱和脂肪酸等)、酚类、蛋白质等化合物，具有利五脏，助消化，滋补，抗癌，抗神经衰弱等功效。
发明内容
发明人发现，本发明所述的猴头菌提取物在修复/维持肠道菌群结构、多样性方面具有显著效果，并且对于炎症、免疫力调节等方面也具有积极的作用，基于此，作出本发明如下。
在本发明的第一方面，提供过一种猴头菌提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂中的用途。
其中，所述肠道菌群失调相关疾病包括肠道菌群失调症、免疫力低下。
优先的，所述猴头菌提取物在制备免疫增强的制剂中的用途。
在本发明的第二方面，一种猴头菌提取物的制备方法，包括将猴头菌子实体冻融后，采用碱液提取，滤液再用酸液提取，收集沉淀，得到猴头菌提取物。
优先的，一种猴头菌提取物的制备方法，包括将猴头菌子实体冻融后，采用氢氧化钠(NaOH)提取，调节pH值为9-10，收集滤液，滤液再用稀盐酸提取，调节pH值为4-5，收集沉淀，得到猴头菌提取物。
进一步优选的，一种猴头菌提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将猴头菌子实体搅碎后加入水得到10％-30％质量百分浓度的猴头菌子实体液，混匀后置于约-80℃冰箱中冷冻4-8h，待猴头菌子实体完全冰冻后，于约37℃完全解冻，反复冻融2-4次；
(2)向冻融后的猴头菌子实体中加入NaOH溶液，调整pH到9-10，保持料液比为40-60ml/g，在35℃-40℃条件下搅拌提取4-8h，例如磁力搅拌，反复提取1-3次，过滤，优选合并滤液；
(3)用稀盐酸溶液调整pH至4-5，沉淀，优选沉淀完全，离心，收集沉淀，即得到猴头菌提取物。
在本发明的第三方面，一种治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂，所述制剂包括药物、保健品或食品，所述制剂包含猴头菌提取物。
在本发明的第四方面，一种预防和/或治疗肠道菌群失调相关疾病的药物，包含猴头菌提取物和药学上可接受的载体。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明的猴头菌提取物不仅能明显有助于肠道内优势菌群结构恢复，有助于菌群多样化，而且还对与肠道菌群结构相关的疾病表现出明显的治疗和/或预防效果，例如能有效抑制炎症因子的表达，有效缓解炎症的恶化，改善免疫相关的各项生理病理指标。同时在对于包括过量抗生素等因素导致的肠道菌群结构破坏后的主体中，观察到肠道的溃疡和炎症加重等症状，而本发明所述的猴头菌提取物有效缓解主体的溃疡性结肠炎等症状，维护主体的肠道菌群完整性，具有明显的修复效果，可以用于药物、保健品等各种领域中，具有极大的经济和社会价值。
附图说明
图1a是小鼠体重变化表。
图1b是小鼠胸腺指数表。
图1c是小鼠脾脏指数表。
图1d是小鼠腹腔巨噬细胞中性红吞噬值表。
图1e是小鼠脾淋巴细胞刺激增殖率表。
图1f是小鼠血小板数量表。
图1g是小鼠血液白细胞数量表。
图1h是小鼠脾脏病理组织HE染色结果图。
图2是小鼠结肠切片免疫组化图。
其中，CT-未处理的正常组；CTX-免疫低下模型组；HEP-G-高剂量的猴头菇提取物处理模型组；HEP-D-低剂量的猴头菇提取物处理模型组。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
经试验证实，本发明所述的猴头菌提取物能促进小鼠单核巨噬细胞RAW264.7增殖，表明提取物在抗炎、增强免疫等方面的潜力。
经试验证实，本发明所述的猴头菇提取物能抑制炎症因子的分泌、表达，例如能抑制炎症因子TNF-α，IL-1β以及IL-6的超量分泌，并通过抑制通路上iNOS因子以及NF-κB的过量表达，达到抑制NO的分泌的效应，可以缓解包括LPS所致的细胞炎症在内的恶化。
经试验证实，本发明所述的猴头菇提取物在免疫力低下小鼠中能修复肠道菌群结构，保持菌群多样性，提高免疫力。
经试验证实，本发明所述的猴头菇提取物在抗生素破坏的肠道菌群及导致的溃疡和炎症中中，能缓解溃疡性结肠炎，促进菌群的应激性调整。
在本发明的第一方面，提供过一种猴头菌提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂中的用途。
其中，所述肠道菌群失调相关疾病包括肠道菌群失调症。
其中，所述肠道菌群失调相关疾病还包括肠道菌群失调所引起的疾病或者肠道菌群失调所影响的疾病或者通过治疗和/或预防和/或调理肠道菌群失调而有帮助的疾病，包括但不限于免疫相关疾病(如免疫力低下)、内分泌代谢性疾病、肾脏疾病、神经性疾病、心血管疾病、呼吸系统疾病。
在一个优选的实施例中，提供一种猴头菌提取物在制备免疫增强的制剂中的用途。
其中，所述猴头菌提取物为猴头菌蛋白提取物。
在本发明的第二方面，提供一种猴头菌提取物的制备方法，包括将猴头菌子实体冻融后，采用碱液提取，获得碱溶性蛋白，滤液再用酸液提取，使蛋白沉淀析出，得到猴头菌蛋白提取物。
其中，上述碱液优选pH值为9-10的碱溶液，包括但不限于金属氢氧化物(例如氢氧化钠、氢氧化钾)、碳酸氢钠等。
优选的，上述碱液提取中加入碱液后调节pH值为9-10。
其中，上述酸液优选pH值为4-5的酸溶液，包括但不限于稀盐酸、醋酸等。
优选的，上述酸液提取中加入酸液后调节pH值为4-5。
在一个优选的实施例中，所述猴头菌提取物的制备方法，包括将猴头菌子实体冻融后，先采用氢氧化钠(NaOH)提取，滤液再用稀盐酸提取，收集沉淀，得到猴头菌提取物。
在一个优选的实施例中，所述猴头菌提取物的制备方法，包括将猴头菌子实体冻融后，先采用氢氧化钠(NaOH)提取，调节pH值为9-10，收集滤液，滤液再用稀盐酸提取，调节pH值为4-5，收集沉淀，得到猴头菌提取物。
优选的，一种猴头菌提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将猴头菌子实体搅碎后加入水得到10％-30％质量百分浓度的猴头菌子实体液，混匀后置于约-80℃冰箱中冷冻4-8h，待猴头菌子实体完全冰冻后，于约37℃完全解冻，反复冻融2-4次；
(2)向冻融后的猴头菌子实体中加入NaOH溶液，调整pH到9-10，保持料液比为40-60ml/g，在35℃-40℃条件下搅拌提取4-8h，例如磁力搅拌，反复提取1-3次，过滤，优选合并滤液；
(3)用稀盐酸溶液调整pH至4-5，沉淀，优选沉淀完全，离心，收集沉淀，即得到猴头菌提取物。
进一步优选的，上述提取方法的步骤(2)为：向冻融后的猴头菌子实体中加入NaOH溶液，调整pH到约9.47，保持料液比为50ml/g，在37.9℃条件下搅拌提取6h，例如磁力减半，反复提取两次，过滤，合并滤液。
进一步优选的，上述提取方法的步骤(3)为：用稀盐酸溶液调整pH至4-5，沉淀，优选沉淀完全，在4℃的条件下，采用8000r/min的转数，离心约20min，收集沉淀，即得到猴头菌蛋白提取物。
在一个进一步优选的实施例中，一种猴头菌提取物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将猴头菌子实体搅碎后加入水例如蒸馏水得到20％质量百分浓度的猴头菌子实体液，混匀后置于约-80℃冷冻6h，迅速于37℃完全解冻，反复冻融3次；
(2)向冻融后的猴头菌子实体加入NaOH溶液，调整pH到9.47，保持料液比为50ml/g，封口，在37.9℃条件下搅拌例如磁力搅拌提取6h，反复提取两次，过滤，合并滤液；
(3)用稀盐酸溶液调整pH至4.5，使沉淀完全，在4℃的条件下，采用8000r/min的转数，离心时间为20min，收集沉淀，即得到猴头菌提取物。
本发明将猴头菌子实体反复冻融后采用碱提酸沉淀的方法，通过对提取步骤、冻融的次数、提取时间温度、离心的转速及时间的优化，极大提高了提取率，提取率可达到31.81mg/g。
在本发明的第三方面，提供一种治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂，包括药物、保健品或食品等，所述制剂包含上述猴头菌提取物。
本发明中所述的“制剂”还可以理解为包含上述猴头菌提取物的组合物。
在本发明的第四方面，本发明还提供一种预防和/或治疗肠道菌群失调相关疾病的药物，包含上述猴头菌提取物和药学上可接受的载体。
本发明所述药物的剂型包含可以诸如用于经口投药的片剂、胶囊、颗粒剂、粉剂、口服液、含片或酏剂、栓剂、无菌溶液或悬浮液、还可以包括静脉注射制剂、冻干剂等。
本发明中所述的“药学上可接受的载体”还可以理解为“稀释剂”或“辅料”等，在医药领域内众所周知且描述于例如雷明顿医药科学(Remington′s PharmaceuticalSciences)，马克出版公司(Mack Publishing Co.)(A·R·格纳诺(A.R.Gennaro)编，1985)。这些物质在所使用的剂量和浓度下对接受者来说是无毒，包括诸如磷酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐和其它有机酸盐等缓冲液；诸如抗坏血酸等抗氧化剂；诸如聚精氨酸等低分子量(小于约10个残基)肽；诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白等蛋白质；诸如聚乙烯吡咯烷酮等亲水聚合物；诸如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或精氨酸等氨基酸；单糖、二糖和包括纤维素或其衍生物、葡萄糖、甘露糖或糊精的其它碳水化合物；诸如EDTA等螯合剂；诸如甘露醇或山梨醇等糖醇；诸如钠等抗衡离子；和/或诸如吐温(Tween)、泊洛尼克(Pluronics)或聚乙二醇等非离子型表面活性剂；还包括包括无菌水、盐水、葡萄糖、油(如玉米油、花生油及类似物)、酸。进一步还可以包括防腐剂、润湿剂、乳化剂、及类似物等。
本发明的猴头菌提取物或药物的给药剂量可以随具体给药方法和被治疗的客体或类型而变化。该剂量足以产生预期的有益效果，并且可以配制用于单一剂量施用或多重剂量施用。
本发明中所述的药物可以通过本领域技术人员已知的任何途径施用，包括口服、肌内、静脉内、真皮内、病灶内等途径。施用可以是局部、表面或者全身的。在任何给定的情况下最合适的途径取决于多种因素，例如疾病的性质、疾病的进程、疾病的严重性等。作为优选，本发明的猴头菌提取物或包含猴头菌提取物在内的药物通过口服给药。
本发明的所述猴头菌提取物还可以与第二活性化合物/第二治疗剂一起施用，同时、相继或并行施用。在分别施用时，本发明的所述猴头菌提取物或包含猴头菌提取物的药物与第二活性化合物或第二治疗剂可以以不同的用药频率或间隔施用。
在本发明的第五方面，本发明还提供一种上述药物的制备方法，采用本领域的相应药物制备方法进行制备即可。
在本发明的第六方面，本发明还提供一种预防和/或治疗方法，包括预防或治疗或减轻或缓解疾病的严重程度，所述方法包括给主体服用本发明所述的猴头菌提取物，这样的疾病包括肠道菌群失调症、免疫力下降等在内的肠道菌群失调相关疾病。
本发明中所述的“失调”可以理解为“紊乱”、或“疾病”等。
如本文中所使用，术语“包含”或“包括”指方法包括所列举的要素，但不排除其它要素。
本发明所述的猴头菌(Hericiumerinaceus)子实体呈块状，扁半球形或头形，肉质，直径5-15cm，不分枝，新鲜时呈白色，干燥时变成褐色或淡棕色。
实施例1
猴头菌提取物的制备，具体包括以下步骤：
(1)将猴头菌子实体用碎冰机搅碎后加入蒸馏水得到20％质量百分浓度的猴头菌提取物，混匀后置于-80℃冰箱中冷冻6h，待猴头菌子实体完全冰冻后，迅速于37℃水浴锅内完全解冻，反复冻融3次；
(2)将冻融好的猴头菌子实体放入大烧杯中，加入NaOH溶液，调整pH到9.47，保持料液比为50ml/g，用保鲜膜封口，在37.9℃条件下磁力搅拌提取6h，反复提取两次，过滤，合并滤液；
(3)用稀盐酸溶液调整pH至4.5，使沉淀完全，在4℃的条件下，采用8000r/min的转数，离心时间为20min，收集沉淀，即为猴头菌提取物(HEP)。
将上述猴头菌蛋白提取物进行药效试验：
试验例一：
通过体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，评价猴头菌提取物对RAW264.7细胞增殖率影响，结果见表1所述。
计算猴头菌提取物对1μg/mL脂多糖(LPS)诱导炎症模型细胞的保护作用，分别设置正常组和模型组作对照，正常组为正常的细胞，模型组为1μg/mL脂多糖(LPS)诱导炎症模型细胞，采用浓度分别为0.05、0.1、0.2的猴头菌提取物对1μg/mL脂多糖(LPS)诱导炎症模型细胞进行处理，观察并计算各组的TNF-α、IL-1β、IL-6、NO、iNOS、NF-κB的水平，结果见表2所示。
表1猴头菌提取物(HEP)对RAW264.7细胞增值率的影响
HEP浓度(mg/ml) 细胞增殖率％
0 100
0.063 202.70
0.313 181.08
0.625 175.68
0.938 140.54
1.250 99.46
表2经猴头菌提取物(HEP)处理后细胞各因子水平的变化
从表1可以知道，将猴头菌提取物对RAW264.7细胞的增值率具有显著影响，随着猴头菌提取物的浓度从1.250-0.063mg/ml降低，RAW264.7细胞增殖率不断提升。
从表2结果可以看出，LPS造炎症模型后，与正常组相比，模型组的炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-6、NO、iNOS、NF-κB的水平都显著上升，证明炎症模型造模成功。与模型组相比，随着猴头菌提取物HEP浓度从0.05mg/ml增加到0.2mg/ml，TNF-α，IL-1β以及IL-6因子的表达呈减小趋势(p<0.05)；并且与模型组相比，细胞NO分泌量也随之不断减少，相关通路上iNOS和NF-κB分泌量也呈递减趋势；且0.10mg/ml和0.20mg/ml浓度下各因子分泌水平差异显著(p<0.01)。
以上结果表明，猴头菌提取物HEP能通过抑制炎症因子TNF-α，IL-1β以及IL-6的超量分泌，并且通过抑制通路上iNOS因子以及NF-κB的过量表达，从而达到抑制NO的分泌的效应，进而缓解LPS所致的RAW264.7细胞炎症的恶化。
试验例二：
采用小鼠腹腔注射80mg/kg的环磷酰胺(CTX)制备免疫低下模型，得到模型组(CTX组)，未处理的正常小鼠为正常组(CT组)，对模型组小鼠灌胃给以200mg/kg/d的猴头菌提取物溶液，得到猴头菌高剂量组(HEP-G)，对模型组小鼠灌胃给以100mg/kg/d的猴头菌提取物溶液，得到猴头菌低剂量组(HEP-D)，观察小鼠免疫相关生理、病理指标的改变，结果见图1a-图1h；同时收集盲肠内容物，采用16SrRNA测序检测肠道微生物组成，结构如表3所示。
从图1a-图1h可以看出，对免疫低下小鼠给予猴头菌提取物处理后，与模型组(CTX组)相比，HEP组小鼠胸腺指数、脾脏指数、腹腔巨噬细胞中性红吞噬值均增大(p<0.05)。其中，HEP-D组呈显著性差异(p<0.01)；HEP组小鼠脾淋巴细胞刺激增殖率达175％(CTX组为125％)，已接近正常组了；此外其血小板数和白细胞数也有一定的提升。脾脏病理切片显示，HEP能改善CTX导致的脾脏萎缩和病变。
表3各组别肠道内主要高丰度菌属
如表3可以看出，与正常组相比，模型组(CTX组)肠道菌群在门分类水平上已经有了明显的改变，劳特氏菌属、理研菌属、Odoribacter属和鞘脂单胞菌细菌增加，而螺杆菌属、嗜胆菌属、Oscilloospira属和普氏菌属减少；经猴头菌提取物HEP处理后，棒状杆菌属、多形杆状菌属、肠杆菌属、不动杆菌属、脱硫弧菌属、乳酸菌丰度增加，而一些致病菌和条件致病菌则相应的减少。
以上结构表明，对免疫低下模型小鼠给予猴头菌提取物处理后，免疫相关的各项生理病理指标都得到一定的改善，小鼠肠道内优势菌结构恢复，菌群多样性较好。
试验例三：
采用三硝基苯磺酸(TNBS，0.6％的浓度，0.1ml每只灌肠)造小鼠溃疡性结肠炎模型，得到模型组，未处理的正常小鼠为正常组，将模型小鼠服用过量混合抗生素处理，得到对照组，将模型小鼠灌胃给予100mg/kg/d猴头菌提取物(HEP)溶液，得到HEP组，观察不同组小鼠结肠处炎症和溃疡病变状况，结果如表4、表5和图2所示，同时采用16s RNA测序检测肠道微生物组成，结果如表6所示。
表4细胞炎症因子水平
组别 IL-1α水平％ IL-8水平％ IL-12水平％ VEGF水平％ MIP-α水平％ MPO水平％
对照组 105.54 98.29 94.44 98.51 125.69 121.69
HEP组 101.16 95.36 104.33 95.52 135.01 139.01
正常组 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
模型组 138.95 133.03 143.35 123.88 164.38 160.38
表5细胞抗炎因子水平
组别 IL-2水平％ IL-10水平％ IL-11水平％ TNF-α水平％ TNF-γ水平％ MCSF水平％
对照组 65.40 102.12 101.70 79.08 109.69 90.80
HEP组 89.83 90.52 110.07 86.44 88.43 89.66
正常组 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00
模型组 39.29 59.39 71.49 64.96 68.21 73.91
从表4、表5的结果可以看出，与正常组相比，模型组病理上呈现严重的溃疡和炎症病变，炎症因子IL-1α、VGEF、IL-12、IL-8、MIP-α和MPO分泌量明显增高，这证明造模成功；经猴头菌提取物HEP处理后，该五种因子分泌值降低明显，GCSF、1L-10、IL-11、1L-2、TNF-α和TNF-β抗炎因子分泌量提升；趋势与抗生素处理的对照组一致，并且在大多数方面的表现还优于抗生素处理的对照组(1L-2、1L-10、IL-11、TNF-α)。
从图2结果显示，与正常组相比，模型组的免疫调节因子Foxp3表达在减少，而炎症调节因子NF-κB p65的表达在增加，与模型组相比，采用猴头菌提取物处理后，Foxp3的表达增加，而NF-κB p65的表达减少，与采用抗生素处理的对照组趋势一致。
表6小鼠肠道菌群结构在门水平上的表现
从表6的结果可以看出，猴头菌提取物处理对肠道菌群结构在门水平上表现出不同，肠道内放线菌门、厚壁菌门和TM7门细菌增多，脱铁杆菌门和变形菌门细菌减少；与模型组相比，给予猴头菌提取物处理后，小鼠肠道内拟杆菌门、厚壁菌门和变形菌门菌数明显增多，特别是双歧杆菌属菌的丰度有明显的提升，差异具有统计学意义(p<0.05)，并且其他肠道菌的多样性情况也有不同变化。
以上结果表明，猴头菌提取物能缓解TNBS导致的小鼠溃疡性结肠炎，其作用机制可能与HEP能促进Foxp3和抑制NF-κB p65的表达，保持肠道菌群结构的完整，促进肠道内菌群的应激性调整以及提升双歧杆菌等益生菌的移植存活率有关。
以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (8)

1.一种猴头菌提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肠道菌群失调相关疾病包括肠道菌群失调症、免疫力低下。
3.根据权利要求1或2的用途，其特征在于，所述猴头菌提取物在制备免疫增强的制剂中的用途。
4.一种猴头菌提取物的制备方法，其特征在于，包括将猴头菌子实体冻融后，采用碱液提取，滤液再用酸液提取，收集沉淀，得到猴头菌提取物。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，包括将猴头菌子实体冻融后，先采用氢氧化钠提取，调节pH值为9-10，收集滤液，滤液再用稀盐酸提取，调节pH值为4-5，收集沉淀，得到猴头菌提取物。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将猴头菌子实体搅碎后加入水得到10％-30％质量百分浓度的猴头菌子实体液，混匀后置于约-80℃冰箱中冷冻4-8h，待猴头菌子实体完全冰冻后，于约37℃完全解冻，反复冻融2-4次；
(2)向冻融后的猴头菌子实体中加入氢氧化钠溶液，调整pH到9-10，保持料液比为40-60ml/g，在35℃-40℃条件下搅拌提取4-8h，例如磁力搅拌，反复提取1-3次，过滤，优选合并滤液；
(3)用稀盐酸溶液调整pH至4-5，沉淀，优选沉淀完全，离心，收集沉淀，即得到猴头菌提取物。
7.一种治疗和/或预防肠道菌群失调相关疾病的制剂，其特征在于，所述制剂包括药物、保健品或食品，所述制剂包含猴头菌提取物。
8.一种预防和/或治疗肠道菌群失调相关疾病的药物，其特征在于，包含猴头菌提取物和药学上可接受的载体。
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