CN112218650A - 肽及其用途 - Google Patents

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CN112218650A CN201980017785.4A CN201980017785A CN112218650A CN 112218650 A CN112218650 A CN 112218650A CN 201980017785 A CN201980017785 A CN 201980017785A CN 112218650 A CN112218650 A CN 112218650A
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Abstract

治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，该方法包括将治疗有效量的式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：R1‑CRSVEGSCG‑R2 (I)(SEQ ID NO:1)，其中R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且R2是F(苯丙氨酸)或者R2不存在；R1‑CRRFVESSC‑R2 (II)(SEQ ID NO:6)，其中R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸‑苯丙氨酸)，或者R2不存在。R1‑CRSVEGSCG‑R2 (I)(SEQ ID NO:1) (I)R1‑CRRFVESSC‑R2 (II)(SEQ ID NO:6) (II)。

Description

肽及其用途
技术领域
本发明涉及可用于治疗神经病理性疼痛的肽，以及其使用方法，其包括减轻神经病理性疼痛或延迟神经病理性疼痛的发作。还描述了产生镇痛的方法。
背景技术
所有参考文献——包括本说明书中引用的任何专利或专利申请，均通过引用并入本文以使得能够完全理解本发明。但是，这些参考文献不应被理解为承认这些文件中的任何文件构成了本领域、澳大利亚或任何其他国家的公知常识的一部分。
神经病理性疼痛是由周围或中枢神经系统中的原发性病变、机能不良或机能障碍引起的。与通过警告组织损伤来发挥保护性生物学功能的伤害性疼痛不同，神经病理性疼痛没有保护作用，并且可以在受伤后数天或数月或者在疾病状态消退后发展，并且通常是长期且慢性的。
神经病理性疼痛可能是由比如运动损伤、意外、跌倒或穿透性伤害等外伤引起的神经损伤所导致的，或神经损伤可以由比如中风、病毒感染、暴露于毒素、退行性疾病和糖尿病等的疾病过程所导致的。可能导致神经病理性疼痛病况发展的疾病状态(比如糖尿病性神经病和疱疹后神经痛)的流行正在增加并且因此越来越多的人正在遭受慢性神经病理性疼痛症状。
虽然存在用于治疗伤害性疼痛的有效救济，但神经病理性疼痛通常对可用的镇痛药有抗性。另外，当前的疗法比如三环类抗抑郁药、抗惊厥药、阿片类和非阿片类镇痛药具有比如镇静和嗜睡等显著的副作用，并且在阿片类镇痛药的情况下，存在药物耐受和药物依赖或成瘾的风险。此外，目前几乎没有可用于在对伤害性疼痛没有镇痛作用的情况下治疗神经病理性疼痛的有用选择。因此，迫切需要对选择性治疗神经病理性疼痛有效且具有有限的或没有副作用的新的和替代的选择。本发明通过提供有效减轻神经病理性疼痛且对伤害性疼痛具有最小或没有镇痛作用的化合物解决或部分缓解了这个问题。
发明内容
在本文公开的方面，提供了一种治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，该方法包括将治疗有效量的式(I)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
在一个实施方式中，所述治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻了受试者的神经病理性疼痛。
在一个实施方式中，受试者是人。
在一个实施方式中，神经病理性疼痛选自糖尿病性神经病；Herpes Zoster(带状疱疹)相关的神经病；纤维肌痛；多发性硬化、中风、脊髓损伤；慢性手术后疼痛、幻肢痛、帕金森病；尿毒症相关的神经病；淀粉样变性神经病；HIV感觉神经病；遗传性运动和感觉神经病(HMSN)；遗传性感觉神经病(HSN)；遗传性感觉和自主神经病；遗传性神经病伴溃疡致残；呋喃妥因神经病；腊肠样神经病；营养缺乏引起的神经病、肾衰竭引起的神经病、三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)、灼口综合征、复杂区域性疼痛综合征、重复性劳损、药物引起的周围神经病和与感染相关的周围神经病。
在一个实施方式中，方法进一步包括将能够减轻受试者的疼痛的治疗有效量的第二药剂施用至受试者，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
在本文公开的另一方面，提供了包括式(I)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗受试者的神经病理性疼痛：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在。
在本文公开的另一方面，提供了式(I)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在。
在本文公开的另一方面，提供了药物组合物的用途，该药物组合物包括：
(i)式(I)的肽或其药学上可接受的盐：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在；和
(ii)能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
在本文公开的另一方面，提供了包括式(I)的肽或其药学上可接受的盐的镇痛组合物：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在。
在本文公开的另一方面，提供了包括治疗有效量的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其中肽由氨基酸序列CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)或氨基酸序列CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)组成。
在本文公开的另一方面，提供了治疗受试者的病况的方法，该方法包括将治疗有效量的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者，其中肽由氨基酸序列CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)或氨基酸序列CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)组成或基本上由其组成，并且其中病况选自肌肉减少症，糖耐量减低，糖尿病，肥胖症，代谢性疾病和肥胖症相关的病况，神经病理性疼痛，骨关节炎，肌肉紊乱，消耗性疾病，恶病质，厌食症，艾滋病消耗综合征，肌营养不良，神经肌肉疾病，运动神经元疾病，神经肌肉接头疾病，炎性肌病，烧伤，损伤或外伤，与LDL胆固醇升高相关的病况，与软骨细胞、蛋白多糖或胶原的生成或品质受损有关的病况，与软骨组织形成或品质受损相关的病况，与肌肉、韧带或肌腱质量、形式或功能受损相关的病况，与影响肌肉或结缔组织的炎症、外伤或遗传异常相关的病况以及骨骼疾病。
在本文公开的另一方面，提供了治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，该方法包括将治疗有效量的式(II)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
在一个实施方式中，治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下减轻了受试者的神经病理性疼痛。
在一个实施方式中，受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。
在一个实施方式中，方法进一步包括将治疗有效量的能够减轻受试者的疼痛的第二药剂施用至受试者，其中第二药剂不是式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
在本文公开的另一方面，提供了包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗受试者的神经病理性疼痛：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在。
在本文公开的另一方面，提供了式(II)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在。
在本文公开的另一方面，提供了一种药物组合物，其包括：
(i)式(II)的肽或其药学上可接受的盐：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在，和
(ii)能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
在本文公开的另一方面，提供了包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的镇痛组合物：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在。
在本文公开的另一方面，提供了式(II)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途。
在本文公开的另一方面，提供了治疗受试者的病况的方法，该方法包括将治疗有效量的包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的组合物施用至受试者：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在，并且
其中病况选自肌肉减少症，糖耐量减低，糖尿病，肥胖症，代谢性疾病和肥胖症相关的病况，神经病理性疼痛，骨关节炎，肌肉紊乱，消耗性疾病，恶病质，厌食症，艾滋病消耗综合征，肌营养不良，神经肌肉疾病，运动神经元疾病，神经肌肉接头疾病，炎性肌病，烧伤，损伤或外伤，与LDL胆固醇升高相关的病况，与软骨细胞、蛋白多糖或胶原的生成或品质受损相关的病况，与软骨组织形成或品质受损相关的病况，与肌肉、韧带或肌腱质量、形式或功能受损相关的病况，与影响肌肉或结缔组织的炎症、外伤或遗传异常相关的病况以及骨骼疾病。
附图说明
图1是显示在神经病理性疼痛的模型中制备脊髓切片和全细胞记录位点的示意图。
图2显示了在单独存在载体(图A：对照)的情况下和在存在AOD9604(在本文中也被称为“LAT8881”；SEQ ID NO:2；图B和C)的情况下通过刺激背根传入持续8-30分钟的时间段诱发的兴奋性突触后电流的连续记录的样品。在存在和不存在AOD9604的情况下取的记录都叠加在图D中。
图3显示了LAT8881(SEQ ID NO:2)对CCI大鼠的WDR神经元自发活动的影响。结果显示为对照值的百分比(％)。与相同时间点的载体组相比，*p<0.05；与对照相比，#p<0.05；对于每组n＝7。
图4显示了LAT8881对CCI大鼠的WDR神经元上紧发条现象(wind-up)的影响。结果显示为对照值的百分比(％)。与相同时间点的载体组相比，*p<0.05，单向方差分析；与对照相比，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001，配对学生t-检验；对于每组n＝7。
图5显示了LAT8881对CCI大鼠中DRG产生的异位放电的影响。结果显示为对照值的百分比(％)，非配对t-检验，与对照相比，##p<0.01，配对t-检验；对于载体和LAT8881(1mg/kg体重，静脉注射)，n＝6；对于利多卡因(5mg/kg体重，静脉注射)，n＝5。
图6显示了AOD9604(10μM)对背角神经元的突触后特性的影响。提供了连续记录的样品，显示了在不存在(对照)或存在AOD9604的情况下对电流注入的叠加膜响应。右侧图显示了来自左侧所显示记录的数据的曲线。注意，在-90mV附近曲线的斜率和交点减小，这与钾电导的激活一致。
图7显示了当与载体(对照)和利多卡因相比时，LAT8881(1mg/kg体重，静脉内)对CCI大鼠的神经瘤起源的异位放电的影响。结果显示为对照值的百分比(％)；与对照相比，###p<0.001；n＝6。
图8显示了当与载体(对照)和利多卡因相比时，LAT8881(1mg/kg体重，静脉内)对CCI大鼠的DRG起源的异位放电的影响。结果显示为对照值的百分比；与对照相比，#p<0.05，##p<0.01；n＝6；与利多卡因相比，*p<0.05；n＝5。
图9显示了当与载体对照相比时，LAT8881(以0.1mg/kg体重、0.5mg/kg体重、1mg/kg体重和5mg/kg体重肌肉内(i.m.)施用)对Chung模型大鼠的同侧爪的爪缩回阈值的影响。Pre：术前；BL1：术后6-8天；BL2：术后12-14天；给药对照前；载体：以1mL/kg体重肌肉内施用磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的1％DMSO；与载体对照动物中的相同时间点相比，*p<0.05，**p<0.01，*p<0.001(单向方差分析)；对于每组n＝8。
图10显示了当与载体对照相比时，LAT9991(SEQ ID NO:4)(以0.5mg/kg体重、1mg/kg体重和5mg/kg体重肌肉内施用)对Chung模型大鼠的同侧爪的爪缩回阈值的影响；Pre：术前；BL1：术后6-8天；BL2：术后12-14天；给药对照前；载体：PBS中1％DMSO(1mL/kg体重i.m.)；加巴喷丁(100mg/kg体重；i.m.)；与载体对照动物中的相同时间点相比，*p<0.05，**p<0.01，*p<0.001(单向方差分析)；对于每组n＝8。
图11显示了当与载体对照相比时，LAT8881(以1mg/kg体重、2mg/kg体重和5mg/kg体重通过口服灌胃施用，PO)对Chung模型大鼠的同侧爪的爪缩回阈值的影响；D-1和D-2：术前；D0：手术当天；D7：术后第7天；D14：术后第14天和给药时间；载体：PBS中1％DMSO(2mL/kg体重PO)；加巴喷丁(100mg/kg体重；PO)；与载体对照动物中的相同时间点相比，**p<0.01和*p<0.001(单向方差分析)；对于每组n＝8。
图12显示了当与载体对照相比时，LAT9991F(SEQ ID NO:5)(以1mg/kg体重、2mg/kg体重和5mg/kg体重通过口服灌胃施用，PO)对Chung模型大鼠的同侧爪的爪缩回阈值的影响；D-1和D-2：术前1天和2天；D0：手术当天；D7：术后第7天；D14：术后第14天和给药时间；载体：PBS中1％DMSO(2mL/kg体重PO)；加巴喷丁(100mg/kg体重；PO)；与载体对照动物中的相同时间点相比，*p<0.05，**p<0.01并且***p<0.001(单向方差分析)；对于每组n＝8。
图13显示了LAT8881(以5mg/kg体重通过口服灌胃施用，PO)对链脲佐菌素诱导的糖尿病性神经病的动物模型中爪缩回阈值(PWT)的影响；Pre1、Pre2和Pre3：在施用链脲佐菌素(STZ)前的1周、2周和3周的基线PWT读数；W1、W2：在STZ施用后的1周和2周；D0-0h：施用LAT8881的时间；D0-1h、D0-2h和D0-4h：STZ施用后的1、2和4小时，与D0-0h相比，**p<0.01；配对学生t-检验；对于每组n＝6。
图14显示了LAT8881(以5mg/kg体重通过口服灌胃施用，PO)对奥沙利铂诱导的神经病的动物模型中的爪缩回阈值(PWT)的影响；Pre1、Pre2和Pre3：在施用奥沙利铂前的1周、2周和3周的基线PWT读数；W1，W2：在奥沙利铂施用后的1周和2周；D0-0h：施用LAT8881的时间；D0-1h、D0-2h和D0-4h：在奥沙利铂施用后的1、2和4小时；与D0-0h相比，**p<0.01并且***p<0.001；配对学生t-检验；对于每组n＝6。
图15显示了LAT8881(以5mg/kg体重通过口服灌胃施用，PO)对利血平诱导的纤维肌痛的动物模型——神经病理性疼痛的模型中的爪缩回阈值(PWT)的影响；Pre1和Pre2：在施用利血平前的1周和2周的基线PWT读数；D0：施用利血平的当天；D8、D9和D10：第一次施用利血平后第8天、第9天和第10天；在施用利血平后的第10天(D8-0h)用载体(PBS中5％DMSO，2mL/kg体重，PO)和LAT8881给药；与载体组相比，*p<0.05并且**p<0.01；配对学生t-检验；对于LAT8881组n＝6并且对于载体组n＝3。
图16显示了LAT8881(以1mg/kg体重，PO，5mg/kg体重且PO以及10mg/kg体重，PO通过口服灌胃施用)对完全弗氏佐剂(CFA)诱导的炎症(同侧)的动物模型——伤害性疼痛的模型中的爪缩回阈值(PWT)的影响；D-2和D-1：在施用CFA前的1周和2周的基线PWT读数；D0：施用CPA当天的基线读数；基线：在施用LAT8881当天取的读数；1hr、2hr和4hr：在施用CFA后的第一小时、第二小时和第四小时；在施用CFA后的第1天用载体(PBS中5％DMSO，2mL/kg体重，PO)、LAT8881和吗啡(3mg/kg体重)给药；与相同时间点的载体组相比，*p<0.05并且***p<0.001；单向方差分析；对于每组n＝8。
图17显示了在37℃下温育1小时时间段的掺入LAT8881的人血液中LAT8881和LAT9991F的检测。结果显示为LAT8881和LAT9991F与其各自内标值的峰面积比。
图18显示了在37℃下温育1小时时间段的掺入LAT8881的大鼠血液中LAT8881和LAT9991F的检测。结果显示为LAT8881和LAT9991F与其各自内标值的峰面积比。
图19显示了当与载体对照相比时，LAT9991(SEQ ID NO:4)(以1mg/kg体重、2mg/kg体重和5mg/kg体重通过口服灌胃施用，PO)对Chung模型大鼠的同侧爪的爪缩回阈值的影响；D-1和D-2：术前的1天和2天；D0：手术当天；D7：术后第7天；D14：术后第14天和给药时间；载体：PBS中1％DMSO(2mL/kg体重，PO)；加巴喷丁(100mg/kg体重；PO)；与载体对照动物中的相同时间点相比，*p<0.05，**p<0.01并且***p<0.001(单向方差分析)；对于每组n＝8。
图20显示了来自Chung模型大鼠的脊髓切片中的神经细胞中的自发电活动(记录中的向上偏转)——神经病理性疼痛状态的性能特征。在将1μM LATc9991F添加至脊髓切片的2分钟内，这种电活动被抑制；*指示将LATc9991F添加至脊髓切片制品中的时间。
具体实施方式
除非另有限定，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明的实践和测试中可使用与本文描述的那些类似或等同的任何方法和材料，但是描述了优选的方法和材料。为了本发明的目的，以下术语限定如下。
冠词“一(“a”和“an”)”在本文中用于指代该冠词的语法对象的一个或多个(即，至少一个)。举例来说，“一个要素”意思是一个要素或一个以上要素。
遍及本说明书，除非上下文另有要求，词语“包括(comprise、comprises和comprising)”将被理解为暗示包括所陈述的步骤或元件或者步骤或元件的组，但不排除任何其他步骤或元件或者步骤或元件的组。
治疗方法
本发明至少部分地基于发明人的令人惊讶的发现而预测：式(I)的肽(SEQ ID NO:1)具有有利的镇痛特性，因为它们能够减轻神经病理性疼痛而对伤害性疼痛具有较小或没有镇痛作用。因而，在本文公开的方面，提供了治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，该方法包括将治疗有效量的式(I)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在。
在优选的实施方式中，肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。SEQ ID NO:2(在本文中可互换地称为LAT8881或AOD9604)是跨越hGH的氨基酸残基178–192的人生长激素(hGH)的C-末端片段(参见，例如，GenBank登录号AAA72260.1、AML27053.1和ADE06645.1)，其在肽的N-末端具有另外的酪氨酸残基。
本发明人还令人惊讶地发现对神经病理性疼痛的治疗作用保留在SEQ ID NO:2肽的较小片段中。例如，本发明人令人惊讶地发现了SEQ ID NO:4(CRSVEGSCG；在本文中也被称为LAT9991)在体内对神经病理性疼痛具有治疗有效的镇痛作用。进一步地，本发明人令人惊讶地发现了SEQ ID NO:5(CRSVEGSCGF；在本文中也被称为LAT9991F)在体内也对神经病理性疼痛具有治疗有效的镇痛作用。因而，在本文公开的实施方式中，R1不存在。在另一个实施方式中，R2不存在。在又另一个实施方式中，R1和R2都不存在。
在本文公开的实施方式中，式(I)的肽的长度是9至16个氨基酸残基，优选长度是9、10、11、12、13、14、15或16个氨基酸残基。式(I)的肽通常将在两个半胱氨酸(C)残基之间包括二硫键，由此在两个半胱氨酸残基之间形成环肽。
在一个实施方式中，肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
在优选的实施方式中，肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。在另一个优选的实施方式中，肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
本发明人还令人惊讶地发现，式(I)的肽的非人变体具有与其人对应物类似的镇痛特性。式(I)的肽的合适的非人变体是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例在WO2013/082667中公开，其内容通过引用并入本文。在本文公开的方面，提供了治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，该方法包括将治疗有效量的式(II)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
式(II)的肽的长度是9至17个氨基酸残基，优选长度是9、10、11、12、13、14、15、16或17个氨基酸残基。式(II)的肽通常在两个半胱氨酸(C)残基之间包括二硫键，由此在两个半胱氨酸残基之间形成环肽。在一个实施方式中，肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。在一个实施方式中，肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。在另一个实施方式中，肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。在另一个实施方式中，肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
在一个实施方式中，肽形成为药学上可接受的盐。应当理解，还考虑了非药学上可接受的盐，因为这些可以用作制备药学上可接受的盐的中间体或者可以在储存或运输其间使用。合适的药学上可接受的盐是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例包括药学上可接受的无机酸，比如盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氢溴酸的盐，或药学上可接受的有机酸，比如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、富马酸、马来酸、柠檬酸、乳酸、粘酸、葡萄糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水杨酸、磺胺酸、天冬氨酸、谷氨酸、乙二酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗坏血酸和戊酸的盐。合适的碱式盐的说明性实例包括与药学上可接受的阳离子，比如钠、钾、锂、钙、镁、铵和烷基铵形成的那些。碱性含氮基团可以被诸如以下的试剂季铵化：低级烷基卤化物，比如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯如硫酸二甲酯和硫酸二乙酯；等等。
本文还公开了包括式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐的前药。如本文所使用，“前药”通常是指可以在体内代谢以提供式(I)或(II)的活性肽或其药学上可接受的盐的化合物。在一些实施方式中，前药本身也具有与如本文其他地方所描述的式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐相同或基本上相同的镇痛活性。
在一些实施方式中，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以进一步包括C-末端封端基团。如本文所使用，术语“C-末端封端基团”是指阻断C-末端羧酸的反应性的基团。合适的C-末端封端基团与C-末端羧酸形成酰胺基或酯，例如，C-末端封端基团形成–C(O)NHRa或–C(O)ORb，其中C(O)来自C-末端羧酸基团并且Ra是氢、烷基、烯基、炔基、环烷基或芳基并且Rb是烷基、烯基、炔基、环烷基或芳基。在具体实施方式中，C-末端封端基团是-NH2，形成–C(O)NH2。在一些实施方式中，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐包括C-末端聚乙二醇(PEG)。在一个实施方式中，PEG的分子量是220至5500Da，优选地220至2500Da，更优选地570至1100Da。
在一些实施方式中，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以进一步包括N-末端封端基团。术语“N-末端封端基团”，如本文所使用，是指阻断N-末端氨基的反应性的基团。合适的N-末端封端基团是与N-末端氨基形成酰胺基的酰基，例如，N-末端封端基团形成–NHC(O)Ra，其中NH来自N-末端氨基并且Ra是烷基、烯基、炔基、环烷基或芳基。在具体实施方式中，N-末端封端基团是-C(O)CH3(酰基)，形成-NHC(O)CH3。
在一些实施方式中，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以包括如本文所述的C-末端封端基团和N-末端封端基团。
如本文所述，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以通过本领域技术人员已知的任何方法制造。合适的方法的说明性实例包括使用Fmoc或Boc保护的氨基酸残基的溶液或固相合成，使用微生物培养的重组技术，基因工程微生物、植物和重组DNA技术(参见，例如，Sambrook和Russell，Molecular Cloning:A Laboratory Manual(3rd Edition)，2001，CSHL Press)。
如本文其他地方所描述，本发明人首次令人惊讶地发现，式(I)的肽(SEQ ID NO:1)具有有利的镇痛特性，因为它们能够减轻神经病理性疼痛同时对伤害性疼痛具有很小或没有镇痛作用。因此，式(I)的肽可以合适地用于治疗、预防、减轻或以其他方式延迟受试者的神经病理性疼痛的发作，包括神经病理性疼痛的一种或多种症状。本发明人还令人惊讶地发现，式(I)的肽的非人变体具有与其人对应物类似的镇痛特性。
因此，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以合适地用于治疗、预防、减轻或以其他方式延迟受试者的神经病理性疼痛的发作，包括神经病理性疼痛的一种或多种症状。
术语“治疗”、“处理”等在本文中互换地使用以表示缓解、降低、减轻、改善或以其他方式抑制神经病理性疼痛，包括神经病理性疼痛的一种或多种症状，比如异常性疼痛或痛觉增敏。术语“治疗”、“处理”等在本文中互换地使用以表示预防神经病理性疼痛在可能易发展神经病理性疼痛或处于发展神经病理性疼痛的风险中但尚未被诊断为患有神经病理性疼痛的受试者中发生或延迟神经病理性疼痛的发作或随后的进展。在这种情况下，术语“治疗”、“处理”等与术语比如“预防(prophylaxis)”、“预防疾病的(prophylactic)”和“预防性的(preventative)”互换地使用。
术语“治疗”、“处理”等还包括缓解、预防、降低、减轻、改善或以其他方式抑制疼痛的影响持续至少一段时间。还应理解，术语“治疗”、“处理”等没有暗示永久地缓解、降低、减轻、改善或以其他方式抑制神经病理性疼痛或其症状，并且因此也涵盖了暂时缓解、降低、减轻、改善或以其他方式抑制神经病理性疼痛或其症状。
不受理论或具体应用模式的束缚，神经病理性疼痛的特征通常为神经组织或神经元本身的创伤(injury)或疾病的损伤或神经组织内的机能障碍所导致的疼痛。疼痛可以是周围的、中枢的或其组合；换句话说，术语“神经病理性疼痛”通常是指由周围或中枢神经系统中的原发性病变或机能障碍引发或引起的任何疼痛综合征。神经病理性疼痛也是可区分的，因为它通常对普通的止痛药比如阿片类的治疗没有有效地响应。相比之下，伤害性疼痛的特征为由可能对组织引起损伤或创伤的有害性的或潜在有害的刺激对伤害感受器的刺激导致的疼痛。伤害性疼痛通常对普通止痛药比如阿片类有响应。
术语“镇痛”在本文中用于描述疼痛知觉降低的状态，包括没有疼痛感，以及对有害性刺激的敏感性降低或不存在的状态。如本领域通常所理解，这种疼痛知觉降低或不存在的状态通常是通过施用一种或多种疼痛控制剂来诱导的并且在不丧失意识的情况下发生。确定化合物是否能够提供镇痛作用的合适的方法是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例包括使用神经病理性疼痛比如慢性压迫性损伤、脊髓神经结扎和坐骨神经部分结扎的动物模型(参见Bennett et al.(2003)；Curr.Protoc.Neurosci.，Chapter 9，Unit 9.14)和伤害性疼痛比如福尔马林、角叉菜胶或完全弗氏佐剂(CFA)诱导的炎症性疼痛的动物模型。在Gregory等(2013，J.Pain.；14(11)；“:An overview of animal models of pain:diseasemodels and outcome measures”)中讨论了其他合适的疼痛模型。
如本领域技术人员将知道，存在神经病和神经病理性疼痛的许多可能原因。因此，应当理解，本文考虑的是，无论原因如何的神经病理性疼痛的治疗或预防。在一些实施方式中，神经病理性疼痛是影响神经的疾病或病况(原发性神经病)和/或由系统性疾病引起的神经病(继发性神经病)的结果，其说明性实例包括糖尿病性神经病；Herpes Zoster(带状疱疹)相关的神经病；纤维肌痛；多发性硬化、中风、脊髓损伤；慢性手术后疼痛、幻肢痛、帕金森病；尿毒症相关的神经病；淀粉样变性神经病；HIV感觉神经病；遗传性运动和感觉神经病(HMSN)；遗传性感觉神经病(HSN)；遗传性感觉和自主神经病；遗传性神经病伴溃疡致残；呋喃妥因神经病；腊肠样神经病；营养缺乏引起的神经病、肾衰竭引起的神经病和复杂区域性疼痛综合征。可能引起神经病理性疼痛的病况的其他说明性实例包括重复性活动，比如打字或在装配线上工作，已知会引起周围神经病的药物比如几种抗逆转录病毒药物ddC(扎西他滨)和ddI(去羟肌苷)、抗生素(甲硝唑，用于克罗恩病的抗生素，用于结核病的异烟肼)、(用于类风湿性关节炎的)金化合物、一些化疗药物(比如长春新碱等)以及许多其他药物。还已知化合物会引起周围神经病，其包括乙醇、铅、砷、汞和有机磷酸酯杀虫剂。一些周围神经病与感染过程有关(比如格林-巴利综合征)。神经病理性疼痛的其他说明性实例包括热或机械性痛觉增敏、热或机械性异常性疼痛、糖尿病性疼痛、影响口腔的神经病理性疼痛(例如，三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)、灼口综合征)、纤维肌痛和卡压性疼痛(entrapment pain)。
在本文公开的实施方式中，神经病理性疼痛选自糖尿病性神经病；Herpes Zoster(带状疱疹)相关的神经病；纤维肌痛；多发性硬化、中风、脊髓损伤；慢性手术后疼痛、幻肢痛、帕金森病；尿毒症相关的神经病；淀粉样变性神经病；HIV感觉神经病；遗传性运动和感觉神经病(HMSN)；遗传性感觉神经病(HSN)；遗传性感觉和自主神经病；遗传性神经病伴溃疡致残；呋喃妥因神经病；腊肠样神经病；营养缺乏引起的神经病、肾衰竭引起的神经病、三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)、灼口综合征、复杂区域性疼痛综合征、重复性劳损、药物引起的周围神经病；与感染相关的周围神经病、异常性疼痛、感觉过敏、痛觉增敏、烧灼痛和射痛。
在一些实施方式中，神经病理性疼痛可伴有麻木、虚弱和反射丧失。疼痛可能很严重且致残。“痛觉增敏”是指对通常疼痛的刺激反应增加。痛觉增敏病况是与通常不痛的刺激引起的疼痛相关的病况。术语“感觉过敏”是指过度的身体敏感性，尤其是皮肤。如本文所使用的术语“异常性疼痛”是指由非有害性刺激导致的疼痛；即，由于通常不会激起疼痛的刺激引起的疼痛。异常性疼痛的说明性实例包括热性异常性疼痛(thermal allodynia)(由于冷或热刺激引起的疼痛)、触觉性异常性疼痛(由于轻压或触摸引起的疼痛)、机械性异常性疼痛(由于重压或针刺引起的疼痛)等。
神经病理性疼痛可以是急性的或慢性的，并且在这种情况下，应当理解，神经病的时程可以基于其潜在原因而变化。例如，在外伤的情况下，神经病理性疼痛的发作或神经病理性疼痛的症状可能是急性的或突然的；然而，最严重的症状可能会随时间而发展并持续数年。数周至数月的慢性时程通常指示毒性或代谢性神经病。慢性、缓慢进行性神经病，比如伴有疼痛的糖尿病性神经病或大多数遗传性神经病或称为慢性炎症性脱髓鞘性多神经根神经病(CIDP)的病况，可能具有数年的时程。症状复发和缓解的神经病理性病况包括格林-巴利综合征。
在一些实施方式中，神经病理性疼痛是由以神经超敏为特征的病况所导致的，比如纤维肌痛或肠道易激综合征。
在其他实施方式中，神经病理性疼痛是由与导致神经超敏的异常神经再生相关的疾病所导致。这种疾病包括乳房疼痛、间质性膀胱炎、外阴痛和癌症化学疗法诱导的神经病。
在一些实施方式中，神经病理性疼痛涉及手术、术前疼痛和术后疼痛，特别是术后神经病理性疼痛。
如本文所使用的术语“受试者”是指需要治疗或预防神经病理性疼痛的哺乳动物受试者。合适的受试者的说明性实例包括灵长类动物，特别是人，伴侣动物比如猫和狗等，工作动物比如马、驴等，家畜动物比如绵羊、牛、山羊、猪等，实验室测试动物比如兔子、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠等以及和圈养野生动物比如动物园和野生公园中的那些、鹿、澳洲野狗等。在一个实施方式中，受试者是人。在另一个实施方式中，受试者选自犬科动物、猫科动物和马科动物。
应当理解，本文中对受试者的参考并不暗示受试者患有神经病理性疼痛或其症状，而是包括处于发展神经病理性疼痛或其症状的风险下的受试者。在一个实施方式中，受试者患有(即，正在经历)神经病理性疼痛或其症状。在另一个实施方式中，受试者在治疗时没有正在经历神经病理性疼痛或其症状，而是处于发展神经病理性疼痛或其症状的风险下。在说明性实例中，受试者患有使受试者处于发展神经病理性疼痛的风险下的疾病或病况，例如，管理不善的糖尿病，其可能导致糖尿病性神经病。在另一个实施方式中，受试者患有可能导致神经病理性疼痛的疾病或病况，比如herpes zoster(带状疱疹)，其可能导致疱疹后神经痛。
在一些实施方式中，本文公开的方法包括向非人受试者施用式(II)的肽或其药学上可接受的盐。在优选的实施方式中，非人受试者选自犬科动物、猫科动物或马科动物。在其他实施方式中，本文公开的方法包括向人受试者施用式(I)的肽或其药学上可接受的盐。在其他实施方式中，向非人受试者比如犬科动物、猫科动物或马科动物施用式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用。短语“治疗有效量”通常是指达到期望的反应或延迟发作或抑制进展或完全停止治疗的神经病理性疼痛的发作或进展所必需的量。本领域技术人员将理解，肽的治疗有效量将取决于几个因素而变化，其说明性实例包括待治疗的受试者的健康和身体状况、待治疗的受试者的分类学类群、待治疗的神经病理性疼痛的严重程度、包括式(I)或式(II)的肽或其药学上可接受的盐的组合物的配方、施用途径以及前述中任意的组合。
治疗有效量通常将落在可以由本领域技术人员通过常规试验确定的相对较宽的范围内。用于施用至人受试者的式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐的合适的治疗有效量的说明性实例包括每千克体重约0.001mg至每千克体重约1g，优选地每千克体重约0.001mg至每千克体重约50g，更优选地每千克体重约0.01mg至每千克体重约1.0mg。在本文公开的实施方式中，式(I)或式(II)的肽或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每剂量每千克体重约0.001mg至每千克体重约1g(例如，0.001mg/kg、0.005mg/kg、0.01mg/kg、0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.15mg/kg、0.2mg/kg、0.25mg/kg、0.3mg/kg、0.35mg/kg、0.4mg/kg、0.45mg/kg、0.5mg/kg、0.5mg/kg、0.55mg/kg、0.6mg/kg、0.65mg/kg、0.7mg/kg、0.75mg/kg、0.8mg/kg、0.85mg/kg、0.9mg/kg、0.95mg/kg、1mg/kg、1.5mg/kg、2mg/kg、2.5mg/kg、3mg/kg、3.5mg/kg、4mg/kg、4.5mg/kg、5mg/kg、5.5mg/kg、6mg/kg、6.5mg/kg、7mg/kg、7.5mg/kg、8mg/kg、8.5mg/kg、9mg/kg、9.5mg/kg、10mg/kg、10.5mg/kg、11mg/kg、11.5mg/kg、12mg/kg、12.5mg/kg、13mg/kg、13.5mg/kg、14mg/kg、14.5mg/kg、15mg/kg、15.5mg/kg、16mg/kg、16.5mg/kg、17mg/kg、17.5mg/kg、18mg/kg、18.5mg/kg、19mg/kg、19.5mg/kg、20mg/kg、20.5mg/kg、21mg/kg、21.5mg/kg、22mg/kg、22.5mg/kg、23mg/kg、23.5mg/kg、24mg/kg、24.5mg/kg、25mg/kg、25.5mg/kg、26mg/kg、26.5mg/kg、27mg/kg、27.5mg/kg、28mg/kg、28.5mg/kg、29mg/kg、29.5mg/kg、30mg/kg、35mg/kg、40mg/kg、45mg/kg、50mg/kg、55mg/kg、60mg/kg、65mg/kg、70mg/kg、75mg/kg、80mg/kg、85mg/kg、90mg/kg、95mg/kg、100mg/kg、105mg/kg、110mg/kg体重等)。在一个实施方式中，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每千克体重约0.001mg至约50mg。在一个实施方式中，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐的治疗有效量为每千克体重约0.01mg至约1.0mg。可以调整剂量方案以提供最佳治疗反应。例如，可以每天、每周、每月或其他合适的时间间隔施用数个分开的剂量，或者根据情况的紧急程度指示的，按比例减少剂量。
如本文其他地方所指出，本发明人惊讶地发现，式(I)的肽具有有利的镇痛特性，由此其能够减轻受试者的神经病理性疼痛，而对伤害性疼痛具有最小或没有镇痛作用。因而，在本文公开的实施方式中，将式(I)的肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用至受试者，该治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻受试者的神经病理性疼痛。本发明人还惊讶地发现，式(I)的肽的非人变体具有与其人对应物类似的镇痛特性。因而，在本文公开的实施方式中，式(II)的肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用至受试者，该治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻受试者的神经病理性疼痛。
“对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用”是指受试者对伤害性疼痛的感知的部分或完全减少。因而，在一个实施方式中，可以通过受试者保持感知伤害性疼痛的刺激的能力达到受试者好像没有接受式(I)或式(II)的肽或其药学上可接受的盐的相同或基本相同的程度——尽管减轻了神经病理性疼痛，来表征不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用。在一个实施方式中，式(I)的肽或其药学上可接受的盐在合适于治疗神经病理性疼痛的剂量下对治疗伤害性疼痛不是治疗有效的。在一个实施方式中，式(II)的肽或其药学上可接受的盐在合适于治疗神经病理性疼痛的剂量下对治疗伤害性疼痛不是治疗有效的。
在其他实施方式中，将式(I)的肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用至受试者，该治疗有效量减轻受试者的神经病理性疼痛，而对伤害性疼痛具有一些但治疗无效的镇痛作用。在另一个实施方式中，将式(II)的肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量施用至受试者，该治疗有效量减轻受试者的神经病理性疼痛，而对伤害性疼痛具有一些但治疗无效的镇痛作用。术语“对伤害性疼痛治疗无效的镇痛作用”是指对伤害性疼痛没有明显的镇痛作用或者对伤害性疼痛具有部分镇痛作用，但受试者仍然能够感知伤害性疼痛的刺激。
先前已经显示SEQ ID NO:2的肽(YLRIVQCRSVEGSCGF；在本文中可以互换地称为AOD9604或LAT8881)可用于治疗比如肥胖症(参见WO99/12969和WO01/033977)和骨骼疾病(参见WO 2005/105132)等的病况。先前也已经显示这种肽可用于治疗肌肉或结缔组织的炎症性、外伤性或遗传性疾病，其至少部分地归因于增加了软骨细胞、蛋白多糖、胶原和软骨组织的产生并且促进了肌肉、韧带和肌腱质量、形式、修复和功能(参见WO2013/082667)。然而，这些较早的研究没有例证对神经病理性疼痛的镇痛作用。
Cox等人(2015；Drug Test.Analysis.；7:31-38))先前已经报道了在人血清和尿液的存在下AOD9604(SEQ ID NO:2)的分解产物。作者鉴定出单一的(最短的)代谢物——遍及他们的文章多处描述——为具有有时CRSVEGSCG或CRSVEGSCGF的氨基酸序列。从他们的报道中，尚不清楚意图是哪种代谢物，注意到CRSVEGSCG在表1和4中鉴定，而CRSVEGSCGF在正文中的多个段落处鉴定。无论如何，Cox等人的报道没有提供任何内容表明这种代谢物(无论是CRSVEGSCG还是CRSVEGSCGF)保留了任何生物学活性，注意到作者的研究目的是鉴定AOD9604的代谢物用于药物测试。现在，本发明人首次表明这些代谢物不仅具有生物学活性，而且与亲本肽SEQ ID NO:2相比，它们保留了同等水平的生物学活性。例如，由神经病理性疼痛的神经收缩模型得到的数据，这是显而易见的(见图9-16和19)。由该数据可见，就神经病理性镇痛的强度和持续时间二者而言，AOD9604(SEQ ID NO:2)的片段显示出与亲本肽相当的活性。因而，在本文公开的另一方面，提供了治疗受试者的病况的方法，该方法包括将治疗有效量的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者，其中肽由氨基酸序列CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)或氨基酸序列CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)组成或基本上由其组成，并且其中病况选自肌肉减少症，糖耐量减低，糖尿病，肥胖症，代谢性疾病和肥胖症相关的病况，神经病理性疼痛，骨关节炎，肌肉紊乱，消耗性疾病，恶病质，厌食症，艾滋病消耗综合征，肌营养不良，神经肌肉疾病，运动神经元疾病，神经肌肉接头疾病，炎性肌病，烧伤，损伤或外伤，与LDL胆固醇升高相关的病况，与软骨细胞、蛋白多糖或胶原的生成或品质受损相关的病况，与软骨组织形成或品质受损相关的病况，与肌肉、韧带或肌腱质量、形式或功能受损相关的病况，与影响肌肉或结缔组织的炎症、外伤或遗传异常相关的病况和骨骼疾病。
施用途径
如本文所述，可以通过允许以治疗有效量将肽递送至受试者的任何合适的途径将式(I)和(II)的肽和其药学上可接受的盐施用至受试者。合适的施用途径是本领域技术人员已知的，其说明性实例包括肠内施用途径(例如，口服和直肠)、通常通过注射或显微注射的肠胃外施用途径(例如，肌肉内、皮下、静脉内、硬膜外、关节内、腹膜内、脑池内或鞘内)、和局部(经皮或跨黏膜)施用途径(例如，面颊、舌下、阴道、鼻内或通过吸入)。式(I)和(II)的肽和其药学上可接受的盐也可以作为控释剂型适当地施用至受试者以在延长的时间段内提供活性剂(一种或多种)的控释。术语“控释”通常是指在一段时间(例如，约8小时至至多约12小时、至多约14小时、至多约16小时、至多约18小时、至多约20小时、至多一天、至多一周、至多一个月或超过一个月)内在受试者中提供恒定或基本上恒定的活性剂浓度的活性剂(一种或多种)的释放。活性剂(一种或多种)的控释可以根据需要在施用后几分钟内或在施用后的延迟时间段(滞后时间)到期后开始。合适的控释剂型是本领域技术人员已知的，其说明性实例在Anal,A.K.(2010；Controlled-Release Dosage Forms.PharmaceuticalSciences Encyclopedia.11:1–46)中描述。
不受理论或具体应用模式的束缚，可能期望基于神经病理性疼痛是局部的还是全身性的来选择施用途径。例如，当神经病理性疼痛是局部的时，可能期望将肽施用至受影响区域或紧邻其的区域。例如，当神经病理性疼痛是在关节(例如，颈部、膝盖、肘部、肩膀、臀部等)中时，可以将肽关节内施用至受试者受影响的关节中。可选地或另外地，可以在受影响的关节处或基本上邻近受影响的关节施用肽。作为另一个说明性实例，当神经病理性疼痛在口腔中时(例如，三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)或灼口综合征)，可以将肽配制为经由口腔黏膜施用(例如，通过面颊和/或舌下施用)。相反，当神经病理性疼痛在受试者的多个解剖部位泛化或散布时，可以在任何部位局部、肠内和/或肠胃外施用肽，目的是将活性肽分布在受神经病理性疼痛影响的多个解剖部位。在本文公开的实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐肠内施用至受试者。在本文公开的实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至受试者。在本文公开的实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至受试者。在本文公开的另一个实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐局部地施用至受试者。如本文其他地方所描述，“局部”施用通常是指将活性剂以乳霜、洗剂、泡沫、凝胶、软膏、滴鼻剂、滴眼剂、滴耳剂、经皮贴剂、经皮膜(例如，舌下膜)等形式施加至身体的表面——比如皮肤或黏膜上。局部施用还涵盖通过吸入或吹入经由呼吸道的黏膜施用。在本文公开的实施方式中，局部施用选自经皮和跨黏膜施用。在一个实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐经皮施用至受试者。
在一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐口服施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐局部施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
局部施用的说明性实例在本文的其他地方描述。在一个实施方式中，局部施用是经皮的。
在本文公开的实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至受试者，该控释剂型的说明性实例在本文的其他地方描述。在一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将式(I)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将式(II)的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至人。在另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，方法包括SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，方法包括将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐作为控释剂型施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，将控释剂型肠胃外施用至受试者，其合适的实例在本文其他地方描述。
如本文其他地方所指出，可以每天、每周、每月或其他合适的时间间隔施用数个(即，多个)分开的剂量，或者可以根据情况的紧急程度指示的，按比例减少剂量。在需要或另外地期望多个剂量的疗程的情况下，如本文所公开，经由多于一种途径施用肽可能是有利的。例如，可能期望肠胃外(例如，经由肌肉内、静脉内；皮下、硬膜外、关节内、腹膜内、脑池内或鞘内施用途径)施用第一剂量以在受试者中诱导快速或其他急性的镇痛作用，接着通过肠内(例如，口服或直肠)和/或局部(例如，经由经皮或跨黏膜施用途径)施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量以在急性治疗阶段之后的较长时间段内提供活性剂的持续可用性。可选地，可能期望肠内(例如，口服或直肠)施用一个剂量，接着肠胃外(例如，经由肌肉内、静脉内；皮下、硬膜外、关节内、腹膜内、脑池内或鞘内施用途径)和/或局部(例如，经由经皮或跨黏膜施用途径)施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量。可选地，可能期望局部(例如，经由经皮或跨黏膜施用途径)施用一个剂量，接着肠胃外(例如，经由肌肉内、静脉内；皮下、硬膜外、关节内、腹膜内、脑池内或鞘内施用途径)和/或肠内(例如，口服或直肠)施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量。
如本文其他地方所讨论，可以基于神经病理性疼痛是局部的还是泛化的来适当地选择施用途径。可选地或另外地，考虑到比如受试者的总体健康状况、年龄、体重和对给定施用途径的耐受性(或缺乏耐受性)，可以适当地选择施用途径(例如，在存在针头恐惧症的情况下，可以选择替代的施用途径，比如肠内和/或局部)。
还应当理解，在需要多种施用途径的情况下，可以根据本文公开的方法使用两种或多种施用途径的任意组合。合适的组合的说明性实例包括，但不限于，(按施用顺序)，(a)肠胃外-肠内；(b)肠胃外-局部；(c)肠胃外-肠内-局部；(d)肠胃外-局部-肠内；(e)肠内-肠胃外；(f)肠内-局部；(g)肠内-局部-肠胃外；(h)肠内-肠胃外-局部；(i)局部-肠胃外；(j)局部-肠内；(k)局部-肠胃外-肠内；(l)局部-肠内-肠胃外；(m)肠胃外-肠内-局部-肠胃外；(n)肠胃外-肠内-局部-肠内；等等。
在一个实施方式中，方法包括(i)将如本文所公开的肽或组合物肠胃外施用至受试者，和(ii)将如本文所公开的肽或组合物非肠胃外(即，肠内或局部)施用至受试者，其中非肠胃外(肠内或局部)施用是在肠胃外施用之后。在一个实施方式中，肠胃外施用选自肌肉内、皮下和静脉内。在进一步的实施方式中，肠胃外施用是皮下。在一个实施方式中，非肠胃外施用是口服。
在一个实施方式中，本文公开的方法包括(i)将式(I)的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至人受试者，和(ii)将式(I)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至人受试者，其中口服施用是在肠胃外施用之后。在另一个实施方式中，本文公开的方法包括(i)将SEQ IDNO:2的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至人受试者，和(ii)将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐口服施用至人受试者，其中口服施用是在肠胃外施用之后。在一个实施方式中，肠胃外施用是皮下。在另一个实施方式中，肠胃外施用是鞘内。
在一个实施方式中，本文公开的方法包括(i)将式(II)的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至非人受试者，和(ii)将式(II)的肽或其药学上可接受的盐口服施用至非人受试者，其中口服施用是在肠胃外施用之后。在进一步的实施方式中，本文公开的方法包括(i)将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至非人受试者，和(ii)将SEQ IDNO:7的肽或其药学上可接受的盐口服施用至非人受试者，其中口服施用是在肠胃外施用之后。在一个实施方式中，非人受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。在一个实施方式中，肠胃外施用是皮下。在另一个实施方式中，肠胃外施用是鞘内。
在进一步的实施方式中，本文公开的方法包括(i)将式(I)的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至人受试者，和(ii)将式(I)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至人受试者，其中局部施用是在肠胃外施用之后。在进一步的实施方式中，本文公开的方法包括(i)将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至人受试者，和(ii)将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐局部施用至人受试者，其中局部施用是在肠胃外施用之后。
在进一步的实施方式中，本文公开的方法包括(i)将式(II)的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至非人受试者，和(ii)将式(II)的肽或其药学上可接受的盐局部施用至非人受试者，其中局部施用是在肠胃外施用之后。在进一步的实施方式中，本文公开的方法包括(i)将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐肠胃外施用至非人受试者，和(ii)将SEQ IDNO:7的肽或其药学上可接受的盐局部施用至非人受试者，其中局部施用是在肠胃外施用之后。
在一个实施方式中，非人受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。在一个实施方式中，肠胃外施用途径是皮下的。在另一个实施方式中，局部施用途径是经皮的。在另一个实施方式中，肠胃外施用是皮下的并且局部施用是经皮的。
可选地或另外地，如本文所述的肽和组合物可以作为控释剂型适当地施用。因而，在一个实施方式中，方法包括(i)将如本文所公开的肽或组合物肠胃外施用至受试者，和(ii)将如本文所公开的肽或组合物作为控释剂型施用至受试者，其中在肠胃外施用之后施用控释剂型。在另一个实施方式中，方法包括(i)将如本文所公开的肽或组合物非肠胃外(肠内或局部)施用至受试者，和(ii)将如本文所公开的肽或组合物作为控释剂型施用至受试者，其中在非肠胃外施用之后将控释剂型施用至受试者。在又另一个实施方式中，方法包括(i)将如本文所公开的肽或组合物肠内施用至受试者，和(ii)将如本文所公开的肽或组合物作为控释剂型施用至受试者，其中在肠内施用之后将控释剂型施用至受试者。在又另一个实施方式中，方法包括(i)将如本文所公开的肽或组合物局部施用至受试者，和(ii)将如本文所公开的肽或组合物作为控释剂型施用至受试者，其中在局部施用之后将控释剂型施用至受试者。在优选的实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
辅助治疗
式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以适当地与一种或多种另外的活性剂一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用。本领域技术人员将理解，其他活性剂的性质将取决于待治疗或预防的病况。例如，在受试者患有癌症的情况下，可以将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐与一种或多种化学治疗剂一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用至受试者，该一种或多种化学治疗剂的说明性实例是本领域技术人员熟悉的。这种性质的组合治疗可以通过减轻通常与一些化学治疗剂相关联的神经病理性疼痛而是有利的，这些化学治疗剂的说明性实例包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、长春新碱、多西他赛、紫杉醇、伊沙匹隆(izbepilone)、硼替佐米、沙利度胺和来那度胺。因而，在一个实施方式中，本文公开的方法进一步包括将治疗有效量的化学治疗剂施用至受试者。
式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以适当地与能够减轻受试者的疼痛的一种或多种其他镇痛剂(即，除了式(I)和(II)的肽和其药学上可接受的盐之外)一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用至受试者。合适的镇痛剂是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例包括能够减轻伤害性疼痛的镇痛剂、能够减轻神经病理性疼痛的药剂或其任意组合。因而，在一个实施方式中，本文公开的方法进一步包括将治疗有效量的能够减轻受试者的疼痛的第二药剂施用至受试者，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方式中，本文公开的方法进一步包括将治疗有效量的能够减轻受试者的疼痛的第二药剂施用至受试者，其中第二药剂不是式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛。
能够减轻伤害性疼痛的合适的药剂是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例包括鸦片制剂比如吗啡、可待因、二氢可待因、氢可酮、乙酰基二氢可待因、羟考酮、羟吗啡酮和丁丙诺啡，以及非甾体抗炎药(NSAID)比如阿司匹林、布洛芬、萘普生、对乙酰氨基酚、二氟尼柳、水杨酯、非那西丁、非诺洛芬、酮洛芬、氟比洛芬、奥沙普嗪、洛索洛芬、吲哚美辛、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、双氯芬酸、萘丁美酮、甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞来昔布、帕瑞昔布、罗美昔布、依托昔布、非罗考昔、利美舒利(rimesulide)和利克飞龙。在一个实施方式中，能够减轻伤害性疼痛的第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的其他实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐与另一种疗法一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用以治疗或减轻神经病理性疼痛或正引起神经病理性疼痛的潜在病况。在一些情况下，当与式(I)或式(II)的肽或其药学上可接受的盐一起施用时，可以减少第二神经病理性镇痛剂的量。能够治疗神经病理性疼痛的合适的药剂的说明性实例包括度洛西汀、普瑞巴林、加巴喷丁、苯妥英、褪黑素、卡马西平、左卡尼汀、辣椒素、三环类抗抑郁药比如阿米替林(amitryptiline)和钠通道阻断剂比如利多卡因。
药物组合物
可以将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为纯净化学品施用至受试者。然而，在某些实施方式中，可能优选的是将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐配制为药物组合物，其包括兽药组合物。因而，在本文公开的另一方面，提供了包括如本文所述的式(I)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，用于治疗受试者的神经病理性疼痛：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
在一个实施方式中，肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。在一个实施方式中，肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。在一个实施方式中，肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
在一个实施方式中，式(I)的肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量存在，当施用至受试者时，其在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻受试者的神经病理性疼痛，如本文其他地方所描述。
在一个实施方式中，组合物进一步包括能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的另一方面，提供了如本文所述的式(I)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在。
在一个实施方式中，其中肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。在一个实施方式中，肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。在一个实施方式中，肽是CRSVEGSCG(SEQ IDNO:4)。在一个实施方式中，肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
在一个实施方式中，将式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于以治疗有效量施用至受试者，所述治疗有效在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻受试者的神经病理性疼痛，如本文其他地方所描述。
在一个实施方式中，将肽配制用于与能够减轻受试者的疼痛的第二药剂一起顺序地或组合地施用，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐，如本文其他地方所描述。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的另一方面，提供了包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗受试者的神经病理性疼痛：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
在一个实施方式中，肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。在一个实施方式中，肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。在一个实施方式中，肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
在一个实施方式中，肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量存在，当施用至受试者时，其在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻受试者的神经病理性疼痛，如本文其他地方所描述。
在一个实施方式中，组合物进一步包括能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的另一方面，提供了式(II)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。在一个实施方式中，肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。在一个实施方式中，肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。在一个实施方式中，肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。在一个实施方式中，将式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于以施用至受试者，所述治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻受试者的神经病理性疼痛，如本文其他地方所描述。
在一个实施方式中，将肽配制用于与能够减轻受试者的疼痛的第二药剂一起顺序地或组合地施用，其中第二药剂不是式(II)的肽或其药学上可接受的盐，如本文其他地方所描述。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
如本文其他地方所指出，式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以与可能取决于待治疗的病况的一种或多种另外的活性剂一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用。例如，在受试者患有癌症的情况下，可以将本文公开的组合物配制用于与一种或多种化学治疗剂一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用，该化学治疗剂的说明性实例是本领域技术人员熟悉的。通过减轻通常与一些化学治疗剂相关联的神经病理性疼痛，这种性质的组合治疗可以是有利的，化学治疗剂的说明性实例包括顺铂、卡铂、奥沙利铂、长春新碱、多西他赛、紫杉醇、伊沙匹隆、硼替佐米、沙利度胺和来那度胺。
也可以将本文公开的组合物适当地配制用于与能够减轻受试者的疼痛的一种或多种其他镇痛剂(即，除了式(I)和(II)的肽和其药学上可接受的盐之外)一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用至受试者，如本文其他地方所描述。在一个实施方式中，本文公开的组合物进一步包括能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方式中，本文公开的组合物进一步包括能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛。
能够减轻伤害性疼痛的合适的药剂是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例包括鸦片制剂比如吗啡、可待因、二氢可待因、氢可酮、乙酰基二氢可待因、羟考酮、羟吗啡酮和丁丙诺啡，以及非甾体抗炎药(NSAID)比如阿司匹林、布洛芬、萘普生、对乙酰氨基酚、二氟尼柳、水杨酯、非那西丁、非诺洛芬、酮洛芬、氟比洛芬、奥沙普嗪、洛索洛芬、吲哚美辛、舒林酸、依托度酸、酮咯酸、双氯芬酸、萘丁美酮、甲芬那酸、甲氯芬那酸、氟芬那酸、托芬那酸、塞来昔布、帕瑞昔布、罗美昔布、依托昔布、非罗考昔、利美舒利和利克飞龙。在一个实施方式中，能够减轻伤害性疼痛的第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的其他实施方式中，将本文公开的组合物配制用于与另外的疗法一起顺序地或组合地(例如，作为混合物)施用以治疗或减轻神经病理性疼痛或正引起神经病理性疼痛的潜在病况。在一些实例中，当与式(I)或式(II)的肽或其药学上可接受的盐一起施用时，可以减少第二神经病理性镇痛剂的量。能够治疗神经病理性疼痛的合适的药剂的说明性实例包括度洛西汀、普瑞巴林、加巴喷丁、苯妥英、褪黑素、卡马西平、左卡尼汀、辣椒素、三环类抗抑郁药比如阿米替林以及钠通道阻断剂比如利多卡因。
在本文公开的另一方面，提供了一种药物组合物，其包括：
(i)如本文所述的式(I)的肽或其药学上可接受的盐：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在；和
(ii)能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是如本文所述的式(I)的肽或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的实施方式中，将式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制为包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物。通常认为载体、赋形剂或稀释剂是“可接受的”，因为它们与组合物的其他成分相容并且在受体中几乎没有或没有产生有害影响。
在本文公开的另一方面，提供了包括如本文所述的式(I)的肽或其药学上可接受的盐的镇痛组合物：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
在一个实施方式中，肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。在一个实施方式中，肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。在一个实施方式中，肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。在一个实施方式中，镇痛组合物进一步包括能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，如本文其他地方所描述，其中第二药剂不是式(I)的肽或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的另一方面，提供了药物组合物，其包括：
(i)如本文所述的式(II)的肽或其药学上可接受的盐：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在；和
(ii)能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，其中第二药剂不是如本文所述的式(II)的肽或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的实施方式中，将式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制为包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物。通常认为载体、赋形剂或稀释剂是“可接受的”，因为它们与组合物的其他成分相容并且在受体中几乎没有或没有产生有害影响。
在本文公开的另一方面，提供了包括如本文所述的式(II)的肽或其药学上可接受的盐的镇痛组合物：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
在一个实施方式中，肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
在一个实施方式中，肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。在一个实施方式中，肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。在一个实施方式中，肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。在一个实施方式中，镇痛组合物进一步包括能够减轻受试者的疼痛的第二药剂，如本文其他地方所描述，其中第二药剂不是式(II)的肽或其药学上可接受的盐。在一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的伤害性疼痛，其说明性实例在本文其他地方描述。在另一个实施方式中，第二药剂能够减轻受试者的神经病理性疼痛，其说明性实例也在本文其他地方描述。在一个实施方式中，第二药剂是阿片类药物。
在本文公开的另一方面，提供了包括治疗有效量的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其中肽由氨基酸序列CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)或氨基酸序列CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)组成或基本上由其组成。
在本文公开的另一方面，提供了包括治疗有效量的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其中肽由氨基酸序列CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)或CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)组成或基本上由其组成。
在一个实施方式中，组合物进一步包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂，如本文其他地方所描述。在一个实施方式中，组合物配制用于口服施用。
合适的药物制剂的说明性实例包括适于肠内或肠胃外施用的那些，其说明性实例在本文其他地方描述，包括口服、直肠、面颊、舌下、阴道、鼻内、局部(例如，经皮)、肌肉内、皮下、静脉内、硬膜外、关节内和鞘内。
式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以适当地置于用作固体(例如，片剂或填充胶囊)或液体(例如，溶液、悬浮液、乳剂、酏剂或填充有其的胶囊)的药物组合物及其单位剂量的形式以用于口服用途，软膏、栓剂或灌肠剂的形式以用于直肠施用，无菌注射液的形式以用于肠胃外用途(例如，肌肉内、皮下、静脉内、硬膜外、关节内和鞘内施用)；或软膏、洗剂、乳霜、凝胶、贴剂、舌下带或膜等的形式以用于肠胃外(例如，局部、面颊、舌下、阴道)施用。在一个实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部(例如，经皮)递送。合适的经皮递送系统是本领域技术人员熟悉的，Prausnitz和Langer(2008；Nature Biotechnol.26(11):1261-1268)描述了其说明性实例，其内容通过引用并入本文。在另一个实施方式中，将式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于舌下或面颊递送。合适的舌下和面颊递送系统是本领域技术人员熟悉的，其说明性实例包括可溶解的带或膜，如由Bala等(2013；Int.J.Pharm.Investig.3(2):67-76)所描述，其内容通过引用并入本文。
合适的药物组合物及其单位剂型可以包括常规比例的常规成分，其具有或不具有另外的活性化合物或原理，并且这种单位剂型可以含有与待采用的预期每日剂量范围相称的任何合适的有效量的活性成分。如本文所述的式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐可以配制用于以各种肠内、局部和/或肠胃外剂型施用。如本文所述，合适的剂型可以包括作为活性组分的式(I)的肽或式(II)的肽、其药学上可接受的盐或前述的任意组合。
如本文其他地方所指出，可能期望基于神经病理性疼痛是局部的还是泛化的来选择施用途径。例如，在神经病理性疼痛是局部的情况下，可能期望将本文公开的组合物配制用于施用至受影响的区域或至紧邻其的区域。例如，在神经病理性疼痛是在关节(例如，颈部、膝盖、肘部、肩膀或臀部)中的情况下，可以将组合物配制用于关节内施用到受影响的关节。可选地或另外地，可以将组合物配制用于施用在受影响的关节处或基本上邻近受影响的关节。作为另一个说明性实例，在神经病理性疼痛在口腔中(例如，三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)或灼口综合征)的情况下，可以将组合物配制用于经由口腔黏膜施用(例如，通过面颊和/或舌下施用)。
相反地，在神经病理性疼痛在受试者的多个解剖部位泛化或散布的情况下，如本文其他地方所描述，将组合物配制用于肠内、局部和/或肠胃外施用途径可能是方便的，目的是在受神经病理性疼痛影响的多个解剖部位分布活性剂。
在一个实施方式中，将组合物配制用于口服施用至人。在另一个实施方式中，将组合物配制用于口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将组合物配制用于口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，将组合物配制用于肠胃外施用至人。在另一个实施方式中，将组合物配制用于肠胃外施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将组合物配制用于肠胃外施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，肠胃外施用是皮下施用。
在另一个实施方式中，将组合物配制用于局部施用至人。在另一个实施方式中，将组合物配制用于局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将组合物配制用于局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，局部施用是经皮的。
在另一个实施方式中，将组合物配制为待施用至人的控释剂型。在另一个实施方式中，将组合物配制为待施用至非人受试者的控释剂型。在又另一个实施方式中，将组合物配制为待施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者的控释剂型。合适的控释剂型的说明性实例在本文其他地方描述。
为了制备式(I)和(II)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，药学上可接受的载体可以是固体或液体。固体形式制品的说明性实例包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可以是可以用作稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或封装材料的一种或多种物质。在粉剂中，载体可以是细小的固体，其与细小的活性组分混合。在片剂中，可以将活性组分与具有必要结合能力的载体以合适的比例混合并压制成所需的形状和尺寸。
在一些实施方式中，粉剂和片剂含有5％或10％至约70％的活性化合物。合适的载体的说明性实例包括碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。术语“制品”旨在包括活性化合物与封装材料的制剂，提供一种胶囊，其中具有或不具有载体的活性组分被载体包围。类似地，本文还设想了扁囊剂和锭剂。片剂、粉剂、胶囊剂、丸剂、扁囊剂和锭剂可以用作适于口服施用的固体形式。
为了制备栓剂，首先熔融低熔点蜡，比如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物，并且通过搅拌将活性组分均匀地分散在其中。然后将熔融的均匀混合物倾倒到尺寸合适的模具中，使其冷却，并由此固化。
适合于阴道施用的制剂可以以阴道栓、棉球、乳霜、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂的形式存在，除了活性成分外，其还含有本领域已知的适当的载体。
液体形式制品包括溶液、悬浮液和乳剂，例如，水或水-丙二醇溶液。例如，肠胃外注射液制品可以配制为在含水聚乙二醇溶液中的溶液。
如本文所述的式(I)和(II)的肽或其药学上可接受的盐可以配制用于肠胃外施用(例如通过注射，例如推注注射或连续输注)并且可以以单位剂型于安瓿瓶、预填充注射器、小容量输液提供或于添加有防腐剂的多剂量容器中提供。组合物可以采取比如油性或含水载体中的悬浮液、溶液或乳剂的形式，并且可以含有比如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂等的配制剂。可选地，活性化合物(一种或多种)可以是粉末形式，其通过灭菌固体的无菌分离或通过从溶液中冻干获得，在使用前用合适的载体，例如无菌、无热源的水构建。
适于口服应用的含水溶液可以通过将活性组分溶解在水中并根据需要添加合适的着色剂、调味剂、稳定剂和增稠剂来制备。
适于口服应用的含水悬浮液可以通过将细小的活性组分与粘性物质比如天然或合成胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或其他众所周知的悬浮剂一起分散在水中来制造。
本文还考虑了固体形式制品，其旨在就在使用前转化为用于口服施用的液体形式制品。这种液体形式包括溶液、悬浮液和乳剂。除了活性组分之外，这些制品还可以含有着色剂、调味剂、稳定剂、缓冲剂、人造和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。
对于局部施用至表皮，可以将如本文所述的式(I)或(II)的肽或其药学上可接受的盐配制为软膏、乳霜或洗剂、或为经皮贴剂。软膏和乳霜可以，例如，用含水或油性基质配制并添加合适的增稠剂和/或胶凝剂。洗剂可以用含水或油性基质配制，并且通常还将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。
适合于在口中局部施用的制剂包括在调味基质中，通常为蔗糖和阿拉伯胶或蓍胶中包含活性剂的锭剂；在惰性基质中比如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中包含活性成分的糖锭；以及在合适的液体载体中包含活性成分的漱口水。
通过常规方式，例如，用滴管、移液管或喷雾器，将溶液或悬浮液直接施加至鼻腔。制剂可以以单剂量或多剂量形式提供。在滴管或移液管的后一种情况下，这可以通过患者施用适当的预定体积的溶液或悬浮液来实现。在喷雾器的情况下，这可以例如借助计量雾化喷雾泵来实现。为了改善鼻腔递送和保留，可以将本发明中使用的肽用环糊精封装，或者与预期增强其在鼻黏膜中的递送和保留的药剂一起配制。
还可以借助气雾剂制剂来实现施用至呼吸道，其中活性成分与合适的推进剂比如氯氟烃(CFC)，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体一起提供在加压包装中。气雾剂还可以方便地含有表面活性剂，比如卵磷脂。可以通过提供计量阀来控制药物的剂量。
可选地或另外地，可以以干粉的形式提供活性成分，例如化合物在合适的粉末基质比如乳糖、淀粉、淀粉衍生物比如羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)中的粉末混合物。方便地，粉末载体将在鼻腔中形成凝胶。粉末组合物可以以单位剂型存在，例如在例如明胶的胶囊剂或药筒中，或可借助吸入器施用粉末的泡罩包装中。
在旨在施用至呼吸道的制剂中——包括鼻内制剂，肽通常将具有较小的粒径，例如1至10微米或更小的数量级。这种粒径可以通过本领域已知的方式，例如通过微粉化获得。
当需要时，可以采用适于使活性成分受控或持续释放的制剂，如本文其他地方所描述。
在一个实施方式中，如本文所述的药物制品优选地为单位剂型。以这种形式，将制品细分为含有适当量的活性组分的单位剂量。单位剂型可以是包装的制品，该包装含有离散量的制品，比如包装的片剂、胶囊剂、以及小瓶或安瓿瓶中粉剂。而且，单位剂型本身可以是胶囊、片剂、扁囊剂或锭剂，或者其可以是适当数量的包装形式的任何这些。
在本文公开的另一方面，提供了包括如本文所述的SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其用作药物。
在本文公开的另一方面，提供了包括如本文所述的SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其用作药物。
在一个实施方式中，将本文公开的组合物配制用于口服施用至人。在又另一个实施方式中，将本文公开的组合物配制用于口服施用至非人。在进一步的实施方式中，将本文公开的组合物配制用于口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至非人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，局部施用是经皮的。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(I)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者，其中非人受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。在一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，局部施用是经皮的。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的式(II)的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者，其中非人受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。在一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
在另一个实施方式中，将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至人。在另一个实施方式中，将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至非人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，局部施用是经皮的。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ IDNO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:2的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者，其中非人受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。在一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
在另一个实施方式中，将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于口服施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。
在另一个实施方式中，将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至非人受试者。在又另一个实施方式中，将SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于局部施用至选自猫科动物、犬科动物和马科动物的非人受试者。在一个实施方式中，局部施用是经皮的。
在另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至人受试者。在又另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ IDNO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的SEQ ID NO:7的肽或其药学上可接受的盐配制用于作为控释剂型施用至非人受试者，其中非人受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。在一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
如本文其他地方所指出，可以每天、每周、每月或其他合适的时间间隔施用数个(即，多个)分开的剂量，或者可以根据情况的紧急程度指示的，按比例减少剂量。在需要或另外地期望多个剂量的疗程的情况下，本文公开的组合物可以适当地配制用于经由所述的多个途径施用。例如，可能期望肠胃外(例如，肌肉内，静脉内；皮下等)施用第一剂量以诱导受试者的快速或其他急性的镇痛作用，接着非肠胃外施用(例如，肠内和/或局部)随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量以在急性治疗阶段之后的较长时间段内提供活性剂的持续可用性。因而，在一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量(即，作为肠胃外剂型)肠胃外施用至受试者并且配制用于在第一剂量之后(例如，作为肠内和/或局部剂型)非肠胃外施用至受试者。在一个实施方式中，肠胃外施用选自肌肉内、皮下和静脉内。在进一步的实施方式中，肠胃外施用是皮下的。
在另一个实施方式中，肠内施用是口服施用。因而，在一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量肠胃外施用至受试者并且配制用于在第一剂量之后(即，作为口服剂型)口服施用至受试者。
在另一个实施方式中，肠内施用是局部施用。因而，在一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量肠胃外施用至受试者并且配制用于在第一剂量之后(即，作为口服剂型)局部施用至受试者。在一个实施方式中，局部施用是经皮施用。
在另一个实施方式中，可能期望肠胃外(例如，肌肉内，静脉内；皮下等)施用第一剂量以诱导受试者的快速或其他急性的镇痛作用，接着施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)控释剂型，如本文其他地方所描述，以在急性治疗阶段之后的较长时间段内提供活性剂的控释。因而，在另一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量肠胃外施用至受试者并且配制作为在第一剂量之后待施用至受试者的控释剂型。在一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
还可能期望肠内(例如，口服或直肠)施用第一剂量，接着局部(例如，经皮)施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量。因而，在一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量(即，作为肠内剂型；口服或直肠)肠内施用至受试者并且配制用于在第一剂量之后(例如，作为经皮或跨黏膜剂型)局部施用至受试者。在另一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于局部施用，其选自经皮和跨黏膜施用。在进一步的实施方式中，如本文所公开的肽和组合物配制用于经皮施用。
在又另一个实施方式中，可能期望肠内(例如，口服或直肠)施用如本文所公开的肽或组合物作为第一剂量，接着作为控释剂型施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量，如本文其他地方所描述。因而，在一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量肠内施用并且配制用于作为控释剂型施用，其中控释剂型配制用于在第一剂量之后施用。在一个实施方式中，肠内剂量配制用于口服施用。在另一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
在一个实施方式中，可能期望局部(例如，口服或直肠)施用如本文所公开的肽或组合物作为第一剂量，接着作为控释剂型施用随后的(例如，第二、第三、第四、第五等)剂量，如本文其他地方所描述。因而，在一个实施方式中，将如本文所公开的肽和组合物配制用于作为第一剂量局部施用并且配制用于作为控释剂型施用，其中将控释剂型配制用于在第一局部剂量之后施用。在一个实施方式中，局部剂量配制用于经皮施用。在另一个实施方式中，控释剂型配制用于肠胃外施用。
现在将参考以下实施例描述本发明，这些实施例说明了本发明的一些优选方面。然而，应当理解，本发明的以下描述的特殊性不取代本发明的先前描述的普遍性。
实施例
使用固相合成和Fmoc保护策略通过Auspep(Victoria，Australia)合成包括SEQ IDNO:2和5的氨基酸序列的肽。
实施例1：体外电生理特性
使用具有完整背根传入的体外脊髓切片结合单细胞全细胞膜片钳电生理记录技术来评估具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的肽的电生理特性。实验制备的示意图在图1中显示。
从神经病理性疼痛的慢性神经收缩模型(Chung模型)制备脊髓切片，并且针对SEQ IDNO:2的肽进行测试。
脊髓神经结扎模型(Chung模型)由Kim和Chung(1992；Pain，50(3):355-63)首次报道，并涉及L5脊神经的单个紧密结扎。模型显示出神经病理性疼痛症状/体征的独特特征，比如：机械性异常性疼痛，机械性和热痛觉增敏以及自发性疼痛，其模仿在临床患者中观察到的症状/体征。该模型已被用作用于评估靶向神经病理性疼痛的新型化合物的疗效的“金标准”模型。
8-9周龄的成年雄性Sprague-Dawley大鼠购买自Charles River UK Ltd，其在手术时体重为220-250g。将动物以4只一组圈养(house)在12-小时光/暗循环的空调房内。食物和水可随意获得。通过将它们放置在凸起的金属网上至少40分钟，使它们适应实验环境三天。在手术前连续3天使用一系列渐变的von Frey纤毛检查基线爪缩回阈值(PWT)，并且在给药前在手术后第6至8天以及在手术后第12至14天进行重新评估。每只大鼠用混合有氧气(2L/min)的5％异氟烷麻醉，接着肌肉内(i.m.)注射氯胺酮90mg/kg加甲苯噻嗪10mg/kg。背部刮毛并且用聚维酮碘消毒。将动物放置在俯卧位置并且在覆盖L4-6水平的皮肤上做一个旁中切口。小心分离L5脊神经并且用6/0丝缝合线紧密结扎。在完全止血后，将伤口分层闭合。常规给予单个剂量的抗生素(阿莫西林，15mg/大鼠，i.p.)以便预防手术后感染。将动物放置在温度可控的恢复室内直到完全清醒，然后将其放回它们的居住笼里。
将8至12周龄的Chung模型大鼠圈养在以12小时光/暗循环的空调房内，食物和水可随意获得。使用异氟烷对大鼠进行最终麻醉并断头。迅速移出脊柱、胸腔和周围组织并且固定在冰冷(<4℃)、含高蔗糖的人工脑脊液(CSF)中，其包括：127mM蔗糖、1.9mM KCl、1.2mMKH2PO4、0.24mM CaCl2、3.9mM MgCl2、26mM NaHCO3、10mM D-葡萄糖和0.5mM抗坏血酸。进行椎板切除术，轻柔地解剖脊髓和相关的根部并从脊柱和周围组织中切取。随后用精细镊子移出硬脑膜、软脑膜和腹侧根，并将脊髓半切。小心以确保维持脊髓的背根输入。将半切的脊髓背根制品固定至组织切片器上，并且使用Leica VT1000s切片机在冰冷的(<4℃)高蔗糖aCSF中切割附连有背根的脊髓切片(400至450μm厚)。
将切片转移至含有冰冷的aCSF的小烧杯中，该aCSF具有127mM NaCl、1.9mM KCl、1.2mMKH2PO4、1.3mM MgCl2、2.4mM CaCl2、26mM NaHCO3和10mM D-葡萄糖，并且在温度控制的水浴中在20分钟时间段内迅速加热至35℃±1℃，然后随后移出并在电生理记录之前维持在室温(22℃±2℃)。在包括127mM NaCl、1.9mM KCl、1.2mM KH2PO4、1.3mM MgCl2、2.4mM CaCl2、26mM NaHCO3和10mM D-葡萄糖的aCSF中进行电生理记录。
使用Axopatch 1D和/或Multiclamp 700B放大器并且使用“blind”版本的膜片钳技术，在34-35℃下从脊髓切片的背角中的椎板I或II神经元进行全细胞记录。
当填充有细胞内溶液时，从薄壁硼硅玻璃拉出膜片移液管，其电阻在3和8MΩ之间。膜片溶液中包括生物胞素以使得能够对记录的神经元进行记录后鉴定。SEQ ID NO:2的肽(AOD；在本文中也被称为LAT8881)以10μM的浓度施加至组织浴中的记录的组织。
在刺激背根传入后，AOD9604(SEQ ID NO:2)对突触后电流的影响可在8分钟时检测到，并且在25min时几乎完全抑制了突触后电流(参见图2)。相反，人生长激素对突触后电流没有影响(数据未显示)。
在洗掉时，AOD对突触后电流的影响是至少部分可逆的，这表明AOD对神经细胞无毒。
实施例2：体内电生理特性
进行该研究以使用如上概述制备的CCI大鼠在慢性神经收缩模型中评估LAT8881(SEQID NO:2)对WDR神经元的自发活动的影响。简要地，在行为验证之后，如果需要，用1.2g/kg氨基甲酸酯(i.p.)对大鼠麻醉以便诱导，并且随后以0.1-0.5g/kg(i.v.)补足以便维持。分别对右颈动脉和颈静脉插管以监测血压并允许药物施用。通过热毯系统监测体温并将其控制在生理范围内。通过插入到左右前爪的一对不锈钢针常规监测心电图(ECG)。
对于神经瘤起源的异位放电，在左后肢的侧面做个一个切口。在解剖显微镜下，坐骨神经结扎区域下方的腓肠神经暴露，并与周围结缔组织小心分离。皮肤被缝合到金属O形环以形成池，然后该池填充温暖的矿物油以保护神经。结扎区域上方的坐骨神经被切开。然后小心地移出神经鞘。从腓肠神经的远切割端切取一小束神经细丝，并将其缠绕到单极银丝记录电极上，其中参比电极连接至附近的结缔组织。
对于DRG起源的异位放电，基本解剖和记录步骤与神经瘤起源的异位放电的记录设置相同，其中唯一的不同是坐骨神经的记录位点在结扎区域上方，在DRG下方。
为了记录来自脊髓背角的WDR神经元，进行了椎板切除术以将T11暴露于L2节段。将切开的背部皮肤夹至塑料膜以形成油池从而防止脊髓的表面变得脱水。打开暴露的脊髓上的硬脑膜。对于背角神经元记录，使用手动液压操纵器将碳纤维微电极(在1KHz时阻抗为0.4-0.8MΩ)降低到脊髓背角以记录神经元活动。所记录的神经元来自L4至L5水平的深层(距脊髓的表面约500至900μm处的椎板IV或V)。根据它们的激发(firing)方式和对关节运动的反应排除了支配肌肉纺锤体、关节受体等的本体感受神经元。使用标准电生理记录技术放大并监测神经活动，并且使用CED Spike 5软件(Cambridge Electronics Design，CED)记录在PC上。
电信号通过Digitimer AC放大器(NL104)放大，并且通过设置为50-500Hz的低通滤波器和在500至5KHz处高截止滤波器进行滤波。然后通过CED micro-1401接口将信号记录到PC并进行离线分析。
(i)WDR神经元的鉴定
先前已经报道了用于鉴定来自背角的WDR神经元的方法(Elmes et al.，2004)。简言之，绘制出后爪的周围感受野(RF)之后，使用一套机械性刺激方案来鉴定WDR神经元：首先，轻柔地刷10s；其次，将三种不同尺寸的von Frey纤毛(1g、4g、15g)，以1s开启和1s关闭施加至RF并且重复10次(两次von Frey纤毛施加之间的间隔为10s)；第三，在RF上使用一对小镊子施加10s的挤压刺激(pinch-stimulus)。典型的WDR神经元的反应将随着刺激强度的增加而增加。A.刷子(10s)2s B.von Frey纤毛(1s开启-1s关闭，10次)20s1g 4g 15g C.挤压(10s)2s D.上紧发条现象和后放电3s。
(ii)上紧发条现象和后放电的诱导
在鉴定WDR神经元之后，将一对细小的针电极插入到RF以递送电刺激。诱发C纤维反应(电刺激后潜伏90～300ms)的动作电位的阈值通过递送增加强度的1ms持续时间的单个电脉冲的来确定。一旦找到阈值，便以每5分钟一次递送强度为两倍阈值的电脉冲序列(5s中16个脉冲，1ms的持续时间)。在施用载体或化合物之前记录神经活动(自发激发和诱发的反应)持续至少20分钟，然后在注射载体或化合物后进一步记录40min。
(iii)自发活动的测量
就在电刺激之前，在载体或化合物注射之前和注射之后10、20、30、40、50、60min时，测量连续4.5min时间段内的平均自发激发频率(表示为每分钟动作电位的数量)。
(iv)上紧发条现象的测量
使用基于1999年由Svendsen等描述的方法的方案来测量上紧发条现象。简要地，上紧发条现象被计算为响应于所有16个电脉冲的神经元的诱发的动作电位的总数减去该序列中第一电脉冲诱导的动作电位的16倍。首先，计数在第一电刺激脉冲(A)之后的300ms内的动作电位的数量。其次，计数在5s(B)内由整个电脉冲序列(16个脉冲)诱导的动作电位的总数。然后如下计算上紧发条现象动作电位的数量：
(v)上紧发条现象动作电位数＝B–(A×16)
就在化合物施用(0min)之前和在化合物注射之后的每10min对上紧发条现象动作电位数进行计数。在一些情况下，在化合物施用之后，上紧发条现象被完全抑制，上紧发条现象动作电位的数量(B)甚至比对照水平(A×16)更低，这导致负读数。在这种情况下，为了便于统计分析，将上紧发条现象设置为0(完全抑制)。
(vi)后放电的测量：
在序列的最后一个电脉冲(即，第16个电脉冲)之后300ms开始的10s内记录的动作电位的总数用作该神经元的后放电程度的标记或指示。
如图3中所显示，在该慢性神经收缩模型中，LAT8881抑制了WDR神经元中的自发活动。在该模型中，LAT8881还抑制了WDR神经元的上紧发条现象(参见图4)。当静脉内施用时，与载体相比，在该慢性神经收缩模型中，LAT8881还抑制了DRG产生的放电(参见图5)。
实施例3：离体电生理特性
进行该研究以评估LAT8881(AOD9604；SEQ ID NO:2)对Chung大鼠的背角神经元中电流注射的突触后膜反应的影响。如图6中所显示，LAT8881激活内向整流钾(K)电导率，如与单独的载体(对照)相比，在-90mV附近的曲线的斜率和交点有所降低。
实施例4：施用位点处的体内电生理学
进行该研究以评估LAT8881(SEQ ID NO:2)对CCI大鼠的慢性神经收缩模型中的神经瘤起源的异位放电和背根神经节(DRG)-起源的异位放电的影响。将LAT8881通过肌肉内注射(IM)以约1mg/kg体重施用至动物。
(i)记录CCI模型大鼠中DRG起源的异位放电：
1.用氨基甲酸酯(1.2g/kg，腹腔注射进行诱导，如果需要，静脉内补充200-400mg/kg)麻醉CCI大鼠。
2.分别对右颈动脉和颈静脉进行插管以便监测血压和药物施加。
3.通过热毯系统监测体温并将其控制在生理范围内。
4.常规监测心电图(ECG)。
5.坐骨神经经由后肢上的背侧切口暴露并覆盖有温暖的矿物油。
6.将损伤区域上方的坐骨神经与周围结缔组织小心地分离并切开。
7.从坐骨神经的近切割端切取一小束神经细丝，并且缠绕到单极银丝记录电极上，其中参比电极连接至附近的结缔组织。
8.将电信号放大并用常规电生理方法记录。
9.从具有自发活动的纤维进行记录，持续至少20min作为对照，并且在化合物给药后记录40min。
10.载体是1％DMSO+99％PBS。静脉内施用载体和测试化合物。
(ii)记录神经瘤起源的异位放电：
制备通常与以上相同，但在损伤区域和DRG之间的坐骨神经部分之后，从损伤区域下方的腓肠神经进行记录。
如图7和8中所显示，LAT8881抑制DRG水平下的异位放电，但不抑制神经瘤水平下的异位放电。数据还显示了，LAT8881抑制自发活动和上紧发条现象，当仅轻微地抑制脊髓背角WDR神经元中的后放电。
实施例5：使用神经收缩模型LAT8881在体内对神经病理性疼痛的作用
进行该研究以使用Chung大鼠的神经收缩模型评估LAT8881(SEQ ID NO:2)在体内对神经病理性疼痛的镇痛作用。简要地，从Charles River UK Ltd.购买了8-9周龄的成年雄性Sprague-Dawley大鼠，手术时其重量为220-250g。
将动物以4只一组圈养在12小时光/暗循环的空调房内。食物和水可随意获得。通过将它们放置在凸起的金属网上至少40分钟，使它们适应实验环境三天。在手术前连续3天使用一系列渐变的von Frey纤毛检查基线爪缩回阈值(PWT)，并且在给药前在手术后第6至8天以及在手术后第12至14天进行重新评估。
每只大鼠用混合有氧气(2L/min)的5％异氟烷麻醉，接着肌肉内(i.m.)注射氯胺酮90mg/kg加甲苯噻嗪10mg/kg。背部刮毛并且用聚维酮碘消毒。将动物放置在俯卧位置并且在覆盖L4-6水平的皮肤上做一个旁中切口。小心分离L5脊神经并且用6/0丝缝合线紧密结扎。在完全止血后，将伤口分层闭合。常规给予单个剂量的抗生素(阿莫西林，15mg/大鼠，i.p.)以便预防手术后感染。将动物放置在温度可控的恢复室内直到完全清醒，然后将其放回它们的居住笼里。
将载体(PBS中1％DMSO)和LAT8881(AOD9604，GL449；由Lateral Pharma Pty Ltd提供)肌肉内(i.m.)施用到损伤部位对侧的腿中。通过第二名实验者进行给药。具有已证实的神经病理性疼痛状态的大鼠随机分成5个实验组：1ml/kg载体，0.1、0.5、1和5mg/kg LAT8881。
每组有8只动物。在测试之前，将动物放置在升高的金属网上的单独的有机玻璃盒上至少40分钟。从最低力(约1g)的细丝开始，将每个细丝垂直于爪腹面的中心施加直到稍微弯曲6秒。如果动物在刺激后将爪缩回或抬起，则使用具有略微低于所测试的力的纤毛。如果未观察到反应，则测试具有略微更高的力的纤毛。诱导可靠反应(5次试验中3次阳性)所需的最低量的力记录为PWT的值。
药物测试在手术后第12至14天进行。在药物或载体施用之前、在药物或载体施用之后的1、2和4小时评估PWT。通过在两个相邻的测试时间之间(约30-60min)将它们放回它们的居住笼中，来使动物休息。通过在同侧肢体中以约0.1mg/kg体重至约5mg/kg体重的剂量单次肌肉内注射(IM)来施用LAT8881。
如图9中所显示，在施用LAT8881的动物中，LAT8881导致爪缩回阈值的显著的剂量依赖性的改善。在施用LAT8881的1小时内观察到该作用，并且该作用维持至少4小时。在该研究中，LAT8881对于对侧爪没有影响。
实施例6：使用神经收缩模型LAT9991在体内对神经病理性疼痛的作用
如以上实施例5中所描述，进行该研究以使用Chung大鼠的神经收缩模型评估LAT9991(SEQ ID NO:4)在体内对神经病理性疼痛的镇痛作用。通过在同侧肢体内以约0.1mg/kg体重至约5mg/kg体重的剂量单次肌肉内注射(IM)来施用LAT9991。
如图10中所显示，在施用LAT9991的动物中，LAT9991导致爪缩回阈值的显著的剂量依赖性的改善，其与使用LAT8881所见的作用相当(参见以上实施例5)。在施用1小时内观察到了LAT9991的该作用，并且该作用维持至少4小时。在该研究中，LAT9991对于对侧爪没有影响。数据还显示了5mg/kg体重的LAT9991对神经病理性疼痛的镇痛作用与100mg/kg体重的加巴喷丁所见的镇痛作用相当。
实施例7：使用神经收缩模型口服施用LAT8881在体内对神经病理性疼痛的作用
除了以2ml/kg口服施用载体(PBS中的2％DMSO)、LAT8881(AOD9604，GL449)和LAT9991之外，如以上实施例5中所描述，进行该研究以使用Chung大鼠的神经收缩模型评估口服施用LAT8881(SEQ ID NO:2)在体内对神经病理性疼痛的镇痛作用。将从Actavis,UK(LotNo.GJ29)获得的加巴喷丁以在生理盐水中100mg/2ml/kg口服施用作为阳性对照。通过第二名实验者进行给药。
如图11中所显示，口服施用LAT8881导致爪缩回阈值的显著的剂量依赖性的改善。在施用LAT8881的1小时内观察到了该作用，并且该作用维持至少4小时。数据显示了，以2mg/kg体重口服和以5mg/kg体重口服LAT8881对神经病理性疼痛的镇痛作用与以100mg/kg体重口服加巴喷丁所见的镇痛作用相当。在该研究中，对于对侧爪反应没有发现作用。从这些数据中选择5mg/kg体重的剂量用于进一步的体内研究。
实施例8：使用神经收缩模型口服施用LAT9991F在体内对神经病理性疼痛的作用
如以上实施例5所述，进行该研究以使用Chung大鼠的神经收缩模型评估口服施用LAT9991F(SEQ ID NO:5)在体内对神经病理性疼痛的镇痛作用。简要地，以约1mg/kg体重至约5mg/kg体重的剂量来口服施用LAT9991F。
如图12中所显示，口服施用LAT9991F导致爪缩回阈值的显著的剂量依赖性的改善，其与使用LAT8881所见的作用相当(见以上实施例7)。在施用LAT9991F的1小时内观察到了该作用，并且该作用维持至少4小时。数据显示了，5mg/kg体重PO的LAT9991F的镇痛作用与100mg/kg体重PO的加巴喷丁所见的镇痛作用相当。在该研究中，对于对侧爪反应没有发现作用。
实施例9：口服施用LAT8881对糖尿病性神经病的作用
进行该研究以评估口服施用LAT8881(SEQ ID NO:2)对链脲佐菌素诱导的糖尿病性神经病的神经病理性疼痛的镇痛作用。简要地，对于体重为220-250g的成年雄性Sprague-Dawley大鼠给予腹膜内注射链脲佐菌素(STZ)50mg/kg以诱导糖尿病。在注射后7天使用即时葡萄糖监测盒Accu plus-Chek检查血液葡萄糖水平。如果葡萄糖水平低于14mmol/L，将给予它们STZ的第二次注射。如果在STZ的两次注射后动物没有发展糖尿病，则将它们从研究中排除。葡萄糖水平高于14mmol/L以及PWT≤4g(两个后肢的平均值)的大鼠用于化合物测试。如使用Von Frey细丝以确定爪缩回阈值(PWT)所测量的，糖尿病大鼠发展出以机械性异常性疼痛为特征的神经病理性疼痛。将LAT8881以约5mg/kg体重的剂量口服施用至动物。
如图13中所显示，如通过改善的爪缩回阈值所证明，口服施用LAT8881在该模型中具有镇痛作用。这种镇痛作用在施用1小时内明显，并且持续至少4小时。
实施例10：口服施用LAT8881对奥沙利铂诱导的化学疗法后神经病模型的作用
进行该研究以评估口服施用LAT8881(SEQ ID NO:2)对链脲佐菌素诱导的糖尿病性神经病中神经病理性疼痛的镇痛作用。简要地，以约5mg/kg体重的剂量口服施用LAT8881。简要地，用混合有氧气(2L/min)的3％异氟烷麻醉大鼠。通过尾静脉以4mg/kg每周两次静脉内注射奥沙利铂。使用施加至后爪以触发缩回反应(爪缩回阈值，PWT)的一系列渐变的vonFrey纤毛来监测以显著的机械性异常性疼痛为特征的神经病理性疼痛的发展。仅选择具有显著的机械性异常性疼痛(PWT≤4.0g)的那些大鼠用于进行进一步药物测试。
如图14中所显示，当与载体相比时，口服施用LAT8881具有显著的镇痛作用，如由施用LAT8881的1小时内改善的爪缩回阈值所证明。该镇痛作用持续至少4小时。
实施例11：口服施用LAT8881对利血平诱导的纤维肌痛模型的作用
进行该研究以评估口服施用LAT8881(SEQ ID NO:2)对利血平诱导的纤维肌痛模型(纤维肌痛综合征)的神经病理性疼痛的镇痛作用。简要地，连续三天对体重为220-250g的成年雄性Sprague-Dawley大鼠以1mg/kg皮下注射给予利血平。在最后剂量的利血平之后的5天，该模型用于药物测试。以约5mg/kg体重的剂量口服施用LAT8881。
图15中所显示，与载体相比，口服施用LAT8881具有显著的镇痛作用，如由在施用LAT8881的1小时内改善的爪缩回阈值所证明。这种镇痛作用持续至少6小时。
实施例12：口服施用LAT8881对伤害性疼痛的作用
进行该研究以使用完全弗氏佐剂(CFA)诱导的炎症性疼痛的动物模型评估口服施用LAT8881(SEQ ID NO：2)对伤害性疼痛的镇痛作用。简要地，用混合有97％氧气的3％异氟烷麻醉大鼠。向左爪注射盐水中的0.05ml CFA乳剂(F5881，Sigma-Aldrich)(CFA∶盐水＝1∶1，vol./vol.)。在CFA注射后，将动物放回其居住笼中。进行定期观察以监测注射后动物的病况。
如图16中所显示，如通过爪缩回阈值所确定，以所测试的所有剂量口服施用LAT8881对CFA诱导的伤害性疼痛没有显著的镇痛作用。这与吗啡相反，如所预期的，吗啡在施用后的1和2小时对伤害性疼痛具有显著的镇痛作用。
实施例13：人和大鼠全血样品中LAT8881的离体代谢
进行该研究以评估LAT8881(SEQ ID NO：2)在人和大鼠全血中的离体代谢。将人或大鼠血液收集到K2EDTA管中，并且将大约2.94mL的血液转移到聚丙烯管中并保存在37℃的水浴中。然后向血液样品中掺入大约60μL的20mg/mL的LAT8881溶液(血液样品中LAT8881的最终浓度为大约400ng/mL)。在指定的时间，将大约300μL的掺入的血液样品转移到含有30μL的10X蛋白酶抑制剂混合物(Sigma Aldrich；产品号P2714)的小瓶，充分混合并在4℃下离心。然后收集血浆部分，将其转移到聚丙烯管并在-80℃下储存。
将每个血浆样品的重复的50μL等分试样掺入20μL内标物的混合物(标记的LAT8881/氘代的LAT9991F/氘代的LAT9998；CRSVEGSC(SEQ ID NO：11))，并且在1500rpm下与200μL的乙腈涡旋混合5min。然后，将所得的混合物在14000rpm下离心5min，并将上清液在37℃下在氮气流下蒸发至干燥。将残留物在150μL的重构溶液中重构，并将大约150μL的重构样品转移至96孔板中以便注射到LC-MS系统中。
为了分析LAT8881和LAT9991F，将每个血浆样品的5μL等分试样注射到ShimadzuNexera UPLC系统，其装配有Phenomenex Kinetex C18，2.6μm，
Figure BDA0002670584780000371
50x2.1mm。流动相为(a)具有0.1％甲酸的5％乙腈/水，和(b)具有0.1％甲酸的95％乙腈/水。流动相流速为0.4mL/min，并且采用梯度洗脱，如以下表1中所总结的。使用质谱分析洗脱的峰。
表1.HPLC梯度
时间(min) 流动相B(％)
0.1 0
3.0 25
3.1 100
3.6 100
3.7 0
5.0 0
为了分析LAT9998(SEQ ID NO：11)，将每个血浆样品的5μL等分试样注射到ShimadzuNexera UPLC系统，其装配有Phenomenex Aeris肽XB-C18，3.6μm，150×2.1mm。流动相为(a)具有0.1％甲酸的5％乙腈/水，和(b)具有0.1％甲酸的95％乙腈/水。流动相流速为0.35mL/min，并且采用梯度洗脱，如以下表2中所总结的。使用质谱分析洗脱的峰。
表2.HPLC梯度
时间(min) 流动相B(％)
2.0 0
2.1 100
3.5 100
3.6 0
4.5 0
使用具有正模式下的ESI的AB Sciex QTrap 5500质谱仪分析样品。在5500V下使用IonSpray(IS)进行MRM分析并且Curtain Gas(CUR)设置为20。对每种分析物的质量过滤器设置进行优化并总结在以下表3中。监测了多个MRM转换(transition)以确保观察到的色谱峰来自标称化合物。结果报告为分析物峰面积比(归一化与内标峰面积之比)。
表3：质量过滤器设置
Figure BDA0002670584780000381
结果
人和大鼠血液中LAT8881和LAT9991F相对于内标值的峰面积比在图17和18中显示。人和大鼠血液中LAT9998(CRSVEGSCG；SEQ ID NO：11)相对于内标值的峰面积比在以下表5中显示：
表5.掺入LAT8881的人和大鼠血液中LAT9998的检测
Figure BDA0002670584780000391
结果显示，LAT8881在人和大鼠血液中的离体半衰期为约3-6分钟，而LAT9991F具有超过60分钟的基本上更长的半衰期。相反，代谢物LAT9998在人和大鼠血液中似乎仅为短暂的存在。
实施例14：使用神经收缩模型口服施用LAT9991在体内对神经病理性疼痛的作用
如以上实施例5所描述，进行该研究以使用Chung大鼠的神经收缩模型评估口服施用LAT9991(SEQ ID NO:4)在体内对神经病理性疼痛的镇痛作用。简要地，以约1mg/kg体重、2mg/kg体重和5mg/kg体重的剂量口服施用LAT9991。
如图19中所显示，口服施用LAT9991导致爪缩回阈值的显著的剂量依赖性的改善，其与使用LAT8881所见的作用相当(参见以上实施例7)。在施用LAT9991的1小时内观察到了这种作用，并且这种作用维持了至少4小时。数据显示，以5mg/kg体重口服施用的LAT9991的镇痛作用与以100mg/kg体重口服施用加巴喷丁所见的镇痛作用相当。在该研究中，对于对侧爪反应没有发现作用。
实施例15：LATc9991F的体外电生理特性
进行该研究以评估LATc9991F(SEQ ID NO:10)对来自具有确认的神经病理性疼痛的Chung模型大鼠的脊髓切片上的自发电活动的作用。LATc9991F是LAT9991F的非人变体，其源自人生长激素的猫科动物、犬科动物和马科动物变体，如WO 2013/082667中所描述。
简要地，由具有确认的神经病理性疼痛症状的Chung模型大鼠制备脊髓切片，并且如实施例1中测量自发电活动。如图20中所显示，在添加LATc9991F之前容易观察到脊髓中神经细胞的自发电活动(在记录中向上偏转)，其为神经病理性疼痛状态的典型特征。在将LATc9991F添加至切片的2分钟内，该电活动被LATc9991F抑制。该结果与这种神经病理性疼痛的啮齿动物模型中镇痛作用的机理一致。
讨论
以上实施例显示了LAT8881(AOD9604；SEQ ID NO:2)能够治疗神经病理性疼痛，对伤害性疼痛的镇痛作用很小或没有可辨别的镇痛作用。因而，在优选不同时治疗伤害性疼痛的情况下，该肽可以有利地用于治疗神经病理性疼痛。本文呈现的数据进一步显示了SEQ IDNO:4和5(分别为LAT9991和LAT9991F)保留了与LAT8881等效或基本上等效的生物学活性。因而，通过施用LAT8881的代谢物(例如，SEQ ID NO:4和5)，也可以实现由归因于LAT8881的有利镇痛特性所带来的好处。实施例13中的数据进一步指示，LAT8881具有显著更短的离体半衰期，并且其代谢物LAT9998(SEQ ID NO:11)在1小时后在人和大鼠血液中几乎检测不到。这些数据与实施例14中的体内数据一致，其显示LAT8881的半衰期远低于1分钟。这些发现首次表明，LAT8881的活性源自其代谢物，而不是源自亲本分子。
序列表
<110> 单侧IP私人有限公司
<120> 肽及其用途
<130> 35521381
<150> AU 2018900117
<151> 2018-01-15
<160> 11
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 11
<212> PRT
<213> 智人
<220>
<221> Xaa
<222> (1)..(1)
<223> Xaa1 选自
Tyr-Leu-Arg-Val-Met-Lys, Leu-Arg-Val-Met-Lys, Arg-Val-Met-Lys,
Val-Met-Lys, Met-Lys和 Lys, 或者 Xaa1不存在
<220>
<221> Xaa
<222> (11)..(11)
<223> Xaa11是Phe或者Xaa11不存在
<400> 1
Xaa Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Xaa
1 5 10
<210> 2
<211> 16
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
Tyr Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe
1 5 10 15
<210> 3
<211> 15
<212> PRT
<213> 智人
<400> 3
Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe
1 5 10 15
<210> 4
<211> 9
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly
1 5
<210> 5
<211> 10
<212> PRT
<213> 智人
<400> 5
Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe
1 5 10
<210> 6
<211> 11
<212> PRT
<213> 狼
<220>
<221> Xaa
<222> (1)..(1)
<223> Xaa1选自
Tyr-Leu-Arg-Val-Met-Lys, Leu-Arg-Val-Met-Lys, Arg-Val-Met-Lys,
Val-Met-Lys, Met-Lys，和Lys, 或者Xaa1不存在
<220>
<221> Xaa
<222> (11)..(11)
<223> Xaa11选自Ala and Ala-Phe
或者Xaa11不存在
<400> 6
Xaa Cys Arg Arg Phe Val Glu Ser Ser Cys Xaa
1 5 10
<210> 7
<211> 17
<212> PRT
<213> 狼
<400> 7
Tyr Leu Arg Val Met Lys Cys Arg Arg Phe Val Glu Ser Ser Cys Ala
1 5 10 15
Phe
<210> 8
<211> 16
<212> PRT
<213> 狼
<400> 8
Leu Arg Val Met Lys Cys Arg Arg Phe Val Glu Ser Ser Cys Ala Phe
1 5 10 15
<210> 9
<211> 11
<212> PRT
<213> 狼
<400> 9
Cys Arg Arg Phe Val Glu Ser Ser Cys Ala Phe
1 5 10
<210> 10
<211> 10
<212> PRT
<213> 狼
<400> 10
Cys Arg Arg Phe Val Glu Ser Ser Cys Ala
1 5 10
<210> 11
<211> 8
<212> PRT
<213> 智人
<400> 11
Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys
1 5

Claims (90)

1.一种治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，所述方法包括将治疗有效量的式(I)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)或者R2不存在。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
3.根据权利要求2所述的方法，其中所述肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。
4.根据权利要求2所述的方法，其中所述肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。
5.根据权利要求2所述的方法，其中所述肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻所述受试者的神经病理性疼痛。
7.权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。
8.权利要求1至7中任一项中所述的方法，其中所述神经病理性疼痛选自糖尿病性神经病；Herpes Zoster(带状疱疹)相关的神经病；纤维肌痛；多发性硬化、中风、脊髓损伤；慢性手术后疼痛、幻肢痛、帕金森病；尿毒症相关的神经病；淀粉样变性神经病；HIV感觉神经病；遗传性运动和感觉神经病(HMSN)；遗传性感觉神经病(HSN)；遗传性感觉和自主神经病；遗传性神经病伴溃疡致残；呋喃妥因神经病；腊肠样神经病；营养缺乏引起的神经病、肾衰竭引起的神经病、三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)、灼口综合征、复杂区域性疼痛综合征、重复性劳损、药物引起的周围神经病和与感染相关的周围神经病。
9.权利要求1中8中任一项所述的方法，进一步包括将能够减轻所述受试者的疼痛的治疗有效量的第二药剂施用至所述受试者，其中所述第二药剂不是所述式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
10.权利要求9所述的方法，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
11.一种包括式(I)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗受试者的神经病理性疼痛：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在。
12.根据权利要求11使用的所述组合物，其中所述肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ IDNO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ IDNO:5)。
13.根据权利要求12使用的所述组合物，其中所述肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。
14.根据权利要求12使用的所述组合物，其中所述肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。
15.根据权利要求12使用的所述组合物，其中所述肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
16.根据权利要求11至15中任一项使用的所述组合物，其中所述肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量存在，当施用至受试者时，其在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻所述受试者的神经病理性疼痛。
17.根据权利要求11至16中任一项使用的所述组合物，其中所述受试者是人。
18.根据权利要求11至17中任一项使用的所述组合物，其中所述神经病理性疼痛选自糖尿病性神经病；Herpes Zoster(带状疱疹)相关的神经病；纤维肌痛；多发性硬化、中风、脊髓损伤；慢性手术后疼痛、幻肢痛、帕金森病；尿毒症相关的神经病；淀粉样变性神经病；HIV感觉神经病；遗传性运动和感觉神经病(HMSN)；遗传性感觉神经病(HSN)；遗传性感觉和自主神经病；遗传性神经病伴溃疡致残；呋喃妥因神经病；腊肠样神经病；营养缺乏引起的神经病、肾衰竭引起的神经病、三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)、灼口综合征、复杂区域性疼痛综合征、重复性劳损、药物引起的周围神经病和与感染相关的周围神经病。
19.根据权利要求10至18中任一项使用的所述组合物，进一步包括能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂，其中所述第二药剂不是所述式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
20.根据权利要求19使用的所述组合物，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
21.式(I)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在。
22.权利要求21的用途，其中所述肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
23.权利要求22的用途，其中所述肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。
24.权利要求22的用途，其中所述肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。
25.权利要求22的用途，其中所述肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
26.权利要求21至25中任一项的用途，其中将所述肽或其药学上可接受的盐配制用于以治疗有效量施用至所述受试者，所述治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻所述受试者的神经病理性疼痛。
27.权利要求21至26中任一项的用途，其中所述受试者是人。
28.权利要求21至27中任一项的用途，其中所述神经病理性疼痛选自糖尿病性神经病；Herpes Zoster(带状疱疹)相关的神经病；纤维肌痛；多发性硬化、中风、脊髓损伤；慢性手术后疼痛、幻肢痛、帕金森病；尿毒症相关的神经病；淀粉样变性神经病；HIV感觉神经病；遗传性运动和感觉神经病(HMSN)；遗传性感觉神经病(HSN)；遗传性感觉和自主神经病；遗传性神经病伴溃疡致残；呋喃妥因神经病；腊肠样神经病；营养缺乏引起的神经病、肾衰竭引起的神经病、三叉神经神经病理性疼痛、非典型牙痛(幻齿痛)、灼口综合征、复杂区域性疼痛综合征、重复性劳损、药物引起的周围神经病和与感染相关的周围神经病。
29.权利要求21至28中任一项的用途，其中所述肽配制用于与能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂一起顺序地或组合地施用，其中所述第二药剂不是所述式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
30.权利要求29的用途，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
31.一种药物组合物，其包括：
(i)式(I)的肽或其药学上可接受的盐：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在，和
(ii)能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂，其中所述第二药剂不是所述式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
32.权利要求31所述的组合物，其中所述肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
33.权利要求32所述的组合物，其中所述肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。
34.权利要求32所述的组合物，其中所述肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。
35.权利要求32所述的组合物，其中所述肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
36.权利要求31至35中任一项所述的组合物，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
37.一种包括式(I)的肽或其药学上可接受的盐的镇痛组合物：
R1-CRSVEGSCG-R2(I)(SEQ ID NO:1)
其中
R1选自YLRIVQ、LRIVQ、RIVQ、IVQ、VQ和Q，或者R1不存在；并且
R2是F(苯丙氨酸)，或者R2不存在。
38.权利要求37所述的组合物，其中所述肽选自YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)、LRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:3)、CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)和CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
39.权利要求38所述的组合物，其中所述肽是YLRIVQCRSVEGSCGF(SEQ ID NO:2)。
40.权利要求38所述的组合物，其中所述肽是CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)。
41.权利要求38所述的组合物，其中所述肽是CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)。
42.权利要求37至41中任一项所述的组合物，进一步包括能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂，其中所述第二药剂不是所述式(I)的肽或其药学上可接受的盐。
43.权利要求42所述的组合物，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
44.一种包括治疗有效量的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其中所述肽由氨基酸序列CRSVEGSCG(SEQ ID NO:4)或氨基酸序列CRSVEGSCGF(SEQ ID NO:5)组成。
45.权利要求44所述的组合物，进一步包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
46.权利要求44或权利要求45所述的组合物，其配制用于口服施用。
47.一种治疗受试者的病况的方法，所述的方法包括将治疗有效量的权利要求44至46中任一项所述的组合物施用至受试者，其中所述病况选自肌肉减少症，糖耐量减低，糖尿病，肥胖症，代谢性疾病和肥胖症相关的病况，神经病理性疼痛，骨关节炎，肌肉紊乱，消耗性疾病，恶病质，厌食症，艾滋病消耗综合征，肌营养不良，神经肌肉疾病，运动神经元疾病，神经肌肉接头疾病，炎性肌病，烧伤，损伤或外伤，与LDL胆固醇升高相关的病况，与软骨细胞、蛋白多糖或胶原的生成或品质受损相关的病况，与软骨组织形成或品质受损相关的病况，与肌肉、韧带或肌腱质量、形式或功能受损相关的病况，与影响肌肉或结缔组织的炎症、外伤或遗传异常相关的病况和骨骼疾病。
48.一种包括SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其用作药物。
49.一种治疗受试者的神经病理性疼痛的方法，所述方法包括将治疗有效量的式(II)的肽或其药学上可接受的盐施用至受试者：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
50.权利要求49所述的方法，其中所述肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
51.权利要求50所述的方法，其中所述肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。
52.权利要求50所述的方法，其中所述肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。
53.权利要求50所述的方法，其中所述肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
54.权利要求49至53中任一项所述的方法，其中所述治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻所述受试者的神经病理性疼痛。
55.权利要求49至54中任一项所述的方法，其中所述受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。
56.权利要求49至55中任一项所述的方法，进一步包括将能够减轻所述受试者的疼痛的治疗有效量的第二药剂施用至所述受试者，其中所述第二药剂不是所述式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
57.权利要求56所述的方法，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
58.一种包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗受试者的神经病理性疼痛：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
59.根据权利要求58使用的所述组合物，其中所述肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ IDNO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQID NO:10)。
60.根据权利要求59使用的所述组合物，其中所述肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ IDNO:7)。
61.根据权利要求59使用的所述组合物，其中所述肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9).
62.根据权利要求59使用的所述组合物，其中所述肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
63.根据权利要求58至62中任一项使用的所述组合物，其中所述肽或其药学上可接受的盐以治疗有效量存在，当施用至受试者时，其在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻所述受试者的神经病理性疼痛。
64.根据权利要求58至63中任一项使用的所述组合物，其中所述受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。
65.根据权利要求58至64中任一项使用的所述组合物，进一步包括能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂，其中所述第二药剂不是所述式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
66.根据权利要求65使用的所述组合物，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
67.一种包括SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的肽或其药学上可接受的盐的组合物，其用作药物。
68.式(II)的肽或其药学上可接受的盐在制造用于治疗受试者的神经病理性疼痛的药物中的用途：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
69.权利要求68的用途，其中所述肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
70.权利要求69的用途，其中所述肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。
71.权利要求69的用途，其中所述肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。
72.权利要求69的用途，其中所述肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
73.权利要求68至72中任一项的用途，其中将所述肽或其药学上可接受的盐配制用于以治疗有效量施用至所述受试者，所述治疗有效量在不存在对伤害性疼痛的治疗有效的镇痛作用的情况下，减轻所述受试者的神经病理性疼痛。
74.权利要求68至73中任一项的用途，其中所述受试者选自猫科动物、犬科动物和马科动物。
75.权利要求68至74中任一项的用途，其中所述肽配制用于与能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂一起顺序地或组合地施用，其中所述第二药剂不是所述式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
76.权利要求75的用途，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
77.一种药物组合物，其包括：
(i)式(II)的肽或其药学上可接受的盐：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在，和
(ii)能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂，其中所述第二药剂不是所述式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
78.权利要求77所述的组合物，其中所述肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
79.权利要求78所述的组合物，其中所述肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。
80.权利要求78所述的组合物，其中所述肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。
81.权利要求78所述的组合物，其中所述肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
82.权利要求77至81中任一项所述的组合物，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
83.一种包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的镇痛组合物：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或者R2不存在。
84.权利要求83所述的组合物，其中所述肽选自YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)、LRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:8)、CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)和CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
85.权利要求84所述的组合物，其中所述肽是YLRVMKCRRFVESSCAF(SEQ ID NO:7)。
86.权利要求84所述的组合物，其中所述肽是CRRFVESSCAF(SEQ ID NO:9)。
87.权利要求84所述的组合物，其中所述肽是CRRFVESSCA(SEQ ID NO:10)。
88.权利要求83至87中任一项所述的组合物，进一步包括能够减轻所述受试者的疼痛的第二药剂，其中所述第二药剂不是所述式(II)的肽或其药学上可接受的盐。
89.权利要求88所述的组合物，其中所述第二药剂能够减轻所述受试者的伤害性疼痛。
90.一种治疗受试者的病况的方法，所述方法包括将治疗有效量的包括式(II)的肽或其药学上可接受的盐的组合物施用至受试者：
R1-CRRFVESSC-R2(II)(SEQ ID NO:6)
其中
R1选自YLRVMK、LRVMK、RVMK、VMK、MK和K，或者R1不存在；并且
R2选自A(丙氨酸)和AF(丙氨酸-苯丙氨酸)，或R2不存在，和
其中所述病况选自肌肉减少症，糖耐量减低，糖尿病，肥胖症，代谢性疾病和肥胖症相关的病况，神经病理性疼痛，骨关节炎，肌肉紊乱，消耗性疾病，恶病质，厌食症，艾滋病消耗综合征，肌营养不良，神经肌肉疾病，运动神经元疾病，神经肌肉接头疾病，炎性肌病，烧伤，损伤或外伤，与LDL胆固醇升高相关的病况，与软骨细胞、蛋白多糖或胶原的生成或品质受损相关的病况，与软骨组织形成或品质受损相关的病况，与肌肉、韧带或肌腱质量、形式或功能受损相关的病况，与影响肌肉或结缔组织的炎症、外伤或遗传异常相关的病况和骨骼疾病。
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