CN112156134A - 大叶蒟提取物用于制备透明质酸酶抑制剂的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了大叶蒟提取物用作透明质酸酶抑制剂的用途。体外酶活试验结果表明:大叶蒟提取物对透明质酸酶的活性具有一定的抑制作用,有望作为抗过敏药物的活性成分或作为添加剂用于美容化妆品,以维持机体内透明质酸的平衡和缓解超敏反应。
Description
技术领域
本发明涉及大叶蒟提取物的新用途,尤其是用作透明质酸酶抑制剂的新用途。
背景技术
大叶蒟(Piper laetispicum C.DC.)为胡椒科胡椒属植物,别名小肠风、野胡椒、山胡椒,性味辛;温。大叶蒟是中国特有的物种,具有活血消肿止痛的功效,民间常用于跌打损伤、瘀血肿痛的治疗。大叶蒟提取物指的是大叶蒟的叶和根茎的水或乙醇提取物,目前还有很多文献报导了大叶蒟提取物具有抗抑郁的药理活性,但是到目前为止还没有用于透明质酸酶抑制剂及其相关用途的报道。
透明质酸酶是透明质酸的特异性裂解酶,用于分解透明质酸,而透明质酸在人体内发挥许多重要作用,如调控细胞粘附、器官形成、创伤愈合、肿瘤发生和血管形成等,抑制透明质酸酶的活性可使透明质酸不被分解,从而维持正常的生理功能。其中已被公认的是能维持皮肤的弹性和保湿性,防止皮肤皱纹、粗涩,因此透明质酸是许多美容润肤化妆品中的添加剂,通过抑制透明质酸酶的活性,有利于维持机体内透明质酸的平衡,从而起到美容作用。另外,透明质酸酶也是I型超敏反应的重要参与者,与过敏有强相关性,研究表明许多抗过敏药物都有很强的抑制透明质酸酶活性的作用,因此透明质酸酶抑制剂对过敏反应具有缓解和改善作用,可用作抗敏药物或护肤品中的添加剂。
发明内容
本发明的目的是提供大叶蒟提取物用作透明质酸酶抑制剂的新用途。
体外酶活试验结果表明:大叶蒟提取物对透明质酸酶的活性具有显著的抑制作用,其中,乙醇提取物的抑制活性高于水提取物,60%乙醇提取物的抑制活性最高。
大叶蒟提取物可用于制备抗过敏药物,用于治疗或预防过敏性疾病,这些过敏性疾病包括过敏性哮喘、过敏性鼻炎、过敏性皮肤病等。
大叶蒟提取物还可用于制备美容化妆品,用于维持皮肤水分,增加皮肤弹性。
在制备抗过敏药物时,可以将大叶蒟提取物单独作为活性成分,或者与其它抗过敏药物共同作为活性成分以进一步提高疗效。
在制备美容化妆品时,可以将大叶蒟提取物单独作为活性成分,或者与其它化妆品原料如马齿苋提取物、芦荟提取物等共同作为活性成分以进一步提高美容效果。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行详细地说明。
实施例1体外抑制试验
1.试验材料:
取大叶蒟的叶和根茎,分别用水、20%、40%、60%、80%乙醇溶液(所述浓度均为体积浓度)加热提取,将提取液浓缩后干燥,得到大叶蒟水和不同浓度乙醇的提取物。将各提取物分别用水溶解,制成浓度为2mg/mL的样品溶液。
500U/mL透明质酸酶溶液;pH=5.4醋酸缓冲液;0.5mg/mL的透明质酸钠溶液;均现配现用。
2.试验方法:
采用Elson-Morgan法进行测定,1号试管中加入0.5ml样品溶液和0.5ml透明质酸酶溶液;2号试管中加入0.5ml样品溶液和0.5ml醋酸缓冲液;3号试管中加入0.5ml蒸馏水和0.5ml透明质酸酶溶液;4号试管中加入0.5ml蒸馏水和0.5ml醋酸缓冲液,37℃保温20min;1、3号试管中加入0.5mL透明质酸钠溶液,2、4号试管中加入0.5ml醋酸缓冲液,37℃保温40min;常温放置10min,加入0.5mL乙酰丙酮溶液(3.5mL乙酰丙酮溶于50ml 0.1mol/L碳酸钠溶液中)、0.1mL NaOH溶液(5mol/L)和0.5mL蒸馏水,放入沸水浴中加热15min后立即用冰水进行冷却10min;室温放置10min后加入1mL P-DAB显色剂(0.8g DBMA与15mL浓HCl以及无水乙醇混合均匀);充分震荡后,加入无水乙醇3.5mL,室温放置30min,显色,于530nm处分别测定1、2、3、4号四支试管的吸光度A1、A2、A3、A4,按下式计算透明质酸酶的抑制率。
透明质酸酶抑制率=【(A3-A4)-(A1-A2)】/(A3-A4)×100%
A1、A2、A3、A4分别为1、2、3、4号试管中溶液的OD值。
3.试验结果:
各提取物对透明质酸酶的抑制率结果见表1。
表1 透明质酸酶的抑制率
样品名称 | 抑制率(%) |
水提取物 | 33.7 |
20%乙醇提取物 | 47.3 |
40%乙醇提取物 | 58.9 |
60%乙醇提取物 | 71.6 |
80%乙醇提取物 | 55.2 |
从以上结果可以看出,大叶蒟提取物对透明质酸酶的活性具有一定的抑制作用,其中,乙醇提取物的抑制率高于水提取物,60%乙醇提取物的抑制率最高。大叶蒟提取物有望作为抗过敏药物的活性成分或作为添加剂用于美容化妆品,以维持机体内透明质酸的平衡和缓解超敏反应。
实施例2美容功效评价
试验样品:将大叶蒟60%醇提取物用水溶解,制成浓度为5%的样品溶液;
根据《化妆品保湿功效评价指南》(QB/T4256—2011)进行实验。采用电容法测定人体皮肤角质层的水分含量,由于水与其它物质的介电常数存在显著差异,皮肤角质层水分含量的不同,可以通过测得的皮肤的电容参数来代表皮肤水分含量。
实验共筛选受试者8名,年龄21~39岁之间,均为女性受试者。所有受试者均无免疫缺陷或皮肤病史,受试部位未接受过皮肤治疗,未使用药物干预,受试部位提前三天停止使用任何化妆品或外用药品。
实验开始前受试者清洁双臂,面巾纸擦拭干净后于受试者双手前臂内侧做测量区域标记。正式测试前,受试者在温度为22℃,湿度为40-50%的房间内静坐2Omin,禁水。实验中,受试者左右手臂内侧均标记3cm×3cm多个试验区域,区域间隔1cm。测量各区域的初始值后,将试验样品均匀涂布于试验区内,按5mg提取物/cm2的用量进行单次涂布,受试区域和空白区域(不进行任何处理)均随机分布。分别在涂抹后的2h、4h和8h用皮肤水分测定仪对受试区域和空白区域测定,每个区域平行测定5次,计算保湿率。
保湿率(%)=1-(初始测量值-实测值)/初始测量值×100%
结果见表2。
表2 人体保湿率测试结果(%,n=8)
2h保湿率 | 4h保湿率 | 8h保湿率 | |
待测区 | 92.2±24.1 | 83.5±17.8 | 72.7±19.4 |
空白区 | 73.3±22.6 | 66.5±16.3 | 43.1±12.0 |
从以上结果可以看出,随着测定时间的延长,各区域的皮肤水分值均有所下降,与空白区相比,涂抹大叶蒟提取物的待测区水分值更高,且各时间点的保湿率均具有显著性差异(P<0.05),说明该提取物具有很好的保湿效果,可用于制备美容化妆品。
Claims (10)
1.大叶蒟提取物用于制备透明质酸酶抑制剂的用途。
2.大叶蒟提取物用于制备抗过敏药物的用途。
3.大叶蒟提取物用于制备美容化妆品的用途。
4.如权利要求3所述的用途,其特征在于:所述美容化妆品是保湿美容化妆品。
5.一种透明质酸酶抑制剂,其活性成分中含有大叶蒟提取物。
6.一种抗过敏药物,其活性成分中含有大叶蒟提取物。
7.一种美容化妆品,其活性成分中含有大叶蒟提取物。
8.如权利要求5所述的透明质酸酶抑制剂、或权利要求6所述的抗过敏药物、或权利要求7所述的美容化妆品,其特征在于:所述大叶蒟提取物是大叶蒟醇提取物。
9.如权利要求8所述的透明质酸酶抑制剂或抗过敏药物或美容化妆品,其特征在于:所述醇是20-80%乙醇。
10.如权利要求9所述的透明质酸酶抑制剂或抗过敏药物或美容化妆品,其特征在于:所述醇是60%乙醇。
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